專利名稱：：貫葉連翹的穩(wěn)定提取物、其制備方法和藥物組合物的制作方法藥理和臨床試驗(yàn)證實(shí)貫葉連翹的提取物能夠成功地用于普通的嚴(yán)重抑郁癥。但不能確切地指明這種溫和的抗抑郁總功效是一種或多種組分產(chǎn)生的；參見J.Holzl，S.Sattler和H.Schutt，JohanniskrautEineAlternativezusynthetischenAntidepressiva(St.Johnswortanalternativetosyntheticantidepressants)，PharmazeutischeZeitung，No.46，139.Jahrgang，1994年11月17日，第3959-3977頁(yè)。然而，近來強(qiáng)烈的暗示貫葉金絲桃素對(duì)達(dá)到功效起顯著的作用(EP-A-0599307)。粗草藥是由貫葉連翹的地上部分組成的。貫葉連翹的組分是另外的金絲桃素和貫葉金絲桃素；參見J.Holzl等，見上。在DE-PS-1569849以及S.Niesel和H.Schilcher在Arch.Pharm.，第323卷1990年第755頁(yè)描述了富含金絲桃素的金絲桃提取物的制備。從R.Berghofer和J.Holzl，DeutscheApothekerzeitung，第126卷第47期(1986)第2569-2573頁(yè)中我們知道一周后從儲(chǔ)存的粗草藥提取的貫葉金絲桃素已經(jīng)完全降解而從新鮮植物中提取的提取物更穩(wěn)定。這些作者推測(cè)該新鮮植物包括一種貫葉金絲桃素的穩(wěn)定劑。J.Holzl等在PlantaMed.，第55卷(1989)第601-602頁(yè)中報(bào)道金絲桃油并推測(cè)在金絲桃素的濃度和過氧化值之間有關(guān)系。暴露在陽(yáng)光中的金絲桃油顯示出不同的過氧化值。但是按照J(rèn).Holzl等，在過氧化值和金絲桃素的濃度之間沒有關(guān)系。P.Maisenbacher和K.-A.Kovar在PlantaMed.第58卷(1992)第351到354頁(yè)中報(bào)道了金絲桃油的穩(wěn)定性。該油中也包括了幾周內(nèi)降解的金絲桃素。從EP-A-0599307(對(duì)應(yīng)于DE-OS4239959)已知金絲桃的提取物和它的制備方法，其中的提取物盡可能少地含有金絲桃素和類似的光敏化合物但是經(jīng)管如此卻顯示出被正式認(rèn)為來自金絲桃素的效果。用貫葉金絲桃素的存在可以解釋這種效果。而且，已知通過用一種脂肪油如橄欖油、大豆油、麥芽油或葵花籽油提取搗碎(搗爛的)貫葉連翹的新鮮花來制備金絲桃油(金絲桃油；Oleumhyperici)。金絲桃油包括不同量的貫葉金絲桃素并可用于局部治療傷口特別是燒傷和擦破；參見P.Maisenbacher和K.-A.Kovar，PlantaMed.，Vol158(1992)，第351-354頁(yè)和J.Holzl，L.Demish和S.Stock，PlantaMed.，第55卷(1989)第601-602頁(yè)。在藥物中的常規(guī)金絲桃提取物中的貫葉金絲桃素含量，在常規(guī)存儲(chǔ)幾個(gè)月內(nèi)會(huì)劇烈地降低直到該物質(zhì)消失；參見Ph.D.thesisofP.Maisenbacher，Tubingen1991和thePh.D.thesisofR.Berghofer，Marburg/L.1987。在早期金絲桃的油性提取物試驗(yàn)中，含有貫葉金絲桃素的組合物的穩(wěn)定性只有在氬氣中存儲(chǔ)才能改善的好一點(diǎn)；參見Ph.D.thesisofP.Maisenbacher，見上。