本申請(qǐng)涉及一種青蒿素類化合物的新制藥用途，特別是在制備治療神經(jīng)病理性疼痛和/或其并發(fā)癥藥物中的制藥用途。

背景技術(shù)：

神經(jīng)病理性疼痛是一種由神經(jīng)系統(tǒng)的原發(fā)損害或功能障礙引發(fā)的疼痛。流行病學(xué)研究顯示，神經(jīng)病理性疼痛的人群患病率高達(dá)8％，中國(guó)約有9000萬患者急需安全有效的針對(duì)性治療。因病因復(fù)雜，神經(jīng)病理性疼痛難以在疾病早期得到重視，待就醫(yī)時(shí)，約有50％的患者已并發(fā)諸如重性抑郁、焦慮等嚴(yán)重的精神類癥狀。導(dǎo)致痛敏癥狀延綿反復(fù)，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量，給患者及社會(huì)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)與壓力。

鑒于以上病理特點(diǎn)，神經(jīng)病理性疼痛急需高效鎮(zhèn)痛，長(zhǎng)效鎮(zhèn)痛，兼顧疼痛誘發(fā)的精神癥狀，毒性低，耐藥性低的針對(duì)性藥物。雖同屬于慢性疼痛，神經(jīng)病理性疼痛與炎癥性疼痛存在本質(zhì)上的差別。現(xiàn)有技術(shù)中治療神經(jīng)病理性疼痛的臨床一線藥物有普瑞巴林(pregabalin,pgb)、三環(huán)類抗抑郁藥、阿片類鎮(zhèn)痛藥物。然而現(xiàn)有的藥物普遍存在各種問題，藥效不能令人滿意。

普瑞巴林(pregabalin,pgb)為食品與藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)并大量應(yīng)用于臨床的一線藥品。臨床研究顯示，即便高劑量使用(600mg)也僅對(duì)部分患者(約38％)有短暫的鎮(zhèn)痛效果。并且，高劑量的使用大大增加了患者頭暈、嗜睡、共濟(jì)失調(diào)、意識(shí)模糊、乏力、思維異常、視物模糊、運(yùn)動(dòng)失調(diào)、口干、水腫、體重增加及、注意困難等副反應(yīng)癥的出現(xiàn)，并對(duì)抑郁等并發(fā)性精神類癥狀無顯著效果。三環(huán)類抗抑郁藥副反應(yīng)強(qiáng)烈，具有嚴(yán)重的心臟毒性，導(dǎo)致臨床停藥率高達(dá)15-20％。阿片類鎮(zhèn)痛藥物則具有耐藥性及成癮的風(fēng)險(xiǎn)，不適合長(zhǎng)期使用。

由此可見，穩(wěn)定有效地緩解痛敏癥狀及并發(fā)精神系統(tǒng)癥狀、降低毒副作用將是神經(jīng)病理性疼痛新藥的研發(fā)目標(biāo)。

中國(guó)中醫(yī)科學(xué)研究院中藥研究所自七十年代開始，在屠呦呦研究員的帶領(lǐng)下，進(jìn)行了對(duì)青蒿素類藥物的深入研究?，F(xiàn)已證明青蒿素類藥物具有毒性低、安全性高的特點(diǎn)，已被廣泛應(yīng)用于炎癥性疾病中，包括瘧疾、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等。除了上述廣泛應(yīng)用的治療或制藥用途以外，青蒿素及其類似物還用于以下與本申請(qǐng)相關(guān)的制藥用途。

