糅漆樹果丁酰膽堿酯酶抑制活性提取物及其組合物的醫(yī)藥用途和制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種糅漆樹果丁酰膽堿酯酶抑制活性提取物及 其組合物的醫(yī)藥用途和制備方法以及它在治療阿爾茨海默?。ˋD)等方面的醫(yī)藥用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 在高通量篩選的過程中，本發(fā)明意外地發(fā)現(xiàn)糅漆樹果具有很好的抑制丁酰膽堿酯 酶的活性，該活性提取物及其組合物有望應(yīng)用于治療阿爾茨海默病（AD)等方面的醫(yī)藥用 途。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明所解決的技術(shù)問題是提供一種糅漆樹果提取物。
[0004] 本發(fā)明還提供了以糅漆樹果提取物為主要活性成分的組合物。
[0005] 本發(fā)明同時(shí)提供了糅漆樹果提取物及其組合物的制備和應(yīng)用。
[0006] 本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的： 維吾爾藥糅漆樹果經(jīng)甲醇超聲提取，提取液濃縮后，用硅膠（SiO2)柱分離，上樣后的硅 膠柱，用石油醚-丙酮混合溶劑梯度洗脫(石油醚-丙酮，比例見表1 )，各石油醚-丙酮比例 混合溶劑洗脫液，濃縮，干燥后，利用體外篩選體系測(cè)試其丁酰膽堿酯酶抑制活性，意外地 發(fā)現(xiàn)先用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮，100:5,體積比)洗脫，繼用石油醚-丙酮混 合溶劑(石油醚-丙酮，100:12,體積比)洗脫得到的石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮， 100:12,體積比)洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，干燥，即為丁酰膽堿酯酶抑制活性提取物。而其他 比例的洗脫部位，沒有丁酰膽堿酯酶抑制活性的作用。最優(yōu)為先用石油醚-丙酮混合溶劑 (石油醚-丙酮，100:5,體積比)洗脫25倍柱體積，繼用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙 酮，100:12,體積比）洗脫20倍柱體積，洗脫液干燥后所得提取物即為本發(fā)明丁酰膽堿酯酶 抑制活性的提取物。丁酰膽堿酯酶抑制活性的提取物可以通過以上方法得到富集，從而與 其他雜質(zhì)類成分分離開。該糅漆樹果丁酰膽堿酯酶抑制活性提取物從未見文獻(xiàn)報(bào)道，其薄 層色譜（TLC)分析結(jié)果見圖1，TLC分析條件：GF254硅膠板，展開系統(tǒng)：石油醚：乙酸乙酯： 丙酮（3:1:1)顯色方法：香草醛-硫酸顯色。
[0007] 維吾爾藥糅漆樹果經(jīng)甲醇超聲提取，提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠 柱，用石油醚-丙酮混合溶劑梯度洗脫(石油醚-丙酮，比例見表1)，各石油醚-丙酮比例 混合溶劑洗脫液，濃縮，干燥后，利用體外篩選體系測(cè)試其丁酰膽堿酯酶抑制活性，意外地 發(fā)現(xiàn)先用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮，100:30,體積比）洗脫，繼用石油醚-丙酮 混合溶劑(石油醚-丙酮，100:50,體積比）洗脫得到的石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙 酮，100:50,體積比）洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，干燥，即為丁酰膽堿酯酶抑制活性提取物。而 其他比例的洗脫部位，沒有丁酰膽堿酯酶抑制活性的作用。特別地，優(yōu)選為先用石油醚-丙 酮混合溶劑(石油醚-丙酮，100:30,體積比)洗脫15倍柱體積，繼用石油醚-丙酮混合溶劑 (石油醚-丙酮，100:50,體積比)洗脫25倍柱體積，洗脫液干燥后即為本發(fā)明丁酰膽堿酯酶 抑制活性的提取物。丁酰膽堿酯酶抑制活性的提取物可以通過以上方法得到富集，從而與 其他雜質(zhì)類成分分離開。該糅漆樹果丁酰膽堿酯酶抑制活性提取物從未見文獻(xiàn)報(bào)道，其薄 層色譜（TLC)分析結(jié)果見圖2, TLC分析條件：GF254硅膠板，展開系統(tǒng)：石油醚：乙酸乙酯： 丙酮（3:1:1)顯色方法：香草醛-硫酸顯色。
[0008] 具體，發(fā)現(xiàn)過程如下： 1、糅漆樹果經(jīng)甲醇超聲提取物的制備 取維吾爾藥糅漆樹果20 g，經(jīng)100 mL甲醇超聲提取15 min，提取液濃縮后，得提取物 SN0053A，樣品上柱：2. 7275 g，拌樣硅膠3 g，空白硅膠15g，石油醚-丙酮系統(tǒng)。
