專利名稱：水溶性唑化合物的改善方法
相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用本申請(qǐng)要求美國臨時(shí)申請(qǐng)60/252,001(2000年11月20日提交)的優(yōu)先權(quán)。
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及一種用于制備某些水溶性唑化合物的改善方法，所述唑化合物可用于治療嚴(yán)重的系統(tǒng)真菌感染。更具體地說，本發(fā)明涉及一種用于制備具有以下通式的水溶性前藥及其藥物可接受的鹽的改善方法 其中A是含仲羥基或叔羥基類型的三唑抗真菌化合物的非羥基部分，R和R1各自獨(dú)立地是氫或(C1-C6)烷基。
現(xiàn)有技術(shù)說明三唑抗真菌化合物在現(xiàn)有技術(shù)中為大家所熟知。在若干已知類別中，一種特別有效的種類含叔羥基。例如，美國專利5,648,372公開了(2R，3R)-3-[4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基]-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-丁-2-醇具有抗真菌活性。
這類化合物的功用受到它們的低水溶性的限制。例如，上述三唑化合物在pH值為6.8的水中的溶解度為0.0006mg/mL。這嚴(yán)重妨礙研制適合的非經(jīng)腸道劑型。
歐洲專利申請(qǐng)829478公開了一個(gè)解決這一問題的方法，其中通過將一個(gè)氨基酸連接到如下分子的唑部分上而增強(qiáng)唑抗真菌劑的水溶性 另一選擇，WO 97/28169公開了可將磷酸根部分直接連接到抗真菌化合物的叔羥基部分上，例如所述的化合物具有下式 美國專利5,707,977和WO 95/19983公開了具有以下通式的水溶性前藥 其中X是OP(O)(OH)2或易于水解的酯OC(O)RNR1R2。
WO 95/17407公開了以下通式的水溶性唑前藥 其中X是P(O)(OH)2、C(O)-(CHR1)n-OP(O)(OH)2或C(O)-(CHR1)n-(OCHR1CHR1)mOR2。
WO 96/38443公開了以下通式的水溶性唑前藥 美國專利5,883,097公開了水溶性氨基酸唑前藥，如甘氨酸酯 將膦酰氧基甲基部分引入含羥基的藥物中已經(jīng)被公開作為制備含羥基藥物的水溶性前藥的方法。
歐洲專利申請(qǐng)604910公開了以下通式的膦酰氧基甲基taxane衍生物 其中R1′、R2”、R3′、R6′、或R7′的至少一個(gè)是OCH2OP(O)(OH)2。
歐洲專利申請(qǐng)639577公開了式T-[OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2]n的膦酰氧基甲基taxane衍生物及其藥物可接受的鹽，其中T是在C13碳原子上帶有一個(gè)取代的3-氨基-2-羥基丙醇?；趸膖axane部分，n是1、2或3；m是0或1-6(包括端值)的整數(shù)。
WO 99/38873公開了二芳基1，3，4-氧雜二唑酮鉀通道開放劑(channel opener)的鄰膦酰氧基甲基醚前藥。
Golik，J.等人，Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters，1996，618371842公開了paclitaxel的新型水溶性前藥，如 我們的同事Yasutsugu Ueda、John D.Matiskella、Jerzy Golik和Thomas W.Hudyma在2000年1月20日提交的未決美國臨時(shí)專利申請(qǐng)60/177,169(其公開內(nèi)容全文在此引入作為參考)描述了一系列具有如下通式I的水溶性前藥及其藥物可接受的鹽， 其中A是含仲羥基或叔羥基類型的三唑抗真菌化合物的非羥基部分，R和R1各自獨(dú)立地是氫或(C1-C6)烷基。
通過以下反應(yīng)方案制備上述申請(qǐng)中的通式I化合物 在該方法中，A代表含叔羥基或仲羥基類型的三唑抗真菌化合物的非羥基部分，Pr代表常規(guī)的羥基保護(hù)基，如叔丁基、苯甲基或烯丙基，R和R1各自獨(dú)立地是氫或(C1-C6)烷基。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，R和R1兩個(gè)都是氫。
研究的抗真菌化合物II通過在適合的堿如氫化鈉存在下與氯化物中間體III進(jìn)行鄰?fù)榛磻?yīng)而變?yōu)榱姿狨ブ虚g體IV。然后酯中間體IV進(jìn)行常規(guī)的脫保護(hù)步驟以除去羥基保護(hù)基Pr，得到最終產(chǎn)物I，如果希望，可將其變?yōu)樗Ｍ乃幬锟山邮艿柠}。
