專利名稱：增加人類精子的濃度和運動性的組合物及方法
背景技術(shù)：
發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及增加人類精子的濃度和/或運動性的組合物和方法，包括治療特發(fā)性精子活力不足的人類患者的組合物和方法。
背景技術(shù)：
精子在睪丸中產(chǎn)生并經(jīng)附睪后生殖腺改變獲得受精能力。在附睪漿液中，高分子蛋白和諸如游離的肉堿這樣的小分子將配子轉(zhuǎn)化為“有能力的”和有功能的細(xì)胞。游離L-肉堿是從血漿中攝取的并在附睪腔富集。這種附睪的分泌物對精子有益，而不僅是排泄廢物。游離肉堿通過被動擴(kuò)散通過精子漿膜。游離L-肉堿僅在成熟精子中被乙?；＞€粒體中過量的乙酰輔酶A可能儲存為乙酰-L-肉堿并調(diào)節(jié)三羧酸循環(huán)功能必需的游離輔酶A的儲量。已知在體細(xì)胞中L-肉堿具有緩沖線粒體基質(zhì)中的輔酶A的性質(zhì)，但在男性生殖細(xì)胞中，L-肉堿的這種性質(zhì)更明顯。內(nèi)源性游離L-肉堿和乙?；疞-肉堿與漸進(jìn)性精子運動性的百分率之間的關(guān)系表明了與鞭毛運動相關(guān)的更重要的代謝功能。因此，發(fā)生在附睪中的引發(fā)精子運動性的潛力可能與肉堿體系無關(guān)，而乙酰-L-肉堿的能量特性與“能源危機(jī)”的情形有關(guān)。成熟精子中攝取的細(xì)胞質(zhì)游離L-肉堿須是對于該分離細(xì)胞的存活有用的線粒體代謝的保護(hù)形式。
特發(fā)性精子活力不足(asthenozoospermia)，一種精子運動性障礙，是該領(lǐng)域中數(shù)種病癥的代表性實例。它是一種由于各種病因?qū)W造成的不孕癥睪丸后原因，即，精尾先天性缺陷、成熟缺陷、免疫疾病或感染。已知用于治療特發(fā)性精子運動無力的數(shù)種藥物還沒有一種能令人完全滿意。
抗雌激素藥物(例如檸檬酸氯米芬和他莫昔芬)通過抑制腦中的促卵泡激素(FSH)和促黃體素(LH)阻斷性激素。這引發(fā)了LH和FSH釋放的增加，結(jié)果刺激了睪酮的產(chǎn)生。增高了的睪酮水平促進(jìn)精子發(fā)生，這提高了精子的密度和運動性。然而，最近世界衛(wèi)生組織(WHO)對190對配偶進(jìn)行的一項隨機(jī)、雙盲、多中心研究表明檸檬酸氯米芬無效。據(jù)稱他莫昔芬改進(jìn)精子的濃度，但通常沒檢測到精子的運動性的改變。對于氯米芬，最近的研究沒有證實其效果。
睪酮反彈療法包括抑制患者垂體腺活性的大劑量的睪酮。結(jié)果，這使睪酮的睪丸內(nèi)水平降低到了低于正常水平的全身水平。然后希望該系統(tǒng)會反彈并因此改善精子的產(chǎn)生，終止該雄激素治療。
該療法并不為人們所推薦，因為大量被治療患者在治療后仍表現(xiàn)出精子運動無力。
睪內(nèi)酯，一種芳香酶抑制劑，阻止睪酮向雌二醇的轉(zhuǎn)化。在特發(fā)性精子減少患者的試驗中，相反結(jié)果的出現(xiàn)導(dǎo)致對其效力產(chǎn)生了許多的疑問。
1-甲氫睪酮是一種廣泛用于治療特發(fā)性男性不孕癥的合成雄激素。最近由WHO發(fā)起的研究發(fā)現(xiàn)該藥物沒有表現(xiàn)出任何功效。