cn1561994a(公開日2009年01月12日)公開了青蒿素類藥物在治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中具有一定效果。然而，神經(jīng)病理性疼痛不同于一般的炎癥性疼痛。在諸如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等炎癥性疼痛中，其中樞敏化過程是依賴于外周損傷性刺激，即依賴于外周炎癥的存在及傷害感受神經(jīng)元的異常激活的，其痛覺癥狀會(huì)伴隨外周損傷或炎癥的治愈而自然消失。因此，對(duì)于炎癥性疼痛，外周炎癥的緩解在疼痛感的治療中具有顯著的療效；而神經(jīng)病理性疼痛在外周損傷或炎癥消失后，痛覺癥狀仍持續(xù)而強(qiáng)烈。其內(nèi)在機(jī)理為，初期外周炎癥或損傷引發(fā)脊髓背角神經(jīng)元、上行傳入神經(jīng)元及多個(gè)腦核團(tuán)內(nèi)神經(jīng)元異常放電，造成外周及中樞敏化，在炎癥或外周損傷愈合后，中樞敏化過程依然持續(xù)。神經(jīng)病理性疼痛中，中樞敏化過程雖起源于外周但不依賴于外周損傷，因此在神經(jīng)病理性疼痛中，僅針對(duì)外周損傷或炎癥治療并無顯著的療效。由于病理機(jī)理不同，本領(lǐng)域技術(shù)人員難以基于青蒿素類藥物對(duì)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的效果聯(lián)想到神經(jīng)病理性疼痛。

cn102884428a(公開日2013年01月16日)記載了青蒿琥酯與抑郁的相關(guān)性，然而該表述是由于其中文譯文錯(cuò)誤地將artn基因的英文縮寫翻譯為青蒿琥酯而產(chǎn)生的，事實(shí)上該文件并不包含任何關(guān)于青蒿琥酯與抑郁的研究性內(nèi)容。目前，尚未有任何報(bào)道指出青蒿素類藥物對(duì)神經(jīng)病理性痛誘發(fā)抑郁具有治療效果。

cn103948585a(公開日2014年07月30日)公開了青蒿素類藥物在神經(jīng)退行性疾病中的潛在應(yīng)用價(jià)值。雖然神經(jīng)退行性疾病和神經(jīng)病理性疼痛均為涉及神經(jīng)的疾病。但首先，神經(jīng)推行性疾病與神經(jīng)病理性疼痛的病理機(jī)制完全不同，因而本領(lǐng)域技術(shù)人員難以基于青蒿素類藥物對(duì)神經(jīng)退行性疾病的效果聯(lián)想到神經(jīng)病理性疼痛。其次，該文件中所有實(shí)施例均僅限于細(xì)胞水平，本領(lǐng)域技術(shù)人員無法由細(xì)胞水平的實(shí)驗(yàn)效果推斷出其在整體動(dòng)物中的藥效，尤其是對(duì)于神經(jīng)病理性疼痛及其并發(fā)精神癥狀，這種病理機(jī)理涉及整個(gè)神經(jīng)系統(tǒng)的病癥。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本申請(qǐng)要解決的技術(shù)問題為提供一種具有治療神經(jīng)病理性疼痛和/或其并發(fā)癥狀性能的化合物、其產(chǎn)品、及其在治療和制藥中的用途。

本申請(qǐng)技術(shù)方案的第一方面為提供一種用于治療神經(jīng)病理性疼痛和/或其并發(fā)癥狀的青蒿素類化合物。

所述青蒿素類化合物為：

a)：青蒿素，

b)：以青蒿素為結(jié)構(gòu)母核，在體內(nèi)以雙氫青蒿素為活性形式的青蒿素衍生物，

或c)：a)或b)藥學(xué)上可接受的鹽。

進(jìn)一步地，所述青蒿素類化合物包括但不限于青蒿素、雙氫青蒿素、去氧青蒿素、青蒿素甲酯、青蒿素乙酯、蒿甲醚、蒿乙醚和/或青蒿琥酯。

進(jìn)一步地，所述藥學(xué)上可接受的鹽包括但不限于與鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、對(duì)甲苯磺酸、碳酸、甲酸、乙酸、草酸、琥珀酸、酒石酸、扁桃酸、富馬酸、乳酸、檸檬酸、谷氨酸、天冬氨酸反應(yīng)而獲得的鹽。

所述青蒿素類化合物是商業(yè)上可獲得的，并且也可使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的常規(guī)方法進(jìn)行制備。

