用于對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行成像的組合物和使用該組合物診斷動(dòng)脈粥樣硬化的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及用于對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行成像的組合物和通過使用該組合物診斷動(dòng)脈粥樣硬化的方法。根據(jù)本發(fā)明的用于對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行成像的組合物顯示優(yōu)秀的動(dòng)脈粥樣硬化診斷準(zhǔn)確度，使得甚至對(duì)于患有需要血糖控制的疾病如糖尿病的個(gè)體也能夠診斷動(dòng)脈粥樣硬化，且使得甚至對(duì)于發(fā)生在腦和心臟中的動(dòng)脈粥樣硬化也能夠有效診斷。此外，與用于動(dòng)脈粥樣硬化診斷的傳統(tǒng)成像組合物相比，其生產(chǎn)成本低。因此，通過使用該組合物可以有效地診斷動(dòng)脈粥樣硬化。
【專利說明】
用于對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行成像的組合物和使用該組合物診斷 動(dòng)脈粥樣硬化的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本公開涉及用于對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行成像的組合物和使用該組合物診斷動(dòng)脈粥 樣硬化的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 動(dòng)脈粥樣硬化指一種疾病，其中膽固醇在血管的內(nèi)部（內(nèi)膜)沉積且內(nèi)膜細(xì)胞在沉 積處增殖，導(dǎo)致血管變窄或阻塞和減少的血液向周圍的流動(dòng)。更具體地，動(dòng)脈粥樣硬化是一 種血管疾病，其中正如老化水管的直徑因鐵銹和雜質(zhì)沉積而變窄，膽固醇滲入血管的內(nèi)膜 層，內(nèi)膜細(xì)胞和巨噬細(xì)胞在該處增殖，導(dǎo)致粥樣斑的形成。粥樣斑的核是由非細(xì)胞的脂質(zhì)核 組成的，且其被硬纖維斑塊覆蓋。當(dāng)斑塊不穩(wěn)定時(shí)，其破裂并在血管中形成血塊。到粥樣斑 內(nèi)的出血導(dǎo)致血管的迅速變窄甚至阻塞，從而導(dǎo)致受限制的向末梢的血液循環(huán)。
[0003] 用于監(jiān)測(cè)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展的方法包括使用PET/CT的分子成像。對(duì)于通 過使用PET/CT的分子成像診斷動(dòng)脈粥樣硬化，已經(jīng)使用氟-18氟脫氧葡萄糖(F18-FDG)。使 用F18-FDG診斷動(dòng)脈粥樣硬化的原理是基于泡沫細(xì)胞對(duì)葡萄糖和FDG增加的吸收。
[0004] 然而，使用F18-n)G對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行成像的診斷方法具有一些問題。首先，因 為FDG是葡萄糖類似物，由于血糖或代謝相關(guān)的激素可能受到影響，控制用于診斷的身體條 件是受限的。因此，動(dòng)脈粥樣硬化診斷的準(zhǔn)確度降低。此外，因?yàn)榻郴蜓强刂剖潜匾模?該方法對(duì)于高危群體例如患有糖尿病的群體是受限的。其次，雖然動(dòng)脈粥樣硬化在腦和心 臟中頻繁地發(fā)生，但是難以使用F18-FDG檢測(cè)動(dòng)脈粥樣硬化，因?yàn)樗鼈兝醚亲鳛槟芰俊?再次，生產(chǎn)成本過高，因?yàn)樾枰嘿F的設(shè)備例如回旋加速器來制備F18-FDG。
