自體纖維蛋白的臨時(shí)制備
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明總體涉及包括纖維蛋白原和凝血酶的組織和細(xì)胞的制備。更具體地講，本發(fā)明涉及被設(shè)計(jì)用于分離血液或血漿蛋白組分的系統(tǒng)及裝置，以及它們的用途，具體地涉及從單個(gè)血液捐獻(xiàn)者分離和濃縮富含纖維蛋白原和凝血酶的血漿級(jí)分，并且涉及它們隨后的組合以出于組織和細(xì)胞工程目的提供例如自體纖維蛋白膠或纖維蛋白凝膠或者作為3D纖維基質(zhì)。
【背景技術(shù)】
[0002]處于纖維蛋白膠和密封膠形式的組織粘合劑已被提出用于在多種外傷和手術(shù)情況下控制出血、密封傷口邊緣并且促進(jìn)傷口愈合。此外，纖維蛋白密封膠可用于充當(dāng)生物基質(zhì)以有利于和提高細(xì)胞生存期、細(xì)胞分化和細(xì)胞增殖，重點(diǎn)在于生長(zhǎng)因子和干細(xì)胞。纖維蛋白膠和纖維蛋白凝膠包含纖維蛋白原和凝血酶，該纖維蛋白原和凝血酶，當(dāng)混合在一起時(shí)，形成纖維的固化纖維蛋白網(wǎng)，即用于止血和凝血的強(qiáng)度的基本物質(zhì)。纖維蛋白可內(nèi)部操作地用于影響止血、傷口邊緣的密封或者用作粘附性預(yù)防屏障。
[0003]在歐洲和其他地方，商業(yè)的纖維蛋白膠從纖維蛋白原和凝血酶制備，所述纖維蛋白原和凝血酶從來自多個(gè)人類捐獻(xiàn)者或從動(dòng)物來源(例如，牛)的混合血漿冷沉物獲得。這些產(chǎn)品是利用實(shí)驗(yàn)室藥物監(jiān)管制造工藝進(jìn)行制備，該工藝包括需要巴氏殺菌和過濾以便消除可從這些源轉(zhuǎn)移到患者的有害病原體。
[0004]這些技術(shù)的已被證實(shí)的另外風(fēng)險(xiǎn)是源于與此類混合血漿源相關(guān)聯(lián)的組成部分的免疫反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)。另外，該技術(shù)的復(fù)雜性在于冷藏管理、冗長(zhǎng)的圍術(shù)期處理時(shí)間和成本(尤其是在更高容量方面)。這些原因使得這些產(chǎn)品需要謹(jǐn)慎使用或者完全撤銷。
[0005]為了避免與混合血漿源相關(guān)聯(lián)的風(fēng)險(xiǎn)，已經(jīng)提出使用在纖維蛋白原和凝血酶從單個(gè)捐獻(xiàn)者獲得的情況下的自體纖維蛋白膠、密封膠或凝膠。這些纖維蛋白產(chǎn)品中的一些，然而，必須依賴于自體纖維蛋白原與例如牛凝血酶的組合，并且因此仍遭受與非人類產(chǎn)品相關(guān)聯(lián)的風(fēng)險(xiǎn)或缺陷，例如針對(duì)牛血楽■蛋白的免疫反應(yīng)。
[0006]出于這些原因，在纖維蛋白原和凝血酶組分從單個(gè)人類捐獻(xiàn)者血液或血漿樣品分離并且用在相同捐獻(xiàn)者身上的情況下，已經(jīng)提出了改進(jìn)的纖維蛋白產(chǎn)品及其制備方法。
[0007]還已經(jīng)相繼提出了若干系統(tǒng)、工具或裝置、以及方法，并且至少提出了相同情況中的一些，隨后啟動(dòng)以便滿足這種尚未被滿足的臨床需求。
