一種抗腦衰老的野竹蘭提取物及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中藥提取物領(lǐng)域，具體涉及一種野竹蘭提取物，該提取物的制備方法 及醫(yī)藥用途，該提取物可以用于抗腦衰老。
【背景技術(shù)】
[0002] 藥材野竹蘭為蘭科植物小花火燒蘭的根。秋季挖根，洗凈曬干。
[0003] 原植物小花火燒蘭為陸生植物，高20-50cm。根莖短，具細(xì)而長的根。莖直立，上 部具短柔毛，下部有3-4枚鞘。葉2-5枚，互生；葉片卵形至卵狀披針形?？偁罨ㄐ蚓?-45 朵花?；ㄐ蜉S被短柔毛；花苞片葉狀，卵形至披針形，通常下部的比花長，上部較短；花綠色 至淡紫色，下垂，稍開放；中萼片卵狀披針形、舟狀，長8-10mm，先端漸尖；側(cè)萼片和中萼片 相似，但稍斜歪；花瓣較小，卵狀披針形；唇瓣長6-8mm，后部杯狀，半球形；前部三角形、卵 形至心形，長3-4_，先端鈍、急尖至漸尖，常在近基部處有2枚平滑或稍皺縮的突起；合蕊 柱連花藥長3-4mm;子房倒卵形，長1-1. 5_，無毛。花期7-10月。生于林下或草坡上。分 布于東北、華北、西北及西南。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種野竹蘭提取物，其制備方法和液相分析方法，含有該 提取物的藥物制劑及利用該提取物制備治療抗腦衰老的藥物的用途。
[0005] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0006] -種野竹蘭提取物，該提取物由以下方法制備：
[0007] (a)以重量計(jì)，每100份藥材包含干燥的野竹蘭80~90份和甘草10~20份， 混合粉碎，用60 %乙醇溶液熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味得到乙醇提取濃縮液； (b)將步驟（a)所得乙醇提取濃縮液用水稀釋，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇 萃取，減壓濃縮，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（C)正丁醇萃 取物用水溶解，過濾，用大孔樹脂富集活性成分，先用8%乙醇沖洗12個(gè)柱體積除去大極性 成分，再用70%乙醇洗脫10個(gè)柱體積，收集70%洗脫液，減壓濃縮即得。
[0008] 進(jìn)一步地，步驟（C)中所述大孔樹脂為AB-8型大孔樹脂。
[0009] 為了能夠通過建立HPLC指紋圖譜的方法控制不同批次制備的提取物的批間差 異，所述提取物的液相分析方法為：
[0010] 色譜柱：AgilentZorbax SB-C18 柱（4. 6mmX 250mm，5 μ m);
[0011] 流動(dòng)相：A為乙腈，B為0. 4%磷酸溶液；
[0012] 梯度洗脫程序：0 ~5min，A 10%-15%;5 ~15min，A 15%-50%;15 ~23min， A 50%- 80% ;23 ~25min，A 80%- 10% ;25 ~30min，A 10%
[0013] 流動(dòng)相流速：1. OmL · min S
[0014] 檢測波長：263nm;
[0015] 柱溫：30°C ;
[0016] 進(jìn)樣量：10 μ L。
[0017] 藥物制劑，含有治療有效量的所述提取物和藥學(xué)上可接受的載體。
[0018] 所述的提取物在制備治療抗腦衰老的藥物中的應(yīng)用。
[0019] 所述的藥物制劑在制備治療抗腦衰老的藥物中的應(yīng)用。
[0020] 本發(fā)明提取物用作藥物時(shí)，可以直接使用，或者以藥物制劑的形式使用。
[0021] 所述藥物制劑含有治療有效量的本發(fā)明野竹蘭提取物，其余為藥物學(xué)上可接受 的、對人和動(dòng)物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0022] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物制劑以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明提取物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時(shí)，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時(shí)，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
[0023] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：本發(fā)明通過對干燥的野竹蘭進(jìn)行提取、除雜、富集處理，能得到具 有抗腦衰老功能的提取物；本發(fā)明提供的液相分析方法可以用于建立該提取物的指紋圖 譜，用于控制不同批次制備的提取物的批間差異。
【附圖說明】
[0024] 圖1為野竹蘭提取物HPLC液相圖譜。
【具體實(shí)施方式】
[0025] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0026] 實(shí)施例1 :提取物制備（野竹蘭85份，甘草15份）
