專利名稱：槐糖類脂物的應(yīng)用，化妝用組合物和護(hù)膚用組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及的是槐糖類脂物(sophorolipides)的一種新的用途。
本發(fā)明還涉及到一些美容用或護(hù)膚用組合物。
特別要指出的是本發(fā)明涉及的組合物具有抗游離基和抗彈性蛋白酶(anti-elastasiques)的性能，而這種性能在用于護(hù)理皮膚及頭發(fā)的組合物中是特別有用的。
槐糖類脂物是一些糖類脂物，是通過酵母發(fā)酵得到的產(chǎn)物。這些酵母包括假絲酵母屬(Candida)或球擬酵母屬(Torulopsis)，像Torulopsismagnoliae，Candida bombicola，Candida apicola或Candida bogoriensis。
構(gòu)成細(xì)胞外槐糖類脂物的糖是槐糖(2′-O-β-D-吡喃葡糖基-β-D-吡喃葡糖)，該糖在6′-位和6″-位可被乙?；?，且在ω-位或(ω-1)-位接一脂肪族醇酸。
由幾個(gè)脂肪族醇酸組成的槐糖類脂物中類脂物的分?jǐn)?shù)決定于用在發(fā)酵過程中的第二碳源(含飽和或不飽和類脂物或多或少的植物油)的類脂物的組成；脂肪族醇酸間的區(qū)別在于鏈長(zhǎng)的不同，不飽和鍵數(shù)目的不同，不飽和鍵的位置不同以及羥基化的位置的不同。
合成的糖類脂物是由幾個(gè)不同級(jí)別的槐糖類脂物組成的混合物，這些槐糖類脂物的區(qū)別在于它們的飽和或不飽和的程度不同，在于存在或不存在幾種不同類型的內(nèi)酯化作用，以及乙?；某潭鹊牟煌?。
這些不同級(jí)別的槐糖類脂物包括1.內(nèi)酯，在槐糖的6′-位和6″-位乙?；蛭匆阴；碧穷愔铮? 1′，4″-內(nèi)酯6′-6″-雙乙酯(記作S1-4″L6′a6″a)。
—槐糖類脂物，1′，4″-內(nèi)酯6″-單乙酯(記作S1-4″L6″a)。
—槐糖類脂物，1′，4″-內(nèi)酯(記作S1-4″L)。
2.酸，在槐糖的6′-位被乙?；蛭幢灰阴；碧穷愔锼?′-位單乙酯(記作S1-A6′a)，—槐糖類脂物酸(記作S1-A)。
內(nèi)酯形式及酸形式的槐糖類脂物的結(jié)構(gòu)式分別如下內(nèi)酯式(I)
酸式(II)
式中R＝H或CH3-CO。
以上結(jié)構(gòu)式中的脂肪族醇酸的情況為17-羥基十八烯酸(17-羥基油酸)，是組成中出現(xiàn)最多的脂肪族醇酸。
下面將給出用氣相色譜法測(cè)定的，對(duì)于不同級(jí)別的槐糖類脂物的每種組成物醇酸分別的含量，以及這些不同級(jí)別的槐糖類脂物的分布。
構(gòu)成槐糖類脂物的脂肪族醇酸例如類型 脂肪族醇酸 ％C16015-OH十六烷酸 1.5C16016-OH十六烷酸 2.0C18017-OH十八烷酸 3.5C18017-OH十八烷酸 60.0C18118-OH十八烯酸 12.0
C18217-OH十八碳二烯酸 7.0C18218-OH十八碳二烯酸14.0生產(chǎn)糖類脂物的主要方法是以甘油三酸酯或碳水化合物為原料進(jìn)行生物合成。
對(duì)微生物法生產(chǎn)糖類脂物無需補(bǔ)充提供氮和鹽，只要有碳源和充足的氧存在這種微生物的作用便可進(jìn)行。
糖類脂物的生物合成包括親脂物(脂肪酸)和親水物(槐糖)這兩部分的合成。
糖類脂物生物合成的特征在于具有以下的要點(diǎn)—類脂物部分的合成取決于被用作基質(zhì)(油)的疏水碳源。
—碳水化合物部分的合成也取決于所用的碳源，但是由novo合成的。
例如在10％葡萄糖，1.25％酵母萃取物和0.2％尿素的存在下培養(yǎng)。球擬酵母屬的酵母，像T.magnoliae或T.bombicala(現(xiàn)在分類于假絲酵母屬)，排泄出槐糖類脂物。
一些研究工作表明向培養(yǎng)基中加入長(zhǎng)鏈酯化脂肪酸，或正鏈烷，或甘油三酸酯，可以提高槐糖類脂物的產(chǎn)率。
