本發(fā)明涉及醫(yī)藥，特別是一種金錢(qián)草炮制的雷公藤中藥飲片。
背景技術(shù)：
雷公藤為衛(wèi)矛科植物雷公藤(tripterygiumwilfordiihook.f.)的干燥根或根的木質(zhì)部，性寒，味苦、辛，歸肝、腎經(jīng)，功效祛風(fēng)除濕、活血通絡(luò)、消腫止痛和殺蟲(chóng)解毒，具有抗癌、抗類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、抗糖尿病腎病、免疫抑制等多種生物活性，療效卓著卻毒性甚大，成為近半個(gè)世紀(jì)以來(lái)報(bào)道發(fā)生中毒事件最多的中草藥之一，尤其突出表現(xiàn)在肝毒性和腎毒性。
中醫(yī)藥理論認(rèn)為，“金錢(qián)草殺雷公藤毒”，即金錢(qián)草可以抑制雷公藤的毒性，金錢(qián)草和雷公藤合用屬于中藥相殺配伍的范疇。中醫(yī)臨床也有以金錢(qián)草解雷公藤中毒的報(bào)道。
炮制是中醫(yī)重要的用藥特色，通過(guò)恰當(dāng)炮制可以起到減毒或(和)增效的效果。以一種藥物恰當(dāng)炮制另一種藥物，以起到炮制減毒或(和)增效的目的，自古有之，如姜半夏、蜜百合、萸黃連等等。本發(fā)明首次選取與雷公藤具有“相殺”配伍關(guān)系的金錢(qián)草為主要輔料藥，旨在開(kāi)發(fā)低毒高效的雷公藤中藥飲片，為雷公藤臨床安全有效用藥奠定基礎(chǔ)。但至今未見(jiàn)有金錢(qián)草炮制雷公藤飲片的公開(kāi)報(bào)導(dǎo)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
針對(duì)上述情況，為克服現(xiàn)有技術(shù)之缺陷，本發(fā)明之目的就是提供一種金錢(qián)草炮制的雷公藤中藥飲片，可有效解決雷公藤療效卓著卻毒性甚大的用藥安全問(wèn)題。
本發(fā)明解決的技術(shù)方案是，該飲片由金錢(qián)草和雷公藤飲片以質(zhì)量比為1︰3-12作原料制成，首先將金錢(qián)草加入金錢(qián)草重量6-8倍的水煎煮兩次，合并兩次煎液，濃縮至濃度為相當(dāng)于含生藥量0.025-0.1g/ml的金錢(qián)草水煎液；將雷公藤飲片加入金錢(qián)草水煎液中，置于不銹鋼鍋內(nèi)，用文火煮至藥透汁盡，取出，置于遠(yuǎn)紅外恒溫干燥箱內(nèi)60℃干燥，成金錢(qián)草炮制的雷公藤飲片。
本發(fā)明原料豐富，制備方法簡(jiǎn)單，有效降低了雷公藤的毒性，提高了療效和藥用價(jià)值，開(kāi)拓了雷公藤的使用價(jià)值，有顯著的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式作詳細(xì)說(shuō)明。
實(shí)施例1
本發(fā)明在具體實(shí)施中，該飲片由金錢(qián)草和雷公藤飲片以質(zhì)量比為1︰3作原料制成，首先將金錢(qián)草加入金錢(qián)草重量6-8倍的水煎煮兩次，合并兩次煎液，濃縮至濃度為相當(dāng)于含生藥量0.1g/ml的金錢(qián)草水煎液；將雷公藤飲片加入金錢(qián)草水煎液中，置于不銹鋼鍋內(nèi)，用文火煮至藥透汁盡，取出，置于遠(yuǎn)紅外恒溫干燥箱內(nèi)60℃干燥，成金錢(qián)草炮制的雷公藤飲片。
實(shí)施例2
本發(fā)明在具體實(shí)施中，該飲片由金錢(qián)草和雷公藤飲片以質(zhì)量比為1︰6作原料制成，首先將金錢(qián)草加入金錢(qián)草重量6-8倍的水煎煮兩次，合并兩次煎液，濃縮至濃度為相當(dāng)于含生藥量0.05g/ml的金錢(qián)草水煎液；將雷公藤飲片加入金錢(qián)草水煎液中，置于不銹鋼鍋內(nèi)，用文火煮至藥透汁盡，取出，置于遠(yuǎn)紅外恒溫干燥箱內(nèi)60℃干燥，成金錢(qián)草炮制的雷公藤飲片。
實(shí)施例3
本發(fā)明在具體實(shí)施中，該飲片由金錢(qián)草和雷公藤飲片以質(zhì)量比為1︰12作原料制成，首先將金錢(qián)草加入金錢(qián)草重量6-8倍的水煎煮兩次，合并兩次煎液，濃縮至濃度為相當(dāng)于含生藥量0.025g/ml的金錢(qián)草水煎液；將雷公藤飲片加入金錢(qián)草水煎液中，置于不銹鋼鍋內(nèi)，用文火煮至藥透汁盡，取出，置于遠(yuǎn)紅外恒溫干燥箱內(nèi)60℃干燥，成金錢(qián)草炮制的雷公藤飲片。
