專利名稱：由木犀草素和連翹制成的藥物組合物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種由木犀草素、連翹或連翹提取物制成的藥物組合物及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
由于目前對如青霉素、阿莫西林等許多傳統(tǒng)抗生素抗藥性的蔓延已引起了醫(yī)藥界的高度關(guān)注和重視，多種耐藥性菌株大量出現(xiàn)及新病毒的出現(xiàn)，使難治性感染越來越多。與此同時(shí)，由于傳統(tǒng)中草藥等天然藥物的配伍或有效成分的組合物往往具有互補(bǔ)、協(xié)同增效作用，亦不產(chǎn)生耐藥性，因而對天然藥物的發(fā)掘和研究日益受到重視。
木犀草素(Luteolin，Lut)別名黃色黃素、黃示靈、毛地黃黃酮，為5，7，3’，4’-四羥基黃酮化合物，主要存在于金銀花、菊花、荊芥、白毛夏枯草等藥物中，并以糖苷的形式分布于多種植物中。木犀草素為黃色針狀結(jié)晶，熔點(diǎn)228～230℃，微溶于水，可溶于堿性溶液中，本品具有鎮(zhèn)咳和祛痰作用，前者與其抑制咳嗽中樞有關(guān)，后者與其促進(jìn)呼吸道腺體分泌和使痰液中酸性粘多糖溶解有關(guān)。此外，本品還有抗炎癥、抗過敏和免疫增強(qiáng)作用。對金黃色葡萄球菌、肺炎雙球菌、綠膿桿菌尚有抑菌作用。用于慢性支氣管炎和其他呼吸道疾病的痰多咳嗽者。近來研究表明木犀草素在治療肝纖維化方面具有良好的應(yīng)用前景，且有文獻(xiàn)報(bào)道Lut對Hsuis、柯薩奇B組病毒有很強(qiáng)的抑制作用，對防治心肌炎具有現(xiàn)實(shí)意義。木犀草素結(jié)構(gòu)如下所示。
木犀草素連翹(Fructus Forsythia)為木犀科植物連翹Forsythia Suspensa(Thunb.)Vahl的干燥果實(shí)。苦，微寒。歸肺、心、小腸經(jīng)。主產(chǎn)于我國山西、河南、山東等地，為一種常用中藥材，具有清熱解毒、散結(jié)消腫之功效，主治溫?zé)?、丹毒、斑疹、癰瘍腫毒、瘰疬、小便淋閉等癥。連翹最早記載于古代神農(nóng)本草經(jīng)，最初在中醫(yī)驗(yàn)方中作為一種復(fù)合草藥，傳統(tǒng)上用它作為疼痛的萬應(yīng)靈藥，特別用于癰腫的散熱。現(xiàn)代藥理作用研究表明，連翹具有抗菌、消炎、解熱、鎮(zhèn)吐等作用?，F(xiàn)臨床上多以連翹用于上呼吸道感染、急性腎炎，并用其復(fù)方治療肝炎、腦膜炎等。連翹成分復(fù)雜，抑菌有效成分主要為苯乙醇苷類，其中連翹酯苷類均系咖啡?；揭掖架站哂休^強(qiáng)的抑菌活性；還含有一酚性成分連翹酚對金黃色葡萄球菌和志賀痢疾桿菌的抗菌效力最強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)式為C18H13O7；木脂素也是一類主要成分，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)的有連翹脂素及其苷連翹苷、牛蒡子苷、(-)-羅漢松脂素-4’-β-D-葡萄糖苷及(+)-表松脂酚-β-D-葡萄糖苷等；此外，還有揮發(fā)油、黃酮類、有機(jī)酸類等成分。其活性成分連翹苷結(jié)構(gòu)式如下 連翹苷現(xiàn)代藥理學(xué)和藥效學(xué)研究表明木犀草素和連翹在抗菌、消炎、增強(qiáng)免疫力方面都具有很好的療效，目前已有單一有效成分的木犀草素片上市，而連翹無單一制劑上市，臨床多以復(fù)方配伍的方式發(fā)揮作用。現(xiàn)利用木犀草素和連翹的相互作用，配伍組方還未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容為了滿足臨床需要，本發(fā)明提供了一種新的藥物組合物及其制備方法和用途，其特征在于它由木犀草素、連翹或連翹提取物制成。
本發(fā)明藥物組份的用量是經(jīng)過發(fā)明人進(jìn)行大量摸索總結(jié)得出的，各組分用量在下述重量份數(shù)范圍內(nèi)都具有較好療效。其重量份數(shù)為木犀草素1～25份，連翹500～15000份或連翹提取物2～4000份；優(yōu)選份數(shù)為木犀草素2～10份，連翹1000～10000份或連翹提取物5～2500份；最佳份數(shù)為木犀草素5份，連翹1500～6000份或連翹提取物7～1500份。
以上組成是按重量份作為配比的，如大規(guī)模生產(chǎn)可以以千克為單位，或以噸為單位，小規(guī)模生產(chǎn)也可以以克為單位，重量可以增大或者減小，但各組成之間重量配比的比例不變。
以上組成，若以克為單位，可以制成100～10000次用量的制劑，如作為注射劑，可制成100～10000支，每次用量1～10支。如作為片劑，可制成100～10000片，每次服用1～10片。