[0009] 2、石油醚-丙酮混合溶劑梯度洗脫方法和結(jié)果 取維吾爾藥糅漆樹果20 g，經(jīng)100 mL甲醇超聲提取15 min，提取液濃縮后，得提取物 SN0053A，2. 7275上柱，甲醇溶解，共用甲醇15 mL。上硅膠柱色譜，拌樣硅膠3 g，空白硅膠 15 g，玻璃柱內(nèi)徑2. 5cm，石油醚-丙酮系統(tǒng)梯度洗脫(條件見表1)，柱體積45 mL，每個(gè)梯 度洗脫300mL，得到，各個(gè)濃度提取洗脫液的洗脫物，回收溶劑，即得，石油醚：丙酮梯度洗 脫提取物，TLC分析結(jié)果見圖3, TLC分析條件：GF254硅膠板，展開系統(tǒng)：石油醚：乙酸乙酯： 丙酮（3:1:1)顯色方法：香草醛-硫酸顯色。
[0010] 表 1
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種糅漆樹果提取物，其特征為糅漆樹果經(jīng)溶劑超聲提取，提取液濃縮后，用硅膠柱 分離，上樣后的硅膠柱，先用體積比為100:5的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫，繼用體積比為 100:12的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫，用100:12石油醚-丙酮混合溶劑洗脫的洗脫液經(jīng) 回收有機(jī)溶劑，干燥，即為該提取物；或一種糅漆樹果提取物，其特征為糅漆樹果經(jīng)溶劑超 聲提取，提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱，先用石油醚-丙酮混合溶劑(石油 醚-丙酮，100:30,體積比）洗脫，繼用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮，100:50,體積 比）洗脫，用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮，100:50,體積比）洗脫的洗脫液經(jīng)回收 有機(jī)溶劑，干燥，即為該提取物。
2. 如權(quán)利要求1所述糅漆樹果提取物，其特征為，其中，提取溶劑可以為甲醇、石油醚、 水、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶劑或乙醇水混合溶劑，優(yōu)條件為甲醇和95%乙醇； 提取物提取用有機(jī)溶劑用量為藥材重量的2-50倍(重量/體積比)。
3. 如權(quán)利要求1所述糅漆樹果提取物，其特征為糅漆樹果經(jīng)溶劑超聲提取，提取液濃 縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱，先用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮，100:5， 體積比)洗脫，洗脫2-50倍柱體積，繼用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮，100:12,體積 比)洗脫，洗脫2-50倍柱體積，用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮，100:12,體積比)洗 脫的洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，干燥，即為該提取物；或其特征為糅漆樹果經(jīng)溶劑超聲提取， 提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱，先用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙 酮，100:30,體積比）洗脫，洗脫2-50倍柱體積，繼用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙 酮，100:50,體積比）洗脫，洗脫2-50倍柱體積，用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮， 100:50,體積比）洗脫的洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，干燥，即為該提取物。
4. 如權(quán)利要求1-3任何一項(xiàng)所述的一種維吾爾藥糅漆樹果提取物，其特征為，用于洗 脫的石油醚-丙酮混合溶劑的洗脫體積為2-50倍柱體積。