[0005] 韓國(guó)專利注冊(cè)號(hào)10-1351411(專利文件1)和韓國(guó)專利注冊(cè)號(hào)10-1055700(專利文 件2)公開了與本公開相關(guān)的技術(shù)。具體地，專利文件1涉及在F18-n)G正電子發(fā)射斷層掃描 中通過將惡性腫瘤與炎性病變區(qū)分開來選擇性地診斷惡性腫瘤的方法，專利文件2涉及用 Ga_68標(biāo)記的甘露糖基化白蛋白。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 技術(shù)問題
[0007] 本公開涉及提供用于對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行成像的組合物，其顯示動(dòng)脈粥樣硬化診 斷的高準(zhǔn)確度，使得甚至對(duì)于患有疾病如糖尿病的個(gè)體也能夠診斷動(dòng)脈粥樣硬化，且使得 甚至對(duì)于發(fā)生在腦和心臟中的動(dòng)脈粥樣硬化也能夠有效檢測(cè)。本公開還涉及以低生產(chǎn)成本 提供用于對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行成像的組合物，和提供使用該組合物診斷動(dòng)脈粥樣硬化的方 法。
[0008] 技術(shù)方案
[0009] 在一方面，本公開提供用于對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行成像的組合物，其包含放射性同 位素標(biāo)記的化合物，所述放射性同位素標(biāo)記的化合物是用金屬放射性同位素標(biāo)記的選自雙 官能螯合劑-甘露糖基化人血清白蛋白、雙官能螯合劑-甘露糖基化納米顆粒和雙官能螯合 劑-甘露糖基化聚合物中的一種或更多種。
[0010] 在另一方面，本公開提供使用根據(jù)本公開的用于對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行成像的組合 物診斷動(dòng)脈粥樣硬化的方法。
[0011] 有益效果
[0012] 根據(jù)本公開的用于對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行成像的組合物顯示診斷動(dòng)脈粥樣硬化的 高準(zhǔn)確度，使得甚至對(duì)于患有伴隨血糖代謝問題的疾病如糖尿病的個(gè)體也能夠診斷動(dòng)脈粥 樣硬化，且使得甚至對(duì)于發(fā)生在腦和心臟中的動(dòng)脈粥樣硬化也能夠有效檢測(cè)。此外，與現(xiàn)有 用于診斷動(dòng)脈粥樣硬化的成像組合物相比，其生產(chǎn)成本低。因此，通過使用該組合物可以有 效地診斷動(dòng)脈粥樣硬化。
【附圖說明】
[0013] 圖1和圖2示出通過TLC測(cè)量68GaCl標(biāo)記效率的結(jié)果。
[0014]圖3示出通過測(cè)量放射化學(xué)純度來驗(yàn)證穩(wěn)定性的結(jié)果。
[0015]圖4示出MSA-RITC與大鼠巨噬細(xì)胞中甘露糖受體的特異性結(jié)合。
[0016] 圖5示出向兔靜脈注射lmCi的68Ga_MSA后進(jìn)行正電子發(fā)射斷層掃描的結(jié)果。
[0017] 圖6示出在具有高膽固醇飲食的兔子的主動(dòng)脈的動(dòng)脈粥樣硬化病變處檢測(cè)的RITC 標(biāo)記的MSA。
[0018] 圖7、圖8和圖9比較使用對(duì)比例的18F-FDG和實(shí)施例及對(duì)比例的68Ga-MSA對(duì)動(dòng)脈粥 樣硬化進(jìn)行成像的結(jié)果。
[0019 ]圖1 〇示出比較實(shí)施例和對(duì)比例的腦實(shí)質(zhì)中的SUV的結(jié)果。
[0020] 圖11、圖12和圖13示出測(cè)試實(shí)施例對(duì)頸動(dòng)脈粥樣硬化部位的臨床適用性的結(jié)果。 比較正常人和患有心肌梗塞的患者的68Ga-MSA圖、SUV等。