以上重量份數(shù)對于特殊病人，可以相應(yīng)調(diào)整組成的比例，增加或者減少不超過100％。
上述藥物組合物中，連翹可以用適宜的溶劑通過浸漬法、滲漉法、煎煮法、回流提取法或連續(xù)提取法、半仿生法制備。其中適宜的溶劑為中藥提取常用的溶劑，優(yōu)選水或乙醇。例如可根據(jù)中國專利CN1148375C制備?，F(xiàn)連翹提取物《中國藥典》(2005版一部275頁)已收載，其中連翹苷(C29H36O15)含量不低于0.5％。
本發(fā)明提供了連翹的一種優(yōu)選制備工藝如下取連翹藥材，粉碎成粗粉，加水煎煮3次，第一次加水10倍量，第二、三次分別為8倍量，每次1.5小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液(50℃)減壓濃縮至相對密度為1.10～1.20(室溫)的清膏，放冷，加入4倍量的乙醇，攪勻，靜置2小時(shí)，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮液噴霧干燥，得連翹提取物即粗提物(供口服用)。
通過上述工藝制備的連翹粗提物連翹苷含量不低于0.5％，提取物得率為0.5～25％。
取連翹粗提物，加水適量，加熱溶解，將溶液加到已預(yù)先處理并裝好的D2820型大孔吸附樹脂(提取物和樹脂比例為1∶15～20)慢慢滴加完后，用水洗脫至還原糖反應(yīng)呈陰性(1ml水洗脫液加入甲基萘酚0.5％試液2～3滴，沿試管壁緩緩加0.5ml濃硫酸，陰性為二試液界面出現(xiàn)棕色環(huán))，然后分別用水液和20％乙醇洗脫，收集20％乙醇洗脫液，回收乙醇，噴霧干燥，得連翹提取物即精提物(供注射或口服用)。
通過上述工藝制備的連翹精提物中連翹苷的含量不低于10％，提取物得率為0.5～2％。
上述藥物組合物，可以制成任一臨床上或藥學(xué)上可接受的劑型，如注射劑、口服常釋劑型、緩釋控釋劑型、顆粒劑、丸劑、口服液體劑、滴眼劑、滴鼻劑、滴耳劑、吸入劑、栓劑、軟膏劑等。本發(fā)明藥物組合物優(yōu)選劑型為注射劑或口服制劑。
本發(fā)明的藥物組合物可采用現(xiàn)有制藥領(lǐng)域中的常規(guī)方法生產(chǎn)，需要的時(shí)候可以添加各種藥學(xué)上可接受的載體。所述的載體包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體、潤滑劑等。
本發(fā)明在制成注射劑時(shí)，為了增加其溶解度，可以加入吐溫-80等增溶劑。輸液中可以加入用于調(diào)節(jié)滲透壓的等滲調(diào)節(jié)劑，例如，氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂、氯化鈣、乳酸納、葡萄糖、木糖醇、山梨醇和右旋糖苷等，優(yōu)選氯化鈉或葡萄糖。粉針中可加入賦形劑，例如，甘露醇、葡萄糖等。
上述藥物組合物，具有抗菌、抗炎、心血管作用、鎮(zhèn)咳化痰、抗癌、抑酶、解熱、保肝、抗過敏、降血脂、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)、利尿利膽等作用。
本發(fā)明組合物的優(yōu)點(diǎn)在于1.提供了一種新的抗菌、抗炎的中藥復(fù)方，滿足了臨床的需要。
2.對木犀草素和連翹的相互作用和配伍組方進(jìn)行了藥理學(xué)研究，結(jié)果表明本發(fā)明組合物對金黃色葡萄球菌、肺炎雙球菌和綠膿桿菌感染小鼠有保護(hù)作用，可增強(qiáng)幼年小鼠的免疫功能，具有明顯治療小鼠滑膜炎的作用，且其作用明顯優(yōu)于單用木犀草素或連翹，提示兩藥有協(xié)同增效的作用。
3.通過對本發(fā)明組合物不同配比的小鼠耳腫脹藥效學(xué)研究，篩選出了本發(fā)明組合物的優(yōu)選配比。
4.本發(fā)明組合物既可由連翹藥材投料制得連翹提取物后再與木犀草素混合加工制成任一制劑，也可由連翹提取物直接投料與木犀草素混合加工制成制劑，滿足了大生產(chǎn)的需要。
5.對連翹提取物的活性成分連翹苷的含量進(jìn)行了限定，便于控制產(chǎn)品的質(zhì)量。
6.對本發(fā)明組合物進(jìn)行了急性毒性試驗(yàn)，結(jié)果表明本發(fā)明組合物毒性小，安全范圍大。
7.對本發(fā)明藥物組合物進(jìn)行的穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表明各項(xiàng)指標(biāo)均比較穩(wěn)定，保證了臨床用藥的安全。
8.木犀草素和連翹臨床用藥療效確切，兩者合并用藥后用藥量減少，具有廣闊的應(yīng)用前景。
