丹參酚酸膠囊在促進骨修復(fù)防治骨關(guān)節(jié)炎及骨質(zhì)疏松的應(yīng)用
【專利說明】
[0001]技術(shù)領(lǐng)域本發(fā)明涉及一種以丹參總酚酸中主要有效成分丹參素、丹酚酸B和原兒茶醛以一定的比例組成藥物及保健食品丹參酚酸膠囊在促進骨修復(fù)，防治骨關(guān)節(jié)炎及骨質(zhì)疏松方面的應(yīng)用。屬藥品的新配方，新制劑及新用途的技術(shù)領(lǐng)域。
[0002]【背景技術(shù)】丹參為中醫(yī)常用的活血化瘀藥，為唇形科鼠尾草屬植物丹參的干燥根及根莖，廣泛應(yīng)用于治療心血管疾病。丹參中含有兩類主要有效成分，即脂溶性丹參酮類和水溶性丹參酚酸類?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，丹參酚酸類成分能夠縮小心肌梗死的范圍，減輕其病情，對大鼠心肌缺血、再灌注損傷具有保護作用，同時有明顯的抑制血小板聚集、抗凝、溶纖及降低血脂、抗動脈粥樣硬化的作用，在臨床上已被廣泛應(yīng)用。
[0003]骨關(guān)節(jié)炎是一種以關(guān)節(jié)軟骨退行性變和繼發(fā)性骨質(zhì)增生為特性的慢性關(guān)節(jié)疾病，系由于增齡、肥胖、勞損、創(chuàng)傷、關(guān)節(jié)先天性異常、關(guān)節(jié)畸形等諸多因素引起的關(guān)節(jié)軟骨退化損傷、關(guān)節(jié)邊緣和軟骨下骨反應(yīng)性增生，又稱骨關(guān)節(jié)病、退行性關(guān)節(jié)炎、老年性關(guān)節(jié)炎、肥大性關(guān)節(jié)炎等。臨床表現(xiàn)為緩慢發(fā)展的關(guān)節(jié)疼痛、壓痛、僵硬、關(guān)節(jié)腫脹、活動受限和關(guān)節(jié)畸形等。
[0004]類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是一種以關(guān)節(jié)滑膜炎為特征的慢性全身性自身免疫性自身免疫性疾病，滑膜炎持久反復(fù)發(fā)作，可導(dǎo)致關(guān)節(jié)內(nèi)軟骨和骨的破壞，關(guān)節(jié)功能障礙，甚至殘廢，血管炎病變累及全身各個器官，故本病又稱為類風(fēng)濕病。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎病因尚未明了，以慢性、對稱性、多滑膜關(guān)節(jié)炎和關(guān)節(jié)外病變?yōu)橹饕R床表現(xiàn)，屬于自身免疫炎性疾病。該病好發(fā)于手、腕、足等小關(guān)節(jié)，反復(fù)發(fā)作，呈對稱分布。早期有關(guān)節(jié)紅腫熱痛和功能障礙，晚期關(guān)節(jié)可出現(xiàn)不同程度的僵硬畸形，并伴有骨和骨骼肌的萎縮，極易致殘。從病理改變的角度來看，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是一種主要累及關(guān)節(jié)滑膜，以后可波及到關(guān)節(jié)軟骨、骨組織、關(guān)節(jié)韌帶和肌鍵，其次為漿膜、心、肺及眼等結(jié)締組織的廣泛性炎癥性疾病。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的全身性表現(xiàn)除關(guān)節(jié)病變外，還有發(fā)熱、疲乏無力、心包炎、皮下結(jié)節(jié)、胸膜炎、動脈炎、周圍神經(jīng)病變等。廣義的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎除關(guān)節(jié)部位的炎癥病變外，還包括全身的廣泛性病變。