[0021] 最佳實(shí)施方式
[0022] 本公開的發(fā)明人已經(jīng)做出不懈努力以開發(fā)用于對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行成像的組合 物，其顯示診斷的高準(zhǔn)確度，使得甚至對(duì)于患有疾病如糖尿病的個(gè)體也能夠診斷動(dòng)脈粥樣 硬化，且甚至可以適用于腦和心臟中的病變。因此，他們已經(jīng)開發(fā)出根據(jù)本公開的用于對(duì)動(dòng) 脈粥樣硬化進(jìn)行成像的組合物。
[0023] 一般來說，F(xiàn)18-FDG(18F-FDG)已經(jīng)被用于診斷動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展的成像 組合物中。然而，其問題在于準(zhǔn)確度低，因?yàn)閞oG是葡萄糖類似物，其難以應(yīng)用于患有疾病如 糖尿病的個(gè)體，和其難以應(yīng)用于其中動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生是最重要問題的腦和心臟。此外， F18-FDG的生產(chǎn)成本高。
[0024] 具體地，根據(jù)本公開的用于對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行成像的藥物組合物包含放射性同 位素標(biāo)記的化合物，所述放射性同位素標(biāo)記的化合物是用金屬放射性同位素標(biāo)記的選自雙 官能螯合劑-甘露糖基化人血清白蛋白、雙官能螯合劑-甘露糖基化納米顆粒和雙官能螯合 劑-甘露糖基化聚合物中的一種或更多種。
[0025] 在組合物中，雙官能螯合劑用于結(jié)合放射性同位素，甘露糖基團(tuán)用于結(jié)合甘露糖 受體，人血清白蛋白、納米顆?；蚓酆衔镒鳛檩d體/支撐體用于將雙官能螯合劑與甘露糖結(jié) 合。期望組合物具有1至lOOnm的尺寸，以便其在血液中很好地分散且可以移動(dòng)穿過血管。因 為雙官能螯合劑和甘露糖具有僅約〇.5nm的尺寸，載體/支撐體即人血清白蛋白、納米顆粒 或聚合物占其尺寸的大部分。人血清白蛋白在尺寸上是理想的，因?yàn)槠渚哂?nm的長(zhǎng)軸和 4nm的短軸的橄欖球形狀。納米顆粒和聚合物可以根據(jù)尺寸和材料適當(dāng)?shù)剡x擇。
[0026] 也就是說，根據(jù)本公開的用于對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行成像的藥物組合物，其中甘露 糖基化的人血清白蛋白（MSA)、納米顆粒或聚合物與甘露糖結(jié)合，甘露糖是甘露糖受體的配 體，然后將選自 6&、991^、111111、1中、11(：、 1231、1241和1311中的一種或更多種放射性同位素與 其連接，所述藥物組合物使得能夠通過檢測(cè)放射性同位素對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行分子成像， 通過這樣，診斷動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展。甘露糖受體是存在于在動(dòng)脈粥樣硬化中出現(xiàn) 的泡沫細(xì)胞上的細(xì)胞膜受體之一。
[0027] 金屬放射性同位素可以特別地是選自686&、991^、 111111、1中、11(：、1231、1241和 1311中的 一種或更多種，最特別地是68Ga。
[0028] 因?yàn)榻M合物不受代謝限制影響，禁食不是必要的。而且，因?yàn)槠渑c代謝相關(guān)的激素 無關(guān)，其甚至可以適用于患有疾病如糖尿病的個(gè)體。此外，不同于現(xiàn)有的F18-FDG，其也可以 用于腦和心臟。并且，由于不同于F18-n)G，不需要復(fù)雜或昂貴的設(shè)備，所以生產(chǎn)成本低。通 常，被稱作回旋加速器的昂貴設(shè)備已被用于制備F18-FDG。然而，當(dāng)如本公開中使用 68Ga作為 金屬放射性同位素時(shí)，其可以用被稱作鎵發(fā)生器的簡(jiǎn)單設(shè)備容易地制備。此外，由于68Ga具 有優(yōu)異的正電子發(fā)射能力，與使用其它放射性同位素或F18-FDG的情況相比，可以得到更清 晰的圖像。
