專利名稱：一種化合物在制備抗艾滋病藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及化工領(lǐng)域及醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及一種化合物在制備抗艾滋病藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
親環(huán)素Cycliphilins (CyPs)是普遍分布的細(xì)胞內(nèi)蛋白，在植物、細(xì)菌和哺乳 動(dòng)物中均存在，具有高度保守性，最初是作為環(huán)孢素A的細(xì)胞受體被發(fā)現(xiàn)的。環(huán) 孢素A (CyclosporinA， CsA)是從真菌代謝產(chǎn)物中分離得到的含11個(gè)氨基酸的 環(huán)狀多肽，作為免疫抑制劑藥物在臨床上常用于治療器官移植后所產(chǎn)生的排斥反 應(yīng)及自身免疫系統(tǒng)疾病。目前已發(fā)現(xiàn)和克隆的CyPs有130多種異構(gòu)體[Galat A，Metcalfe SM. Peptidyl proline cis-trans iso-merases. Prog Biophys Molec Biol, 1995; 63:67.]，它們構(gòu)成了 Cyclophilins家族。CyPs具有肽脯氨酰順反異構(gòu)酶(PPIase) 活性，催化蛋白質(zhì)折疊過程，尤其是富含脯氨酸的蛋白質(zhì)折疊，并且起著分子伴 侶作用[Ivery MT, Immunophilins:switched on protein binding domains Med Res Rev. 2000;20(6):452-484.]。與此同時(shí)，CyPs也廣泛參與相關(guān)的生物學(xué)過程如細(xì)胞凋亡 [Lee JP,Palfrey HC,Bindokas VP, et al. The role of immunophilins in mutant superoxide dismutas-l linked familial amyotrophic lateral sclerosis. Proc Natl Acad Sci USA. 1999; 96(6):3251-3256.]和細(xì)胞間信號(hào)傳導(dǎo)[Jin ZJ,Melaragno MQLiao DF,et al. Cyclophilin A is a secreted growth factor induced by oxidative stress. Circ Res. 2000; 87(外789-796,]等。
有許多研究顯示，CyPA能夠與人類免疫缺陷病毒(HIV-1)的Gag多聚蛋白 (Gagpolyprotein)結(jié)合。這種結(jié)合使得CypA能夠被特異地包裝到HIV-1病毒體 中，而不被包裝到其它逆轉(zhuǎn)錄病毒中[Franke EK， Yuan HE， Luban J. Specific incorporation of cyclophilin A into HIV-1 virions. Nature. 1994; 372(6504》359-362.]。' 在HIV-1型病毒自組裝過程中，CyPA作為特定的組成部分進(jìn)入病毒，在HIV-1 感染細(xì)胞的早期階段發(fā)揮作用[Braaten D, Franke EK, Luban J. Cyclophilin A is required for an early step in the life cycle of human immunodeficiency virus type 1 before the initiation of reverse transcription. J Virol. 1996; 70(6):3551-3560.]。 CypA與