以酸的形式存在的乙?；碧穷愔锏纳a(chǎn)方法是特別以植物油為培養(yǎng)基，對(duì)Candida bombicola或Candida apicola進(jìn)行培養(yǎng)。
表面活性劑用于對(duì)身體的護(hù)理和牙齒的護(hù)理時(shí)，存在于洗滌劑中。表面活性劑在醫(yī)藥領(lǐng)域和化妝品領(lǐng)域用量都很多。由于用量越來越大，現(xiàn)今的生態(tài)學(xué)考慮使人們注意到對(duì)這類物質(zhì)與生命有關(guān)的性質(zhì)及毒性的研究。這樣，人們知道合成的表面活性劑(非生物性表面活性劑)可以改變生物膜的滲透性，陽離子型和陰離子型表面活性劑起作用于細(xì)胞間分子的釋放，或抑制其呼吸作用。隨著濃度的變化，合成表面活性劑還會(huì)表現(xiàn)出毒性。
本發(fā)明的一個(gè)目的是提出一類在化妝品組合物或藥物組合物中無毒性的生物表面活性劑。
槐糖類脂物曾被用作可生物降解的工業(yè)用除垢劑，特別是在要求減少污染的過程中，例如在法國(guó)專利申請(qǐng)92/16033，93/14999以及歐洲專利申請(qǐng)EP 499434中所描述。
歐洲專利申請(qǐng)EP-A-209783(Wella)描述了槐糖類脂物的內(nèi)酯形式及其在作為抗成膜劑(agent antipelliculaire)及抑菌劑方面的應(yīng)用。
日本專利JP-A-55004344(Kao)敘述了用于美容術(shù)的羥烷基醚糖類脂物的酯。
這些專利申請(qǐng)中沒有一個(gè)專利描述或提議過具有抗游離基，抗彈性蛋白酶和/或抗炎癥性能的組合物。
此外，還提出了以糖類脂物(例如葡基脂酰基鞘氨醇或二半乳糖二甘油酯)為基質(zhì)的化妝用或藥用組合物，使得類脂物對(duì)皮膚有好處，特別是有利于皮膚的水合作用。
按照本發(fā)明，人們發(fā)現(xiàn)槐糖類脂物是具有優(yōu)良物理化學(xué)性質(zhì)的糖類脂物，特別是具有多樣的可乳化性，這樣便可制備出以槐糖類脂物為基質(zhì)的，用于化妝的或一般用于局部用藥的多種多樣的組合物。
另一方面，除了槐糖類脂物對(duì)皮膚具有所有的類脂物的好處之外，還具有抗游離基和抗彈性蛋白酶的性質(zhì)，這些性質(zhì)正是所尋找的在用于化妝的，衛(wèi)生保健的，皮膚用藥的，特別是在對(duì)頭發(fā)和皮膚進(jìn)行防護(hù)的組合物中所需要的。
因此，本發(fā)明的目的在于用槐糖類脂物制備美容或護(hù)膚組合物，以及所得到的組合物。
本發(fā)明首次提出了這些生物來源的表面活性糖類脂物，這樣的類脂物具有多樣的可乳化性，具有抗游離基性，抗彈性蛋白酶性和/或抗炎性。
按照本發(fā)明，由于其特殊的可乳化性質(zhì)，用槐糖類脂物可以制備乳液形式的美容用組合物，這樣的乳液可以是水連續(xù)相(水包油乳液)，或者是油連續(xù)相(油包水乳液)，將這樣的類脂物用到皮膚上或頭發(fā)上，就無需再使用合成的表面活性劑和合成的乳液了。特別是這種組合物可用做藥物有效成分的媒介物。
按照本發(fā)明，在發(fā)酵法制備槐糖類脂物所使用的培養(yǎng)基質(zhì)為一種植物油，并且親油相含有一種植物油(例如橄欖油，甜杏仁油，胡桃油或氫化椰子油，或其他植物油)時(shí)，用這樣的槐糖類脂物還可以得到具有穩(wěn)定油連續(xù)相的乳液，而親油相可以完全是來源于植物。為了避免毒理學(xué)上的問題，實(shí)際上我們知道要盡量使用植物來源而不是動(dòng)物來源的產(chǎn)品。
最后，當(dāng)所用槐糖類脂物為酸的形式，或一價(jià)金屬鹽，如鈉鹽或鉀鹽的形式，或所述酸的二價(jià)鹽的形式的時(shí)候，槐糖類脂物構(gòu)成一種陰離子型表面活性劑，其HLB值隨pH值而改變，正是因?yàn)槿绱?，特別可以得到高HLB值(主要約在8～12之間)的水乳液，甚至得到穩(wěn)定的水微乳液，且透明性很好(HLB值約為13～15)，這正是制備某些美容用及衛(wèi)生保健用組合物所需要具備的性能。
特別是水微乳液(水包油微乳液)對(duì)制備不用水醇溶液，即不用醇的加香洗滌劑或香水來講，是很有意義的。
