專利名稱：以β－欖香烯為有效成分的抗癌藥物的制備方法及其組成的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種抗癌藥物的制備方法及其組成，特別涉及一種以β-欖香烯作為有效成份的抗癌藥物制備方法及其組成。
抗癌新藥欖香烯已于1993年12月獲國家貳類新藥證書，1994年2月通過國家科委組織、國家醫(yī)藥局主持召開的欖香烯抗癌研究成果鑒定會。欖香烯可從多種植物中提取分離而得，例如最重要來源之一是從我國特產(chǎn)的植物溫郁金(C.Wenyujin chen et C.ling)的根莖俗稱溫莪術(shù)的揮發(fā)油中提取的一種化合物，即欖香烯類化合物，其中以β-欖香烯為主要成分，同時含有δ-欖香烯和γ-欖香烯。欖香烯是從植物中提取的有效部位，非單一成分或單體，其中的化學異構(gòu)體難于分離。
最近，藥效學實驗證明，欖香烯是從溫莪術(shù)油中分離出來的，經(jīng)證實它具有抗癌性。它不僅具有良好的控制惡性胸、腹腔積液、治療淺表腫瘤，毒副作用低的特點，而且在擴大應(yīng)用時發(fā)現(xiàn)它對腦瘤、肝癌、消化道腫瘤等均有一定療效。作為二類新藥，試生產(chǎn)兩年證明工藝路線合理，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，適合工業(yè)性生產(chǎn)。上述植物溫郁金和另外兩種植物莪術(shù)和姜黃同屬于姜科植物類群，產(chǎn)于世界熱帶地區(qū)，我國主要產(chǎn)于廣東、四川、福建、廣西、浙江等省。欖香烯中主要起抗癌作用的是β-欖香烯，β-欖香烯，其拉丁名β-Elemenum、英文名β-elemene、化學名為1-甲基-1-乙烯基-2，4-二異丙烯基環(huán)已烷，β-欖香烯尚處于研究階段，以前雖曾有β-欖香烯的報導，但經(jīng)核實都應(yīng)為欖香烯(異構(gòu)體混合物)，所有實驗均用欖香烯，而不是單一的β-欖香烯。目前，有許多種植物中含有β-欖香烯，如溫郁金、水菖蒲、土木香、鳥藥、人參等50多種植物。有關(guān)部門初步調(diào)查表明含β-欖香烯1％以上的香精在中國就有近40種，其中含量較高且從氣相色譜流出曲線看，易分離的就有7種，如天女木蘭油、蟹橙葉油、羅絞葉油、樹蘭花油和石南藤油等，但上述資源不算豐實，成本亦較高。欖香烯制劑對小鼠艾氏腹水癌(EAC)、小鼠白血病(P388，L1210)、網(wǎng)織細胞瘤ARS，以及大鼠吉田肉瘤腹水型(YAS)等多瘤譜均有明顯的抗癌活性。I，II，III期臨床實踐證實它對癌性胸，腹水，淺表腫瘤，都有很好的控制作用，總有效率為69％以上。值得提出的是在擴大臨床應(yīng)用時采用區(qū)域化療治療腦瘤有27％的患者達到完全恢復水平。該藥的另一個特點是毒副作用輕微，對骨髓無抑制，不影響機體的免疫功能，對血相、肝、腎功能均不影響。但目前還沒有一種方法能將β-欖香烯單獨提煉出來作為抗癌藥物使用。
本發(fā)明的目的是提供一種以β-欖香烯作為有效成份的抗癌藥物原料的制備方法及其組成，該抗癌藥物原料以香茅草為主，資源豐富、價格低廉、含β-欖香烯量高、以及可供工業(yè)化生產(chǎn)。
本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的一種以β-欖香烯作為有效抗癌藥物的制備方法，其特征在于以香茅油作為提取β-欖香烯的原料，在精密分餾塔中進行二次分餾。
所述二次分餾均是在一定條件下進行的，真空度為2-5mmHg(壓力10-2-10-0.5Pa)；溫度范圍為86-93℃；分餾比為4∶1或5∶1；反應(yīng)時間約10小時。
所述第一次分餾是將粗料置于所述精密分餾塔釜中，進行加熱分餾，按照所述條件，共有三個溫區(qū)餾分；86-88℃、89-90℃及91-93℃，β-欖香烯主要處于89-90℃的餾分中，接收89-90℃的餾分。
所述第二次分餾是取第一次分餾得到的89-90℃的餾分油，條件同第一次分餾，在分餾過程中接收三種溫區(qū)餾分86-88℃、89-90℃及91-93℃，收取89-90℃的餾分。
所述二次分餾過程中的86-88℃和91-93℃餾分以及二次分餾的釜底殘油作為粗料進行循環(huán)使用，重復進行所述二次分餾。由于整個提取分餾過程是在密閉容器中進行，不會對環(huán)境造成污染。
所述精密分餾塔是專門用于提取β-欖香烯的設(shè)備，其中精餾柱高1.4m，直徑6cm，內(nèi)裝用120目不銹鋼網(wǎng)卷3×3mm空心圓柱體為填料，塔板數(shù)N＝40。
