一種三七總皂甙透皮劑的制備方法
【專利摘要】一種三七皂甙透皮劑的制備方法，具體步驟為：(1)將三七皂甙依次溶于無水乙醇、蒸餾水中；(2)加熱配制殼聚糖冰醋酸溶液；(3)將中藥提取物與殼寡糖冰醋酸溶液混合；(4)將混合物加入乳化體系進(jìn)行乳化(5)乳化產(chǎn)物進(jìn)行交聯(lián)反應(yīng)(6)通過洗滌、沉淀、離心、烘干方式處理交聯(lián)反應(yīng)產(chǎn)物，得到載有中藥提取物的透皮藥膜，所述制備方法簡單，適合規(guī)?；I(yè)生產(chǎn)的需要。
【專利說明】
_種三七總阜ft透皮劑的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種透皮劑的制備方法，尤其是一種三七總皂甙透皮劑的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 三七總皂甙是中藥三七中的主要活性生物堿，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明三七總皂甙具有 擴(kuò)張血管、防止血栓形成、抑制血小板聚集、改善腦缺血等多種作用，在臨床上被廣泛用于 缺血性腦血管病的治療并達(dá)到較為理想的治療效果，根據(jù)藥動(dòng)學(xué)研究結(jié)果，三七總皂甙具 有吸收快、代謝快、半衰期短（2. 8小時(shí)）的特點(diǎn)，因此在以口服或肌注方式給藥時(shí)，要求頻 繁給藥才能維持藥物的有效血濃，故有必要研制其長效制劑。
[0003] 透皮劑是采用親水性高分子材料、保濕劑、交聯(lián)劑等與藥物混合而形成的空間網(wǎng) 狀充水交聯(lián)體結(jié)構(gòu)，具有載藥量大、無刺激、無致敏、含液體量大、利于藥物釋放和透皮吸收 等優(yōu)點(diǎn)。醇質(zhì)體具有藥物包封率高、穩(wěn)定性好、脂質(zhì)體膜變形性高及易于攜帶藥物穿過皮膚 黏膜的特性，成為近年來透皮給藥的一個(gè)新技術(shù)。但其作為局部給藥制劑時(shí)，常因液體制劑 臨床給藥不便而被限制利用。本發(fā)明將三七總皂甙制備成透皮劑，具有非常重要的生產(chǎn)實(shí) 踐意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供一種三七總皂甙透皮劑的制備方法。
[0005] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提出以下技術(shù)方案：
[0006] -種三七總皂甙透皮劑的制備方法，具體步驟為：
[0007] (1)取三七總皂甙溶于無水乙醇，W/V比為25-30:1，置于密封錐形瓶中，置于磁力 攪拌器上持續(xù)攪拌，得溶液A，緩慢加入V/V為16:1的蒸餾水，得中藥A。
[0008] (2)將殼聚糖溶于1-3%冰乙酸溶液中，W/V比為1-1. 8:32,攪拌溶解得殼聚糖冰 醋酸溶液，其中，攪拌溫度為45-55°C，加熱方式為蒸汽加熱。
[0009] (3)將中藥A溶于步驟⑵殼寡糖冰醋酸溶液中，V/V比為1:3-3:1，得混合溶液 B〇
[0010] (4)將混合物B緩慢加入乳化劑中，高速磁力攪拌35-50分鐘，V/V比為1:35-45， 溫度控制在50-55°C，用pH調(diào)節(jié)劑將pH調(diào)至7. 8-9. 2,其中，乳化設(shè)備是帶有隔層的乳化 鍋，轉(zhuǎn)速1000-2000rpm，得乳化液C后；將超純水緩慢加入乳化液C中，V/V比為1:10-30， 中速攪拌至室溫得穩(wěn)定的乳化液D。