Gag的互作位點(diǎn)目前己經(jīng)被確定在Gag的N端CA結(jié)構(gòu)域(該結(jié)構(gòu)域在HIV-l成 熟后經(jīng)過切割成為p24外殼蛋白)，CypA的脯氨酸異構(gòu)酶活性能夠協(xié)助病毒完成 感染細(xì)胞后的脫衣殼過程[Gamble TR， Vajdos FF, Yoo S, Worthylake DK, Houseweart M， Sundquist WI， Hill CP. Crystal structure of human cyclophilin A bound to the ammo-terminal domain of HIV-l capsid. Cell. 1996; 87(7): 1285-1294,]。使用 RNAi技術(shù)沉默CypA的表達(dá)[Bmaten D， Luban J. Cyclophilin A regulates HIV-l infectivity, as demonstrated by gene targeting in human T cells. EMBO J. 2001; 20(6): 1300-1309; Sokolskaja E, Sayah DM, Luban J. Target cell cyclophilin A modulates human immunodeficiency virus type 1 infectivity. J Virol. 2004; 78(23): 12800-12808.]，或者使用CsA及其衍生物[Sokolskaja E， Sayah DM, Luban J. Target cell cyclophilin A modulates human immunodeficiency virus type 1 infectivity. J Virol. 2004; 78(23): 12800-12808.; Bartz SR, Hohenwalter E, Hu MK， Rich DH, Malkovsky M. Inhibition of human immunodeficiency virus replication by nonimmunosuppressive analogs of cyclosporin A. Proc Natl Acad Sci USA. 1995; 92(12):5381-5385.; Steinkasserer A， Harrison R， Billich A, Hammerschmid F， Werner G Wolff B， Peichl P， Palfi Q Schnitzel W， Mlynar E, et al. Mode of action of SDZ NIM 811, a nonimmunosuppressive cyclosporin A analog with activity against human immunodeficiency virus type 1 (HIV-l): interference with early and late events in HIV-l replication. J Virol. 1995; 69(2):814-824.]來抑制CypA的活性，均能干擾 HIV-l病毒的復(fù)制。
然而，到目前為止，尚未有人報(bào)道具有抗HIV病毒的CypA抑制劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種化合 制備抗艾滋病藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明提供了結(jié)構(gòu)如<formula>formula see original document page 4</formula>
的分子在制備抗艾滋病藥物中的應(yīng)用；其中，R, = 3，4-二甲基-苯基，1,3-二
氫-苯并呋喃-5-基或者2，3-二氫-lH-茚-5-基；R2 =環(huán)丙基，環(huán)己基，t-丁基，環(huán)
戊烷基或者異丙基。本發(fā)明還包括對(duì)上述化合物進(jìn)行常規(guī)替代所得到的化合物，
本發(fā)明統(tǒng)稱為FD8。
本發(fā)明中，R!可以是2,3-二氫-lH-茚-5-基。
