專利名稱：環(huán)保型人參皂苷Rb的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥有效成份的提取分離方法。
雖然在上世紀(jì)80年代初期，人參莖葉總皂苷的工業(yè)化生產(chǎn)就已完成，但時(shí)至今日，人參總皂苷中的40余種單體人參皂苷中只有人參皂苷-Re、物理化學(xué)方法制備的人參皂苷-Rg3、酶轉(zhuǎn)化法生產(chǎn)人參皂苷-Rh2等3種單體人參皂苷得以實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，其他單體皂苷由于分離技術(shù)尤其是分離工藝的制約，即以往的溶劑法和層析法，工藝繁瑣、效率低下、操作困難、生產(chǎn)成本過高，溶媒易揮發(fā)、易燃、有毒，對(duì)生產(chǎn)人員的人身安全造成威脅，易對(duì)環(huán)境造成污染，僅限于實(shí)驗(yàn)室少量純品的制備，所以沒有能夠?qū)崿F(xiàn)工廠化生產(chǎn)，未能實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化開發(fā)。且傳統(tǒng)的分離方法，人參皂苷Rb1的收率為10％左右，純度只能達(dá)到90％左右，如需進(jìn)一步純化，只能靠高效液相色譜儀。傳統(tǒng)的分離方法的洗脫劑需要幾種溶劑混合，生產(chǎn)結(jié)束后，溶劑回收、分離困難，不能重復(fù)使用，如需要分離需要增加生產(chǎn)設(shè)備，造成生產(chǎn)成本提高。
人參中含有的40余種人參皂苷，每種均有獨(dú)特的藥理作用，人參皂苷Rb1是人參、西洋參中重要的生理活性物質(zhì)，最新藥理研究表明人參皂苷Rb1能激活RNA多聚酶，促進(jìn)大腦細(xì)胞和神經(jīng)中樞細(xì)胞的RNA、DNA蛋白質(zhì)，可修復(fù)受損大腦細(xì)胞，使大腦細(xì)胞再生，對(duì)大腦皮層細(xì)胞具有保護(hù)作用，可提高思維能力，改善記憶力，提示人參皂苷Rb1具有促智、抗老年癡呆藥物開發(fā)價(jià)值；在腸內(nèi)某種厭氧菌的作用下，可產(chǎn)生CompandK，簡(jiǎn)稱Rck，而Rck具有明顯的抑癌作用，提示人參皂苷Rb1具有抗癌藥物開發(fā)價(jià)值；小鼠ig人參皂苷Rb1，通過提高雄激素水平，激活NO/cGMP通路，而顯著改善小鼠性功能，提示人參皂苷Rb1具有開發(fā)改善性功能藥物價(jià)值。
本發(fā)明采取的技術(shù)方案是一、裝柱取12千克200～300目硅膠，加入水飽和正丁醇，邊加邊攪拌，排除氣泡，浸泡10～15小時(shí)，裝入到高100厘米層析柱中，36升水飽和正丁醇洗脫穩(wěn)定，備用；
二、分離取240～400克人參總皂苷或西洋參總皂苷或三七總皂苷上樣，少量水飽和正丁醇溶解，加入到穩(wěn)定好的層析柱上面，水飽和正丁醇洗脫，到色帶到達(dá)層析柱底端時(shí)開始用三角瓶連續(xù)接樣，每次50毫升，邊接樣邊用薄層色譜檢測(cè)，直到檢測(cè)無明顯斑點(diǎn)時(shí)，結(jié)束接樣；三、回收得產(chǎn)品合并人參皂苷Rb1洗脫液部分，減壓回收正丁醇，得人參皂苷Rb1水溶液，真空冷凍干燥，得人參皂苷Rb1凍干粉，質(zhì)量檢測(cè)，產(chǎn)品包裝。