憑經(jīng)驗對精子數(shù)量或運動性缺陷的患者施用人絨毛膜促性腺素(HCG)以糾正推測的睪丸內(nèi)睪酮缺乏。某些患者事實上由于試驗產(chǎn)生的雌激素增多而導(dǎo)致了精子數(shù)量的減少。
人絕經(jīng)促性腺素(HMG)具有與LH和FSH相當(dāng)?shù)幕钚?，但其僅在約50％的情況下產(chǎn)生精子數(shù)量增加的作用。
FSH和HCG或者HCG和HMG的聯(lián)合治療也沒有顯示出對這些結(jié)果有任何改善作用。
促性腺素釋放激素(GnRH)昂貴，并且獲得的結(jié)果也不令人滿意。
舒血管素能夠增進(jìn)精子的運動性和增加精子濃度，但也僅在約50％的情況下有效。
L-肉堿和乙酰L-肉堿也已被作為治療精子活力不足的候選藥物。
Vitali G.等(Drugs Exptl.Clin.Res.XXI(4)157-159，1995)研究了L-肉堿給藥于特發(fā)性精子活力不足的患者的有效性。該化合物在試驗的47位患者的37位中，對精子運動性顯示出有益作用并呈快速線性前進(jìn)。Torok L.(Dermatol.Monatsschr.169572-575，1983)的研究獲得了同樣的結(jié)果。
Costa M.等(Andrologia，26155-159，1994)的研究表明L-肉堿給藥后對精子運動性以定性和定量方式均表現(xiàn)出明顯改善。它們推測在不孕患者中，損害不僅發(fā)生在附睪功能或還發(fā)生在精子捕獲和利用肉堿的能力(Bartelloni M.等Acta Eur.Fertil.1829-31，1987)。因此，肉堿的給藥將產(chǎn)生精子能量代謝和運動性的附加底物。
Muller-Tyl E.等(Fertilitat 41-4，1988)認(rèn)為L-肉堿療法可成功地用于不孕患者。事實上，結(jié)果表明肉堿治療后精子中肉堿水平的持續(xù)增加，但運動性和精子細(xì)胞的數(shù)量只是暫時性地得到提高。
Loumbakis P.等(XIIth Congress of the European Associationof Urology.Paris，September 1-4，1996)提供的初步數(shù)據(jù)表明肉堿給藥可積極影響精子的數(shù)量。
最后，Moncada M.L.等(Acta Eur.Fertil.23(5)221-224，1992)研究了乙酰L-肉堿給藥于特發(fā)性精子過少和活力不足患者后對精子數(shù)量的影響。乙酰-L-肉堿對精子密度沒有影響，但顯示出增強(qiáng)進(jìn)行性的精子運動性。
發(fā)明概述本發(fā)明的一個目的是提供各種增加人類精子濃度的組合物和方法。
本發(fā)明的另一個目的是提供各種增加人類精子運動性的組合物和方法。
本發(fā)明的另一個目的是提供各種治療特發(fā)性精子活力不足患者的組合物和方法。
下面描述了有關(guān)給人給藥L-肉堿和乙酰L-肉堿或它們的可藥用鹽可有效增加人類精子濃度和/或運動性，包括有效治療特發(fā)性精子活力不足，甚至是治療對已知的、常用的上述療法沒有反應(yīng)的個體患者的發(fā)現(xiàn)，由此可以清楚地看出本發(fā)明的上述和其他目的。(注本文采用的術(shù)語“可藥用鹽”簡單地說，是指在食料或處方產(chǎn)品中使用安全的那些鹽。該術(shù)語不于說明和表示一種需要處方的產(chǎn)品)。