以下試驗(yàn)例來進(jìn)一步闡述本發(fā)明所述藥物的有益效果，這些試驗(yàn)例包括本發(fā)明藥物組合物的藥效學(xué)試驗(yàn)，本發(fā)明藥物組合物以下簡稱組合物。以下試驗(yàn)例中連翹藥材均根據(jù)實(shí)施例1中連翹的制備工藝制備。
試驗(yàn)例1 藥效學(xué)試驗(yàn)-組合物對二甲苯致小鼠耳腫脹影響試驗(yàn)供試品 對照組氯化鈉注射液(山東長富潔晶藥業(yè)有限公司)木犀草素組木犀草素注射液，自制連翹組連翹注射液，自制組合物組木犀草素和連翹重量比分別為20mg+10g、20mg+15g、20mg+60g、20mg+100g、50mg+10g、50mg+15g、50mg+60g、50mg+100g、100mg+10g、100mg+15g、100mg+60g、100mg+100g，各劑量組注射液自制。
受試動(dòng)物 昆明小鼠，150只，雌雄各半，隨機(jī)分為15組，每組10只。
方法 將小鼠隨機(jī)分為生理鹽水對照組、木犀草素注射液組、連翹注射液組、組合物各劑量注射液組，每組10只，雌雄各半。分別按下表所示劑量灌胃給藥或生理鹽水，每日1次，連續(xù)7天，最后一次給藥1小時(shí)后，各鼠右耳滴0.04ml二甲苯致炎，30分鐘后處死動(dòng)物，剪下雙耳，用內(nèi)徑4mm打孔器在雙耳相同部位取耳片，靜脈稱重，以左右耳片重量差值表示腫脹度，并根據(jù)下式計(jì)算腫脹抑制率腫脹抑制率(％)＝(生理鹽水組腫脹度一給藥組腫脹度)/生理鹽水組腫脹度×100％表1 組合物對小鼠耳腫脹的影響(x±s，n＝10)
注與對照組相比，*p＜0.05，**p＜0.01試驗(yàn)結(jié)果與結(jié)論 由上表結(jié)果可知木犀草素注射液組、連翹注射液組和組合物注射液組對二甲苯致小鼠的耳腫脹均有抑制作用(p＜0.05，p＜0.01)，各組腫脹抑制率與對照組相比明顯增高。但組合物注射液抑制作用明顯強(qiáng)于木犀草素注射液、連翹注射液，當(dāng)木犀草素與連翹重量份數(shù)分別為50mg+15g、50mg+60g時(shí)效果最好。提示兩藥有協(xié)同增效的作用。
試驗(yàn)例2 組合物體內(nèi)抑菌試驗(yàn)供試品 對照組氯化鈉注射液(山東長富沽晶藥業(yè)有限公司)連翹組連翹注射液，自制木犀草素組木犀草素注射液，自制組合物組木犀草素和連翹分別為50mg+15g、50mg+30g、50mg+60g，自制受試動(dòng)物健康小鼠60只，體重23～29g，雌雄兼用，隨機(jī)分為連翹注射液組、木犀草素注射液組、組合物注射液組、氯化鈉注射液組，共6組，每組10只。
菌液用5％胃膜素稀釋金黃色葡萄球菌、肺炎雙球桿菌、綠膿桿菌，含菌量均為1010個(gè)/ml。
方法每只小鼠腹腔注射菌液0.5ml感染，注射菌液后1、6小時(shí)分別腹腔注射連翹注射液50mg/kg、木犀草素注射液10mg/kg、氯化鈉注射液50mg/kg，組合物注射液50mg/kg等感染后觀察24小時(shí)動(dòng)物生存數(shù)，判斷藥品保護(hù)作用。
表2 組合物注射液對感染小鼠的保護(hù)作用
注*為小鼠處于瀕死狀態(tài)而被處死。
試驗(yàn)結(jié)果與結(jié)論 金黃色葡萄球菌、肺炎雙球菌和綠膿桿菌感染小鼠各治療組中，組合物注射液各組、木犀草素注射液和連翹注射液對感染小鼠均有保護(hù)作用，但組合物注射液的保護(hù)作用明顯強(qiáng)于木犀草素注射液、連翹注射液組單獨(dú)用藥，提示兩藥有協(xié)同增效的作用。
試驗(yàn)例3 組合物對幼年小鼠免疫功能的影響受試動(dòng)物 幼年雄鼠70只，每只8～12g，每組10只供試品 對照組氯化鈉注射液，山東華信制藥有限公司陽性對照組地塞米松連翹組連翹注射液，自制木犀草素組木犀草素注射液組合物組木犀草素和連翹分別為50mg+15g、50mg+30g、50mg+60g，自制方法將幼鼠隨機(jī)分為對照組、陽性對照組、連翹注射液組、木犀草素注射液組、組合物三組。各給藥組每日灌胃給藥，木犀草素注射液組給藥量為10mg/kg，對照組灌胃等體積的氯化鈉注射液，陽性對照組給藥量為6mg/kg，其余組均為50mg/kg。給藥第13天，所有動(dòng)物灌胃給予等體積的淀粉溶液。第14天，所有動(dòng)物灌胃給予0.5％雞紅細(xì)胞0.1ml/10g。1h時(shí)后，處死動(dòng)物。取腹腔液涂片，甲醇固定，姬氏染色，在油鏡下觀察100個(gè)腹腔巨噬細(xì)胞有多少吞噬了雞紅細(xì)胞，吞噬多少個(gè)雞紅細(xì)胞，計(jì)數(shù)吞噬率和吞噬指數(shù)。剪開胸腔和腹腔一摘取脾臟和胸腺，剔除周圍的結(jié)締組織后，在1g/萬的電子天秤上稱各個(gè)動(dòng)物的脾臟和胸腺重量，結(jié)果見表3、表4。
表3 組合物對小鼠免疫器官重量系數(shù)的影響(n＝10，X±S)