本申請(qǐng)技術(shù)方案的第二方面為提供一種用于治療神經(jīng)病理性疼痛和/或其并發(fā)癥狀的含青蒿素類化合物的組合物。

進(jìn)一步地，所述組合物包括藥物組合物。

進(jìn)一步地，所述藥物組合物包含一種或多種可接受的載體、助劑、和/或輔料。

進(jìn)一步地，所述組合物進(jìn)一步包含已知的治療神經(jīng)病理性疼痛和/或其并發(fā)精神癥狀的其他活性成分。

本申請(qǐng)技術(shù)方案的第三方面為提供一種用于治療神經(jīng)病理性疼痛和/或其并發(fā)癥狀的青蒿素類化合物的生產(chǎn)原料。

進(jìn)一步地，所述青蒿素類化合物的生產(chǎn)原料包括青蒿素類化合物的原料藥、中藥藥材、生物合成載體。優(yōu)選所述青蒿素類化合物的生產(chǎn)原料為中藥青蒿。

本申請(qǐng)技術(shù)方案的第四方面為前述青蒿素類化合物、含青蒿素類化合物的組合物和/或青蒿素類化合物的生產(chǎn)原料在制備治療、預(yù)防和/或緩解神經(jīng)病理性疼痛和/或其并發(fā)癥狀的藥物中的用途。

進(jìn)一步地，所述藥物包括常規(guī)的多種劑型，包括但不限于口服劑、栓劑、注射劑、涂敷劑。

進(jìn)一步地，所述藥物包括常規(guī)的多種劑型，包括但不限于脂質(zhì)體制劑、納米顆粒制劑、固體分散劑、自乳化劑、經(jīng)皮給藥劑、β-環(huán)糊精包合物、磷脂復(fù)合物。

進(jìn)一步地，所述藥物的給藥途徑包括靜脈內(nèi)、經(jīng)皮、皮內(nèi)、皮下、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、口腔、直腸、鼻內(nèi)或其組合。

本申請(qǐng)技術(shù)方案的第五方面為前述青蒿素類化合物、含青蒿素類化合物的組合物和/或青蒿素類化合物的生產(chǎn)原料的在治療、預(yù)防和/或緩解神經(jīng)病理性疼痛和/或其并發(fā)癥狀中的用途。

本申請(qǐng)技術(shù)方案的第六方面為一種治療、預(yù)防和/或緩解神經(jīng)病理性疼痛和/或其并發(fā)癥狀中的方法，使用了前述青蒿素類化合物、含青蒿素類化合物的組合物和/或青蒿素類化合物的生產(chǎn)原料。

本申請(qǐng)所述神經(jīng)病理性疼痛為由神經(jīng)系統(tǒng)原發(fā)性損害和功能障礙所激發(fā)或引起的疼痛。其屬于一種慢性疼痛，臨床表現(xiàn)包括但不限于自發(fā)性疼痛、痛覺過敏、異常疼痛、感覺異常。