[0008]EP 0877 632 B1，例如，涉及用于逐步制備手術(shù)所用的自體纖維蛋白膠的方法，該方法包括血液樣品的離心分離以提供主要由血漿組成的包含纖維蛋白原的上清液，借助于離心分離和隨后的過濾來濃縮血漿級(jí)分中的纖維蛋白原，并且在使用前最終冷凍所濃縮的血漿。通過使解凍的濃縮的血漿級(jí)分與適當(dāng)?shù)囊?事實(shí)上是凝血酶)混合來獲得纖維蛋白膠。使用構(gòu)成閉合系統(tǒng)的連通的塑料小袋執(zhí)行離心分離，并且事實(shí)上手動(dòng)執(zhí)行特定血漿級(jí)分的轉(zhuǎn)移。
[0009]EP 1155 706 A1披露了用于制備“高濃縮的臨床備好的纖維蛋白原”的設(shè)備并且披露了閉合系統(tǒng)，其實(shí)是具有用于容納來自患者血液濃度的構(gòu)件、從不希望的組分提取和分離血漿的質(zhì)膜分離器、提供纖維蛋白原分離的第二質(zhì)膜分離器的設(shè)備。
[0010]真空栗連接到纖維蛋白原收集器；冷凍機(jī)用于為多種血漿級(jí)分提供可調(diào)溫度；通訊構(gòu)件包括至少一個(gè)蠕動(dòng)栗以維持該閉合系統(tǒng)內(nèi)的血漿運(yùn)輸。根據(jù)特定實(shí)施例，該系統(tǒng)還包括混合器以用于使纖維蛋白原與適當(dāng)濃度的自體凝血酶和鈣鹽混合以形成纖維蛋白膠。[0011 ] EP 1420 833涉及用于制備自體血小板凝膠的系統(tǒng)(設(shè)備)，該系統(tǒng)將自體抗凝血液樣品用作起始材料，并且包括(在其他中)第一容器，該第一容器包括用于激活血液組分的構(gòu)件，其然后提供凝固的血液成分并且最終由此表達(dá)凝血酶。
[0012]所述第一血管裝配有外部過濾器，該外部過濾器具有允許凝血酶選擇性通過的孔尺寸，該過濾的凝血酶然后與自體血液組分的單獨(dú)部分進(jìn)行混合以形成自體血小板凝膠，該自體血液組分如紅細(xì)胞、包細(xì)胞、富血小板血漿(PRP)、貧血小板血漿(PPP)，所有這些成分得自初始的自體血液樣品的離心分離并且被儲(chǔ)存于第二容器中。
[0013]所有這些溶液及其等效物存在一些缺點(diǎn):最簡(jiǎn)單的系統(tǒng)，例如EP 0877 632 B1中限定的系統(tǒng)，存在如下風(fēng)險(xiǎn)，即干擾無菌情況(手動(dòng)操作所固有的)，不能產(chǎn)生滿足大手術(shù)所需的足夠數(shù)量，手術(shù)期間操作不切實(shí)際，在手術(shù)前勞動(dòng)輸入和材料兩方面耗費(fèi)過大，并且花費(fèi)時(shí)間過長(zhǎng)從而不允許此類系統(tǒng)在手術(shù)期間的使用。
[0014]如上文所提及的閉合系統(tǒng)，或者它們的等價(jià)物，已被證實(shí)過于復(fù)雜而難以處理并且難以監(jiān)測(cè)，由于必須在隨后的重復(fù)使用之前對(duì)其部件中的大部分進(jìn)行清理、凈化(如果確實(shí)需要)和消毒故在它們的實(shí)際使用中太昂貴，因此不適宜采用，這樣使得使用基于重組體或動(dòng)物的產(chǎn)品、冷凍儲(chǔ)存作為實(shí)際的、成本經(jīng)濟(jì)的技術(shù)用于如今僅需要少量的纖維蛋白的手術(shù)，如此在這些手術(shù)中遺留了未滿足的醫(yī)療需要，尤其是需要大于10ml的更大容量的心臟和矯形手術(shù)。