本發(fā)明中，R2可以為環(huán)戊垸基。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，R,是2，3-二氫-lH-茚-5-基，R2為環(huán)戊烷基，這樣本 發(fā)明的化合物就成為N-[4-(N-(5-[(2,3-z:氫-lH-茚-5-基氧)甲基]-2-呋喃基}乙酰肼 基) 苯基] 環(huán)戊烷甲酰胺 (即 N-[4-(N- ■{ 5-[(2,3-dihydro-1 H-inden-5-yloxy)methyl]-2-fUroyl} ethanehydrazonoyl) phenyl] cyclopentanecarboxamide ) ， 也 可 稱 為 S—IXZ^-dihydro-l/f-inden-S-yloxjOmethyU-A^-IXlZ).:!- (4-cyclopentanecarboxamide)-phenylethylidene]-2 —fiirohydrazide， 5-[(2,3-二氫-1//-茚-5-氧)甲基]-^-[(12)-1- (4-環(huán) 戊垸甲酰胺基)-苯基亞乙基]-2-呋喃酰肼，其分子量為524.62，結(jié)構(gòu)式為
鑒于抑制CypA活性的物質(zhì)可能干擾HIV-1病毒的復(fù)制，本發(fā)明針對(duì)CypA 的活性位點(diǎn)設(shè)計(jì)了若干小分子抑制劑。由于是針對(duì)細(xì)胞靶點(diǎn)設(shè)計(jì)的藥物，而細(xì)胞 靶點(diǎn)相對(duì)于病毒靶點(diǎn)來說突變速率相對(duì)較慢，因此不易形成耐藥性，適合AIDS 患者終身用藥的需求。
首先，本發(fā)明對(duì)CypA小分子抑制劑進(jìn)行了虛擬篩選。
Cyclophilin A (CypA, PPIA)基因在人類基因組數(shù)據(jù)庫中己經(jīng)被登錄，其錄入 號(hào)為NMJ)21130。在PDB蛋白結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫中，檢索到了人類CypA蛋白的X光 衍射晶體結(jié)構(gòu)(PDB代碼1CWA)。這個(gè)結(jié)構(gòu)是CypA與其天然抑制劑環(huán)孢菌素 A (CsA)的復(fù)合物晶體結(jié)構(gòu)。從這個(gè)結(jié)構(gòu)中，確定了CypA的活性位點(diǎn)，并且確 定了活性位點(diǎn)中，能夠被CsA所抑制的若干關(guān)鍵氨基酸位點(diǎn)。根據(jù)這些結(jié)構(gòu)信息， 本發(fā)明針對(duì)CypA活性位點(diǎn)，對(duì)若干小分子數(shù)據(jù)庫進(jìn)行了篩選。用于篩選的小分 子數(shù)據(jù)庫主要包括SPECS和CNPD,最后篩選到了本發(fā)明的FD8。整個(gè)計(jì)算過程 是在中科院上海藥物所64CPU-SGI ORIGN3800計(jì)算機(jī)和上海超算中心392CPU-神威I超級(jí)計(jì)算機(jī)上進(jìn)行的。
其次，本發(fā)明利用BIAcore分子互作儀驗(yàn)證虛擬篩選結(jié)果
BIAcore分子互作儀是基于表面等離子共振技術(shù)來實(shí)現(xiàn)跟蹤生物分子間的相 萬.作用，無需任何標(biāo)記物，因此最大限度的保證了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的真實(shí)性。實(shí)驗(yàn)時(shí)， 將目的生物分子(CypA蛋白)固定在傳感芯片表面，然后將小分子化合物溶于溶 劑并且流過芯片表面。監(jiān)測(cè)器能實(shí)時(shí)跟蹤檢測(cè)溶液中的分子與芯片表面目的生物 分子結(jié)合、解離整個(gè)過程的變化。通過BIAcore的結(jié)合數(shù)據(jù)，我們最終確定了 12 個(gè)能夠與CypA發(fā)生結(jié)合的小分子化合物，并且計(jì)算出了這些小分子化合物與 CypA結(jié)合的平衡一解離常數(shù)KD。本發(fā)明的N-[4-(N-(5-[(2，3-二氫-lH-茚-5-基氧) 甲基]-2-呋喃基}乙酰肼基)苯基]環(huán)戊烷甲酰胺其平衡解離常數(shù)KD (M)為 KD=8.42±0.13x10.6， Chi2=0.263;而CsA為KD=2.18±0,36xl()-7， Chi2=0.232。其中， On2是BIAcore統(tǒng)計(jì)軟件中用于檢測(cè)實(shí)驗(yàn)誤差的一個(gè)數(shù)據(jù)。
再次，本發(fā)明利用酶活實(shí)驗(yàn)證明小分子化合物對(duì)CypA酶活抑制的能力，從 而尋找出CypA的抑制劑。