在這些提取物中用抗氧化劑如丁基羥基甲苯(BHT)和丁基羥基甲氧基苯(BHA)不能實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定。而且，常規(guī)的抗氧化劑如OxynexLM和Oxynex2004也不能改善穩(wěn)定性。在金絲桃油時(shí)，使用辛基十二烷醇(EutanolG)作提取劑達(dá)到了最好的穩(wěn)定性(按照P.Maisenbacher的Ph.D.理論)；見P.Maisenbacher’sPh.D.thesis，第151-154頁(yè)。用常規(guī)的藥用無機(jī)或有機(jī)溶劑或其混合物能夠制備含有貫葉金絲桃素的金絲桃提取物(P.List和P.C.Schmidt，TechnologiepflanzlicherArzneizubereitungen，Wissensch.VerlagsgesellschaftmbH，Stuttgart，1984)。通常金絲桃的含水乙醇提取物和其制備成的藥物組合物一般包括少于大約1％的貫葉金絲桃素(以提取物為準(zhǔn))。存儲(chǔ)后該值明顯下降并根據(jù)不同的存儲(chǔ)條件趨向于零。人們推測(cè)氧化過程對(duì)原藥材和提取物中的貫葉金絲桃素的降解起作用。本發(fā)明的技術(shù)問題是提供含有貫葉金絲桃素的貫葉連翹的穩(wěn)定提取物，其中貫葉金絲桃素長(zhǎng)期保持穩(wěn)定。本發(fā)明的另一個(gè)技術(shù)問題是提供了一種制備這些穩(wěn)定提取物的方法以及提供了含有穩(wěn)定提取物的藥物組合物，其中該組合物中的貫葉金絲桃素的量也保持穩(wěn)定。按照本發(fā)明，這些技術(shù)問題用權(quán)利要求1到14的提取物、用權(quán)利要求15的藥物組合物、用權(quán)利要求16-26的方法以及權(quán)利要求27的該提取物和/或藥物組合物的用途已經(jīng)解決。本發(fā)明首先是以這樣一種出人意料的結(jié)果為基礎(chǔ)的，即含有某些抗氧化劑和/或結(jié)合氧的穩(wěn)定劑或還原劑的貫葉金絲桃素的提取物，這些試劑能夠降解氧化劑類如游離基、過氧化物、大氣中氧等和/或抑制貫葉金絲桃素的降解，以及任選在惰性氣體中如氮?dú)夂?或避光和/或用一種高還原氧含量的溶劑進(jìn)行的提取比未處理的金絲桃提取物穩(wěn)定很多。這種提取物是與R.Berghofer和J.Holzl從干燥和存儲(chǔ)的粗草藥得到的觀察相反的角度得到的。通過物理處理如用惰性氣體向氮?dú)馇逑茨軌蛑频酶哌€原氧含量的溶劑。如按照本發(fā)明特別是通過加入一種抗氧化劑并優(yōu)選避光和大氣中氧來保護(hù)或穩(wěn)定金絲桃的提取物時(shí)，則該提取物中的貫葉金絲桃素長(zhǎng)期基本保持穩(wěn)定。通過相應(yīng)的藥物制劑業(yè)能夠?qū)崿F(xiàn)避光和大氣中氧的保護(hù)。在本發(fā)明制備穩(wěn)定提取物方法的優(yōu)選實(shí)施方案中，用含水乙醇或甲醇提取新鮮或最好是干燥的貫葉連翹藥材，通過物理處理大大降低了試劑的氧含量。由于可能存在氧化劑，將作為穩(wěn)定劑的抗氧化劑加到提取溶液并使其溶解。提取貫葉連翹優(yōu)選溶劑的例子還包括低熔點(diǎn)含大約5到8個(gè)碳原子的烷烴如戊烷、己烷和庚烷，特別是正庚烷，以及液態(tài)和超臨界的二氧化碳。術(shù)語(yǔ)“含水乙醇或甲醇”是指水含量最好高達(dá)大約體積40％體積的甲醇或乙醇。優(yōu)選抗氧化穩(wěn)定劑或抗氧化劑的特殊例子是藥學(xué)上可接受的物質(zhì)，其能夠抑制貫葉金絲桃素的降解和/或還原提取物或藥物組合物中的氧化劑。