5. 權(quán)利要求1所述提取物的制備方法，其特征為：糅漆樹果經(jīng)有機(jī)溶劑超聲提取，提 取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱，先用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮， 100:5,體積比）洗脫2-50倍柱體積，繼用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮，100:12， 體積比）洗脫2-50倍柱體積，用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮，100:12,體積比）洗 脫的洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，干燥，即為該提取物；以上條件最優(yōu)為先用石油醚-丙酮混合 溶劑(石油醚-丙酮，100:5,體積比）洗脫25倍柱體積，繼用石油醚-丙酮混合溶劑(石油 醚-丙酮，100:12,體積比)洗脫20倍柱體積；或糅漆樹果經(jīng)有機(jī)溶劑超聲提取，提取液濃縮 后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱，先用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮，100:30,體 積比）洗脫2-50倍柱體積，繼用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮，100:50,體積比）洗 脫2-50倍柱體積，用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮，100:50,體積比)洗脫的洗脫液 經(jīng)回收有機(jī)溶劑，干燥，即為該提取物；以上條件最優(yōu)為先用石油醚-丙酮混合溶劑(石油 醚-丙酮，100:30,體積比）洗脫15倍柱體積，繼用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮， 100:50，體積比）洗脫25倍柱體積。
6. -種藥物組合物，其特征在于，包含權(quán)利要求1-5任何一項(xiàng)所述的維吾爾藥糅漆樹 果提取物和藥學(xué)上可接受的載體。
7. -種藥物制劑，其特征在于，包含權(quán)利要求1-5任何一項(xiàng)所述的糅漆樹果提取物或 權(quán)利要求6所述的藥物組合物。
8. 如權(quán)利要求7所述的藥物制劑，其特征在于，所述的制劑為固體分散體、環(huán)糊精包合 物、分散片。
9. 權(quán)利要求1-5任何一項(xiàng)所述提取物或權(quán)利要求6所述的組合物或權(quán)利要求7所述的 藥物制劑在制備丁酰膽堿酯酶抑制活性藥物中的應(yīng)用。
10. 如權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的丁酰膽堿酯酶抑制活性，可用于治 療阿爾茨海默?。ˋD)等方面的醫(yī)藥用途。
11. 如權(quán)利要求1-5任何一項(xiàng)所述的維吾爾藥肉根黃芪膠提取物，其特征在于，用TLC 檢測(cè)法；其色譜條件：GF254硅膠板，展開系統(tǒng)：石油醚：乙酸乙酯：丙酮（3:1:1)顯色方法： 香草醛-硫酸顯色。
【專利摘要】本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種糅漆樹果丁酰膽堿酯酶抑制活性提取物及其組合物的制備方法以及它在治療阿爾茨海默病(AD)等方面的醫(yī)藥用途。所述的提取物通過如下方法獲得：先用石油醚-丙酮混合溶劑（石油醚-丙酮，100:5，體積比）洗脫，繼用石油醚-丙酮混合溶劑（石油醚-丙酮，100:12，體積比）洗脫，用石油醚-丙酮混合溶劑（石油醚-丙酮，100:12，體積比）洗脫的洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，干燥，即為該丁酰膽堿酯酶抑制活性提取物，或先用石油醚-丙酮混合溶劑（石油醚-丙酮，100:30，體積比）洗脫，繼用石油醚-丙酮混合溶劑（石油醚-丙酮，100:50，體積比）洗脫，用石油醚-丙酮混合溶劑（石油醚-丙酮，100:50，體積比）洗脫的洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，干燥，即為該丁酰膽堿酯酶抑制活性提取物。
【IPC分類】G01N30-90, A61K36-22, A61P25-28
【公開號(hào)】CN104825508
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510058780
【發(fā)明人】王金輝, 熱娜·卡斯木, 黃健, 李國(guó)玉, 張瑾, 王小青, 馬慶東, 張珂
【申請(qǐng)人】新疆醫(yī)科大學(xué)
【公開日】2015年8月12日
【申請(qǐng)日】2015年2月4日