[0029] 當(dāng)使用99mTc或mIn作為金屬放射性同位素時(shí)是有利的，這是因?yàn)榘胨テ诟L(zhǎng)。并 且，由于生產(chǎn)成本降低， 1231、1241和1311是有利的。并且，當(dāng)同時(shí)連接68Ga、 99mTc、mIn、18F、nC 、123I、124I和1311中的兩個(gè)或更多個(gè)放射性同位素時(shí)，各放射性同位素的效果同時(shí)發(fā)揮。例 如，當(dāng)同時(shí)連接 68Ga和99mTc時(shí)是有利的，這是因?yàn)榭梢栽黾釉\斷準(zhǔn)確度，甚至可以應(yīng)用于患 有疾病如糖尿病的對(duì)象，甚至可以應(yīng)用于腦和心臟，且半衰期增加。
[0030] 雙官能螯合劑可以是選自[1，4，7-三氮雜環(huán)壬烷-1，4，7-三乙酸(ΝΟΤΑ) ]、[ 1，4，7， 10-四氮雜環(huán)十二烷-1，4,7，10-四乙酸（D0TA)]、二亞乙基三胺五乙酸（DTPA)、肼基煙酸 (HYNIC)，N 2S2和N3S中的一種或更多種。最具體地，其可以是Ν0ΤΑ，雖然不限于此。特別地，當(dāng) ΝΟΤΑ用作雙官能螯合劑時(shí)是有利的，這是因?yàn)槠涫侨菀子?8Ga標(biāo)記的。具體地，當(dāng)使用99mTc 作為標(biāo)記物時(shí)可以使用HYNIC、N2S2或N3S，當(dāng)使用mIn作為標(biāo)記物時(shí)可以使用D0TA。
[0031] 根據(jù)本公開的用于診斷動(dòng)脈粥樣硬化的方法使用根據(jù)本公開的用于對(duì)動(dòng)脈粥樣 硬化進(jìn)行成像的組合物。診斷方法包括相關(guān)領(lǐng)域中已知的任何診斷方法。
[0032] 發(fā)明方式
[0033] 在下文中，通過具體實(shí)施例詳細(xì)地描述本公開以使本公開所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人 員可以容易地實(shí)施本公開。然而，本公開可以以各種不同形式實(shí)施而不受限于實(shí)施例。 實(shí)施例
[0034] 實(shí)施例1:用于Ga_68(68Ga)標(biāo)記的N0TA-MSA的制備
[0035] 〈步驟1:苯基甘露糖結(jié)合的人血清白蛋白的制備〉
[0036] 在將20mg的人血清白蛋白溶于5mL的0.1M碳酸鹽緩沖液(pH 9.5)中并添加5.5mg 的α-L-異硫氰酸苯基吡喃甘露糖苷后，在室溫下通過充分地?cái)嚢柽M(jìn)行反應(yīng)20小時(shí)。然后， 在-70°C保儲(chǔ)存反應(yīng)溶液。
[0037]〈步驟2:芐基ΝΟΤΑ和苯基甘露糖結(jié)合的人血清白蛋白的制備〉
[0038] 在向步驟1中制備的lmL甘露糖基化人血清白蛋白（13.6mg/mL)中加人10mg的ρ- SCN-Bz-NOTA后，在室溫下進(jìn)行反應(yīng)1小時(shí)。反應(yīng)后，分離芐基ΝΟΤΑ和苯基甘露糖結(jié)合的人血 清白蛋白，并用Sephadex G-25柱純化。
[0039] 實(shí)施例2:用于對(duì)甘露糖受體進(jìn)行成像的試劑盒的制備
[0040] 在向0.3mL的乙酸鈉緩沖液(0.5M，pH 5.5)中加入lmL的芐基ΝΟΤΑ和苯基甘露糖結(jié) 合的人血清白蛋白（13.6mg/mL)，并將相當(dāng)于lmg蛋白質(zhì)的量轉(zhuǎn)移至每個(gè)小瓶后，將混合物 冷凍干燥并在_70°C保存。