通過使鄰?fù)榛襟E的產(chǎn)率大為增高，本發(fā)明大大地改進(jìn)了上述方法。
發(fā)明概述本發(fā)明提供了一種用于制備以上通式I的水溶性抗真菌前藥的改善方法 更具體地說，本發(fā)明涉及一種用于制備具有下式的水溶性前藥及其藥物可接受的鹽的方法 其中A是含仲羥基或叔羥基類型的三唑抗真菌化合物的非羥基部分，R和R1各自獨(dú)立地是氫或(C1-C6)烷基。該方法包括(a)使式A-OH的化合物(其中A是含仲羥基或叔羥基類型的三唑抗真菌化合物的非羥基部分)與下式化合物以及碘離子源在惰性有機(jī)溶劑中在堿存在下、在約25-50℃的溫度下進(jìn)行反應(yīng) 其中R和R1定義如上，Pr代表羥基保護(hù)基，形成下式的中間體 其中Pr、A、R和R1定義如上，和(b)通過傳統(tǒng)方法從中間體IV中除去保護(hù)基Pr，生成下式化合物 并且，如果希望，可將所述化合物I通過傳統(tǒng)方法轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌幬锟山邮艿柠}。
當(dāng)給藥于體內(nèi)時(shí)，通式I的化合物起“前藥”的作用，即它們?cè)趬A性磷酸酯酶存在下變?yōu)樯锘钚缘哪阁w唑。
詳細(xì)說明如這里所用，“(C1-C6)烷基”是指具有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈飽和脂肪族基，如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、正己基等。
如這里所用，術(shù)語“藥物可接受的鹽”用來包括帶有如銨的平衡離子的磷酸鹽、金屬鹽、帶有氨基酸的鹽、帶有胺的鹽以及帶有其它堿如哌啶或嗎啉的鹽。術(shù)語“藥物可接受的鹽”包括單鹽和二鹽。具體的實(shí)施方案包括銨、鈉、鈣、鎂、銫、鋰、鉀、鋇、鋅、鋁、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、甲胺、乙胺、叔丁胺、環(huán)己胺、N-甲基葡糖胺、乙二胺、甘氨酸、普魯卡因、benzathine、二乙醇胺、三乙醇胺、哌啶和嗎啉。對(duì)于最優(yōu)選的實(shí)施方案，(2R，3R)-3-[4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基]-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-[(二氫膦酰氧基)甲氧基]丁烷、叔丁胺和賴氨酸鹽是特別優(yōu)選的，因?yàn)榭梢垣@得它們的具有優(yōu)良溶解度和穩(wěn)定性的高純度單一多晶型晶體固體。
式I的化合物可以是溶劑化的或非溶劑化的。優(yōu)選的溶劑合物是水合物。
用本發(fā)明制備的最優(yōu)選的化合物是(2R，3R)-3-[4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基]-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-[(二氫膦酰氧基)甲氧基]丁烷或其藥物可接受的鹽。與母體化合物相比較，這種前藥顯示出大大改善的水溶性(pH值為7時(shí)＞10mg/mL，pH值為4.3時(shí)5-6mg/mL)，這使其可用于非經(jīng)腸胃給藥以及口服給藥。該化合物在溶液中也是穩(wěn)定的，可以結(jié)晶形態(tài)分離，并且易于在體內(nèi)變?yōu)槟阁w藥物。
在美國專利申請(qǐng)60/177,169(2000年1月20日提交)中，通過以下概括的反應(yīng)方案制備式I的化合物。在該方法中，A代表含叔羥基或仲羥基類型的三唑抗真菌化合物的非羥基部分，Pr代表常規(guī)的羥基保護(hù)基，如叔丁基、苯甲基或烯丙基，R和R1各自獨(dú)立地是氫或(C1-C6)烷基。最優(yōu)選，R和R1兩個(gè)都是氫。 詳述該方法，通過使研究的抗真菌母體化合物II在適合的堿存在下與氯化物中間體III發(fā)生鄰?fù)榛磻?yīng)而使其變?yōu)榱姿猁}中間體IV，所述堿如氫化鈉、氫化鉀、氨基鈉、叔丁醇鈉、叔丁醇鉀、二(三甲基甲硅烷基)氨基鈉、二(三甲基甲硅烷基)氨基鉀或其組合物，如氫化鈉加上二(三甲基甲硅烷基)氨基鈉。該反應(yīng)步驟可在惰性的有機(jī)溶劑中進(jìn)行，所述有機(jī)溶劑如四氫呋喃、甲基四氫呋喃、甲基叔丁基醚、乙醚或二甲基乙酰胺，并且該反應(yīng)在約0-50℃、更優(yōu)選約20-40℃、最優(yōu)選在約40℃的溫度下進(jìn)行。最優(yōu)選的堿是氫化鈉，最優(yōu)選的溶劑是四氫呋喃。最優(yōu)選的R和R1基團(tuán)是氫。
