專利名稱：制備甲基鈷胺素的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種優(yōu)異的制備甲基鈷胺素的工業(yè)化方法。特別地，本發(fā)明還涉及一種新的不會(huì)生成具有惡臭的有害物質(zhì)且符合生態(tài)學(xué)要求的制備方法，以及在制備甲基鈷胺素(V)的過(guò)程中抑制這種具有惡臭的有害物質(zhì)生成的方法。
現(xiàn)有技術(shù)甲基鈷胺素是一種存在于血液和脊髓液中的輔酶型維生素B12。與其它B12同系物相比，其可更容易地遷移進(jìn)入神經(jīng)組織，并可用于預(yù)防、治療和改善糖尿病性神經(jīng)病變、多神經(jīng)炎以及其它周?chē)窠?jīng)病，尤其是麻木、疼痛和麻痹，也可用于由于缺乏維生素B12所導(dǎo)致的幼巨紅細(xì)胞貧血。
通常，按照以下制備方法制備甲基鈷胺素(1)使羥鈷胺素與二羧酸單甲酯在金屬粉末存在下反應(yīng)的方法(JP-A49-47899)；(2)使氰鈷胺素與草酸單甲酯在金屬粉末存在下于含水甲醇中反應(yīng)的方法(JP-A 50-41900)；(3)使羥鈷胺素與碘化甲基汞或甲基六氟硅酸銨反應(yīng)的方法(JP-A50-38120)；和(4)使氰鈷胺素與碘代甲烷在硼氫化鈉存在下反應(yīng)的方法(JP-A45-38059)。
但是，方法(1)和(2)中使用的二羧酸單甲酯如草酸單甲酯，不能從商業(yè)途徑獲得，必須在使用前制備并且不能用于大規(guī)模生產(chǎn)。此外，用作金屬粉末的鋅粉是一種重金屬，必須采取措施以保護(hù)環(huán)境并防止其污染產(chǎn)品，并且其不適于工業(yè)化應(yīng)用。
在方法(3)中所使用的碘化甲基汞是一種污染物，不能在工業(yè)上使用。此外，甲基六氟硅酸銨不能從商業(yè)途徑獲得，必須在使用前制備，因此不能在工業(yè)上使用。
相比之下，制備方法(4)在收率和產(chǎn)品純度方面都很優(yōu)異。但是，碘代甲烷的沸點(diǎn)很低(41℃至43℃)，因而不易操作。因此，該方法不足以作為用于大規(guī)模生產(chǎn)的工業(yè)方法。此外，從保護(hù)工作環(huán)境或自然環(huán)境的角度考慮，使用被列為特殊化學(xué)物質(zhì)并具有毒性如潛在致癌性的碘代甲烷對(duì)于保護(hù)工人的健康也是決不可取的。為了在使用碘代甲烷的方法中獲得高純度的甲基鈷胺素，通常需要進(jìn)行一次或多次柱層析純化步驟，從而在操作和生產(chǎn)成本方面帶來(lái)嚴(yán)重的問(wèn)題。此外，柱層析純化需要大量的有機(jī)溶劑并可產(chǎn)生大量的廢液。
根據(jù)以上所述，目前還沒(méi)有優(yōu)異的制備甲基鈷胺素的工業(yè)化方法，因此需要一種新的優(yōu)異的方法。
因此，本發(fā)明的目的是提供一種優(yōu)異的制備甲基鈷胺素的工業(yè)化方法，特別是制備甲基鈷胺素的新方法，所述方法不需要使用碘代甲烷和柱層析純化步驟，符合生態(tài)學(xué)的要求。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種新的不會(huì)引起具有惡臭的有害物質(zhì)生成且符合生態(tài)學(xué)要求的制備方法，以及在甲基鈷胺素(V)的制備過(guò)程中抑制具有惡臭的有害物質(zhì)生成的方法。

發(fā)明內(nèi)容
一方面，本發(fā)明提供了以下反應(yīng)式所表示的制備甲基鈷胺素的方法，其包括還原步驟和甲基化步驟。
還原步驟鈷胺素-CN或鈷胺素-OH→鈷胺素甲基化步驟鈷胺素→鈷胺素-CH3具體地講，本發(fā)明提供了制備甲基鈷胺素(V)的方法，其包括在還原劑(III)存在下將以下通式所表示的氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)還原、然后通過(guò)加入水溶性甲基化試劑(IV)將還原產(chǎn)物甲基化的步驟。
R2＝CN氰鈷胺素(I)R2＝OH羥鈷胺素(II)R3＝CH3甲基鈷胺素(V)本發(fā)明還提供了制備甲基鈷胺素(V)的方法，其包括在還原劑(III)存在下于水溶液或含水有機(jī)溶劑中將氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)還原、加入水溶性甲基化試劑(IV)將還原產(chǎn)物甲基化、然后將反應(yīng)產(chǎn)物以結(jié)晶或沉淀形式析出的步驟。
