一種治療腸道病毒感染的組合物和聯(lián)合用藥方法
【技術領域】
[0001 ]本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領域，具體地說，本發(fā)明設及一種治療腸道病毒感染的組合 物和聯(lián)合用藥方法。
【背景技術】
[0002] 腸道病毒是帶有單股正鏈RNA的微小核糖核酸病毒科病毒，目前共發(fā)現(xiàn)多于100種 血清型。多數(shù)腸道病毒感染并不引起嚴重的癥狀或僅僅引起較輕微的疾病，但在兒童和免 疫缺陷人群中通常造成嚴重后果W。腸道病毒屬中的腸道病毒71型化V71)和柯薩奇病毒 A16(CVA16)是引起亞太地區(qū)嬰幼兒手足口病的主要病原體W。手足口病的癥狀通常較輕微 如發(fā)熱、咽痛、腹瀉、局部出疹等，但也有些病人會發(fā)展成中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)疾病，如無菌 性腦膜炎、致死性腦炎甚至死亡而EV71是引起重癥手足口病的主要病原體W。迄今為 止尚無有效針對腸道病毒感染的藥物治療手段，現(xiàn)有的治療手段僅限于支持性護理、靜脈 注射免疫球蛋白或利己韋林因此尋找抗病毒藥物迫在眉睫。腸道病毒使用病毒自身的 RNA依賴性RNA聚合酶合成基因組，所W在RNA復制過程中，子代RNA很容易發(fā)生突變。
[0003] 因此，為了有效地預防或治療腸道病毒感染，本領域迫切需要開發(fā)新型的預防和/ 或治療腸道病毒感染的技術。

【發(fā)明內容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種治療腸道病毒感染的組分和聯(lián)合用藥方法。
[0005] 本發(fā)明的第一方面，提供了一種抑制腸道病毒組合物，所述組合物包括第一活性 成分和第二活性成分，
[0006] 其中，所述第一活性成分為腸道病毒(如，EV71)的3D蛋白抑制劑；
[0007] 所述第二活性成分為腸道病毒(如，EV71)的衣殼蛋白抑制劑。
[000引在另一優(yōu)選例中，所述第一活性成分特異性結合腸道病毒的3D蛋白的第121位氨 基酸殘基(優(yōu)選為絲氨酸殘基），其中氨基酸殘基編號基于SEQ ID NO.1。
[0009] 在另一優(yōu)選例中，所述第一活性成分包括法匹拉韋、其類似物、或其藥學上可接受 的鹽；
[0010] 所述第二活性成分包括蘇拉明、其類似物、或其藥學上可接受鹽。
[0011] 在另一優(yōu)選例中，所述法匹拉韋的類似物包括對腸道病毒的作用祀點與法匹拉韋 相同的物質。
[0012] 在另一優(yōu)選例中，所述蘇拉明的類似物包括對腸道病毒的作用祀點與蘇拉明相同 的物質。
[0013] 在另一優(yōu)選例中，所述腸道病毒選自下組:腸道病毒71型化V71)、柯薩奇病毒A16 (CVA16)、CVB3型、PVl型或EV68型，W及鼻病毒。
[0014] 在另一優(yōu)選例中，所述第一活性成分和第二活性成分的摩爾比約為10~100:1~ 20，優(yōu)選地為10~100:1~10,更更優(yōu)選地為10~100:1~5。
[0015] 在另一優(yōu)選例中，所述第一活性成分具有腸道病毒(如，EV71)的3D蛋白抑制活性。
[0016] 在另一優(yōu)選例中，所述第二活性成分具有腸道病毒(如，EV71)的衣殼蛋白抑制活 性。
[0017] 在另一優(yōu)選例中，所述組合物中還包括藥學上可接受的載體或賦形劑。
[0018] 在另一優(yōu)選例中，所述藥物組合物的劑型包括片劑、顆粒劑、膠囊、丸劑、注射劑、 或口服液。
[0019] 在另一優(yōu)選例中，所述的組合物為單元劑型，每個單元劑型中所述第一活性成分 和所述第二活性成分的含量約為日劑量的0.1至1(或0.25-1，或0.5-1)，其中所述日劑量為 20-100mg〇
[0020] 在另一優(yōu)選例中，所述的日劑量為25-70mg，如25mg、40mg、50mg。
[0021] 本發(fā)明的第二方面，提供了如本發(fā)明第一方面所述的抑制腸道病毒組合物的用 途，用于制備預防和/或治療腸道病毒感染的藥物。
[0022] 本發(fā)明的第=方面，提供了一種預防和/或治療腸道病毒感染的方法，所述方法包 括步驟：
[0023] 給需要的對象施用本發(fā)明第一方面所述的抑制腸道病毒組合物，從而抑制所述對 象體內的腸道病毒。
[0024] 在另一優(yōu)選例中，所述的對象包括人和非人哺乳動物(如曬齒動物）。
[0025] 在另一優(yōu)選例中，所述的施用的用量為lO-lOOmg/kg體重，較佳地15-70mg/kg體 重，更佳地10-50mg/kg體重，W所述第一活性成分的重量計。
[0026] 本發(fā)明的第四方面，提供了一種體外非治療性地抑制腸道病毒生長或者殺滅腸道 病毒的方法，包括步驟:在需要處理的場所使用本發(fā)明的第一方面所述的抑制腸道病毒組 合物。
[0027] 本發(fā)明的第五方面，提供了法匹拉韋、其類似物、或其藥學上可接受鹽在制備試劑 中的用途，所述試劑用于：
