注：亞麻籽由脫殼機(jī)進(jìn)行脫殼進(jìn)而獲得亞麻籽殼；亞麻籽殼、木肩、麩皮的含水量均彡5 % (重量%)。
[0077]②、將基料中除了葡萄糖以外的成分進(jìn)行均勻混合，得混合料；
[0078]將葡萄糖溶于水后與混合料攪拌均勻后進(jìn)行裝袋，每袋重約600g左右，然后于121°C、1. I個(gè)大氣壓高壓滅菌30min，得以亞麻籽殼為主要原料的菌菇培養(yǎng)基質(zhì)（簡(jiǎn)稱：菌菇培養(yǎng)基質(zhì)）。
[0079]水與基料的重量之和稱為總重，水占總重的60% (即，控制含水量為60% )。
[0080](2)菌菇栽培：
[0081]于無(wú)菌條件下，將培養(yǎng)基（菌菇培養(yǎng)基質(zhì)）降溫至室溫25°C接種菌菇，接種量為5% ;接著依次進(jìn)行以下階段的栽培：
[0082]先將接種菌菇后的培養(yǎng)基于25°C、相對(duì)濕度60%條件下培養(yǎng)25天，此為菌絲生長(zhǎng)階段；
[0083]然后于10°C、相對(duì)濕度90%條件下培養(yǎng)7天，此為催蕾階段；
[0084]再于4%°C、相對(duì)濕度80%條件下培養(yǎng)7天，此為生長(zhǎng)抑制階段；
[0085]最后在8%°C、相對(duì)濕度80%條件下培養(yǎng)直至菌菇成熟，此為出菇階段；當(dāng)菌菇成熟時(shí)進(jìn)行采收（備注說(shuō)明：視菌菇成熟程度進(jìn)行采收，此為常規(guī)技術(shù)，例如金針菇的出菇階段一般為15天，一般收3茬燕)。
[0086]在本發(fā)明中，菌菇為金針菇（當(dāng)然，也可為平菇以及草菇等）。
[0087](3)采集菌菇的不同生長(zhǎng)階段結(jié)束后所得的培養(yǎng)基作為提取亞麻籽殼降解產(chǎn)物的培養(yǎng)料；
[0088]所述菌菇的不同生長(zhǎng)階段是指以下任意一種：
[0089]菌菇生長(zhǎng)抑制階段（S卩，為菌絲長(zhǎng)滿時(shí)含亞麻籽殼的培養(yǎng)基質(zhì)）、出菇階段（S卩，為菌菇采收后的含亞麻籽殼培養(yǎng)基質(zhì)）；
[0090]備注說(shuō)明：以未接種菌菇前的以亞麻籽殼為主要原料的菌菇培養(yǎng)基質(zhì)作為對(duì)比。
[0091]S卩，此步驟為：
[0092]亞麻籽殼分解階段獲取：以菌菇不同生長(zhǎng)階段為參考，獲取亞麻籽殼分解培養(yǎng)基。選擇的生長(zhǎng)階段分別為：未接種菌菇前含亞麻籽殼培養(yǎng)基（即亞麻籽殼以及木肩等按一定配比配成的培養(yǎng)基）、菌絲長(zhǎng)滿時(shí)含亞麻籽殼的培養(yǎng)基質(zhì)（即菌菇生長(zhǎng)抑制階段）以及菌菇采收后含亞麻籽殼培養(yǎng)基質(zhì)。分別以上述培養(yǎng)基質(zhì)作為培養(yǎng)料。
[0093](4)亞麻籽殼中活性成分提?。?br>[0094]取步驟2)所得的培養(yǎng)料，烘干（60°C，2h)后用攪拌機(jī)將其粉碎（能過(guò)100目篩)。準(zhǔn)確稱取粉碎后培養(yǎng)料，加入10倍量（即，lg/10ml的料液比)的80%乙醇提取，超聲（40KHz) 15min，然后在40°C熱回流提取4h，如此循環(huán)提取兩次。每次提取后以3000r/min離心lOmin，離心結(jié)束后取其上清液，將兩次提取離心后的上清液（提取液）合并，最后濃縮至原體積的1/10，得亞麻籽殼活性成分提取物。
[0095](5)菌菇活性成分提取：
[0096]栽培所得的菌菇按照如下步驟進(jìn)行菌菇活性成分提?。?br>[0097]取菌菇（65°C烘干至恒重），于燒杯中按照l(shuí)g/20ml的比例加入/K，70°C水浴浸提
2.5h，紗布過(guò)濾，分別得上清和濾渣；
[0098]按75%乙醇：上清液=3:1的體積比，在上清中加入75%乙醇沉淀菌菇多糖，離心(8000r/minl5min離心)，離心所得的上清旋蒸濃縮定容，為菌燕水提取物；
[0099]按照Ig ：20ml的料液比，在濾渣中加入80%甲醇，于70°C水浴浸提2. 5h，紗布過(guò)濾，所得的濾液旋蒸濃縮定容，為菌菇80%甲醇提取物。
[0100](6)以HPLC法對(duì)活性成分進(jìn)行定量、定性分析：將提取物用0.45μπι醋酸纖維素膜進(jìn)行過(guò)膜，然后進(jìn)HPLC，以SDG為外標(biāo)對(duì)亞麻籽殼降解產(chǎn)物進(jìn)行定性、定量分析。