[0041] 實(shí)施例3:使用用于對(duì)甘露糖受體進(jìn)行成像的試劑盒制備68Ga標(biāo)記的化合物
[0042]當(dāng)向?qū)嵤├?的試劑盒加入使用68Ge/68Ga發(fā)生器(Cyclotron Co.，俄羅斯)制備的 lmL 68GaCl的0.1M鹽酸溶液后，在37°C進(jìn)行反應(yīng)時(shí)，稍后通過TLC 10分鐘、30分鐘、1小時(shí)和2 小時(shí)測(cè)量標(biāo)記效率。使用ITLC-SG(Gelman Co.，美國(guó)）作為固定相，使用0.1M檸檬酸溶液作 為流動(dòng)相。使用TLC掃描儀(Bioscan Co.)測(cè)量ITLC板上放射性的分布。標(biāo)記的68Ga保持在原 點(diǎn)而未標(biāo)記的68Ga移至溶劑前沿（圖1)。在37°C、pH 4-5反應(yīng)30分鐘后幾乎完成標(biāo)記（圖2)。 在與人血清混合并在37°C培養(yǎng)后，通過測(cè)量放射化學(xué)純度來研究標(biāo)記的68Ga-N0TA_MSA的穩(wěn) 定性。結(jié)果顯示在圖3中。從圖3可以看出，當(dāng)化合物在37°C在血清中培養(yǎng)時(shí)，純度保持在 99%或更高2小時(shí)?？紤]到在核醫(yī)學(xué)成像中通常在標(biāo)記后1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行注射，可以看出化合 物對(duì)于實(shí)際用途是足夠穩(wěn)定的。
[0043] 實(shí)施例4:用于甘露糖受體熒光成像的RITC-MSA化合物的制備
[0044] 首先，以與實(shí)施例1的步驟1相同的方式制備MSA。使100mg的MSA與溶于13mL的0.1M 碳酸鈉緩沖液(pH 9.5)中的16mg(0.03毫摩爾）羅丹明B異硫氰酸酯(RITC)在室溫、黑暗中 反應(yīng)20小時(shí)。使用PD-10柱和生理鹽水對(duì)生成的RITC-MSA進(jìn)行分離和純化，然后冷凍干燥。 通過使用配備氮?dú)饧す?337nm)的MALDI-T0F質(zhì)譜儀測(cè)量分子量來計(jì)算每MSA結(jié)合的RITC的 量。為此，通過以線性模式照射激光500次進(jìn)行測(cè)量。將所有樣品分析4次，通過取結(jié)果平均 值來確定MSA和RITC-MSA的分子量。
[0045] 通過該過程制備用于對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行成像的組合物。
[0046] 使用所制備的用于對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行成像的組合物得到患有動(dòng)脈粥樣硬化癥 狀患者的 PET/CT 圖。使用Phi lips'Extended Brilliance Workspace V3.5 得到PET/CT 圖。 具體地，在高麗大學(xué)九老醫(yī)院進(jìn)行成像。選擇主動(dòng)脈的感興趣區(qū)(R〇I)以使最大放射性吸收 的部位位于中心。對(duì)于升主動(dòng)脈和降主動(dòng)脈的軸向中的相鄰切片，確定感興趣區(qū)的最大標(biāo) 準(zhǔn)吸收值(SUV)和平均標(biāo)準(zhǔn)吸收值。通過將相應(yīng)組織的放射性濃度除以所注射的放射性的 總體濃度來計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)吸收值。在內(nèi)部觀察者和外部觀察者之間的平均標(biāo)準(zhǔn)吸收值的相關(guān)系 數(shù)大于0.9。
[0047] 從圖4可以看出，MSA-RITC與大鼠巨噬細(xì)胞中的甘露糖受體特異性結(jié)合（圖4a )，在 用抗甘露糖受體抗體預(yù)培養(yǎng)時(shí)抑制該結(jié)合（圖4b)。此外，流式細(xì)胞術(shù)分析顯示，在用抗CD 206抗甘露糖受體抗體培養(yǎng)時(shí)，MSA與甘露糖受體的結(jié)合以取決于含量的方式減少(圖4c)。