另一方面，本發(fā)明還提供了制備甲基鈷胺素(V)的方法，其包括在氰根離子清除劑和還原劑(III)存在下于水溶液或含水有機(jī)溶劑中將氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)還原、加入水溶性甲基化試劑(IV)將還原產(chǎn)物甲基化、然后將反應(yīng)產(chǎn)物以結(jié)晶或沉淀形式析出的步驟。
此外，本發(fā)明提供了在使用三甲基硫衍生物(VI)作為甲基化試劑制備甲基鈷胺素(V)的過(guò)程中抑制具有惡臭的甲硫醚生成的方法，其包括在還原劑(III)存在下將氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)還原、然后加入碘化三甲基氧化锍、溴化三甲基氧化锍和/或氯化三甲基氧化锍將還原產(chǎn)物甲基化的步驟。
根據(jù)本發(fā)明，將還原劑和水溶性甲基化試劑在不同的時(shí)間分別加入至反應(yīng)體系中。具體而言，在還原步驟中，將還原劑加入至反應(yīng)體系中從而使氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)轉(zhuǎn)化為還原產(chǎn)物。在還原步驟之后，將水溶性甲基化試劑加入至反應(yīng)體系中從而制得甲基鈷胺素。在還原步驟中，氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)是否被轉(zhuǎn)化為還原產(chǎn)物通常可以由氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)在分離分析中例如在高效液相色譜中是否消失來(lái)判別。由還原劑的作用而導(dǎo)致的氫的生成的停止，表明還原步驟已完成。
本發(fā)明中涉及的氰鈷胺素(I)、羥鈷胺素(II)和甲基鈷胺素(V)是已知的天然的化合物。
氰鈷胺素 (CAS登記號(hào)68-19-9)羥鈷胺素 (CAS登記號(hào)13422-51-0)甲基鈷胺素(CAS登記號(hào)13422-55-4)對(duì)用于本發(fā)明的水溶性甲基化試劑沒(méi)有具體的限制，只要其于室溫下在水中具有2％或更大的溶解度即可，其包括例如以下通式所表示的三甲基硫衍生物(VI)。在該通式中，X為鹵原子或甲氧基磺酰氧基；且n為0或1。
三甲基硫衍生物(VI)的例子包括但不限于以下化合物(1)碘化三甲基氧化锍(CAS登記號(hào)1774-47-6)(2)三甲基碘化锍(CAS登記號(hào)2181-42-2)(3)氯化三甲基氧化锍(CAS登記號(hào)5034-06-0)(4)三甲基氯化锍(CAS登記號(hào)3086-29-1)(5)溴化三甲基氧化锍(CAS登記號(hào)3084-53-5)(6)三甲基溴化锍(CAS登記號(hào)25596-24-1)(7)三甲基锍甲基硫酸鹽(CAS登記號(hào)2181-44-4)
所有這些化合物都是已知物質(zhì)。其中，碘化三甲基氧化锍、三甲基碘化锍、氯化三甲基氧化锍、溴化三甲基氧化锍和三甲基溴化锍均為以低成本可獲得的試劑或工業(yè)原料。三甲基氯化锍可根據(jù)B.Byrne等人在Tetrahedron Lett.，27，1233，1986中所述的方法容易地合成得到。
在三甲基硫衍生物(VI)中，溴化三甲基氧化锍、三甲基溴化锍、氯化三甲基氧化锍和三甲基氯化锍尤其可顯示在水中的高溶解度，并且具有使用較小的量就可以以高收率得到高純度的甲基鈷胺素的特點(diǎn)。
對(duì)三甲基硫衍生物(VI)的量沒(méi)有具體的限制，通常相對(duì)于氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)為1.0至5當(dāng)量、優(yōu)選1.1至4.5當(dāng)量、更優(yōu)選1.2至4當(dāng)量。
對(duì)用于本發(fā)明的還原劑(III)沒(méi)有具體的限制，只要其可用于氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)的合成即可，其包括例如硼氫化鈉、硼氫化鋰、NaBH3CN(氰基硼氫化鈉)和Red-Al(雙(2-甲氧基乙氧基)氫化鋁鈉)，其中優(yōu)選硼氫化鈉。
