專利名稱：用于人和獸醫(yī)的具有抗真菌活性的唑類化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于人和獸醫(yī)的抗真菌化合物，更具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及在人和動(dòng)物中用于治療和預(yù)防由真菌和酵母引起的感染的具有抗真菌活性的唑類化合物。
在文獻(xiàn)已知的抗真菌化合物中，包含一類重要的稱為唑類的衍生物，該唑類衍生物包括一些用于治療的化合物，如Fluconazole(Merck索引，4054，第645頁(yè))，Itraconazole(Merck索引，第六版，No.5131，第825頁(yè))和Ketoconazoie(Merck索引，第六版，No.5181，第835頁(yè))。
然而，就我們所知，這些化合物沒(méi)有任何一種對(duì)一些機(jī)會(huì)致病真菌菌株具有顯著的抗真菌活性，這些菌株對(duì)于免疫-脫阻抑患者造成感染(甚至是致命的)。
在作為用于人或獸醫(yī)抗真菌的所熟知的唑類衍生物中，描述了下文稱之為叔醇唑類的化合物，該物質(zhì)以在它們的式(I)中存在叔醇組分為特征，
其中Az表示三唑或咪唑基團(tuán)，X′優(yōu)選的是氯、氟或三氟甲基，R優(yōu)選的是氫、氯、氟或三氟甲基，R′和R″相同或不同并且是氫或烷基，Y是S、SO、SO2或O，以及A是烷基。
在這些叔醇唑類中，我們提及，例如，在歐洲專利申請(qǐng)No.54974(Sumitomo化學(xué)有限公司)，No.61835(皇家化學(xué)工業(yè)PLC)，No.107392(Plizer有限公司)，No.140154(Sumitomo化學(xué)有限公司)，No.178533(Sumitomo藥物有限公司)，No.435081(SS藥物有限公司)和No.473387(Sankvo有限公司)中描述的化合物。
對(duì)于某些這樣的化合物公開了顯著的抗真菌活性，盡管有一般而言是局部的和全身性的。然而，就我們所知，在開發(fā)過(guò)程中僅僅一種作為Genaconazole的化合物為人們所熟知，該化合物是歐洲專利申請(qǐng)No.78533中公開的(2R，3R)α-(2，4-二氟苯基)-α-[1-(甲基磺?；?乙基]-1H-1，2，4-三唑-1-乙醇。
近來(lái)在歐洲專利申請(qǐng)No.679647(Nihon Nohyaku有限公司)中已描述式(I)的叔醇唑類的高級(jí)同系物，該同系物具有對(duì)白假絲酵母(Candidaalbicans)的好的抗真菌活性，其以A是一個(gè)取代的或未取代的苯基或雜環(huán)為特征。
現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)式(II)的唑類衍生物的單一對(duì)映體
其中，R1是氯、氟、溴或三氟甲基；R2是氫、氯、氟、溴或三氟甲基；Z是CH或N；R3、R4和R5相同或不同并且是氫或C1-C4烷基，其附加條件是當(dāng)R3是氫時(shí)，R4與R5不同；X是O、S、SO或SO2；R6是包含至少兩個(gè)氟原子和可有可無(wú)的選自氯和溴的其它鹵素原子的C1-C5多氟烷基；該單一對(duì)映體對(duì)人和動(dòng)物的真菌病原體，特別地是對(duì)用于治療的抗真菌劑具有抗性的真菌菌株，以及對(duì)在免疫-脫阻抑的受試者中造成感染的機(jī)會(huì)致病真菌菌株具有明顯的寬譜的抗真菌活性，并且它們?cè)诰植亢腿矶季哂谢钚浴?br> 在外消旋混合物中，某些式(II)的化合物，尤其是那些X是O或S的化合物，包括在歐洲專利申請(qǐng)No.315946(Presidenza del Consiglio deiMinistri-Ufficio del Minittero per il Coordinamento delle Iniziative perla Ricerca Scientifica e Tecnologica)被報(bào)道在農(nóng)業(yè)上作為真菌病理學(xué)的免疫劑和有益生長(zhǎng)的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑是有用的。
因此，本發(fā)明的目的是式(II-A)的化合物和其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽
其中，R1是氯、氟、溴或三氟甲基；R2是氫、氯、氟、溴或三氟甲基；Z是CH或N；R3、R4和R5相同或不同并且是氫或C1-C4烷基，其附加條件是當(dāng)R3是氫時(shí)，R4與R5不同；X是O、S、SO或SO2；R6是包含至少兩個(gè)氟原子和可有可無(wú)的選自氯和溴的其它鹵素原子的C1-C5多氟烷基。
式(II-A)的附加條件是排除在歐洲專利申請(qǐng)No.272679中所要求的化合物。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是用作藥物的式(II-A)的化合物和其在藥學(xué)上可接受的鹽。
在式中，以星號(hào)標(biāo)記的碳原子具有絕對(duì)構(gòu)型。因而，根據(jù)Cahn，Ingold以及Prelog公約；該碳原子的構(gòu)型是R或S，這取決于取代基的優(yōu)先秩序。
當(dāng)R3和R4相互之間不同并且是非對(duì)映異構(gòu)體時(shí)，式(II-A)的化合物也可以包含第二個(gè)手性中心。本發(fā)明式(II-A)目的物的非對(duì)映異構(gòu)體是蘇型非對(duì)映異構(gòu)體。
式(II-A)的化合物具有強(qiáng)的寬譜抗真菌活性，特別是抗對(duì)Fluconazole和Itraconazole具有抗性的Candida spp和新型隱球酵母菌株，以及抗對(duì)Itraconazole具有抗性的Candida glabrata、克魯斯假絲酵母、Aspergillus spp和Fusarium spp以及前文提及的類似的菌株，抗在免疫-脫阻抑患者由真菌感染中起作用的病原體菌株，并且該化合物在人和動(dòng)物中對(duì)于治療和預(yù)防真菌和酵母感染是有用的。
對(duì)于R3、R4和R5，術(shù)語(yǔ)C1-C4烷基意思是指甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基和叔丁基，優(yōu)選的是甲基和乙基。術(shù)語(yǔ)至少包含二個(gè)氟原子的C1-C5多氟烷基優(yōu)選是指二氟甲基、三氟甲基、1，1，2-三氟-2-氯乙基、1，1-二氟乙基、2，2，2-三氟乙基、1，1，2-三氟乙基、1，1，2，2-四氟乙基、1，1，2，3，3，3-六氟丙基、2，2，3，3-四氟丙基和它們的異構(gòu)體，更優(yōu)選的是1，1，2，2-四氟乙基。
