原兒茶醛在治療男性不育癥及體外處理精子中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種原兒茶醛在治療男性不育癥及體外處理精子中的應(yīng)用，特別是原 兒茶醛在治療由環(huán)磷酰胺導(dǎo)致的男性不育癥中的應(yīng)用，以及原兒茶醛用于防治環(huán)磷酰胺導(dǎo) 致的男性生殖損傷的應(yīng)用，屬于治療男性不育癥及體外處理精子技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著工業(yè)化的發(fā)展、環(huán)境污染的加劇以及社會(huì)壓力的增加，男性精液質(zhì)量逐年下 降，男性不育癥患者明顯增加。按世界衛(wèi)生組織（WorldHealthOrganization，WHO)標(biāo)準(zhǔn)， 育齡夫婦婚后同居一年以上，未采用任何避孕措施，由男方原因?qū)е屡讲辉姓?，稱為男性 不育癥。男性不育癥的治療主要包括人類輔助生殖技術(shù)、藥物治療提高精子質(zhì)量，以及手術(shù) 治療矯正生理結(jié)構(gòu)異常。引起男性不育癥的病因十分復(fù)雜，目前尚未找到導(dǎo)致男性不育癥 的確切病因，所以對(duì)男性不育癥主要是經(jīng)驗(yàn)性藥物治療。臨床常用的藥物治療方式有：抗氧 化治療，包括常用的維生素E、輔酶Q10等；激素治療，包括抗雌激素、促性腺激素、促性腺激 素釋放激素、雄激素、芳香化酶抑制藥；其他藥物，包括肉毒堿等。但這些藥物都有各自的局 限性，如價(jià)格昂貴、副反應(yīng)多等，故研究開發(fā)新的男性不育癥治療藥物具有重要的臨床意義 和廣泛的應(yīng)用前景。
[0003] 人類輔助生殖技術(shù)可用于治療男性不育癥以及女性不孕癥，包括人工授精和體外 受精-胚胎移植技術(shù)，兩種技術(shù)都需要對(duì)男性精液進(jìn)行體外處理優(yōu)選精子。精液體外處理 優(yōu)選精子是人類輔助生殖技術(shù)治療中的常規(guī)必需步驟，目的是獲得沒有精漿、細(xì)胞碎片及 病原微生物污染的精子懸液，回收足夠數(shù)量具有正常形態(tài)和功能的精子。精液處理過程中 需加入精子營養(yǎng)液以維持精子活力和功能。目前，【背景技術(shù)】所用的精子營養(yǎng)液仍有待改進(jìn)， 我國所用的大多為進(jìn)口產(chǎn)品，價(jià)格昂貴。開發(fā)能提高精子活力的精子營養(yǎng)液成分對(duì)于精子 體外優(yōu)選和提高輔助生殖臨床妊娠率具有關(guān)鍵作用和重要意義。
[0004] 原兒茶醛（protocatechuicaldehyde，PAL)學(xué)名3,4_二羥基苯甲醛，是丹參水溶 性成分丹酚酸B降解的主要產(chǎn)物之一，存在于唇形科植物丹參等植物中，也存在于鱗始蕨 科植物烏蕨的葉中，冬青科植物四季青葉中，來源十分廣泛。研究表明，原兒茶醛具有非常 廣泛的藥理活性，包括抗動(dòng)脈粥樣硬化、保護(hù)心肌、抗血栓形成、神經(jīng)保護(hù)、抗膿血、抗病毒、 抗纖維化等方面。迄今為止，有關(guān)原兒茶醛在治療男性不育癥和體外處理精子中的用途還 沒有文獻(xiàn)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明目的是提供一種原兒茶醛在治療男性不育癥及體外處理精子中的應(yīng)用，解 決【背景技術(shù)】中存在的上述問題。
[0006] 本發(fā)明的技術(shù)方案是： 原兒茶醛在治療男性不育癥及體外處理精子中的應(yīng)用，將原兒茶醛用于治療男性不育 癥及體外處理精子。