對(duì)還原劑(III)的量沒(méi)有具體的限制，通常相對(duì)于氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)為5至30當(dāng)量、優(yōu)選8至25當(dāng)量、更優(yōu)選10至20當(dāng)量。
本發(fā)明的特征之一是具有與柱層析分離純化的產(chǎn)品相當(dāng)或更高純度的甲基鈷胺素可以以高收率方便地制得，其中使用氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)，依次按順序逐步進(jìn)行還原步驟和隨后的甲基化步驟，必要時(shí)以結(jié)晶或沉淀物的形式將幾乎不溶于水的產(chǎn)品析出，并對(duì)所得物質(zhì)進(jìn)行分離和處理。在還原步驟中，氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)通常在還原劑(III)存在下于水溶液或含水有機(jī)溶劑中被還原。在甲基化步驟中，于還原步驟之后加入水溶性甲基化試劑(IV)從而將還原產(chǎn)物甲基化。
還原劑和水溶性甲基化試劑分別在不同的步驟中被加入到反應(yīng)體系中。更具體地講，在還原步驟中，加入還原劑以使氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)完全轉(zhuǎn)化為還原產(chǎn)物。還原步驟完成后，向反應(yīng)體系中加入水溶性甲基化試劑以生成甲基鈷胺素。
本發(fā)明的另一個(gè)重要特征是當(dāng)使用三甲基硫衍生物中的碘化三甲基氧化锍、溴化三甲基氧化锍和/或氯化三甲基氧化锍作為水溶性甲基化試劑時(shí)、依次按順序逐步進(jìn)行還原步驟和隨后的甲基化步驟，可以抑制甲硫醚的生成。在還原步驟中，氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)通常在還原劑(III)存在下于水溶液或含水有機(jī)溶劑中被還原。在甲基化步驟中，于還原步驟后加入水溶性甲基化試劑(IV)從而將還原產(chǎn)物甲基化。
甲硫醚是一種具有惡臭的有害物質(zhì)，且對(duì)工人和環(huán)境具有不良的作用。因此，根據(jù)刺激氣體管理法(the Offensive Odor Control Law)，應(yīng)對(duì)甲硫醚的排放進(jìn)行嚴(yán)格的控制。
當(dāng)作為水溶性甲基化試劑的三甲基硫衍生物與還原劑在反應(yīng)體系中共存時(shí)，三甲基硫衍生物可被還原從而生成可污染大氣環(huán)境的甲硫醚。根據(jù)本發(fā)明，首先用還原劑將氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)還原，并將其轉(zhuǎn)化為還原產(chǎn)物。在該步驟完成之后，加入作為水溶性甲基化試劑的三甲基硫衍生物中的碘化三甲基氧化锍、溴化三甲基氧化锍和/或氯化三甲基氧化锍，從而將還原產(chǎn)物甲基化。這樣，可以防止過(guò)度的還原過(guò)程，并可基本上完全抑制甲硫醚的生成。
當(dāng)使用三甲基碘化锍、三甲基溴化锍和/或三甲基氯化锍作為水溶性甲基化試劑時(shí)，通過(guò)依次按順序逐步進(jìn)行還原步驟，其中氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)通常在還原劑(III)存在下于水溶液或含水有機(jī)溶劑中被還原，隨后進(jìn)行甲基化步驟，其中加入水溶性甲基化試劑(IV)將還原產(chǎn)物充分甲基化，雖可生成甲硫醚，但其生成量小于“其中甲基化試劑和還原劑共存于反應(yīng)體系中的制備甲基鈷胺素的方法”中的生成量。當(dāng)甲基化試劑和還原劑共存于反應(yīng)體系中時(shí)，必須過(guò)量加入甲基化試劑以使反應(yīng)穩(wěn)定，從而生成與過(guò)量的甲基化試劑相對(duì)應(yīng)量的甲硫醚。相比之下，本發(fā)明的“通過(guò)分別依次進(jìn)行還原步驟和隨后的甲基化步驟”，沒(méi)有生成由過(guò)量的甲基化試劑所衍生的甲硫醚，從而減少了甲硫醚的生成量。
