一種制備木犀草素/SBE-β-CD包合物的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中藥制劑技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種制備木犀草素/SBE-13 -CD包合物 的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 木犀草素（Iuteolin)是一種天然的黃酮類化合物，廣泛存在于白毛夏枯草、金 銀花、菊花等天然藥材中，具有抗氧化、抗炎、抗菌等方面的作用。近年來的研究證實(shí)，木 犀草素是一種拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑，可多靶點(diǎn)、多途徑、多環(huán)節(jié)產(chǎn)生抗腫瘤效應(yīng)，如直接干 擾腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和代謝，誘導(dǎo)其凋亡；抑制腫瘤的轉(zhuǎn)移；通過增強(qiáng)機(jī)體的免疫力，抑制 血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)，減少腫瘤組織血管的生成；與化療藥物聯(lián)用產(chǎn)生增敏效應(yīng)，從而提 高藥物療效，是一種很有前途的天然抗腫瘤藥物?；嵌』?(6-環(huán)糊精（sulfobutyl ether-0-cyclodextrin簡(jiǎn)稱SBE-(6-⑶）是對(duì)(6-⑶進(jìn)行磺酸化修飾的衍生物。與(6-⑶ 的其他衍生物相比，SBE- P -CD中引入的極性強(qiáng)大的伸向外側(cè)的磺丁基醚基團(tuán)，擴(kuò)大了 0 -⑶的洞穴范圍，在和藥物包合時(shí)，它結(jié)合的更加牢固。SBE-P -⑶主要應(yīng)用于增加藥物 溶解度和穩(wěn)定性、提高生物利用度、調(diào)節(jié)釋放速度、防止揮發(fā)性成分逸散、改善不良?xì)馕丁p 少刺激性、降低不良反應(yīng)等方面。
[0003] 但是，由于木犀草素水溶性較差，將其制成木犀草素新劑型以改善藥物溶解度，存 在一定的困難。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺點(diǎn)與不足，提供一種制備木犀草素/ SBE-(6-⑶包合物的方法。
[0005] 本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：一種制備木犀草素/SBE-P -⑶包合物的 方法，包括如下步驟：
[0006] 將木犀草素與SBE- P -⑶按物質(zhì)的量之比1:2混勻，緩慢加入100 y L超純水，研 磨70min，得到初始包合物，將所述的初始包合物于60°C干燥lh，研細(xì)后置于墊有濾紙的布 氏漏斗中，用無水乙醇洗滌，取殘?jiān)?0 °C干燥20min，得到木犀草素/SBE- P -⑶包合物。
[0007] 所述的研磨優(yōu)選為沿同一方向勾速研磨。
[0008] 本發(fā)明相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)具有如下的優(yōu)點(diǎn)及效果：SBE-P -CD水溶性好、腎毒性和 溶血作用等不良反應(yīng)可降至最低，是一種優(yōu)良的藥物輔料。本發(fā)明以投料比與研磨時(shí)間為 常設(shè)置的因素，以可明顯影響研磨力度的加水量作為第三個(gè)因素，采用正交試驗(yàn)法優(yōu)選制 備處方。制備得到的木犀草素/SBE-P -⑶包合物經(jīng)IR和DSC鑒別證明已形成，相對(duì)木犀 草素而言其溶解度得到了很大的提高。本發(fā)明采用HPLC作為檢測(cè)方式，該方法專屬性強(qiáng)， 靈敏度高，重復(fù)性好，操作方便。其制備方法簡(jiǎn)單，可得到較滿意的包合率和收率，可應(yīng)用于 生產(chǎn)與臨床需要。
【附圖說明】
[0009] 圖1是木犀草素的紫外掃描圖；
[0010] 圖2是木犀草素對(duì)照品溶液、陰性樣品溶液、供試品溶液的HPLC圖譜；其中，A為 木犀草素對(duì)照品的HPLC圖譜，B為SBE- -CD的HPLC圖譜，C為木犀草素/SBE- -CD包合 物的HPLC圖譜，1為木犀草素；
[0011] 圖3是木犀草素的相溶解度圖，以木犀草素溶解度（mol/L)為縱坐標(biāo)，SBE-P -⑶ 濃度（mol/L)為橫坐標(biāo)；
[0012]圖4是各物質(zhì)的紅外分析圖譜，其中，A為木犀草素的紅外分析圖譜；B為 SBE--⑶的紅外分析圖譜；C為木犀草素與SBE--⑶物理混合物的紅外分析圖譜；D為 木犀草素/SBE-P -⑶包合物的紅外分析圖譜；
[0013] 圖5是各物質(zhì)的差示掃描量熱分析圖譜，其中，A為木犀草素的差示掃描量熱分析 圖譜，B為SBE--⑶的差示掃描量熱分析圖譜，C為木犀草素與SBE--⑶物理混合物的 差示掃描量熱分析圖譜，D為木犀草素/SBE-P -CD包合物的差示掃描量熱分析圖譜。
【具體實(shí)施方式】
[0014] 下面結(jié)合實(shí)施例及附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限 于此。
[0015] 實(shí)施例
[0016] 1儀器與材料
[0017] 1.1 儀器
