技術(shù)特征：

1.一種復(fù)合微生物菌肥，其特征在于，制備該復(fù)合微生物菌肥的原料按重量份為：渾圓鏈霉菌粉20-60份， 環(huán)狀芽孢桿菌與崛越氏芽孢桿菌混合發(fā)酵菌粉20-60份， 多孢木霉菌粉20-40份，巴氏梭菌菌粉20-40份，氨基酸原粉10-20份，黃腐酸鉀10-20份，棉粕粉10-20份。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種復(fù)合微生物菌肥的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

、渾圓鏈霉菌粉的制備

取出渾圓鏈霉菌菌種保藏管，用高氏一號固體培養(yǎng)基劃平板進行復(fù)蘇，30℃培養(yǎng)7天，在平板下挑取單個菌落劃線接種裝有150毫升高氏一號固體培養(yǎng)基的茄子瓶中，在培養(yǎng)箱中30℃培養(yǎng)6-8天，待菌苔長滿茄子瓶，產(chǎn)生大量孢子粉即可用500毫升的無菌生理鹽水洗脫，調(diào)節(jié)孢子濃度為0.1億cfu/ml，即為渾圓鏈霉菌種子液；

二級種子擴培：將上述制備的渾圓鏈霉菌種子液以1%的接種量接種至滅菌的渾圓鏈霉菌液體二級種子培養(yǎng)基上，500L的發(fā)酵罐裝液量為350L，通氣量為每分鐘液氣比為1：0.8，28-30℃培養(yǎng)36-48小時，待菌體含量達到80g/L時，即可作為渾圓鏈霉菌二級種子液；

發(fā)酵：將上述制備的渾圓鏈霉菌二級種子液以20%的接種量接種至滅菌的渾圓鏈霉菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基上，菌種與渾圓鏈霉菌固體培養(yǎng)基混合均勻后，將接好種的渾圓鏈霉菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基攤在發(fā)酵槽上，物料高度為5-8cm，控溫28-32℃，前兩天空氣濕度保持為60%-75%，過后空氣濕度保持為40%-50%，發(fā)酵4-6天，檢測其孢子含量不低于40億CFU/g，即可低溫風干，即得到渾圓鏈霉菌菌粉；

其中，所述的高氏一號固體培養(yǎng)基：硝酸鉀：1克，可溶性淀粉：20克，磷酸氫二鉀：0.5克，硫酸鎂：0.5克，氯化鈉：0.5克，硫酸亞鐵：0.01克，瓊脂：20克，蒸餾水補足1000ml ，PH7.2～7.4；

其中，所述的渾圓鏈霉菌二級液體種子培養(yǎng)基：棉粕粉2%，玉米粉2%，氯化鈉0.2%，碳酸鈣1%，硫酸鎂0.1%，PH7﹒2～7﹒4；

其中，所述的渾圓鏈霉菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基：啤糟渣80%，棉粕5%，玉米粉1%，石粉6%，麩皮8%，硫酸錳0.004%，磷酸氫二鉀0.1%，硫酸鎂0.05%，固體培養(yǎng)基含水量為40%-60%，各培養(yǎng)基滅菌的條件為：0.10-0.15MPa，121℃滅菌30分鐘；

、環(huán)狀芽孢桿菌與崛越氏芽孢桿菌混合發(fā)酵菌粉

崛越氏芽孢桿菌種子液的制備

取出崛越氏芽孢桿菌保藏管，用營養(yǎng)肉汁固體培養(yǎng)基分別劃平板進行復(fù)蘇，30℃培養(yǎng)48小時，在平板下挑取單個菌落接種至裝有營養(yǎng)肉汁固體培養(yǎng)基，在30℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時，用3000ml無菌水將三個茄子瓶中的菌苔洗脫，接種至裝有300L液體種子培養(yǎng)基的500L發(fā)酵罐中，開攪拌120r/min，前10小時通氣量為200L/min，10小時后通氣量為320L/min ，30℃培養(yǎng)16-24小時，待總菌含量不低于20億cfu/ml，即可作為崛越氏芽孢桿菌種子液；

環(huán)狀芽孢桿菌種子液的制備

取出環(huán)狀芽孢桿菌保藏管，用無氮固體培養(yǎng)基分別劃平板進行復(fù)蘇，30℃培養(yǎng)48小時，在平板下挑取單個菌落接種至裝有無氮固體培養(yǎng)基，在30℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時，用3000ml無菌水將三個茄子瓶中的菌苔洗脫，接種至裝有300L液體種子培養(yǎng)基的500L發(fā)酵罐中，開攪拌120r/min，前10小時通氣量為200L/min，10小時后通氣量為350L/min ，30℃培養(yǎng)16-24小時，待總菌含量不低于10億cfu/ml，即可作為環(huán)狀芽孢桿菌種子液；