[0101](7)活性分析：一、亞麻籽殼降解產(chǎn)物對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制活性分析：在O. 05mol/L的磷酸緩沖液(PH = 6. 8) 250 μ I和50 μ I樣品溶液，加入O. 01656mol/L的PNPG、0. 5U/L AG各50 μ 1，搖勻后再37°C恒溫水浴中反應(yīng)20min，用I. OmoI/L碳酸鈉溶液100 μ I做終止反應(yīng)，將反應(yīng)液至于酶標(biāo)儀405nm波長(zhǎng)下測(cè)定在酶的作用下釋放出的PNP的量，用超純水代替酶液作空白對(duì)照。每個(gè)樣品同一濃度下作3個(gè)平行試驗(yàn)，取其平均值。二、菌燕活性成分總抗氧化能力測(cè)定:采用FRAP法測(cè)定。
[0102]實(shí)施例2:—種由菌菇降解亞麻木酚素從而提高生物活性的方法，
[0103]將實(shí)施例1的步驟(I)中的培養(yǎng)基的配方改成按比例為:亞麻籽殼65%、木肩5%、麩皮28%、葡萄糖1%、石膏1%。
[0104]其余等同于實(shí)施例1。
[0105]實(shí)施例3:—種由菌菇降解亞麻木酚素從而提高生物活性的方法，
[0106]將實(shí)施例1的步驟(I)中的培養(yǎng)基的配方改成按比例為:亞麻籽殼43%、木肩45%、麩皮10%、葡萄糖1%、石膏1%。
[0107]其余等同于實(shí)施例1。
[0108]備注說(shuō)明:
[0109]I)、上述實(shí)施例3，分別對(duì)以下3種培養(yǎng)料所得的“亞麻籽殼活性成分提取物”分別進(jìn)tx檢測(cè):
[0110]未接種菌菇前含亞麻籽殼培養(yǎng)基(即亞麻籽殼以及木肩等按一定配比配成的培養(yǎng)基)、菌絲長(zhǎng)滿時(shí)含亞麻籽殼的培養(yǎng)基質(zhì)(即菌菇生長(zhǎng)抑制階段)以及菌菇采收后含亞麻籽殼培養(yǎng)基質(zhì)。
[0111]2)、上述實(shí)施例1和實(shí)施例2，僅僅以“菌菇采收后含亞麻籽殼培養(yǎng)基質(zhì)”作為培養(yǎng)料所得的“亞麻籽殼活性成分提取物”進(jìn)行檢測(cè)。
[0112]結(jié)果與比較具體如下:
[0113]圖1分別是實(shí)施例1、實(shí)施例2、實(shí)施例3(包括3個(gè)階段的含亞麻籽殼培養(yǎng)基質(zhì))所得亞麻籽殼提取物的RP-HPLC色譜圖。根據(jù)參考文獻(xiàn)，SDG標(biāo)準(zhǔn)品在18min左右出峰，圖1的各圖中在18min處均存在單體峰，根據(jù)質(zhì)譜定性分析，18min存在的單體峰確實(shí)為SDG，各圖中SDG在含量上存在一定的差異。根據(jù)實(shí)施例1、2以及實(shí)施例3-c，可以看出，不同的培養(yǎng)基配方所得到的降解產(chǎn)物大致相同，都存在12個(gè)峰，實(shí)施例3-c中的各峰分離程度相對(duì)較好且SDG含量相對(duì)較高。將實(shí)施例3-a、3-b以及3_c進(jìn)行對(duì)比，可見(jiàn)實(shí)施例3_a圖中亞麻籽殼提取物的色譜圖在保留時(shí)間為25-45min的范圍內(nèi)顯示了一個(gè)寬峰，根據(jù)參考文獻(xiàn)以及質(zhì)譜定性分析，存在異型的大分子木酚素，其大部分未被降解成小分子化合物及單體。由實(shí)施例3-a、3-b以及實(shí)施例3-c可見(jiàn)，寬峰逐漸消失，在保留時(shí)間為5-30min的范圍內(nèi)，實(shí)施例3-b上存在10個(gè)峰，實(shí)施例3-c上存在12個(gè)峰，且實(shí)施例3-c上峰型較好，基本不存在拖尾峰，說(shuō)明物質(zhì)的分離程度較好，降解程度相對(duì)高。鑒于以上分析，基本可以表明異型的大分子木酚素被菌菇降解成小分子化合物或者單體，并且實(shí)施例3-c的降解程度高于其他實(shí)施例。
[0114]圖2為實(shí)施例1、2以及實(shí)施例3-a、3-b、3_c所得的含亞麻籽殼培養(yǎng)基質(zhì)提取物抑制α-葡萄糖苷酶活性的IC50值的結(jié)果圖。從圖中可以看出，隨著降解程度的加深，亞麻木酚素降解產(chǎn)物對(duì)α-葡萄糖苷酶活性抑制率升高，由此可見(jiàn)，經(jīng)降解后的亞麻籽殼木酚素具有更尚的降血糖活性。
[0115]圖3分別是對(duì)照金針菇水提取物、甲醇提取物以及實(shí)施例1、實(shí)施例2、實(shí)施例3亞麻籽殼培養(yǎng)金針菇水提取物和甲醇提取物的HPLC色譜圖。由色譜圖可看出，亞麻籽殼培養(yǎng)的金針菇與對(duì)照金針菇的色譜峰存在一定的差異。<