已發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的組合物和方法在增加人類精子的濃度和/或精子的運動性上呈現(xiàn)出明顯的優(yōu)勢，包括治療特發(fā)性精子活力不足的患者，該作用超過了單獨施用L-肉堿或乙酰L-肉堿，即單一療法獲得的效果。
根據(jù)各種因素，例如一種或多種活性成分的濃度，本發(fā)明的L-肉堿或乙酰L-肉堿可以食品添加劑、營養(yǎng)添加劑或包括非處方藥和處方藥品的治療產(chǎn)品形式出售。
各種摩爾比的L-肉堿與乙酰L-肉堿，或者它們的可藥用鹽均可用于本發(fā)明中，包括4.0∶1～1∶1.5的摩爾比范圍。優(yōu)選的比例范圍包括3.2∶1～2.8∶1以及相應(yīng)于約1∶1的摩爾比。
本發(fā)明的聯(lián)合制劑，當(dāng)呈單位劑型時，包含2.5克至0.22克L-肉堿內(nèi)鹽和0.28克至1.3克乙酰L-肉堿或者等摩爾量的它們的可藥用鹽。
單位劑型的優(yōu)選聯(lián)合制劑包含1.0克L-肉堿內(nèi)鹽和0.5克乙酰L-肉堿內(nèi)鹽或者等摩爾量的它們的可藥用鹽。
另外發(fā)現(xiàn)，雖然上述活性成分給藥的每日劑量取決于患者的年齡、體重和適應(yīng)癥，但利用資深專業(yè)評價通常認(rèn)為的單次劑量或多次劑量的給藥方案為約0.8至2.5克/天L-肉堿和約1.0至1.5克/天乙酰L-肉堿或者等摩爾量的它們的可藥用鹽?；谇笆龌钚猿煞謽O低毒性的觀點，較高的劑量仍可安全地給藥。
下文描述了旨在評價與L-肉堿單一療法和乙酰L-肉堿單一療法相比，藥物聯(lián)合治療的互補(bǔ)作用是否對改善降低的精子運動性更有效的臨床研究。
對相應(yīng)于下列包括/排除標(biāo)準(zhǔn)的36位患者進(jìn)行研究。
包括標(biāo)準(zhǔn)年輕，被認(rèn)為特發(fā)性精子活力不足是不孕的唯一原因的有至少兩年病史的不孕男性；至少兩份樣品的精液參數(shù)符合精子濃度(M/ml)為10-20，2小時時運動性(％)＞20＜40，2小時時快速線性前進(jìn)(％)＜20。
排除標(biāo)準(zhǔn)不下降試驗，精索靜脈曲張(3級)，外傷或感染有關(guān)的睪丸萎縮，阻塞，生殖道發(fā)炎或感染，任何影響下丘腦-垂體-生殖腺軸的內(nèi)分泌性疾病；青春期后腮腺炎，存在抗精子抗體。
所有患者都對該開放性研究表示贊同和認(rèn)可。
在禁止性交后至少四天通過手淫獲得精液。通過WHO(1987)推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法，在射精后一小時內(nèi)分析樣品的所有參數(shù)。對至少兩份樣品使用計算機(jī)運動性分析依分析精子的運動性。
在基線時和用L-肉堿(N=12)或乙酰L-肉堿(N=12)或者聯(lián)合藥物(N=12)治療4個月后，進(jìn)行精液分析和運動性評價。
以2克/天的劑量(2×500毫克片，一日兩次，飯后)施用L-肉堿，給藥4個月。以4克/天的劑量(2×1克囊劑，一日兩次，飯后)施用乙酰L-肉堿，給藥4個月。以2克/天的劑量(2×500毫克片，由220毫克L-肉堿和280毫克乙酰L-肉堿組成，每日兩次，飯后)進(jìn)行聯(lián)合藥物治療(L-肉堿+乙酰L-肉堿)，給藥4個月。