然后使酯中間體IV進(jìn)行常規(guī)的脫保護(hù)步驟，以除去羥基保護(hù)基Pr。用于這個(gè)步驟的試劑取決于所用的具體羥基保護(hù)基，但是對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員而言這是眾所周知的。最優(yōu)選的羥基保護(hù)基是叔丁基，它可以在適當(dāng)?shù)亩栊杂袡C(jī)溶劑中用三氟乙酸、鹽酸或甲酸除去。惰性溶劑可以是例如，二氯甲烷、二氯乙烷、甲苯或三氟甲基苯。在對(duì)優(yōu)選的二叔丁基酯進(jìn)行脫保護(hù)步驟的情況下，優(yōu)選在約0-40℃、最優(yōu)選約0-5℃的溫度下、在三氟乙酸的二氯甲烷溶的中進(jìn)行脫保護(hù)步驟。
然后可以通過常規(guī)方法如反相C-18柱色譜法或溶劑萃取法回收并提純最終產(chǎn)物I。
當(dāng)然，可將最終產(chǎn)物I通過傳統(tǒng)方法轉(zhuǎn)變?yōu)樗Ｍ乃幬锟山邮艿柠}，如上所述。
后來本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，使用提純的試劑III在上述反應(yīng)中使中間體IV的產(chǎn)率相當(dāng)?shù)?產(chǎn)率大約為10-35％)，這使產(chǎn)物I的總收率低。然而，當(dāng)向上述反應(yīng)的鄰?fù)榛襟E中加入碘離子源時(shí)，中間體IV的產(chǎn)率出人意料地升高至約90％，從而也顯著地提高了最終產(chǎn)物I的產(chǎn)率。據(jù)信，加入碘離子使下式的相應(yīng)的碘中間體III′就地形成 而且使用這一試劑使磷酸鹽中間體IV的產(chǎn)率大大提高。嘗試在上述反應(yīng)的第一個(gè)步驟中用預(yù)制的中間體III′直接替代中間體III，然而未成功，這是由于與氯化物中間體III相比碘試劑III′的穩(wěn)定性大為降低。一個(gè)成功的備選方法涉及在鄰?fù)榛襟E中將碘與氯化物中間體III在堿如NaH(也可以作為碘的還原劑)存在下一起使用。據(jù)信，碘被還原成碘離子，然后碘離子將氯化物中間體III就地轉(zhuǎn)變?yōu)榈庵虚g體III′，促進(jìn)該方法的這個(gè)步驟有利地進(jìn)行。以下說明性的例子顯示了使用單質(zhì)碘的鄰?fù)榛襟E，這是進(jìn)行這一反應(yīng)而得到中間體IV的優(yōu)選方法。
通過加入碘離子源或通過碘和試劑III在強(qiáng)堿存在下反應(yīng)而就地形成碘試劑III’，這大大提高了磷酸酯IV的產(chǎn)率，并使最終產(chǎn)物I的產(chǎn)率也大大提高。
碘離子源優(yōu)選是碘化鈉，但是也可以包括碘化鋰、碘化銫、碘化鎘、碘化鈷、碘化銅、碘化銣、碘化鋇、碘化鋅和碘化鈣。通常每當(dāng)量的式II(A-OH)母體化合物使用約2-3當(dāng)量的碘鹽。
當(dāng)在偶合步驟中使用單質(zhì)碘時(shí)，每當(dāng)量的母體化合物A-OH使用約0.1-1.0當(dāng)量的碘，優(yōu)選0.5當(dāng)量。
使用碘或碘離子時(shí)使用的堿和溶劑與上述使用試劑III本身時(shí)使用的那些相同。
應(yīng)理解，在用于上述反應(yīng)的取代基含某些反應(yīng)敏感性官能團(tuán)如氨基或羧酸根基團(tuán)(可能產(chǎn)生所不希望的副反應(yīng))的情況下，可以用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的常規(guī)保護(hù)基保護(hù)此類基團(tuán)。在例如ProtectiveGroups in Organic Synthesis，Theodora W.Greene(John Wiley& Sons，1991)中說明了適合的保護(hù)基和除去它們的方法。本發(fā)明的公開內(nèi)容和權(quán)利要求的范圍打算包括這種“保護(hù)的”中間體和最終產(chǎn)物。
應(yīng)理解，在式I范圍內(nèi)的某些產(chǎn)物可能具有引起光學(xué)異構(gòu)體形成的取代基。本發(fā)明打算在其范圍內(nèi)包括所有這類光學(xué)異構(gòu)體，以及其差向異構(gòu)體的混合物，即R-式或S-式或消旋式。
本發(fā)明的藥物活性化合物可以單獨(dú)使用或配制成藥物組合物來使用，所述藥物組合物除含活性的三唑成分外還含有藥物可接受的載體、助劑或稀釋劑?？梢酝ㄟ^多種方式將該化合物進(jìn)行給藥，例如口服給藥、局部給藥或非經(jīng)腸道給藥(靜脈注射或肌肉注射)。該藥物組合物可以是固態(tài)形式，如膠囊劑、片劑、粉末等，或者是液態(tài)形式，如溶液、懸浮體或乳液。注射用組合物可制備成安瓿中的或多劑量容器中的單位劑型，并且可以含添加劑如懸浮劑、穩(wěn)定劑和分散劑。該組合物可以是即用的形式，或者是在遞送時(shí)用適合的載體如無菌水進(jìn)行再組成的粉末形式。
