一種蠐螬中可抗呼吸道合胞病毒的有效部位及制備方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于中藥活性成分生產(chǎn)提取工藝,涉及蠐螬抗呼吸道合胞病毒有效部位提取分離的新工藝以及在制藥領域的新用途,具體涉及利用抗病毒追蹤的方式提取制備蠐螬抗呼吸道合胞病毒的有效部位。具體步驟包括蒸餾水、75%乙醇、乙酸乙酯回流提取蠐螬,水提醇沉,醇提水沉,抗病毒,溶解沉淀,處理D101、DM130、X?5、AB?8、HPD100大孔樹脂,上樣于大孔樹脂,不同濃度梯度洗脫,每200ml接一瓶每個濃度梯度洗脫至無色,每個洗脫液進行抗病毒確定有效部位。本發(fā)明采用了抗病毒追蹤的方法發(fā)現(xiàn)了蠐螬中抗呼吸道合胞病毒的有效部位,該有效部位對呼吸道合胞病毒具有較好的抵抗作用。
【專利說明】一種蠐螬中可抗呼吸道合胞病毒的有效部位及制備方法
[0001]
技術領域
[0002]本發(fā)明涉及中藥活性成分生產(chǎn)提取工藝,涉及蠐螬抗病毒有效部位提取的新思路新方法以及在制藥領域的新用途,具體涉及利用抗病毒追蹤的方式提取分離純化蠐螬抗呼吸道合胞病毒的有效部位。
【背景技術】
[0003]最近幾年以來世界各地都受到了各種病毒的入侵,比如SARS病毒,甲型HlNl等,每次病毒的爆發(fā)都會引起人類的恐慌以及死亡。所以找到合適的抗病毒藥物迫在眉睫。
[0004]呼吸道合胞病毒是導致嬰幼兒急性下呼吸道感染最重要的病原體之一,還可引起間質(zhì)性肺炎及毛細支氣管炎等同時也可以引起老年人和免疫缺陷病人住院和肺炎死亡。
[0005]呼吸道合胞病毒早在50年前就備受關注,但是目前仍缺乏對其有效的預防治療措施。利巴韋林是廣譜的對呼吸道合胞病毒有一定療效的抗病毒藥物。然而,研究發(fā)現(xiàn),經(jīng)過呼吸道合胞病毒感染的棉鼠模型出現(xiàn)了利巴韋林的抵抗株,并且對患者和醫(yī)務人員有潛在毒性,所以只有出現(xiàn)嚴重的RSV感染患者是才使用此藥物,因此探索對呼吸道合胞病毒具有抑制作用的新物質(zhì)為時代所必需。
[0006]蠐螬在傳統(tǒng)醫(yī)學中有著悠久的應用歷史,可以破瘀血,消腫止痛,明目,主治丹毒、目翳,癰疽痔漏?,F(xiàn)代藥理學研究表明,蠐螬具有治療眼疾、抗腫瘤、保肝、抗菌的作用。
[0007]蠐螬對呼吸道合胞病毒具有一定的治療作用,實驗表明蠐螬提取的有效部位對呼吸道合胞病毒有很好的治療作用。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0008]本發(fā)明所要解決的技術問題是明確了蠐螬抗呼吸道合胞病毒的有效部位,并為該有效部位的分離提取提供了一種利用抗病毒追蹤的方式制備蠐螬抗病毒有效部位的新方法。該有效部位從金龜子科動物蠐螬中提取分離得到可以用于呼吸道合胞病毒感染的治療。該方法可以較為簡便的對以上有效部位進行分離提取。
[0009]本發(fā)明的優(yōu)點是,本發(fā)明首次分離出了蠐螬中具有抗呼吸道合胞病毒的有效部位,并發(fā)明了一種抗病毒追蹤的方法對該有效部位進行了制備,此分離方法目的性強,簡單節(jié)省了大量的人力物力,優(yōu)于傳統(tǒng)的系統(tǒng)分離。制備得到的有效部位對呼吸道合胞病毒具有較好的治療作用。
[0010]本發(fā)明蠐螬抗呼吸道合胞病毒的有效部位為水提醇沉的沉淀,該有效部位的制備方法,包括如下步驟:
(I)取一定量的蠐螬藥材分別用10倍的水、10倍的75%乙醇、8倍的乙酸乙酯加熱回流提取2次,每次2h。合并兩次的提取液減壓濃縮回收溶劑,濃縮至每毫升藥液含有I克的藥材,然后做體外抗呼吸道合胞病毒試驗,發(fā)現(xiàn)蠐螬水提取物抗呼吸道合胞病毒的效果最好。
[0011](2)將(I)中的水提取物后加乙醇調(diào)節(jié)乙醇的濃度為70%,靜置24小時。過濾得到沉淀和上清液。
[0012](3)將上清液回收乙醇,將沉淀用水溶解,分別進行抗病毒實驗。實驗顯示沉淀的抗病毒效果較好。
[0013](4)分別取一定的0101、乂-5、01130^8-8、冊0100大孔吸附樹脂、用95%的乙醇浸泡24小時,之后裝柱,用蒸餾水洗至無醇味,然后用5倍柱體積5%的鹽酸水溶液進行沖洗浸泡3個小時,之后用蒸餾水沖至PH等于7,再用5倍柱體積的5%的NaOH水溶液進行沖洗浸泡3個小時,之后用蒸餾水沖至PH等于7,備用。
[0014](5)取(3)中的沉淀分別上樣于處理好的上述五種大孔樹脂柱,分別用水,25%乙醇,50%乙醇,75%乙醇,95%乙醇進行沖洗,每個洗脫液中每200ml接一瓶,并且沖洗到?jīng)]有顏色之后再換下一個洗脫液。
[0015](6)將上述接到的樣品進行抗病毒實驗。實驗顯示蠐螬水提醇沉的沉淀過DlOl大孔樹脂柱后的水I號2號抗病毒效果很好。
【具體實施方式】
[0016]實例1(1)稱取一定量的蠐螬加10倍量加熱回流提取兩次,每次2h,合并兩次提取液,減壓濃縮至每毫升藥液含有I克的藥材,加乙醇調(diào)節(jié)溶液乙醇的濃度為70%,靜置24小時。
[0017](2)將(I)得到的醇沉液減壓抽濾,得到沉淀,將沉淀用蒸餾水超聲溶解。
[0018](3)將(2)得到的溶液上樣于處理好的DlOl大孔吸附樹脂,用水進行沖洗,每200ml
接一瓶,沖洗至無色。
[0019](4)將(3)中得到的溶液進行體外抗病毒實驗,實驗結果顯示水I號2號其抗病毒效果較好。
【主權項】
1.一種蠐螬中具有抗呼吸道合胞病毒作用的有效部位以及一種利用抗病毒追蹤的方式提取分離純化該有效部位的工藝方法,在每一步的提取分離之后要進行抗病毒追蹤出有效部位的所在,首先利用水提醇沉,其次利用DlOl大孔樹脂分離得到蠐螬抗病毒的有效部位。2.根據(jù)權利要求1所述提取分離方法,其特征在于蠐螬水回流提取的料液比為1:10,提取次數(shù)為兩次,提取時間為每次2h。3.根據(jù)權利要求1所述提取分離方法,其特征在于水提液的濃縮液濃度為Iml藥液含有I g的藥材,醇沉濃度為70%,醇沉時間為24小時。4.根據(jù)權利要求1所述提取分離方法,其特征在于醇沉之后進行減壓抽濾,得到沉淀和上清液,然后進行抗病毒實驗得到沉淀為抗病毒有效部位。5.根據(jù)權利要求1所述提取分離方法,其特征在于所用的大孔樹脂型號為DlOl,洗脫液為水,25%乙醇,50%乙醇,75%乙醇,95%乙醇,每200ml接一瓶,每個梯度沖至無色。6.根據(jù)權利要求1所述提取分離方法,其特征在于將洗脫液進行抗病毒實驗,得到I,2號為有效部位。
【文檔編號】A61P31/14GK105998082SQ201610558453
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年7月16日
【發(fā)明人】周長征, 張加澤, 王清, 牛文斐, 侯寶山
【申請人】周長征