本發(fā)明的一個(gè)有利的實(shí)施辦法是使組合物含有一種槐糖類脂物作為唯一的乳化劑。然而，當(dāng)槐糖類脂物與一種傳統(tǒng)的表面活性劑混合時(shí)，會(huì)產(chǎn)生一種協(xié)同效應(yīng)，降低水和碳?xì)浠衔镏g的表面張力。這樣的表面活性劑的例子有二辛基磺基琥珀酸鈉(DOS)，壬基苯酚乙氧基醚，單月桂酸脫水山梨醇乙氧基醚(Tween 20)或十六烷基三甲基銨。
但是，按照本發(fā)明的組合物中，優(yōu)選經(jīng)過純化的槐糖類脂物，這是為了使槐糖類脂物只是呈現(xiàn)酸式和/或鹽式，酸式和鹽式比內(nèi)酯式更穩(wěn)定，且溶解性能更好。從人的嗅覺角度講，穩(wěn)定性是重要的。酸式和/或鹽式槐糖類脂物溶于水溶液，而內(nèi)酯式在水溶液中的溶解性能明顯要差。
本發(fā)明所用的槐糖類脂物通過C.bogoriensis或C.bombicola發(fā)酵來制備更好些。特別要列舉出的是由下面的式〔I〕(酸式)和式〔2〕(內(nèi)酯式)所表示的槐糖類脂物，式中R1代表氫或乙?；?，當(dāng)R3為一由7-16個(gè)碳原子構(gòu)成的飽和烴殘基時(shí)，R2表示氫或一個(gè)由1～9個(gè)碳原子構(gòu)成的烷基，或者當(dāng)R3為一由13-17個(gè)碳原子構(gòu)成的不飽和烴殘基時(shí)，R2表示氫或一甲基；
特別是-R2-CH-R3-是一個(gè)飽和的或不飽和的，16個(gè)碳原子或18個(gè)碳原子構(gòu)成的脂肪族醇酸的二價(jià)殘基，在不飽和的情況下，指的是如前所述的，具有一個(gè)或兩個(gè)雙鍵。
本發(fā)明的組合物中槐糖類脂物(干品)含量為0.01～30％(w/w)，優(yōu)選0.05～5％。
本發(fā)明的組合物中可以含有C10-C34，優(yōu)選C14-C22的飽和或不飽和脂肪酸，例如油酸，亞油酸，亞麻酸，棕櫚酸及棕櫚油酸，其含量為槐糖類脂物(干品)的0.01～20％(w/w)，更特別是1～10％。大量的脂肪酸可按照不同的應(yīng)用在以后補(bǔ)加。
在一些特定的實(shí)施形式中，本發(fā)明的美容用組合物將呈現(xiàn)以下各種形式—乳狀液，特別是油-醇洗滌液，水乳液或水微乳液的形式，—洗劑，如加香洗劑，或香水，特別是水醇洗劑，或穩(wěn)定的水微乳液形式，—洗發(fā)香波，浴用凝膠，水微乳形式的液體肥皂，—卸妝用凝膠，水合香脂，特別是油包水或水包油的乳液形式，—固體形式的油脂混合物，如口紅棒，或軟膏。
這些性能特別適用于毛發(fā)及皮膚的衛(wèi)生保健。
按照本發(fā)明的美容用組合物體現(xiàn)了槐糖類脂物的抗游離基和抗彈性蛋白酶的性能，用在皮膚的護(hù)理中，表現(xiàn)出了抗游離基性，抗彈性蛋白酶性和/或抗炎性。
在藥用皮膚病組合物中，可以列舉出適用于局部用藥的各種組合物，特別是軟膏，油脂，乳液，凝膠及液體肥皂等的配方。
本發(fā)明的一些其他好處及特征將被揭示于后面的實(shí)施例中。
表10及表11給出的是根據(jù)本發(fā)明組合物的各種可能的配方。
實(shí)施例1為了說明問題，這里給出在Candida bombicola菌株中的合成條件。
槐糖類脂物的最佳生產(chǎn)條件為—所用的培養(yǎng)基初始含有10％葡萄糖，0.5％干玉米浸漬液和0.4％硫酸銨，培養(yǎng)液起始pH值為6.0，溫育溫度固定在22～30℃。
連續(xù)加入第二碳源，例如一些鏈烷，一些長(zhǎng)碳鏈醇，一些脂肪酸或其甲酯、乙酯。
—發(fā)酵終了時(shí)，葡萄糖/第二碳源消耗比一般約為2∶1。
—按照法國(guó)專利FR 2692593描述的方法，以C.bombicola CBS600g為酵母，連續(xù)投料菜油的甲酯或乙酯(ester méthylique ou esteréthylique de zola)，按日加入葡萄糖，這樣，槐糖類脂物的產(chǎn)率為300g/l。
