用于眼藥物遞送的穩(wěn)定的脂質(zhì)體制劑的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及用于眼藥物遞送的穩(wěn)定的脂質(zhì)體制劑。
【背景技術(shù)】
[0002] 眼睛內(nèi)的眼內(nèi)壓（intraocularpressure,I0P)是通過(guò)睫狀體所生成的水狀液的 連續(xù)流予以維持。過(guò)多的流體經(jīng)由鞏膜小梁網(wǎng)（trabecularmeshwork)流出眼睛。如果流 出物被阻塞，則水狀液在眼睛內(nèi)部積累而導(dǎo)致增加的IOP與眼高壓。眼高壓會(huì)損害視神經(jīng)， 導(dǎo)致視神經(jīng)病變及不可逆地視覺受損。此病況被稱為青光眼（glaucoma)，影響超過(guò)全世界 六千萬(wàn)人，并且為第二大致盲原因。增加的IOP是青光眼的關(guān)鍵可改變的危險(xiǎn)因子。
[0003] 傳統(tǒng)用于眼高壓及青光眼病患的治療包括眼手術(shù)以及局部眼藥水滴注。這些治療 方式有缺點(diǎn)。例如，并非所有病患為眼手術(shù)的候選者。再者，雖然局部眼藥水一般被認(rèn)為是 有效的，病患長(zhǎng)期遵守滴注安排是主要問題。假如病患不遵守適當(dāng)?shù)难鬯幩巫才?，局?眼高壓與青光眼無(wú)法妥善被控制。
[0004] 局部眼藥水含有用于控制IOP的藥物，這些藥物典型地通過(guò)降低眼睛所產(chǎn)生 的流體、增加流體流出，或通過(guò)這兩種機(jī)制來(lái)作用。前列腺素類似物[如拉坦前列腺 素（Iatanoprost)]是強(qiáng)效藥物，其可通過(guò)增加房水經(jīng)由葡萄膜鞏膜路徑（uveoscleral pathway)外流來(lái)降低I0P。
[0005] 典型地，只有5%經(jīng)由眼藥水施用至角膜上皮的游離藥物成功地穿過(guò)角膜。因此， 到達(dá)水狀液的藥物的量通常低于治療有效的濃度。這迫使反復(fù)的施用。再者，該藥物的大 量部分經(jīng)由結(jié)膜囊（conjunctivalsac)進(jìn)入循環(huán)而引起非所需的全身性副作用。
[0006] 作為局部眼藥水的替代，持續(xù)釋放IOP-降低藥物的結(jié)膜下注射 (subconjunctivalinjection)可以被用來(lái)直接遞送藥物至作用位點(diǎn)。這樣的遞送模式解 決了病患不遵守滴注安排及低效率的穿過(guò)角膜的藥物傳送的問題。
[0007] 對(duì)于用于結(jié)膜下注射的穩(wěn)定的藥物制劑，且需最低頻率的施用以長(zhǎng)期穩(wěn)定控制 I0P，存在有需要。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 為解決用于眼內(nèi)壓的改善的療法的需求，一種用于眼遞送的穩(wěn)定的脂質(zhì)體制劑被 提供。該制劑包含含有至少一個(gè)脂質(zhì)雙層的脂質(zhì)體，該脂質(zhì)雙層含有卵磷脂。該制劑還含 有被包覆在該脂質(zhì)體內(nèi)的前列腺素F2a。此外，該脂質(zhì)體具有低于2 的直徑。
[0009] 還被提供的是，一種通過(guò)施用上面所描述的制劑來(lái)治療眼疾病的方法。
[0010] 本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式的細(xì)節(jié)闡明于附圖以及以下說(shuō)明中。本發(fā)明的其他 特征、目的以及優(yōu)點(diǎn)將從詳細(xì)說(shuō)明以及權(quán)利要求中變得明顯。所有在此被引述的參考文獻(xiàn) 以其整體被并入本案以作為參考數(shù)據(jù)。
【附圖說(shuō)明】
[0011] 下面的詳細(xì)說(shuō)明參照所附附圖，其中：
[0012] 圖1是拉坦前列腺素從棕櫚?；王；蚜字╬almitoyloleoylphosphatidyl choline，P0PC)脂質(zhì)體中相對(duì)于時(shí)間的累積釋放的圖形；
[0013] 圖2A是針對(duì)含有蛋卵磷脂（eggphosphatidylcholine,eggPC)的脂質(zhì)體及含有 POPC的脂質(zhì)體，在脂質(zhì)體中剩余的拉坦前列腺素的起始量的百分比相對(duì)于時(shí)間的圖形；
[0014] 圖2B是在4°C儲(chǔ)存下，脂質(zhì)體大小相對(duì)于時(shí)間的圖形；
[0015] 圖3是在被包覆在含有POPC的脂質(zhì)體內(nèi)的拉坦前列腺素的單一結(jié)膜下注射之后， 眼內(nèi)壓相對(duì)于天數(shù)的圖形。
【具體實(shí)施方式】
[0016] 如上面所提，一種用于眼遞送的穩(wěn)定的脂質(zhì)體制劑被提供。該制劑包括含有至少 一個(gè)脂質(zhì)雙層的脂質(zhì)體，該脂質(zhì)雙層含有卵磷脂。在一個(gè)實(shí)施方式中，該脂質(zhì)體是單層囊 泡（unilamellarvesicle)。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，該卵磷脂是棕櫚?；王；蚜字?(POPC)。
[0017] 該制劑還含有被包覆在該脂質(zhì)體內(nèi)的前列腺素F2a。該前列腺素F2a可為 拉坦前列腺素、比馬前列腺素（bimatoprost)、曲伏前列腺素（travoprost)或卡前列素 (carboprost)。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，該前列腺素F2a是拉坦前列腺素。