[0011] (5)連續(xù)攪拌乳化液D，將交聯(lián)劑戊二醛加入乳化液D中，交聯(lián)反應(yīng)2. 5-3. 5小時(shí)， V/V 比為 1:10-2:9，
[0012] (6)交聯(lián)反應(yīng)完成后，低速離心（50rpm，20-30分鐘）后靜置30分鐘，棄上清液，得 固體混合物E。
[0013] (7)用無水乙醇和丙酮交替洗滌沉淀混合物E 2-4次，并離心脫泡處理；
[0014] (8)采用流延法，將反應(yīng)充分的體系倒入聚四氟乙烯模具中，放入30°C烘箱中真 空干燥，從而得到透皮劑藥膜。
[0015] 其中，上述三七總皂甙、無水乙醇按重量體積比為28:1。
[0016] 優(yōu)選的，上述三七總皂甙的透皮劑的制備方法，其特征在于，所述三七總皂甙粒徑 為50-100 μ m，過100-300目篩，密閉保存?zhèn)溆谩?br>[0017] 優(yōu)選的，上述三七總皂甙的透皮劑的制備方法，其特征在于，殼聚糖的分子量大于 等于10萬以上。
[0018] 優(yōu)選的，上述三七總皂甙的透皮劑的制備方法，其特征在于，所述乳化劑 是聚乳酸-羥基乙酸共聚物與吐溫80或司盤80中的一種的混合物，體積比為 98. 5:1. 5-97. 5:2. 5〇
[0019] 優(yōu)選的，上述三七總皂甙的透皮劑的制備方法，其特征在于，所述pH調(diào)節(jié)劑是磷 酸鹽緩沖溶液（〇. 2mol/L NaH2P04:Na2HP04S 16:84 ~5. 3:94. 7)或者 0. 2mol/L 氨水。 [0020] 優(yōu)選的，上述三七總皂甙的透皮劑的制備方法，其特征在于，所述干燥方式是真空 干燥（需在35-45 °C條件）或冷凍干燥。
[0021] 本發(fā)明的有益效果是：
[0022] 本發(fā)明方中，三七總皂甙為三七的主要活性成分，具有明顯的抗炎、抗菌、抗病毒、 保護(hù)肝細(xì)胞與免疫調(diào)節(jié)等多方面的藥理活性。對于局部炎癥如靜脈炎有較好效果，還可以 用于治療慢性肝炎及肝癌等。
[0023] 選擇殼寡糖作為微丸載體，是因?yàn)椋浩浔旧砭哂幸欢ǖ拿庖咴?，能夠刺激機(jī)體 免疫應(yīng)答；殼寡糖分子與存在于腸內(nèi)皮細(xì)胞上的有害微生物的受體結(jié)構(gòu)相似，能與一定的 毒素、病毒和真菌細(xì)胞的表面結(jié)合，可作為外源抗原的佐劑減緩抗原的吸收，增加抗原的效 價(jià)，從而增強(qiáng)動(dòng)物體的細(xì)胞和體液免疫反應(yīng)；殼寡糖可促進(jìn)有益菌如雙歧桿菌等的大量增 殖，而雙歧桿菌可以提高機(jī)體的抗體水平，激活巨噬細(xì)胞的吞噬活性，從而影響機(jī)體的免疫 功能。
[0024] 本發(fā)明未采用醫(yī)學(xué)上公知的透皮劑薄荷油、氮酮、1，2_丙二醇，通過制備殼聚糖緩 釋膜是把藥物溶解并均勻分散在成膜材料中，通過添加無水乙醇，改變膜材料pH，改變皮膚 表面細(xì)胞通透性，使藥物順利達(dá)到病灶。
[0025] 總之，上述三七總皂甙透皮劑的制備方法，操作簡單，所制備載有中藥混合物的殼 聚糖微球可透過皮膚直達(dá)病灶，并在炎癥部位維持較高的藥物濃度，提高藥物生物利用度， 提高機(jī)體免疫能力，緩解局部癥狀，見效快，持續(xù)時(shí)間長，使用方便，實(shí)用性強(qiáng)；適合規(guī)?；?工業(yè)生產(chǎn)的需要。
【具體實(shí)施方式】