粗品及酸式槐糖類脂物的特性如下1.粗品槐糖類脂物—外觀粘稠狀液體—?dú)馕恫伙@著—干燥物質(zhì)≤60％±0.5％—顏色琥珀色—游離脂肪酸≤4％(2.6％油酸)—游離糖≤1％—無機(jī)鹽≤2％—pH7±0.5—防腐劑苯氧基乙醇，對(duì)羥基苯甲酸甲酯的鈉鹽—密度20℃ 1.09740℃ 1.085—運(yùn)動(dòng)粘度20℃ 562.61mm2/s40℃ 160.49mm2/s粗品槐糖類脂物結(jié)構(gòu)中脂肪族醇酸的分布如下(表1)
2.酸式槐糖類脂物堿性水解粗品槐糖類脂物得酸式槐糖類脂物。
—外觀粘稠液體—?dú)馕遁p微的乙酰化物質(zhì)的氣味—含水量≥60％±5％—游離脂肪酸≤5％(2.4％油酸)—游離脂肪族醇酸≤0.5％—游離糖≤1％—無機(jī)物≤2％—防腐劑苯氧基乙醇，對(duì)羥基苯甲酸甲酯的鈉鹽(POBM，Na)—pH6±0.5—密度20℃ 1.09240℃ 1.082—運(yùn)動(dòng)粘度96mm2/s(20℃)42mm2/s(40℃酸式槐糖類脂物的脂肪族醇酸的分布如下(表2)
實(shí)施例21.眼試劑量按照1992年6月9日法令(見1992年7月10日法蘭西共和國(guó)官方文件，Journal officiel de la République Francaise)規(guī)定的方法，將濃度為6％(按干品計(jì))的粗品槐糖類脂物及濃度為4％(按干品計(jì))的酸式槐糖類脂物按0.1ml的量一次滴入三只兔子的眼睛。
滴入兔眼1小時(shí)后，所得結(jié)果給出粗品槐糖類脂物和酸式槐糖類脂物的最大刺激指數(shù)分別為15.0和7.3。
由這樣的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以得出這樣的結(jié)論粗品槐糖類脂物和酸式槐糖類脂物均為弱刺激性物質(zhì)。
2.皮試劑量用蒸餾水將粗品槐糖類脂物和酸式槐糖類脂物分別稀釋至6％和4％(均按干品含量計(jì))，按照1982年2月1日文件(見Journal officielde la Republique Francaise du 21 Février 1982)規(guī)定的方法，以0.5ml的劑量涂到三只兔子的一塊健康皮膚和一塊劃傷皮膚上。
測(cè)試結(jié)果給出粗品槐糖類脂物和酸式槐糖類脂物的指數(shù)分別為0.3和0.1。
由這樣的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以得出粗品槐糖類脂物和酸式槐糖類脂物均非刺激性物質(zhì)的結(jié)論。
3.口服無害性按照一定的方法，選擇一定的對(duì)象，以槐糖類脂物最大劑量?jī)H以口服的形式來評(píng)價(jià)其毒性。
以5ml/kg的劑量，使兩組雄鼠和雌鼠口服粗品槐糖類脂物和酸式槐糖類脂物。
這項(xiàng)研究所用的方法來自文件《la Directive O.C.D.E.84/449L251 du 25 Avril 1984》對(duì)分別實(shí)驗(yàn)的每一種產(chǎn)物來說，兩組動(dòng)物的死亡率均為零。
在這樣的條件下，口服粗品槐糖類脂物和酸式槐糖類脂物的無害劑量為高于或等于5mg/kg。
4.致敏性的測(cè)定(Magnusson-Kligman法)按照一定的方法，以患白化病的豚鼠為對(duì)象對(duì)粗品槐糖類脂物及酸式槐糖類脂物的致敏性進(jìn)行評(píng)價(jià)。與被研究產(chǎn)品重復(fù)進(jìn)行一系列接觸兩個(gè)星期(誘發(fā)階段)之后，如果沒被誘發(fā)過分過敏現(xiàn)象，還以同樣的產(chǎn)品對(duì)豚鼠再進(jìn)行接觸以誘發(fā)其過敏。
通過用非刺激性的最大濃度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的觀察結(jié)果表明粗品槐糖類脂物和酸式槐糖類脂物的致敏性屬于1級(jí)。
在這樣的條件下，粗品槐糖類脂物及酸式槐糖類脂物的致敏性是很弱的，在患白化病的豚鼠身上沒有明顯的表現(xiàn)。
