本發(fā)明屬于降血壓藥物領(lǐng)域，具體涉及一種延長(zhǎng)卡托普利降血壓藥效時(shí)間的方法。

背景技術(shù)：

高血壓病是一種以動(dòng)脈血壓升高為主要表現(xiàn)的高危慢性疾病，在各個(gè)年齡階段都有較高的發(fā)病率，已高居死亡原因的首位。根據(jù)世界衛(wèi)生組織（who）的調(diào)查數(shù)據(jù)，目前全世界約三分之一成年人患有高血壓病，造成的死亡人數(shù)約占了全世界死亡人數(shù)的12.8%。這其中，血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（angiotensini-convertingenzyme，ace，ec3.4.15.1）在血壓調(diào)節(jié)系統(tǒng)中起到關(guān)鍵作用。人體的血壓主要受到腎素-血管緊張素系統(tǒng)和激肽-激肽釋放酶系統(tǒng)兩個(gè)拮抗體系的調(diào)節(jié)。腎素將血管緊張素原轉(zhuǎn)化為血管緊張素i，血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（ace）將血管緊張素i轉(zhuǎn)為為血管緊張素ⅱ。血管緊張素ⅱ能加強(qiáng)心肌收縮，同時(shí)也可以加強(qiáng)血管平滑肌收縮，從而升高血壓。ace也可以調(diào)節(jié)激肽系統(tǒng)，能夠使具有血管舒張功能的激肽轉(zhuǎn)化為沒(méi)有活性的緩釋肽。兩個(gè)系統(tǒng)在ace的調(diào)節(jié)下，協(xié)同升高血壓。

最早的降血壓肽提取于蛇毒，隨著研究深入，越來(lái)越多的植物性原料成為降血壓肽的良好來(lái)源。比如酶解小麥胚芽制備降血壓肽（小麥胚芽蛋白組分酶解物降血壓和抗氧化作用，賈俊強(qiáng)，2010），或者利用生物技術(shù)合成特定序列的降血壓肽（金槍魚(yú)降血壓肽的基因設(shè)計(jì)、克隆表達(dá)和活性鑒定，李云亮，2015）。降血壓肽類的ace抑制劑雖然作用持續(xù)時(shí)間更長(zhǎng)，但是降血壓作用效果慢，作用溫和。

目前，卡托普利（脯氨酸衍生物）作為一種高效快速的人工合成的非肽類ace抑制劑，廣泛使用在臨床和科研研究中。然而其半衰期僅1.9h，維持功效需日服三次。當(dāng)攝入總量為37.5~75mg時(shí)，療效僅維持6~8h；單劑量口服50mg，血液峰濃度可達(dá)600ng/ml以上，而其治療濃度為50ng/ml，這種較大的血藥濃度峰谷波動(dòng)很可能引起眩暈、頭疼、胃腸道紊亂等不良反應(yīng)（卡托普利緩釋膠囊的研究，黃瑛，2004）。由于單獨(dú)使用卡托普利藥物作用激烈、持續(xù)時(shí)間短，很多研究者將目光轉(zhuǎn)向卡托普利緩釋的研究，例如上海凱寶藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)的卡托普利緩釋片，半衰期為3h。

大豆制備的活性肽除了降血壓效果，還有抗氧化、抗疲勞、提高免疫、降血脂等功效（大豆肽生理功能的研究進(jìn)展，李文，2012）。大豆降血壓肽相比于卡托普利，收縮壓降低幅度小于卡托普利，但是作用溫和、有效降壓時(shí)間持續(xù)長(zhǎng)（紫菜降血壓肽的酶法制備及降壓效果的研究，王茵，2009）。

卡托普利和大豆降血壓肽在降血壓效果上各有利弊，但目前關(guān)于利用降血壓肽和卡托普利共同使用，延長(zhǎng)卡托普利降血壓藥效時(shí)間方面的研究，未見(jiàn)報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是克服卡托普利藥效持續(xù)時(shí)間短的特點(diǎn)，提供一種在保證卡托普利迅速起效和保證作用效果的基礎(chǔ)上，延長(zhǎng)有效降壓持續(xù)時(shí)間的方法。