另一選擇，本發(fā)明的化合物可以以栓劑或陰道栓的形式進(jìn)行給藥，或者它們可以洗液、溶液或乳膏的形式進(jìn)行局部施用。另外，可以將它們并入(以高達(dá)10％的濃度)由白蠟或軟、白石蠟堿與所需的穩(wěn)定劑和/或防腐劑一起組成的軟膏中。
本發(fā)明的化合物是有用的，因?yàn)樗鼈冊(cè)趧?dòng)物、特別是包括哺乳動(dòng)物(最特別是人類)體內(nèi)具有藥理學(xué)活性。具體地說，本發(fā)明的化合物可用于治療或預(yù)防局部真菌感染，包括由假絲酵母屬、毛癬菌屬、小孢子菌屬或表皮癬菌屬引起的那些感染。另外，它們可用于治療由白色假絲酵母所引起的粘膜感染。它們還可以用于治療由以下真菌引起的全身真菌感染例如白色假絲酵母、新型隱球酵母、黃曲霉、煙曲霉、球孢子菌屬、副球孢子菌屬、組織胞漿菌屬或芽生菌屬。
因此，根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)方面，提供了一種治療真菌感染的方法，該方法包括將治療有效量的化合物向受體，特別是哺乳動(dòng)物受體、最特別是人類患者進(jìn)行給藥。也提供了將本發(fā)明的化合物作為藥物的用途，以及用本發(fā)明的化合物制造治療真菌感染的藥物的用途。
給藥的劑量在很大程度上取決于所用的具體化合物、配制的具體組合物、給藥途徑、受體的屬性和狀況，以及治療的具體部位和有機(jī)體。然后，由醫(yī)生或獸醫(yī)來判斷對(duì)具體優(yōu)選的劑量和施用路徑的選擇。然而，通常將該化合物以約5mg/天-1.0g/天的量對(duì)哺乳動(dòng)物受體進(jìn)行非經(jīng)腸道給藥或口服給藥。這些劑量是平均情況的示范，可能在個(gè)別的情況中使用較高或較低的劑量，這類劑量在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。而且，可以一次性或分成多份將本發(fā)明的化合物進(jìn)行給藥。
通過測定最低抑菌濃度(MIC)對(duì)由本發(fā)明方法制備的化合物的抗真菌活性進(jìn)行體外評(píng)價(jià)。MIC是試驗(yàn)化合物能抑制試驗(yàn)微生物生長的濃度。在實(shí)踐中，將真菌菌株植入一系列加入了特定濃度的試驗(yàn)化合物的瓊脂平皿中，然后將每個(gè)平皿在37℃下培養(yǎng)48小時(shí)。檢查這些平皿，看是否存在真菌生長，記錄相關(guān)的濃度?？捎糜谠撛囼?yàn)的微生物包括白色念珠菌、煙曲霉、毛癬菌屬、小孢子菌屬、絮狀表皮癬菌、粗球孢子菌和光滑球擬酵母。應(yīng)該承認(rèn)，本發(fā)明的一些化合物作為前藥在體外試驗(yàn)中沒有活性。
通過將本發(fā)明制備的化合物按一系列劑量水平對(duì)已植入了真菌(例如白色念珠菌)菌株的老鼠進(jìn)行腹膜內(nèi)注射或靜脈注射或者口服給藥，來對(duì)本發(fā)明制備的化合物進(jìn)行體內(nèi)評(píng)價(jià)。在未經(jīng)治療老鼠組死后通過比較使用了不同劑量水平進(jìn)行治療的老鼠組的存活率來測定活性。記錄試驗(yàn)化合物對(duì)感染的致命效果能提供50％的保護(hù)時(shí)的劑量水平。
由本發(fā)明制備的化合物大大提高了母體三唑抗真菌化合物的溶解度，并且如人類肝臟S9實(shí)驗(yàn)所示，能釋放出生理活性母體化合物(即起前藥的作用)。
在本發(fā)明的方法中，優(yōu)選的式I化合物是其中R和R1都是氫的那些化合物。
在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，式I中的基團(tuán)A代表含叔羥基類型的三唑抗真菌化合物的非羥基部分。在優(yōu)選實(shí)施方案中，A可以是 其中R3代表被一個(gè)或多個(gè)(優(yōu)選1-3個(gè))鹵原子取代的苯基；R4代表H或CH3；R5代表H，或與R4一起代表＝CH2；R6代表5元或6元含氮的環(huán)，其可以任選被一個(gè)或多個(gè)選自以下基團(tuán)的基團(tuán)所取代鹵素；＝O；被一個(gè)或多個(gè)選自以下基團(tuán)的基團(tuán)所取代的苯基CN、(C6H4)-OCH2CF2CHF2和CH＝CH-(C6H4)-OCH2CF2CHF2；或者被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素和甲基吡唑基所取代的苯基。
R6可以代表的含氮雜環(huán)包括三唑基、嘧啶基和噻唑基。
如這里所用，術(shù)語“鹵素”包括氯代、溴代、氟代和碘代，優(yōu)選氯代或氟代，最優(yōu)選氟代。
