專利名稱：嘧啶酮衍生物作為治療藥物治療急性和慢性炎性、缺血性和重建性病變的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的雜環(huán)衍生物、它們的制備方法及它們在藥物中的用途，尤其是治療慢性阻塞性肺病、急性冠狀動脈綜合征、急性心肌梗塞和心力衰竭發(fā)展的用途。
纖維狀蛋白質(zhì)彈性蛋白在一些組織(如動脈、一些韌帶、肺和心臟)中占所有蛋白質(zhì)含量的適當(dāng)比例，可被選定分類為彈性蛋白酶的一組酶水解或者否則被破壞。人白細胞彈性蛋白酶(HLE，EC 3.4.21.37)，也稱為人嗜中性粒細胞彈性蛋白酶(HNE)，為糖基化的強堿性絲氨酸蛋白酶并發(fā)現(xiàn)于人多形核白細胞(PMN)的嗜天青顆粒中。HNE由活化PMN釋放并參入到急性和慢性炎性疾病的發(fā)病機理中。HNE能降解廣泛的基質(zhì)蛋白，包括彈性蛋白和膠原蛋白，并且除這些對結(jié)締組織的作用之外，HNE具有廣泛的炎性作用，包括IL-8基因表達的正調(diào)節(jié)、水腫形成、粘液腺增生和粘液分泌過多。它也通過水解膠原蛋白結(jié)構(gòu)作為組織損傷的介體，例如，在急性心肌梗塞后的心臟或心力衰竭發(fā)展過程中的心臟，如此損害上皮細胞，加速附著在內(nèi)皮上的嗜中性粒細胞的外滲，并影響粘著過程本身。
認為HNE起作用的肺病包括肺纖維化、肺炎、急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)、肺氣腫(包括吸煙-誘發(fā)的肺氣腫)、慢性阻塞性肺病(COPD)和囊性纖維化。在心血管疾病中，HNE與急性心肌梗塞后缺血組織損傷隨后心肌機能障礙的增強性產(chǎn)生有關(guān)并與心力衰竭發(fā)展過程中出現(xiàn)的重建病變有關(guān)。HNE也牽涉到類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、動脈粥樣硬化、腦創(chuàng)傷、癌和涉及嗜中性粒細胞參與相關(guān)病癥的病因。
因此，HLE活性抑制劑可潛在地用于許多炎性疾病的治療，尤其是慢性阻塞性肺病的治療[R.A.Stockley，嗜中性粒細胞和蛋白酶/抗蛋白酶不平衡，Am.J.Respir.Crit.Care160，S49-S52(1999)]。HLE活性抑制劑也可潛在地用于治療急性心肌綜合征、不穩(wěn)定性心絞痛、急性心肌梗塞和冠狀動脈旁路移植術(shù)(CABG)中[C.P.Tiefenbacher等，彈性蛋白酶改善大鼠心臟反復(fù)缺血和心肌梗塞后心肌功能的抑制，Eur.J.Physiol.433，S563-S570(1997)；Dinerman等，增加不穩(wěn)定性心絞痛和急性心肌梗塞中嗜中性粒細胞彈性蛋白酶的釋放，J.Am.Coll.Cardiol.15，1559-1563(1990)]、心力衰竭發(fā)展[S.J.Gilbert等，增加在犬膨大心肌病中前基質(zhì)金屬蛋白酶-9和嗜中性粒細胞彈性蛋白酶的表達，Cardiov.Res.34，S377-S383(1997)]和動脈粥樣硬化[Dollery等，人動脈粥樣硬化斑塊中的嗜中性粒細胞彈性蛋白酶，Circulation107，2829-2836(2003)]。
在J.Heterocyclic Chem.38，1051(2001)中描述了5-乙氧羰基-1-苯基-6-甲基-4-(3-硝基苯基)-3，4-二氫嘧啶-2(1H)-酮的合成。沒有提及該化合物的藥理活性。
本發(fā)明涉及通式(I)化合物 其中A代表芳環(huán)或雜芳環(huán)，R1、R2和R3彼此獨立代表氫、鹵素、硝基、氰基、C1-C6-烷基、羥基或C1-C6-烷氧基，其中C1-C6-烷基和C1-C6-烷氧基可被一個至三個選自以下的相同基團或不同基團進一步取代鹵素、羥基和C1-C4-烷氧基，R4代表三氟甲基羰基、C1-C6-烷基羰基、C1-C6-烷氧基羰基、C1-C6-烯氧基羰基、羥基羰基、氨基羰基、單-或二-C1-C4-烷基氨基羰基、C6-C10-芳基氨基羰基、芳基羰基、雜芳基羰基、雜環(huán)基羰基、雜芳基、雜環(huán)基或氰基，其中C1-C6-烷基羰基、C1-C6-烷氧基羰基、單-和二-C1-C4-烷基氨基羰基可被一個至三個選