本發(fā)明屬于藥學(xué)領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及硫醚酸結(jié)構(gòu)的化合物在制備用于治療或預(yù)防由血小板聚集引起的心腦血管疾病的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
隨著我國人口老齡化程度日益加劇，由血栓性問題引起的心腦血管疾病不斷上升，常表現(xiàn)為心肌梗死、中風(fēng)、缺血性腦梗死、靜脈血栓栓塞等，全球每年死于該類疾病的人數(shù)接近世界總死亡人數(shù)的四分之一，因此抗血栓類藥物的開發(fā)成為全球各大制藥公司競(jìng)相開發(fā)的熱點(diǎn)，代表性的藥品有阿司匹林和氯吡格雷，其中氯吡格雷在2015年在國內(nèi)市場(chǎng)的銷售金額達(dá)92億元，此藥品已經(jīng)連續(xù)幾年排在全國各種藥品口服用藥的第一名位置。但是以阿司匹林和氯吡格雷為代表的藥品不良反應(yīng)過多，以引起消化道出血和腦出血為主要不良反應(yīng)，更不幸的是氯吡格雷抗血小板作用并不能使所有患者受益，部分患者對(duì)氯吡格雷的心血管的保護(hù)作用存在氯吡格雷抵抗，對(duì)于阿司匹林也同樣有部分患者會(huì)產(chǎn)生阿司匹林抵抗。因此市場(chǎng)上需要更多全新結(jié)構(gòu)的化學(xué)藥品來改善現(xiàn)有品種的不足。
氯吡格雷和普拉格雷為一個(gè)前體藥，需要在體內(nèi)經(jīng)過開環(huán)氧化后代謝成活性產(chǎn)物起藥理作用，其有效活性基團(tuán)為巰基丁烯酸結(jié)構(gòu)，我們從活性的巰基著手分析發(fā)現(xiàn)，很多含有裸露巰基的分子量較小的小分子極性化合物，有一定的抗血小板聚集的藥理作用，如乙酰半胱氨酸、硫普羅寧和卡托普利等，但這些小分子化合物并沒有用于抗血小板聚集疾病的治療，推測(cè)其原因可能是，其裸露的巰基和蛋白分子結(jié)合能力過強(qiáng)，不良反應(yīng)過大，出血率過高，這些分子不單單是能抗血小板聚集有時(shí)還能夠達(dá)到溶栓的藥理作用，而這對(duì)于長(zhǎng)期用藥的患者是極其不利的，會(huì)引起出血率的風(fēng)險(xiǎn)大大增加，抗血小板聚集藥物的開發(fā)方向是在保證藥效的同時(shí)如何最大限度的降低出血率，而這些含有裸露巰基的小分子極性化合物顯然是不適合長(zhǎng)期用藥的。我們?cè)诖嘶A(chǔ)之上，期望尋找含有硫醚結(jié)構(gòu)的小分子極性化合物來嘗試用于抗凝藥物的開發(fā)，考慮到硫醚結(jié)構(gòu)的化合物和蛋白的結(jié)合能力弱遠(yuǎn)遠(yuǎn)達(dá)不到巰基的活性的，推測(cè)可能的結(jié)果可能是沒有抗凝的藥理作用，我們檢索了相關(guān)文獻(xiàn)沒有查到硫醚結(jié)構(gòu)的小分子極性化合物用于抗血小板聚集的文獻(xiàn)報(bào)道。我們也只是隨意做個(gè)嘗試，但是試驗(yàn)結(jié)果，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過我們的預(yù)料。發(fā)現(xiàn)多個(gè)含有硫醚酸結(jié)構(gòu)的小分子極性化合物有很好的抗凝藥理作用。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