A的具體例子包括但不局限于以下基團(tuán) 除了將本發(fā)明應(yīng)用于含叔醇的結(jié)構(gòu)外，也應(yīng)理解，這一發(fā)現(xiàn)可以用于含仲醇的抗真菌劑。含仲羥基類型的三唑抗真菌化合物的非羥基部分的一些例子包括但不局限于以下基團(tuán) 或 用以下實(shí)施例舉例說明本發(fā)明，但不是對(duì)本發(fā)明進(jìn)行限制。用于實(shí)施例的縮寫詞是本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的慣用縮寫詞。一些使用的縮寫詞如下h＝小時(shí)rt＝室溫mmol＝毫摩爾g＝克THF＝四氫呋喃mL＝毫升L＝升Et2O＝乙醚EtOAc＝乙酸乙酯TFA＝三氟乙酸CH2Cl2＝二氯甲烷CH3CN＝乙腈在下面的實(shí)施例中，所有溫度都是按攝氏度計(jì)。在電熱裝置上測定熔點(diǎn)，沒有校正。在Bruker-500、Bruker AM-300或Varian Gemini300光譜儀上記錄質(zhì)子核磁共振(1H NMR)光譜。除非另有陳述，所有光譜都是在CDC13或D2O中測定。化學(xué)位移相對(duì)于四甲基硅烷(TMS)或參考溶劑峰按δ單位(ppm)計(jì)，質(zhì)子間偶合常數(shù)按赫茲(Hz)計(jì)。如下命名分裂圖形s，單峰；d，雙峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰；br，寬峰；dd，雙二重峰；dt，雙三重峰；和app d，清晰可見的雙峰，等。在Kratos MS-50或Finnegan 4500設(shè)備上應(yīng)用直接化學(xué)電離(DCI，異丁烯)、快速原子撞擊(FAB)或電子離子噴射(ESI)來記錄質(zhì)譜。
在預(yù)涂好的硅膠板(60F-254)上進(jìn)行分析薄層色譜法(TLC)，使用紫外線燈、碘蒸氣和/或用甲醇磷鉬酸加熱染色來使之顯象。在稍高于大氣壓的壓力下，使用C18硅膠(Waters CorporationPreparative C18 125A)在玻璃柱中進(jìn)行反相色譜法。
說明性實(shí)施例實(shí)施例1(舉例說明現(xiàn)有的USSN 60/177,169的方法)(2R，3R)-3-[4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基]-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-[(二氫膦酰氧基)甲氧基]丁烷，鈉鹽 A.(2R，3R)-3-[4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基]-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-[(二叔丁基膦酰氧基)甲氧基]丁烷
在rt下，在氮?dú)夥罩袑浠c(0.80g，在油中60％，20mmol)加入(2R，3R)-3-[4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基]-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇II(8.74g，20mmol)的THF(40mL)溶液中。將得到的混合物在rt下攪拌0.25h，然后加入二叔丁基氯甲基磷酸鹽III(10.3g，40mmol)。在50℃下將反應(yīng)混合物加熱16小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物冷卻至rt，并且在減壓下濃縮。將殘余物溶于Et2O并用H2O和鹽水沖洗。用MgSO4干燥有機(jī)層并且在減壓下濃縮，得到17.0g膠狀粗制的標(biāo)題化合物IV。將小部分這種粗制的化合物在C-18上用反相色譜法提純。依次用30％的CH3CN/H2O、38％的CH3CN/H2O、45％的CH3CN/H2O和50％的CH3CN/H2O對(duì)柱子進(jìn)行洗脫。將含產(chǎn)物的部分在減壓下濃縮以便除去CH3CN。然后用Et2O萃取得到的水層。用鹽水沖洗Et2O層，干燥并在減壓下濃縮，得到白色泡沫狀的純化標(biāo)題化合物IV。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.35(s，1H)，7.98(d，2H，J＝9)，7.76(s，1H)，7.71(d，2H，J＝9)，7.63(s，1H)，7.36-7.27(m，1H)，6.86-6.78(m，2H)，5.53(dd，1H，J＝28,6)，5.53(dd，1H，J＝9,6)，5.17(d，1H，J＝15)，5.03(d，1H，J＝15)，4.01(q，1H，J＝7)，1.47(s，9H)，1.45(s，9H)，1.37(d，3H，J＝7).MS[ESI+(M+H)+]660.2obs.