[0007] 所述原兒茶醛用于治療男性不育癥，原兒茶醛水溶液穩(wěn)定性較差，使用固體制劑， 如片劑、顆粒劑、膠囊劑、軟膠囊、滴丸等。
[0008] 用藥劑量：根據(jù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)換算，推薦劑量為4. 4mg/kg(約300mg/d)。
[0009] 用藥方法：口服。
[0010] 用藥療程：推薦1-2個(gè)生精周期，即3-6個(gè)月。
[0011] 可單獨(dú)使用，也可與其他藥物合用。
[0012] 所述原兒茶醛用于體外處理精子，原兒茶醛水溶液穩(wěn)定性較差，制成粉針劑，現(xiàn)用 現(xiàn)配，用少量生理鹽水溶解后，加入精子營養(yǎng)液中使用，推薦濃度范圍為0. 1mg/ml-lmg/ ml〇
[0013] 本發(fā)明通過試驗(yàn)證明，原兒茶醛能增加環(huán)磷酰胺導(dǎo)致的雄性不育小鼠的睪丸指數(shù) 及附睪指數(shù)，提尚精子核成熟度，保護(hù)睪丸組織形態(tài)正常，增加睪丸中S0D活性，提尚睪丸 中DJ-1蛋白含量。原兒茶醛具有治療男性不育癥的藥理活性。
[0014] 本發(fā)明通過體外實(shí)驗(yàn)證明，原兒茶醛與精子在體外孵育后，能顯著提高精子存活 率及精子膜完整性，在體外處理精子方面有一定的應(yīng)用前景。
[0015] 男性不育癥的治療主要包括藥物治療和人類輔助生殖技術(shù)。男性不育癥的治療藥 物種類有限，亟需開發(fā)新的治療藥物。人類輔助生殖技術(shù)中必需對(duì)精子進(jìn)行體外處理，其所 需的精子營養(yǎng)液尚有待改善。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，原兒茶醛可用于男性不育癥的治療和精子體外 處理，并具有出人意料的技術(shù)效果。
[0016] 本發(fā)明中男性不育癥的誘導(dǎo)劑環(huán)磷酰胺是臨床上常用的抗腫瘤藥物及免疫抑制 劑，效果好且價(jià)格便宜，但環(huán)磷酰胺具有明顯的男性生殖毒性，很大程度上限制了其應(yīng)用。 本發(fā)明表明，原兒茶醛也可以用于防治環(huán)磷酰胺導(dǎo)致的男性生殖損傷，從而推廣環(huán)磷酰胺 在臨床上的使用，也可為患者減輕經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。
[0017] 原兒茶醛治療男性不育癥的優(yōu)點(diǎn)和有益效果： 對(duì)于男性不育癥，目前臨床常用的藥物治療方式有：激素治療，包括抗雌激素、促性腺 激素、促性腺激素釋放激素、雄激素、芳香化酶抑制藥；抗氧化治療，包括常用的維生素E、 輔酶Q10等；其他藥物，包括肉毒堿等。
[0018] (-）激素治療：抗雌激素療效并不肯定，不適合長期治療；促性腺激素的療效有 限，應(yīng)用較少；促性腺激素釋放激素費(fèi)用較高，療效欠佳，一般不推薦使用；雄激素治療對(duì) 妊娠率并無明顯改善；芳香化酶抑制藥不能改善精液質(zhì)量，而且價(jià)格昂貴，故臨床較少使 用。由此可見，激素治療在臨床上并不常用，且價(jià)格昂貴；而原兒茶醛來源豐富，故價(jià)格相對(duì) 低廉，可推廣使用。
