苦參總生物堿提取物的制備方法及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種苦參總生物堿提取物的制備方法及其應(yīng)用，屬于中藥制藥技術(shù)領(lǐng) 域。
【背景技術(shù)】
[0002] 苦參為豆科槐屬植物苦參H )的干燥根，現(xiàn)代臨床藥理 研宄表明，其主要化學(xué)成分及藥效物質(zhì)基礎(chǔ)一一生物堿，是一類具有重要生物活性的天然 產(chǎn)物，其主要成分有氧化苦參堿、苦參堿、槐果堿、槐定堿等多種生物堿，以氧化苦參堿和苦 參堿含量最高。苦參總生物堿具有抗菌消炎、抗病毒、抗腫瘤、殺蟲，升白細(xì)胞、免疫調(diào)節(jié)、擴(kuò) 張血管、降低血脂、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、解熱、平喘、抗心、律失常、抗缺氧、利尿等藥理作用。
[0003] 抗病毒作用：苦參總生物堿能夠進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)影響病毒的生物合成，主要表現(xiàn)為抑 制病毒蛋白質(zhì)的合成。臨床上可用于治療病毒性肝炎、病毒性心肌炎、病毒性角膜炎等。
[0004] 抗菌消炎作用：苦參堿和氧化苦參堿均可有效抑制IgE及其特異性抗原引起的肥 大細(xì)胞釋放組織胺、白三烯等介質(zhì)。臨床上可用于治療急性菌痢、扁桃體炎、乳腺炎、盆腔 炎、淋巴結(jié)炎、支氣管炎、蕁麻瘆、濕瘆、急性腎炎、宮頸炎、陰道炎、鼻炎及皮炎等。
[0005] 殺蟲作用：苦參總生物堿提取物可作為廣譜的植物源性殺蟲抗菌劑應(yīng)用于天然農(nóng) 藥的生產(chǎn)，其具有強(qiáng)烈的觸殺和胃殺的作用和較強(qiáng)的滲透性，害蟲不易產(chǎn)生抗藥性。據(jù)一藥 三效的作用，即殺蟲、抑菌、增產(chǎn)三重功效。具有無殘留、無不良刺激氣味、不影響農(nóng)產(chǎn)品的 質(zhì)量、品味、安全性高等特點(diǎn)。主要應(yīng)用于蔬菜，茶葉，果樹，煙草等一些農(nóng)作物的殺蟲。目前 市場上以苦參堿制劑對蔬菜刺吸式口器昆蟲蚜蟲，鱗翅目昆蟲菜青蟲、茶毛蟲、小菜蛾，以 及茶小綠葉蟬等均有理想防效。另外對于動(dòng)物體內(nèi)寄生蟲也有良好的殺滅作用，如對阿米 巴原蟲、賈第蟲、毛滴蟲均有殺滅作用，可以減輕寄生蟲對培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞毒性作用， 還能延遲該寄生蟲導(dǎo)致的皮下膿腫的發(fā)展，可用于治愈毛蟲病、蟯蟲病等。
[0006] 抗腫瘤作用：苦參總生物堿提取物對腫瘤細(xì)胞具有選擇性殺傷作用，通過改變細(xì) 胞核酸的分子序列抑制腫瘤的生長。除了抑制腫瘤細(xì)胞增殖，促進(jìn)其良性分化和凋亡，抑制 腫瘤轉(zhuǎn)移之外，還有抑制腫瘤新生血管形成、減輕致腫瘤炎癥和抑制腫瘤耐藥性、減低化療 不良作用、增強(qiáng)腫瘤宿主免疫功能、腫瘤預(yù)防性化療等多個(gè)方面。可用于肝癌、胃癌、腸癌、 肺癌、性激素依賴性癌癥，如子宮癌、卵巢癌、前列腺癌、乳腺癌等癌癥的治療。
[0007] 此外，苦參堿還具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、解熱、降溫、利尿、抗過敏、耐缺氧、平喘作用。
[0008] 并且，苦參總生物堿提取物，是多種生物堿的混合天然產(chǎn)物，多以苦參堿為結(jié)構(gòu)代 表，屬于四環(huán)喹諾里西啶類化合物，分子骨架可看成兩個(gè)噻嗪啶的稠合體，包括氧化苦參 堿、苦參堿、槐果堿、槐定堿等等，一起應(yīng)用會產(chǎn)生協(xié)同作用。
[0009] 然而苦參中藥材或者飲片受地域生態(tài)環(huán)境、加工及儲備等因素的影響，導(dǎo)致苦參 內(nèi)在質(zhì)量不穩(wěn)定，因此將起到具有上述功效的成分一一生物堿提取出來，以生物堿提取物 的形式進(jìn)行施藥，用藥劑量更精準(zhǔn)，藥物品質(zhì)及含量更穩(wěn)定，藥效更確切。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010] 本發(fā)明的目的之一是克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷和不足，提供一種綠色、對環(huán)境相對友 好、極具產(chǎn)業(yè)化潛力的苦參總生物堿提取物的制備方法，其總生物堿提取率高、純度高、穩(wěn) 定性高，提取過程能耗低、所用試劑和材料可再生。