式(II-A)化合物的鹽是在藥學(xué)上可接受的有機(jī)酸和無(wú)機(jī)酸的鹽，所說(shuō)的酸如鹽酸、溴酸、碘酸、硝酸、磷酸、醋酸、草酸、蘋果酸、苯甲酸、苯磺酸、甲磺酸、4-甲基苯磺酸、延胡索酸、乳酸、酒石酸、檸檬酸和葡糖酸。
式(II-A)優(yōu)選的化合物是這樣一些化合物，其中R1是氯或氟，R2是氫、氯或氟，R3是甲基或乙基，R4和R5相同或不同并且是氫、甲基或乙基，Z是N以及R6是1，1，2，2-四氟乙基。
式(II-A)更優(yōu)選的化合物是這樣一些化合物，其中R1是氯或氟，R2是氫、氯或氟，R3是甲基或乙基，R4和R5相同或不同并且是氫、甲基或乙基，Z是N，R6是1，1，2，2-四氟乙基并且X是O或SO2。
下列是式(II-A)優(yōu)選化合物的特定的例子(2R，3S)1-(1H-1，2，4-三唑基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-乙基-4-(1，1，2，2-四氟乙氧基)-2-丁醇(2R，3S)1-(1H-1，2，4-三唑基)-2-(2，4-二氯苯基)-3-甲基-4-(1，1，2，2-四氟乙氧基)-2-丁醇
(2R，3R)1-(1H-1，2，4-三唑基)-2-(2，4-二氯苯基)-3-甲基-4-(1，1，2，2-四氟乙基硫代)-2-丁醇(2R，3R)1-(1H-1，2，4-三唑基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-甲基-4-(1，1，2，2-四氟乙基硫代)-2-丁醇(2R，3S)1-(1H-1，2，4-三唑基)-2-(4-氯苯基)-3-甲基-4-(1，1，2，2-四氟乙氧基)-2-丁醇(2R，3R)1-(1H-1，2，4-三唑基)-2-(4-氯苯基)-3-甲基-4-(1，1，2，2-四氟乙基硫代)-2-丁醇(2R)1-(1H-1，2，4-三唑基)-2-(2，4-二氟苯基)-3，3-二甲基-4-(1，1，2，2-四氟乙氧基)-2-丁醇(2R，3S)1-(1H-1，2，4-三唑基)-2-(4-氟苯基)-3-甲基-4-(1，1，2，2-四氟乙氧基)-2-丁醇(2R，3R)1-(1H-1，2，4-三唑基)-2-(4-氟苯基)-3-甲基-4-(1，1，2，2-四氟乙基硫代)-2-丁醇(2S)1-(1H-1，2，4-三唑基)-2-(4-氯苯基)-3，3-二甲基-4-(1，1，2，2-四氟乙氧基)-2-丁醇(2S)1-(1H-1，2，4-三唑基)-2-(4-氯苯基)-3，3-二甲基-4-(1，1，2，2-四氟乙基硫代)-2-丁醇(2S)1-(1H-1，2，4-三唑基)-2-(4-氟苯基)-3，3-二甲基-4-(1，1，2，2-四氟乙氧基)-2-丁醇(2S)1-(1H-1，2，4-三唑基)-2-(4-氟苯基)-3，3-二甲基-4-(1，1，2，2-四氟乙基硫代)-2-丁醇(2R，3R)1-(1H-1，2，4-三唑基)-2-(2，4-二氯苯基)-3-甲基-4-(1，1，2，2-四氟乙基磺?；?-2-丁醇。
根據(jù)在已經(jīng)引用的歐洲專利申請(qǐng)No.315946中描述的合成方案，從以光學(xué)活性形式的合適的中間體開始進(jìn)行式(II-A)化合物(其中X是O或SO2)的制備。
采用常規(guī)氧化技術(shù)，從式(II-A)對(duì)應(yīng)的化合物(其中X是S)中可以獲得式(II-A)的化合物(其中X是SO或SO2)。優(yōu)選的是將過(guò)氧化氫、低鹵化物或過(guò)酸類作為氧化劑，催化劑可有可無(wú)。優(yōu)選地，通過(guò)將下式的多氟鏈烯CF2＝C(X2)-X1其中X1和X2相同或不同并且是F、Cl、或CF3，或通過(guò)將下式的多氟化醇R7-CH2-OH，其中R7是包含至少兩個(gè)氟原子和可有可無(wú)的選自氯和溴的其它鹵素原子的C1-C4多氟烷基，與下式的光學(xué)活性中間體
其中R1、R2、R3、R4、R5和Z如上文所定義的，X是O或S或者它的如酯一類的衍生物(例如甲磺酸酯，甲苯磺酸酯或三氟甲磺酸酯)反應(yīng)來(lái)進(jìn)行式(II-A)化合物(其中X是O或S)的制備。
采用已知的方法可以制備式(V)的光學(xué)活性中間體。
例如，通過(guò)分離相應(yīng)的外消旋混合物(如在上文引用的歐洲專利申請(qǐng)No.315946中或在US專利No.5134152中描述的)可以制備式(V)的化合物。
另外，通過(guò)已知方法，從式(V)對(duì)應(yīng)的化合物(其中X是O)可以制備式(V)的化合物(其中X是S)。
此外，通過(guò)立體有擇性地酰化和隨后水解反應(yīng)的酶促分離發(fā)現(xiàn)對(duì)于制備式(V)的化合物(其中X是O并且R3和R4都是甲基)來(lái)說(shuō)特別有用。
雖然通過(guò)立體有擇酰化的酶促分離來(lái)制備式(V)的化合物的較低相同性的叔醇為人們所熟知(參見(jiàn)，例如，國(guó)際專利申請(qǐng)WO 94/24305-限于Zeneca)，但令人驚奇的是它也可以應(yīng)用來(lái)制備式(V)的化合物，其中X是O并且R3和R4都是甲基。
事實(shí)上，不但這些化合物在酰化的與不對(duì)稱的碳原子之間有兩個(gè)碳原子，而且這些碳原子中的一個(gè)是雙取代的，具有顯著的空間位阻。
因此，本發(fā)明的另一個(gè)目的是酶促分離式(V)的化合物的方法，其中X是O并且R3和R4都是甲基，該方法包括將它們立體有擇性地?；碗S后水解。
另外，通過(guò)還原式(VI)的對(duì)應(yīng)的酸(其中R1、R2、R3、R4和Z如上文所定義的)可以制備式(V)的化合物(其中X是O并且R5是氫原子)。
式(VI)的化合物是已知的或根據(jù)已知方法可以容易地制備(Bartroli J.等，有機(jī)化學(xué)雜志1995，60，3000-3012)。
根據(jù)常規(guī)技術(shù)，可以進(jìn)行式(II-A)的化合物的鹽的制備，例如，通過(guò)在溶液中混合等摩爾量的式(II-A)的化合物組分和所選擇的酸，并且通過(guò)沉淀和過(guò)濾或蒸發(fā)溶劑來(lái)分離鹽。
式(II-A)的化合物和它們的鹽在治療和預(yù)防人和動(dòng)物的真菌和酵母感染中是有用的抗真菌化合物。
實(shí)際上，本發(fā)明的式(II-A)目的化合物具有對(duì)酵母、絲狀真菌、皮膚真菌以及雙晶真菌的抗真菌活性。
在體外通過(guò)IC50和MIC(最小抑制濃度)已估計(jì)出一些菌株的抗真菌活性，所說(shuō)的真菌例如，白假絲酵母，新型隱球酵母，須發(fā)癬菌，煙曲霉，近平滑假絲酵母，葡萄牙假絲酵母，乳酒假絲酵母，Craldidatropicalis，Candida krursei，Candida glabrata，黑曲霉和Fusariumspp。