B.(2R，3R)-3-[4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基]-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-[(二氫膦酰氧基)甲氧基]丁烷，鈉鹽 將粗制的(2R，3R)-3-[4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基]-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-[(二叔丁基膦酰氧基)甲氧基]丁烷IV(17g)溶于CH2Cl2(100mL)。向該溶液中加入TFA(50mL)，在rt下將反應(yīng)混合物攪拌0.25h。然后在減壓下濃縮反應(yīng)混合物。向殘余物中加入H2O(200mL)、Et2O(100mL)和EtOAc(100mL)。通過加入固體Na2CO3將水層的pH值調(diào)節(jié)為7.6，然后分離有機(jī)層和水層。然后在400g C-18(用H2O至5％CH3CN/H2O進(jìn)行洗脫)上用反相色譜法處理水層。將含產(chǎn)物的部分在減壓下濃縮，冷凍并凍干，得到1.5g白色無定形固體狀標(biāo)題化合物I。(1.5g，兩步產(chǎn)率12％)。1H NMR(500MHz，D2O)δ8.91(s，1H)，7.92(s，1H)，7.81(d，2H，J＝8)，7.80(s，1H)，7.77(d，2H，J＝8)，7.21(dd，1H，J＝15,9)，6.99(ddd，1H，J＝9,9,2)，6.91(ddd，1H，J＝9,9,2)，5.35(dd，1H，J＝6,6)，5.29(d，1H，J＝15)，5.21(dd，1H，J＝6,6)，5.19(d，1H，J＝15)，3.86(q，1H，J＝7)，和1.35(d，3H，J＝7)；MS [(ESI-(M-H)-548.1]；分析計(jì)算C23H18F2N5O5S1P1/Na2/3.5 H2OC，42.21H，3.85N，10.70Na，7.03.實(shí)測C，42.32H，3.83N，10.60Na，7.04.
二叔丁基氯甲基磷酸鹽，III可以由以下任何一個(gè)方法制備二叔丁基氯甲基磷酸鹽III。
方法1通過將二叔丁基磷酸鹽(用Zwierzak和Kluba，Tetrahedron，1971，27，3163的方法從二叔丁基亞磷酸鹽獲得)與一當(dāng)量碳酸銀在50％的含水乙腈中混合并凍干至干燥而制備二叔丁基磷酸銀(6.34g，20mmol)，將其與氯碘甲烷(35g，200mmol)一起放入苯中并在室溫下攪拌18h。過濾反應(yīng)混合物，將濾液在減壓下濃縮。在二氧化硅上用2∶1的己烷-乙酸乙酯洗脫對(duì)殘余物進(jìn)行色譜分離。將適當(dāng)?shù)牟糠譂饪s至干燥，獲得標(biāo)題化合物III(3.7g，產(chǎn)率71％)1H NMR(CDCl3)δ5.63(d，2H，J＝17)，1.51(s，18H)；MS(MH+＝259).