本申請(qǐng)所述神經(jīng)病理性疼痛并發(fā)癥狀包括精神癥狀，其包括但不限于抑郁、焦慮、認(rèn)知功能障礙和/或上述癥狀的組合。

有益效果

本申請(qǐng)相較現(xiàn)有針對(duì)神經(jīng)病理性疼痛和/或其并發(fā)癥的一些藥物具有以下效果：

1)對(duì)神經(jīng)病理性疼痛具有確定、顯著的治療效果；

2)能夠同時(shí)抑制神經(jīng)病理性疼痛和抑制其并發(fā)癥；

2)對(duì)神經(jīng)病理性疼痛中的慢性疼痛療效持久，耐藥性低；

3)毒副作用低，用藥安全；

4)成本低廉，制備簡(jiǎn)單。

附圖說明

圖1雙氫青蒿素早期(造模后第4天)給藥的鎮(zhèn)痛療效。

圖2a雙氫青蒿素早期(造模后第4天)給藥的抗抑郁療效。

圖2b雙氫青蒿素早期(造模后第4天)給藥的抗焦慮療效。

圖3雙氫青蒿素晚期(造模后第18天)給藥的鎮(zhèn)痛療效。

圖4a雙氫青蒿素晚期(造模后第18天)給藥的抗抑郁療效(強(qiáng)迫游泳)。

圖4b雙氫青蒿素晚期(造模后第18天)給藥的抗抑郁療效(懸尾檢測(cè))。

圖4c雙氫青蒿素晚期(造模后第18天)給藥的抗焦慮療效(曠場(chǎng)檢測(cè))。

圖5青蒿琥酯早期(造模后第4天)給藥的鎮(zhèn)痛療效。

圖6a青蒿琥酯早期(造模后第4天)給藥的抗抑郁療效。

圖6b青蒿琥酯早期(造模后第4天)給藥的抗焦慮療效。

圖7蒿甲醚早期(造模后第4天)給藥的鎮(zhèn)痛療效。

圖8a蒿甲醚早期(造模后第4天)給藥的抗抑郁療效。

圖8b蒿甲醚早期(造模后第4天)給藥的抗焦慮療效。

具體實(shí)施方式

以下實(shí)施例通過證實(shí)雙氫青蒿素、青蒿琥酯、蒿甲醚在降低小鼠snl模型中神經(jīng)病理性疼痛的機(jī)械痛敏、抑制焦慮和/或抑郁中均具有確切而顯著的治療效果，以證明青蒿素類化合物具有治療神經(jīng)病理性疼痛和/或其并發(fā)癥狀的效果，能夠用于治療所述疾病或制備相關(guān)藥物。

其中選擇小鼠snl模型的理由在于其為公認(rèn)較好的神經(jīng)病理性疼痛模型，其痛覺癥狀穩(wěn)定，個(gè)體差異小，誘發(fā)抑郁、焦慮、認(rèn)知功能障礙的癥狀也較穩(wěn)定。

實(shí)驗(yàn)例1：實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備、模型構(gòu)建及檢測(cè)方法

1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

清潔級(jí)8周成年雄性c57/bl6小鼠，體重24-26g,由北京市維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，動(dòng)物合格證編號(hào)syxk-2010-0034.

2、實(shí)驗(yàn)分組

小鼠在適應(yīng)環(huán)境4天后，稱量體重，并進(jìn)行曠場(chǎng)檢測(cè)、強(qiáng)迫游泳檢測(cè)及懸尾檢測(cè)，剔除體重低于23克，曠場(chǎng)試驗(yàn)中心場(chǎng)停留時(shí)間小于15秒，強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間超過160秒，或懸尾檢測(cè)不動(dòng)時(shí)間在50-100秒以外的個(gè)體，而后隨機(jī)分組，即假手術(shù)組，模型snl組、及用藥組，每次平行實(shí)驗(yàn)中的每組大于12只。

3、小鼠神經(jīng)病理性疼痛模型的建立方法

本申請(qǐng)采用脊神經(jīng)結(jié)扎的方法(thespinalcordligation,snl)制備小鼠神經(jīng)病理性疼痛模型。

具體方法如下：模型組合用藥組以戊巴比妥鈉麻醉，解剖鏡下暴露第六腰椎橫突，將橫突剪去，分離第6、5、4脊神經(jīng)，以6號(hào)眼科線對(duì)第5脊神經(jīng)進(jìn)行結(jié)扎，術(shù)后縫合。假手術(shù)組在以戊巴比妥鈉麻醉后，僅暴露第六腰椎橫突，將橫突剪去，分離第6、5、4脊神經(jīng)，直接術(shù)后縫合。觀察所有小鼠術(shù)后行動(dòng)狀態(tài)，剔除運(yùn)動(dòng)行為受損個(gè)體。由于造模成功率一般在70％左右，在造模穩(wěn)定的第4天對(duì)小鼠模型進(jìn)行鑒定。對(duì)所有動(dòng)物進(jìn)行機(jī)械痛閾檢測(cè)，在模型組及用藥組小鼠中剔除對(duì)vonfrey探針0.16g及以上有痛敏反應(yīng)的個(gè)體，在假手術(shù)組中剔除對(duì)vonfrey探針0.16g及以下有痛敏反應(yīng)的個(gè)體。

4、機(jī)械痛閾檢測(cè)