通常，在反應(yīng)中過(guò)程中生成的甲硫醚常常通過(guò)1)氧化劑如次氯酸鹽水溶液或2)有機(jī)溶劑如二甲基甲酰胺水溶液而被收集和除去。但是，技術(shù)1)為使用氧化劑的氧化反應(yīng)，當(dāng)廢氣中共存其它成分如氫氣和氰化氫時(shí)，作用繁雜，需要進(jìn)行復(fù)雜的控制。其還需要對(duì)用于收集廢氣的設(shè)施進(jìn)行復(fù)雜的安裝和管理。技術(shù)2)使生成的有機(jī)溶劑廢液的量增加，由此帶來(lái)環(huán)境問(wèn)題并增加了處理廢液所致的花費(fèi)。
相比之下，本發(fā)明的制備甲基鈷胺素的方法和抑制甲硫醚生成的方法本身可控制甲硫醚的生成，無(wú)需額外的設(shè)備和處理，是非常簡(jiǎn)便而有用的方法。
本發(fā)明的制備方法可以不使用或僅使用少量的金屬離子作為氰根離子清除劑而以高收率制備高純度的甲基鈷胺素，并且由于不會(huì)產(chǎn)生將難以過(guò)濾的金屬離子從體系中除去的問(wèn)題，所述方法顯示出極其優(yōu)異的效果。
當(dāng)使用碘代甲烷作為甲基化試劑時(shí)，通常將硫酸亞鐵作為氰根離子清除劑與碘代甲烷一起使用。這種情況下，硫酸亞鐵的量相對(duì)于氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)以重量計(jì)必須為30％或者更多。
然而，本發(fā)明可以以高收率制得高純度的甲基鈷胺素，是因?yàn)榧词共皇褂昧蛩醽嗚F作為氰根離子清除劑，甲基化反應(yīng)依然可以進(jìn)行。
當(dāng)使用少量的硫酸亞鐵作為氰根離子清除劑時(shí)，反應(yīng)可以以更高的速度進(jìn)行，并且即使通過(guò)與不使用硫酸亞鐵時(shí)同樣的后處理過(guò)程也可以以高收率制得高純度的甲基鈷胺素。同理，通過(guò)使用少量的氯化鈷，可使甲基化反應(yīng)以高選擇性進(jìn)行，從而抑制雜質(zhì)的生成并且也可以以高收率制得高純度的甲基鈷胺素。
可提及的用于本發(fā)明的氰根離子清除劑的例子包括金屬或金屬鹽如硫酸亞鐵、鐵粉、莫爾鹽、氯化亞鐵、氯化鈷、氯化鎳或氯化鋅。其中，特別優(yōu)選硫酸亞鐵和/或氯化鈷。這些金屬和金屬鹽中的每一種都可以單獨(dú)或組合使用。
氰根離子清除劑的用量可以很小且通常相對(duì)于氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)以重量計(jì)為1至30％、優(yōu)選1至10％。
對(duì)反應(yīng)溶劑的使用沒(méi)有具體的限制。若使用反應(yīng)溶劑，只要其對(duì)氰鈷胺素(I)、羥鈷胺素(II)、三甲基硫衍生物(VI)和甲基鈷胺素(V)呈惰性外，無(wú)其它具體的限制。反應(yīng)溶劑通常為水溶液或含水有機(jī)溶劑。有機(jī)溶劑優(yōu)選在水中可溶的溶劑，包括低級(jí)醇如甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇、異丁醇、仲丁醇或叔丁醇；酯類如甲酸甲酯、甲酸乙酯、乙酸甲酯、乙酸乙酯或乙酸異丙酯；酮類如丙酮、2-丁酮或3-甲基-2-丁酮；環(huán)醚類如THF或二氧雜環(huán)己烷；和乙腈、DMF、DMSO、吡啶以及這些有機(jī)溶劑的混合物。
對(duì)本發(fā)明中的還原步驟和甲基化步驟的反應(yīng)溫度沒(méi)有具體的限制，通常為0℃至90℃、優(yōu)選10℃至70℃、更優(yōu)選15℃至50℃。
本發(fā)明中的還原步驟和甲基化步驟的反應(yīng)優(yōu)選在惰性氣體流如氮?dú)饬骱?或暗處(在紅色光下)的條件下進(jìn)行。但是，反應(yīng)進(jìn)程并不因此受到限制。
本發(fā)明可提供優(yōu)異的制備甲基鈷胺素的工業(yè)化方法；其還可提供新的優(yōu)異的制備甲基鈷胺素的工業(yè)化方法，所述方法不會(huì)生成具有惡臭的有害物質(zhì)且符合生態(tài)學(xué)的要求；以及在制備甲基鈷胺素的過(guò)程中抑制具有惡臭的有害物質(zhì)生成的方法。以下將描述有關(guān)本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)的實(shí)施例。
本發(fā)明對(duì)具有惡臭的有害物質(zhì)生成的抑制作用。
本發(fā)明的方法包括按順序逐步進(jìn)行還原步驟和隨后的甲基化步驟。
