黃芩總黃酮苷元提取物的制備新方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種中藥原料提取物成分，特別是一種黃芩總黃酮苷元(或稱黃芩素 和黃苳黃酮總苷兀、黃苳總苷兀）提取物的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 黃苳（Scutellaria baicalensis Georgi)是中國(guó)藥典中收載的一種常用藥材，具 有清熱、瀉火、解毒之功效。已有研究表明，黃芩主要有效成分為黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素 (黃芩苷元）及漢黃芩素等黃酮類化合物。《中藥現(xiàn)代研究與應(yīng)用》（鄭虎占等主編，北京學(xué) 苑出版社1998年1月，p3960)中曾報(bào)道了對(duì)黃芩苷和黃芩素藥理學(xué)作用的比較研究，證明 了黃芩素的作用強(qiáng)于黃芩苷。胡世林等（《中國(guó)藥學(xué)雜志》2001，36 (11) : 728)的研究還進(jìn)一 步證明，黃芩素是上述4種黃酮中抗氧化作用最強(qiáng)的成分。趙玉男等（《中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué) 雜志》2002, 8 (9) : 59)還報(bào)道，黃芩苷的口服吸收率很低，僅約4~5%。由于苷元的生物利用 度一般都高于苷，因此將黃芩黃酮苷類成分轉(zhuǎn)化為苷元，能具有更好的藥效作用和廣泛的 醫(yī)療用途。
[0003][0004][0005] 此外，公開號(hào)CN1546482A的中國(guó)專利報(bào)道的方法為：黃芩粉碎加水于25-40°C酶 解5-24小時(shí)后烘干，乙醇滲漉提取得到黃芩總黃酮苷元；公開號(hào)CN1709885A的中國(guó)專利報(bào) 道的方法為：黃芩粉碎加水，41-46°C酶解4. 1-4. 8小時(shí)后干燥，用無(wú)水乙醇提取得到黃芩 總黃酮苷兀。
[0006] 上述制備方法雖都是利用同時(shí)存在于黃芩原料中的黃芩酶，但其的共同點(diǎn)是都采 用乙醇對(duì)黃芩苷類成分酶解后水難溶性的黃芩黃酮總苷元進(jìn)行提取。由于在采用有機(jī)溶劑 提取時(shí)，會(huì)帶入較多的脂溶性雜質(zhì)，影響了產(chǎn)物中黃芩黃酮總苷元的純度，導(dǎo)致了黃芩黃酮 總苷元提取物中的主要有效成分黃芩素含量較低，如CN101008022A報(bào)道的其提取物中黃 芩素的含量?jī)H為33. 0~37. 8%。
[0007] 針對(duì)上述問題，在公開號(hào)CN103356740A的文獻(xiàn)中，本申請(qǐng)人提出了一種在< 30°C 和pH值5~9的條件下，對(duì)黃芩藥材原料用水充分浸提后，收集浸提液并在加熱至< 70°C 條件下維持3~20小時(shí)，收集析出的沉淀物，即得黃芩素和黃芩黃酮總苷元提取物。該方法 可以徹底摒棄對(duì)有機(jī)溶劑的使用，從而有效避免了在所得黃芩素提取物中帶入較多脂溶性 雜質(zhì)的問題，從而可顯著提高產(chǎn)物中黃芩黃酮總苷元的純度，提高了提取物中主要有效成 分黃苳素的含量(如提取物中黃苳素的含量可達(dá)63. 5~81. 2%)，顯著高于現(xiàn)有同類的技術(shù)方 法。但該方法尚存在的不足，是黃芩藥材原料在< 30°C用水浸提取時(shí)，黃芩苷的提取效率較 低，即黃芩苷的提取不完全，因而對(duì)藥材的利用率尚不充分。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 針對(duì)上述情況，本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種黃芩總黃酮苷元，即黃芩素和黃芩黃酮 總苷元提取物的制備方法，可以滿意地解決上述問題。
[0009] 申請(qǐng)人通過進(jìn)一步的深入研究發(fā)現(xiàn)，黃芩藥材中黃芩酶的活力很強(qiáng)，水溶性好，用 水浸提取一次所得到的黃芩酶，即足以酶解完全黃芩藥材中的全部黃芩苷類成分。