以vonfrey法進(jìn)行機(jī)械痛閾值檢測(cè)。有感探針壓力越高表示痛閾越高。

5、強(qiáng)迫游泳檢測(cè)：抑郁行為

于實(shí)驗(yàn)前一天進(jìn)行游泳訓(xùn)練，將小鼠放入深度高于16cm，溫度為20℃的深水區(qū)中，游泳12分鐘。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天，將小鼠放入深度高于16cm,溫度為20℃的有限空間中，進(jìn)行6分鐘強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)，并記錄后4分鐘內(nèi)，小鼠停止掙扎的總時(shí)長(zhǎng)。該時(shí)長(zhǎng)越長(zhǎng)表示抑郁程度越重。

6、懸尾檢測(cè)：抑郁行為

將小鼠尾部尖端2cm處以膠帶固定，懸掛于檢測(cè)箱內(nèi)?？傆?jì)懸掛時(shí)間為6分鐘，記錄后4分鐘內(nèi)，小鼠停止掙扎的總時(shí)長(zhǎng)。該時(shí)長(zhǎng)越長(zhǎng)表示抑郁程度越重。

7、曠場(chǎng)檢測(cè)：焦慮行為

準(zhǔn)備底面四邊長(zhǎng)50cm,高30cm的正方形純黑色曠場(chǎng)檢測(cè)箱，在底面標(biāo)記距箱壁20cm的邊長(zhǎng)30cm的正方形中心區(qū)域。將小鼠頭朝箱壁的方向，放入曠場(chǎng)檢測(cè)箱，記錄4分鐘內(nèi)，小鼠在中心區(qū)域停留的總時(shí)長(zhǎng)。該時(shí)長(zhǎng)越長(zhǎng)表示焦慮程度越輕。

8、給藥方法

造模/假手術(shù)操作當(dāng)日記為d0。用藥組按照40mg/kg(青蒿素類似物/小鼠體重)的比例灌胃，藥液體積為150μl；假手術(shù)組和模型snl組的給藥時(shí)間及途徑同用藥組，以等體積的溶劑載體替代藥液。

早期給藥為第4天起灌胃給藥，記為d4(1)。灌胃給藥于每天于下午5點(diǎn)進(jìn)行，連續(xù)給藥14天，最后一天記為d17(14)。

晚期給藥為第18天起灌胃給藥，記為d18(1)。灌胃給藥于每天于下午5點(diǎn)進(jìn)行，連續(xù)給藥5天，最后一天記為d22(5)。

實(shí)驗(yàn)例2：雙氫青蒿素對(duì)神經(jīng)病理性疼痛中機(jī)械痛敏、抑郁及焦慮的治療效果

1、藥物制備、給藥方案

造模/假手術(shù)操作當(dāng)日記為d0。用藥組按照40mg/kg(青蒿素類似物或陽性藥物普瑞巴林/小鼠體重)的比例灌胃，藥液體積為150μl；雙氫青蒿素或普瑞巴林預(yù)先懸溶于150μl的食用油中制成藥液；假手術(shù)組與模型snl組使用等體積食用油代替藥液，給藥時(shí)間及途徑同用藥組。

早期給藥實(shí)驗(yàn)中，第4天起灌胃給藥，記為d4(1)。灌胃給藥于每天于下午5點(diǎn)進(jìn)行，連續(xù)給藥14天，最后一天記為d17(14)。

晚期給藥實(shí)驗(yàn)中，第18天起灌胃給藥，記為d18(1)。灌胃給藥于每天于下午5點(diǎn)進(jìn)行，連續(xù)給藥5天，最后一天記為d22(5)。

2、觀察指標(biāo)

早期給藥實(shí)驗(yàn)中，在造模后d4、d7、d10、d13進(jìn)行機(jī)械痛閾值檢測(cè),檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)分別在灌胃給藥后的第1.5小時(shí)、3小時(shí)及24小時(shí)。在造模后d9、d17天分別進(jìn)行懸尾檢測(cè)和曠場(chǎng)檢測(cè)。

晚期給藥實(shí)驗(yàn)中，在造模后d1-d17天中的隔天和d17-d22的每天進(jìn)行機(jī)械痛閾值檢測(cè),檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)分別在灌胃給藥后的第1.5小時(shí)。在造模后d22天分別進(jìn)行強(qiáng)迫游泳檢測(cè)、懸尾檢測(cè)和曠場(chǎng)檢測(cè)。