[0015]本發(fā)明適當(dāng)?shù)嘏懦中g(shù)過程中仍面臨的所有障礙并且回應(yīng)明顯未滿足的臨床需要。本發(fā)明由下文的權(quán)利要求限定。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0016]本發(fā)明的目的是可用于血漿或血液組分的處理或分離的系統(tǒng)，包括被布置用于與可拆卸一次性裝置協(xié)作的特定支撐平臺(tái)，并且該系統(tǒng)包括機(jī)械致動(dòng)構(gòu)件、機(jī)械或電磁或視覺接觸的構(gòu)件、熱轉(zhuǎn)移構(gòu)件、振蕩構(gòu)件、控制與命令構(gòu)件、以及下文限定的可拆卸一次性裝置。
[0017]本發(fā)明的另一個(gè)方面是用于上述系統(tǒng)的可拆卸一次性裝置，并且包括:連通的治療室、儲(chǔ)存室；用于使液體流從一個(gè)室轉(zhuǎn)移到另一個(gè)室的構(gòu)件(分別地，液體流或氣體流從裝置2的外部到內(nèi)部，或者從裝置2的內(nèi)部到外部)，和用于控制液體流從一個(gè)室到另一個(gè)室的構(gòu)件(分別地，液體流從裝置2的外部到內(nèi)部，或者從裝置2的內(nèi)部到外部)。
[0018]本發(fā)明的另一個(gè)目的是使用所述系統(tǒng)來分別制備富集凝血酶和纖維蛋白原的至少兩種單獨(dú)的自體血漿級(jí)分。
[0019]本發(fā)明的另一個(gè)目的是用于富集血漿級(jí)分的纖維蛋白原含量的裝置，該裝置包括以建立自調(diào)節(jié)的閉合回路的方式連接的三個(gè)獨(dú)立的室；這些室中的每一個(gè)均配備有入口和/或出口，并且適于在專用容器中單獨(dú)地執(zhí)行或者嵌入在上文所述系統(tǒng)中執(zhí)行。
[0020]本發(fā)明的另一個(gè)目的是使用所述系統(tǒng)來臨時(shí)制備自體纖維蛋白。
[0021]本發(fā)明的另一個(gè)目的是使用所述系統(tǒng)來制備3D纖維蛋白細(xì)胞保存基質(zhì)和細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖基質(zhì)。
【附圖說明】
[0022]圖1是透視圖，其示出了配備有專用構(gòu)件的平臺(tái)1，該專用構(gòu)件應(yīng)當(dāng)與嵌入在裝置2中的對(duì)應(yīng)構(gòu)件協(xié)作。
[0023]圖2是平臺(tái)1和裝置2的局部截面圖。
[0024]圖3是裝置2內(nèi)部的示意性表示。
【具體實(shí)施方式】
[0025]本發(fā)明系統(tǒng)首先包含平臺(tái)1。此平臺(tái)尤其包括機(jī)械激活構(gòu)件3a、3b、3c……(例如垂直連接軸)，其各自布置在嵌入式引擎(未圖解說明)中或連接到該嵌入式引擎并按次序排列以牽引栗(例如，位于例如可拆卸裝置2內(nèi)部的蠕動(dòng)栗3a、3b、3c……)的相應(yīng)對(duì)應(yīng)部分。
[0026]牽引上述軸的所述引擎中的每一者經(jīng)單獨(dú)控制，以例如接通或關(guān)斷所述栗以及用于其旋轉(zhuǎn)速度。此控制是根據(jù)預(yù)定義且預(yù)設(shè)的方案借助中央控制和命令單元5a(例如，微處理器)來進(jìn)行:由此可實(shí)質(zhì)上自動(dòng)管控或另一選擇根據(jù)用戶自己的選擇管控所述引擎。在此后一情形下，用戶的指令借助例如觸敏屏5a傳輸遍及上述平臺(tái)。
[0027]平臺(tái)1還包括機(jī)械、電磁或甚至視覺接觸構(gòu)件4a、4b、4c……這些構(gòu)件可包括例如壓力傳感器、熱傳感器或可見光或紅外光檢測(cè)器。這些接觸構(gòu)件4a、4b、4c……具體來說用于檢查和控制位