[0026] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明所述技術(shù)方案作進(jìn)一步的說明。
[0027] 實(shí)施例1
[0028] 一種三七總皂甙透皮劑主要包含三七總皂甙，包封率為86. 79±1. 68%。
[0029] 上述一種三七總皂甙透皮劑的制備方法，具體制備步驟如下：
[0030] (1)將三七總皂甙進(jìn)行超微粉碎，過200目篩；
[0031] (2)稱取三七總皂甙25g為原料；
[0032] (3)將三七總皂甙加入1L無水乙醇中，室溫，密閉防爆環(huán)境下磁力攪拌6小時(shí)；
[0033] (4)將步驟（3)中所得溶液置入V/V為16:1蒸餾水，攪拌30min，待用；
[0034] (5)將lg殼聚糖溶于32mL 1 %冰乙酸溶液中，攪拌溶解得殼聚糖冰醋酸溶液，其 中，攪拌溫度為45-55°C，加熱方式為蒸汽加熱；
[0035] (6)將32mL中藥浸膏A溶于步驟（5)殼寡糖冰醋酸溶液中，得混合溶液B ;
[0036] (7)將64mL混合物緩慢加入乳化劑中，高速磁力攪拌30分鐘，乳化劑體積為 2560mL，溫度控制在50-55°C，用pH調(diào)節(jié)劑將pH調(diào)至7. 8,其中，乳化設(shè)備是帶有隔層的乳 化鍋，轉(zhuǎn)速lOOOrpm，得乳化液C后；將262. 4mL超純水緩慢加入乳化液C中，中速攪拌至室 溫得穩(wěn)定的乳化液D;
[0037] (8)連續(xù)攪拌乳化液D，將交聯(lián)劑戊二醛加入乳化液D中，交聯(lián)反應(yīng)3小時(shí)，交聯(lián)劑 體積為288. 6mL ;
[0038] (9)交聯(lián)反應(yīng)完成后，低速離心（50rpm，20-30分鐘）后靜置30分鐘，棄上清液，得 固體混合物E ;
[0039] (10)用無水乙醇和丙酮交替洗滌沉淀混合物E 3次，并離心脫泡處理；
[0040] (11)采用流延法，將反應(yīng)充分的體系倒入聚四氟乙烯模具中，放入30°C烘箱中真 空干燥，從而得到透皮劑藥膜。
[0041] 其中，殼聚糖分子量為10萬以上。
[0042] 其中，乳化劑成分是由98%的聚乳酸-羥基乙酸共聚物和2%的吐溫80組成的。
[0043] 實(shí)施例2
[0044] 一種三七總皂甙透皮劑主要包含三七總皂甙，包封率為84. 89±1. 79%。
[0045] 上述一種三七總皂甙透皮劑的制備方法，具體制備步驟如下：
[0046] (1)將三七總皂甙進(jìn)行超微粉碎，過300目篩；
[0047] (2)稱取三七總皂甙30g為原料；
[0048] (3)將三七總皂甙加入1L無水乙醇中，室溫，密閉防爆環(huán)境下磁力攪拌6小時(shí)；
[0049] (4)將步驟⑶中所得溶液置入V/V為16:1蒸餾水，攪拌30min，待用；
[0050] (5)將7. 5g殼聚糖溶于160mL 2%冰乙酸中，攪拌溶解得殼聚糖冰醋酸溶液，攪拌 溫度為45°C，加熱方式為蒸汽加熱。
[0051] (6)將160mL中藥提取物A溶于步驟（5)殼寡糖冰醋酸溶液中，得混合溶液B。
[0052] (7)取上述100mL混合物B緩慢加入乳化劑中進(jìn)行乳化，高速磁力攪拌40分鐘，乳 化劑體積為4500mL，溫度控制在50°C，用pH調(diào)節(jié)劑將pH調(diào)至8,乳化設(shè)備是帶有隔層的乳 化鍋，轉(zhuǎn)速2000rpm，得乳化液C后，將131mL超純水緩慢加入乳化液C中，中速攪拌至室溫 得穩(wěn)定的乳化液D。