3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1雙氫青蒿素能夠提高機(jī)械痛閾值，降低痛敏

雙氫青蒿素對(duì)機(jī)械痛閾值影響的檢測(cè)結(jié)果如圖1和圖3顯示：

在早期給藥實(shí)驗(yàn)中：模型snl組相對(duì)于假手術(shù)組機(jī)械痛閾值顯著降低，證明神經(jīng)病理性疼痛模型造模成功。在給藥1.5小時(shí)的檢測(cè)結(jié)果中，與模型snl組相比，在造模后d4、d7、d10、d13、d17(造模后d4為首次給藥日)，雙氫青蒿素均顯示出顯著的鎮(zhèn)痛效果(^&&&p<0.001)；在給藥3小時(shí)和24小時(shí)(次日給藥前)的檢測(cè)結(jié)果中，與模型snl組相比，在造模后d10、d13、d17天均顯示出顯著的鎮(zhèn)痛效果(^***p<0.001)。

在晚期給藥實(shí)驗(yàn)中：模型snl組相對(duì)于假手術(shù)組機(jī)械痛閾值顯著降低，證明神經(jīng)病理性疼痛模型造模成功。與模型snl組相比，陽性藥普瑞巴林組在給藥期間d1-d22顯示出顯著的鎮(zhèn)痛效果(^&&&p<0.001)，其中d1-d3可恢復(fù)痛閾至與假手術(shù)組相當(dāng)?shù)乃?，但從d4起逐漸下降。雙氫青蒿素用藥組自d18開始給藥，與模型snl組相比，d19-d22可顯著恢復(fù)痛閾值(^***p<0.001)，至給藥第4天d22鎮(zhèn)痛效果已超過普瑞巴林組。

3.2雙氫青蒿素能夠緩解抑郁

在早期給藥實(shí)驗(yàn)中：雙氫青蒿素對(duì)抑郁行為影響的懸尾實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果如圖2a結(jié)果顯示：在造模/假手術(shù)處理之前的d0，模型snl組/假手術(shù)組/用藥組的停止掙扎時(shí)間相似。在造模后的d9及d17(造模后d4首次給藥)，模型snl組與假手術(shù)組小鼠相比(^&&&p<0.001)，停止掙扎時(shí)間顯著增加，顯示出抑郁樣癥狀，證明神經(jīng)病理性疼痛模型并發(fā)抑郁。雙氫青蒿素用藥組小鼠與模型snl組相比(^***p<0.001)，停止掙扎時(shí)間顯著降低，已達(dá)到和假手術(shù)組相同的水平，證明雙氫青蒿素具有對(duì)神經(jīng)病理性疼痛并發(fā)的抑郁的療效。

在晚期給藥實(shí)驗(yàn)中：

強(qiáng)迫游泳檢測(cè):在d22(給藥第4天)，模型snl組相對(duì)于假手術(shù)組，的停止掙扎時(shí)間明顯增加(^***p<0.001)，表明模型組顯示抑郁狀態(tài)；雙氫青蒿素用藥組相對(duì)于模型snl組，停止掙扎時(shí)間明顯縮短(^***p<0.001)，證明雙氫青蒿素具有對(duì)神經(jīng)病理性疼痛并發(fā)的抑郁的療效；然而普瑞巴林組相較模型snl組并未顯示出抗抑郁效果。

懸尾檢測(cè):在d22(給藥第4天)，模型snl組相對(duì)于假手術(shù)組，的停止掙扎時(shí)間明顯增加(^***p<0.001)，表明模型組顯示抑郁狀態(tài)；雙氫青蒿素用藥組相對(duì)于模型snl組，停止掙扎時(shí)間明顯縮短(^***p<0.001)，證明雙氫青蒿素具有對(duì)神經(jīng)病理性疼痛并發(fā)的抑郁的療效；然而普瑞巴林組相較模型snl組并未顯示出抗抑郁效果。