本工藝生產(chǎn)的人參皂苷Rb1各項(xiàng)理化指標(biāo)如下性狀白色粉末或淡黃色粉末，味微苦熔點(diǎn)197～200℃比旋度+9.0～+13.0°含量測(cè)定按干燥品計(jì)算，含人參皂苷Rb1大于95.0％。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于1、工藝簡(jiǎn)單，生產(chǎn)周期短。由于人參、西洋參、三七中的B組人參皂苷化學(xué)結(jié)構(gòu)相似，極性相近，以往的分離難度很大、工藝繁瑣、生產(chǎn)周期長(zhǎng)、效率低，僅限于實(shí)驗(yàn)室制備少量純品。本工藝如用總皂苷分離純化人參皂苷，只需要一次硅膠柱層析即可將人參皂苷Rb1與其他皂苷成分分離，生產(chǎn)周期大大縮短。
2、環(huán)保、無污染傳統(tǒng)的人參皂苷Rb1的分離工藝，多采用三氯甲烷、甲醇、乙酸乙酯等，易揮發(fā)、易燃、有毒，對(duì)生產(chǎn)人員的人身安全造成威脅，易對(duì)環(huán)境造成污染，不適合工廠化生產(chǎn)。本工藝采用水飽和正丁醇作為洗脫劑，揮發(fā)性和易燃性降低，且無毒，還可回收利用，真正實(shí)現(xiàn)環(huán)保、無污染生產(chǎn)。
3、純度高，收率多。利用本工藝生產(chǎn)的人參皂苷純度達(dá)到95％以上，收率達(dá)到20％。
4、成本低本工藝洗脫劑為水飽和正丁醇，回收后可直接用做洗脫劑，反復(fù)使用，不需要增加新的溶劑分離設(shè)備，生產(chǎn)成本大大降低。
實(shí)施例二一、裝柱取12千克200～300目硅膠，加入24升水飽和正丁醇，邊加邊攪拌，排除氣泡，浸泡12小時(shí)，裝入到高100厘米層析柱中，36升水飽和正丁醇洗脫穩(wěn)定，備用；二、分離取300克人參總皂苷上樣，少量水飽和正丁醇溶解，加入到穩(wěn)定好的層析柱上面，水飽和正丁醇洗脫，到色帶到達(dá)層析柱底端時(shí)開始用三角瓶連續(xù)接樣，每次50毫升，邊接樣邊用薄層色譜檢測(cè)，直到檢測(cè)無明顯斑點(diǎn)時(shí)，結(jié)束接樣；三、回收得產(chǎn)品合并人參皂苷Rb1洗脫液部分，減壓回收正丁醇，得人參皂苷Rb1水溶液，真空冷凍干燥，得人參皂苷Rb1凍干粉，質(zhì)量檢測(cè)，產(chǎn)品包裝。
實(shí)施例三一、裝柱取12千克200～300目硅膠，加入24升水飽和正丁醇，邊加邊攪拌，排除氣泡，浸泡15小時(shí)，裝入到高100厘米層析柱中，36升水飽和正丁醇洗脫穩(wěn)定，備用；二、分離取400克人參總皂苷上樣，少量水飽和正丁醇溶解，加入到穩(wěn)定好的層析柱上面，水飽和正丁醇洗脫，到色帶到達(dá)層析柱底端時(shí)開始用三角瓶連續(xù)接樣，每次50毫升，邊接樣邊用薄層色譜檢測(cè)，直到檢測(cè)無明顯斑點(diǎn)時(shí)，結(jié)束接樣；三、回收得產(chǎn)品合并人參皂苷Rb1洗脫液部分，減壓回收正丁醇，得人參皂苷Rb1水溶液，真空冷凍干燥，得人參皂苷Rb1凍干粉，質(zhì)量檢測(cè)，產(chǎn)品包裝。
實(shí)施例四一、裝柱取12千克200～300目硅膠，加入24升水飽和正丁醇，邊加邊攪拌，排除氣泡，浸泡10小時(shí)，裝入到高100厘米層析柱中，36升水飽和正丁醇洗脫穩(wěn)定，備用；二、分離取240克西洋參總皂苷上樣，少量水飽和正丁醇溶解，加入到穩(wěn)定好的層析柱上面，水飽和正丁醇洗脫，到色帶到達(dá)層析柱底端時(shí)開始用三角瓶連續(xù)接樣，每次50毫升，邊接樣邊用薄層色譜檢測(cè)，直到檢測(cè)無明顯斑點(diǎn)時(shí)，結(jié)束接樣；