強(qiáng)調(diào)本發(fā)明式(II-A)目的化合物已顯示出對(duì)涉及到的所有Candidaspp和新型隱球酵母菌株(包括對(duì)Fluconazole，Itraconazole和Genaconazole具有抗性的菌株)有效，這一點(diǎn)是重要的。
一種特別顯著的抗真菌活性也由抗對(duì)Itraconazole和Genaconazole有抗性的Candida glabrata和Fusarium spp菌株，以及抗對(duì)Fluconazole和Genaconazole有抗性的克魯斯假絲酵母和煙曲霉菌株所揭示，它們都是在免疫-脫阻抑受治療者中的感染起使用的病原體。
通過(guò)與相應(yīng)的對(duì)映體比較也已估計(jì)出本發(fā)明式(II-A)目的化合物的抗真菌活性。
在某些情況下，這些對(duì)映體的活性與參照化合物的活性是可以比較的，然而，它總體上比本發(fā)明式(II-A)目的化合物顯著地較低。
在小鼠中誘導(dǎo)的抗對(duì)Fluconazole和Itraconazole敏感的白假絲酵母菌株的假絲酵母模型中，通過(guò)腹膜內(nèi)注射和口頭施用都已估計(jì)出體內(nèi)抗真菌活性。
在體內(nèi)試驗(yàn)中已確定出式(II-A)的化合物的50％保護(hù)性劑量(PD50)，顯示出至少與參照化合物的50％保護(hù)性劑量(PD50)是可以比較的。
因此，本發(fā)明式(II-A)目的化合物對(duì)寬譜深度真菌病是有活性的，特別是在免疫-脫阻抑受治療者中對(duì)感染起作用的機(jī)會(huì)致病菌，它們可以是局部、口頭以及腸胃外施用的，并且具有好的治療指數(shù)。
于是，式(II-A)的化合物在人或獸醫(yī)中治療和預(yù)防由真菌和酵母引起的全身感染和粘膜感染是有用的。
正如剛才所強(qiáng)調(diào)的，考慮到將歐洲專利申請(qǐng)No.315946所公開的化合物報(bào)道為真菌病理學(xué)的免疫劑和有用生長(zhǎng)的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑(它們的活性都將限于農(nóng)業(yè)運(yùn)用)，因而式(II-A)的化合物在藥理學(xué)上的有效活性(也顯示抗對(duì)用于治療的抗真菌劑具有抗性的菌株以及抗近來(lái)在免疫-脫阻抑受治療者中分離的引起感染的菌株)是特別令人驚奇的。
式(II-A)的化合物的藥理學(xué)活性仍然是令人更加驚奇的，考慮到這樣的化合物，當(dāng)顯示與文獻(xiàn)描述的唑類叔醇具有某些共同結(jié)構(gòu)組分時(shí)，同時(shí)以在攜帶羥基的碳原子與氧原子或硫原子之間存在兩個(gè)碳原子的鏈以及在包含醚或硫的組分中的存在簡(jiǎn)單的多氟化烷基為特征。
就我們所知，在為人和動(dòng)物所利用的具有抗真菌活性的唑類叔醇類化合物中還從來(lái)沒(méi)有文獻(xiàn)描述過(guò)這些結(jié)構(gòu)特征的組合。
對(duì)于人和獸醫(yī)的運(yùn)用來(lái)說(shuō)，鑒于施用途徑，式(II-A)的化合物可以與所選的合適載體混合進(jìn)行施用。
因此，本發(fā)明進(jìn)一步的目的包括包含一種治療有效量的式(II-A)的化合物的藥物組合物，該化合物與藥學(xué)上可接受的載體混合。
例如，式(II-A)的化合物或其鹽可以以藥片、膠囊、溶液或懸浮液進(jìn)行施用。
至于腸胃外施用，例如經(jīng)過(guò)靜脈內(nèi)，肌內(nèi)或皮下途徑，式(II-A)的化合物或其鹽可以是無(wú)菌水溶液形式。
另外，式(II-A)的化合物或其鹽可以以栓劑或陰道藥栓進(jìn)行施用。
至于局部施用，優(yōu)選地式(II-A)的化合物或其鹽可以按配方制造成乳劑或藥粉。
至于口服或腸胃外施用，式(II-A)的化合物的日劑量一般范圍在0.1至50mg/kg之間，優(yōu)選的是在1至20mg/kg之間，它將細(xì)分為一個(gè)或更多個(gè)間隔劑量。
為了更好地說(shuō)明本發(fā)明，提供下列實(shí)施例。實(shí)施例1(±)3-(2，4-二氟苯基)-2，2-二甲基-4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-1，3-丁二醇的酶促動(dòng)力學(xué)分離a)異構(gòu)體(+)將酶(3g；來(lái)源于Candida cilindracea的VII型脂肪酶-Sigma)在強(qiáng)有力的攪拌下在30℃時(shí)添加到溶解在氯仿(60ml)和乙烯乙酸酯(l.9ml，20毫摩爾)的(±)3-(2，4-二氟苯基)-2，2-二甲基-4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-1，3-丁二醇(2.97g；10毫摩爾)溶液中。
在72小時(shí)后過(guò)濾懸浮液，并且進(jìn)一步添加酶(3g)，在攪拌下在30℃時(shí)進(jìn)一步保持24小時(shí)。
將懸浮液過(guò)濾，用氯仿(20ml)洗滌固體，并且在減壓下蒸發(fā)有機(jī)相。
在硅膠(洗脫液乙酸乙酯∶己烷＝60∶40)上將殘余物進(jìn)行層析分析，得到(-)3-(2，4-二氟苯基)-3-羥基-2，2-二甲基-4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁基乙酸酯(1.63g；e.e.88％手性HPLC-柱CHIRACEL-OD，洗脫液己烷∶異丙醇＝70∶30)和(+)3-(2，4-二氟苯基)-2，2-二甲基-4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-1，3-丁二醇(1.3g；e.e.79％手性HPLC)。
于是，將獲得的異構(gòu)體(+)(1.3g)在相同的條件下利用脂肪酶再處理17小時(shí)。
在經(jīng)過(guò)相同處理和通過(guò)快速層析法分離之后，獲得白色固體狀的(+)3-(2，4-二氟苯基)-2，2-二甲基-4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-1，3-丁二醇(0.92g；產(chǎn)率62％)。D20＝+43.4°(c＝1％，甲醇)手性HPLC＝e.e.95％m.p.116.5-117.5℃1H-核磁共振與外消旋混合物相同。
b)異構(gòu)體(-)將上面步驟(a)獲得的(-)3-(2，4-二氟苯基)-3-羥基-2，2-二甲基-4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁基乙酸酯(1.63g)溶解在0.05M pH7磷酸鹽緩沖液(400ml)和丙酮(50ml)中。
