一種用于治療卵巢癌的秋蒿提取物及其制備方法與其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體設(shè)及一種用于防治卵巢癌的秋葛提取物及其制備方法 和其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 卵巢腫瘤為發(fā)生于女性卵巢上的腫瘤，且為婦科惡性腫瘤中死亡率最高的腫瘤。 近年來，卵巢惡性腫瘤的基礎(chǔ)研究和臨床診治方面取得了很大的進(jìn)展，但其5年生存率仍 不明顯，徘徊在30%。
[0003] 卵巢癌的治療方法包括西醫(yī)治療和中醫(yī)治療。其中，西醫(yī)治療包括手術(shù)、放療、化 療、生物治療、免疫治療等，但西藥副作用強(qiáng)烈且藥物成癒性非常之大；中醫(yī)治療則包括口 服給藥（方劑、中成藥、中藥現(xiàn)代化提取物）、局部用藥（貼、敷、灸）、食療等，并作為腫瘤綜 合治療的一部分，具有獨(dú)到之處，既可單獨(dú)使用，而且非常適合一些年老體弱不適宜手術(shù)與 放化療的卵巢癌患者，可與西醫(yī)的手術(shù)、放化療聯(lián)合使用，既可W增強(qiáng)手術(shù)、放療、化療的效 果，又可W減輕其毒副作用，提高患者的機(jī)體免疫力。
[0004] 秋葛為菊科植物黃花葛的全草，異名：黃葛、臭葛、桐臭葛子、草葛（日華子本草）、 香絲草、酒餅草（廣州植物志）、馬尿葛、苦葛（貴州民間方藥集）、黃香葛、野筒葛（江蘇植 藥志）、雞風(fēng)草（江西草藥）、香苦草、野苦草。
[0005] 秋葛的拉下名為autumnus Artemisia,英文名為autumn artemisia，莖圓柱形，表 面淺棟色或灰棟色，有縱向棱線，質(zhì)硬，折斷面粗糖，中央有白色的髓，嫩枝具多數(shù)葉片，質(zhì) 脆，易碎裂，花期8-10月，果期10-11月；秋葛的分布：生于荒野、山坡、路邊及河岸邊，分布 遍及全國（東半部省區(qū)分布在海拔1500米W下地區(qū)，西北及西南省區(qū)分布在2000-3000米 地區(qū)，西藏分布在3650米地區(qū)）；廣布于歐洲、亞洲的溫帶、寒溫帶及亞熱帶地區(qū)，在歐洲的 中部、東部、南部及亞洲北部、中部、東部最多，向南延伸分布到地中海及非洲北部，亞洲南 部、西南部各國；另外還從亞洲北部遷入北美洲、并廣布于加拿大及美國。模式標(biāo)本采自蘇 聯(lián)西伯利亞地區(qū)。
[0006] 秋葛的采集：秋季割取，曬干或切段曬干；秋葛的藥物部位：干燥全草，長約 60-100厘米，其果實(shí)（黃花葛子）亦可藥用。
[0007] 吳靜等（黃花葛的抑菌活性及有效成分的初步分離研究，西南大學(xué)碩±學(xué)位論 文，2008年）利用一系列溶劑對(duì)采自4月份黃花富植株的根、莖、葉部分（置于6(TC烘箱烘 干，小型粉碎機(jī)粉碎，過80目篩）分別進(jìn)行常規(guī)室溫浸提、恒溫浸提、室溫?cái)埌杼崛『臀⒉?輔助萃取，獲得多種提取物，W比較不同提取方法對(duì)黃花富提取率的影響；選擇合適、經(jīng)濟(jì) 的提取方法，并對(duì)7月份黃花富植株的根、莖、葉不同部位（置于60°C烘箱烘干，小型粉碎機(jī) 粉碎，過80目篩）分別用石油酸30-60°C (石油酸I)、石油酸60-90°C (石油酸II)、乙醇、 丙酬和水進(jìn)行平行和順序提取，比較不同植株部位和不同溶劑提取率的差異。但其并未明 確公開提取物中含有生物堿及其含量。
[0008] 周宇杰等（黃花葛殺蛾活性及有效成分的初步分離研究，西南大學(xué)碩±學(xué)位論 文，2006年）利用一系列平行和順序溶劑石油酸、苯、乙酸、丙酬和水對(duì)黃花富葉、莖（置于 干燥箱內(nèi)60°C烘干，家用粉碎機(jī)粉碎，過80目篩）進(jìn)行室溫浸提、恒溫浸提、攬拌提取和索 氏提取，獲得多種提取物，W比較不同提取方法對(duì)獲取黃花富提取量的影響。但其并未明確 公開提取物中含有生物堿及其含量。