[0053] (8)連續(xù)攪拌乳化液D，將交聯(lián)劑戊二醛加入乳化液D中，交聯(lián)反應(yīng)2. 8小時(shí)，戊二 醛添加量為1051. 3mL。
[0054] (9)交聯(lián)反應(yīng)完成后，低速離心（50rpm，20-30分鐘）后靜置30分鐘，棄上清液，得 固體混合物E。
[0055] (10)用無水乙醇和丙酮交替洗滌沉淀混合物E2次，并離心脫泡處理；
[0056] (11)采用流延法，將反應(yīng)充分的體系倒入聚四氟乙烯模具中，放入30°C烘箱中真 空干燥，從而得到透皮劑藥膜。
[0057] 其中，殼聚糖分子量為10萬以上。
[0058] 其中，乳化劑成分是由98. 5%的聚乳酸-羥基乙酸共聚物和1. 5%的吐溫80組成 的。
[0059] 實(shí)施例3
[0060] 一種三七總皂甙透皮劑主要包含三七總皂甙，包封率為81. 89±1. 33%。
[0061] 上述一種三七總皂甙透皮劑的制備方法，具體制備步驟如下：
[0062] (1)將三七總皂甙進(jìn)行超微粉碎，過100目篩；
[0063] (2)稱取三七總皂甙28g為原料；
[0064] (3)將三七總皂甙加入1L無水乙醇中，室溫，密閉防爆環(huán)境下磁力攪拌6小時(shí)；
[0065] (4)將步驟（3)中所得溶液置入V/V為16:1蒸餾水，攪拌30min，待用；
[0066] (5)將1. 8g殼聚糖溶于32mL 3%冰乙酸，攪拌溶解得殼聚糖冰醋酸溶液，攪拌溫 度為55°C，加熱方式為蒸汽加熱。
[0067] (6)將64mL中藥提取物A溶于步驟（5)殼寡糖冰醋酸溶液中，得混合溶液B。
[0068] (7)取96mL混合物B緩慢加入乳化劑中進(jìn)行乳化，高速磁力攪拌50分鐘，乳化劑 體積為3360mL，溫度控制在55°C，用pH調(diào)節(jié)劑將pH調(diào)至9. 2,乳化設(shè)備是帶有隔層的乳化 鍋，轉(zhuǎn)速1200rpm，得乳化液C后，將99mL超純水緩慢加入乳化液C中，V/V比為1:20-1:35， 中速攪拌至室溫得穩(wěn)定的乳化液D。
[0069] (8)連續(xù)攪拌乳化液D，將交聯(lián)劑戊二醛加入乳化液D中，交聯(lián)反應(yīng)3. 5小時(shí)，戊二 醛添加量為400mL。
[0070] (9)交聯(lián)反應(yīng)完成后，低速離心（50rpm，20-30分鐘）后靜置30分鐘，棄上清液，得 固體混合物E。
[0071] (10)用無水乙醇和丙酮交替洗滌沉淀混合物E3次，并離心脫泡處理；
[0072] (11)采用流延法，將反應(yīng)充分的體系倒入聚四氟乙烯模具中，放入30°C烘箱中真 空干燥，從而得到透皮劑藥膜。
[0073] 其中，殼聚糖分子量為10萬以上。
[0074] 其中，乳化劑成分是由97. 8%的聚乳酸-羥基乙酸共聚物和2. 2%的吐溫80組成 的。
[0075] 實(shí)施例4
[0076] -種三七總皂甙透皮劑主要包含三七總皂甙，包封率為82. 89±1. 33%。
[0077] 上述一種三七總皂甙透皮劑的制備方法，具體制備步驟如下：
[0078] (1)將三七總皂甙進(jìn)行超微粉碎，過140目篩；
[0079] (2)稱取三七總皂甙26g為原料；
[0080] (3)將三七總皂甙加入1L無水乙醇中，室溫，密閉防爆環(huán)境下磁力攪拌6小時(shí)；
[0081] (4)將步驟（3)中所得溶液置入V/V為16:1蒸餾水，攪拌30min，待用；