將酶(1.6g；來(lái)源于Candida cilindracea的VII型脂肪酶)添加到30℃時(shí)不停攪拌的溶液中，并且隨后添加0.1M的氫氧化鈉以保持pH。
在5小時(shí)后用濃縮鹽酸將pH調(diào)到4，并且用乙酸乙酯(3×100ml)進(jìn)行抽提。
將有機(jī)相在硫酸鈉上進(jìn)行脫水，并且在在減壓下蒸發(fā)從而獲得油狀殘余物。在硅膠(洗脫液乙酸乙酯∶己烷＝60∶40)上進(jìn)行快速層析后，分離出白色固體狀的(-)3-(2，4-二氟苯基)-2，2-二甲基-4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-1，3-丁二醇(1.20g，產(chǎn)率80％)。D20＝-46.2°(c＝1％，甲醇)手性HPLC＝e.e.98.4％m.p.117-118℃1H-核磁共振與外消旋混合物相同。實(shí)施例2(-)(2S，3R)-3-(2，4-二氟苯基)-2-甲基-4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-1，3-丁二醇的制備將硼三氟醚合物(0.365ml；2.97毫摩爾)一滴一滴地添加到溶解在無(wú)水四氫呋喃(6.5ml)中的(2R，3R)-3-(2，4-二氟苯基)-3-羥基-2-甲基-4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-1，3-丁酸(0.88g；2.97毫摩爾)溶液中，并且將混合物回流30分鐘。
在55℃下，將10M溶解在四氫呋喃(0.356ml；3.56毫摩爾)中的甲硼烷二甲基硫化物溶液一滴一滴地添加到形成的溶液中，并且保持回流6小時(shí)。
冷卻到4℃后，將水∶四氫呋喃＝1∶1的溶液(3ml)添加5M的小蘇打(8ml)中，并且將混合物保持回流12小時(shí)。
將四氫呋喃在對(duì)減下蒸發(fā)，用氯仿(5×10ml)抽提混合物，將有機(jī)相脫水并且進(jìn)行蒸發(fā)得到固體殘余物，從苯∶已烷＝1∶1(20ml)中結(jié)晶出來(lái)，從而獲得(-)(2S，3R)-3-(2，4-二氟苯基)-2-甲基-4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-1，3-丁醇(0.76g；產(chǎn)率90％)。
m.p.93-95℃[α]D20＝-59.6°(c＝1％，甲醇)1H-核磁共振(CDCl3)7.93(s，1H)；7.74(s，1H)；7.48-7.33(m，1H)；6.83-6.68(m，2H)；5.40(s-寬峰，1H)；4.97(d，1H)；4.78(d，1H)；4.00(dd，1H)；3.80(dd，1H)；3.10(s-寬峰，1H)；2.45-2.25(m，1H)；0.85(d，3H)。
同樣的操作制備下列化合物。
(-)(2S，3R)-3-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-1，3-丁二醇產(chǎn)率87％m.p.108-110℃[α]D20＝-90.7°(c＝1％，甲醇)(+)(2R，3S)-3-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-1，3-丁二醇產(chǎn)率91％m.p.110-111℃[α]D20＝+87.0°(c＝1％，甲醇)(-)(2S，3R))-2-乙基-3-(2，4-二氟苯基-4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-1，3-丁二醇產(chǎn)率90％m.p.75-77℃[α]D20＝-41.1°(c＝1％，甲醇)手性HPLC(己烷∶異丙醇＝70∶30)＝e.e.92％1H-核磁共振(CDCl3)7.89和7.71(2s，2H，2CH-Triaz.)；7.40-6.62(m，3H，Ar)；5.30(s-寬峰，1H，OH)；4.98-4.70(m，2H，CH2-Triaz.)；4.12-3.87(m，2H，CH2-OH)；2.80(s-寬峰，1H，CH2-OH)；2.05-1.93(m，2H，*CH-CH2-CH3)；1.60-0.98(m，2H，CH-*CH2-CH3)；0.81(t，3H，CH-CH2-*CH3)。實(shí)施例3(-)2-(2，4-二氟苯基)-4-(1，1，2，2-四氟乙氧基)-3，3-二甲基-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-丁醇(化合物1A)的制備在-5℃時(shí)攪拌下將氫氧化鉀(533mg；9.5毫摩爾)以粉狀添加到溶解在對(duì)甲苯(60ml)中的如實(shí)施例1中描述的方法制備的(-)3-(2，4-二氟苯基)--2，2-二甲基-4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-1，3-丁二醇(5g；16.8毫摩爾)和二甲基亞砜(8ml)溶液中。
用四氟乙烯替代反應(yīng)氛圍，并且在攪拌下將混合物在5℃下保持90分鐘。
在添加水(120ml)后，將有機(jī)相用5％的鹽酸(80ml)洗滌，并且在攪拌下利用無(wú)水碳酸氫鈉(6.5g)處理30分鐘。
將液相過(guò)濾并且將溶劑在減壓下蒸發(fā)以便獲得油狀殘余物，將該油狀殘余物通過(guò)快速層析法(洗脫液己烷∶乙酸乙酯＝6∶4)進(jìn)行純化，得到白色固體狀的化合物1A(5.2g；產(chǎn)率79％)。D20＝-48.5°(c＝1％，甲醇)手性HPLC＝e.e.≥99.8％m.p.46-47℃1H-核磁共振(CDCl3)8.01(d，1H，CH-Tetr.)；7.69(s，1H，CH-Cat.)；7.63-6.56(m，3H，Ar)；5.70(tt，1H，JHF＝53.4Hz，CHF2)；5.33(s-寬峰，1H，OH)；5.29-4.41(m，2H，CH2-Triaz.)；系統(tǒng)ABVA＝4.19，VB＝3.75，JAB＝9.8Hz，CH2-O；1.06(d，3H，JHF＝2.4Hz，CH3)；0.98(s，3H，CH3)。
同樣的操作制備下列化合物。