三、回收得產(chǎn)品合并人參皂苷Rb1洗脫液部分，減壓回收正丁醇，得人參皂苷Rb1水溶液，真空冷凍干燥，得人參皂苷Rb1凍干粉，質(zhì)量檢測(cè)，產(chǎn)品包裝。
實(shí)施例五一、裝柱取12千克200～300目硅膠，加入24升水飽和正丁醇，邊加邊攪拌，排除氣泡，浸泡12小時(shí)，裝入到高100厘米層析柱中，36升水飽和正丁醇洗脫穩(wěn)定，備用；二、分離取300克西洋參總皂苷上樣，少量水飽和正丁醇溶解，加入到穩(wěn)定好的層析柱上面，水飽和正丁醇洗脫，到色帶到達(dá)層析柱底端時(shí)開始用三角瓶連續(xù)接樣，每次50毫升，邊接樣邊用薄層色譜檢測(cè)，直到檢測(cè)無明顯斑點(diǎn)時(shí)，結(jié)束接樣；三、回收得產(chǎn)品合并人參皂苷Rb1洗脫液部分，減壓回收正丁醇，得人參皂苷Rb1水溶液，真空冷凍干燥，得人參皂苷Rb1凍干粉，質(zhì)量檢測(cè)，產(chǎn)品包裝。
實(shí)施例六一、裝柱取12千克200～300目硅膠，加入24升水飽和正丁醇，邊加邊攪拌，排除氣泡，浸泡15小時(shí)，裝入到高100厘米層析柱中，36升水飽和正丁醇洗脫穩(wěn)定，備用；二、分離取400克西洋參總皂苷上樣，少量水飽和正丁醇溶解，加入到穩(wěn)定好的層析柱上面，水飽和正丁醇洗脫，到色帶到達(dá)層析柱底端時(shí)開始用三角瓶連續(xù)接樣，每次50毫升，邊接樣邊用薄層色譜檢測(cè)，直到檢測(cè)無明顯斑點(diǎn)時(shí)，結(jié)束接樣；三、回收得產(chǎn)品合并人參皂苷Rb1洗脫液部分，減壓回收正丁醇，得人參皂苷Rb1水溶液，真空冷凍干燥，得人參皂苷Rb1凍干粉，質(zhì)量檢測(cè)，產(chǎn)品包裝。
實(shí)施例七一、裝柱取12千克200～300目硅膠，加入24升水飽和正丁醇，邊加邊攪拌，排除氣泡，浸泡10小時(shí)，裝入到高100厘米層析柱中，36升水飽和正丁醇洗脫穩(wěn)定，備用；二、分離取240克三七總皂苷上樣，少量水飽和正丁醇溶解，加入到穩(wěn)定好的層析柱上面，水飽和正丁醇洗脫，到色帶到達(dá)層析柱底端時(shí)開始用三角瓶連續(xù)接樣，每次50毫升，邊接樣邊用薄層色譜檢測(cè)，直到檢測(cè)無明顯斑點(diǎn)時(shí)，結(jié)束接樣；三、回收得產(chǎn)品合并人參皂苷Rb1洗脫液部分，減壓回收正丁醇，得人參皂苷Rb1水溶液，真空冷凍干燥，得人參皂苷Rb1凍干粉，質(zhì)量檢測(cè)，產(chǎn)品包裝。
實(shí)施例八一、裝柱取12千克200～300目硅膠，加入24升水飽和正丁醇，邊加邊攪拌，排除氣泡，浸泡12小時(shí)，裝入到高100厘米層析柱中，36升水飽和正丁醇洗脫穩(wěn)定，備用；二、分離取300克三七總皂苷上樣，少量水飽和正丁醇溶解，加入到穩(wěn)定好的層析柱上面，水飽和正丁醇洗脫，到色帶到達(dá)層析柱底端時(shí)開始用三角瓶連續(xù)接樣，每次50毫升，邊接樣邊用薄層色譜檢測(cè)，直到檢測(cè)無明顯斑點(diǎn)時(shí)，結(jié)束接樣；三、回收得產(chǎn)品合并人參皂苷Rb1洗脫液部分，減壓回收正丁醇，得人參皂苷Rb1水溶液，真空冷凍干燥，得人參皂苷Rb1凍干粉，質(zhì)量檢測(cè)，產(chǎn)品包裝。