[0019] (二）抗氧化治療：維生素E療效較明確，其作用機(jī)制主要是抗氧化應(yīng)激，維生素E 不溶于水，制劑中含有食用油，治療男性不育癥長期服用維生素E制劑可能導(dǎo)致患者脂肪 攝入增多，從而引發(fā)相關(guān)疾病，如血脂異常等；而原兒茶醛水溶性好，不會(huì)增加患者脂肪攝 入量。輔酶Q10 (400mg/d，6個(gè)月）可改善患者精液質(zhì)量，按藥品價(jià)格，患者每日費(fèi)用約12 元，改善精液質(zhì)量（6個(gè)月）費(fèi)用約2160元；而原兒茶醛價(jià)格較低廉。維生素E和輔酶Q10的 作用機(jī)制是抗氧化，而原兒茶醛除了能對(duì)抗氧化應(yīng)激外，還有其他作用機(jī)制(增加睪丸DJ-1 蛋白含量)。
[0020] (三)其他：肉毒堿目前應(yīng)用較廣泛，肉毒堿治療男性不育癥常用劑量為2_3g/d，參 考藥品價(jià)格，患者每日費(fèi)用22-33元，1個(gè)療程（3個(gè)月）治療費(fèi)用1980-2970元，2個(gè)療程（6 個(gè)月）治療費(fèi)用3960-5940元，費(fèi)用相對(duì)較高；而原兒茶醛來源豐富，而且每日用量少（300 mg/d)，故治療費(fèi)用比肉毒堿低。肉毒堿的作用機(jī)制主要是抗氧化，而原兒茶醛除了能對(duì)抗 氧化應(yīng)激外，還有其他作用機(jī)制(增加睪丸DJ-1蛋白含量)。綜上所述，目前臨床治療男性 不育癥應(yīng)用較多的藥物是肉毒堿和維生素E，二者的主要作用機(jī)制是抗氧化應(yīng)激，而原兒茶 醛除具有抗氧化應(yīng)激作用外，還能提高睪丸DJ-1蛋白含量，在治療男性不育癥機(jī)制上優(yōu)于 肉毒堿和維生素E。因此，我們認(rèn)為，原兒茶醛在臨床上可單獨(dú)使用治療男性不育癥，也可與 肉毒堿和維生素E聯(lián)合使用。
[0021] 原兒茶醛體外處理精子的優(yōu)點(diǎn)和有益效果： 目前常用的精子營養(yǎng)液有Ham's-F10、Earle's、HTF等，其主要成分均是各種無機(jī)鹽與 氨基酸，沒有添加其他成分。在精子營養(yǎng)液中加入原兒茶醛，可發(fā)揮其抗氧化應(yīng)激作用，清 除精子體外處理過程中產(chǎn)生的氧自由基，從而保護(hù)精子形態(tài)和功能，比單獨(dú)應(yīng)用精子營養(yǎng) 液效果更加。此外，原兒茶醛價(jià)格低廉，不會(huì)增加體外處理精子的操作成本，而且使用方便 (直接加入營養(yǎng)液中即可)，不會(huì)明顯增加操作步驟和時(shí)間。
【附圖說明】
[0022] 圖1為本發(fā)明原兒茶醛對(duì)環(huán)磷酰胺致雄性不育小鼠的睪丸形態(tài)學(xué)的影響 (X400)； 圖2為本發(fā)明原兒茶醛對(duì)環(huán)磷酰胺致雄性不育小鼠的睪丸組織S0D活性的影響（ 霧土S，n=10); 圖3為本發(fā)明原兒茶醛對(duì)環(huán)磷酰胺致雄性不育小鼠的睪丸DJ-1蛋白表達(dá)的影響(i~ ±S,n=3)〇
【具體實(shí)施方式】
[0023] 以下結(jié)合附圖，通過實(shí)例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。
[0024] 原兒茶醛在治療男性不育癥及體外處理精子中的應(yīng)用，將原兒茶醛用于治療男性 不育癥及體外處理精子。
[0025] 所述原兒茶醛用于治療男性不育癥，使用固體制劑； 用藥劑量：4. 4mg/kg(約 300mg/d); 用藥方法：口服。
[0026] 用藥療程：1-2個(gè)生精周期，即3-6個(gè)月。
[0027] 可單獨(dú)使用，也可與其它藥物合用。
[0028] 所述原兒茶醛用于體外處理精子，制成粉針劑，現(xiàn)用現(xiàn)配，用少量生理鹽水溶解 后，加入精子營養(yǎng)液中使用，濃度為〇. 1mg/ml-lmg/m