(+)2-(2，4-二氟苯基)-4-(1，1，2，2-四氟乙氧基)-3，3-二甲基-1-2，4-三唑-1-基)-2-丁醇(化合物1B)產(chǎn)率74％[α]D20＝+45.9°(c＝1％，甲醇)手性HPLC(己烷∶異丙醇＝85∶15)＝e.e.99.2％m.p.47.1-49.1℃1H-核磁共振與化合物1A相同(-)(2R，3S)-2-(2，4-二氟苯基)-4-(1，1，2，2-四氟乙氧基)-3-甲基-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-丁醇(化合物2A)無(wú)色油-產(chǎn)率72％[α]D20＝-54.7°(c＝1％，甲醇)手性HPLC(己烷∶異丙醇＝80∶20)＝e.e.99.％硝酸鹽(從異丙醚結(jié)晶)m.p.147.5-148.5℃1H-核磁共振(CDCl3)9.77和8.09(2s，2H，Triaz.)；7.39-6.69(m，5H，OH e HNO3)；5.76(tt，1H，JHF＝53.1Hz，CHF2)；系統(tǒng)ABVa＝5.12，Vb＝4.95，Jab＝14.4Hz，*CH2-Triaz.；系統(tǒng)ABX的部分ABVa＝4.37，Vb＝3.96，Jab＝10.5Hz，Jax＝＝7.4Hz，Jbx＝4.8Hz；CH2-O；2.72-2.55(m，3H，*CH3-CH)；0.86-0.81(s，3H，*CH3-CH)。
(-)(2R，3S)-2-(2，4-二氯苯基)-4-(1，1，2，2-四氟乙氧基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-丁醇(化合物3A)無(wú)色油-產(chǎn)率73％[α]D20＝-77.7°(c＝1％，甲醇)手性HPLC(己烷∶異丙醇＝90∶10)＝e.e.≥99.8％硝酸鹽(從異丙醚結(jié)晶)m.p.120.3-121.3℃1H-核磁共振(CDC13)9.74和8.07(2s，2H，Triaz.)；7.44(d，1H，C-CH-*CH-CH-C-Cl)；7.35(d，1H，JHH＝2.2Hz，C-Cl-CH-C-Cl)；7.08(dd，1H，C-CH-*CH-C-Cl)；5.82(tt，1H，JHF＝53.2Hz，CHF2)；系統(tǒng)ABVa＝5.67，Vb＝4.89，Jab＝14.3Hz，*CH2-Triaz.；系統(tǒng)ABX的部分ABVa＝4.44，Vb＝4.09，Jab＝10.8Hz，Jax＝8.4Hz，Jbx＝4Hz；CH2-O；3.33-3.16(m，1H，*CH-CH3)；0.72(d，3H，JHH＝7Hz，*CH3-CH)。
(+)(2S，3R)-2-(2，4-二氯苯基)-4-(1，1，2，2-四氟乙氧基)-3-甲基-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-丁醇(化合物3B)無(wú)色油-產(chǎn)率63％[α]D20＝+76.5°(c＝1％，甲醇)手性HPLC(己烷∶異丙醇＝90∶10)＝e.e.99.8％硝酸鹽(從異丙醚結(jié)晶)m.p.120.9-121.9℃1H-核磁共振(CDCl3)9.67和8.05(2s，2H，Triaz.)；8.21(s-寬峰，2H，OH e HNO3)；7.44(d，1H，JHH＝8.6Hz，C-*CH-CH-C-Cl)；7.35(d，1H，JHH＝2.2Hz，C-Cl-CH-C-Cl)；7.09(dd，1H，C-CH-*CH-C-Cl)；5.82(tt，1H，JHF＝52.8Hz，CHF2)；系統(tǒng)ABVa＝5.67，Vb＝4.89，Jab＝14.3Hz，*CH2-Triaz.；系統(tǒng)ABX的部分ABVa＝4.44，Vb＝4.09，Jab＝10.8Hz，Jax＝8.4Hz，Jbx＝4Hz；CH2-O；3.32-3.16(m，1H，*CH-CH3)；0.71(d，3H，JHH＝7Hz，*CH3-CH)。
(-)(2R，3S)-3-etil-2-(2，4-二氟苯基)-4-(1，1，2，2-四氟乙氧基)-3-甲基-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-丁醇(化合物4A)產(chǎn)率87％[α]D20＝-56.1°(c＝1％，甲醇)手性HPLC(己烷∶異丙醇＝90∶10)＝e.e.99％硝酸鹽(從異丙醚/乙腈結(jié)晶)m.p.89-91℃1H-核磁共振(CDCl3)9.70(s，1H，CH-Triaz.)；8.05(s，1H，CH-Triaz.)；7.37-6.67(m，3H，Ar)；6.77(s-寬峰，H+)；5.80(tt，1H，JHF＝52.6Hz，CHF2)；系統(tǒng)ABVa＝5.11，Vb＝4.87，Jab＝14.2Hz，*CH2-Triaz.；系統(tǒng)ABX的部分ABVa＝4.42，Vb＝4.21，Jab＝11.1Hz，Jax＝7.7Hz，Jbx＝2.6Hz；CH2-O；2.41-2.30(m，1H，*CH-CH2)；1.32-1.18(m，2H，CH-*CH2)；0.83(d，3H，JHH＝7.1Hz，CH3)。實(shí)施例4(-)(2R，3S)-2-(2，4-二氯苯基)-4-(1，1，2，2-四氟乙氧基)-3-甲基-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-丁醇(化合物3A)的制備可供選擇的實(shí)施例3的純化方法，在溫度30與35℃之間，將為粗制品的標(biāo)題化合物(86.2g)溶解在173ml的乙醇中，然后過(guò)濾獲得一種完全清澈的溶液，在90分鐘后，20℃下，將該溶液滴加到水(260ml)和乙醇(87ml)的混合液中。
將混合液加熱至35℃，在攪拌下保持90分鐘，冷卻至2℃，并且再將混合物攪拌60分鐘。
過(guò)濾不溶性固體，用乙醇/水為1∶1的混合物進(jìn)行洗滌，并且在真空下于50℃烘箱內(nèi)進(jìn)行干燥直到恒重為止，然后獲得純度大于99％的(-)(2R，3S)-2-(2，4-二氯苯基)-4-(1，1，2，2-四氟乙氧基)-3-甲基-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-丁醇(化合物3A)。D22＝-83.6°(c＝1％，甲醇)手性HPLC(己烷∶異丙醇＝90∶10)＝e.e.99.5％m.p.79-80℃1H-核磁共振(CDCl3)7.80和8.05(2s，2H，Triaz.)；7.42(d，1H，JHH＝8.6Hz，C-*CH-CH-C-Cl)；7.27(d，1H，JHH＝2.1Hz，C-Cl-CH-C-Cl)；7.05(dd，1H，C-CH-*CH-C-Cl)；5.75(tt，1H，JHF＝53.4Hz，CHF2)；系統(tǒng)AB＝VA＝5.48，VB＝4.54，JAB＝14.4Hz，*CH2-Triaz.)5.09(寬信號(hào)，1H，OH)；4.54-3.98(m，2H，CH2-O)；3.14-2.97(m，1H，*CH2-CH3)；0.67(d，3H，JHH＝7.1Hz，CH3-CH)。實(shí)施例53-(2，4-二氯苯基)-3-羥基-2-甲基-4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)甲磺酸丁基酯的制備在氮?dú)庵校?℃下首先將三乙胺(1.94ml，13.9毫摩爾)，然后將甲磺?；然?0.735ml；9.46毫摩爾)添加到如實(shí)施例2中描述的方法制備的溶解在二氯甲烷(90ml)中的(2R，3S)-3-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-1，3-丁二醇(2.95g；9.31毫摩爾)溶液中。