[0028] (I)抑制腸道病毒3D蛋白的合成，和/或
[0029] (II)特異性結合腸道病毒3D蛋白的第121位氨基酸殘基，其中氨基酸殘基編號基 于沈Q ID NO. 1。
[0030] 在另一優(yōu)選例中，所述腸道病毒3D蛋白的第121位氨基酸殘基為絲氨酸。
[0031] 在另一優(yōu)選例中，所述試劑還用于：（111)抑制腸道病毒的復制。
[0032] 在另一優(yōu)選例中，所述腸道病毒為腸道病毒71型。
[0033] 本發(fā)明的第六方面，提供了一種復合物，所述復合物如式I所示
[0034] A-B (I)
[0035] 其中，A為法匹拉韋或其類似物;B為腸道病毒的3D蛋白。
[0036] 在另一優(yōu)選例中，所述復合物中，A和B的結合位點包括腸道病毒3D蛋白的第121位 氨基酸殘基，其中氨基酸殘基編號基于SEQ ID NO.1。
[0037] 本發(fā)明的第屯方面，提供了一種腸道病毒耐藥毒株，所述毒株的3D蛋白發(fā)生了突 變，并且所述突變導致所述腸道病毒產(chǎn)生了耐藥性。
[0038] 在另一優(yōu)選例中，所述突變發(fā)生在3D蛋白的第121位氨基酸殘基。
[0039] 在另一優(yōu)選例中，所述3D蛋白的第121位氨基酸殘基由絲氨酸殘基突變?yōu)樘於?酸殘基。
[0040] 在另一優(yōu)選例中，所述毒株為腸道病毒71型毒株。
[0041] 本發(fā)明的第八方面，提供了本發(fā)明第屯方面所述的耐藥毒株的用途，用于篩選抑 制或殺滅腸道病毒的藥劑或試劑。
[0042] 本發(fā)明的第九方面，提供了一種本發(fā)明所述的腸道病毒耐藥毒株的抑制劑，所述 抑制劑能抑制或殺滅本發(fā)明第屯方面所述的的耐藥毒株。
[0043] 本發(fā)明的第十方面，提供了一種篩選藥物的方法，所述方法包括:將待篩選藥物與 腸道病毒或者腸道病毒的3D蛋白接觸，并檢測是否形成式II所述的復合物，
[0044] A'-B (II)
[0045] 其中，A'為待篩選藥物;B為腸道病毒的3D蛋白.
[0046] 在另一優(yōu)選例中，所述復合物中，A'和B的結合位點包括腸道病毒3D蛋白的第121 位氨基酸殘基，其中氨基酸殘基編號基于SEQ ID NO. 1
[0047] 在另一優(yōu)選例中，所述待篩選藥物包括法匹拉韋、其類似物、或其藥學上可接受 ±h rm. O
[004引本發(fā)明的第十一方面，提供了一種腸道病毒的抑制劑，所述抑制劑W腸道病毒3D 蛋白為祀點，抑制所述腸道病毒的生長或繁殖。
[0049] 在另一優(yōu)選例中，所述抑制劑W腸道病毒3D蛋白的第121位氨基酸殘基為祀點，其 中氨基酸殘基編號基于SEQ ID NO. 1。
[0050] 在另一優(yōu)選例中，所述抑制劑選自法匹拉韋、其類似物、或其藥學上可接受鹽。
[0051] 應理解，在本發(fā)明范圍內中，本發(fā)明的上述各技術特征和在下文(如實施例）中具 體描述的各技術特征之間都可W互相組合，從而構成新的或優(yōu)選的技術方案。限于篇幅，在 此不再一一累述。
【附圖說明】
[0化2]圖1.伊曲康挫、蘆平曲韋、法匹拉韋、蘇拉明和GW5074抑制EV71的感染。其中，圖IA 顯示了各化合物對EV71的抑制效果及對細胞的毒性作用；圖IB顯示了顯示了不同濃度的各 化合物對病毒滴度的影響.
[0053] 圖2.法匹拉韋通過作用于腸道病毒71型3D蛋白抑制病毒復制。
[0054] 圖3.不同藥物組合在治療EV71感染中的相互作用效果。
【具體實施方式】
[0055] 本發(fā)明人通過廣泛而深入的研究，首次意外地發(fā)現(xiàn)了一種抑制腸道病毒組合物， 所述組合物中W法匹拉韋為第一活性成分，W蘇拉明為第二活性成分，實驗結果表明，此藥 物組合具有顯著的協(xié)同作用，而且在被測濃度組合下均未發(fā)現(xiàn)增強的細胞毒性。
[0056] 本發(fā)明公開了能夠有效抑制腸道病毒感染的聯(lián)合用藥方法。針對腸道病毒的抑制 活性，本發(fā)明人經(jīng)過大量的測試意外的發(fā)現(xiàn)法匹拉韋和蘇拉明表現(xiàn)出顯著地協(xié)同作用。而 且上述藥物組合，在被測濃度組合下均未發(fā)現(xiàn)增強的細胞毒性。法匹拉韋和蘇拉明組合能 夠阻止耐藥病毒的產(chǎn)生。此外本發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)法匹拉韋通過作用于EV71的3D蛋白來抑制病 毒復制，該位點可W作為潛在的祀點用W開發(fā)抗病毒藥物。
[0057] 在描述本發(fā)明之前，應當理解本發(fā)明不限于所述的具體方法和實驗條件，因為運 類方法和條件可W變動。還應當理解本文所用的術語其目的僅在于描述具體實施方案，并 且不意圖是限制性的，本發(fā)明的范圍將僅由所附的權利要求書限制。
[0058] 除非另外定義，否則本文中所用的全部技術與科學術語均具有如本發(fā)明所屬領域 的普通技術人員通常理解的相同含義。如本文所用，在提到具體列舉的數(shù)值中使用時，術