測(cè)定CyP活性的方法很多，但以a -胰凝乳蛋白酶活性測(cè)定法(a -chymotrypsin-coupled enzymic assay)最常用。其原理是含脯氨酸的寡肽底物，如 N-琥珀酰-Ala-Ala-Pro-Phe對(duì)硝基苯胺(N-Succinyl-Ala-Ala-Pro-Phe p-nitroanilide) 在溶液中其順式、反式結(jié)構(gòu)處于平衡，CyP能催化該底物發(fā)生順反異構(gòu)作用，即 催化脯氨酸由順式變?yōu)榉词?；?dāng)其處于反式結(jié)構(gòu)時(shí)，C端p-nitroanilide被a-胰凝 乳蛋白酶裂解，釋放出色素基團(tuán)對(duì)硝基苯胺，在390nm連續(xù)測(cè)定吸光值的變化即 可得知CyP的PPIase活性。
我們以不加小分子抑制劑的反應(yīng)作為對(duì)照反應(yīng)，測(cè)定各個(gè)小分子配體在不同 濃度下對(duì)酶活反應(yīng)的抑制率，從而計(jì)算出各個(gè)小分子配體的ICso值。本發(fā)明的 N-[4—(N^5-[(2，3-二氫-lH-茚-5-基氧)甲基]-2-呋喃基}乙酰肼基)苯基]環(huán)戊烷甲 酰胺，其酶活抑制ICso值(pM)為18.67±1.74，例如，16.84、 18.86或者20.3。
最后，本發(fā)明還測(cè)定了 CypA小分子抑制劑對(duì)HIV—l病毒復(fù)制的影響
化合物抗HIV-1病毒增值測(cè)試簡(jiǎn)單的說，就是利用雙抗夾心法測(cè)定每個(gè)孔 內(nèi)p24蛋白產(chǎn)生的量。以空白對(duì)照孔的光吸收值為參照，計(jì)算各個(gè)化合物抑制
HIV-1病毒p24蛋白產(chǎn)生的IC5o值。結(jié)果N-[4-(N-(5-[(2，3-二氫-lH-茚-5-基氧)甲 基]-2-呋喃基}乙酰肼基)苯基]環(huán)戊垸甲酰胺抑制HIV-l病毒p24蛋白產(chǎn)生的IC50 值(ug/ml)為22,92±9.06。可見，N-[4-(N-(5-[(2,3-二氫-lH-茚-5-基氧)甲基]-2-呋喃基}乙酰肼基)苯基]環(huán)戊烷甲酰胺具有抑制HIV—1病毒復(fù)制的能力，可以 作為新的抗艾滋病藥物進(jìn)行開發(fā)。
本發(fā)明的小分子化合物可以采用各種常規(guī)的制備方法制備。例如，采用人工 化學(xué)合成的方法。
利用本發(fā)明小分子化合物，通過各種常規(guī)篩選方法，可篩選出與FD8發(fā)生相 5作用的物質(zhì)，如受體、抑制劑或拮抗劑等。
本發(fā)明及其抑制劑、拮抗劑等，當(dāng)在治療上進(jìn)行施用(給藥)時(shí)，可提供不同 的效果。通常，可將這些物質(zhì)配制于無毒的、惰性的和藥學(xué)上可接受的水性載體 介質(zhì)中，其中pH通常約為5-8，較佳地pH約為6-8，盡管pH值可隨被配制物 質(zhì)的性質(zhì)以及待治療的病癥而有所變化。配制好的藥物組合物可以通過常規(guī)途徑 進(jìn)行給藥，其中包括(但并不限于)肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下、皮內(nèi)、或局部給藥。
以本發(fā)明的人FD8為例，可以將其與合適的藥學(xué)上可接受的載體聯(lián)用。這 類藥物組合物含有治療有效量的化合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。這類載 體包括(但并不限于)鹽水、緩沖液、葡萄糖、水、甘油、乙醇、及其組合。藥 物制劑應(yīng)與給藥方式相匹配。本發(fā)明的人FD8可以被制成針劑形式，例如用生 理鹽水或含有葡萄糖和其他輔劑的水溶液通過常規(guī)方法進(jìn)行制備。諸如片劑和膠 囊之類的藥物組合物，可通過常規(guī)方法進(jìn)行制備。藥物組合物如針劑、溶液、片 劑和膠囊宜在無菌條件下制造。活性成分的給藥量是治療有效量，例如每天約1 微克/千克體重-約5毫克/千克體重。此外，本發(fā)明的FD8還可與其他治療劑一 起使用。
本發(fā)明的人FD8在制備抗艾滋病藥物中的應(yīng)用中，可以是針劑或者片劑。 當(dāng)本發(fā)明的人FD8多肽被用作藥物時(shí)，可將治療有效劑量的該多肽施用于 哺乳動(dòng)物，其中該治療有效劑量通常至少約10微克/千克體重，而且在大多數(shù)情 況下不超過約8毫克/千克體重，較佳地該劑量是約10微克/千克體重-約l毫克/千 克體重。當(dāng)然，具體劑量還應(yīng)考慮給藥途徑、病人健康狀況等因素，這些都是熟 練醫(yī)師技能范圍之內(nèi)的。