[0082] (5)將3. 6g殼聚糖溶于64mL 3%冰乙酸，攪拌溶解得殼聚糖冰醋酸溶液，攪拌溫 度為45°C，加熱方式為蒸汽加熱。
[0083] (6)將64mL中藥提取物A溶于步驟（5)殼寡糖冰醋酸溶液中，得混合溶液B。
[0084] (7)將混合物B緩慢加入乳化劑中進(jìn)行乳化，高速磁力攪拌35-50分鐘，乳化劑體 積為5120mL，溫度控制在55°C，用pH調(diào)節(jié)劑將pH調(diào)至8. 0,乳化設(shè)備是帶有隔層的乳化鍋， 轉(zhuǎn)速lOOOrpm，得乳化液C后，將175mL超純水緩慢加入乳化液C中，V/V比為1:20-1:35， 中速攪拌至室溫得穩(wěn)定的乳化液D。
[0085] (8)連續(xù)攪拌乳化液D，將交聯(lián)劑戊二醛加入乳化液D中，交聯(lián)反應(yīng)3小時(shí)，戊二醛 添加量為813mL。
[0086] (9)交聯(lián)反應(yīng)完成后，低速離心（50rpm，20-30分鐘）后靜置30分鐘，棄上清液，得 固體混合物E。
[0087] (10)用無水乙醇和丙酮交替洗滌沉淀混合物E 2次，并離心脫泡處理；
[0088] (11)采用流延法，將反應(yīng)充分的體系倒入聚四氟乙烯模具中，放入30°C烘箱中真 空干燥，從而得到透皮劑藥膜。
[0089] 其中，殼聚糖分子量為10萬以上。
[0090] 其中，乳化劑成分是由98. 5%的聚乳酸-羥基乙酸共聚物和1. 5%的吐溫80組成 的。
[0091] 實(shí)施例1-4之一所述三七總皂甙均為市售產(chǎn)品，將各組分用量按照相同比例增加 或減少，所得各組分的重量份數(shù)關(guān)系均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0092] 實(shí)施例1-4之一所述中藥材均符合《中國藥典》2010年版二部標(biāo)準(zhǔn)。
[0093] 體外實(shí)驗(yàn)釋放例：
[0094] 將殼聚糖載藥復(fù)合膜切割成橫截面積為圓形（S = 2. 190cm2)的樣品留作透皮試 驗(yàn)備用〃試驗(yàn)選取SD小鼠（體重20g)，擊頭迅速處死，用剪刀剪取腹部皮膚，再用電動(dòng)理發(fā) 器除去鼠皮的絨毛，將皮膚浸于2mol/L的NaBr溶液中24h，取出分離皮下組織和脂肪，即得 離體鼠皮〃選用無破損的鼠皮浸入生理鹽水中洗滌，直至洗液澄清，于一 20°C冰箱中冷凍 保存"使用前，從冰箱中取出，用生理鹽水反復(fù)淋洗，濾紙拭干后用于透皮試驗(yàn)"將處理好 的皮膚固定于Franz擴(kuò)散池上，角質(zhì)層面向外〃接受液應(yīng)具有接受通過皮膚的藥物的能力， 在體內(nèi)藥物滲透通過皮膚能很快被皮膚中的血液轉(zhuǎn)移出去，形成漏槽條件，體外試驗(yàn)時(shí)接 受液也應(yīng)該提供漏槽條件，接受液應(yīng)有適宜的pH值（7.2~7. 4)和一定的滲透壓，常用生 理鹽水、格林液和等滲磷酸鹽緩沖液等。本試驗(yàn)中，擴(kuò)散池面積為2. 190cm2)，接收池裝滿模 仿人體環(huán)境的生理鹽水，整個(gè)裝置置于32°C恒溫水浴中，分別在0. 5,1，1. 5, 2. 5, 3. 5,4. 5， 5. 5, 7. 5,9. 5,11. 5, 24h從接受池內(nèi)取樣1. 0ml，并同時(shí)補(bǔ)充入等體積的新鮮生理鹽水，接 收池磁力攪拌設(shè)定為300r/min，將所取樣品稀釋一定倍數(shù)后，用紫外分光光度計(jì)分析樣品 在295nm處的吸收，比較透皮體系的釋藥性能。