自以下的相同基團或不同基團進一步取代C3-C8-環(huán)烷基、羥基、C1-C4-烷氧基、C1-C4-烷氧基羰基、羥基羰基、氨基羰基、單-和二-C1-C4-烷基氨基羰基、C1-C4-烷基羰基氨基、(C1-C4-烷基羰基)-C1-C4-烷基氨基、氰基、氨基、單-和二-C1-C4-烷基氨基、雜芳基、雜環(huán)基和三-(C1-C6-烷基)-甲硅烷基，且其中雜芳基羰基、雜環(huán)基羰基、雜芳基和雜環(huán)基可被C1-C4-烷基進一步取代，R5代表可被一個至三個選自以下的相同基團或不同基團取代的C1-C4-烷基鹵素、羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-烯氧基、C1-C6-烷硫基、氨基、單-和二-C1-C6-烷基氨基、芳基氨基、羥基羰基、C1-C6-烷氧基羰基和基團-O-C1-C4-烷基-O-C1-C4-烷基，或R5代表氨基，R6代表氫、C1-C6-烷基、甲酰基、氨基羰基、單-或二-C1-C4-烷基氨基羰基、C3-C8-環(huán)烷基羰基、C1-C6-烷基羰基、C1-C6-烷氧基羰基、N-(C1-C4-烷基磺?；?-氨基羰基、N-(C1-C4-烷基磺?；?-N-(C1-C4-烷基)-氨基羰基、雜芳基、雜環(huán)基、雜芳基羰基或雜環(huán)基羰基，其中C1-C6-烷基、單-和二-C1-C4-烷基氨基羰基、C1-C6-烷基羰基、C1-C6-烷氧基羰基、雜芳基和雜環(huán)基可被一個至三個選自以下的相同基團或不同基團取代芳基、雜芳基、羥基、C1-C4-烷氧基、羥基羰基、C1-C6-烷氧基羰基、氨基羰基、單-和二-C1-C4-烷基氨基羰基、氨基、單-和二-C1-C4-烷基氨基、C1-C4-烷基羰基氨基、三-(C1-C6-烷基)-甲硅烷基、氰基、N-(單-和二-C1-C4-烷基氨基-C1-C4-烷基)-氨基羰基、N-(C1-C4-烷氧基-C1-C4-烷基)-氨基羰基和鹵素，
或R6代表下式部分 或 其中R6A選自氫和C1-C6-烷基，且n代表1或2的整數(shù)，R7代表鹵素、硝基、氰基、C1-C6-烷基、羥基或C1-C6-烷氧基，其中C1-C6-烷基和C1-C6-烷氧基可被一個至三個選自以下的相同基團或不同基團進一步取代鹵素、羥基和C1-C4-烷氧基，且Y1、Y2、Y3、Y4和Y5彼此獨立代表CH或N，其中該環(huán)含有0、1個或2個氮原子。
本發(fā)明化合物也可以它們的鹽、水合物和/或溶劑合物的形式存在。
在本發(fā)明的上下文中優(yōu)選生理學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明的生理學(xué)上可接受的鹽為無毒的鹽，一般可通過化合物(I)與通常用于該目的的無機堿、有機堿或酸反應(yīng)而獲得?；衔?I)的藥學(xué)上可接受的鹽的非限定性實例包括堿金屬鹽(例如鋰鹽、鉀鹽和鈉鹽)、堿土金屬鹽(如鎂鹽和鈣鹽)、季銨鹽(如三乙基銨鹽)、醋酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、碳酸氫鹽、硫酸氫鹽、酒石酸氫鹽、硼酸鹽、溴化物、碳酸鹽、氯化物、檸檬酸鹽、二氫氯化物、延胡索酸鹽、葡萄糖酸鹽、谷氨酸鹽、己基間苯二酚鹽、氫溴酸鹽、氫氯酸鹽、羥基萘甲酸鹽、碘化物、異硫代硫酸鹽、乳酸鹽、月桂酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽、甲基溴化物、甲基硝酸鹽、甲基硫酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、泛酸鹽、磷酸鹽、二磷酸鹽、聚半乳糖醛酸鹽、水楊酸鹽、硬脂酸鹽、硫酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽、戊酸鹽和其他作藥用目的的鹽。
本發(fā)明化合物或它們的鹽的水合物為這些化合物與水的化學(xué)計量的組合物，如半、一或二水化合物。
本發(fā)明化合物或它們的鹽的溶劑合物為這些化合物與溶劑的化學(xué)計量的組合物。
本發(fā)明包括本發(fā)明化合物的單獨對映體或非對映體和相應(yīng)的消旋體或非對映體混合物以及它們各自的鹽。此外，根據(jù)本發(fā)明包括上述化合物所有可能的互變異構(gòu)形式。非對映體混合物通過色譜方法可分離出單獨異構(gòu)體。消旋體可通過基于手性相的色譜方法或通過拆分法分離出各自的對映體。