3.3雙氫青蒿素能夠緩解焦慮

在早期給藥實(shí)驗(yàn)中：雙氫青蒿素對(duì)焦慮行為影響的曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果如圖2b顯示：在造模/假手術(shù)處理之前的d0，模型組/假手術(shù)組/用藥組的中心區(qū)域停留時(shí)間相似。在造模后的d9及d17(造模后d4首次給藥)，模型snl組與假手術(shù)組小鼠相比(^&&&p<0.001)，中心區(qū)域停留時(shí)間顯著降低，顯示出焦慮樣癥狀,證明神經(jīng)病理性疼痛模型并發(fā)焦慮；用藥組小鼠與模型snl組相比(^***p<0.001)，中心區(qū)域停留時(shí)間顯著升高，證明雙氫青蒿素具有對(duì)神經(jīng)病理性疼痛并發(fā)的焦慮的療效。

在晚期給藥實(shí)驗(yàn)中：雙氫青蒿素對(duì)焦慮行為影響的曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果如圖4c顯示：在d22(給藥第4天)，模型snl組相對(duì)于假手術(shù)組，中心區(qū)域停留時(shí)間明顯縮短(^***p<0.001)，表明模型組顯示焦慮狀態(tài)；雙氫青蒿素用藥組相對(duì)于模型snl組，中心區(qū)域停留時(shí)間明顯延長(zhǎng)(^***p<0.001)，證明雙氫青蒿素具有對(duì)神經(jīng)病理性疼痛并發(fā)的焦慮的療效；然而普瑞巴林組相較模型snl組并未顯示出抗焦慮效果。

實(shí)驗(yàn)例3：青蒿琥酯對(duì)神經(jīng)病理性疼痛中機(jī)械痛敏、抑郁及焦慮的治療效果

1、藥物制備

青蒿琥酯預(yù)先懸溶于150μl的5％醫(yī)用碳酸氫鈉注射液中制成藥液；假手術(shù)組與模型snl組使用5％醫(yī)用碳酸氫鈉注射液為溶劑載體。

2、觀察指標(biāo)

在造模后d4、d7、d10、d13進(jìn)行機(jī)械痛閾值檢測(cè),檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)分別在灌胃給藥后的第1.5小時(shí)、3小時(shí)及24小時(shí)。

在造模后d9、d17天分別進(jìn)行懸尾檢測(cè)和曠場(chǎng)檢測(cè)。

3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1青蒿琥酯能夠提高機(jī)械痛閾值，降低痛敏

青蒿琥酯對(duì)機(jī)械痛閾值影響的檢測(cè)結(jié)果如圖5顯示：模型snl組相對(duì)于假手術(shù)組機(jī)械痛閾值顯著降低，證明神經(jīng)病理性疼痛模型造模成功。在給藥1.5小時(shí)的檢測(cè)結(jié)果中，與模型snl組相比，在造模后d4、d7、d10、d13、d17(造模后d4為首次給藥日)，青蒿琥酯均顯示出顯著的鎮(zhèn)痛效果(^&&&p<0.001)；在給藥3小時(shí)和24小時(shí)(次日給藥前)的檢測(cè)結(jié)果中，與模型snl組相比，在造模后d10、d13、d17天均顯示出顯著的鎮(zhèn)痛效果(^***p<0.001)。

3.2青蒿琥酯能夠緩解抑郁

青蒿琥酯對(duì)抑郁行為影響的懸尾實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果如圖6a結(jié)果顯示：在造模/假手術(shù)處理之前的d0，模型snl組/假手術(shù)組/用藥組的停止掙扎時(shí)間相似。在造模后的d9及d17(造模后d4首次給藥)，模型snl組與假手術(shù)組小鼠相比(^&&&p<0.001)，停止掙扎時(shí)間顯著增加，顯示出抑郁樣癥狀，證明神經(jīng)病理性疼痛模型并發(fā)抑郁。用藥組小鼠與模型snl組相比(^***p<0.001)，停止掙扎時(shí)間顯著降低，證明青蒿琥酯具有對(duì)神經(jīng)病理性疼痛并發(fā)的抑郁的療效。