在本發(fā)明的實(shí)施例1至3中(甲基化試劑溴化三甲基氧化锍)，在硼氫化鈉水溶液滴加完畢后，立即按照以下方式每小時(shí)對(duì)反應(yīng)罐中甲硫醚的濃度進(jìn)行測(cè)定。具體而言，將甲硫醚經(jīng)由玻璃管從反應(yīng)罐引入作為吸收劑的50％DMF水溶液中，通過(guò)氣液鼓泡使氣體吸收，并通過(guò)毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定吸收劑中所收集的甲硫醚的濃度(使用安捷倫公司制造的GC HP6890毛細(xì)管氣相色譜儀、DB-624柱進(jìn)行毛細(xì)管氣相色譜法分析。溫度在50℃保持10分鐘后，以每分鐘15℃的速度升溫至200℃。氣體吸收溫度為100℃，檢測(cè)溫度為215℃，進(jìn)樣量為1μl。與此同時(shí)進(jìn)行嗅覺(jué)測(cè)試)。
作為對(duì)照試驗(yàn)，在以下的“其中作為水溶性甲基化試劑的三甲基硫衍生物與還原劑共存于反應(yīng)體系中的制備甲基鈷胺素的方法”中，在滴加硼氫化鈉水溶液完畢后，立即進(jìn)行同樣的每小時(shí)取樣測(cè)定。對(duì)照試驗(yàn)向260ml離子交換水中加入20g氰鈷胺素、7.66g溴化三甲基氧化锍、1.4g氯化鈷六水合物和15ml 2-丁酮。以氮?dú)庵脫Q出體系中的氣體后，將混合物在水浴中加熱，并在攪拌狀態(tài)下、體系內(nèi)溫度為40℃下、于90分鐘內(nèi)向其中滴加硼氫化鈉水溶液(8g/40ml)。保持狀態(tài)繼續(xù)攪拌3小時(shí)后，將該混合物在水浴溫度15℃下攪拌過(guò)夜。過(guò)濾收集所得的沉淀并使之干燥，得到標(biāo)題化合物的粗品。向粗品中加入50％的丙酮水溶液，將混合物在35℃下加熱，并用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至7.0，然后滴加丙酮并攪拌過(guò)夜。過(guò)濾收集沉淀的結(jié)晶并使之干燥。
各實(shí)施例中生成的甲硫醚的濃度見(jiàn)表1。
表1

上行甲硫醚的濃度下行嗅覺(jué)測(cè)試的結(jié)果在實(shí)施例1至3中(甲基化試劑溴化三甲基氧化锍)，加入硼氫化鈉后1小時(shí)、2小時(shí)、3小時(shí)和5小時(shí)，在嗅覺(jué)測(cè)試中沒(méi)有檢測(cè)到惡臭并且在氣相色譜分析中沒(méi)有檢測(cè)到甲硫醚。相反，在水溶性甲基化試劑和還原劑共存的對(duì)照試驗(yàn)中，加入硼氫化鈉至少3小時(shí)后還能檢測(cè)到惡臭和高濃度的甲硫醚。
這些結(jié)果表明本發(fā)明的制備甲基鈷胺素的方法、特別是“其中氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)在還原劑(III)存在下被還原，并在還原后加入碘化三甲基氧化锍、溴化三甲基氧化锍和/或氯化三甲基氧化锍，從而將還原產(chǎn)物甲基化”的制備方法，不會(huì)引起并且可以有效地抑制具有惡臭的有害物質(zhì)的生成。
實(shí)施例通過(guò)以下的實(shí)施例將對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)地闡述，但這些實(shí)施例并不對(duì)本發(fā)明的范圍進(jìn)行限定。
實(shí)施例1甲基鈷胺素的合成本實(shí)施例中的所有步驟均于暗處(紅色光下)進(jìn)行。
向65ml離子交換水中加入5g氰鈷胺素、0.35g氯化鈷六水合物和3.75ml 2-丁酮。以氮?dú)庵脫Q出體系中的氣體后，將混合物在水浴中加熱，并在攪拌狀態(tài)下、水浴溫度38℃下、于60分鐘內(nèi)向其中滴加硼氫化鈉水溶液(2g/10ml)。保持狀態(tài)繼續(xù)攪拌30分鐘后，再于30分鐘內(nèi)向其中加入溴化三甲基氧化锍的水溶液(1.9g/10ml)。將混合物保持狀態(tài)繼續(xù)攪拌3小時(shí)，然后在水浴溫度15℃下攪拌過(guò)夜。過(guò)濾收集得到的沉淀并使之干燥，得到標(biāo)題化合物的粗品。向粗品中加入50％的丙酮水溶液，加熱至35℃后，用濃鹽酸將混合物的pH值調(diào)節(jié)至7.0，然后向其中滴加丙酮并將混合物攪拌過(guò)夜。過(guò)濾收集沉淀的結(jié)晶并使之干燥，得到標(biāo)題化合物，收率85％。