[0027] 藥材來源：野竹蘭和甘草干燥根莖購自安徽亳州中藥材市場。
[0028] 主要試劑：食品級乙醇購自上海凌峰化學(xué)試劑有限公司；醫(yī)藥級AB-8大孔樹脂購 自天津波鴻樹脂有限公司；乙腈為HPLC級，購于TEDIA ;85 %磷酸為HPLC級，購于TEDIA ; 色譜用純凈水為哇哈哈純凈水。
[0029] 制備方法：將8. 5kg干燥的野竹蘭和I. 5kg的甘草干燥根莖混合粉碎，用60 %乙 醇溶液熱回流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到乙醇提取濃縮液（2L);將 所得乙醇提取濃縮液用水稀釋至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水 飽和的正丁醇（3LX3次）萃取，減壓濃縮，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁 醇萃取物212g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解，醫(yī)用脫脂棉過濾，用AB-8大孔樹脂（2kg， 柱體積I. 5L)富集活性成分，先用8 %乙醇沖洗12個(gè)柱體積（18L)除去大極性成分，再用 70%乙醇洗脫10個(gè)柱體積（15L)，收集70%洗脫液，減壓濃縮，即得野竹蘭提取物約120g。
[0030] 實(shí)施例2 :提取物制備（野竹蘭80份，甘草20份）
[0031] 制備方法：將8kg干燥的野竹蘭和2kg的甘草干燥根莖混合粉碎，用60%乙醇溶 液熱回流提取（25LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到乙醇提取濃縮液（2L);將所得 乙醇提取濃縮液用水稀釋至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水飽和 的正丁醇（3LX3次）萃取，減壓濃縮，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃 取物212g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解，醫(yī)用脫脂棉過濾，用AB-8大孔樹脂（2kg，柱體 積I. 5L)富集活性成分，先用8%乙醇沖洗12個(gè)柱體積（18L)除去大極性成分，再用70% 乙醇洗脫10個(gè)柱體積（15L)，收集70 %洗脫液，減壓濃縮，即得野竹蘭提取物約120g。
[0032] 實(shí)施例3 :提取物制備（野竹蘭90份，甘草10份）
[0033] 制備方法：將9kg干燥的野竹蘭和Ikg的甘草干燥根莖混合粉碎，用60 %乙醇溶 液熱回流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到乙醇提取濃縮液（2L);將所得 乙醇提取濃縮液用水稀釋至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水飽和 的正丁醇（3LX3次）萃取，減壓濃縮，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃 取物212g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解，醫(yī)用脫脂棉過濾，用AB-8大孔樹脂（2kg，柱體 積I. 5L)富集活性成分，先用8%乙醇沖洗12個(gè)柱體積（18L)除去大極性成分，再用70% 乙醇洗脫10個(gè)柱體積（15L)，收集70 %洗脫液，減壓濃縮，即得野竹蘭提取物約120g。
[0034] 實(shí)施例4 :提取物制備（野竹蘭75份，甘草25份）
[0035] 制備方法：將7. 5kg干燥的野竹蘭和2. 5kg的甘草干燥根莖混合粉碎，用60 %乙 醇溶液熱回流提取（25LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到乙醇提取濃縮液（2L);將 所得乙醇提取濃縮液用水稀釋至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水 飽和的正丁醇（3LX3次）萃取，減壓濃縮，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁 醇萃取物212g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解，醫(yī)用脫脂棉過濾，用AB-8大孔樹脂（2kg， 柱體積I. 5L)富集活性成分，先用8 %乙醇沖洗12個(gè)柱體積（18L)除去大極性成分，再用 70%乙醇洗脫10個(gè)柱體積（15L)，收集70%洗脫液，減壓濃縮，即得野竹蘭提取物約120g。
[0036] 實(shí)施例5 :提取物制備（野竹蘭95份，甘草5份）
[0037] 制備方法：將9. 5kg干燥的野竹蘭和0. 5kg的甘草干燥根莖混合粉碎，用60 %乙 醇溶液熱回流提取（25LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到乙醇提取濃縮液（2L);將 所得乙醇提取濃縮液用水稀釋至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水