特殊的例子是有機(jī)硫醇化合物，如半胱氨酸和谷胱甘肽，以及抗壞血酸及其衍生物如抗壞血酸的脂肪酸酯，如肉豆蔻酸酯、棕櫚酸酯和硬脂酸酯。向金絲桃提取溶液中加入足以穩(wěn)定貫葉金絲桃素的量的抗氧化穩(wěn)定劑。對(duì)一般金絲桃提取物講0.01％到5％濃度的抗氧化穩(wěn)定劑是足夠的。在另一個(gè)實(shí)施方案中，如上所述進(jìn)行，但穩(wěn)定劑是在干燥提取溶液后即除去溶劑后加入的。在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，在與其它藥物添加劑一起制備藥物產(chǎn)品階段加入抗氧化穩(wěn)定劑。所有的實(shí)施方案最好在避開光和無氧下進(jìn)行。所得到的提取物能夠與常規(guī)藥物添加劑一起制備，任選擇性地在之后把穩(wěn)定劑再加入到藥物組合物如膠囊、片劑和包衣片中。藥物添加劑是填充劑、粘合劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑和用于膜片和包衣片的包衣劑以及用于軟膠囊的油類和脂肪類填充劑。本發(fā)明通過下列實(shí)施例加以解釋，但不限定本發(fā)明的范圍。如果不另作說明，百分比按重量計(jì)。用氮?dú)庾鞫栊詺怏w(保護(hù)性氣體)。應(yīng)當(dāng)清楚其它惰性氣體如氬或氪也能使用。實(shí)施例1a)和1b)(對(duì)照實(shí)施例)a)在碾機(jī)中把1kg貫葉連翹的粗草藥碾細(xì)并加入7kg70(v/v)％的乙醇。在55℃惰性氣體下把1kg粗草藥的懸浮液和7kg溶劑劇烈攪拌1小時(shí)。然后從粗草藥中離心分離所得到的提取物。用7kg的溶劑再把藥渣提取兩次。合并兩次提取液測(cè)定提取物等分部分的干燥殘余物。緩緩地減壓濃縮提取物到含大約70％干燥剩余物，再在40℃減壓干燥。得到0.42kg干燥提取物。貫葉金絲桃素的含量是2.26％，金絲桃素的中含量是0.27％。b)按照EP-A-0599307所教導(dǎo)的，用聚乙烯吡咯烷酮(PVP)處理進(jìn)一步加工實(shí)施例1a)的干燥提取物來選擇性除去金絲桃素。貫葉金絲桃素的含量是2.96％。實(shí)施例2在碾機(jī)中把24kg貫葉連翹的粗草藥碾細(xì)并在用氮?dú)鉀_洗之前加入156kg80(v/v)％的甲醇。然后在55℃把混合物攪拌1小時(shí)。從藥物剩余物中離心分離所得到的提取溶液。接著把剩余物提取兩次。合并兩次提取溶液并加入重量百分比1.0％的抗壞血酸。把該溶液攪拌15分鐘。然后緩緩把提取溶液濃縮到干燥殘余物含量為70％并在40℃減壓干燥。得到貫葉金絲桃素含量3.2％的5.39kg穩(wěn)定的干燥提取物。提取物中金絲桃素的總含量為0.48％。實(shí)施例3在碾機(jī)中把8kg貫葉連翹的粗草藥碾細(xì)并加入56kg70(v/v)％的乙醇。在用惰性氣體沖洗前還原所用溶劑的氧含量。然后在惰性氣體55℃下把8kg粗草藥的懸浮液和56kg溶劑劇烈攪拌1小時(shí)。從藥物剩余物中離心分離所得到的提取物同時(shí)用氮?dú)庾鞫栊詺怏w沖洗。把藥渣用相同方式提取兩次。合并兩次提取溶液并加入0.05％的L-半胱氨酸。在氮?dú)庾鞫栊詺怏w下把該溶液劇烈攪拌10分鐘。然后緩緩減壓濃縮到干燥殘余物含量為70％并在40℃減壓干燥。得到貫葉金絲桃素含量3.9％的2.524kg穩(wěn)定的干燥提取物。提取物中金絲桃素的總含量為0.28％。實(shí)施例4在壓榨機(jī)中壓榨454g切細(xì)的新鮮貫葉連翹。向壓榨液(160ml)中加入1.5g抗壞血酸并溶解。然后再把壓榨液加入到壓榨過的藥材中。向濕潤(rùn)的藥材中加入1kg正庚烷。在50℃避光一直攪拌下靶混合物提取1小時(shí)。用SeitzSupra1500濾頭把混合物吸出并把藥渣用相同方式提取兩次。