所得甲基鈷胺素的物理性質(zhì)如下在鹽酸緩沖液(pH 2.0)中，測(cè)得UVmax為264至266nm、303至307nm和459至462nm。
在磷酸鹽緩沖液(pH 7.0)中，測(cè)得UVmax為266至269nm、341至344nm和520至524nm。
UVmax參考值(默克索引，第十二版)(0.1N鹽酸)264、304和462nm。
(pH 7)266、342和522nm。
實(shí)施例2甲基鈷胺素的合成本實(shí)施例中的所有操作步驟均于暗處(紅色光下)進(jìn)行。
向260ml離子交換水中加入20g氰鈷胺素、1.4g氯化鈷六水合物和15ml 2-丁酮。以氮?dú)庵脫Q出體系中的氣體后，將混合物在水浴中加熱，并在攪拌狀態(tài)下、體系內(nèi)溫度40℃下、于70分鐘內(nèi)向其中滴加硼氫化鈉水溶液(8g/40ml)。保持狀態(tài)繼續(xù)攪拌30分鐘后，再于30分鐘內(nèi)向其中加入溴化三甲基氧化锍的水溶液(7.66g/40ml)。將混合物保持狀態(tài)繼續(xù)攪拌3小時(shí)，隨后在水浴溫度15℃下攪拌過(guò)夜。過(guò)濾收集生成的沉淀并使之干燥，得到標(biāo)題化合物的粗品。向粗品中加入50％的丙酮水溶液，加熱至35℃后，用濃鹽酸將混合物的pH值調(diào)節(jié)至7.0。然后向其中滴加丙酮并將混合物攪拌過(guò)夜。過(guò)濾收集沉淀的結(jié)晶并使之干燥，得到標(biāo)題化合物，收率85％。
實(shí)施例3甲基鈷胺素的合成本實(shí)施例中的所有操作步驟均于暗處(紅色光下)進(jìn)行。
向390ml離子交換水中加入30g氰鈷胺素、2.1g氯化鈷六水合物和22.5ml 2-丁酮。以氮?dú)庵脫Q出體系中的氣體后，將混合物在水浴中加熱，并在攪拌狀態(tài)下、體系內(nèi)溫度40℃下、于2小時(shí)內(nèi)向其中滴加硼氫化鈉水溶液(12g/60ml)。保持狀態(tài)繼續(xù)攪拌30分鐘后，再于30分鐘內(nèi)向其中加入溴化三甲基氧化锍的水溶液(11.5g/60ml)。將混合物保持狀態(tài)繼續(xù)攪拌3小時(shí)，然后在水浴溫度15℃下攪拌過(guò)夜。過(guò)濾收集得到的沉淀并使之干燥，得到標(biāo)題化合物的粗品。向粗品中加入50％的丙酮水溶液，在加熱至35℃后，用濃鹽酸將混合物的pH值調(diào)節(jié)至7.0，然后向其中滴加丙酮并將混合物攪拌過(guò)夜。過(guò)濾收集沉淀的結(jié)晶并使之干燥，得到標(biāo)題化合物，收率88％。
實(shí)施例4甲基鈷胺素的合成本實(shí)施例中的所有操作步驟均于暗處(紅色光下)進(jìn)行。
向390ml離子交換水中加入30g氰鈷胺素、2.1g氯化鈷六水合物和22.5ml 2-丁酮。以氮?dú)庵脫Q出體系中的氣體后，將混合物在水浴中加熱，并在攪拌狀態(tài)下、體系內(nèi)溫度40℃下、于2小時(shí)向其中滴加硼氫化鈉水溶液(12g/60ml)。保持狀態(tài)繼續(xù)攪拌30分鐘后，再于30分鐘內(nèi)向其中加入溴化三甲基氧化锍的水溶液(11.5g/60ml)。將混合物保持狀態(tài)繼續(xù)攪拌3小時(shí)，然后在水浴溫度15℃下攪拌過(guò)夜。過(guò)濾收集得到的沉淀并使之干燥，得到標(biāo)題化合物的粗品。向粗品中加入50％的丙酮水溶液，在加熱至35℃后，用濃鹽酸將混合物的pH值調(diào)節(jié)至7.0，然后向其中滴加丙酮并將混合物攪拌過(guò)夜。過(guò)濾收集沉淀的結(jié)晶并使之干燥，得到標(biāo)題化合物，收率87％。
實(shí)施例5甲基鈷胺素的合成本實(shí)施例中的所有操作步驟均于暗處(紅色光下)進(jìn)行。
向390ml離子交換水中加入30g氰鈷胺素、2.1g氯化鈷六水合物和22.5ml 2-丁酮。以氮?dú)庵脫Q出體系中的氣體后，將混合物在水浴中加熱，并在攪拌狀態(tài)下、體系內(nèi)溫度50℃下、于2小時(shí)內(nèi)向其中滴加硼氫化鈉水溶液(12g/60ml)。保持狀態(tài)繼續(xù)攪拌30分鐘后，再于30分鐘內(nèi)向其中加入溴化三甲基氧化锍的水溶液(11.5g/60ml)。將混合物保持狀態(tài)繼續(xù)攪拌3小時(shí)，然后在水浴溫度15℃下攪拌過(guò)夜。過(guò)濾收集得到的沉淀并使之干燥，得到標(biāo)題化合物的粗品。向粗品中加入50％的丙酮水溶液，在加熱至35℃后，用濃鹽酸將混合物的pH值調(diào)節(jié)至7.0，然后向其中滴加丙酮并將混合物攪拌過(guò)夜。過(guò)濾收集沉淀的結(jié)晶并使之干燥，得到標(biāo)題化合物，收率88％。