[0095]
[0096] 上述參照實(shí)施例是對三七總皂甙透皮劑的制備方法的詳細(xì)描述，是說明性的而不 是限定性的，可按照所限定范圍列舉出若干個(gè)實(shí)施例，因此在不脫離本發(fā)明總體構(gòu)思下的 變化和修改，應(yīng)屬本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種三七總皂甙透皮劑的制備方法，具體步驟為： (1) 取三七總皂甙溶于無水乙醇，W/V比為25-30:1，置于密封錐形瓶中，置于磁力攪拌 器上持續(xù)攪拌，得溶液A，緩慢加入V/V為16:1的蒸餾水，得中藥A ; (2) 將殼聚糖溶于1-3%冰乙酸溶液中，W/V比為1-1. 8:32,攪拌溶解得殼聚糖冰醋酸 溶液，其中，攪拌溫度為45-55°C，加熱方式為蒸汽加熱； (3) 將中藥A溶于步驟⑵殼寡糖冰醋酸溶液中，V/V比為1:3-3:1，得混合溶液B ; (4) 將混合物B緩慢加入乳化劑中，高速磁力攪拌35-50分鐘，V/V比為1:35-45,溫度 控制在50-55°C，用pH調(diào)節(jié)劑將pH調(diào)至7. 8-9. 2,其中，乳化設(shè)備是帶有隔層的乳化鍋，轉(zhuǎn) 速1000-2000rpm，得乳化液C后；將超純水緩慢加入乳化液C中，V/V比為1:10-30,中速攪 拌至室溫得穩(wěn)定的乳化液D ; (5) 連續(xù)攪拌乳化液D，將交聯(lián)劑戊二醛加入乳化液D中，交聯(lián)反應(yīng)2. 5-3. 5小時(shí)，V/V 比為 1:10-2:9 ; (6) 交聯(lián)反應(yīng)完成后，低速離心（50rpm，20-30分鐘）后靜置30分鐘，棄上清液，得固體 混合物E ; (7) 用無水乙醇和丙酮交替洗滌沉淀混合物E 2-4次，并離心脫泡處理； (8) 采用流延法，將反應(yīng)充分的體系倒入聚四氟乙烯模具中，放入30°C烘箱中真空干 燥，從而得到透皮劑藥膜； 其中，上述三七總皂甙、無水乙醇按重量體積比為28:1。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種三七總皂甙透皮劑的制備方法，其特征在于，所述三七 總皂甙粒徑為50-100 μ m，過100-300目篩，密閉保存?zhèn)溆谩?. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種三七總皂甙透皮劑的制備方法，其特征在于，，殼聚糖的 分量大于等于10萬以上。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種三七總皂甙透皮劑的制備方法，其特征在于，，所述 乳化劑是聚乳酸-羥基乙酸共聚物與吐溫80或司盤80中的一種的混合物，體積比為 98. 5:1. 5-97. 5:2. 5〇5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種三七總皂甙透皮劑的制備方法，其特征在于，所述pH調(diào) 節(jié)劑是磷酸鹽緩沖溶液（〇· 2mol/L NaH2P04:Na2HP04S 16:84 ~5. 3:94. 7)或者 0· 2mol/L 氨水。
【文檔編號】A61K9/70GK106031717SQ201510110293
【公開日】2016年10月19日
【申請日】2015年3月13日
【發(fā)明人】田東奎, 何磊
【申請人】天津法莫西醫(yī)藥科技有限公司