5.細(xì)菌檢測(cè)及防腐研究將1克槐糖類脂物溶于10ml無菌水中，取1ml所得溶液接種于Sabouraud瓊脂(SAB)上。
將接種好的瓊脂放入37℃烘箱，120小時(shí)。按UFC(Unites FormantColonie)對(duì)所形成的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，并換算成1g/ml產(chǎn)品。
對(duì)產(chǎn)品防腐細(xì)菌學(xué)研究共進(jìn)行12個(gè)星期(見后面的表3)所得結(jié)果與細(xì)菌數(shù)目相符
*0.5％苯氧基乙醇+0.5％POBM，Na實(shí)施例3抗彈性蛋白酶的性質(zhì)由于人體白血球彈性蛋白酶(ELH)與炎癥病理學(xué)有關(guān)，像肺氣腫、類風(fēng)濕性多關(guān)節(jié)性、牙周炎，引起了人們對(duì)其進(jìn)行大量的研究工作。這種酶能降解結(jié)締組織的多種大分子，像纖維彈性硬蛋白，某些類型的骨膠原，蛋白聚糖(protéoglycane)及結(jié)構(gòu)糖蛋白等。因此，為了避免有炎癥現(xiàn)象時(shí)所有這些大分子被降解，有必要使用抗白血球彈性蛋白酶的物質(zhì)。
人體白血球彈性蛋白酶(ELH)的抑制實(shí)驗(yàn)用ELH和N-甲氧基琥珀酰-丙氨酸-丙氨酸-脯氨酸-纈氨酸-p-硝基酰替苯胺作為合成基質(zhì)，研究了槐糖類脂物水溶液的抗彈性蛋白酶性質(zhì)。所用緩沖液為TRIS HCl。
通過利用分光光度法(410nm)檢測(cè)p-硝基酰替苯胺的釋放(生成帶顏色的產(chǎn)物)來研究動(dòng)力學(xué)。
表4給出了研究的結(jié)果。
粗品槐糖類脂物對(duì)人體白血球彈性蛋白酶的抑制作用
實(shí)施例4抗彈性蛋白酶的性質(zhì)(用人的真皮切片做實(shí)驗(yàn))粗品槐糖類脂物對(duì)人的真皮切片顯示出抗彈性蛋白酶的活性?；|(zhì)彈性硬蛋白存在于人的皮膚的真皮切片中，彈性蛋白酶消化彈性硬蛋白(組織化學(xué)清楚地顯示這一點(diǎn))，而抗彈性蛋白的抑制作用表現(xiàn)為減輕這一消化作用。
參比物氯化汞抑制彈性蛋白酶的活性，且與氯化汞劑量有關(guān)。參比物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果是預(yù)料之中的，它可確定本實(shí)驗(yàn)的有效性。
利用人的真皮切片所做的對(duì)粗品槐糖類脂物抗彈性蛋白酶的評(píng)價(jià)如表5所示。
濃度為5％(w/v)的粗品槐糖類脂物完全地抑制了對(duì)彈性硬蛋白纖維的降解作用。
實(shí)施例5抗彈性蛋白酶的活性(半固體介質(zhì)試驗(yàn))要點(diǎn)含在瓊脂中的彈性硬蛋白被彈性蛋白酶降解的抑制作用借助于一種半定量技術(shù)評(píng)價(jià)了酸式槐糖類脂物的抗彈性蛋白酶的活性。在含有基質(zhì)彈性硬蛋白的瓊脂上挖有小坑，向坑中放入彈性蛋白酶溶液，該酶溶液中含有或不含有被實(shí)驗(yàn)物質(zhì)或參比化合物。
彈性蛋白酶在瓊脂中擴(kuò)散，并且消化彈性硬蛋白。
測(cè)量瓊脂中被消化區(qū)域的尺寸以說明抑制作用的強(qiáng)弱。
表6中列出了酸式槐糖類脂物對(duì)胰彈性蛋白酶消化彈性硬蛋白的抑制作用的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
平行參比抑制劑是濃度為10mM的氯化汞。在這種抑制劑的存在下，對(duì)彈性蛋白酶的抑制作用是完全的(見上邊的表7)。
只有實(shí)驗(yàn)產(chǎn)物單獨(dú)存在時(shí)，瓊脂外觀無變化。