實(shí)施例6甲基鈷胺素的合成本實(shí)施例中的所有操作步驟均于暗處(紅色光下)進(jìn)行。
向390ml離子交換水中加入30g氰鈷胺素、2.1g氯化鈷六水合物和22.5ml 2-丁酮。以氮?dú)庵脫Q出體系中的氣體后，將混合物在水浴中加熱，并在攪拌狀態(tài)下、體系內(nèi)溫度50℃下、于2小時(shí)內(nèi)向其中滴加硼氫化鈉水溶液(12g/60ml)。保持狀態(tài)繼續(xù)攪拌30分鐘后，再于30分鐘內(nèi)向其中加入溴化三甲基氧化锍的水溶液(11.5g/60ml)。將混合物保持狀態(tài)繼續(xù)攪拌3小時(shí)，然后在水浴溫度15℃下攪拌過(guò)夜。過(guò)濾收集得到的沉淀并使之干燥，得到標(biāo)題化合物的粗品。向粗品中加入50％的丙酮水溶液，在加熱至35℃后，用濃鹽酸將混合物的pH值調(diào)節(jié)至7.0，然后向其中滴加丙酮并將混合物攪拌過(guò)夜。過(guò)濾收集沉淀的結(jié)晶并使之干燥，得到標(biāo)題化合物，收率87％。
實(shí)施例7甲基鈷胺素的合成本實(shí)施例中的所有操作步驟均于暗處(紅色光下)進(jìn)行。
向390ml離子交換水中加入30g氰鈷胺素、2.1g氯化鈷六水合物和22.5ml 2-丁酮。以氮?dú)庵脫Q出體系中的氣體后，將混合物在水浴中加熱，并在攪拌狀態(tài)下、體系內(nèi)溫度30℃下、于2小時(shí)內(nèi)向其中滴加硼氫化鈉水溶液(12g/60ml)。保持狀態(tài)繼續(xù)攪拌30分鐘后，再于30分鐘內(nèi)向其中加入溴化三甲基氧化锍的水溶液(11.5g/60ml)。將混合物保持狀態(tài)繼續(xù)攪拌3小時(shí)，然后在水浴溫度15℃下攪拌過(guò)夜。過(guò)濾收集生成的沉淀并使之干燥，得到標(biāo)題化合物的粗品。向粗品中加入50％的丙酮水溶液，在加熱至35℃后，用濃鹽酸將混合物的pH值調(diào)節(jié)至7.0，然后向其中滴加丙酮并將混合物攪拌過(guò)夜。過(guò)濾收集沉淀的結(jié)晶并使之干燥，得到標(biāo)題化合物，收率85％。
實(shí)施例8甲基鈷胺素的合成本實(shí)施例中的所有操作步驟均于暗處(紅色光下)進(jìn)行。
向390ml離子交換水中加入30g氰鈷胺素、2.1g氯化鈷六水合物和22.5ml 2-丁酮。在以15ml/min的流速向體系中通入氮?dú)獾耐瑫r(shí)，將混合物在水浴中加熱，并在攪拌狀態(tài)下、體系內(nèi)溫度30℃下、于2小時(shí)內(nèi)向其中滴加硼氫化鈉水溶液(12g/60ml)。保持狀態(tài)繼續(xù)攪拌30分鐘后，再于30分鐘內(nèi)向其中加入溴化三甲基氧化锍的水溶液(11.5g/60ml)。將混合物保持狀態(tài)繼續(xù)攪拌3小時(shí)，然后在水浴溫度15℃下攪拌過(guò)夜。過(guò)濾收集生成的沉淀并使之干燥，得到標(biāo)題化合物的粗品。向粗品中加入50％的丙酮水溶液，在加熱至35℃后，用濃鹽酸將混合物的pH值調(diào)節(jié)至7.0，然后向其中滴加丙酮并將混合物攪拌過(guò)夜。過(guò)濾收集沉淀的結(jié)晶并使之干燥，得到標(biāo)題化合物，收率86％。
實(shí)施例9甲基鈷胺素的合成本實(shí)施例中的所有操作步驟均于暗處(紅色光下)進(jìn)行。
向13L離子交換水中加入1kg氰鈷胺素、70g氯化鈷六水合物和750ml 2-丁酮。以氮?dú)庵脫Q出體系中的氣體后，將混合物在水浴中加熱，并在攪拌狀態(tài)下、體系內(nèi)溫度35℃±5℃下、于120分鐘內(nèi)向其中滴加硼氫化鈉水溶液(400g/2L)。再于30分鐘內(nèi)向其中加入溴化三甲基氧化锍的水溶液(383g/2L)。將混合物保持狀態(tài)繼續(xù)攪拌3小時(shí)，然后在水浴溫度15℃下攪拌過(guò)夜。過(guò)濾收集生成的沉淀并使之干燥，得到標(biāo)題化合物的粗品。向粗品中加入50％的丙酮水溶液，在加熱至35℃后，用濃鹽酸將混合物的pH值調(diào)節(jié)至7.0，然后向其中滴加丙酮并將混合物攪拌過(guò)夜。過(guò)濾收集沉淀的結(jié)晶并使之干燥，得到標(biāo)題化合物，收率87％。