一種用上述方法制備的以β-欖香烯作為有效成份的抗癌藥物，其特征在于所述抗癌藥物由β-欖香烯及同時得到的γ-欖香烯及雜質(zhì)組成。
所述藥物中的雜質(zhì)主要為欖香醇、玷巴烯及異呋吉嗎烯。
所述藥物中的各成份相對含量百分比為
β-欖香烯96.4％以上γ-欖香烯0.5％欖香醇0.8-1.2％玷巴烯1.3-1.7％異呋吉嗎烯0.2％。
本發(fā)明的有益效果為1、本發(fā)明的抗癌藥物原料，以香茅草為主，該植物資源豐富、價格低廉、含β-欖香烯量高、便于提取，且β-欖香烯的異構(gòu)體γ-欖香烯與β-欖香烯結(jié)構(gòu)相似，作用相似，均有抗癌作用。藥效學實驗證明本發(fā)明的抗癌藥物具有明顯的抗動物EAC、S180、L1210等移植性腫瘤和神經(jīng)膠質(zhì)瘤的作用，其毒副作用低，效果明顯，是一種理想的抗癌性腹水、腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤和癌性實體瘤的藥物。
2、本發(fā)明提供的β-欖香烯抗癌藥物的原料制備設(shè)備和方法，該方法工藝簡單、成本低、無污染。
下面結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明作進一步說明。


圖1為本發(fā)明的抗癌藥物制備方法流程圖。
本發(fā)明的抗癌藥物制備方法是從香茅草精油中提取β-欖香烯。現(xiàn)在，中國香茅草精油年產(chǎn)量約2千多噸，是中國出口的大宗精油之一，約占目前國際精油市場香茅草油貿(mào)易量的50％，該精油含有β-欖香烯1.63-5.21％。尤其在香茅草油提取香精后的副產(chǎn)品，即粗料中β-欖香烯的含量較高，可達80％。這種粗料可由加工香茅油的香料化工廠提供，價格便宜。實驗證明利用精密分餾法可制得純度96.4％以上的β-欖香烯，主要雜質(zhì)已研究清楚，其成本便宜，毒副作用低微，具有明顯的抗腫瘤作用。尤其是對癌性胸腹水、腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤、實體瘤有明顯效果，屬一類新藥。
本發(fā)明首次采用精密分餾塔釜的分餾方法來生產(chǎn)β-欖香烯，是將原料油置于精密分餾塔釜中進行多次精密分餾。精密分餾塔是專用于β-欖香烯生產(chǎn)的。本發(fā)明所用的精密分餾塔，其中精餾柱高1.4m，直徑6cm，內(nèi)裝用120目不銹鋼網(wǎng)卷3×3mm空心圓柱體為填料，塔板數(shù)n＝40。
提取分離的條件真空度不低于2mmHg(壓力10-2Pa)，一般采用2-5mmHg(壓力10-2-10-0.5Pa)；溫度范圍為86-93℃；分餾比控制在4∶1或5∶1；反應(yīng)時間約10小時；可反復操作2-3次。
提取分餾的方法二次分餾法，具體步驟為第一次分餾，取粗料(含β-欖香烯80％以上)，加入到精密分餾塔釜中；按照上述條件，進入三個溫區(qū)餾分；86-88℃、89-90℃及91-93℃，β-欖香烯主要處于89-90℃的餾分中，接收三種溫區(qū)餾分。其中89-90℃的餾分，收率為投料量的63％，純度約為95％。
第二次分餾，取純度為95％的第一次餾分油，進行第二次分餾純化，條件同上，在分餾過程中接收三種溫區(qū)餾分86-88℃、89-90℃及91-93℃。收取89-90℃的餾分，收率60％，β-欖香烯純度96.4％以上。
若將兩次分餾過程中的86-88℃和91-93℃餾分以及二次分餾的釜底殘油循環(huán)使用，β-欖香烯89-90℃的餾分總收率可達45％。用上述設(shè)備和方法，進行二次分餾提純后，β-欖香烯的純度可達96.4％以上。整個提取分餾過程是在密閉容器中進行，不會對環(huán)境造成污染。
本發(fā)明按照以下規(guī)定的技術(shù)標準進行分析鑒定折射率n25＝1.4911 相對密度0.8813比旋度[a]25＝13.47沸程196℃-219℃元素分析 理論值實測值計算值C 88.24 88.12H 11.76 11.70C15H24經(jīng)紅外光譜、紫外光譜、氣相色譜、質(zhì)譜和氣質(zhì)聯(lián)用儀及核磁共振做1H，13C，DEPT，COSY譜等鑒定符合β-欖香烯的結(jié)構(gòu)。