相對(duì)于參比試驗(yàn)而言，0.4％和2％濃度的酸式槐糖類脂物減小了被消化的面積。經(jīng)過6小時(shí)的培育之后，對(duì)應(yīng)0.4％濃度和2％濃度的消化面積分別為0.28cm2和0.24cm2，而無槐糖類脂物的參比實(shí)驗(yàn)的消化面積為0.38cm2。經(jīng)過21小時(shí)的培育后，對(duì)應(yīng)0.4％濃度和2％濃度的消化面積分別為0.64cm2和0.5cm2，無槐糖類脂物的參比實(shí)驗(yàn)的消化面積達(dá)0.95cm2。
概括說來，這項(xiàng)實(shí)驗(yàn)表明0.4％濃度的酸式槐糖類脂物輕微抑制彈性蛋白酶的活性。濃度達(dá)2％后抑制作用明顯增強(qiáng)。因此，要具備抗彈性蛋白酶的活性，需要這樣的濃度才行。
實(shí)施例6抗游離基活性(RPE法)由氧衍生出的游離基在病理學(xué)上是很重要的，這里研究了粗品及酸式槐糖類脂物對(duì)氧游離基的抗游離基作用。
所用的方法為電子順磁共振的光譜測(cè)定技術(shù)(RPE)。
在這種方法中，分子中(特別是在游離基的情況下)的不成對(duì)電子的自旋狀態(tài)是特征的。
一個(gè)捕獲游離基的分子使信號(hào)減弱。
RPE實(shí)驗(yàn)是在Brucker ECS 106光譜儀上于室溫下進(jìn)行的。
光解(U.V.B)過氧化氫水溶液得到羥游離基(OH)，用甘露糖醇作參比分子(正對(duì)照)。
在濃度為10mM的甘露糖醇存在下，ESR信號(hào)銳減，捕獲活性高達(dá)98％，濃度為0.0092％和0.028％(干品，w/v)的粗品槐糖類脂物的捕獲效率分別達(dá)到71％和97％，當(dāng)粗品槐糖類脂物濃度達(dá)2.5％(干品，w/v)時(shí)，ESR信號(hào)全部消失。
酸式槐糖類脂物的濃度達(dá)到0.0092％(干品，w/v)時(shí)，捕獲率達(dá)到98％。
表8中列出了槐糖類脂物和甘露糖醇對(duì)對(duì)應(yīng)于羥游離基強(qiáng)度的ESR信號(hào)強(qiáng)度的影響。
濃度是用單位體積中干品重量百分比(w/v)表示的。
氧的反應(yīng)代謝物，過氧化物負(fù)離子(O2-)，羥游離基(OH)，過氧化氫(H2O2)和單態(tài)氧(IO2)與機(jī)體中的有毒化反應(yīng)有關(guān)。機(jī)體自身的產(chǎn)物或從外部進(jìn)入的物質(zhì)分解糖，蛋白質(zhì)，類脂物和核酸。
酸式和粗品槐糖類脂物減弱羥游離基的ESR信號(hào)，不同劑量減弱程度不一。這種效果比甘露糖醇(具有捕獲OH能力的參比物)要強(qiáng)。
總之，粗品和酸式槐糖類脂物表現(xiàn)出有趣的對(duì)羥游離基的抗游離基作用，這種作用所需活性物質(zhì)濃度低，并且一般可用于含有化妝品組分的配方中。
實(shí)施例7抗游離基效應(yīng)(用人的成纖維細(xì)胞作實(shí)驗(yàn))以培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞為對(duì)象進(jìn)行的研究表明粗品槐糖類脂物在抗游離基方面對(duì)成纖維細(xì)胞有保護(hù)作用。這里的游離基是由U.V.A.產(chǎn)生的。
實(shí)驗(yàn)所用槐糖類脂物的濃度以對(duì)細(xì)胞無毒害為準(zhǔn)。
參比物用維生素E的醋酸酯，濃度為200μg/ml，在無U.V.A.的存在下，對(duì)細(xì)胞無毒性，在U.V.A存在下，保護(hù)效率為31％。
濃度為0.125μg/ml，0.25μg/ml和0.5μg/ml的粗品槐糖類脂物分別引起18％，14％和15％的細(xì)胞成活率的下降，保護(hù)效率分別相當(dāng)于47％，7％和18％。
在無抗游離基試劑存在時(shí)，經(jīng)U.V.A.輻照后細(xì)胞的成活率僅為21％。
<>表9中列出了粗品槐糖類脂物對(duì)U.V.A.產(chǎn)生的游離基的抗游離基效率。
>由此可以看出粗品槐糖類脂物對(duì)由U.V.A產(chǎn)生的游離基的抗游離基作用有效而顯著地保護(hù)了成纖維細(xì)胞。
實(shí)施例8以槐糖類脂物為基質(zhì)的化妝品的應(yīng)用1.配方實(shí)例表9和表10代表了不同類型的可能的配方，各組分的含量是用相對(duì)于整個(gè)組合物的重量百分比表示的。