權(quán)利要求
1.制備甲基鈷胺素(V)的方法，其包括在還原劑(III)存在下將以下通式所表示的氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)還原然后通過(guò)加入水溶性甲基化試劑(IV)將還原產(chǎn)物甲基化的步驟， R2＝CN氰鈷胺素(I)R2＝OH羥鈷胺素(II)R2＝CH3甲基鈷胺素(V)。
2.制備甲基鈷胺素(V)的方法，其包括在還原劑(III)存在下于水溶液或含水有機(jī)溶劑中將氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)還原然后通過(guò)加入水溶性甲基化試劑(IV)將還原產(chǎn)物甲基化的步驟。
3.制備甲基鈷胺素(V)的方法，其包括在還原劑(III)存在下于水溶液或含水有機(jī)溶劑中將氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)還原、通過(guò)加入水溶性甲基化試劑(IV)將還原產(chǎn)物甲基化然后將反應(yīng)產(chǎn)物以結(jié)晶或沉淀形式析出的步驟。
4.制備甲基鈷胺素(V)的方法，其包括在氰根離子清除劑和還原劑(III)存在下于水溶液或含水有機(jī)溶劑中將氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)還原、通過(guò)加入水溶性甲基化試劑(IV)將還原產(chǎn)物甲基化然后將反應(yīng)產(chǎn)物以結(jié)晶或沉淀的形式析出的步驟。
5.權(quán)利要求1至4的任一項(xiàng)的制備甲基鈷胺素的方法，其中的水溶性甲基化試劑(IV)為以下通式所表示的三甲基硫衍生物(VI) 其中X為鹵原子或甲氧基磺酰氧基；且n為0或1。
6.權(quán)利要求5的制備甲基鈷胺素(V)的方法，其中的三甲基硫衍生物(VI)為碘化三甲基氧化锍、三甲基碘化锍、溴化三甲基氧化锍、三甲基溴化锍、氯化三甲基氧化锍和/或三甲基氯化锍。
7.權(quán)利要求1至4的任一項(xiàng)的制備甲基鈷胺素(V)的方法，其中的還原劑(III)為硼氫化鈉。
8.權(quán)利要求4的制備甲基鈷胺素(V)的方法，其中的氰根離子清除劑為硫酸亞鐵和/或氯化鈷。
9.權(quán)利要求4或8的制備甲基鈷胺素(V)的方法，其中的氰根離子清除劑的量相對(duì)于氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)以重量計(jì)為1至30％。
10.權(quán)利要求1至4的任一項(xiàng)的制備甲基鈷胺素(V)的方法，其中的三甲基硫衍生物(VI)為碘化三甲基氧化锍、三甲基碘化锍、溴化三甲基氧化锍、三甲基溴化锍、氯化三甲基氧化锍和/或三甲基氯化锍，其中的還原劑(III)為硼氫化鈉。
11.權(quán)利要求4的制備甲基鈷胺素(V)的方法，其中的三甲基硫衍生物(VI)為碘化三甲基氧化锍、三甲基碘化锍、溴化三甲基氧化锍、三甲基溴化锍、氯化三甲基氧化锍和/或三甲基氯化锍，其中的還原劑(III)為硼氫化鈉，其中的氰根離子清除劑為硫酸亞鐵和/或氯化鈷。
12.在使用三甲基硫衍生物(VI)作為甲基化試劑制備甲基鈷胺素(V)的過(guò)程中抑制具有惡臭的甲硫醚生成的方法，其包括在還原劑(III)存在下將氰鈷胺素(I)或羥鈷胺素(II)還原然后通過(guò)加入碘化三甲基氧化锍、溴化三甲基氧化锍和/或氯化三甲基氧化锍將還原產(chǎn)物甲基化的步驟。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種新的、優(yōu)異的制備可用作藥物等的甲基鈷胺素的方法，其適合于工業(yè)生產(chǎn)并符合生態(tài)學(xué)的要求。更具體地講，本發(fā)明提供了通過(guò)在還原劑存在下將氰鈷胺素或羥鈷胺素還原、然后加入水溶性甲基化試劑使還原產(chǎn)物甲基化而制備甲基鈷胺素的方法。
文檔編號(hào)C07H23/00GK1524086SQ0281135
公開(kāi)日2004年8月25日 申請(qǐng)日期2002年6月4日 優(yōu)先權(quán)日2001年6月5日
發(fā)明者久武義彥, 田中卓扶, 鶴來(lái)外美雄, 黑田浩史, 史, 扶, 美雄 申請(qǐng)人:衛(wèi)材株式會(huì)社