艾滋病(AIDS)是一種由艾滋病病毒，即人體免疫缺陷病毒(human
immunodeficiencyvirus，簡(jiǎn)稱HIV)侵入人體后破壞人體免疫功能，使人體發(fā)生多 種不可治愈的感染和腫瘤，最后導(dǎo)致被感染者死亡的一種嚴(yán)重傳染病。被稱為"當(dāng) 代瘟疫"和"超級(jí)癌癥"的艾滋病已引起世界衛(wèi)生組織(WHO)及各國政府的高度重 視，無論是人員和經(jīng)費(fèi)的投入均放在首位，我國已將其列入乙類法定傳染病，并 為國境衛(wèi)生監(jiān)測(cè)傳染病之一。然而，到目前為止，尚無可以治愈該病的有效藥物。 本發(fā)明的小分子化合物FD8具有抑制HIV—1病毒復(fù)制的能力，而且是針對(duì)細(xì)胞 靶點(diǎn)設(shè)計(jì)的藥物，不易形成耐藥性，適合AIDS患者終身用藥的需求。因此，本 發(fā)明的FD8可以作為新的抗艾滋病藥物進(jìn)行開發(fā)，為治療和治愈艾滋病提供了 -種新的途徑和手段。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1 CypA小分子抑制劑的虛擬篩選
Cyclophilin A (CypA, PPIA)基因在人類基因組數(shù)據(jù)庫中已經(jīng)被登錄，其錄入 號(hào)為NM—021130。在PDB蛋白結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫中，我們檢索到了人類CypA蛋白的X 光衍射晶體結(jié)構(gòu)(PDB代碼1CWA)。這個(gè)結(jié)構(gòu)是CypA與其天然抑制劑環(huán)孢菌 素A (CsA)的復(fù)合物晶體結(jié)構(gòu)。從這個(gè)結(jié)構(gòu)中，我們確定了CypA的活性位點(diǎn)， 并且確定了活性位點(diǎn)中，能夠被CsA所抑制的若干關(guān)鍵氨基酸位點(diǎn)。根據(jù)這些結(jié) 構(gòu)信息，我們與中國科學(xué)院上海藥物所合作，針對(duì)CypA活性位點(diǎn)，對(duì)若干小分 子數(shù)據(jù)庫進(jìn)行了篩選。用于篩選的小分子數(shù)據(jù)庫主要包括SPECS和CNPD。最后 篩選到了本發(fā)明的FD8。整個(gè)計(jì)算過程是在中科院上海藥物所64CPU-SGI ORIGN3800計(jì)算機(jī)和上海超算中心392CPU-神威I超級(jí)計(jì)算機(jī)上進(jìn)行的。
實(shí)施例2利用BIAcore分子互作儀驗(yàn)證虛擬篩選結(jié)果
BlAcore分子互作儀是基于表面等離子共振技術(shù)來實(shí)現(xiàn)跟蹤生物分子間的相 互作用，無需任何標(biāo)記物，因此最大限度的保證了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的真實(shí)性。實(shí)驗(yàn)時(shí)， 將目的生物分子(CypA蛋白)固定在傳感芯片表面，然后將小分子化合物溶于溶 劑并且流過芯片表面。監(jiān)測(cè)器能實(shí)時(shí)跟蹤檢測(cè)溶液中的分子與芯片表面目的生物 分子結(jié)合、解離整個(gè)過程的變化。通過BIAcore的結(jié)合數(shù)據(jù)，我們最終確定了 12 個(gè)能夠與CypA發(fā)生結(jié)合的小分子化合物，并且計(jì)算出了這些小分子化合物與 CypA結(jié)合的平衡一解離常數(shù)KD。本發(fā)明的本發(fā)明的^[4-(^{5-[(2,3-二氫-111-茚-5-基氧)甲基]-2-呋喃基}乙酰肼基)苯基]環(huán)戊烷甲酰胺其平衡解離常數(shù)KD
(M)為KD=8.42±0.13xl(T6, Chi2=0.263。其中，Chi2是BIAcore統(tǒng)計(jì)軟件中用于 檢測(cè)實(shí)驗(yàn)誤差的一個(gè)數(shù)據(jù)。
實(shí)施例3利用酶活實(shí)驗(yàn)證明小分子化合物對(duì)CypA酶活抑制的能力 測(cè)定CyP活性的方法很多，但以a -胰凝乳蛋白酶活性測(cè)定法(a -chymotrypsin-coupled enzymic assay)最常用。