本發(fā)明金錢(qián)草炮制的雷公藤飲片具有祛風(fēng)除濕、活血通絡(luò)、消腫止痛和殺蟲(chóng)解毒，具有抗癌、抗類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、抗糖尿病腎病、免疫抑制等多種生物活性的功效，并經(jīng)實(shí)驗(yàn)取得了非常好的有益技術(shù)效果，有關(guān)實(shí)驗(yàn)資料如下：
1.1實(shí)驗(yàn)材料與方法
1.1.1受試動(dòng)物
昆明(km)小鼠，雄性，spf級(jí)，體質(zhì)量18～22g，由河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供[scxk(豫)2015-0004]。s180荷瘤腹水瘤小鼠，由中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所提供。
1.1.2受試藥物
取雷公藤生品及金錢(qián)草炮制的雷公藤飲片，置于圓底燒瓶中，分別加入10倍量的乙酸乙酯或20％～95％乙醇，浸泡1小時(shí)，進(jìn)行回流提取3次，每次2小時(shí)，4000r/min離心分離上清液，合并3次上清液，減壓回收乙酸乙酯至無(wú)乙酸乙酯味，或減壓回收乙醇至無(wú)醇味，減壓干燥(60℃)，得雷公藤生品及金錢(qián)草炮制的雷公藤飲片的乙酸乙酯或20％～95％乙醇的提取物浸膏受試藥物。
1.2實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1腫瘤細(xì)胞的傳代與接種(s180實(shí)體瘤)
s180荷瘤小鼠生長(zhǎng)7d，頸椎脫臼處死荷瘤小鼠，用醫(yī)用酒精和碘伏對(duì)其腹部進(jìn)行兩次消毒，無(wú)菌抽取s180荷瘤小鼠乳白色腹水至無(wú)菌ep管中(放置冰上備用)，立即加入預(yù)冷無(wú)菌生理鹽水稀釋2倍，從稀釋過(guò)的腫瘤細(xì)胞抽取0.2ml快速腹腔注射正常小鼠，常規(guī)飼養(yǎng)，觀察傳代荷瘤小鼠狀況，取9d生長(zhǎng)旺盛的荷瘤小鼠，繼續(xù)傳代，根據(jù)實(shí)驗(yàn)所需，決定所傳代數(shù)。
將生長(zhǎng)7d旺盛的s180細(xì)胞種鼠頸椎脫臼處死，無(wú)菌取小鼠乳白色腹水，用無(wú)菌生理鹽水稀釋5倍。抽取腫瘤細(xì)胞懸液，無(wú)菌條件下將s180腫瘤細(xì)胞接種于小鼠右前肢腋窩部皮下，0.2ml/只。
1.2.2動(dòng)物分組與給藥
于瘤細(xì)胞接種次日，將小鼠隨機(jī)分為7組：模型、模型+陽(yáng)性藥5-氟尿嘧啶(5-fu，25mg/kg)、模型+雷公藤生品、模型+雷公藤炮制飲片a(金錢(qián)草/雷公藤＝1/3)、模型+雷公藤炮制飲片b(金錢(qián)草/雷公藤＝1/6)、模型+雷公藤炮制飲片c(金錢(qián)草/雷公藤＝1/12)組，另取10只正常動(dòng)物作為正常對(duì)照組。
雷公藤生品及不同炮制品組均灌胃(ig)給藥(0.2ml/10g)，劑量均為60mg/kg(由預(yù)實(shí)驗(yàn)確定)，模型組和正常對(duì)照組均ig等體積0.5％cmc-na，每日1次，連續(xù)14d。第15d摘眼球采血，取下瘤塊稱(chēng)重，按公式計(jì)算抑瘤率。
1.2.3樣本的采集與處理
于第14d末次給藥24小時(shí)后，對(duì)小鼠進(jìn)行摘眼球取血，取至一ep管中，做好相應(yīng)標(biāo)記，于4℃冰箱中靜置30min，3000r/min離心15min，分離血清，分裝后于－20℃冰箱中保存?zhèn)溆?，測(cè)定血清肝功指標(biāo)谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alt)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(ast)、及腎功指標(biāo)肌酐(cr)、尿素氮(bun)。
1.2.4實(shí)體瘤采集