[0005]原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥是老年人的常見病，從整個世界范圍來看，60歲以上老人占整個人口中的比例不斷上升，我國目前已步入老齡化社會，因而關(guān)注老人身體健康，提高生活質(zhì)量顯得十分重要。由于骨質(zhì)疏松，老年人脊椎骨折，髖部骨折發(fā)生率在增高，并發(fā)癥嚴(yán)重，常長期臥床，失去生活能力，死亡率高達15-30%，因此防治老年骨質(zhì)疏松病不僅是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)界急待解決的問題，也是一個社會化問題。原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥本質(zhì)上是衰老的集中體現(xiàn)，可分為絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松(I型)和老年性骨質(zhì)疏松(II型)。絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松多見于絕經(jīng)后15?20年由于雌激素不足的婦女，為高轉(zhuǎn)換型骨質(zhì)疏松；老年性骨質(zhì)疏松多見于70歲以上的老年人，男女均可發(fā)病，多為低轉(zhuǎn)換型骨質(zhì)疏松。目前防治骨質(zhì)疏松癥的藥物主要分為三種類型:一類為抑制骨吸收的藥物，如雌激素、降鈣素、孕激素、二膦酸鹽類等；另一類是促進骨形成的藥物，如氟化物、同化類固醇激素、依普拉芬等；第三類為作用骨礦化的藥物，如鈣劑、維生素D等。第一類是預(yù)防、治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的主要藥物，但存在嚴(yán)重的不良反應(yīng)，其最嚴(yán)重不良反應(yīng)是刺激子宮內(nèi)膜增生，增加子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病率，而且長期使用也會增加乳腺癌的發(fā)病率和引起子宮出血等。第二類則較適合于老年性骨質(zhì)疏松，但這一類藥物還處于研發(fā)的初始階段，有良好前景，其代表藥氟化物證明可增加骨量，但卻會降低骨質(zhì)量而誘發(fā)繼發(fā)性骨折。第三類藥物療效明確且安全，但也存在一些不良反應(yīng)。因此，尋找療效肯定，無毒副作用的防治骨質(zhì)疏松的藥物成為了一個新的研究熱點。
[0006]丹參是我國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中應(yīng)用廣泛的藥物，其化學(xué)成分主要分為兩類，S卩脂溶性的二萜醌類化合物和水溶性的酚酸類成分。在我國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中應(yīng)用丹參主要為其水煎液，國內(nèi)外學(xué)者對丹參水溶性成分的研究比較深入。丹參的水溶性成分主要為酚酸類物質(zhì)，主要包括丹參素、原兒茶醛、丹酚酸B、咖啡酸、丹酚酸F、丹酚酸H/L、丹酚酸G、丹酚酸D、丹酚酸E、迷迭香酸、紫草酸、異丹酚酸B/E、丹酚酸C、丹酚酸A等。丹參的水溶性成分均具有酚酸性結(jié)構(gòu)，其中最早發(fā)現(xiàn)的為丹參素，化學(xué)名稱為3，4_ 二羥基苯乳酸，丹參酚酸是一類含有酚羥基的有機酸類化合物，是丹參水溶性成分中重要的組成部分。丹參酚酸有多種，但都具有相似的基本結(jié)構(gòu)，并具有相似的作用。丹參酚酸B又稱為丹參酚酸乙或紫草酸B，是一種縮酸酸類多輕基化合物，淡黃色無定形粉末，分子式C36H3t116,為三分子丹參素與一分子咖啡酸縮合而成，是目前研究較多的丹參酚酸之一。丹參素和丹參酚酸B對心、腦、肝等器官具有重要的藥理作用，已有較多的報道，在臨床上廣泛應(yīng)用，丹參單獨應(yīng)用或與其他中藥聯(lián)合應(yīng)用對骨的損傷的保護作用目前報道不多，主要有:
[0007]1.丹參促進骨組織的微循環(huán):丹參可以從降低全血黏度和細胞聚集指數(shù)，提高紅細胞變形指數(shù)等方面，提高血流速度，使微循環(huán)得到顯著改善。丹參促進微循環(huán)對心臟微血管內(nèi)皮細胞的損傷起保護作用已有許多報道，有人觀察到黃芪丹參注射液對大鼠骨骼肌鈍挫傷后修復(fù)有明顯改善作用，骼肌鈍挫傷后早期給予黃芪丹參注射液可改善損傷骨骼肌的局部微循環(huán)，并減輕組織水腫程度，促進損傷骨骼肌愈合，該作用可能與丹參促進微循環(huán)有關(guān)。有人采用可視化連續(xù)性微循環(huán)觀察系統(tǒng)，發(fā)現(xiàn)丹參素改善微循環(huán)作用的可能途徑為抑制白細胞與血管內(nèi)皮細胞黏附(王茂林，等，黃芪丹參注射液對大鼠急性骨骼肌鈍挫傷后微循環(huán)的影響.中國運動醫(yī)學(xué)雜志，2009，28 (6) =651-653) ο