方法2將二叔丁基磷酸鹽[20g，94mmol(用Zwierzak和Kluba，Tetrahedron，1971，27，3163的方法從二叔丁基亞磷酸鹽獲得)]溶入甲醇四丁銨氫氧化物(47mL的1M溶液，47mmol)中，制得二叔丁基磷酸四丁銨。反應(yīng)混合物的溫度為23℃，pH值為4.33。通過在0.2h內(nèi)加入甲醇四丁銨氫氧化物(48mL的1M溶液，48mmol)將反應(yīng)混合物的pH值調(diào)節(jié)為6.5-7.0。在大約26℃下將反應(yīng)混合物攪拌0.5h，然后在減壓下、在低于40℃的浴溫下濃縮。通過加入甲苯(3×100mL)將粗制的殘余物共沸三次，然后在減壓下濃縮混合物。然后將粗制的殘余物在冷己烷(0℃)中研磨1h，然后通過過濾收集固體，用最少量的冷己烷沖洗并且干燥，得到白色固體狀的第一次獲得的二叔丁基磷酸四丁銨。(24.0g)。在減壓下濃縮母液，然后在冷己烷(20mL)中研磨1h。通過過濾收集固體，用最少量的冷己烷沖洗并且干燥，得到白色固體狀的第二次獲得的二叔丁基磷酸四丁銨。[(8.5g)，總計(jì)32.5g(77％)]。在rt下，在1.5h內(nèi)將二叔丁基磷酸四丁銨(218g，480mmol)的苯(200mL)溶液逐滴加入攪拌著的氯碘甲烷(800g，4535mmol)中。在rt下再攪拌反應(yīng)混合物1.5h，然后在減壓下濃縮。將油狀殘余物溶于Et2O，并過濾除去沉淀的白色固體。用飽和NaHCO3和H2O/鹽水(1/1)沖洗有機(jī)層。然后用硫酸鎂干燥有機(jī)層，過濾并將濾液在減壓下濃縮，得到棕紅色油(320g)。通過在硅膠(800g)上用20％的EtOAc/己烷、25％的EtOAc/己烷接著30％的EtOAc/己烷洗脫對(duì)該棕紅色油進(jìn)行色譜分離。將含產(chǎn)物的部分在減壓下濃縮，得到金色的油。用CH2Cl2(30mL)稀釋該油，并在減壓下濃縮，在真空下干燥，得到標(biāo)題化合物III(61.3g，產(chǎn)率49％)。1H NMR(Benzene-d6)δ5.20(2H，d，J＝15)，1.22(18H，s).
方法3在25℃下用二叔丁基磷酸四丁銨(250g，0.553mol)處理碘氯甲烷(974g，402mL，5.53mol)。在10分鐘內(nèi)逐份加入磷酸鹽。大約15分鐘后非均勻混合物變?yōu)槌吻宓姆奂t色溶液。攪拌混合物三小時(shí)，然后在＜30℃的浴溫下通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去碘氯甲烷。將殘余物用1L叔丁基甲醚吸收中并攪拌15分鐘，沉淀出碘化四丁銨副產(chǎn)品。通過真空過濾通過燒結(jié)玻璃漏斗來除去碘化四丁銨。通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮濾液至油狀，其含5∶1的III和不希望的二聚物雜質(zhì)的混合物。 用硅膠色譜法提純混合物，得到油狀純化合物III(產(chǎn)率～60％)。
實(shí)施例2(2R，3R)-3-[4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基]-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-[(二氫膦酰氧基)甲氧基]丁烷 A.將氫化鈉(2.89g，0.069mol，60％)和THF(50mL)裝入烘干的1L圓底燒瓶中，該圓底燒瓶裝備了機(jī)械攪拌器、氮?dú)馊肟谵D(zhuǎn)接器、裝有橡膠隔片的壓力平衡加料漏斗和溫度傳感器。在室溫下，在20分鐘內(nèi)向這一攪拌著的懸浮液中逐滴加入30mL THF中的(2R，3R)-3-[4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基]-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇II(10g，0.023mol)。攪拌45分鐘后，在10分鐘內(nèi)逐滴加入碘(2.99g，0.0115mol)的THF(30mL)溶液，隨后在15分鐘內(nèi)逐滴加入二叔丁基氯甲基磷酸鹽III(13.29g，0.035mol，純度約68％)。在大約41℃下將反應(yīng)混合物攪拌4h以完成反應(yīng)。用生產(chǎn)中的HPLC判斷反應(yīng)的完成。將反應(yīng)混合物倒入冰冷的水(100ml)中。分離水相并用乙酸乙酯(3×50ml)萃取，用10％的硫代亞硫酸鈉(50mL)、水(50ml)、鹽水(50mL)沖洗合并的有機(jī)萃取液，用硫酸鎂干燥并且在減壓下濃縮濾液，得到淺黃色油(22.8g，生產(chǎn)中的HPLC約97％純)。將粗品“原樣”用于步驟B。
