顆粒組合物和含有其的醫(yī)藥組合物的制作方法
【專利說明】
[0001] 本申請是2010年8月31日提出的申請?zhí)枮?01080038549.X的同名專利申請的 分案申請。
技術(shù)領(lǐng)域
[0002] 本發(fā)明涉及可以作為藥物遞送系統(tǒng)（DDS)的載體使用的顆粒組合物（例如，高分 子微團(tuán)），和具有該顆粒組合物與在其中內(nèi)包的藥物的醫(yī)藥組合物（例如，高分子微團(tuán)制 劑）。
【背景技術(shù)】
[0003] 相比于利用低分子化合物的以往型的醫(yī)藥品，利用諸如蛋白質(zhì)和核酸的生物體高 分子的生物醫(yī)藥品，容易被酶分解或被免疫系統(tǒng)排除。專利文獻(xiàn)1~4從提高生物醫(yī)藥品 在生物體內(nèi)的穩(wěn)定性的觀點(diǎn)出發(fā)，公開了使生物體高分子內(nèi)包于由脂質(zhì)雙層膜構(gòu)成的核糖 體的DDS。
[0004] 現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)
[0005] 專利文獻(xiàn)
[0006] 專利文獻(xiàn)1:國際公開第2001/034115號小冊子
[0007] 專利文獻(xiàn)2 :國際公開第1998/58630號小冊子
[0008] 專利文獻(xiàn)3 :國際公開第2005/092389號小冊子
[0009] 專利文獻(xiàn)4 :日本特表2001-504093

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010] 發(fā)明所要解決的課題
[0011] 在專利文獻(xiàn)1~3中記載的以往型DDS中，通過以脂質(zhì)雙層膜保護(hù)作為藥物的生 物體高分子，雖然能夠提高藥物在生物體內(nèi)的穩(wěn)定性，但是藥物難以從載體釋放。另外，這 樣的以往型DDS，由于其粒徑大小和構(gòu)成脂質(zhì)雙層膜的脂質(zhì)具有的電荷，從而容易被諸如 肺、肝臟和脾臟的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)捕捉，所以有時(shí)在到達(dá)投藥對象物以前會從血中被除去。在 專利文獻(xiàn)4中記載的DDS中，通過將核糖體隱形化，可以實(shí)現(xiàn)防止被捕捉到這樣的網(wǎng)狀內(nèi)皮 系統(tǒng)，但仍然有藥物難以從載體釋放的傾向。
[0012] 相比于使用核糖體的以往型DDS，以高分子微團(tuán)作為載體的DDS能夠?qū)DS顆粒大 幅度地小型化（例如，平均粒徑IOOnm以下），該高分子微團(tuán)通過由疏水性聚合物鏈段和親 水性聚合物鏈段形成的嵌段共聚物單元構(gòu)成。但是，這樣的以高分子微團(tuán)作為載體的DDS， 如后述的比較例所示，由于將生物體高分子保持在DDS顆粒內(nèi)的作用過弱，仍然有難以將 藥物適當(dāng)輸送到投藥對象物中的情況。另外，在這樣的DDS中，有時(shí)在制造后的儲藏期間 中，藥物也會從載體脫離。
[0013] 用于解決課題的方法
[0014] 本發(fā)明提供一種顆粒組合物，其含有具有疏水性聚合物鏈段和親水性聚合物鏈段 的嵌段共聚物單元，多個(gè)上述嵌段共聚物單元以上述疏水性聚合物鏈段朝向內(nèi)側(cè)，并且上 述親水性聚合物鏈片朝向外側(cè)的狀態(tài)放射狀配置，該顆粒組合物還具有帶電脂質(zhì)，該帶電 脂質(zhì)帶有與應(yīng)該被內(nèi)包的藥物的電荷相反的電荷，通過與該帶電脂質(zhì)的靜電結(jié)合將上述藥 物保持在顆粒內(nèi)，另一方面該帶電脂質(zhì)以被吸引到上述疏水性聚合物鏈段側(cè)的狀態(tài)配置， 從而防止顆粒外周面帶有能夠吸引與上述帶電脂質(zhì)帶有相反電荷的帶電性物質(zhì)的電荷。
[0015] 從另一個(gè)側(cè)面，本發(fā)明提供一種醫(yī)藥組合物，其具有上述顆粒組合物、和在該顆粒 組合物中內(nèi)包的帶有與帶電脂質(zhì)相反電荷的藥物。發(fā)明的效果