用上述方法可獲得一種以β-欖香烯作為有效成份的抗癌藥物，它由β-欖香烯及雜質(zhì)γ-欖香烯、欖香醇、玷巴烯和異呋吉嗎烯組成，各成份相對含量百分比為β-欖香烯96.4％以上；玷巴烯1.3-1.7％；欖香醇0.8-1.2％；γ-欖香烯0.5％；異呋吉嗎烯0.2％。
制備以β-欖香烯作為有效成份的抗癌藥物的具體實施方法如下1、取粗料，即香茅油(香料化工廠提供)副產(chǎn)物2000g(含β-欖香烯80％以上)置于精密分餾塔釜中進行加熱分餾，分餾比控制在5∶1，真空度2mmHg(壓力為10-2Pa)；2、加溫溫度范圍為I86-88℃，II 89-90℃，III 91-93℃，接收89-90℃的溫區(qū)餾分，收率65％，純度95％，得到一次分餾產(chǎn)物；
3、將經(jīng)一次分餾產(chǎn)物純度為95％的香茅油2000g，進行二次分餾，條件和方法同第一次分餾，接收89-90℃的餾分，收率為60％，純度96.4％以上。
將一次分餾接收的86-88℃的餾分和91-93℃的餾分(兩種餾分)及經(jīng)過二次分餾后的釜底剩余物，再循環(huán)使用進行分餾，方法和條件同前，收取89-90℃的餾分，收率為20％。
最終得精密分餾的β-欖香烯及其雜質(zhì)，含有β-欖香烯96.4％以上；玷巴烯1.3-1.7％；欖香醇0.8-1.2％；γ-欖香烯0.5％；異呋吉嗎烯0.2％。其中β-欖香烯的異構(gòu)體γ-欖香烯與β-欖香烯結(jié)構(gòu)相似，作用相似，均有抗癌作用。
可將上述原料制備成制劑所述的生產(chǎn)方法為1、將β-欖香烯、磷脂和膽固醇一起混合加熱至80℃，到融熔澄明；2、將磷酸二氫納和磷酸氫二納加水溶解，再加熱至80℃；3、將第1、2步分別得到的混合物一起放入高速乳勻機乳化至乳注射液；4、將乳注射液通過G4垂融漏斗過濾，然后進行粒度檢查；5、將檢查后的注射液灌封，在100℃的高溫進行40分鐘滅菌至成品。
通過上述過程制備成β-欖香烯抗腫瘤制劑。
根據(jù)上述工藝路線制備的β-欖香烯抗癌藥物進行動物藥效學研究結(jié)果如下1、癌性腹水腹腔注射β-欖香烯注射對EAC和S-180腹水癌均有穩(wěn)定的療效，其生命延長率分別為85-310％、90-321％。對肝癌腹水癌的生命延長率為103-224％。
2、實體瘤β-欖香烯注射液對S-180實體瘤也有一定抑制，其抑制率為33-59％，對肝癌實體瘤的抑制率在10-30％之間。
3、小鼠白血病L1210，β-欖香烯注射液對L1210有較明顯的療效，其生命延長率為47-286％。
4、神經(jīng)膠質(zhì)瘤用小鼠腎囊膜法(SRC)進行腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤的藥效學實驗表明，抑瘤率50-70％。
5、γ-欖香烯對小鼠艾氏腹水癌和小鼠白血病L1210的生命延長約為111％，但詳細研究需進一步完成。
6、β-欖香烯無骨髓抑制、白細胞下降等反應(yīng)等常見的抗腫瘤藥物的副作用。
本發(fā)明人經(jīng)實驗研究認為β-欖香烯具有明顯的抗癌性胸腹水、實體瘤、小鼠白血病L1210，腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤等作用，無明顯副作用。適合開發(fā)出治療人類癌性胸腹水、腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤及實體瘤的一類新藥。γ-欖香烯的抗癌作用應(yīng)進一步研究。
β-欖香烯的臨床應(yīng)用在特殊情況下，有兩名腦瘤患者用了β-欖香烯注射液治療，均取得顯著的臨床療效。
例1、王××，女，25歲，住院號3016。因頭痛，右上下肢無力，偏癱，經(jīng)CT確診為丘腦膠質(zhì)母細胞瘤，瘤體大小為3.8×5.3×4cm。1995年7月入院手術(shù)，切除4/5。術(shù)后兩周瘤體長到術(shù)前大小，在這種情況下用了β-欖香烯注射液，采用頸動脈插管和靜脈點滴交替給藥的方法，每天一次，每次頸動脈插管600ml，靜脈點滴400ml，瘤體很快被控制。經(jīng)CT復查，瘤體縮小不明顯。體征好轉(zhuǎn)，帶瘤生存11個月。
