獲得透明質(zhì)酸和游離形式維生素c和/或它們的鹽的穩(wěn)定凝膠的方法
【專利說明】獲得透明質(zhì)酸和游離形式維生素C和/或它們的鹽的穩(wěn)定 凝膠的方法 發(fā)明領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種交聯(lián)或非交聯(lián)透明質(zhì)酸或稱為透明質(zhì)酸鹽的其至少一種鹽，和維 生素C或稱為抗壞血酸鹽的其鹽的能存儲數(shù)月無任何顯著降解且優(yōu)選不泛黃的穩(wěn)定水凝 膠形式的可注射含水組合物的獲得方法。更具體地說，本發(fā)明涉及一種可通過這種方法獲 得的交聯(lián)或非交聯(lián)透明質(zhì)酸或其鹽，和酸形式的維生素C或其衍生自維生素C鹽的抗壞血 酸鹽形式的等價物的水凝膠形式的可注射含水組合物。
[0002] 根據(jù)本發(fā)明的組合物可尤其用于美容或治療目的。
[0003] 現(xiàn)有技術(shù)方案
[0004] 通常以可注射凝膠的形式使用透明質(zhì)酸組合物。在美容醫(yī)學(xué)或再生醫(yī)學(xué)中，為了 能夠填充皺紋和細(xì)紋、重塑面部或嘴唇，可在皮膚下注射透明質(zhì)酸凝膠。這些凝膠也在治療 醫(yī)學(xué)中使用并尤其應(yīng)用于眼科領(lǐng)域，其中，在角膜移植或青光眼或白內(nèi)障手術(shù)后凝膠能夠 使眼睛獲得水分并緩解角膜疼痛。為了減少關(guān)節(jié)疼痛，特別是風(fēng)濕病，也可在關(guān)節(jié)中注入凝 膠。
[0005] 通過使用添加劑可對這些凝膠進(jìn)行改進(jìn)，尤其是其效果的持續(xù)時間和在體內(nèi)的抗 降解性。
[0006] 這些添加劑也可具有通過注射透明質(zhì)酸增強(qiáng)治療效果的補(bǔ)充性效果。這樣的添加 劑，例如能延長期望效果的持續(xù)時間、優(yōu)化所注入產(chǎn)品的分布、限制注射過程中的疼痛并提 供補(bǔ)充性作用，尤其是抗瘀斑性、抗氧化性或生成透明質(zhì)酸或膠原的刺激性。
[0007] 在可以使用的各種添加劑中，L-抗壞血酸或維生素C由于其抗氧化性、抗衰老及 膠原促進(jìn)性，因此是特別有利的。
[0008] 然而，已證明，將游離形式維生素C和/或其鹽-即以酸形式或衍生自維生素C鹽 的抗壞血酸鹽形式-與透明質(zhì)酸凝膠組合不可能生成足夠穩(wěn)定的凝膠。實際上，加入維生 素C使透明質(zhì)酸降解并導(dǎo)致凝膠的液化和溶液的泛黃。在加熱消毒這些組合物時，它們快 速降解的情況下，這種變質(zhì)是特別不希望的。此外，維生素C分子本身不是很穩(wěn)定且快速降 解。因此，這樣的組合物不容易生產(chǎn)、存儲備用或滅菌。
[0009] 透明質(zhì)酸凝膠和維生素C的降解導(dǎo)致凝膠粘度和粘彈性的顯著降低，即在完全分 解成液體之前早期降解的跡象，伴隨出現(xiàn)深黃色。
[0010] 從文獻(xiàn)US2001/0171286、TO2011/086458 和US2012/0225842 已知結(jié)合透明質(zhì)酸 凝膠和抗壞血酸衍生物的可能包含添加穩(wěn)定劑的穩(wěn)定組合物。然而，只有當(dāng)使用維生素C 衍生物，特別是抗壞血酸磷酸鎂或抗壞血酸磷酸鈉和抗壞血酸-2-葡糖苷（AA2G)時，這樣 的組合物才是穩(wěn)定的。實際上，當(dāng)使用游離形式的維生素C和/或其鹽時，當(dāng)在高壓釜中對 組合物滅菌時，透明質(zhì)酸凝膠迅速降解。在高壓釜中處理后，凝膠泛黃且降解。本領(lǐng)域技術(shù) 人員也知道透明質(zhì)酸的這種降解。例如，文獻(xiàn)W0 95/29683和FR2 900 575描述了當(dāng)透明 質(zhì)酸凝膠與游離形式的維生素C或其鹽結(jié)合時，透明質(zhì)酸凝膠的穩(wěn)定性問題。