在35℃避光下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮合并的提取溶液得到大約70％含量的干燥殘余物并冷凍干燥。得到貫葉金絲桃素含量為37.2％的9.11g干燥提取物。實(shí)施例5在壓榨機(jī)中壓榨515g切細(xì)的新鮮貫葉連翹。向壓榨液(180ml)中加入1.7g抗壞血酸并溶解。然后再把壓榨液加入到壓榨過的藥材中。然后把濕潤(rùn)的藥材轉(zhuǎn)到高壓提取機(jī)上并在350巴40℃用二氧化碳提取。每kg藥材用20kg二氧化碳。提取后，減壓到60巴來分離提取物。將提取物從提取機(jī)中取出并加熱到大約60℃，從共同提取的水中分離出來。得到貫葉金絲桃素含量為43.1％的12.3g干燥提取物。實(shí)施例6檢測(cè)貫葉金絲桃素的穩(wěn)定性在該實(shí)施例中，把按照實(shí)施例1制備中沒有特別預(yù)防方法和加入法得到的提取物的貫葉金絲桃素含量(用HPLC測(cè)得)與本發(fā)明實(shí)施例2到5制得的提取物比較。在室溫避光下把本發(fā)明制得的提取物儲(chǔ)存在氮?dú)庵小＝Y(jié)果總結(jié)在表1中。該結(jié)果顯示12月后按照本發(fā)明制得的提取物的貫葉金絲桃素的含量幾乎沒有變化。在這期間實(shí)施例1到3制得的提取物的金絲桃素總量也沒有變化。表1</tables>實(shí)施例7含有貫葉金絲桃素的軟明膠膠囊-組合物貫葉金絲桃素的干燥提取物300mg抗壞血酸0.25mg辛基十二烷醇200mg制備分別把實(shí)施例3和4的提取物用作干燥提取物。把干燥提取物和抗壞血酸一起分散到辛基十二烷醇中并在避開大氣氧下加工成軟明膠膠囊。實(shí)施例8含有貫葉金絲桃素提取物的包膜片-組合物貫葉金絲桃素的干燥提取物300mg纖維素100mg改良淀粉90mg羧甲基纖維素鈉30mg高度分散的二氧化硅5.0mg抗壞血酸5.0mg硬脂酸鎂5.0mg羥丙基甲基纖維素-包衣20.0mg制備用實(shí)施例3的提取物作干燥提取物。在干燥條件下用混合機(jī)把組分混合并直接壓成片。把所得到的片用羥丙基甲基纖維素包衣包裹。實(shí)施例9商業(yè)上可得到的(德國(guó)市場(chǎng)，1995年9月)的金絲桃的藥物組合物和本發(fā)明制成的藥物組合物之間的比較在該實(shí)施例中，就制劑中所含提取物為準(zhǔn)驗(yàn)次貫葉金絲桃素含量，測(cè)定五種制成的金絲桃的藥物組合物，它們是1995年9月從德國(guó)市場(chǎng)上得到的，并與本發(fā)明制得的藥物組合物比較。結(jié)果顯示在表II中。很明顯本發(fā)明制得的藥物組合物具有幾乎較高的貫葉金絲桃素的含量，這種含量甚至在12月后幾乎保持穩(wěn)定。表II</tables>權(quán)利要求1.一種基于干燥提取物含有至少2％的貫葉金絲桃素的貫葉連翹的穩(wěn)定提取物，其特征在于貫葉金絲桃素相對(duì)于分解或降解是穩(wěn)定的或是用一種穩(wěn)定劑穩(wěn)定的。2.一種干燥提取物含有至少2％的貫葉金絲桃素的貫葉連翹的穩(wěn)定提取物，它是通過加入一種選自于有機(jī)硫醇化合物、抗壞血酸或其衍生物和通過用常規(guī)藥物無機(jī)或有機(jī)溶劑或其混合物提取新鮮或干燥的貫葉連翹藥物，條件是該溶劑是非油性提取溶劑。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的貫葉連翹的穩(wěn)定提取物，其特征在于貫葉金絲桃素的含量至少是3％。4.根據(jù)權(quán)利要求1或2的貫葉連翹的穩(wěn)定提取物，其特征在于貫葉金絲桃素的含量至少是5％。5.