[0048] 另外的制備例:使用rMSA試劑盒制備Tc-99m-MSA("mTc-MSA)
[0049] 在向?qū)嵤├脑噭┖屑尤胗蒑〇-99/Tc_99m發(fā)生器(Samyoung Uni tech)制備的2mL 或5mL高锝酸鹽(99mTc04_)的生理鹽水溶液后，在室溫下進(jìn)行反應(yīng)1至30分鐘。通過在ITLC (瞬時(shí)薄層色譜)板上用少量的反應(yīng)物點(diǎn)板然后使用TLC掃描儀在用生理鹽水顯影后測(cè)量放 射性分布來確定锝的放射性同位素標(biāo)記效率。標(biāo)記的锝保持在原點(diǎn)，而所有其他未標(biāo)記的 锝移至溶劑前沿。標(biāo)記效率為99%或更高。當(dāng)標(biāo)記的99mTc-MSA保持在室溫下且當(dāng)其與人血 清混合然后在37°C培養(yǎng)時(shí)，通過測(cè)量隨時(shí)間的放射化學(xué)純度（％ )來研究標(biāo)記的99mTc-MSA的 穩(wěn)定性。結(jié)果顯不在表1中。
[0050]【表1】
[0051 ]_
[0052]如從表1看出，當(dāng)99mTc_MSA保持在室溫下且當(dāng)其在37°C在血清中培養(yǎng)時(shí)，純度保持 在90%或更高20小時(shí)。雖然當(dāng)其在37°C在血清中培養(yǎng)時(shí)，純度在24小時(shí)降至88.7%，但是對(duì) 于實(shí)際用途是足夠穩(wěn)定的，因?yàn)樵诤酸t(yī)學(xué)成像中通常在標(biāo)記后1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行注射。
[0053] 對(duì)比例
[0054] 在對(duì)比例中，不同于實(shí)施例，使用在用于對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行成像的組合物中已 經(jīng)使用的F18-FDG。
[0055] 測(cè)試?yán)?br>[0056] 測(cè)試?yán)?:實(shí)施例的兔動(dòng)脈粥樣硬化的分子成像
[0057]使用十只12周齡的正常兔(新西蘭白兔）用于實(shí)驗(yàn)。它們被隨機(jī)地分為2組，每組5 只兔。給一組提供正常飲食而給另一組提供包含1%膽固醇的飲食。將動(dòng)物保持在具有定期 光照/黑暗（10/14小時(shí))循環(huán)的標(biāo)準(zhǔn)條件（21°C，濕度41%至62%)下，并提供水和飼料的自 由使用。3個(gè)月后，在麻醉下靜脈注射lmCi的 68Ga-MSA后，在注射后10分鐘開始對(duì)全身實(shí)施10 分鐘正電子發(fā)射斷層掃描（圖5和圖6)。次日，將兔麻醉并向兔的耳靜脈注射RITC-MSA(42μ g/0. lmL)或混在0.9%生理鹽水中的RITC。10分鐘后，將兔安樂死，切下主動(dòng)脈并使其保持 在-20°C。在室溫下，將主動(dòng)脈部分在4% (體積/體積)緩沖的福爾馬林溶液中固定30分鐘， 用冷PBS(pH 7.4)清洗，將其嵌入最佳切削溫度復(fù)合物(OCT，Sakura，東京）中，并在組織滲 透一天后使其保持在_80°C。在載玻片上安裝切成10mm厚度的組織切片和聚-D-賴氨酸，然 后保持在室溫下直至在45°C在陰涼處干燥后使用。在用PBS(pH 7.4)清洗2次后使用 Fluoromount-G?(SouthernBio tech，Birmingham，AL)安裝組織切片。用分別具有547nm 和 572nm的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)的IX81-ZDC焦點(diǎn)漂移補(bǔ)償顯微鏡(Olympus，東京，日本)觀察熒光 圖（圖6)。