實(shí)施例九一、裝柱取12千克200～300目硅膠，加入24升水飽和正丁醇，邊加邊攪拌，排除氣泡，浸泡10小時(shí)，裝入到高100厘米層析柱中，36升水飽和正丁醇洗脫穩(wěn)定，備用；二、分離取400克三七總皂苷上樣，少量水飽和正丁醇溶解，加入到穩(wěn)定好的層析柱上面，水飽和正丁醇洗脫，到色帶到達(dá)層析柱底端時(shí)開始用三角瓶連續(xù)接樣，每次50毫升，邊接樣邊用薄層色譜檢測(cè)，直到檢測(cè)無明顯斑點(diǎn)時(shí)，結(jié)束接樣；三、回收得產(chǎn)品合并人參皂苷Rb1洗脫液部分，減壓回收正丁醇，得人參皂苷Rb1水溶液，真空冷凍干燥，得人參皂苷Rb1凍干粉，質(zhì)量檢測(cè)，產(chǎn)品包裝。
權(quán)利要求
1.一種環(huán)保型人參皂苷Rb1高獲取量產(chǎn)業(yè)化分離方法，其特征在于一、裝柱取12千克200～300目硅膠，加入水飽和正丁醇，邊加邊攪拌，排除氣泡，浸泡10～15小時(shí)，裝入到高100厘米層析柱中，36升水飽和正丁醇洗脫穩(wěn)定，備用；二、分離取240～400克人參總皂苷上樣，少量水飽和正丁醇溶解，加入到穩(wěn)定好的層析柱上面，水飽和正丁醇洗脫，到色帶到達(dá)層析柱底端時(shí)開始用三角瓶連續(xù)接樣，每次50毫升，邊接樣邊用薄層色譜檢測(cè)，直到檢測(cè)無明顯斑點(diǎn)時(shí)，結(jié)束接樣；三、回收得產(chǎn)品合并人參皂苷Rb1洗脫液部分，減壓回收正丁醇，得人參皂苷Rb1水溶液，真空冷凍干燥，得人參皂苷Rb1凍干粉，質(zhì)量檢測(cè)，產(chǎn)品包裝。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的環(huán)保型人參皂苷Rb1高獲取量產(chǎn)業(yè)化分離方法，其特征在于在分離過程中取300克人參總皂苷上樣。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的環(huán)保型人參皂苷Rb1高獲取量產(chǎn)業(yè)化分離方法，其特征在于在分離過程中取240～400克西洋參總皂苷上樣。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的環(huán)保型人參皂苷Rb1高獲取量產(chǎn)業(yè)化分離方法，其特征在于在分離過程中取300克西洋參總皂苷上樣。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的環(huán)保型人參皂苷Rb1高獲取量產(chǎn)業(yè)化分離方法，其特征在于在分離過程中取240～400克三七總皂苷上樣。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的環(huán)保型人參皂苷Rb1高獲取量產(chǎn)業(yè)化分離方法，其特征在于在分離過程中取300克三七總皂苷上樣。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種環(huán)保型人參皂苷Rb
文檔編號(hào)C07J9/00GK1473841SQ0312766
公開日2004年2月11日 申請(qǐng)日期2003年8月5日 優(yōu)先權(quán)日2003年8月5日
發(fā)明者魏春雁, 李向高, 王秀全, 王德清, 王光學(xué) 申請(qǐng)人:吉林農(nóng)大珍源參業(yè)高科技有限公司