一種延長(zhǎng)卡托普利降血壓藥效時(shí)間的方法，按照下述步驟進(jìn)行：

將卡托普利和大豆降血壓肽按一定的比例混合后使用。

其中混合方法包括：將固體形式的卡托普利和大豆降血壓肽直接混合，也可以將液體形式的卡托普利和大豆降血壓肽混合后，以噴霧干燥等方法干燥即得。

其中卡托普利和大豆降血壓肽的混合比為：3:7~8:2（質(zhì)量比）。

其中所述的大豆降血壓肽，按照下述步驟進(jìn)行：底物質(zhì)量濃度為5%的大豆蛋白溶液在50℃、ph8.5條件下按0.1%（v/v）添加堿性蛋白酶酶解3h，離心取上清經(jīng)濃縮、干燥制得。

其中所述大豆降血壓肽可以由其他原料或者類似工藝制備的降血壓肽簡(jiǎn)單代替，起到類似效果。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：

（1）卡托普利與大豆降血壓肽在起作用時(shí)各有特點(diǎn)，初期由于卡托普利起作用效果迅速，起主要降血壓效果，中后期大豆降血壓肽通過(guò)腸胃消化吸收，起到延長(zhǎng)降血壓效果的作用。

（2）卡托普利與大豆降血壓肽共同使用，起到協(xié)同作用的效果，相比單一卡托普利，卡托普利-大豆降血壓肽混合物降血壓藥效時(shí)間最多可延長(zhǎng)1.29h。相比單一大豆多肽，卡托普利-大豆降血壓肽混合物降血壓藥效時(shí)間最多可延長(zhǎng)0.91h。

具體實(shí)施方式

在本發(fā)明中所使用的術(shù)語(yǔ)，除非有另外說(shuō)明，一般具有本領(lǐng)域普通技術(shù)人員通常理解的含義。下面結(jié)合具體的實(shí)施例，并參照數(shù)據(jù)進(jìn)一步詳細(xì)地描述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例只是對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步說(shuō)明，不能理解為對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限定，該領(lǐng)域的技術(shù)工程師可根據(jù)上述發(fā)明的內(nèi)容對(duì)本發(fā)明作出一些非本質(zhì)的改進(jìn)和調(diào)整。

在以下的實(shí)施例中，未詳細(xì)描述的各種過(guò)程和方法是本領(lǐng)域中公知的常規(guī)方法。所用試劑的來(lái)源、商品名以及有必要列出其組成成分者，均在首次出現(xiàn)時(shí)標(biāo)明，其后所用相同試劑如無(wú)特殊說(shuō)明，均以首次標(biāo)明的內(nèi)容相同。

本對(duì)照和實(shí)施例所用的卡托普利于sigma公司購(gòu)買(mǎi)。

本對(duì)照和實(shí)施例所用的大豆降血壓肽由以下方法制備：

（1）配置底物濃度為5%的大豆蛋白溶液，50℃水浴并攪拌10min，升溫到位后酶解。

（2）按0.1%（v/v）加入堿性蛋白酶并用naoh溶液維持ph穩(wěn)定在8.5，酶解3h。

（3）酶解結(jié)束，沸水浴滅酶，離心（4000r/m，10min）所得上清液經(jīng)濃縮、噴霧干燥得大豆降血壓肽粉末，干燥環(huán)境中保存?zhèn)溆谩?/p>

本實(shí)施例所用降血壓藥效檢測(cè)方法如下：

本實(shí)施例購(gòu)買(mǎi)大鼠為原發(fā)性高血壓大鼠（shr），飼養(yǎng)環(huán)境溫度保持22±2℃，濕度保持50±5%，日夜時(shí)間各半，適應(yīng)一周后用于實(shí)驗(yàn)。

（1）一次性灌胃試驗(yàn)：配置試劑并按一定劑量灌胃各組大鼠，灌胃后定期測(cè)定大鼠收縮壓，連續(xù)測(cè)定三次取平均值。

（2）大鼠收縮壓測(cè)定儀器為alc-nibp無(wú)創(chuàng)血壓測(cè)量分析系統(tǒng)，購(gòu)自上海奧爾科特生物科技有限公司，大鼠收縮壓測(cè)定過(guò)程按照儀器操作說(shuō)明進(jìn)行。

對(duì)照1

一次性灌胃試驗(yàn)：以生理鹽水為溶劑按15mg/ml配置卡托普利溶液，以30mg/kg·bw劑量灌胃大鼠，灌胃后每隔1h測(cè)定一次大鼠收縮壓，連續(xù)測(cè)定三次取平均值。有效降血壓時(shí)間為6.78±0.34h。