[0011] 本發(fā)明的目的之二是提供苦參總生物堿有效部位提取物在抗菌消炎、抗病毒、抗 腫瘤、殺蟲、升白細(xì)胞、免疫調(diào)節(jié)、擴(kuò)張血管、降低血脂、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、解熱、平喘等多方面的藥 用用途。
[0012] 本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用技術(shù)方案是： 一種苦參總生物堿提取物的制備方法，包括如下步驟： (1)提?。?第一步：粉碎：取凈選好的苦參根藥材干燥后，粉碎成中粉，粒度為65目~85目； 第二步：浸潤：以pH=2~3的HCl水溶液浸潤12h，浸潤溶劑量與苦參中粉量的體積比為 2:1 ； 第三步：滲漉：以3~5mV (kg · min)的流速滲漉提取，收集6~10倍料液比的提取液。
[0013] (2)分離 第四步：等電點(diǎn)法除雜：以pH梯度沉淀法去除蛋白質(zhì)、鞣質(zhì)和多糖雜質(zhì)：將提取液酸堿 度調(diào)為pH=3,靜置Ih后以離心機(jī)2000r/min離心2min取上清液，調(diào)節(jié)提取液pH=4,靜置Ih 后2000r/min離心2min取上清液，以此類推，直至調(diào)節(jié)提取液pH=14,靜置Ih后以2000r/ min離心2min，得到較為清澈的提取液； 第五步：還原提取液：每100g苦參為原料的苦參中粉通過上述步驟所得提取液，在 pH=2~3的條件下每100g苦參原料在此步加入0. 20g~0. 25g亞硫酸鈉，充分溶解后，靜置 2. 5~3. Oh ; 第六步：上柱吸附：以大孔樹脂進(jìn)一步分離生物堿，去除其他雜質(zhì)：上柱液PH調(diào)為 11~12,上柱量為IOmg生物堿/mL樹脂，NaCl濃度為2~3mol · Γ1，上柱流速=1. 5~2BV/h ; 第七步：洗脫解吸附：以60%~70%乙醇（pH=2~3)作為洗脫液，解吸流速為l~2BV/h，收 集洗脫液至無生物堿反應(yīng)。
[0014] (3)純化 第八步：所得洗脫液經(jīng)減壓濃縮后，以氯仿進(jìn)行4段萃取，所得萃取液經(jīng)減壓濃縮，真 空干燥，得到苦參總生物堿提取物。
[0015] 經(jīng)定性定量分析檢測：本發(fā)明方法中得到的苦參總生物堿提取物中，苦參總生物 堿的質(zhì)量含量以苦參堿、槐果堿和槐定堿含量之和計(jì)，為95%以上，可見，通過本發(fā)明方法， 可分離制得高含量的苦參總生物堿提取物。
[0016] 另外，現(xiàn)代研宄證實(shí)，苦參生物堿提取物具有顯著的抗菌消炎；抗病毒；抗腫瘤； 殺蟲；升白細(xì)胞、免疫調(diào)節(jié)；擴(kuò)張血管、降低血脂；鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、解熱；平喘等功能，由本發(fā)明 方法制備的苦參總生物堿提取物可用于制備抗病毒類藥物(如治療病毒性肝炎、病毒性心 肌炎、病毒性角膜炎等病癥的藥物)、抗菌消炎類藥物(如治療急性菌痢、扁桃體炎、乳腺炎、 盆腔炎、淋巴結(jié)炎、支氣管炎、蕁麻瘆、濕瘆、急性腎炎、宮頸炎、陰道炎、鼻炎及皮炎等病癥 的藥物)、抗菌消炎類日用品(如洗手液、婦科洗液、衛(wèi)生巾、濕巾、紙尿褲等);殺蟲類藥物(如 農(nóng)業(yè)殺蟲抗菌劑、動(dòng)物殺蟲藥、驅(qū)蟲藥等）；抗腫瘤類藥物(如治療肝癌、胃癌、腸癌、肺癌、子 宮癌、卵巢癌、前列腺癌、乳腺癌等的藥物）；此外還有升白、免疫調(diào)節(jié)類藥物；擴(kuò)張血管、降 低血脂類藥物；鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、解熱、降溫類中樞神經(jīng)藥物；抗過敏、平喘類藥物等。可制成片 劑、散劑、顆粒劑、丸劑、液體制劑、膠囊劑、外用膏劑、栓劑、注射劑，膠劑、膜劑等臨床接收 的藥物劑型，具有廣泛的藥用開發(fā)價(jià)值。
[0017] 本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明提供了總生物堿提取率高、純度高、穩(wěn)定性高、質(zhì)量 可控、藥效顯著的苦參總生物堿提取物；所述的苦參總生物堿提取物中，總生物堿含量達(dá) 98%以上。
[0018] 本發(fā)明所述的制備方法中采用樹脂進(jìn)行生物堿與其他成分的分離，所用試劑和材 料均可