[0010] 據(jù)此，本發(fā)明的黃芩總黃酮苷元提取物的制備方法，是在〇~30°C和pH值2~7的條 件下，對(duì)黃芩藥材原料用水浸提一次，收集浸提液后的剩余藥渣再于PH值5~7的條件下置 沸水中繼續(xù)煎煮提取，收集煎煮提取液，浸提液與煎煮提取液合并后，于室溫至<70°C條件 下維持3~20小時(shí)，收集沉淀物，即得黃芩素和黃芩總黃酮苷元提取物。對(duì)混合提取液的加 熱溫度一般不宜高于70°C，過高會(huì)影響黃芩酶的活性。
[0011] 本發(fā)明上述方法中，先用水對(duì)黃芩藥材原料進(jìn)行浸提，主要是為得到含黃芩酶的 浸提液。然后再對(duì)與浸提液分離后的剩余藥渣置沸水中繼續(xù)煎煮，提取完全其中的黃芩苷 類成分。煎煮提取液與浸提液合并后升溫進(jìn)行酶解，即得到黃芩素和黃芩總黃酮苷元提取 物。該方法不僅完全具有上述CN103356740A所述方法的優(yōu)點(diǎn)，并克服了其黃芩苷提取率低 的不足，而且黃芩苷酶解完全，使黃芩藥材得以充分利用。
[0012] 在本發(fā)明上述方法的基礎(chǔ)上，還可以單獨(dú)或任意組合方式采用的進(jìn)一步優(yōu)選方式包括： 所述的浸提優(yōu)選在PH值2~4條件下進(jìn)行，和/或在0~20°C條件下進(jìn)行。
[0013] 所述的水煎煮提取優(yōu)選在pH值5~7的條件下提取1次后，對(duì)分離的藥渣再加水 煎煮提取1~2次。
[0014] 所述浸提用的黃芩藥材原料優(yōu)選為粉碎至粒徑< 5目篩孔的粉粒，例如可粉碎至 現(xiàn)行中國(guó)藥典規(guī)定的最粗粉等，更有利于酶和所需成分的提取。此時(shí)，更好的提取方式，是 在攪拌下進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)顯示，雖然粉碎的粒徑越細(xì)小，越有利于水提取的效率和充分性，但粒 徑過于細(xì)小也可能會(huì)增大提取后的分離操作難度，加大了成本，可綜合平衡后確定。
[0015] 所述的水煎煮提取液與浸提液合并后，進(jìn)一步優(yōu)選的是可在30~60°C的條件下加 熱3-20小時(shí)，和/或在pH值4~8條件下加熱并維持。其中，更好的方式是所述的水煎煮 提取液與浸提液合并后，在pH值5~6和40~60°C的條件下維持5-10小時(shí)。
[0016] 實(shí)驗(yàn)表明，在pH值2~7和0~301：條件下浸提時(shí)，隨pH值的升高，浸提的溫度宜相 應(yīng)降低，以減少因黃芩酶的活性導(dǎo)致黃芩苷被提前酶解產(chǎn)生不必要的損失。例如，在PH值 2~4,和/或在0~30°C、特別是在0~20°C條件下的水浸取，能使黃芩酶的活性被抑制，可以顯 著減少在水浸提過程中黃芩苷酶解成黃芩素，從而提高了在后續(xù)水煎煮提取中的黃芩苷提 取率。將浸提液與水煎煮提取液合并，在室溫或適當(dāng)加熱條件下，即可使黃芩酶恢復(fù)活性， 將提取液中的黃芩苷類成分酶解為以黃芩素為主的黃酮總苷元和葡萄糖醛酸。從提取液 中析出的是難溶于水的黃酮總苷元，收集后即得到黃芩素含量較高的黃芩黃酮總苷元提取 物。經(jīng)高效液相色譜法測(cè)定，提取物中主要有效成分黃芩素的含量較高可大于70%。
[0017] 本發(fā)明上述制備方法的提取物收率高，且所得產(chǎn)物中主要有效成分黃芩素的含量 高，特別是完全不必使用乙醇等有機(jī)溶劑，大大降低了生產(chǎn)成本，具有理想的操作簡(jiǎn)便、低 成本及工業(yè)生產(chǎn)可行性。
[0018] 以下通過實(shí)施例的【具體實(shí)施方式】再對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但 不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。在不脫離本發(fā)明上述技術(shù)思想 情況下，根據(jù)本領(lǐng)域普通技術(shù)知識(shí)和慣用手段做出的各種替換或變更，均應(yīng)包括在本發(fā)明 的范圍內(nèi)。
