豬傳染性胃腸炎、流行性腹瀉二聯(lián)活疫苗稀釋液的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種活疫苗稀釋液，尤其豬傳染性胃腸炎、流行性腹瀉二聯(lián)活疫苗稀釋液。
【背景技術(shù)】
[0002]豬流行性腹瀉與豬傳染性胃腸炎在世界范圍內(nèi)廣泛流行，尤其在韓國(guó)，日本和中國(guó)等亞洲國(guó)家。它給養(yǎng)豬業(yè)帶來了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。PED造成豬的成活率減少、整齊度差、減緩生長(zhǎng)速度、增重減少、推遲上市時(shí)間、降低飼料利用率、增加額外消耗、降低牲畜抗病力、增加對(duì)細(xì)菌、病毒的易感性、增加發(fā)病率，提高治療費(fèi)用、牲畜脫水、休克、死亡、豬拉稀體重下降等嚴(yán)重后果。
[0003]目前，對(duì)于豬流行性腹瀉及豬傳染性胃腸炎還無確切有效的治療方法，因此對(duì)這兩種疾病的防控，多采用“預(yù)防為主，養(yǎng)防結(jié)合”的方針。為了有效的控制豬流行性腹瀉及豬傳染性胃腸炎，我國(guó)已開發(fā)出用于防治豬流行性腹瀉及豬傳染性胃腸炎的疫苗，但是對(duì)其稀釋劑，特別是同時(shí)適用于豬傳染性胃腸炎、流行性腹瀉二聯(lián)活疫苗稀釋液研宄較少，現(xiàn)有的疫苗稀釋液效果對(duì)于豬傳染性胃腸炎、流行性腹瀉二聯(lián)活疫苗的效果也不佳。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]針對(duì)上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種豬傳染性胃腸炎、流行性腹瀉二聯(lián)活疫苗稀釋液，可以提高疫苗免疫效果，使豬群獲得更好的免疫保護(hù)力。具體技術(shù)方案為:
[0005]豬傳染性胃腸炎、流行性腹瀉活疫苗稀釋液，由以下步驟制備所得:
[0006](I)A 液制備
[0007]每升A 液中含 8g 的 NaCK0.2g 的 KCl,3.58g 的 Na2HPO4.12H20、0.24g 的 KH2PO4,以上物質(zhì)溶解于注射用水中，在121°C溫度、100千帕壓強(qiáng)條件下進(jìn)行滅菌處理；
[0008](2) B 液制備
[0009]水相:每升水中含有8g 的 NaCK0.2g 的 KCl,3.58g 的 Na2HPO4.12H20、0.24g 的KH2PO4,以上物質(zhì)溶解于注射用水中；再加入黃芪多糖、蜂膠、吐溫80，加入后黃芪多糖濃度為0.5?5% w/v，蜂膠濃度為10?100mg/ml，吐溫80濃度為I?5% w/v，過濾除菌后備用；
[0010]油相:礦物油121°C、100千帕壓強(qiáng)滅菌后備用；
[0011]將油相緩慢加入水相中并攪拌，油相與水相重量比1: 2，油相加入完畢后再使用高剪切乳化機(jī)以4000r/min乳化處理30min得到B液；
[0012](3)稀釋液的使用:使用時(shí)A液與B液按質(zhì)量比1:1混合均勻。
[0013]本發(fā)明提供的豬傳染性胃腸炎、流行性腹瀉二聯(lián)活疫苗稀釋液，可以提高疫苗免疫效果，使豬群獲得更好的免疫保護(hù)力。
【附圖說明】
[0014]圖1 I?3日齡仔豬TGE中和抗體效價(jià)；
[0015]圖2 I?3日齡仔豬PED中和抗體效價(jià)；
[0016]圖3母豬TGE中和抗體效價(jià)；
[0017]圖4母豬PED中和抗體效價(jià)。
【具體實(shí)施方式】
[0018]結(jié)合實(shí)施例說明本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】。
[0019]豬傳染性胃腸炎、流行性腹瀉活疫苗稀釋液，由以下步驟制備所得:
[0020](I)A 液制備
[0021]每升A 液中含 8g 的 NaCK0.2g 的 KCl,3.58g 的 Na2HPO4.12H20、0.24g 的 KH2PO4,以上物質(zhì)溶解于注射用水中，在121°C溫度、100千帕壓強(qiáng)條件下進(jìn)行滅菌處理；
[0022](2) B 液制備
[0023]水相:每升水中含有8g 的 NaCK0.2g 的 KCl,3.58g 的 Na2HPO4.12H20、0.24g 的KH2PO4,以上物質(zhì)溶解于注射用水中；再加入黃芪多糖、蜂膠、吐溫80，加入后黃芪多糖濃度為0.5?5% w/v，蜂膠濃度為10?100mg/ml，吐溫80濃度為I?5% w/v，過濾除菌后備用；
[0024]油相:礦物油121°C、100千帕壓強(qiáng)滅菌后備用；
[0025]將油相緩慢加入水相中并攪拌，油相與水相重量比1: 2，油相加入完畢后再使用高剪切乳化機(jī)以4000r/min乳化處理30min得到B液；