[0058]圖5a示出正常飲食兔中68Ga_MSA的PET/CT圖?？梢钥闯觯从^察到動(dòng)脈粥樣硬化病 變，在肝臟和骨髓組織中68Ga-MSA吸收提高。圖5b是膽固醇飲食兔中68Ga-MSA的PET/CT圖。 在脊柱前面的腹部觀察到綠色的動(dòng)脈粥樣硬化病變。圖5c放大圖5b中的動(dòng)脈粥樣硬化部 位。在黃色脊柱前面觀察到綠色動(dòng)脈粥樣硬化病變。
[0059]圖6E示出通過DIC(微分干涉對(duì)比）顯微鏡觀察的來自膽固醇飲食兔的主動(dòng)脈的動(dòng) 脈粥樣硬化部位的動(dòng)脈粥樣硬化組織。圖6F示出在DAPI染色后通過熒光共聚焦顯微鏡觀察 來自動(dòng)脈粥樣硬化病變的相同組織的細(xì)胞核的結(jié)果。圖6G示出在動(dòng)脈粥樣硬化部位觀察的 在MSA標(biāo)記的RITC的熒光。圖6H示出對(duì)于相同的動(dòng)脈粥樣硬化組織，當(dāng)注射未在MSA標(biāo)記的 RITC時(shí)，通過熒光顯微鏡不能夠觀察到RITC的熒光。圖61是通過疊加上述圖得到的圖，示出 RITC-MSA與甘露糖受體的特異性結(jié)合?？梢钥闯鯮ITC標(biāo)記的MSA與動(dòng)脈粥樣硬化部位充分 地結(jié)合。
[0060] 測(cè)試?yán)?:實(shí)施例和對(duì)比例的動(dòng)脈粥樣硬化成像的比較
[0061]比較實(shí)施例和對(duì)比例的動(dòng)脈粥樣硬化的診斷圖。通過向相同的兔以兩天間隔注 射68Ga-MSA和18F-FDG進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示在圖7、圖8和圖9中。
[0062]圖7a示出正常飲食兔中的18F-FDG的PET/CT圖?？梢钥闯觯从^察到動(dòng)脈粥樣硬化 病變，在肝臟和骨髓組織中的18F-FDG吸收提高。圖7b是膽固醇飲食兔中的68Ga-MSA的PET/ CT圖。在脊柱前面的腹部觀察到綠色的動(dòng)脈粥樣硬化病變。圖7c放大圖7b中的動(dòng)脈粥樣硬 化部位。在灰色脊柱前面觀察到綠色動(dòng)脈粥樣硬化病變。
[0063]由圖8可以看出，對(duì)于對(duì)比例的18F-FDG和68Ga_MSA都可以觀察到動(dòng)脈粥樣硬化病 變。同時(shí)，如由圖9看出，在吸收提高中，其中使用68Ga-MSA的實(shí)施例與其中使用18F-FDG的對(duì) 比例相比得到更好的結(jié)果。更具體地。圖9a示出相對(duì)于主動(dòng)脈動(dòng)脈粥樣硬化病變的SUV的下 腔靜脈的SUV(TBR:目標(biāo)背景比），圖9b示出心臟SUV相對(duì)于主動(dòng)脈動(dòng)脈粥樣硬化病變的SUV 的TBR，圖9c示出腦實(shí)質(zhì)SUV相對(duì)于主動(dòng)脈動(dòng)脈粥樣硬化病變的SUV的TBR。由圖9可以看出， 實(shí)施例與對(duì)比例相比得到更好的結(jié)果。因此，確定實(shí)施例與對(duì)比例相比可以獲得更清晰的 動(dòng)脈粥樣硬化成像。
[0064]表2顯示主動(dòng)脈動(dòng)脈粥樣硬化部位的SUV相對(duì)于腦SUV的TBR?？梢钥闯鰧?shí)施例的 TBR與對(duì)比例的TBR高。圖10示出與對(duì)比例相比，實(shí)施例的腦SUV在PET中的作用很低。相反， 對(duì)于對(duì)比例，因?yàn)?8F-FDG通過血腦屏障進(jìn)入腦實(shí)質(zhì)，不確定信號(hào)是來源于動(dòng)脈粥樣硬化病 變還是來源于 18F-FDG的增加。因此，可以看出18F-FDG不能用于檢測(cè)腦組織中的動(dòng)脈粥樣硬 化病變。
[0065]【表2】
[0066]
[0067] 測(cè)試?yán)?:實(shí)施例的臨床適用性的評(píng)價(jià)