我們以不加小分子抑制劑的反應(yīng)作為對(duì)照反應(yīng)，測(cè)定各個(gè)小分子配體在不 同濃度下對(duì)酶活反應(yīng)的抑制率，從而計(jì)算出各個(gè)小分子配體的IC50值。本發(fā)明的 N-[4-(N-(5-[(2,3-:i氫-lH-茚-5-基氧)甲基]-2-呋喃基}乙酰肼基)苯基]環(huán)戊烷 甲酰胺(CHEMCATS Order Number: AK-968/15604391 )。其酶活抑制IC50值 (,)為18.67土1.74，例如，16.84、 18.86或者20.3。
實(shí)施例4化合物抗HIV-1病毒增值測(cè)試
MT-2細(xì)胞種于96孔板中，每孔104個(gè)。培養(yǎng)基為含10%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基。HIV-1病毒以100個(gè)50%組織感染當(dāng)量來感染細(xì)胞，同時(shí)加入不同 濃度梯度的化合物培養(yǎng)過夜(以不加化合物的孔為空白對(duì)照)。次日，更換不含小 分子化合物的新鮮培養(yǎng)基。第四天，取100uL培養(yǎng)液上清，加入5%體積的Triton 一X100處理后得到病毒裂解液，然后用ELISA方法測(cè)定p24蛋白含量(p24是 HIV-1的外殼蛋白，可以作為衡量病毒粒子數(shù)量的指標(biāo))。簡(jiǎn)單的說，就是利用雙 抗夾心法測(cè)定每個(gè)孔內(nèi)p24蛋白產(chǎn)生的量。將抗HIV免疫球蛋白包板過夜(pH 9.6 碳酸緩沖液，4°C)，然后加入含4X脫脂奶粉的PBS封閉；加入100uL病毒裂解 液后于37°C孵育1個(gè)小時(shí)，用預(yù)冷PBS沖洗若干次；加入辣根過氧化物酶標(biāo)記 的抗p24單克隆抗體，用TMB顯色一刻鐘；然后加入IN的硫酸溶液終止反應(yīng)， 在酶標(biāo)儀上讀取450nm時(shí)的光吸收值。以空白對(duì)照孔的光吸收值為參照，計(jì)算各 個(gè)化合物抑制HIV-1病毒p24蛋白產(chǎn)生的IC50值。
結(jié)果N-[4-(N-(5-[(2,3-二氫-lH-茚-5-基氧)甲基]-2-呋喃基}乙酰肼基)苯 基]環(huán)戊烷甲酰胺抑制HIV-1病毒p24蛋白產(chǎn)生的IC50值如下(ug/ml): FD8 =22.92±9.06。
權(quán)利要求
1.一種結(jié)構(gòu)如的分子的應(yīng)用，其特征是在制備抗艾滋病藥物中的應(yīng)用；其中，R1＝3，4-二甲基-苯基，1，3-二氫-苯并呋喃-5-基或者2，3-二氫-1H-茚-5-基；R2＝環(huán)丙基，環(huán)己基，t-丁基，環(huán)戊烷基或者異丙基。
2. 如權(quán)利要求l所述的應(yīng)用，其特征在于，R,為2，3-二氫-1H-茚-5-基。
3. 如權(quán)利要求l所述的應(yīng)用，其特征在于，R2為環(huán)戊垸基。
4. 如權(quán)利要求l所述的應(yīng)用，其特征在于，該抗艾滋病藥物為針劑或者片劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及化工領(lǐng)域，涉及一種具有抗HIV活性的小分子化合物，其制備方法及應(yīng)用。CyPA能夠與人類免疫缺陷病毒(HIV-1)的Gag多聚蛋白結(jié)合。使用RNAi技術(shù)沉默CypA或者抑制CypA的活性，均能干擾HIV-1病毒的復(fù)制。本發(fā)明的小分子化合物是CyPA抑制劑，具有抗HIV-1病毒的功能，而且本發(fā)明的小分子化合物是針對(duì)細(xì)胞靶點(diǎn)設(shè)計(jì)的，不易形成耐藥性，適合AIDS患者終身用藥的需求。因此，本發(fā)明的小分子化合物可以作為新的抗艾滋病藥物進(jìn)行開發(fā)，為治療和治愈艾滋病提供了一種新的途徑和手段。
文檔編號(hào)A61P31/00GK101108177SQ200610029170
公開日2008年1月23日 申請(qǐng)日期2006年7月20日 優(yōu)先權(quán)日2006年7月20日
發(fā)明者龍 余, 唐麗莎, 蔣華良, 趙雪梅, 帥 陳 申請(qǐng)人:復(fù)旦大學(xué)