瑞諾木素在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及瑞諾木素在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。【背景技術(shù)】 瑞諾木素（Reynosin)，mp. 145-146°c，分子式為C15H2Q03，分子量為248. 32,結(jié)構(gòu)式為：
瑞諾木素是從菊科（Compositae)奇蒿Artemisia anomalaS.Moore的地上部分分離得到一種倍半貓內(nèi)醋類化合物。藥理研宄表明，瑞諾木 素對對人塑小細朐肺癌株和人塑結(jié)腸癌細朐株的IC50分別為10. 7yM和8. 9yM(對照 品Cisplatin為l.OyM和3.OyM)。通過文獻檢索，國內(nèi)尚未見瑞諾木素用于制備抗腫 瘤藥物。
【發(fā)明內(nèi)容】
為滿足臨床需要，擴大用藥品種，更好地治療癌癥，應(yīng)用瑞諾木素制備抗 腫瘤藥物。本發(fā)明的技術(shù)方案如下：本發(fā)明所述的瑞諾木素，其制備方法包括以下步驟： (1)取奇蒿的地上部分粉碎，按固液體積比為5 :1. 5-2加入夾帶劑，在壓力22-35MPa，溫度 35-48°C條件下，通入液態(tài)0)2萃取90-180min，在壓力7-9MPa，溫度30-35°C條件下解析，收 集萃取液；（2)將步驟（1)中得到的萃取液加硅藻土攪拌脫色，過濾得到脫色液；（3)將步 驟（2)中得到的脫色液濃縮至相對密度為1. 12,上中性氧化鋁柱，用石油醚-乙酸乙酯洗脫 純化，得到瑞諾木素粗品；（4)粗品經(jīng)過制備型高效液相色譜精制得到高純度的瑞諾木素。 所述步驟（1)中，夾帶劑為甲醇或乙醇溶液。所述步驟（2)中，硅藻土加入量為藥材量的 3-4. 5%所述步驟（3)中，石油醚-乙酸乙酯的體積比為3:14。所述步驟（4)中，制備型高效 液相色譜流動相為甲醇-乙腈-水，體積比為19:38:45。瑞諾木素在制備抗腫瘤藥物中的 應(yīng)用。通過體外腫瘤細胞體外抑制試驗，觀察瑞諾木素的抗腫瘤作用，結(jié)果表明瑞諾木素對 GLC4肺癌和C0L0結(jié)腸癌均有一定的抑制作用，具有顯著抗癌活性，且其毒副作用小。本發(fā) 明的有益效果通過以下實驗得到了驗證：實驗方法：1、受試提取物：瑞諾木素提取物（1)性 狀：結(jié)晶，味苦。（2)規(guī)格：含瑞諾木素多90%。（3)溶劑：乙醇或甲醇。（4)儲存條件：4°C， 密封保存。2、細胞株：肺癌細胞株GLC4、結(jié)腸癌細胞株C0L0。3、給藥劑量和方法瑞諾木素 組：l〇mg/kg/天，灌胃給藥，隔一天一次，共五天。陰性對照組：10mg/kg/天，生理鹽水肌注 給藥，隔一天一次，共五天。陽性對照組：30mg/kg/天，5-氟尿喃啶肌注給藥，隔一天一次， 共五天。灌胃后2h，用HPLC檢測血漿藥物濃度。4、種植瘤模型的建立與給藥（1)皮下種 植：分別將上述細胞培養(yǎng)至90%融合，收集細胞，取2X10 6細胞懸液，注射至小鼠肋下皮下 組織，于術(shù)后15天取材，稱量瘤重。另取同樣模型，觀察30天，計算藥物對模型動物存活率 的影響。（2)肺內(nèi)種植瘤肺轉(zhuǎn)移模型：取2X10 6細胞懸液注射至小鼠肺包膜內(nèi)，于術(shù)后15 天取肺，測量瘤重和肺轉(zhuǎn)移數(shù)。（3)給藥方式：種植瘤細胞同時給藥。5、結(jié)果結(jié)果如表1、表 2和表3顯示，瑞諾木素組用藥均有不同程度的抑制腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的作用，可延長實驗小 鼠的生存期。 表1瑞諾木素對種植瘤的抑制作用（n=20,i土S)