[0068] 進(jìn)行實(shí)驗(yàn)以比較與對(duì)比例相比實(shí)施例的化合物的臨床適用性。進(jìn)行比較對(duì)于急性 心肌梗塞患者組和正常對(duì)照組的頸動(dòng)脈粥樣硬化部位的 68Ga_MSA圖的I期臨床研究。結(jié)果顯 示在圖11、圖12和圖13中。圖11示出急性心肌梗塞患者在頸動(dòng)脈粥樣硬化病變部位的 68Ga-MSA圖。在頸部區(qū)域充分地觀察到綠色動(dòng)脈粥樣硬化部位。圖12示出在頸動(dòng)脈沒有動(dòng)脈粥樣 硬化病變的對(duì)照組的 68Ga-MSA圖?？梢钥闯鰶]有觀察到異常部位。由圖13可以看出，與正常 對(duì)照組相比，由68Ga-MSA PET/CT圖像的目視檢查(PET_目視_級(jí)）、SVU(PET_RCA_S)和目標(biāo) SUV/背景SUV比（PET_RCA_TBR)可以容易地檢測(cè)在頸動(dòng)脈具有動(dòng)脈粥樣硬化的心血管疾病 患者中存在或不存在動(dòng)脈粥樣硬化病變。因此，確定實(shí)施例的用于對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行成 像的組合物是臨床上可適用的。
[0069] 雖然已經(jīng)描述了本公開的具體示例性實(shí)施方案，但是本公開并不限于此，并且可 以在本公開的精神和范圍內(nèi)進(jìn)行各種改變。應(yīng)理解的是這些改變?cè)谌缢綑?quán)利要求所限定 的本公開的范圍內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種用于對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行成像的組合物，其包含放射性同位素標(biāo)記的化合物， 所述放射性同位素標(biāo)記的化合物是用放射性同位素標(biāo)記的選自雙官能螯合劑-甘露糖基化 人血清白蛋白、雙官能螯合劑-甘露糖基化納米顆粒和雙官能螯合劑-甘露糖基化聚合物中 的一種或更多種。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行成像的組合物，其中所述放射性同 位素是選自686&、 99%、111111、1￥、11(：、1231、 1241和1311中的一種或更多種。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行成像的組合物，其中所述放射性同 位素是68Ga。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行成像的組合物，其中所述雙官能螯 合劑是選自[1，4,7_三氮雜環(huán)壬烷-1，4,7-三乙酸(1^^)]、[1，4,7，10-四氮雜環(huán)十二烷-1， 4,7，10_四乙酸(DOTA)]、二亞乙基三胺五乙酸(DTPA)、肼基煙酸（HYNIC)、N 2S2和N3S中的一 種或更多種。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行成像的組合物，其中所述雙官能螯 合劑是1，4,7-三氮雜環(huán)壬烷_1，4,7-三乙酸(ΝΟΤΑ)。6. -種使用根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)所述的用于對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)行成像的組合 物診斷動(dòng)脈粥樣硬化的方法。
【文檔編號(hào)】A61P9/10GK106061512SQ201580009693
【公開日】2016年10月26日
【申請(qǐng)日】2015年2月17日
【發(fā)明人】徐汞錫, 金成恩, 金應(yīng)周, 鄭載民
【申請(qǐng)人】高麗大學(xué)校產(chǎn)學(xué)協(xié)力團(tuán), 首爾大學(xué)校產(chǎn)學(xué)協(xié)力團(tuán)