對(duì)照2

一次性灌胃試驗(yàn)：以生理鹽水為溶劑按15mg/ml配置大豆降血壓肽溶液，以30mg/kg·bw劑量灌胃大鼠，灌胃后每隔1h測(cè)定一次大鼠收縮壓，連續(xù)測(cè)定三次取平均值。有效降血壓時(shí)間為7.16±0.31h。

實(shí)施例1

一次性灌胃試驗(yàn)：取卡托普利和大豆降血壓肽按質(zhì)量比8:2（質(zhì)量比）混合，以生理鹽水為溶劑按15mg/ml配置卡托普利-大豆降血壓肽混合溶液，以30mg/kg·bw劑量灌胃大鼠，灌胃后每隔1h測(cè)定一次大鼠收縮壓，連續(xù)測(cè)定三次取平均值。有效降血壓時(shí)間為7.46±0.38h。相比于對(duì)照1卡托普利組藥效時(shí)間延長(zhǎng)0.68h，相比于對(duì)照2大豆降血壓肽組藥效時(shí)間延長(zhǎng)0.30h。

實(shí)施例2

一次性灌胃試驗(yàn)：取卡托普利和大豆降血壓肽按質(zhì)量比7:3（質(zhì)量比）混合，以生理鹽水為溶劑按15mg/ml配置卡托普利-大豆降血壓肽混合溶液，以30mg/kg·bw劑量灌胃大鼠，灌胃后每隔1h測(cè)定一次大鼠收縮壓，連續(xù)測(cè)定三次取平均值。有效降血壓時(shí)間為7.88±0.28h。相比于對(duì)照1卡托普利組藥效時(shí)間延長(zhǎng)1.10h，相比于對(duì)照2大豆降血壓肽組藥效時(shí)間延長(zhǎng)0.72h。

實(shí)施例3

一次性灌胃試驗(yàn)：取卡托普利和大豆降血壓肽按質(zhì)量比6:4（質(zhì)量比）混合，以生理鹽水為溶劑按15mg/ml配置卡托普利-大豆降血壓肽混合溶液，以30mg/kg·bw劑量灌胃大鼠，灌胃后每隔1h測(cè)定一次大鼠收縮壓，連續(xù)測(cè)定三次取平均值。有效降血壓時(shí)間為7.93±0.36h。相比于對(duì)照1卡托普利組藥效時(shí)間延長(zhǎng)1.15h，相比于對(duì)照2大豆降血壓肽組藥效時(shí)間延長(zhǎng)0.77h。

實(shí)施例4

一次性灌胃試驗(yàn)：取卡托普利和大豆降血壓肽按質(zhì)量比5:5（質(zhì)量比）混合，以生理鹽水為溶劑按15mg/ml配置卡托普利-大豆降血壓肽混合溶液，以30mg/kg·bw劑量灌胃大鼠，灌胃后每隔1h測(cè)定一次大鼠收縮壓，連續(xù)測(cè)定三次取平均值。有效降血壓時(shí)間為7.99±0.37h。相比于對(duì)照1卡托普利組藥效時(shí)間延長(zhǎng)1.21h，相比于對(duì)照2大豆降血壓肽組藥效時(shí)間延長(zhǎng)0.83h。

實(shí)施例5

一次性灌胃試驗(yàn)：取卡托普利和大豆降血壓肽按質(zhì)量比4:6（質(zhì)量比）混合，以生理鹽水為溶劑按15mg/ml配置卡托普利-大豆降血壓肽混合溶液，以30mg/kg·bw劑量灌胃大鼠，灌胃后每隔1h測(cè)定一次大鼠收縮壓，連續(xù)測(cè)定三次取平均值。有效降血壓時(shí)間為8.07±0.29h。相比于對(duì)照1卡托普利組藥效時(shí)間延長(zhǎng)1.29h，相比于對(duì)照2大豆降血壓肽組藥效時(shí)間延長(zhǎng)0.91h。

實(shí)施例6

一次性灌胃試驗(yàn)：取卡托普利和大豆降血壓肽按質(zhì)量比3:7（質(zhì)量比）混合，以生理鹽水為溶劑按15mg/ml配置卡托普利-大豆降血壓肽混合溶液，以30mg/kg·bw劑量灌胃大鼠，灌胃后每隔1h測(cè)定一次大鼠收縮壓，連續(xù)測(cè)定三次取平均值。有效降血壓時(shí)間為7.76±0.41h。相比于對(duì)照1卡托普利組藥效時(shí)間延長(zhǎng)0.98h，相比于對(duì)照2大豆降血壓肽組藥效時(shí)間延長(zhǎng)0.60h。