表2瑞諾木素對腫瘤轉(zhuǎn)移發(fā)生率的影響（n=20, ％)
表3瑞諾木素對實驗小鼠生存率的影響（n=20, ％)
由表1、表2和表3可以看出，瑞諾木素組用藥抑制腫瘤生長、轉(zhuǎn)移的效果與陽性對照組 基本相當(dāng)，可有效延緩實驗小鼠的生存壽命，其效果明顯優(yōu)于對照組。本發(fā)明用于制備抗腫 瘤藥物時，將瑞諾木素與醫(yī)學(xué)上可接受的輔料一起制成抗腫瘤的藥物，藥物的劑型為注射 劑、膠囊劑、片劑、顆粒劑、丸劑、合劑、口服液中的一種。本發(fā)明用于制備抗腫瘤藥物時，在 其口服配方中添加腸吸收促進劑，包含中鏈脂肪酸鹽、膽酸鹽、鵝去氧膽酸鹽、殼聚糖及其 衍生物中的一種或幾種。下面將結(jié)合【具體實施方式】進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護 的范圍并不局限于下列實施方式。【具體實施方式】實施例1瑞諾木素的制備取500g奇蒿的 地上部分粗粉，置于萃取釜中，按固液體積比為5 :2加入甲醇作為夾帶劑，在壓力22MPa，溫 度38°C條件下，通入液態(tài)C02，C02流量為4. 5ml/g生藥/min，萃取120min，在壓力7MPa，溫 度32°C條件下解析，收集萃取液，加入15g硅藻土攪拌脫色，過濾得到脫色液，濃縮至相對 密度為1. 12,上中性氧化鋁柱(柱壓為6bar，柱徑高比為1:8)，用石油醚-乙酸乙酯3:14洗 脫純化，得到瑞諾木素粗品；以體積比19:38:45甲醇-乙腈-水為流動相，粗品用流動相溶 解，注入制備型高效液相色譜儀，控制流速為20ml/min，收集目標(biāo)流分，連續(xù)制備，冷凍干燥 得高純度的瑞諾木素，經(jīng)HPLC檢測，純度94. 4%。實施例2片劑：瑞諾木素40g，淀粉135g， 鵝去氧膽酸鹽25g，制粒，壓片制成1000片。服用方法：成人一次1片，一日2次。實施例3 膠囊：瑞諾木素40g，淀粉135g，殼聚糖25g，混勻，制成1000粒。服用方法：成人一次1粒， 一日2次。
【主權(quán)項】
1. 結(jié)構(gòu)式如下所示的瑞諾木素在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。2. 如權(quán)利要求1所述的瑞諾木素在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于，瑞諾木素 在肺癌藥物中的應(yīng)用。3. 如權(quán)利要求1所述的瑞諾木素在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于，瑞諾木素 在結(jié)腸癌藥物中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種瑞諾木素在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，通過體外腫瘤細胞體外抑制試驗，觀察瑞諾木素的抗腫瘤作用，結(jié)果表明瑞諾木素對肺癌和結(jié)腸癌均有一定的抑制作用，具有顯著抗癌活性，且其毒副作用小。將瑞諾木素與醫(yī)學(xué)上可接受的輔料一起制成抗腫瘤的藥物，藥物的劑型為注射劑、膠囊劑、片劑、顆粒劑、丸劑、合劑、口服液中的一種。
【IPC分類】A61K31/365, A61P35/04, A61P1/00, A61P35/00, A61P11/00
【公開號】CN104940192
【申請?zhí)枴緾N201510263700
【發(fā)明人】劉東鋒, 楊成東
【申請人】南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司
【公開日】2015年9月30日
【申請日】2015年5月22日