B.將CH2Cl2(23mL)中的以上步驟A的產(chǎn)物(7.5g)裝入圓底燒瓶并冷卻至0℃，該圓底燒瓶裝備了磁性攪拌器、冷卻槽、pH值傳感器和N2進(jìn)口-出口。將三氟乙酸(8.8mL)慢慢加入這一攪拌著的溶液中，攪拌3小時(shí)以完成反應(yīng)。用生產(chǎn)中的HPLC判斷反應(yīng)的完成。將反應(yīng)混合物倒入冷的2N NaOH溶液(64ml)中。用乙酸叔丁酯(2×65mL)萃取反應(yīng)混合物，以除去所有有機(jī)雜質(zhì)。用活性炭(10g)處理含標(biāo)題產(chǎn)物的二鈉鹽的水層，通過硅藻土床進(jìn)行過濾。用1N HCl將清濾液酸化至pH值為2.5。游離酸即標(biāo)題產(chǎn)物被萃取入乙酸乙酯(2×50mL)。用水沖洗合并的有機(jī)層，用MgSO4干燥，過濾，并將濾液在減壓下濃縮，得到3.39g粗制的標(biāo)題產(chǎn)物。
實(shí)施例3(2R，3R)-3-[4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基]-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-[(二氫膦酰氧基)甲氧基]丁烷的二賴氨酸鹽將上述實(shí)施例2獲得的標(biāo)題產(chǎn)物溶于甲醇(75mL)并向其中加入L-賴氨酸(1.8g)，在60℃下加熱4.5h。通過硅藻土床過濾熱反應(yīng)混合物。濃縮濾液直到體積約為5mL，與乙醇(100mL)混合并加熱到65℃，結(jié)晶出二賴氨酸鹽。在布氏漏斗上收集該鹽并且在真空下干燥，得到3.71g米色的結(jié)晶固體。
實(shí)施例4(2R，3R)-3-[4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基]-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-[(二氫膦酰氧基)甲氧基]丁烷的叔丁胺鹽將實(shí)施例2所得標(biāo)題產(chǎn)物的溶液溶于50mL乙酸乙酯中，并在氮?dú)庀孪蚱渲屑尤胧宥“?5.3mL)。在40℃下將反應(yīng)混合物攪拌約1h以結(jié)晶出產(chǎn)物。在布氏漏斗上收集二叔丁胺鹽并且在真空下干燥，得到2.21g米色結(jié)晶固體狀標(biāo)題化合物。
權(quán)利要求
1.一種制備下式的水溶性前藥或其藥物可接受的鹽的方法 其中A是含仲羥基或叔羥基類型的三唑抗真菌化合物的非羥基部分，R和R1各自獨(dú)立地是氫或(C1-C6)烷基，該方法包括(a)使式A-OH的化合物，其中A是含仲羥基或叔羥基類型的三唑抗真菌化合物的非羥基部分，與下式化合物以及碘離子源在惰性有機(jī)溶劑中、在堿存在下、在約25-50℃的溫度下進(jìn)行反應(yīng) 其中R和R1定義如上，Pr代表羥基保護(hù)基，反應(yīng)形成下式的中間體 其中Pr、A、R和R1定義如上，和(b)通過傳統(tǒng)方法從中間體IV除去保護(hù)基Pr，生成下式化合物 并且，如果希望，可將所述化合物I通過傳統(tǒng)方法轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌幬锟山邮艿柠}。
2.權(quán)利要求1的方法，其中保護(hù)基Pr是叔丁基。
3.權(quán)利要求1的方法，其中用于步驟(a)的溶劑是四氫呋喃。
4.權(quán)利要求1的方法，其中通過I2與氫化鈉的反應(yīng)就地生成碘離子。
5.權(quán)利要求1的方法，其中用于步驟(a)的堿是氫化鈉。
6.權(quán)利要求1的方法，其中起始物質(zhì)A-OH是
全文摘要
提供了一種制備含仲羥基或叔羥基的三唑抗真菌化合物的水溶性前藥的改善方法。更具體地說，所述改善方法涉及具有通式(I)的水溶性三唑抗真菌化合物的制備，其中A是含仲羥基或叔羥基類型的三唑抗真菌化合物的非羥基部分，R和R
文檔編號(hào)C07D277/22GK1474817SQ01819166
公開日2004年2月11日 申請(qǐng)日期2001年10月18日 優(yōu)先權(quán)日2000年11月20日
發(fā)明者C·－P·陳, T·P·孔諾利, L·R·科拉, J·D·馬蒂斯克拉, R·H·米勒, Y·倫德里, D·T·佩特施, C -P 陳, 佩特施, 呂, 孔諾利, 科拉, 米勒, 馬蒂斯克拉 申請(qǐng)人:布里斯托爾-邁爾斯斯奎布公司