[0026](3)稀釋液的使用:使用時(shí)A液與B液按質(zhì)量比1:1混合均勻。
[0027]將以上實(shí)施例所得的稀釋液與對(duì)比例子進(jìn)行對(duì)比實(shí)驗(yàn):
[0028]1、疫苗稀釋:使用本實(shí)施例制得的稀釋液、磷酸鹽緩沖液PBS分別將傳染性胃腸炎、流行性腹瀉二聯(lián)活疫苗稀釋至I頭份/ml。
[0029]2、免疫對(duì)比
[0030](1)1?3日齡仔豬:1?3日齡仔豬15頭，分為Al、B1、C13組，每組5頭。
[0031]Al組注射現(xiàn)有本實(shí)施例制得的稀釋液稀釋后的疫苗，1.0ml/頭；B1組注射PBS稀釋后的疫苗，1.0ml/頭；C1組注射PBS作為空白對(duì)照組，1.0ml/頭。免疫后第0、7、14、21、28及35天分別采血分離血清，測(cè)定PED及TGE中和抗體效價(jià)，計(jì)算每組仔豬抗體效價(jià)的幾何平均值并進(jìn)行比較分析。
[0032](2)母豬:產(chǎn)前28?35日齡母豬15頭，分為A2、B2、C23組，每組5頭。A2組組注射實(shí)施例制得的稀釋液稀釋后的疫苗；B2組注射PBS稀釋后的疫苗，1.0ml/頭；C2組注射PBS作為空白對(duì)照組，1.0ml/頭。免疫后第0、14、28、35分別采血分離血清，測(cè)定PED及TGE中和抗體效價(jià)，計(jì)算每組母豬抗體效價(jià)的幾何平均值并進(jìn)行比較分析。
[0033]3、結(jié)果分析
[0034](1)1?3日齡仔豬:稀釋液組I?3日齡在免疫后第7、14、21、28及35天產(chǎn)生的TGE抗體水平明顯高于PBS組及空白對(duì)照組；免疫后第7、14、21、28及35天產(chǎn)生的PED抗體水平明顯高于PBS組及空白對(duì)照組，并且在疫苗免疫后第7天稀釋液組PED抗體效價(jià)幾何平均值高于1: 32，結(jié)果見圖1及圖2。
[0035](2)母豬:稀釋液組母豬免疫后第14、28、35及生產(chǎn)當(dāng)天TGE抗體水平明顯高于PBS組及空白對(duì)照組；免疫后第14、28及35天PED抗體水平明顯高于PBS組及對(duì)照組，結(jié)果見圖3及圖4。母豬PED及TGE高抗體水平，有助于初產(chǎn)仔豬通過母源抗體獲得保護(hù)力，從而減少或者減輕由傳染性胃腸炎或流行性腹瀉造成的疾病甚至死亡。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.豬傳染性胃腸炎、流行性腹瀉活疫苗稀釋液，其特征在于，由以下步驟制備所得: (1)A液制備每升 A 液中含 8g 的 NaCK0.2g 的 KCl,3.58g 的 Na2HPO4.12H20、0.24g 的 KH2PO4,以上物質(zhì)溶解于注射用水中，在121°C溫度、100千帕壓強(qiáng)條件下進(jìn)行滅菌處理； (2)B液制備水相:每升水中含有 8g 的 NaCK0.2g 的 KCl,3.58g 的 Na2HPO4.12H20、0.24g 的 KH2PO4,以上物質(zhì)溶解于注射用水中；再加入黃芪多糖、蜂膠、吐溫80，加入后黃芪多糖濃度為.0.5?5% w/v，蜂膠濃度為10?100mg/ml，吐溫80濃度為I?5% w/v，過濾除菌后備用； 油相:礦物油121°C、100千帕壓強(qiáng)滅菌后備用； 將油相緩慢加入水相中并攪拌，油相與水相重量比1: 2，油相加入完畢后再使用高剪切乳化機(jī)以4000r/min乳化處理30min得到B液； (3)稀釋液的使用:使用時(shí)A液與B液按質(zhì)量比1:1混合均勻。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種活疫苗稀釋液，尤其豬傳染性胃腸炎、流行性腹瀉二聯(lián)活疫苗稀釋液，包括A液與B液，每升A液中含8g的NaCl、0.2g的KCl、3.58g的Na2HPO4·12H2O、0.24g的KH2PO4，B液除了含有A液中物質(zhì)，還加入黃芪多糖、蜂膠、吐溫80和礦物油，使用時(shí)A液與B液按質(zhì)量比1∶1混合均勻。本發(fā)明提供的豬傳染性胃腸炎、流行性腹瀉二聯(lián)活疫苗稀釋液，可以提高疫苗免疫效果，使豬群獲得更好的免疫保護(hù)力。
【IPC分類】A61K47-36, A61K47-26, A61P1-12, A61K47-44, A61K39-225, A61K39-215, A61P1-00, A61K47-04, A61P31-14
【公開號(hào)】CN104815334
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510184521
【發(fā)明人】方鵬飛, 邱文英, 徐靜, 張麗燕, 郝偉偉
【申請(qǐng)人】四川省華派生物制藥有限公司
【公開日】2015年8月5日
【申請(qǐng)日】2015年4月17日