用成對數(shù)據(jù)的“學(xué)生”“t”檢驗分析數(shù)據(jù)。結(jié)果精液分析 LC+ALC=L-肉堿+乙酰L-肉堿*與L-肉堿相比，p≤0.05#與乙酰L-肉堿相比，p≤0.05§與L-肉堿+乙酰L-肉堿相比，p≤0.001a與L-肉堿相比，p≤0.01b與乙酰L-肉堿相比，p≤0.001**與L-肉堿相比，p≤Cool。
治療前精液的參數(shù)值低于WHO正常范圍。
與L-肉堿和乙酰L-肉堿單一療法相比，聯(lián)合藥物治療明顯增加了精子的濃度和運動性以及快速線性前進(jìn)的精子百分?jǐn)?shù)。
本發(fā)明的藥物可通過將活性成分(L-肉堿內(nèi)鹽和乙酰L-肉堿內(nèi)鹽或它們的可藥用鹽)一起或者單獨包裝地與適于配制組合物的賦形劑混合來制備，所述組合物使活性成分經(jīng)腸道給藥(尤其是口服)或非胃腸給藥(尤其是通過肌內(nèi)或靜脈內(nèi)途徑)。本領(lǐng)域普通專業(yè)技術(shù)人員十分清楚這類賦形劑。
前述活性成分的可藥用鹽包括所有可藥用鹽，它們通過將酸加入到L-肉堿或乙酰L-肉堿內(nèi)鹽上制得，且不會產(chǎn)生有害的毒副作用?？伤幱盟峒映甥}的形成是熟知的制藥技術(shù)。
適宜的鹽的非限制性實例包括氯化物；溴化物；碘化物；天冬氨酸鹽，尤其是酸式天冬氨酸鹽；檸檬酸鹽，尤其是酸式檸檬酸鹽；酒石酸鹽；磷酸鹽，尤其是酸式磷酸鹽；富馬酸鹽，尤其是酸式富馬酸鹽；甘油磷酸鹽；葡糖磷酸鹽；乳酸鹽；馬來酸鹽，尤其是酸式馬來酸鹽；乳清酸鹽；草酸鹽，尤其是酸式草酸鹽；硫酸鹽，尤其是酸式硫酸鹽；三氯乙酸鹽；三氟乙酸鹽和甲磺酸鹽。
本發(fā)明的優(yōu)選實施方案使用L-肉堿酸式富馬酸鹽和乙酰L-肉堿鹽酸鹽，最優(yōu)的摩爾比為3∶1。通過含有下列成分的囊劑來說明該優(yōu)選實施方案和其他優(yōu)選實施方案 將一囊劑的內(nèi)容物與至少120毫升的水或其他飲料混合。
每天應(yīng)服用2枚最低劑量組合物(即組合物1)的囊劑，優(yōu)選早、晚各一枚，優(yōu)選持續(xù)服用至少6個月。
本申請是1997年12月1日遞交的申請?zhí)枮?8/980821的待審的申請的部分后續(xù)申請。
*****依照上面的教導(dǎo)，本發(fā)明顯然可以有許多修改和變化。因此，在所附權(quán)利要求的范圍內(nèi)，本發(fā)明可按照本文具體描述方式以外的方式進(jìn)行實施。
權(quán)利要求
1.一種能夠增加人類精子濃度或運動性的混合形式的或者單獨包裝形式的L-肉堿和乙酰L-肉堿的組合，所述組合是適于口服或非胃腸給藥形式的。
2.權(quán)利要求1的L-肉堿和乙酰L-肉堿的組合，呈適于口服給藥的形式。
3.權(quán)利要求1的L-肉堿和乙酰L-肉堿的組合，呈適于非胃腸給藥的形式。
4.權(quán)利要求1的L-肉堿和乙酰L-肉堿的混合物。
5.權(quán)利要求1的單獨包裝的L-肉堿和乙酰L-肉堿。
6.權(quán)利要求1的組合，包含L-肉堿或乙酰L-肉堿的可藥用鹽，所述鹽選自氯化物、溴化物、碘化物、天冬氨酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、磷酸鹽、富馬酸鹽、甘油磷酸鹽、葡糖磷酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、乳清酸鹽、草酸鹽、硫酸鹽、三氯乙酸鹽、三氟乙酸鹽和甲磺酸鹽。