發(fā)酵：將上述制備的崛越氏芽孢桿菌種子液與環(huán)狀芽孢桿菌種子液以1：3-1：1的比例混勻，然后以總接種量的10%-20%的接種量加至芽孢固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，混勻，在淺盤上發(fā)酵，堆料厚度為5-10cm，控制發(fā)酵溫度為30-40℃，發(fā)酵36-48小時，待芽孢含量不低于100億cfu/g，其中環(huán)狀芽孢桿菌的芽孢含量不低于40億cfu/g，即可曬干，待水分含量低于10%，即得到環(huán)狀芽孢桿菌與崛越氏芽孢桿菌混合發(fā)酵菌粉；

其中，所述無氮固體培養(yǎng)基：蔗糖5g，磷酸氫二鉀0.2 g，硫酸鎂0.2 g，氯化鈉0.2 g，硫酸鈣0.1 g，碳酸鈣5g，瓊脂20 g，水1000mL，pH7.2；

其中，所述液體種子培養(yǎng)基：糖蜜35 g/L， 豆粕粉20 g/L，硫酸鎂0.6g/L，硫酸錳0.5 g/L，磷酸二氫鉀0.3 g/L，碳酸鈣5.0 g/L，pH7.0；

其中，所述的芽孢固體發(fā)酵培養(yǎng)基：甘蔗渣57%，麩皮35%，棉粕5%，石粉1%，粗玉米皮2%，尿素0.4%，磷酸氫二鉀0.4%，硫酸鎂0.05%，培養(yǎng)基含水量50%-60%；各培養(yǎng)基滅菌的條件為：0.10-0.15MPa，121℃滅菌30分鐘；

、多孢木霉菌粉的制備

多孢木霉種子液的制備：取出多孢木霉菌菌種保藏管，用PDA固體培養(yǎng)基劃平板進行復(fù)蘇，30℃培養(yǎng)6天，在平板下挑取單個菌落劃線接種裝有150毫升PDA固體培養(yǎng)基的茄子瓶中，在培養(yǎng)箱中30℃培養(yǎng)4-6天，待菌苔長滿茄子瓶，產(chǎn)生大量孢子即可用500毫升的無菌生理鹽水洗脫，調(diào)節(jié)孢子濃度為0.1億cfu/ml，即為多孢木霉種子液；

發(fā)酵：將上述制備的多孢木霉種子液以3%的接種量接種至滅菌的多孢木霉固體發(fā)酵培養(yǎng)基上，菌種與多孢木霉固體培養(yǎng)基混合均勻后，將接好種的多孢木霉固體發(fā)酵培養(yǎng)基攤在發(fā)酵槽上，物料高度為5-10cm，控溫28-32℃，濕度保持為60%-75%，發(fā)酵4-6天，檢測其總孢子含量不低于30億CFU/g，即可低溫風干，即得到多孢木霉菌粉；

其中，所述的PDA固體培養(yǎng)基：土豆200g，蔗糖20g，水1000mL，瓊脂20g；

其中，所述的多孢木霉固體發(fā)酵培養(yǎng)基：麩皮85%，芝麻渣粕2%，玉米芯5%，石粉4%，粗玉米皮2%，尿素0.4%，磷酸氫二鉀0.4%，硫酸鎂0.05%，培養(yǎng)基含水量50%-60%；各培養(yǎng)基滅菌的條件為：0.10-0.15MPa，121℃滅菌30分鐘；

、巴氏梭菌菌粉的制備

取-80℃甘油管保藏的菌種1mL接種于裝有999mLRCM培養(yǎng)基的厭氧瓶中，37℃條件下靜態(tài)厭氧活化64h，將活化好的菌種按1%(v/v)的接種量轉(zhuǎn)接到滅過菌的99L巴氏梭菌發(fā)酵培養(yǎng)基中，37℃條件下靜態(tài)厭氧培養(yǎng)64h~126h，芽孢含量超過30億CFU/ml，即可加入輕質(zhì)碳酸鈣，噴霧干燥，調(diào)節(jié)巴氏梭菌芽孢含量30億CFU/g，即為巴氏梭菌菌粉；

其中，所述的RCM培養(yǎng)基：胰蛋白陳10g/L，牛肉膏10g，酵母膏10g/L，葡萄糖5g/L，氯化鈉5g/L，可溶性淀粉1g/L，半胱氨酸鹽酸鹽0.5 g /L，醋酸鈉3g/L，pH7.0，121℃滅菌20min，

其中，所述的巴氏梭菌發(fā)酵培養(yǎng)基：:酵母膏20g/L，牛肉膏10g/L，KH2PO4 2g/L硫酸鎂1g/L，半胱氨酸鹽酸鹽1g/L，NaHCO3 1g/L，CaCO3 1g/L，葡萄糖20g/L， PH7.0，121℃滅菌20min；

、將上述步驟中的渾圓鏈霉菌粉20-60份， 環(huán)狀芽孢桿菌Bacillus circulans與崛越氏芽孢桿菌Bacillus horikoshii 混合發(fā)酵菌粉20-60份， 多孢木霉菌粉20-40份，巴氏梭菌菌粉20-40份，氨基酸原粉10-20份，黃腐酸鉀10-20份，棉粕粉10-20份混勻，檢測總菌含量不低于30億CFU/ g，包裝即為復(fù)合微生物菌肥。