注與對照組相比，*p＜0.01，**p＜0.001，&p＞0.05，#p＜0.05表4 對幼鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響(n＝10，X±S)
注與對照組相比，*p＜0.01，**p＜0.001，&p＞0.05，#p＜0.05試驗(yàn)結(jié)果與結(jié)論 由表3結(jié)果可以看出木犀草素注射液、連翹注射液組、組合物三個(gè)劑量組均可增加幼鼠免疫器官脾臟和胸腺的重量(p＜0.01，p＜0.001，p＜0.05)。由表4結(jié)果可以看出木犀草素注射液、連翹注射液組、組合物三個(gè)劑量組均可增加幼鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能(p＜0.01，p＜0.001，p＜0.05)。且組合物注射液組與連翹注射液組或新木犀草素注射液組相比作用更明顯，提示兩藥有協(xié)同作用。
試驗(yàn)例4 組合物對小鼠滑膜炎的治療作用試驗(yàn)試驗(yàn)動(dòng)物 KM小鼠，18～22g，共60只，隨機(jī)分為6組，每組10只供試品 對照組氯化鈉注射液，山東華信制藥有限公司連翹組連翹注射液，自制木犀草素組木犀草素注射液組合物組木犀草素與連翹分別為50mg+15g、50mg+30g、50mg+60g，自制方法 將小鼠隨機(jī)分為6組，每組10只，分別為生理鹽水對照組、連翹注射液組、木犀草素注射液組、組合物三組。分別腹腔注射給予連翹注射液50mg/kg，木犀草素注射液組10mg/kg，組合物50mg/kg，連續(xù)給藥1周；給藥當(dāng)天時(shí)，受試小鼠背部皮下注射空氣5ml，第3天及第6天再次注入空氣3ml，維持氣囊的膨脹，制造小鼠氣囊滑膜炎模型。于末次給藥后2小時(shí)囊內(nèi)注射30％雞蛋清1ml，6小時(shí)后處死小鼠，于氣囊內(nèi)注入生理鹽水(含肝素50U/ml)2.5ml，輕輕按壓，吸出1ml，1000r/min離心10分鐘，計(jì)數(shù)白細(xì)胞量，上清液用紫外分光光度法檢測前列腺素E2含量，以O(shè)D表示。試驗(yàn)結(jié)果見下表。
表5 組合物注射液對小鼠滑膜炎的治療作用
注與生理鹽水對照組比較，*表示p＜0.05，**表示p＜0.01；與連翹組或新魚腥草素鈉組比較，#p＜0.01試驗(yàn)結(jié)果與結(jié)論 由上表結(jié)果可以看出連翹注射液、木犀草素注射液和組合物各組注射液均可明顯降低氣囊滲出液OD值和滲出液中的白細(xì)胞數(shù)(p＜0.05，p＜0.01)，而組合物注射液與連翹注射液或木犀草素注射液相比較具有明顯治療小鼠滑膜炎的作用(p＜0.01)，提示兩藥有協(xié)同增效的作用。
試驗(yàn)例5 小鼠注射給藥急性毒性試驗(yàn)(1)試驗(yàn)方法供試品組合物注射液，來源于實(shí)施例3處方2，規(guī)格2ml。
受試動(dòng)物小鼠，每組雌雄各60只，雄性體重25～28g，雌性體重21～24g。
給藥途徑靜脈注射、腹腔注射。
觀察項(xiàng)目死亡數(shù)、一般狀態(tài)、體重、剖檢、半數(shù)致死劑量。
(2)試驗(yàn)結(jié)果按照急性毒性試驗(yàn)要求進(jìn)行預(yù)試，腹腔注射及靜脈注射兩給藥途徑皆無法測出藥物的半數(shù)致死量，也未見明顯的毒性反應(yīng)，故進(jìn)行日最大給藥量試驗(yàn)。給藥劑量尾靜脈注射0.1ml/10g，腹腔注射0.1ml/10g，一日2次。
死亡數(shù)未出現(xiàn)死亡。
一般狀態(tài)未見異常變化。
體重于給藥前1大，給藥日，給藥后2、4、6、8、10、12、14大測量；未見異常變化。
剖檢心、肝、肺、腎等組織未見異常變化。
(3)結(jié)論本實(shí)驗(yàn)中未出現(xiàn)死亡，本組合物注射液對雌雄小鼠靜脈和腹腔注射給藥的最大耐受量為0.2ml/10g，相當(dāng)于70kg體重人日最大用量10ml的140倍。表明本品低毒，安全性高。
試驗(yàn)例6組合物注射液穩(wěn)定性試驗(yàn)供試品組合物注射液，來源于實(shí)施例3處方2，規(guī)格2ml。
考察項(xiàng)目性狀、pH值、澄明度、有關(guān)物質(zhì)、標(biāo)示含量；并在加速試驗(yàn)6個(gè)月和長期試驗(yàn)期末增加無菌和熱原檢查。
1、影響因素試驗(yàn)強(qiáng)光照射試驗(yàn)取供試品，置照度為4500Lx的光照箱內(nèi)放置10天。
高溫試驗(yàn)取供試品，分別置于40℃、60℃條件下放置10天。
低溫試驗(yàn)取供試品，在4℃冰箱中放置10天。
上述試驗(yàn)，分別于第5、10天取樣測定。比較性狀后測試各項(xiàng)指標(biāo)，并將結(jié)果與0天比較。