[0016] 根據(jù)本發(fā)明，能夠提供適于DDS的藥物載體和利用該藥物載體的醫(yī)藥品，該藥物 載體藥物保持性優(yōu)異，并且能夠防止生物體分子向載體表面的附著，該附著會導(dǎo)致妨礙藥 物向投藥對象物搬運(yùn)。相比于以往型的DDS，這些藥物載體和醫(yī)藥品能夠向投藥對象物可靠 地輸送藥物。
【附圖說明】
[0017] 圖1(a)~（C)是表示本發(fā)明的顆粒組合物和醫(yī)藥組合物結(jié)構(gòu)的一例的示意圖。
[0018] 圖2是表示在試驗(yàn)例Ib中測得的顆粒組合物的電動電位（zetapotential)的絕 對值與在試驗(yàn)例Ic中測得的顆粒組合物的血中凝集度的關(guān)系的圖表。
[0019] 圖3是表示在試驗(yàn)例2b中的白蛋白-FITC熒光強(qiáng)度測定結(jié)果的圖表。
[0020] 圖4是表示在試驗(yàn)例5a中的電泳結(jié)果的圖。
[0021] 圖5是用于說明在試驗(yàn)例5c中測得的顆粒組合物的抗癌活性的圖表。
[0022] 圖6是用于說明在試驗(yàn)例5d中測得的顆粒組合物在血清中的凝集性的圖表。
[0023] 圖7是表示在試驗(yàn)例5b中測得的顆粒組合物的電動電位的絕對值與在試驗(yàn)例5d 中測得的顆粒組合物的血中凝集度的關(guān)系的圖表。
[0024] 圖8是用于說明在試驗(yàn)例5f中測得的藥物的臟器轉(zhuǎn)移性的圖表。
【具體實(shí)施方式】
[0025] 圖I(a)是表示本發(fā)明的顆粒組合物（以下，有時(shí)簡稱為"顆粒組合物"）結(jié)構(gòu)的一 例的示意圖。圖1(b)是其部分放大圖。顆粒組合物1含有嵌段共聚物單元2和帶電脂質(zhì) 3。嵌段共聚物單元2具有親水性聚合物鏈段2a和疏水性聚合物鏈段2b，以疏水性聚合物 鏈段2b朝向內(nèi)側(cè)，并且親水性聚合物鏈段2a朝向外側(cè)的狀態(tài)，放射狀配置在顆粒組合物1 內(nèi)。另外，帶電脂質(zhì)3帶有與應(yīng)該內(nèi)包的藥物的電荷相反的電荷，以吸引在疏水性聚合物鏈 段2b側(cè)的狀態(tài)配置。圖1(c)是表示本發(fā)明的顆粒狀醫(yī)藥組合物（以下，有時(shí)簡稱為"醫(yī)藥 組合物"）結(jié)構(gòu)的一例的示意圖。醫(yī)藥組合物1'具有顆粒組合物1和帶有與帶電脂質(zhì)3相 反電荷的藥物4,藥物4通過與帶電脂質(zhì)3靜電結(jié)合被保持在顆粒組合物1內(nèi)。
[0026] 在本說明書中，"帶電脂質(zhì)"是指在生理性pH(例如pH7. 4)的水性介質(zhì)中具有多于 正電荷的負(fù)電荷的陰離子性脂質(zhì)，和在該水性介質(zhì)中具有多于負(fù)電荷的正電荷的陽離子性 脂質(zhì)。因此，在本說明書中，關(guān)于具有陽離子性基團(tuán)和陰離子性基團(tuán)的所謂兩性帶電脂質(zhì)， 也根據(jù)上述基準(zhǔn)處理。
[0027] 帶電脂質(zhì)3在顆粒組合物1內(nèi)通過靜電結(jié)合保持應(yīng)該被內(nèi)包的藥物4。帶電脂質(zhì) 3只要至少在從顆粒組合物1形成的醫(yī)藥組合物1'的儲藏環(huán)境下，帶有與被內(nèi)包的藥物4 的電荷相反的電荷即可。由此，能夠在制造后的儲藏期間中在顆粒組合物1內(nèi)更可靠地保 持藥物4。帶電脂質(zhì)3和藥物4優(yōu)選即使以血中為代表的生理環(huán)境下（例如，pH7. 4)，也帶 有相反的電荷。由此，能夠更可靠地防止在向投藥對象物的輸送途中，藥物4從顆粒組合物 1脫離。