[0008]2.丹參對成骨細胞與破骨細胞的調(diào)控:丹參能促進骨形成的主要功能細胞成骨細胞樣細胞的分裂和增殖，增加滿足骨折愈合的需要，能促進成骨細胞樣細胞合成和分泌更多的骨質(zhì)基質(zhì)，還能促進和加速鈣鹽沉積及骨組織形成，加快骨折的愈合速度(張曉峰，等，丹參注射液髓關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射促進股骨頸骨折愈合27例，中醫(yī)藥信息，2001，18(3):37)。有人采用用新生的SD大鼠頭蓋骨，膠原酶法培養(yǎng)成骨細胞，用MTT法來測定不同濃度丹參對體外培養(yǎng)成骨細胞在24、48、72h不同時段的促細胞增殖作用，采用堿性磷酸(ALP)活性觀察上述藥物的促細胞分化作用。結(jié)果:0.05%,0.10%,0.15%的丹參可促進成骨細胞增殖率提高(P < 0.05);不同濃度丹參可使堿性磷酸酶(ALP)活性增強(P < 0.05)，證明了丹參具有促進成骨細胞增殖及分化的作用(劉國良，等，丹參對大鼠成骨細胞增殖和分化的影響，重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2006，3U6):865-867)。破骨細胞主要作用是從事骨吸收，可以選擇性吸收損傷部位的骨質(zhì)，丹參可通過對破骨細胞生成的調(diào)節(jié)，達到修復(fù)骨組織的作用，丹參具有抑制了破骨母細胞向多核破骨細胞轉(zhuǎn)化，抑制破骨母細胞的形成，此外，丹參還對促破骨細胞生成作用產(chǎn)生抑制，致使多核破骨細胞數(shù)大量減少，而這兩種物質(zhì)正是通過促使破骨母細胞融合形成多核破骨細胞來促進骨吸收的(丁寅，等，丹參對骨髓培養(yǎng)中破骨細胞生成的影響，實用口腔醫(yī)學(xué)雜志，1999，15(1):10-ll)o我們的通過骨形態(tài)計量學(xué)研究丹參水提物對骨的影響，證明了丹參水提物能降低骨小梁表面破骨細胞的數(shù)目和周長，增加骨形成率，是預(yù)防骨質(zhì)疏松的良藥(崔燎，等，丹參水提物和丹參促進成骨細胞活性和防治潑尼松所致大鼠骨質(zhì)疏松，中國藥理學(xué)通報，2004，20 (3) =286-291)。
[0009]3丹參對成纖維細胞的影響:成纖維細胞對骨創(chuàng)傷的修復(fù)有著十分重要的作用，骨折初期就出現(xiàn)于骨折局部血腫中，在機化血腫及骨折斷端的間隙及其周圍大量存在，是參與纖維骨痂階段的主要細胞成分。丹參對體外培養(yǎng)成纖維細胞的生長增殖和膠原合成有明顯抑制作用(劉敏，等，胰島素及丹參對體外培養(yǎng)成纖維細胞影響的實驗研究，中國修復(fù)重建外科雜志，1998，12 (I):52-53)。
[0010]4.丹參對骨折愈合有一定的促進作用:有人觀察了由丹參素和川芎嗪組成丹參緩釋劑植入新西蘭健康白兔骨折局部對骨折愈合的影響，分別于術(shù)后第2、4、5、6周取右橈骨行X線片及組織學(xué)檢查；第2、4、6周行電鏡及骨密度檢查；第5、6周進行生物力學(xué)測試。結(jié)果X線片顯示實驗組較對照組骨折愈合提前；組織學(xué)觀察實驗組纖維性骨痂、軟骨性骨痂、骨小梁之間過渡加快，毛細血管增生明顯；電鏡檢查實驗組示骨折修復(fù)細胞形態(tài)學(xué)變化均有利于修復(fù)骨折；術(shù)后第2、4、6周時骨密度值實驗組均較對照組高，其中第4周時兩者差異具有顯著性(P < 0.05)。術(shù)后第5、6周實驗組抗折力均較對照組高(P < 0.05);結(jié)果證明在骨折局部使用丹參緩釋劑對骨折愈合具有一定的促進作用(王俊國，等，植入型復(fù)方丹參緩釋劑對骨折愈合影響的實驗研究，中國骨傷，2005，18(1):28-31)。
[0011]5丹參對生長因子的影響:生長因子具有刺激細胞生長活性的細胞因子，某些生長因子促進生成大量的成骨細胞、抑制破骨細胞。我們項目組通過免疫組化的結(jié)果顯示，在骨折愈合的中期，丹參可以促進轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β I)的表達，而TGF-β能促進骨膜間充質(zhì)細胞和成骨細胞增殖、移動、聚集，抑制破骨細胞的活性，偶聯(lián)骨形成和骨吸收。提示復(fù)方丹參可能是通過增加TGF-β I的表達而促進家兔骨折中期骨愈合(許碧蓮，吳鐵，張新樂，等，復(fù)方丹參對家兔骨折愈合腎組織轉(zhuǎn)化生長因子的影響，時珍國醫(yī)國藥，2009，20 (3):588-589)ο
[0012]丹參能增加毛細血管的生成數(shù)量，改善和增加骨折局部的血液供應(yīng)；促進成骨細胞與破骨