末次給藥后禁食不禁水，摘眼球取血后，頸椎脫臼處死小鼠，立即剖開(kāi)小鼠右腋下外皮，剪取實(shí)體瘤，用生理鹽水洗去血液與粘液，并用濾紙吸干后迅速稱(chēng)重。腫瘤生長(zhǎng)抑制率(inhibitionrate,ir)＝(1-實(shí)驗(yàn)組平均瘤重/模型對(duì)照組平均瘤重)×100％。
1.2.5酶標(biāo)儀檢測(cè)血液生化指標(biāo)
實(shí)驗(yàn)第15d處死小鼠后，取小鼠眼眶血清，測(cè)血清指標(biāo)alt、ast、cr、bun，具體按南京建成生物工程研究所各類(lèi)指標(biāo)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。
1.2.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法
數(shù)據(jù)分析用spss17.0醫(yī)用統(tǒng)計(jì)包進(jìn)行數(shù)據(jù)資料的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差
1.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1.3.1本發(fā)明中藥飲片對(duì)腫瘤小鼠瘤重的影響
如表1所示，與模型組比較，陽(yáng)性藥5-fu及本發(fā)明中藥飲片均可使腫瘤小鼠瘤重極顯著降低(p<0.01)，提示陽(yáng)性藥及本發(fā)明中藥飲片在小鼠s180實(shí)體瘤實(shí)驗(yàn)中均表現(xiàn)出了顯著抗腫瘤的作用；與雷公藤生品組比較，經(jīng)金錢(qián)草按照質(zhì)量比1:3～1:12炮制后，雷公藤各炮制飲片組小鼠瘤重均顯著降低(p<0.05或p<0.01)，腫瘤抑制率升高了10.94％～18.75％，其中以金錢(qián)草與雷公藤質(zhì)量比為1/6時(shí)抑瘤率升高最多，說(shuō)明經(jīng)金錢(qián)草炮制后的產(chǎn)生的雷公藤飲片(金錢(qián)草/雷公藤＝1/3～1/12)，抗腫瘤活性顯著升高了，其中尤以1/6時(shí)為佳。進(jìn)一步與陽(yáng)性藥5-fu組比較后發(fā)現(xiàn)，質(zhì)量比在1/3～1/6時(shí)，與5-fu無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05)，提示本發(fā)明炮制后的飲片，抗腫瘤作用與5-fu作用相當(dāng)。
表1本發(fā)明中藥飲片對(duì)腫瘤小鼠瘤重的影響(n＝10，
與模型組比較，#p<0.01；與雷公藤生品比較，*p<0.05，**p<0.01
1.3.2本發(fā)明中藥飲片對(duì)腫瘤小鼠肝功、腎功的影響
如表2所示，與正常組比較，陽(yáng)性藥5-fu及雷公藤生品飲片均可使s180實(shí)體瘤小鼠血清肝功指標(biāo)alt和ast、腎功指標(biāo)cr和bun顯著升高(p<0.05)，提示陽(yáng)性藥5-fu及雷公藤生品飲片引起了腫瘤小鼠的肝毒性和腎毒性；與雷公藤生品組比較，經(jīng)金錢(qián)草按照質(zhì)量比1:3～1:12炮制后，雷公藤各炮制飲片組小鼠血清肝功指標(biāo)alt和ast、腎功指標(biāo)cr和bun均顯著降低(p<0.05或p<0.01)，說(shuō)明經(jīng)金錢(qián)草炮制后的產(chǎn)生的雷公藤飲片(金錢(qián)草/雷公藤＝1/3～1/12)降低了雷公藤所致的肝毒和腎毒。
表2本發(fā)明中藥飲片對(duì)腫瘤小鼠肝功、腎功的影響(n＝10，
與正常組比較，&p<0.05；與模型組比較，#p<0.05；
與雷公藤生品組比較，*p<0.05，**p<0.01
上述試驗(yàn)可以清楚的表明，以雷公藤生品飲片相比，經(jīng)金錢(qián)草炮制后的雷公藤飲片，不僅抗腫瘤作用提高了，而且肝毒和腎毒也降低了；本發(fā)明飲片作用與陽(yáng)性藥5-fu相當(dāng)，而且避免了5-fu引起的肝毒和腎毒性。說(shuō)明本發(fā)明中藥雷公藤飲片具有抗腫瘤低毒高效作用，開(kāi)拓了雷公藤的安全高效用藥的藥用價(jià)值，為中醫(yī)藥學(xué)的發(fā)展做出創(chuàng)造性貢獻(xiàn)，有顯著的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。