岳××，女，65歲，住院號3679。因肺癌伴有頭痛，走路不穩(wěn)，嘔吐。經(jīng)CT確診為肺癌伴多發(fā)性腦轉(zhuǎn)移，右小腦瘤體2.8×4.0×3.1cm，左基底節(jié)區(qū)0.5×1.5×1.6cm。因系肺癌腦轉(zhuǎn)移，原發(fā)灶在肺部，年齡較大，手術(shù)困難，1996年11月中旬入院，估計生存期不超過一個月。入院后采用β-欖香烯注射液治療，方法和劑量同上。病情好轉(zhuǎn)。頭痛減輕，嘔吐消失，12月中旬進行CT復查，瘤體縮小。1997年3月，因肺癌淋巴節(jié)、肋骨等轉(zhuǎn)移，左前臂病理性骨折。病人要求出院。生命延長四個多月。
上述兩病例均在大連醫(yī)科大學附屬二院腫瘤分院治療，病志保存在該院。
權(quán)利要求
1.一種以β-欖香烯作為有效抗癌藥物的制備方法，其特征在于以香茅油作為提取β-欖香烯的原料，在精密分餾塔中進行二次分餾。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以β-欖香烯作為有效抗癌藥物的制備方法，其特征在于所述二次分餾均是在一定條件下進行的，真空度為2-5mmHg(壓力10-2-10-0.5Pa)；溫度范圍為86-93℃；分餾比為4∶1或5∶1；反應(yīng)時間約10小時。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的以β-欖香烯作為有效抗癌藥物的制備方法，其特征在于所述條件中最佳條件為，真空度2mmHg(壓力10-2Pa)；分餾比為5∶1；反應(yīng)時間約10小時。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的以β-欖香烯作為有效抗癌藥物的制備方法，其特征在于所述第一次分餾是將粗料置于所述精密分餾塔釜中，進行加熱分餾，按照所述條件，共有三個溫區(qū)餾分；86-88℃、89-90℃及91-93℃，β-欖香烯主要處于89-90℃的餾分中，接收89-90℃的餾分。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的以β-欖香烯作為有效抗癌藥物的制備方法，其特征在于所述第二次分餾是取第一次分餾得到的89-90℃的餾分油，條件同第一次分餾，在分餾過程中接收三種溫區(qū)餾分86-88℃、89-90℃及91-93℃，收取89-90℃的餾分。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的以β-欖香烯作為有效抗癌藥物的制備方法，其特征在于將所述二次分餾過程中的86-88℃和91-93℃餾分以及二次分餾的釜底殘油作為粗料進行循環(huán)使用，重復進行所述二次分餾。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以β-欖香烯作為有效抗癌藥物的制備方法，其特征在于所述精密分餾塔是專門用于提取β-欖香烯的設(shè)備，其中精餾柱高1.4m，直徑6cm，內(nèi)裝用120目不銹鋼網(wǎng)卷3×3mm空心圓柱體為填料，塔板數(shù)N＝40。
8.一種用上述方法制備的以β-欖香烯作為有效成份的抗癌藥物，其特征在于所述抗癌藥物以β-欖香烯為有效成份及同時得到的γ-欖香烯及雜質(zhì)組成。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的以β-欖香烯作為有效成份的抗癌藥物，其特征在于所述藥物中的及雜質(zhì)主要為γ-欖香烯、欖香醇、玷巴烯及異呋吉嗎烯。
10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的以β-欖香烯作為有效成份的抗癌藥物，其特征在于所述藥物中的各成份相對含量百分比為β-欖香烯 96.4％以上γ-欖香烯 0.5％欖香醇0.8-1.2％玷巴烯1.3-1.7％異呋吉嗎烯0.2％。
全文摘要
本發(fā)明的抗癌藥物,以香茅草為主要原料,從中提取抗癌物β－欖香烯作為主要成分構(gòu)成,其制備方法是采用在精密分餾塔中二次分餾,從香茅精油中分離出β－欖香烯,純度可達96.4%。香茅草資源豐富、價格低廉、含β－欖香烯量高。本方法工藝簡單、效率高、成本低、無污染。本藥物經(jīng)藥效學實驗證明有明顯的抗動物EAC、S
文檔編號A61K31/01GK1200266SQ98106848
公開日1998年12月2日 申請日期1998年4月13日 優(yōu)先權(quán)日1997年4月14日
發(fā)明者陳玉仁, 吳秀英, 何勤, 馬德錫, 李志 , 蘇成業(yè), 王維, 孫銘, 何中秋, 涂歡, 秦麗亞, 劉玉欣, 王顯圣 申請人:中國科技開發(fā)院醫(yī)藥科技開發(fā)所