當(dāng)反應(yīng)進(jìn)行20分鐘時(shí)將溫度保持在0℃，然后將水(60ml)注入反應(yīng)混合物中。
分離各相，并且將水相用二氯甲烷進(jìn)一步抽提兩次。用5％的碳酸氫鈉水溶液洗滌收集的有機(jī)相，然后用飽和的氯化鈉水溶液洗滌，并且在硫酸鈉中進(jìn)行脫水。
蒸發(fā)溶劑得到3.64g(100％)白色固體狀的3-(2，4-二氯苯基)-3-羥基-2-甲基-4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)甲磺酸丁基酯，將該物質(zhì)用于下面的步驟。
1H-核磁共振(CDCl3)7.84和7.79(2s，2H，CH-Triaz.)；7.50-7.00(m，3H，H-苯基)；5.56和4.56(2d，2H，CH2-Triaz.)；4.77和4.28(2dd，2H，CH2-OMs)；3.20-3.10(m，1H，CH)；3.10(s，3H，CH3mesylate)；0.70(d，3H，CH3)。實(shí)施例6硫代乙酸S-[3-(2，4-二氯苯基)-3-羥基-2-甲基-4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁基]酯的制備將如實(shí)施例5中描述的方法制備的3-(2，4-二氯苯基)-3-羥基-2-甲基-4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)甲磺酸丁基酯(9.3毫摩爾)溶解到乙醇(95ml)中，并且添加硫代乙酸鉀(2.12g)。將混合物回流2小時(shí)，然后在冰中進(jìn)行冷卻，過(guò)濾形成的沉淀，并且用冰二氯甲烷進(jìn)行洗滌。
在減壓下濃縮濾液，用水(60ml)吸收，并且用二氯甲烷抽提多次。收集有機(jī)相，并且在硫酸鈉上脫水，然后將得到的3.5g微紅粗制品在硅膠(洗脫液乙酸乙酯∶己烷＝1∶1)上通過(guò)快速層析法進(jìn)行純化，于是獲得1.72g(49％)的硫代乙酸S-[3-(2，4-二氯苯基)-3-羥基-2-甲基-4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁基]酯.
1H-核磁共振(CDCl3)7.85和7.76(2s，2H，CH-Triaz.)；7.50-7.00(m，3H，H-苯基)；5.62和4.75(2d，2H，CH2-Triaz.)；3.60-3.45和2.80-2.65(2m，2H，CH2-SCOCH3)；2.75(m，1H，CH)；2.39(s，3H，CH3硫代乙酸)；0.70(d，3H，CH3)。實(shí)施例7(2R，3R)-3-(2，4-二氯苯基)-3-羥基-2-甲基-4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-1-丁醇的制備在氮?dú)庵性谑覝叵聦⑷芙庠诩状?40ml)中的氫氧化鉀溶液(0.266g；4，74毫摩爾)滴進(jìn)如實(shí)施例6中描述的方法制備的溶解在甲醇(40ml)中的硫代乙酸S-[3-(2，4-二氯苯基)-3-羥基-2-甲基-4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁基]酯(1.72g；4.6毫摩爾)溶液中。
反應(yīng)10分鐘后，將反應(yīng)用水(20ml)稀釋的5％的HCl(4ml)終止，將反應(yīng)混合物在減壓下濃縮，然后進(jìn)一步用水進(jìn)行稀釋，并且用二氯甲烷抽提多次。將收集的有機(jī)相進(jìn)行脫水和蒸發(fā)得到產(chǎn)率為1.6g的粗制品，通過(guò)硅膠快速層析法(洗脫液乙酸乙酯∶己烷＝1∶1)純化該粗制品。于是獲得1.2g(80％)輕油狀的(2R，3R)-3-(2，4-二氯苯基)-3-羥基-2-甲基-4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-1-丁醇。
1H-核磁共振(CDC13)7.85和7.79(2s，2H，CH-Triaz.)；7.50-7.00(m，3H，H-苯基)；5.55和4.60(2d，2H，CH2-Triaz.)；3.10-2.90和2.80-2.60(2m，2H，CH2-SH)；2.75(m，1H，CH)；1.58(t，1H，SH)；0.78(d，3H，CH3)。實(shí)施例8(-)(2R，3R)-2-(2，4-二氯苯基)-3-甲基-4-(1，1，2，2-四氟乙基硫代)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-丁醇(化合物5)的制備從如實(shí)施例7描述的方法制備的(2R，3R)-3-(2，4-二氯苯基)-3-羥基-2-甲基-4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-1-丁醇(1.85g；5.57毫摩爾)出發(fā)，采用實(shí)施例3的方法，得到粗制品，通過(guò)快速層析法(洗脫液石油醚∶乙酸乙酯6∶4)將該粗制品進(jìn)行純化，并且得到2.15g白色固體狀的(-)(2R，3R)-2-(2，4-二氯苯基)-3-甲基-4-(1，1，2，2-四氟乙基硫代)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-丁醇(化合物5)。D22＝-105.7°(c＝1％，甲醇)手性HPLC(己烷∶異丙醇＝90∶10)＝e.e.99.78％m.p.61-63℃1H-核磁共振(CDCl3)7.84(s，1H，CH-Triaz.)；7.75(s，1H，CH-Triaz.)；7.43(d，1H，JHH＝8.6Hz，*CH-CH-CCl)；7.265(d，1H，JHH＝2Hz，Cl-C-CH-C-Cl)；7.08(dd，1H，CH-CH-*CCl)；5.83(tt，1H，JHF＝53.8Hz，CHF2)；系統(tǒng)AB＝Va＝5.50，Vb＝4.57，JAB＝14.0Hz，CH2-Triaz.)；5.06(寬信號(hào)，1H，OH)；3.47-3.35(m，1H，*CH-CH3)；3.07-2.90(m，2HCH2-S)；0.77(d，3H，JHH＝6.3Hz，*CH3-CH)。實(shí)施例9(-)(2R，3R)-2-(2，4-二氯苯基)-3-甲基-4-(1，1，2，2-四氟乙基亞磺?；?-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-丁醇(化合物6)的制備將有催化量的Na2WO4·2H2O存在下的40％過(guò)氧化氫(0.073ml；0.89毫摩爾)添加到如實(shí)施例8描述的方法制備的溶解在甲醇(2.5ml)中的(-)(2R，3R)-2-(2，4-二氯苯基)-3-甲基-4-(1，1，2，2-四氟乙基硫代)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-丁醇(0.48g；1.11毫摩爾)的溶液中，在室溫下攪拌放置3天，然后將該反應(yīng)混合物用焦硫酸鈉(Na2S2O5)溶液處理，用10％氫氧化鈉進(jìn)行堿化。