3.3青蒿琥酯能夠緩解焦慮

青蒿琥酯對(duì)焦慮行為影響的曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果如圖6b結(jié)果顯示：在造模/假手術(shù)處理之前的d0，模型組/假手術(shù)組/用藥組的中心區(qū)域停留時(shí)間相似。在造模后的d9及d17(造模后d4首次給藥)，模型snl組與假手術(shù)組小鼠相比(^&&&p<0.001)，中心區(qū)域停留時(shí)間顯著降低，顯示出焦慮樣癥狀,證明神經(jīng)病理性疼痛模型并發(fā)焦慮；用藥組小鼠與模型snl組相比(^***p<0.001)，中心區(qū)域停留時(shí)間顯著升高，證明青蒿琥酯具有對(duì)神經(jīng)病理性疼痛并發(fā)的焦慮的療效。

實(shí)驗(yàn)例4：蒿甲醚對(duì)神經(jīng)病理性疼痛中機(jī)械痛敏、抑郁及焦慮的治療效果

1、藥物制備

蒿甲醚預(yù)先懸溶于150μl的食用油中制成藥液；假手術(shù)組與模型snl組使用食用油為溶劑載體。

2、觀察指標(biāo)

在造模后d4、d7、d10、d13進(jìn)行機(jī)械痛閾值檢測(cè),檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)分別在灌胃給藥后的第1.5小時(shí)、3小時(shí)及24小時(shí)。

在造模后d9、d17天分別進(jìn)行懸尾檢測(cè)和曠場(chǎng)檢測(cè)。

3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1蒿甲醚能夠提高機(jī)械痛閾值，降低痛敏

蒿甲醚對(duì)機(jī)械痛閾值影響的檢測(cè)結(jié)果如圖7顯示：模型snl組相對(duì)于假手術(shù)組機(jī)械痛閾值顯著降低，證明神經(jīng)病理性疼痛模型造模成功。在給藥1.5小時(shí)的檢測(cè)結(jié)果中，與模型snl組相比，在造模后d4、d7、d10、d13、d17(造模后d4為首次給藥日)，蒿甲醚均顯示出顯著的鎮(zhèn)痛效果(^&&&p<0.001)；在給藥3小時(shí)和24小時(shí)(次日給藥前)的檢測(cè)結(jié)果中，與模型snl組相比，在造模后d10、d13、d17天均顯示出顯著的鎮(zhèn)痛效果(^***p<0.001)。

3.2蒿甲醚能夠緩解抑郁

蒿甲醚對(duì)抑郁行為影響的懸尾實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果如圖8a結(jié)果顯示：在造模/假手術(shù)處理之前的第0天，模型snl組/假手術(shù)組/用藥組的停止掙扎時(shí)間相似。在造模后的d9及d17(造模后d4首次給藥)，模型snl組與假手術(shù)組小鼠相比(^&&&p<0.001)，停止掙扎時(shí)間顯著增加，顯示出抑郁樣癥狀，證明神經(jīng)病理性疼痛模型并發(fā)抑郁。用藥組小鼠與模型snl組相比(^***p<0.001)，停止掙扎時(shí)間顯著降低，證明蒿甲醚具有對(duì)神經(jīng)病理性疼痛并發(fā)的抑郁的療效。

3.3蒿甲醚能夠緩解焦慮

蒿甲醚對(duì)焦慮行為影響的曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果如圖8b結(jié)果顯示：在造模/假手術(shù)處理之前的d0，模型組/假手術(shù)組/用藥組的中心區(qū)域停留時(shí)間相似。在造模后的d9及d17(造模后d4首次給藥)，模型snl組與假手術(shù)組小鼠相比(^&&&p<0.001)，中心區(qū)域停留時(shí)間顯著降低，顯示出焦慮樣樣癥狀,證明神經(jīng)病理性疼痛模型并發(fā)焦慮；用藥組小鼠與模型snl組相比(^***p<0.001)，中心區(qū)域停留時(shí)間顯著升高，證明蒿甲醚具有對(duì)神經(jīng)病理性疼痛并發(fā)的焦慮的療效。