[0011] 此外，人們普遍接受的是，使用抗壞血酸酯，特別是棕櫚酸酯或其他維生素C衍生 物-例如，脂肪酸抗壞血酸鹽、抗壞血酸-2-葡糖苷或抗壞血酸磷酸鹽提供比直接使用游離 形式維生素C或其鹽更少的效果。
[0012] 因此，需要一種包含透明質(zhì)酸和游離形式的維生素C和/或一種其鹽的可注射凝 膠，其足夠穩(wěn)定以能夠在高壓釜中加熱滅菌，即凝膠的粘度和/或粘彈性不會顯著降低、凝 膠不會降解成液體形式且不會泛黃。
[0013] 發(fā)明目的
[0014] 本發(fā)明的目的尤其在于克服現(xiàn)有技術(shù)的這些缺點。
[0015] 更準(zhǔn)確地說，本發(fā)明的一個目的是實施包含交聯(lián)或非交聯(lián)透明質(zhì)酸或稱為透明質(zhì) 酸鹽的其至少一種鹽、游離形式的維生素C和/或稱為抗壞血酸鹽的其鹽和選自偏亞硫酸 氫鹽的穩(wěn)定劑的含水凝膠的獲得方法。
[0016] 在其實施方案的至少一個中，本發(fā)明的另一個目的是提供一種包含交聯(lián)或非交聯(lián) 透明質(zhì)酸或?qū)?yīng)透明質(zhì)酸鹽，和游離形式的維生素C和/或稱為抗壞血酸鹽的其鹽的含水 凝膠。在凝膠或其組分，特別是維生素C無任何顯著降解的情況下，為了存儲數(shù)月，優(yōu)選至 少6個月，凝膠必須足夠穩(wěn)定以能夠在高壓釜中滅菌并包裝。
[0017] 在其實施方案的至少一個中，本發(fā)明的另一個目的是將透明質(zhì)酸注射劑的優(yōu)點和 以游離形式使用的維生素C和/或其鹽的抗氧化作用、抗衰老作用以及膠原促進(jìn)作用結(jié)合。
[0018] 本發(fā)明的另一個目的是含有酸或鹽形式的交聯(lián)或非交聯(lián)透明質(zhì)酸；游離形式，即 酸或抗壞血酸鹽形式的維生素C和/或其鹽，特別是抗壞血酸鈉；以及選自偏亞硫酸氫鹽的 穩(wěn)定劑的制劑（formula)在化妝品領(lǐng)域中的用途。
[0019] 本發(fā)明的另一個目的是包含酸或鹽形式的交聯(lián)或非交聯(lián)透明質(zhì)酸；游離形式的維 生素C或其鹽，特別是抗壞血酸鈉；以及選自偏亞硫酸氫鹽的穩(wěn)定劑的可注射凝膠在美容 目的、再生目的或治療目的的用途。
[0020] 發(fā)明描述
[0021] 根據(jù)具體實施方案，本發(fā)明涉及一種制備包含透明質(zhì)酸、維生素C和選自偏亞硫 酸氫鹽的穩(wěn)定劑的含水凝膠的方法。
[0022] 根據(jù)本發(fā)明，這樣的方法包括下述步驟：
[0023] a)制備一種混合物，所述混合物包含摩爾質(zhì)量為lOOODa至lOMDa的交聯(lián)或非交聯(lián) 透明質(zhì)酸和/或其鹽、〇.lwt% -20.Owt%的酸形式的維生素C或其衍生自維生素C鹽的抗 壞血酸鹽形式的等價物、0. 〇lwt% -1. 00wt%的選自偏亞硫酸氫鹽的穩(wěn)定劑以及為了形成 水凝膠加入的使得透明質(zhì)酸含量為0. 01mg/ml-100mg/ml的水溶液；
[0024] b)在正在形成的水凝膠完全溶脹之前將混合物脫氣。
[0025] 本發(fā)明的一般原理是基于加入選自偏亞硫酸氫鹽的穩(wěn)定劑，所述加入與在制備凝 膠過程中的組合物脫氣步驟結(jié)合。令人驚訝的是，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，當(dāng)加入穩(wěn)定劑與在制備凝膠 過程中的組合物脫氣步驟結(jié)合時，獲得凝膠的穩(wěn)定性，即，至少6個月的時間內(nèi)或在高壓釜 內(nèi)處理時沒有降解，且沒有出現(xiàn)泛黃。所述穩(wěn)定性對應(yīng)于透明質(zhì)酸凝膠本身關(guān)于其粘彈性 的穩(wěn)定性和維生素C的穩(wěn)定性兩者，后者也導(dǎo)致所述凝膠不存在泛黃。