2.向乳液中加入槐糖類脂物的方式粗品或酸式槐糖類脂物都可以同時(shí)加入到油相和水相中去。
如果希望將其加入到油相，需在70℃將其溶于油相，恰好在乳化于水相之前進(jìn)行。
對(duì)于洗劑，洗發(fā)香波或凝膠，可以在冷的情況下，在制備完畢后再加入槐糖類脂物。
對(duì)于洗劑或洗發(fā)香波，可以在冷的情況下，在制備完畢后再加入槐糖類脂物。
3.配制實(shí)例在后面的配方中用了如下的縮寫詞—POBM對(duì)羥基苯甲酸甲酯(防腐劑)—PCLPure cellin-phénonip苯氧基乙醇，羥苯甲酸甲酯、羥苯甲酸乙酯、羥苯甲酸丙酯、羥苯甲酸丁酯(防腐劑)—PPG丙撐二醇—Ozokerite石蠟，石油制品，增稠劑—CAO蓖麻油(Castor oil)3.1-卸妝凝膠A-·槐糖類脂物 3％(或0.9％活性物質(zhì))B-·羥丙基瓜爾膠·Hydroxypropyl trimonium chloride 0.3％·羥乙基纖維素1％
·水 84.5％C-·Sodium méthyl cocoyl taurat 0.4％·水 10％D-·phénonip0.5％·Nonoxynol 100.2％·香料0.1％操作方法·適度加熱混合相C。
·水合相B，并向其中慢慢加入相C。
·制備相D，使其與制備的BC混合，最后加入槐糖類脂物。
·混合直至得一均勻的凝膠。
3.2-加有槐糖類脂物的水合膏狀物，水包油型乳液。
A-·粗品或酸式槐糖類脂物 2％(或0.6％活性物質(zhì))·phénonip0.5％·香料0.2％B-·硬脂酸甘油酯 4％·聚乙二醇150雙硬脂酸酯 0.5％·Alcool cetearyl 2％·葵花籽油 2％·Octanoate cetearyl1％·甘油三酸酯8％·硅油0.5％C-·水55.70％D-·甘油 3％·Carbomer 8400.3％·三乙醇胺0.3％·水 20％操作方法·制備D相按順序加入甘油，Carbomer和水，然后加入三乙醇胺。
·分別加熱B和C(65℃)，在攪拌下慢慢將B加入到C中。
·加入D，然后降低溫度到30～35℃，然后再加入槐糖類脂物及防腐劑，香料。
3.3-油包水乳液型(HLB4-7)加有槐糖類脂物的水合膏狀物配方(按50％植物油計(jì)算的)—由以下組分得到的槐糖類脂物的鈣鹽·酸式槐糖類脂物 10％(4％干物質(zhì))·Ca(OH)210％—PPG**(穩(wěn)定劑)10％—葵花籽油，氫化椰子油的甘油三酸酯**50％—硫酸鎂(對(duì)羥基苯甲酸甲酯) 4％—POBM(對(duì)羥基苯甲酸酯) 0.6％—苯氧基乙醇 0.6％—Kathon 0.2％—香料 0.2％—水 14.4％操作方式—將水加熱至70℃—加入槐糖類脂物和Ca(OH)2，然后加入硫酸鹽；—將油(**)熔化，然后混合于水中；—于40℃下加入防腐劑POBM，苯氧基乙醇；加入Kathon和香料分別用20％，40％和50％椰子油做了試驗(yàn)。
3.4-口紅型油脂混合物(HLB4-5)配方—粗品或酸式槐糖類脂物的鈣鹽4.0％—覆盆子香精0.4％—蓖麻油 39.2％—Merystate d′isopropyl 13％—PCL液體 7.6％—白蜂蠟3.4％—Candelila蠟 7.2％—Carnauba蠟2.3％—地蠟 5.4％
—Bintome CAO(膠凝劑)6.9％—Amerlate W(羊毛脂衍生物) 7.6％—Ceraphyl 424(脂肪酯) 3％—對(duì)羥基苯甲酸丙酯 0.1％在這個(gè)配方中，低HLB值的，以二價(jià)鹽形式存在的槐糖類脂物的潤(rùn)滑劑特征使這種組合物表現(xiàn)出可乳化的性能。
表10槐糖類脂物在化妝品組合物中的應(yīng)用
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表11<
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權(quán)利要求