結(jié)果光照4500Lx條件下放置10天，除有關(guān)物質(zhì)略有升高外，其它各項(xiàng)指標(biāo)均無明顯變化。高溫60℃條件下放置10天，各項(xiàng)指標(biāo)無明顯變化。高溫40℃、低溫4℃條件下放置10天，各項(xiàng)指標(biāo)無明顯變化。
2、加速試驗(yàn)方法置溫度40℃±2℃、相對濕度75％±5％的條件下放置6個(gè)月。在試驗(yàn)期間分別于第1個(gè)月、2個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月末取樣，比較外觀后，測試各項(xiàng)指標(biāo)，將結(jié)果與0個(gè)月比較；并在6個(gè)月末增加無菌和熱原檢查。
結(jié)果溫度40℃±2℃、相對濕度75％±5％的條件下放置6個(gè)月，除有關(guān)物質(zhì)略有增加，標(biāo)示含量略有下降外，其它各項(xiàng)指標(biāo)均無明顯變化，加速試驗(yàn)6個(gè)月末，熱原、無菌檢查均符合規(guī)定。
3、長期試驗(yàn)方法置溫度25℃±2℃、相對濕度60％±10％的條件下放置18個(gè)月。分別于第3個(gè)月、6個(gè)月、9個(gè)月、12個(gè)月、18個(gè)月，比較外觀后，測試各項(xiàng)指標(biāo)，將結(jié)果與0個(gè)月比較；并在18個(gè)月末增加無菌和熱原檢查。
結(jié)果溫度25℃±2℃、相對濕度60％±10％的條件下放置18個(gè)月，各項(xiàng)指標(biāo)均無明顯變化，長期試驗(yàn)18個(gè)月末，熱原、無菌檢查均符合規(guī)定。
結(jié)論由上述考察結(jié)果得出結(jié)論，各項(xiàng)試驗(yàn)中，組合物注射液均比較穩(wěn)定。
綜上所述，本發(fā)明提供的木犀草素與連翹組合物具有協(xié)同增效作用，明顯優(yōu)于木犀草素或連翹單獨(dú)給藥的藥效。對組合物注射液進(jìn)行的穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明提供的木犀草素與連翹組合物制成的注射劑的各項(xiàng)指標(biāo)均比較穩(wěn)定，可以用于放大生產(chǎn)。
具體實(shí)施方式以下通過實(shí)施例來進(jìn)一步闡述本發(fā)明藥物組合物的制備方法，但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)施例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。以下實(shí)施例中各劑型的輔料可以用藥學(xué)上可接受的輔料替換，或者減少、增加。
以下實(shí)施例2～10中的連翹提取物是精制三批中的第一批。
實(shí)施例1 連翹提取物的制備1.連翹粗提物的制備取連翹藥材1100kg，粉碎成粗粉，加水煎煮3次，第一次加水10倍量，第二、三次分別為8倍量，每次1.5小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液(50℃)減壓濃縮至相對密度為1.10～1.20(室溫)的清膏，放冷，加入4倍量的乙醇，攪勻，靜置24小時(shí)，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮液噴霧干燥，得連翹提取物即粗提物149.27kg(供口服用)。其中連翹苷(C29H36O15)的含量為0.89％，得率為13.57％。
2.連翹提取物的精制取上述連翹粗提物，加水適量，加熱溶解，將溶液加到已預(yù)先處理并裝好的D2820型大孔吸附樹脂(提取物和樹脂比例為1∶15～20)慢慢滴加完后，用水洗脫至還原糖反應(yīng)呈陰性(1ml水洗脫液加入甲基萘酚0.5％試液2～3滴，沿試管壁緩緩加0.5ml濃硫酸，陰性為二試液界面出現(xiàn)棕色環(huán))，然后分別用水液和20％乙醇洗脫，收集20％乙醇洗脫液，回收乙醇，噴霧干燥，得連翹提取物即精提物9.46kg(供注射或口服用)。其中連翹苷含量為15.15％，得率為0.86％。
按照上述精制工藝重新制得三批連翹提取物，連翹苷含量和得率見表6。由結(jié)果可以看出，通過本工藝制得的連翹提取物中連翹苷含量不低于10％，得率為0.5～2％。
表6 連翹提取物的含量測定結(jié)果和得率
實(shí)施例2 本發(fā)明組合物粉針劑的制備處方處方1連翹提取物 130.5g(相當(dāng)于連翹15kg)木犀草素 50g聚山梨酯80 50g甘露醇 200g無菌注射用水 加至2000ml共制備 1000支處方2連翹提取物 261g(相當(dāng)于連翹30kg)木犀草素 50g聚山梨酯80 50g甘露醇 300g無菌注射用水 加至3000ml共制備 1000支處方3連翹提取物 522g(相當(dāng)于連翹60kg)木犀草素 50g聚山梨酯80 50g甘露醇 500g無菌注射用水 加至5000ml共制備 1000支制備工藝1)首先將配液用的容器具及抗生素玻璃瓶，膠塞等進(jìn)行無菌處理。