[0018] 高效液相色譜儀、Sro-20A檢測(cè)器及色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)（日本島津）；UV2600 型紫外-可見分光光度計(jì)（日本島津）！DiscoveryDV215⑶電子天平（美國OHAUS Corporation,) ;CS101-1E電熱鼓風(fēng)干燥箱（重慶萬達(dá)儀器有限公司）；G16型醫(yī)用離心機(jī) (北京白洋醫(yī)療器械有限公司）；KQ3200DB型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公 司）；HITECHEdi-SlOUV實(shí)驗(yàn)室純水系統(tǒng)（上海和泰儀器有限公司）；THZ-82水浴恒溫振 蕩器（江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司）；傅里葉紅外光譜儀（美國ThermoFisher scientific) ；TGA/DSCISTAReSystem(METTLERllOOLF)〇
[0019] I. 2 試藥
[0020] 木犀草素對(duì)照品（成都曼思特生物科技有限公司，批號(hào)MUST-14050411，純度大于 98%);木犀草素（西安唯奧生物科技有限公司，批號(hào)20140912,純度98% ) ;SBE-P-CD (山 東濱州智源生物科技有限公司，批號(hào)20140626,平均取代度6. 5);甲醇（色譜純，美國 TEDIA公司）；磷酸，無水乙醇均為分析純；水為超純水。
[0021] 2方法與結(jié)果
[0022] 2. 1色譜條件
[0023] 色譜柱：Agilent ZORBAX SB-C18(4. 6X250mm, 5 ym);流動(dòng)相：甲醇-0? 2% H3PO4 溶液（70:30);流速：lml/min ;檢測(cè)波長(zhǎng)：348nm ;進(jìn)樣量：10 y L。
[0024] 2. 2溶液配制
[0025]木犀草素對(duì)照品儲(chǔ)備液：精密稱取木犀草素對(duì)照品適量，置IOmL容量瓶，以甲醇 溶解并定容，搖勻，即得濃度為111. 6 y g/mL的對(duì)照品儲(chǔ)備液，于4°C冰箱保存，臨用前配制 成濃度分別為 6. 696、8. 928、11. 160、13. 392、15. 624、20. 088yg/mL的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。
[0026] 供試品溶液：精密稱取木犀草素/SBE- P -⑶包合物適量，置IOmL容量瓶，以40% 甲醇溶解并定容，超聲20min，即為供試品溶液。
[0027] 陰性樣品溶液：精密稱取SBE-P -⑶適量，置IOml容量瓶中，以甲醇溶解并定容， 即得陰性樣品溶液。
[0028] 2. 3包合物制備（研磨法）
[0029]稱取適量木犀草素與SBE- P -⑶（物質(zhì)的量之比1:2)，將二者物理混勻，緩慢加入 100 y L適量超純水，沿同一方向勻速研磨70min，即得初步的包合物，將包合物于60°C干燥 Ih后研細(xì)，后置于墊有濾紙的布氏漏斗中，用適量無水乙醇洗滌未包合的木犀草素，60°C干 燥20min，即得木犀草素/SBE- P -⑶包合物。
[0030] 2. 4方法學(xué)研究
[0031] 2. 4. 1檢測(cè)波長(zhǎng)的確定
[0032] 將一定濃度的木犀草素對(duì)照品溶液，以甲醇為空白，在200_800nm范圍內(nèi)全波段 掃描，測(cè)得木犀草素的最大吸收波長(zhǎng)為348nm(圖1)。
[0033] 2. 4. 2 專屬性
[0034] 按照"2. 1"項(xiàng)下色譜條件，分別考察木犀草素對(duì)照品溶液、陰性樣品溶液、供試品 溶液的色譜圖（見圖2)。結(jié)果表明，木犀草素峰形良好，SBE-P-CD未對(duì)木犀草素的測(cè)定產(chǎn) 生干擾。
[0035] 2. 4. 3標(biāo)準(zhǔn)曲線
[0036] 取系列木犀草素對(duì)照品溶液，按照"2. 1"項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，記錄峰面積。 以峰面積為縱坐標(biāo)，對(duì)照品濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為：￥ = 23794乂-17234(r= 0. 999)，表明木犀草素在6. 696~20. 088 y g/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。
[0037] 2. 4. 4 精密度
[0038] 取濃度為15. 624 y g/mL的木犀草素對(duì)照品溶液，按"2. 1"項(xiàng)下色譜條件于Id內(nèi) 重復(fù)測(cè)定5次，連續(xù)測(cè)定5d，記錄峰面積，計(jì)算得日內(nèi)精密度RSD為0. 35%，日間精密度RSD 為0. 64%，表明儀器精密度良好，日內(nèi)及日間精密度均滿足檢測(cè)要求。
[0039] 2. 4. 5 穩(wěn)定性
[0040] 取供試品溶液，于室溫下放置0、1、2、4、8、10、241!后按"2.1"項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè) 定，記錄峰面積，計(jì)算得RSD為0. 38%，表明供試品溶液在24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。
[0041] 2. 4. 6 重復(fù)性
[0042] 精密稱取包合物5份，按