1.具有抗游離基，抗彈性蛋白酶和/或抗炎癥性能的美容和/或護(hù)膚用組合物，其特征在于其中至少含有一種槐糖類脂物(sophorolipide)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其特征在于這種組合物呈油包水型乳液，水包油型乳液或水包油型微乳狀液形式。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的組合物，其特征在于這種組合物呈油連續(xù)相乳液的形式，其中的油相為一種植物油，如橄欖油、甜杏仁油、胡桃油、氫化椰子油。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3的組合物，其特征在于這種組合物含有作為唯一的乳化劑的一種槐糖類脂物。
5.根據(jù)權(quán)利要求2或3的組合物，其特征在于這種組合物含有一種槐糖類脂物和一種傳統(tǒng)的乳化劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其特征在于槐糖類脂物溶解于一種油相中，溶解于水的，醇的，油-醇的或水-醇的一種溶液中。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任何一項(xiàng)的組合物，其特征在于其中的槐糖類脂物以游離羧酸形式(forme acide protonée)，或以其中至少有一部分形成了金屬鹽的羧酸形式，或以粗品形式(即與內(nèi)酯形式相混合的酸的形式和/或其中至少有一部形成了一價(jià)或二價(jià)的金屬鹽的羧酸形式)存在。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任何一項(xiàng)的組合物，其特征在于按組合物總重計(jì)算，槐糖類脂物(干品)的重量百分含量在0.01～30％之間，優(yōu)選1～15％。
9.根據(jù)權(quán)利要求1至8中任何一項(xiàng)的組合物，其特征在于這種組合物還至少包含一種由10～34個(gè)碳原子，優(yōu)選14～22個(gè)碳原子構(gòu)成的飽和或不飽和脂肪酸，其用量為干品槐糖類脂物重量的0.01～20％，優(yōu)選1～10％。
10.根據(jù)權(quán)利要求1～9中任何一項(xiàng)的美容用組合物，其特征在于這種組合物包括一種洗劑，特別是加香洗劑，一種洗發(fā)香波，一種浴用凝膠，一種液體肥皂，一種乳液，一種膏狀物，一種軟膏或一種固體油脂混合物。
11.根據(jù)權(quán)利要求1～9中任何一項(xiàng)的護(hù)膚用組合物，其特征在于這種組合物呈現(xiàn)一種適用于局部施用的形式。
12.根據(jù)權(quán)利要求1～10中任何一項(xiàng)的組合物的應(yīng)用，其特征在于這種組合物用作抗游離基劑和/或抗彈性蛋白酶劑。
13.根據(jù)權(quán)利要求1～10中任何一項(xiàng)及權(quán)利要求11的組合物的應(yīng)用，其特征在于這種組合物用作抗游離基劑，抗彈性蛋白酶劑和/或抗炎癥劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及的是一種美容用和/或護(hù)膚用組合物，其中至少含有一種粗品形式的，或酸式的，或與一價(jià)或二價(jià)鹽形式共用的槐糖類脂物，其重量百分濃度為0.01～30％，本發(fā)明還涉及到這樣的組合物的應(yīng)用。特別是這種組合物狀態(tài)可以是油包水型乳液，水包油型乳液，或是水包油型微乳。符合本發(fā)明的，以槐糖類脂物為基質(zhì)的組合物具有抗游離基，抗彈性蛋白酶和/或抗炎癥的性質(zhì)。
文檔編號(hào)A61K8/00GK1155240SQ9519449
公開日1997年7月23日 申請(qǐng)日期1995年6月12日 優(yōu)先權(quán)日1994年6月13日
發(fā)明者G·希利翁, R·馬沙爾, C·斯托爾茨, F·博爾澤克斯 申請(qǐng)人:法國(guó)石油公司, 索福爾有限公司