[0009] 王麗芳等（添加菊科植物黃花葛提取物對(duì)奶山羊乳中CLA含量影響及機(jī)理研究， 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)博±學(xué)位論文，2010年）探討了菊科植物黃花葛提取工藝條件及活性成分 的，55%乙醇、95°C和回流提取化為最佳提取工藝條件，測定的成分主要包括倍半祗類、芳 香族類、脂肪酸類、醬體類、=祗類、脂肪族類、生物堿類（2, 3, 5-=甲基-6-(2-甲基下基） 化嗦酷胺）等。但未公開生物堿的含量。
[0010] 王鴻博等（黃花葛的化學(xué)成分研究進(jìn)展，現(xiàn)代藥物與臨床，2011年11月）研究了 黃花葛的化學(xué)成分中包含生物堿，生物堿主要為玉米素。劉海峰等（毛細(xì)管電泳間接激光 誘導(dǎo)巧光法測定苦葛和青葛中酸性成分，四川大學(xué)學(xué)報(bào)（工程科學(xué)版），2011年07月）研 究了苦葛的化學(xué)成分主要有生物堿。但其未公開生物堿的含量和提取工藝。許旭東等（抗 腫瘤藥用植物有效成分研究概況，中國中藥雜志，2008年09月）研究了生物堿類抗腫瘤成 分主要對(duì)卵巢癌、淋己癌和消化道系統(tǒng)癌如肝癌、結(jié)腸癌等有較顯著的療效。張新等（細(xì)胞 調(diào)亡與生物堿，黑龍江醫(yī)學(xué)，2006年06月）研究了細(xì)胞調(diào)亡與卵巢癌等腫瘤疾病相關(guān)，細(xì)胞 調(diào)亡異常是腫瘤發(fā)生的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，而許多生物堿可W誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞調(diào)亡。但其均未進(jìn) 一步公開生物堿的種類。而已知生物堿的種類約在10000種，結(jié)構(gòu)不同，性質(zhì)各異。
[0011] 已有的提取方法（如煎煮法、超臨界c〇2萃取法、回流法、浸潰法等）在保留有效成 分、去除無效成分方面存在著有效成分損失大、提取周期長、工序多、萃取率不高等缺點(diǎn)。并 且，選擇對(duì)癥藥物為治療卵巢癌的關(guān)鍵因素，而研制安全有效卵巢腫瘤治療藥物成為重要 的研究課題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0012] 本發(fā)明的目的在于提供一種秋葛提取物的制備方法，其包括W下步驟：1)將秋葛 烘干后，將其粉碎至100~800目，制得秋葛粉；2)在4~25°C條件下，在秋葛粉中加入水， 浸泡1-1化后，超聲提取10min-6h，其中，秋葛粉冰的質(zhì)量體積比為1 :2-1 :15,制得秋葛 提取液；3)過濾，收集秋葛提取液，提取液經(jīng)干燥，即得。
[0013] 本發(fā)明的優(yōu)選技術(shù)方案中，所述秋葛烘干前經(jīng)篩選、除雜處理。
[0014] 本發(fā)明的優(yōu)選技術(shù)方案中，所述烘干溫度為30~80°C，優(yōu)選為40-70°C，更優(yōu)選為 55-65 °C。
[0015] 本發(fā)明的優(yōu)選技術(shù)方案中，秋葛粉碎至150-700目，優(yōu)選為250-650目，更優(yōu)選為 450-600 目。
[0016] 本發(fā)明的優(yōu)選技術(shù)方案中，所述超聲提取溫度為10-24°C，優(yōu)選為12-20°C。