司坦類化合物被廣泛應(yīng)用于呼吸疾病的治療，特別是多痰的治療，其分子結(jié)構(gòu)中大多含有硫醚結(jié)構(gòu)，并極少含有裸露的巰基，我們檢索有關(guān)司坦類化合物和血小板的相關(guān)文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)只有一個(gè)厄多司坦（erdosteine）的化合物被報(bào)道和血小板相互作用的兩篇文獻(xiàn)，這兩篇文獻(xiàn)由同一作者arica發(fā)表在同一期刊human&experimentaltoxicology上的有關(guān)厄多司坦對(duì)血液系統(tǒng)功能的影響，但是他們的試驗(yàn)結(jié)果竟然是厄多司坦有提升血小板數(shù)量并促進(jìn)止血的藥理作用，這引起了我們的興趣，他們的實(shí)驗(yàn)方法是將體重在180–200g的大鼠28只隨機(jī)分成4組，空白組給于生理鹽水，另外三組按高中低三個(gè)劑量分別給予厄多司坦3mg/kg/day、10mg/kg/day、30mg/kg/day，連續(xù)給藥三天后，取血，測(cè)定血小板數(shù)量，結(jié)果是中劑量組血小板數(shù)量比空白組稍高，低劑量和高劑量組的血小板數(shù)量遠(yuǎn)高于中劑量組（p<0.05），并且低劑量組和高劑量組的血小板數(shù)量基本相同。也就是說厄多司坦到底是有促進(jìn)止血作用還是有抗凝血的作用是模糊不清的。
我們從厄多司坦著手，用于化痰時(shí)其在體內(nèi)的活性代謝物為水解開環(huán)后的巰基丁酸結(jié)構(gòu)，和氯吡格雷在體內(nèi)的活性代謝物巰基丁烯酸結(jié)構(gòu)有點(diǎn)接近，我們?cè)谥貜?fù)arica的實(shí)驗(yàn)中，并沒有能夠重復(fù)出他們的實(shí)驗(yàn)過程和實(shí)驗(yàn)結(jié)果，相反的是在我們的實(shí)驗(yàn)過程中得出厄多司坦有一定的抗血小板聚集的實(shí)驗(yàn)結(jié)論。于是我們推測(cè)厄多司坦抗血小板聚集的功能是由厄多司坦在體內(nèi)的活性代謝物為水解開環(huán)后的巰基丁酸結(jié)構(gòu)在起作用，為了深入驗(yàn)證厄多司坦在抗血小板聚集中的藥理作用，我們直接用大鼠血漿進(jìn)行體外測(cè)試，發(fā)現(xiàn)沒有經(jīng)過水解開環(huán)的厄多司坦也有較好的降低血小板聚集的藥理作用，由此推測(cè)其能起降低血小板聚集的藥理作用的活性基團(tuán)應(yīng)該是硫醚乙酸結(jié)構(gòu)，于是我們將二乙酸硫醚（硫代二乙酸）應(yīng)用于抗血小板聚集試驗(yàn)，結(jié)果其抗血小板的藥效作用竟然是同等劑量的阿司匹林的三倍的作用效果！這是非常神奇的。我們?cè)侔淹瑫r(shí)具有硫醚乙酸結(jié)構(gòu)和硫醚丙酸結(jié)構(gòu)的羧甲司坦應(yīng)用于抗血小板聚集試驗(yàn)，結(jié)果其抗血小板的藥效作用等同于阿司匹林，只能推測(cè)起降低血小板聚集的藥理作用的活性基團(tuán)應(yīng)該是硫醚乙酸或者硫醚丙酸結(jié)構(gòu)，于是我們將能夠得到的含有硫醚乙酸或者硫醚丙酸結(jié)構(gòu)的化合物如羧甲司坦、福多司坦、美司坦、厄多司坦、莫吉司坦、來托司坦、普瑞司坦、奈索司坦、米地司坦、伊沙司坦、?