2)按照處方量稱取原料和輔料。
3)將連翹提取物加入配液量30％無菌注射用水中加熱溶解完全。甘露醇加配液量30％的無菌注射用水加熱攪拌溶解完全，聚山梨酯80加20％的無菌注射用水后制成水溶液加入木犀草素加熱溶解，合并上述溶液，補(bǔ)加無菌注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
5)經(jīng)砂濾棒過濾脫炭。測定并調(diào)節(jié)溶液的pH值。
6)經(jīng)0.22um的微孔濾膜精濾。
7)檢查溶液的澄明度，半成品化驗(yàn)。
8)分裝于抗生素玻璃瓶中，半壓塞。將樣品放入凍干機(jī)中冷凍干燥。預(yù)凍-45℃5小時(shí)，低溫真空干燥-45℃～0℃20小時(shí)，然后升溫至25℃真空干燥3小時(shí)。
9)凍干結(jié)束，壓塞，軋蓋。
10)成品全檢，包裝入庫。
實(shí)施例3 本發(fā)明組合物水針劑的制備處方處方1連翹提取物 130.5g(相當(dāng)于連翹15kg)木犀草素 50g丙二醇 500ml注射用水 加至2000ml共制備 1000支處方2連翹提取物 261g(相當(dāng)于連翹30kg)木犀草素 50g丙二醇 700ml注射用水 加至2000ml共制備 1000支處方3連翹提取物 522g(相當(dāng)于連翹60kg)木犀草素 50g丙二醇 900ml注射用水 加至2000ml共制備 1000支制備工藝1)提前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗。
2)將連翹提取物加入配液量20％的注射用水中加熱攪拌溶解完全。木犀草素加入丙二醇中加熱攪拌溶解完全。
3)合并上述兩溶液，補(bǔ)加注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
5)經(jīng)砂濾棒過濾脫炭。測定并調(diào)節(jié)溶液的pH值。
6)經(jīng)0.45um的微孔濾膜精濾。
7)檢查溶液的澄明度，半成品化驗(yàn)。
8)將溶液熔封于玻璃安瓿中。
9)100℃流通蒸汽滅菌30分鐘。
10)趁熱將樣品放入0.01％的亞甲藍(lán)溶液中檢漏。
11)燈檢，成品全檢，包裝入庫。
實(shí)施例4 本發(fā)明組合物輸液的制備氯化鈉輸液處方處方1連翹提取物 130.5g(相當(dāng)于連翹15kg)木犀草素 50g聚山梨酯80 50g氯化鈉 600g注射用水 加至100000ml共制備 1000瓶處方2連翹提取物 261g(相當(dāng)于連翹30kg)木犀草素 50g聚山梨酯80 50g氯化鈉 900g注射用水 加至100000ml共制備 1000瓶處方3連翹提取物 522g(相當(dāng)于連翹60kg)木犀草素 50g聚山梨酯80 50g氯化鈉 1200g注射用水 加至100000ml共制備 1000瓶制備工藝1)前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗。
2)將連翹提取物加入配液量20％注射用水加熱攪拌溶解完全，將氯化鈉用配液量20％的注射用水溶解完全。聚山梨酯80加20％的無菌注射用水后制成水溶液加入木犀草素加熱溶解。
3)合并上述溶液，補(bǔ)加注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
5)經(jīng)砂濾棒過濾脫炭。測定并調(diào)節(jié)溶液的pH值。
6)經(jīng)0.45um的微孔濾膜精濾。
7)檢查溶液的澄明度，半成品化驗(yàn)。
8)灌裝于100ml的輸液瓶中。
9)115℃熱壓滅菌30分鐘。
10)燈檢，成品全檢，包裝入庫。
葡萄糖輸液處方處方1連翹提取物130.5g(相當(dāng)于連翹15kg)木犀草素 50g聚山梨酯8025g葡萄糖5000g注射用水 加至100000ml共制備1000瓶處方2連翹提取物261g(相當(dāng)于連翹30kg)木犀草素 50g聚山梨酯8050g葡萄糖5000g注射用水 加至100000ml共制備1000瓶處方3連翹提取物522g(相當(dāng)于連翹60kg)木犀草素 50g聚山梨酯80100g葡萄糖5000g注射用水 加至100000ml共制備1000瓶制備工藝1)提前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗。
2)將連翹提取物加入配液量20％注射用水中加熱攪拌溶解完全，將葡萄糖用配液量20％的注射用水溶解完全，加熱煮沸15分鐘。聚山梨酯80加20％的無菌注射用水后制成水溶液加入木犀草素加熱溶解。
3)合并上述溶液，補(bǔ)加注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