【具體實(shí)施方式】
[0019] 實(shí)施例1 黃芩酶的活力與溫度關(guān)系的實(shí)驗(yàn)： 取黃芩藥材粗粉，加水8倍，于0°C和pH 6條件下攪拌提取2次，合并提取液，HPLC法 測(cè)定其中黃芩苷和黃芩素含量分別為6. 05mg/ml、0. 74mg/ml。
[0020] 取提取液2ml，分別于0、10、20、30、40、50、60、70、80°C酶解1小時(shí)，加甲醇定容至 50ml，HPLC法測(cè)定黃芩苷和黃芩素的含量，結(jié)果見表1。表1的結(jié)果顯示，黃芩酶在30°C以 下活力較低，處于被抑制狀態(tài)；40~60°C時(shí)酶的活力較強(qiáng)；70°C時(shí)基本已滅活。
[0021] 表1黃芩酶活力與溫度的關(guān)系
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 黃芩總黃酮苷元提取物的制備新方法，其特征是在0~30°c和pH值2~7的條件下， 對(duì)黃芩藥材原料用水浸提一次，收集浸提液后的剩余藥渣再于PH值5~7的條件下置沸水 中繼續(xù)煎煮提取，收集煎煮提取液，浸提液與煎煮提取液合并后，于室溫至<70°C條件下維 持3~20小時(shí)，收集沉淀物，即得黃芩素和黃芩總黃酮苷元提取物。
2. 如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是所述的浸提在pH值2~4條件下進(jìn)行。
3. 如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是所述的浸提在0~20°C條件下進(jìn)行。
4. 如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是所述的水煎煮提取是在pH值5~7的條件 下提取1次后，對(duì)分離的藥渣再加水煎煮提取1~2次。
5. 如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是所述浸提用的黃芩藥材原料為粉碎至粒徑 < 5目篩孔的粉粒。
6. 如權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征是所述的浸提和/或煎煮在攪拌下進(jìn)行。
7. 如權(quán)利要求1至6之一所述的制備方法，其特征是所述的水煎煮提取液與浸提液合 并后，在30~60°C的條件下加熱3-20小時(shí)。
8. 如權(quán)利要求1至6之一所述的制備方法，其特征是所述的水煎煮提取液與浸提液合 并后，在pH值4~8條件下加熱并維持。
9. 如權(quán)利要求1至6之一所述的制備方法，其特征是所述的水煎煮提取液與浸提液合 并后，在pH值5~6和40~60°C的條件下維持5-10小時(shí)。
【專利摘要】黃芩總黃酮苷元提取物的制備新方法。在0~30℃和pH值2~7的條件下，對(duì)黃芩藥材原料用水浸提一次，收集浸提液后的剩余藥渣再于pH值5~7的條件下置沸水中繼續(xù)煎煮提取，收集煎煮提取液，浸提液與煎煮提取液合并后，于室溫至＜70℃條件下維持3~20小時(shí)，收集沉淀物，即得黃芩總黃酮苷元提取物。該方法提取物的收率高，且所得產(chǎn)物中主要有效成分黃芩素的含量高，特別是完全無(wú)須使用乙醇等有機(jī)溶劑，大大降低了生產(chǎn)成本，具有理想的操作簡(jiǎn)便、低成本及工業(yè)生產(chǎn)可行性。
【IPC分類】A61K36-539
【公開號(hào)】CN104606288
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510003388
【發(fā)明人】易進(jìn)海, 彭易蘭, 劉云華, 陳燕, 黃志芳, 劉玉紅
【申請(qǐng)人】四川省中醫(yī)藥科學(xué)院
【公開日】2015年5月13日
【申請(qǐng)日】2015年1月6日