將混合物用醚抽提，在真空下干燥并且濃縮，得到油狀物，產(chǎn)率為0.41g，將這種油狀物通過(guò)快速層析法進(jìn)行純化(洗脫液乙酸乙酯∶石油醚4∶6)。
將形成的油狀物(0.35)溶解在乙醇中，并且用70％硝酸處理。
在真空下濃縮該混合物，用熱異丙醚粉碎并且得到產(chǎn)率為0.32g白色固體狀的(-)(2R，3R)-2-(2，4-二氯苯基)-3-甲基-4-(1，1，2，2-四氟乙基亞磺?；?-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-丁醇(化合物6)。
m.p.153-155℃1H-核磁共振(CDCl3)9.56和9.51(2s，1H，CH-Triaz.)；8.13和8.10(2s，1H，CH-Triaz.)；7.58(s-寬峰，H+)；7.50-7.08(m，3H，Ar)；6.57-5.98(m，1H，CHF2)；5.66-4.87(m，2H，CH2-Triaz.)；3.57-2.79(m，3H，*CH2-CH3)；3.07-2.90(m，2H，CH2-S)；0.77(d，3H，JHH＝6.3Hz，*CH3-CH)。實(shí)施例10(-)(2R，3R)-2-(2，4-二氯苯基)-3-甲基-4-(1，1，2，2-四氟乙基磺?；?-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-丁醇(化合物7)的制備將40％過(guò)氧化氫(0.9ml；10.35毫摩爾)添加到如實(shí)施例8描述的方法制備的溶解在甲醇(2.5ml)中有催化量的Na2WO4·2H2O和濃HCl(0.19ml；2.3毫摩爾)存在下的(-)(2R，3R)-2-(2，4-二氯苯基)-3-甲基-4-(1，1，2，2-四氟乙基硫代)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-丁醇(0.5g；1.15毫摩爾)的溶液中，在60℃下加熱14小時(shí)，然后放在室溫下過(guò)夜。
將該反應(yīng)混合物用焦硫酸鈉(Na2S2O5)溶液處理，用10％氫氧化鈉進(jìn)行堿化，用醚提取，在真空下干燥并且濃縮得到油狀物，產(chǎn)率為0.49g，將這種油狀物通過(guò)快速層析法進(jìn)行純化(洗脫液乙酸乙酯∶石油醚1∶1)。
將形成的油狀物(0.45g)溶解在乙醇中，并且用70％硝酸處理。
在真空下濃縮該混合物，得到0.42g白色固體(-)(2R，3R)-2-(2，4-二氯苯基)-3-甲基-4-(1，1，2，2-四氟乙基磺酰基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-丁醇(化合物7)。D22＝-63.4°(c＝1％，甲醇)手性HPLC(己烷∶異丙醇＝90∶10)＝e.e.99.7％m.p.192-194℃1H-核磁共振(CDCl3)8.52(s，1H，CH-Triaz.)；7.84(S，1H，CH-Triaz.)；7.58-7.25(m，3H，Ar)；7.19(dt，1H，JHF＝51Hz，CHF2)；6.51-6.30(寬信號(hào)H+)；5.10-4.74(m，2H，*CH2-Triaz.-系統(tǒng))；4.10-3.39(m，1H*CH2-*CH3)；0.84(2d，3H，JHH＝6.1Hz，CH3)。實(shí)施例11體外抗真菌活性A)以幾何級(jí)數(shù)通過(guò)梯度肉湯稀釋液的常量法(M.R.McGinnis和M.G.Rinaldi，藥學(xué)實(shí)驗(yàn)室的抗生素″抗真菌藥物在生物液體中活性機(jī)制，藥物抗性，敏感性試驗(yàn)和活性分析″，Ed.V.Lorian，Baltimore 1991)已經(jīng)估計(jì)出抑制真菌生長(zhǎng)的活性。
對(duì)酵母菌和霉菌分別利用酵母氮基本肉湯(YNB)和沙氏葡糖肉湯(SDB)作為生長(zhǎng)培養(yǎng)基。將在SDB中獲得的結(jié)果(在28℃下溫育7天后)表示為真菌生長(zhǎng)的最小抑制濃度(MIC)，同樣將在YNB中獲得的結(jié)果(在35℃下溫育48小時(shí)后)表示為在50％酵母生長(zhǎng)的抑制濃度(IC50)。
將Fluconazole作為參照化合物。
在下表中，列出了一些式(II-A)的化合物對(duì)白假絲酵母，Aspergillus fumigahts，Cryptococcus neofornlans和須發(fā)癬菌的體外抗真菌活性的典型數(shù)據(jù)。表1a化合物1A，3A及它們各自的對(duì)映體1B，3B和參照化合物Fluconazole對(duì)白假絲酵母，Cryptococcus neofornlans，Aspergillusfumigahts和須發(fā)癬菌的體外抗真菌活性。
>(*)將化合物作為硝酸鹽檢驗(yàn)。
在表中列出的數(shù)據(jù)顯示本發(fā)明的目的化合物具有比參照化合物明顯更高的抗真菌活性。
B)利用在瓊脂中稀釋的方法估計(jì)出抑制酵母和絲狀真菌生長(zhǎng)的活性。通過(guò)摻入生長(zhǎng)培養(yǎng)基提高待測(cè)化合物的濃度，然后得到以2為基礎(chǔ)從64到0.00085μg/ml的梯度濃度來(lái)測(cè)量50％的最小抑制濃度(MIC50)。
使用在pH＝7緩沖的酪胨瓊脂(酪胨9g，葡萄糖20g，檸檬酸鈉10g，發(fā)酵劑抽提物5g，瓊脂18g，磷酸二氫鉀0.54g，磷酸二氫鈉3.34g，蒸餾水1,000ml)作為生長(zhǎng)培養(yǎng)基。
為了估計(jì)對(duì)酵母菌的活性，將包含梯度濃度化合物的待測(cè)生長(zhǎng)培養(yǎng)基用從在沙氏葡糖瓊脂上培養(yǎng)24-48小時(shí)所獲得的1μl 5×105個(gè)芽生孢子/ml的懸浮液進(jìn)行溫育。在32℃下繼續(xù)溫育溫育過(guò)的生長(zhǎng)培養(yǎng)基，并且在24，48小時(shí)后進(jìn)行測(cè)量，對(duì)于緩慢生長(zhǎng)的酵母(如新型隱球酵母)在72小時(shí)后進(jìn)行測(cè)量。