[0028] 帶電脂質(zhì)3由下面的機(jī)理以吸引在疏水性聚合物鏈段側(cè)2b的狀態(tài)配置。顆粒組 合物1通過包括將嵌段共聚物單元2和帶電脂質(zhì)3懸濁在水溶液中的工序的方法形成。嵌 段共聚物單元2的疏水性聚合物鏈段2b因?yàn)槭鞘杷缘?，所以在水溶液中不擴(kuò)散地凝集 存在。親水性聚合物鏈段2a可以在水溶液中擴(kuò)散并自由地運(yùn)動。因此，嵌段共聚物單元2 在水溶液中，以疏水性聚合物鏈段2b朝向內(nèi)側(cè)，親水性聚合物鏈段2a朝向外側(cè)的放射狀配 置。而且，帶電脂質(zhì)3因?yàn)槭杷詮?qiáng)，相比于水或親水性聚合物鏈段2a，與疏水性聚合物鏈 段2b的親和性高，所以被吸引在疏水性聚合物鏈段2b側(cè)，與顆粒組合物1的外周面離開配 置。由此，可以防止顆粒組合物1和醫(yī)藥組合物1'的外周面帶有能夠吸引帶有與帶電脂質(zhì) 3相反電荷的帶電性物質(zhì)（例如，血中的蛋白質(zhì)）的電荷。
[0029] 而且，如果這樣操作懸濁在水溶液中，因?yàn)閹щ娭|(zhì)3和嵌段共聚物單元2以混合 的狀態(tài)顆?；?，所以如圖1(b)所示，帶電脂質(zhì)3不是在顆粒組合物1的環(huán)向以連續(xù)的狀態(tài) 配置，而是在顆粒組合物1的環(huán)向以介于相鄰接的嵌段共聚物單元2之間的方式配置。由 此，在顆粒組合物1中，在顆粒組合物1的環(huán)向相鄰接的帶電脂質(zhì)3之間的接觸被嵌段共聚 物單元2隔斷。因此，在顆粒組合物1中，在顆粒組合物1的環(huán)向相鄰接的帶電脂質(zhì)3之間， 為形成有能夠容納嵌段共聚物單元2程度的間隙G的狀態(tài)，換而言之，處于相鄰接的帶電脂 質(zhì)3之間形成間隙G，在該間隙G中配置有嵌段共聚物單元2的狀態(tài)。帶電脂質(zhì)3和嵌段共 聚物單元2之間的結(jié)合力小于帶電脂質(zhì)3之間的結(jié)合力。因此，如果相比于脂質(zhì)在環(huán)向處 于被連續(xù)配置狀態(tài)的以往型DDS(核糖體），在顆粒組合物1中，容易產(chǎn)生由帶電脂質(zhì)3的脫 落造成的顆粒形狀崩解，其結(jié)果，就可以防止應(yīng)該被內(nèi)包在顆粒（載體）內(nèi)的藥物4被過剩 地保持。在專利文獻(xiàn)4中記載的以DDS為代表的隱形核糖體，因?yàn)橥ㄟ^在形成由脂質(zhì)雙層 膜構(gòu)成的核糖體主體后，使二嵌段共聚物附著在該主體表面而形成，所以，在環(huán)向相鄰接的 脂質(zhì)之間的接觸沒有被嵌段共聚物等隔斷，脂質(zhì)仍舊處于在環(huán)向連續(xù)配置的狀態(tài)。
[0030] 防止顆粒組合物1和醫(yī)藥組合物1'的外周面帶有可以吸引帶電性物質(zhì)的電荷的 狀態(tài)，例如，能夠通過從顆粒組合物1和醫(yī)藥組合物1'測得的電動電位的絕對值在規(guī)定值 以下的范圍而確定。更具體而言，對于醫(yī)藥組合物1'，電動電位的絕對值希望為IOmV以下， 例如為5mV以下，或者例如為3mV以下，優(yōu)選為2mV以下，更優(yōu)選為ImV以下。由于在顆粒 組合物1中含有藥物4,醫(yī)藥組合物1'的電動電位的絕對值容易低于該顆粒組合物1固有 的電動電位的絕對值。因此，對于顆粒組合物1，電動電位的絕對值希望為15mV以下，例如 為12mV以下，或者例如為6mV以下，或者例如為3mV以下，優(yōu)選為2mV以下，更優(yōu)選為ImV以 下。電動電位如下測定：在pH為7. 4的IOmM的HEPES緩沖溶液中，以每ImL該緩沖溶液， 顆粒組合物1或醫(yī)藥組合物1'所含有的帶電脂質(zhì)3的總量為0.Img的方式，添加顆粒組合 物1或醫(yī)藥組合物1'。
[0031] 在本說明書中，電動電位的絕對值作為將小數(shù)點(diǎn)以下四舍五入得到的數(shù)值處理。 例如，電動電位的絕對值為"2mV以下"的狀態(tài)包含小于2. 5mV的狀態(tài)。
[0032] 另外，如后述的實(shí)施例所示，通過控制顆粒組合物1或醫(yī)藥組合物1'的電動電位 的絕對值使其變低，能夠防止顆粒組合物1或醫(yī)藥組合物r的血中凝集。更具體而言，通過 將顆粒組合物1的電動電位的絕對值控制在規(guī)定范圍以下，就能夠防止在血中的凝集，使 得顆粒組合物1的