[0018] 前列腺素F2a相對(duì)于POPC的摩爾比可為0. 01 : 1至0. 5 : 1。在一個(gè)實(shí)施方式 中，該摩爾比為0.01 : 1至0.35 : 1。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，該穩(wěn)定的脂質(zhì)體制劑包括 摩爾比為0.01 : 1至0.175 : 1的拉坦前列腺素與P0PC。此外，該脂質(zhì)體可被配制成包括 介于2與25wt%之間的前列腺素F2a。
[0019] 該脂質(zhì)體可具有低于2iim的直徑。在一個(gè)實(shí)施方式中，該脂質(zhì)體的直徑是IOOnm 至300nm，例如100nm、150nm、200nm、250nm及300nm。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，該直徑為 100nm。這些納米大小的裝載有藥物的脂質(zhì)體可以隨著時(shí)間緩慢地釋放前列腺素F2a。
[0020] 在一個(gè)實(shí)施方式中，上面所描述的脂質(zhì)體制劑可以是用于結(jié)膜下注射的預(yù)先組成 的、實(shí)時(shí)可注射的水性制劑。
[0021] 還落在本發(fā)明的范疇的是一種用于治療眼疾病的方法，其依賴于施用上面所描述 的脂質(zhì)體制劑。該眼疾病可為眼高壓或青光眼。優(yōu)選地，該疾病是青光眼。在一個(gè)實(shí)施方 式中，該脂質(zhì)體制劑通過(guò)結(jié)膜下注射而被施用。
[0022] 施用上面所描述的脂質(zhì)體制劑可以在注射后一小時(shí)顯著地降低I0P。更具體地，施 用該脂質(zhì)體制劑致使IOP相較于治療前IOP降低至少30% (例如30%、40%及50% )。有 利地，在單一注射之后，IOP維持被降低的歷時(shí)長(zhǎng)達(dá)4至6個(gè)月。
[0023] 如上面所提，所注射的脂質(zhì)體制劑可以緩慢地釋放前列腺素F2a(例如拉坦前列 腺素）超過(guò)數(shù)個(gè)月。例如，在該脂質(zhì)體內(nèi)的藥物的50%初始量可以在注射該制劑至眼睛內(nèi) 之后的10天內(nèi)被釋放。優(yōu)選地，該藥物的65%在注射的28天內(nèi)被釋放?？骨喙庋鬯幬锏?慢性局部施用通常會(huì)誘發(fā)眼表面疾病。該脂質(zhì)體的緩釋特征免除每天施用這些藥物的需 要，由此降低或消除伴隨的副作用。
[0024] 典型地，不穩(wěn)定的藥物在_20°C或更低的溫度下凍干或冷凍，以避免活性隨著時(shí)間 喪失。特別是，凍干或冷凍裝載有藥物的脂質(zhì)體的持續(xù)釋放制劑會(huì)不利地影響該藥物釋放 圖形，致使在該藥物有效性上不可預(yù)期的變異性。
[0025] 有利地，該脂質(zhì)體制劑是穩(wěn)定的歷時(shí)相當(dāng)長(zhǎng)期的時(shí)間。例如，該制劑可以在4°C下 儲(chǔ)存歷時(shí)多達(dá)6個(gè)月（例如1、2、3、4、5及6個(gè)月），而無(wú)脂質(zhì)體的聚集或從該脂質(zhì)體中損失 藥物。因此，該脂質(zhì)體制劑可以在4°C下儲(chǔ)存在小瓶中歷時(shí)長(zhǎng)期間，繼而可以直接地從該小 瓶中立即被注射。
[0026] 不用進(jìn)一步詳細(xì)闡述，可以相信的是，基于上面的詳細(xì)說(shuō)明，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以 利用本發(fā)明達(dá)至其最大程度。在下面的具體實(shí)施例僅要被解釋為例示說(shuō)明，而非以任何方 式限制本公開內(nèi)容的剩余部分。
[0027]實(shí)施例1:制備用于藥物釋放研究的大單層囊泡(largeunilamellarvesicles, LUV)
[0028] -種薄膜水合技術(shù)被用來(lái)配制用于藥物釋放速率的裝載有拉坦前列腺素的POPC 脂質(zhì)體。簡(jiǎn)言之，POPC被稱重并且溶于氯仿：甲醇（2 :lv/v)溶劑混合物中。拉坦前列腺 素（在乙腈中的2mg/ml儲(chǔ)備溶液）以藥物：脂質(zhì)摩爾比為0. 175 : 1而被加入至該脂質(zhì)溶 劑混合物中并且維持在40°C下。該溶劑混合物被加入至一個(gè)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中的圓底燒瓶?jī)?nèi)， 該旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器被連結(jié)至維持在40°C的水浴。該燒瓶在低壓下以IOOrpm旋轉(zhuǎn)歷時(shí)1小時(shí)以 移除溶劑，由此形成薄的裝載有藥物的脂質(zhì)膜。等張的磷酸鹽緩沖液（PBS) (150mM、pH5. 5) 被加入至此膜，以形成多層囊泡（multilamellarvesicles,MLV)。這些MLV經(jīng)由聚碳酸酯 濾器（0. 2iim-0. 08iim)擠壓10次。該擠壓致使形成具有大小分布為0. 09-0. 12iim的直 徑的LUV。
[0029]實(shí)施例2:制各用于藥物穩(wěn)定件研究的LUV
[0030] 裝載有藥物的LUV還被制備用于穩(wěn)定性研究。POPC被溶于PBC(在pH6. 7下）中， 并在室溫下以恒定的