5)經(jīng)砂濾棒過濾脫炭。測定并調(diào)節(jié)溶液的pH值。
6)經(jīng)0.45um的微孔濾膜精濾。
7)檢查溶液的澄明度，半成品化驗(yàn)。
8)灌裝于100ml的輸液瓶中。
9)115℃熱壓滅菌30分鐘。
10)燈檢，成品全檢，包裝入庫。
實(shí)施例5 本發(fā)明組合物片劑的制備處方處方1連翹提取物 130.5g(相當(dāng)于連翹15kg)木犀草素 50g淀粉 40.0g微晶纖維素 40.0g2％HPMC水溶液適量硬脂酸鎂 6.0g羧甲淀粉鈉 12.0g共制備 1000片處方2連翹提取物 261g(相當(dāng)于連翹30kg)木犀草素 50g淀粉 40.0g微晶纖維素 40.0g2％HPMC水溶液適量硬脂酸鎂 6.0g羧甲淀粉鈉 12.0g共制備 1000片處方3連翹提取物 522g(相當(dāng)于連翹60kg)木犀草素 50g淀粉 20.0g微晶纖維素 20.0g2％HPMC水溶液適量硬脂酸鎂 6.0g羧甲淀粉鈉 12.0g共制備 1000片制備工藝1)將木犀草素和連翹提取物粉碎過100目篩備用。
2)按照處方量稱取原料和輔料。
3)將羥丙甲纖維素溶于水中制成2％的水溶液備用。
4)將連翹提取物、木犀草素、淀粉、微晶纖維素混合均勻，加入2％HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材。
5)過20目篩制顆粒。
6)顆粒在60℃的條件下烘干。
7)干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂和羧甲淀粉鈉，過18目篩整粒，混合均勻。
8)取樣，半成品化驗(yàn)。
9)按照化驗(yàn)確定的片重壓片。
10)成品全檢，包裝入庫。
實(shí)施例6 本發(fā)明組合物膠囊劑的制備處方處方1連翹提取物 130.5g(相當(dāng)于連翹15kg)木犀草素50g淀粉40.0g微晶纖維素 100.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂6.0g共制備 1000粒處方2連翹提取物 261g(相當(dāng)于連翹30kg)木犀草素50g淀粉20.0g微晶纖維素 60.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂6.0g共制備 1000粒處方3連翹提取物 522g(相當(dāng)于連翹60kg)木犀草素50g淀粉20.0g微晶纖維素 40.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂6.0g共制備 1000粒制備工藝1)將木犀草素和連翹提取物粉碎過100目篩備用。
2)按照處方量稱取原料和輔料。
3)將羥丙甲纖維素溶于水中制成2％的水溶液備用。
4)將連翹提取物、木犀草素、淀粉、微晶纖維素混合均勻，加入2％HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材。
5)過20目篩制顆粒。
6)顆粒在60℃的條件下烘干。
7)干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂，過18目篩整粒，混合均勻。
8)取樣，半成品化驗(yàn)。
9)按照化驗(yàn)確定的裝量裝入膠囊。
10)成品全檢，包裝入庫。
實(shí)施例7 本發(fā)明組合物顆粒劑的制備處方處方1連翹提取物130.5g(相當(dāng)于連翹15kg)木犀草素 50g糖粉 2000.0g2％HPMC50％乙醇溶液 適量共制備1000包處方2連翹提取物261g(相當(dāng)于連翹30kg)木犀草素 50g糖粉 2000.0g2％HPMC50％乙醇溶液 適量共制備1000包處方3連翹提取物522g(相當(dāng)于連翹60kg)木犀草素 50g糖粉 2000.0g2％HPMC50％乙醇溶液 適量共制備1000包制備工藝1)將蔗糖粉碎過100目篩備用。將木犀草素和連翹提取物粉碎過100目篩備用。
2)按照處方量稱取原料和輔料。
3)將木犀草素、連翹提取物與糖粉以等量遞加的方法混合均勻，加入2％HPMC50％乙醇溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材，4)過20目篩制顆粒。
5)顆粒在60℃的條件下烘干。
6)干顆粒過18目篩整粒。
7)取樣，半成品化驗(yàn)顆粒中主藥的含量，確定裝量。
8)包裝，成品全檢，包裝入庫。