7.權(quán)利要求6的L-肉堿和乙酰L-肉堿，其中所述的鹽選自酸式天冬氨酸鹽、酸式檸檬酸鹽、酸式磷酸鹽、酸式富馬酸鹽、酸式馬來酸鹽、酸式草酸鹽和酸式硫酸鹽。
8.權(quán)利要求1的L-肉堿酸式富馬酸鹽和乙酰L-肉堿鹽酸鹽。
9.權(quán)利要求6的組合，包含L-肉堿和乙酰L-肉堿的可藥用鹽。
10.權(quán)利要求1的組合，能夠增加人類精子的濃度。
11.權(quán)利要求1的組合，能夠增加人類精子的運動性。
12.權(quán)利要求1的組合，能夠治療人類特發(fā)性精子活力不足。
13.權(quán)利要求4的L-肉堿和乙酰L-肉堿的混合物，呈適于口服給藥的形式。
14.權(quán)利要求4的L-肉堿和乙酰L-肉堿的混合物，呈適于非胃腸給藥的形式。
15.權(quán)利要求1的組合，包含摩爾比為4.0∶1～1∶1.5的L-肉堿和乙酰L-肉堿。
16.權(quán)利要求15的組合，包含L-肉堿酸式富馬酸鹽和乙酸L-肉堿鹽酸鹽。
17.一種增加需要的人類精子濃度或運動性的方法，包括給該人施用能夠提供所述增加精子濃度或運動性的量的L-肉堿和乙酰L-肉堿。
18.權(quán)利要求17的方法，包括給所述人施用L-肉堿和乙酰L-肉堿的混合物。
19.權(quán)利要求17的方法，用于治療人類特發(fā)性精子活力不足。
20.權(quán)利要求17的方法，包括施用L-肉堿或乙酰L-肉堿的可藥用鹽，所述鹽選自氯化物、溴化物、碘化物、天冬氨酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、磷酸鹽、富馬酸鹽、甘油磷酸鹽、葡糖磷酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、乳清酸鹽、草酸鹽、硫酸鹽、三氯乙酸鹽、三氟乙酸鹽和甲磺酸鹽。
21.權(quán)利要求20的方法，包括施用選自酸式天冬氨酸鹽、酸式檸檬酸鹽、酸式磷酸鹽、酸式富馬酸鹽、酸式馬來酸鹽、酸式草酸鹽和酸式硫酸鹽的鹽。
22.權(quán)利要求20的方法，包括施用L-肉堿的酸式富馬酸鹽和乙酰L-肉堿。
23.權(quán)利要求17的方法，包括給所述人施用摩爾比為4.0∶1～1∶1.5的L-肉堿和乙酰L-肉堿。
24.權(quán)利要求22的方法，包括施用摩爾比為4.0∶1～1∶1.5的L-肉堿酸式富馬酸鹽和乙酰L-肉堿鹽酸鹽。
25.權(quán)利要求1的組合，呈單位劑量形式，含有0.22～2.5克的L-肉堿內(nèi)鹽和0.28～1.3g的乙酰L-肉堿內(nèi)鹽或等摩爾量的它們的可藥用鹽。
全文摘要
本發(fā)明公開一種治療特發(fā)性精子活力不足并改善精子質(zhì)量的方法,該方法包括給需此治療的對象口服或非經(jīng)胃腸施用包含摩爾比約為4.0∶1～1∶1.5的L－肉堿和乙酰L－肉堿或它們的可藥用鹽的混合物或者獨立包裝的L－肉堿和乙酰L－肉堿或它們的可藥用鹽的聯(lián)合制劑。
文檔編號A61K31/205GK1284871SQ98813635
公開日2001年2月21日 申請日期1998年11月18日 優(yōu)先權(quán)日1997年12月1日
發(fā)明者C·卡瓦扎 申請人:希格馬托保健科學(xué)股份公司