根據(jù)權(quán)利要求1或2的貫葉連翹的穩(wěn)定提取物，其特征在于貫葉金絲桃素的含量至少是20％。6.根據(jù)權(quán)利要求1到5的任何穩(wěn)定的提取物，其特征在于該穩(wěn)定劑是基于提取物的0.01％到5％，優(yōu)選0.2％到1％存在的。7.根據(jù)權(quán)利要求1到6的任何穩(wěn)定的提取物，其特征在于該穩(wěn)定劑是半胱氨酸。8.根據(jù)權(quán)利要求1到6的任何穩(wěn)定的提取物，其特征在于該穩(wěn)定劑是谷胱甘肽。9.根據(jù)權(quán)利要求1到6的任何穩(wěn)定的提取物，其特征在于該穩(wěn)定劑是抗壞血酸。10.根據(jù)權(quán)利要求1到6的任何穩(wěn)定的提取物，其特征在于該穩(wěn)定劑是抗壞血酸的脂肪酸酯。11.根據(jù)權(quán)利要求1到10的任何穩(wěn)定的提取物，其特征在于該溶劑是含水乙醇。12.根據(jù)權(quán)利要求1到10的任何穩(wěn)定的提取物，其特征在于該溶劑是含水甲醇。13.根據(jù)權(quán)利要求1到10的任何穩(wěn)定的提取物，其特征在于該溶劑是正庚烷。14.根據(jù)權(quán)利要求1到10的任何穩(wěn)定的提取物，其特征在于該溶劑是液態(tài)或超臨界二氧化碳。15.一種藥物組合物，它含有權(quán)利要求1到14中任何一種提取物和常規(guī)的藥物添加劑。16.一種制備穩(wěn)定提取物的方法，其中用常規(guī)的藥物無機(jī)或有機(jī)溶劑或其混合物提取篩選過的新鮮或干燥貫葉連翹藥材，條件是該溶劑是非油性提取溶劑，和在制備期間或制備后加入選自于有機(jī)硫醇化合物類、抗壞血酸及其衍生物中的穩(wěn)定劑，以及其中從這樣獲得的液態(tài)提取物中得到干燥提取物。17.根據(jù)權(quán)利要求16的方法，其特征在于把半胱氨酸用作穩(wěn)定劑。18.根據(jù)權(quán)利要求16的方法，其特征在于把谷胱甘肽用作穩(wěn)定劑。19.根據(jù)權(quán)利要求16的方法，其特征在于把抗壞血酸用作穩(wěn)定劑。20.根據(jù)權(quán)利要求16的方法，其特征在于把抗壞血酸的脂肪酸酯用作穩(wěn)定劑。21.根據(jù)權(quán)利要求16到20中任何一種方法，其特征在于以基于提取物的0.01％到5％，優(yōu)選0.2％到1％的濃度加入穩(wěn)定劑。22.根據(jù)權(quán)利要求16到21中任何一種方法，其特征在于提取溶劑的氧含量較低或顯著還原。23.根據(jù)權(quán)利要求16到22中任何一種方法，其特征在于用含水乙醇或含水甲醇或大約5到8個(gè)碳原子的烷烴或液態(tài)或超臨界二氧化碳作溶劑。24.根據(jù)權(quán)利要求16到23中任何一種方法，其特征在于干燥提取溶液后加入穩(wěn)定劑。25.根據(jù)權(quán)利要求16到23中任何一種方法，其特征在于在與常規(guī)藥物添加劑一起制備藥物組合物的階段加入穩(wěn)定劑。26.根據(jù)權(quán)利要求16到25中任何一種方法，其特征在于避開光和/或氧。27.權(quán)利要求15的藥物組合物治療抑郁和植物性神經(jīng)疾病的用途。全文摘要本發(fā)明描述了一種至少在12個(gè)月期間內(nèi)穩(wěn)定的含至少2%貫葉金絲桃素的貫葉連翹的提取物。文檔編號(hào)A61K36/00GK1198097SQ96197288公開日1998年11月4日申請(qǐng)日期1996年9月27日優(yōu)先權(quán)日1995年9月29日發(fā)明者C·艾德梅爾,E·格里斯雷,F·蘭,R·奧斯曼,K－H·斯圖木申請(qǐng)人:威廉施瓦布博士有限公司