[0026] 在凝膠的組合物中使用穩(wěn)定劑。這種穩(wěn)定劑必須與醫(yī)學(xué)應(yīng)用或化妝品應(yīng)用，特別 是注射劑相容。所述穩(wěn)定劑選自按質(zhì)量計〇. 01% -1%的濃度，優(yōu)選〇. 08% -1%的濃度下 使用的還原劑或抗氧化劑。這種穩(wěn)定劑選自偏亞硫酸氫鹽，優(yōu)選地選自堿金屬偏亞硫酸氫 鹽和堿土金屬偏亞硫酸氫鹽，更優(yōu)選地選自堿金屬偏亞硫酸氫鹽，最優(yōu)選地選自偏亞硫酸 氫鉀和偏亞硫酸氫鈉。優(yōu)選的穩(wěn)定劑是偏亞硫酸氫鈉。
[0027] 因此，本發(fā)明是基于將使用偏亞硫酸氫鹽形式的穩(wěn)定劑與脫氣步驟結(jié)合的完全新 穎和具有創(chuàng)造性的方法。事實上，如果加入穩(wěn)定劑使得防止凝膠液化，但出人意料的是， 即使在高濃度穩(wěn)定劑下，其也不可能防止凝膠泛黃。例如，濃度為〇.〇8wt% -lwt%的穩(wěn)定 劑不可能防止凝膠的泛黃。為了防止透明質(zhì)酸凝膠的泛黃，有必要在制備凝膠過程中進(jìn)行 脫氣步驟。
[0028] 特別是，本發(fā)明人通過制備包含摩爾質(zhì)量為lOOODa至10MDa(107Da)，優(yōu)選50KDa 至5MDa，或更優(yōu)選200KDa至3MDa的交聯(lián)或非交聯(lián)透明質(zhì)酸或其鹽的膠凝化含水組合物解 決了這些降解和變色問題，過高摩爾質(zhì)量使凝膠難以處理，而l〇〇〇Da以下的摩爾質(zhì)量使組 合物太稀。膠凝化含水組合物還包含0.lwt% -20.Owt%，優(yōu)選2wt% -10wt%的酸形式的 維生素C或其衍生自維生素C鹽的抗壞血酸鹽形式的等價物；0.Olwt% -1. 00wt%，優(yōu)選 0. 08wt% -1. 00wt%的、選自偏亞硫酸氫鹽，優(yōu)選地選自堿金屬偏亞硫酸氫鹽和堿土金屬偏 亞硫酸氫鹽，更優(yōu)選地選自堿金屬偏亞硫酸氫鹽，最優(yōu)選地選自偏亞硫酸氫鈉和偏亞硫酸 氫鉀的穩(wěn)定劑（優(yōu)選的穩(wěn)定劑是偏亞硫酸氫鈉）；以及加入的使得透明質(zhì)酸含量在〇. 〇lmg/ ml-100mg/ml，優(yōu)選在 2mg/ml-50mg/ml的水溶液。
[0029] 將使用術(shù)語透明質(zhì)酸以無差別地描述交聯(lián)或非交聯(lián)透明質(zhì)酸或相應(yīng)的透明質(zhì)酸 鹽。優(yōu)選地，透明質(zhì)酸鹽是鈉鹽。
[0030] 根據(jù)期望的應(yīng)用，可以使用交聯(lián)和非交聯(lián)透明質(zhì)酸的混合物。事實上，交聯(lián)透明質(zhì) 酸允許獲得較高的粘度和穩(wěn)定性。相反，非交聯(lián)透明質(zhì)酸允許獲得更流態(tài)的組合物。交聯(lián) 劑優(yōu)選是二醇，其特別可選自1，4-丁二醇二縮水甘油醚、1，4-雙（2, 3-環(huán)氧丙氧基）丁烷、 1，4-雙縮水甘油氧丁烷、1，2-雙（2, 3-環(huán)氧丙氧基）乙烯和1- (2, 3-環(huán)氧丙基）-2, 3-環(huán) 氧環(huán)己烷。
[0031] 由于這些原因，在制造植入物中組合交聯(lián)透明質(zhì)酸和非交聯(lián)透明質(zhì)酸可以是有利 的。透明質(zhì)酸特別在Allergan公司的商標(biāo)Juvederm下或MedicisAesthetics公司的商 標(biāo)Restylane下出售。
[0032] 術(shù)語維生素C可被解釋為涵蓋游離形式的抗壞血酸，即左旋酸形式或稱為抗壞血 酸鹽的其鹽形式的抗壞血酸。
[0033] 本領(lǐng)域技術(shù)人員可基于公知常識選擇用于制備透明質(zhì)酸凝膠的水相以使其與可 注射凝膠的應(yīng)用相容。
[0034] 可注射凝膠應(yīng)