實(shí)施例8 本發(fā)明組合物軟膠囊劑的制備處方處方1連翹提取物130.5g(相當(dāng)于連翹15kg)木犀草素 50g大豆油1000.0g大豆磷脂 600g蜂蠟 500g共制備1000粒處方2連翹提取物261g(相當(dāng)于連翹30kg)木犀草素 50g大豆油1000.0g大豆磷脂 500g蜂蠟 500g共制備1000粒處方3連翹提取物522g(相當(dāng)于連翹60kg)木犀草素 50g大豆油1000.0g大豆磷脂 300g蜂蠟 500g共制備1000粒制備工藝將處方量的大豆油和大豆磷脂、蜂蠟加熱熔融，混勻，放冷，加入連翹提取物、木犀草素研勻，壓制成軟膠囊即可。
實(shí)施例9 本發(fā)明組合物口服液的制備處方處方1連翹提取物130.5g(相當(dāng)于連翹15kg)木犀草素 50g丙二醇2000ml尼泊金甲酯2.0g甜菊甙20g純化水加至10000ml共制備1000支處方2連翹提取物261g(相當(dāng)于連翹30kg)木犀草素 50g丙二醇2000ml尼泊金甲酯1.0g甜菊甙10g純化水加至10000ml共制備1000支處方3連翹提取物522g(相當(dāng)于連翹60kg)木犀草素 50g丙二醇2000ml尼泊金甲酯1.0g甜菊甙10g純化水加至10000ml共制備1000支制備工藝1)將連翹提取物加入配液量50％的純化水中加熱攪拌溶解完全。木犀草素加入丙二醇加熱攪拌溶解完全。
2)將尼泊金甲酯和甜菊甙用配液量20％的水溶解完全。
3)合并上述溶液，補(bǔ)加純化水水至全量。
4)過0.8um的微孔濾膜過濾。
5)半成品化驗(yàn)。
6)灌裝。成品全檢，包裝入庫。
實(shí)施例10 本發(fā)明組合物滴丸劑的制備處方處方1連翹提取物 130.5g(相當(dāng)于連翹15kg)木犀草素 50g聚乙二醇6000 1100g處方2連翹提取物 261g(相當(dāng)于連翹30kg)木犀草素 50g聚乙二醇6000 1000g處方3連翹提取物 522g(相當(dāng)于連翹60kg)木犀草素 50g聚乙二醇6000 800g制備工藝將木犀草素和連翹提取物粉碎過100目篩后備用。將聚乙二醇6000在水浴中加熱熔融，待全部熔融后加入木犀草素和連翹提取物，攪拌溶解，60目篩過濾，保持60℃滴入冷至10℃以下的液體石蠟中制成丸。
權(quán)利要求
1.一種新的藥物組合物，其特征在于其重量份數(shù)為木犀草素1～25份，連翹500～15000份或連翹提取物2～4000份。
2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于其重量份數(shù)為木犀草素2～10份，連翹1000～10000份或連翹提取物5～2500份。
3.如權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于其重量份數(shù)為木犀草素5份，連翹1500～6000份或連翹提取物7～1500份。
4.如權(quán)利要求1～3所述的藥物組合物，其特征在于連翹可以用適宜的溶劑通過浸漬法、滲漉法、煎煮法、回流提取法或連續(xù)提取法、半仿生法制備得到連翹提取物，再與木犀草素混合加工制成任一制劑。
5.如權(quán)利要求4所述的藥物組合物，所述的連翹提取物的主要有效成分為連翹苷。
6.如權(quán)利要求4所述的藥物組合物，所述的煎煮法步驟為a.取連翹藥材，粉碎成粗粉，用水煎煮，濾過，合并濾液，濃縮得濃縮液；b.向濃縮液中加入乙醇，靜置，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮液噴霧干燥，得連翹提取物；c.將連翹提取物、木犀草素與藥物可接受的載體混合，制成制劑。
7.如權(quán)利要求5、6所述的任一藥物組合物，其特征在于，所述的連翹提取物中連翹苷的含量不低于0.5％。
8.如權(quán)利要求1～3所述的任一藥物組合物，其特征在于該組合物可制成任何一種臨床上或藥學(xué)上可接受的劑型。
9.如權(quán)利要求8所述的藥物組合物，其特征在于該組合物可制成注射劑或口服制劑。
10.如權(quán)利要求9所述的藥物組合物在制成注射劑時(shí)，其中的連翹提取物中連翹苷的含量不低于10％。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種藥物組合物及其制備方法和用途，包括木犀草素、連翹或連翹提取物，其重量份數(shù)為木犀草素1～25份，連翹500～15000份或連翹提取物2～4000份；該藥物組合物可制成各種藥學(xué)上可接受的劑型，優(yōu)選注射劑和口服制劑；具有抗菌、抗病毒、抗炎、抗腫瘤、鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)咳化痰、解熱、保肝、止血、降血脂、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)等作用。
文檔編號(hào)A61P31/04GK1947747SQ20051010422
公開日2007年4月18日 申請日期2005年10月10日 優(yōu)先權(quán)日2005年10月10日
發(fā)明者黃振華 申請人:黃振華