；撬咎?、替美司坦、沙米司坦、奧莫司坦、達(dá)西司坦、卡他司坦、達(dá)諾司坦、愈創(chuàng)司坦、本司坦和硫代二乙酸等，和同等劑量的阿司匹林做了在抗血小板聚集方面的系統(tǒng)藥效學(xué)篩選，實(shí)驗(yàn)結(jié)果是這幾個(gè)化合物和同濃度的阿司匹林對(duì)比有較好的抗血小板聚集的藥理作用，特別是硫代二乙酸具有更好的抗血小板聚集的藥理作用。就是說具有硫醚脂肪酸結(jié)構(gòu)的小分子極化合物在治療由血小板聚集引起的疾病方面有很好的治療效果。
具體實(shí)施方式
藥效學(xué)試驗(yàn)1:
a、血小板的制備：大鼠經(jīng)10%水合氯醛4ml/kg麻醉，腹主動(dòng)脈取血，3.2%枸櫞酸鈉抗凝（血液與抗凝劑體積比為9:1），1200rpm離心10min，分離富血小板血漿（prp）；3500rpm離心10min，分離貧血小板血漿(ppp)。
b、聚集率的測(cè)定：用ppp作為基底，prp進(jìn)行測(cè)定。在塑料測(cè)試杯中加入170μlppp和30μl水放入測(cè)試通道，按ppp鍵進(jìn)行基底測(cè)量；在另一測(cè)試杯中加入170μlprp和20μl待測(cè)藥物（終濃度為100μg/ml），加一粒磁珠，將測(cè)試杯放入37℃預(yù)溫通道中溫育3min，結(jié)束后將測(cè)試杯移入測(cè)試通道，按開始鍵進(jìn)行測(cè)定，加入誘導(dǎo)劑aa10μl(終濃度為1mm)，按born比濁法記錄5min內(nèi)血小板最大聚集率，并計(jì)算其抑制率。
c、數(shù)據(jù)處理：
聚集抑制率=(對(duì)照組聚集率-試驗(yàn)組聚集率)/對(duì)照組聚集率×100%。
d、實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
硫醚酸結(jié)構(gòu)的化合物對(duì)血小板聚集的抑制作用一
藥效學(xué)試驗(yàn)2：
將體重在210-230克的sd大鼠42只，隨機(jī)分成7組，即陰性對(duì)照組(0.9%生理鹽水，5ml/kg)、厄多司坦組(50mg/kg)、莫吉司坦組(50mg/kg)、來托司坦組(50mg/kg)、奈索司坦組(鈉鹽，50mg/kg)、奧莫司坦組(50mg/kg)、陽性對(duì)照組(氯吡格雷，50mg/kg)。均采用灌胃給藥，給藥體積均為5ml/kg。一天1次，連續(xù)三天給藥。最后一次給藥2小時(shí)后經(jīng)10%水合氯醛4ml/kg麻醉，腹主動(dòng)脈取血，3.2%枸櫞酸鈉抗凝（血液與抗凝劑體積比為9:1），1200rpm離心10min，分離富血小板血漿（prp）；3500rpm離心15min，分離貧血小板血漿(ppp)。用血小板計(jì)數(shù)儀測(cè)定prp中的血小板數(shù)后，通過ppp調(diào)整prp的血小板數(shù)至250×109個(gè)/l左右。調(diào)節(jié)血小板聚集儀,在塑料測(cè)試杯中加入200μl調(diào)節(jié)好的樣品，加一粒磁珠，將測(cè)試杯放入37℃預(yù)溫通道中溫育3min，結(jié)束后將測(cè)試杯移入測(cè)試通道，加入誘導(dǎo)劑adp3μl(終濃度為45μm)，進(jìn)行測(cè)定，記錄5min內(nèi)血小板最大聚集率，通過和陰性對(duì)照組的結(jié)果比較，計(jì)算其抑制率，計(jì)算出每組的血小板聚集抑制率，結(jié)果如下：