[0017] 本發(fā)明的優(yōu)選技術(shù)方案中，所述秋葛粉與水混合2-化，優(yōu)選3-化，更優(yōu)選4-化。 [001引本發(fā)明的優(yōu)選技術(shù)方案中，秋葛粉與水的質(zhì)量體積比為1:4-1:12,優(yōu)選為 1:6-1:10,最優(yōu)選為 1:7-1:8。
[0019] 本發(fā)明的優(yōu)選技術(shù)方案中，所述水選自軟水、蒸饋水、去離子水的任一種或其組 合。
[0020] 本發(fā)明的優(yōu)選技術(shù)方案中，超聲提取次數(shù)為1-6次，優(yōu)選為2-5次，更優(yōu)選為3-4 次。
[0021] 本發(fā)明的優(yōu)選技術(shù)方案中，所述超聲提取條件為，超聲15-lOOmin，優(yōu)選超聲 25-80min，更優(yōu)選超聲35-60min，最優(yōu)選超聲40-50min。
[0022] 本發(fā)明的優(yōu)選技術(shù)方案中，所述超聲提取條件為，超聲功率為200-1000W，優(yōu)選為 300-900W，更優(yōu)選為 400-750W，最優(yōu)選為 500-650W。
[0023] 本發(fā)明的優(yōu)選技術(shù)方案中，所述超聲提取條件為，超聲1-lOOs，間隙1-lOOs，優(yōu) 選超聲5-80S，間隙5-80S，更優(yōu)選超聲10-70S，間隙10-70S，最優(yōu)選超聲20-60S，間隙 20-60S。
[0024] 本發(fā)明的優(yōu)選技術(shù)方案中，所述過濾依次為初濾、精濾、膜阻菌過濾，優(yōu)選初 濾用100目篩網(wǎng)過濾，精濾使用生白布反復(fù)吸附過濾4-6次，膜阻菌過濾的孔徑為 0. 22 ym-O. 45 jim〇
[00巧]本發(fā)明的優(yōu)選技術(shù)方案中，所述干燥選自減壓濃縮干燥、冷凍干燥或噴霧干燥的 任一種或其組合。
[0026] 本發(fā)明的優(yōu)選技術(shù)方案中，所述提取物中有效成分包括12. 5%-25% (重量）生 物堿，優(yōu)選所述有效成分包括15 %-20 % (重量）生物堿，更優(yōu)選包括18 % (重量）生物 堿。
[0027] 本發(fā)明的另一目的在于提供一種本發(fā)明所述的制備方法獲得的秋葛提取物。
[0028] 本發(fā)明的優(yōu)選技術(shù)方案中，所述提取物為粉末，優(yōu)選所述粉末為100 %全水溶性白 色結(jié)晶體。
[0029] 本發(fā)明的優(yōu)選技術(shù)方案中，所述提取物中有效成分包括12. 5%-25% (重量）生 物堿，優(yōu)選所述有效成分包括15 %-20 % (重量）生物堿，更優(yōu)選包括18 % (重量）生物 堿。
[0030] 本發(fā)明的另一目的在于提供一種用于防治卵巢癌的藥物組合物，所述藥物組合物 由本發(fā)明所述的秋葛提取物和藥學(xué)上可接受的載體組成。
[0031] 本發(fā)明的藥物組合物采用本領(lǐng)域常規(guī)的制劑技術(shù)制備得到。
[0032] 本發(fā)明的優(yōu)選技術(shù)方案中，所述的藥物組合物選自口服制劑、外用制劑、腸溶口服 制劑的任一種。
[0033] 本發(fā)明的優(yōu)選技術(shù)方案中，所述的口服制劑選自片劑、膠囊劑、顆粒劑、粉劑、口服 液、混懸液、丸劑、散劑、滴丸、糖漿劑、合劑、露劑、泡騰劑、糊劑、乳劑、茶劑的任一種或其腸 溶制劑。
[0034] 本發(fā)明的優(yōu)選技術(shù)方案中，所述的腸溶口服制劑選自腸溶片劑、腸溶膠囊劑、腸溶 顆粒劑、腸溶粉劑、腸溶口服液、腸溶混懸液、腸溶丸劑、腸溶散劑、腸溶滴丸、腸溶糖漿劑、 腸溶合劑、腸溶露劑、腸溶泡騰劑、腸溶糊劑、腸溶乳劑、腸溶茶劑的任一種。
[0035] 本發(fā)明所述的藥學(xué)上可接受的載體為本領(lǐng)域熟知用于制備上述制劑的常用賦形 劑或輔料?？诜苿┗蛲庥弥苿┏Ｓ玫馁x形劑或輔料包括但不僅限于填充劑（又稱稀釋 劑）、潤