將Fluconazole和Itraconazole作為參照化合物。
在下表中，列出了對(duì)白假絲酵母，熱帶假絲酵母，克魯斯假絲酵母，Candida glabrata，近平滑假絲酵母，Candida lutitanice，乳酒假絲酵母，Clyptococcus neoformans，Trichosporon spp，Blastoschizomycescapitatus，Geotrichum spp，Prototecha wicherhamii的體外抗真菌活性的數(shù)據(jù)。表1b
將化合物3A和2A以及參照化合物Fluconazole和Itraconazole對(duì)所列出的酵母菌的體外抗真菌活性表示為MIC50。
為了估計(jì)對(duì)真菌的活性，將包含梯度濃度化合物的待測(cè)生長(zhǎng)培養(yǎng)基與從適當(dāng)孢子培養(yǎng)物中所獲得的1μl 5×105個(gè)孢子/ml(分生孢子或內(nèi)生孢子)的懸浮液進(jìn)行溫育。在32℃下繼續(xù)溫育接種過(guò)的生長(zhǎng)培養(yǎng)基，并且在1，2，3，5，7和10天后進(jìn)行測(cè)量。
將Fluconazole，Itraconazole和兩性霉素B作為參照化合物。
在下表中，列出了對(duì)煙曲霉，黃曲霉，黑曲霉，土曲霉，洋蔥曲霉，F(xiàn)usarium verticilloides，F(xiàn)usarium proliferatum，Pseudoallescheria，傘枝犁頭霉，毛霉，Rhyzomucor pusillus，頂孢霉屬，木霉屬的體外抗真菌活性的數(shù)據(jù)。表1c將化合物3A和2A以及參照化合物Fluconazole，Itraconazole和兩性霉素B對(duì)所列出的真菌的體外抗真菌活性表示為MIC50。<
>在表中列出的數(shù)據(jù)顯示本發(fā)明的目的化合物具有比參照化合物明顯更高的抗真菌活性。實(shí)施例12體內(nèi)抗真菌活性使用Alino Charles河小鼠(CD1品系)，重量從23到25g，通常以標(biāo)準(zhǔn)飲食和水任意進(jìn)食。
用適當(dāng)微生物的懸浮液(0.2ml，2.5×107細(xì)胞/ml)對(duì)每只動(dòng)物進(jìn)行靜脈(對(duì)于系統(tǒng)性白假絲酵母病、隱球菌病、曲霉病)，顱內(nèi)(對(duì)于顱內(nèi)隱球菌病)或鼻(對(duì)于肺曲霉病)進(jìn)行處理。在剛注射以及在注射4、24和48小時(shí)之后，給動(dòng)物口服(用2％阿拉伯樹膠)幾何漸進(jìn)增加劑量的待試化合物。以一組感染的作為參照。
監(jiān)測(cè)的小鼠死亡率延長(zhǎng)至14天。以在每種濃度下生還的動(dòng)物數(shù)量為基礎(chǔ)通過(guò)概率值分析計(jì)算出中間保護(hù)劑量(PD50)(L.Lison-″Statisticaapplicata alla biologia sperimentale.La programmazionedell′esperimento el′analisi dei risultati″-Casa Editrice Ambrosiana，1961)。
將Fluconazole和Itraconazole作為參照物。
下表給出了體內(nèi)施用后，一些本發(fā)明的代表性化合物的體內(nèi)抗真菌活性的數(shù)據(jù)。表2化合物1A，3A，它們各自的對(duì)映體1B，3B，化合物2A和參照化合物Fluconazole與Itraconazole的口頭抗真菌效能，表示為在感染14天后的中間保護(hù)劑量(PD50)。
列出的數(shù)據(jù)顯示本發(fā)明的式(II)的目的化合物在口服后是具有活性的，中間保護(hù)劑量(PD50)比Itraconazole的中間保護(hù)劑量低，并且至少等于Fluconazole的中間保護(hù)劑量。
權(quán)利要求
1)一種下式的化合物和其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽，
其中R1是氯、氟、溴或三氟甲基；R2是氫、氯、氟、溴或三氟甲基；Z是CH或N；R3、R4和R5相同或不同并且是氫或C1-C4烷基，附加條件是當(dāng)R3是氫時(shí)R4與R5不同；X是O、S、SO或SO2；R6是包含至少兩個(gè)氟原子和可有可無(wú)的選自氯和溴的其它鹵素原子的C1-C5多氟烷基。
2)按照權(quán)利要求1的化合物，其中R1是氯或氟，R2是氫、氯或氟，R3是甲基或乙基，R4和R5相同或不同并且是氫、甲基或乙基，Z是N，并且R6是1，1，2，2-四氟乙基。
3)按照權(quán)利要求2的化合物，其中R1是氯或氟，R2是氫、氯或氟，R3是甲基或乙基，R4和R5相同或不同并且是氫、甲基或乙基，Z是N，R6是1，1，2，2-四氟乙基，并且X是O或SO2。
4)一種制備按照權(quán)利要求1的化合物的方法，該方法通過(guò)將下式的多氟鏈烯CF2＝C(X2)-X1，其中X1和X2相同或不同并且是F、CI、或CF3，或者通過(guò)將下式的多氟化醇R7-CH2-OH，其中R7是包含至少兩個(gè)氟原子和可有可無(wú)的選自氯和溴的其它鹵素原子的C1-C4多氟烷基，與下式的光活性中間體或者其反應(yīng)性衍生物反應(yīng)
其中R1、R2、R3、凡、R5和z具有與權(quán)利要求1相同的含義，并且X是O或S；隨后可有可無(wú)地進(jìn)行氧化。
5)一種制備下式的化合物的酶促分離方法，
其中R1、R2、R5和z具有與權(quán)利要求1相同的含義，X是O，R3和R4都是甲基，該方法包括立體有擇性地?；?V)的外消旋化合物，并且隨后進(jìn)行水解。
6)一種下式的化合物和其用作藥物的藥學(xué)上可接受的酸加成鹽，
其中R1是氯、氟、溴或三氟甲基；R2是氫、氯、氟、溴或三氟甲基；Z是CH或N；R3、R4和R5相同或不同并且是氫或C1-C4烷基，附加條件是當(dāng)R3是氫時(shí)凡與R5不同；X是O、S、SO或SO2；R6是包含至少兩個(gè)氟原子和可有可無(wú)的選自氯和溴的其它鹵素原子的C1-C5多氟烷基。
7)一種藥物組合物，該藥物組合物包含一種治療有效量的按照權(quán)利要求1的化合物和一種藥學(xué)上可接受的載體。
全文摘要
本文描述了式(Ⅱ－A)的化合物,其中,R
文檔編號(hào)A61K31/415GK1212685SQ97192673
公開日1999年3月31日 申請(qǐng)日期1997年2月25日 優(yōu)先權(quán)日1996年2月28日
發(fā)明者M·納波萊塔諾, C·弗拉里, E·阿爾比尼, G·施奧帕卡希 申請(qǐng)人:薩寶集團(tuán)公司, 伊薩羅公司