實(shí)施例1
羧甲司坦750mg
乳糖1000mg
微晶纖維素240mg
硬脂酸鎂10mg
將上述物料混合后、過60目篩、通過壓片機(jī)壓片，制成每片片重為200mg的片劑。根據(jù)需要可以對(duì)此片劑進(jìn)行包衣。
實(shí)施例2
羧甲司坦500mg
乳糖1200mg
微晶纖維素290mg
硬脂酸鎂10mg
將上述物料混合后、過60目篩，裝入空心的硬膠囊中，制成每粒粒重為200mg的膠囊劑。
實(shí)施例3
將50mg的硫代二乙酸、120mg乳糖、29mg微晶纖維素、1mg硬脂酸鎂，混合過篩后壓片制成200mg的片劑。
實(shí)施例4
將50mg的福多司坦、100mg乳糖、49mg微晶纖維素、1mg硬脂酸鎂，混合過篩后壓片制成200mg的片劑。
實(shí)施例5
將50mg的本司坦、80mg乳糖、69mg微晶纖維素、1mg硬脂酸鎂，混合過篩后壓片制成200mg的片劑。
實(shí)施例6
將50mg的厄多司坦、80mg乳糖、69mg微晶纖維素、1mg硬脂酸鎂，混合過篩后壓片制成200mg的片劑。
實(shí)施例7
將50mg的莫吉司坦、80mg乳糖、69mg微晶纖維素、1mg硬脂酸鎂，混合過篩后壓片制成200mg的片劑。
實(shí)施例8
將50mg的來托司坦、80mg乳糖、69mg微晶纖維素、1mg硬脂酸鎂，混合過篩后壓片制成200mg的片劑。
實(shí)施例9
將50mg的普瑞司坦、80mg乳糖、69mg微晶纖維素、1mg硬脂酸鎂，混合過篩后壓片制成200mg的片劑。
實(shí)施例10
將50mg的奈索司坦鈉、80mg乳糖、69mg微晶纖維素、1mg硬脂酸鎂，混合過篩后裝入到膠囊中，制成200mg的膠囊劑。
實(shí)施例11
將20mg的米地司坦、105mg乳糖、74mg微晶纖維素、1mg硬脂酸鎂，混合過篩后裝入到膠囊中，制成粒重200mg的膠囊劑
實(shí)施例12
將50mg的伊沙司坦、80mg乳糖、69mg微晶纖維素、1mg硬脂酸鎂，混合過篩后裝入到膠囊中，制成200mg的膠囊劑。
實(shí)施例13
將50mg的牛磺司坦、90mg乳糖、59mg微晶纖維素、1mg硬脂酸鎂，混合過篩后裝入到膠囊中，制成200mg的膠囊劑。
實(shí)施例14
將25mg的替美司坦、100mg乳糖、74mg微晶纖維素、1mg硬脂酸鎂，混合過篩后裝入到膠囊中，制成200mg的膠囊劑。
實(shí)施例15
將25mg的沙米司坦、105mg乳糖、69mg微晶纖維素、1mg硬脂酸鎂，混合過篩后壓片制成200mg的片劑。
實(shí)施例16
將25mg的奧莫司坦、105mg乳糖、69mg微晶纖維素、1mg硬脂酸鎂，混合過篩后壓片制成200mg的片劑。
實(shí)施例17
將25mg的達(dá)西司坦、105mg乳糖、69mg微晶纖維素、1mg硬脂酸鎂，混合過篩后壓片制成200mg的片劑。
實(shí)施例18
將25mg的卡他司坦、105mg乳糖、69mg微晶纖維素、1mg硬脂酸鎂，混合過篩后壓片制成200mg的片劑。
實(shí)施例19
將50mg的達(dá)諾司坦、80mg乳糖、69mg微晶纖維素、1mg硬脂酸鎂，混合過篩后壓片制成200mg的片劑。
實(shí)施例20
將25mg的愈創(chuàng)司坦、105mg乳糖、69mg微晶纖維素、1mg硬脂酸鎂，混合過篩后壓片制成200mg的片劑。