在本發(fā)明的上下文中，一般而言，如果沒有另外說明，取代基具有以下含義烷基一般代表具有1-6個、優(yōu)選1-4個碳原子的直鏈或支鏈烴基。非限定性實例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、己基、異己基。這同樣適用于如烷氧基、烷基氨基、烷氧基羰基和烷氧基羰基氨基等基團。
烷氧基例證性并優(yōu)選代表甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、叔丁氧基、正戊氧基和正己氧基。
烷基羰基一般代表具有1-6個、優(yōu)選1-4個碳原子的在其連接位置具有羰基官能團的直鏈或支鏈烴基。非限定性實例包括甲?；⒁阴；?、正丙酰基、正丁?；?、異丁?；?、新戊酰基、正己?；?。
烷氧基羰基例證性并優(yōu)選代表甲氧基羰基、乙氧基羰基、正丙氧基羰基、異丙氧基羰基、叔丁氧基羰基、正戊氧基羰基和正己氧基羰基。
烷基氨基代表具有一個或兩個(獨立選擇的)烷基取代基的烷基氨基基團，例證性并優(yōu)選代表甲基氨基、乙基氨基、正丙基氨基、異丙基氨基、叔丁基氨基、正戊基氨基、正己基氨基、N，N-二甲基氨基、N，N-二乙基氨基、N-乙基-N-甲基氨基、N-甲基-N-正丙基氨基、N-異丙基-N-正丙基氨基、N-叔丁基-N-甲基氨基、N-乙基-N-正戊基氨基和N-正己基-N-甲基氨基。
烷基氨基羰基代表具有一個或兩個(獨立選擇的)烷基取代基的烷基氨基羰基基團，例證性并優(yōu)選代表甲基氨基羰基、乙基氨基羰基、正丙基氨基羰基、異丙基氨基羰基、叔丁基氨基羰基、正戊基氨基羰基、正己基氨基羰基、N，N-二甲基氨基羰基、N，N-二乙基氨基羰基、N-乙基-N-甲基氨基羰基、N-甲基-N-正丙基氨基羰基、N-異丙基-N-正丙基氨基羰基、N-叔丁基-N-甲基氨基羰基、N-乙基-N-正戊基氨基-羰基和N-正己基-N-甲基氨基羰基。
烷基磺酰基一般代表具有1-6個、優(yōu)選1-4個碳原子的在其連接位置具有磺酰基官能團的直鏈或支鏈烴基。非限定性實例包括甲基磺?；⒁一酋；?、正丙基磺酰基、異丙基磺酰基、正丁基磺酰基、叔丁基磺酰基。
環(huán)烷基一般代表具有3-8個、優(yōu)選3-6個碳原子的環(huán)狀飽和烴基。非限定性實例包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基和環(huán)庚基。
芳基本身和芳基羰基中芳基代表一般具有6-14個碳原子的單環(huán)至三環(huán)的芳族碳環(huán)基團，例證性并優(yōu)選代表苯基、萘基和菲基。
芳基羰基例證性并優(yōu)選代表苯甲酰基和萘甲?；?。
雜芳基本身和雜芳基羰基中雜芳基代表具有5-10個、優(yōu)選5個或6個環(huán)原子且最多可達5個、優(yōu)選最多可達4個選自S、O和N的雜原子的芳族單環(huán)或雙環(huán)基團，例證性并優(yōu)選代表噻吩基、呋喃基、吡咯基、噻唑基、噁唑基、咪唑基、噁二唑基、噻二唑基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吲哚基、吲唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、喹啉基、異喹啉基。
雜芳基羰基例證性并優(yōu)選代表噻吩基羰基、呋喃基羰基、吡咯基羰基、噻唑基羰基、噁唑基羰基、咪唑基羰基、吡啶基羰基、嘧啶基羰基、噠嗪基羰基、吲哚基羰基、吲唑基羰基、苯并呋喃基羰基、苯并噻吩基羰基、喹啉基羰基、異喹啉基羰基。
雜環(huán)基本身和雜環(huán)基羰基中雜環(huán)基代表單環(huán)或多環(huán)、優(yōu)選單環(huán)或雙環(huán)非芳族雜環(huán)基團，一般具有4-10個且優(yōu)選5-8個環(huán)原子且最多可達3個、優(yōu)選最多可達2個選自N、O、O、SO和SO2的雜原子和/或雜基。雜環(huán)基可以飽和或部分不飽和。優(yōu)選具有最多可達兩個選自O(shè)、N和S的雜原子的5-8元單環(huán)飽和雜環(huán)基，如例證性并優(yōu)選四氫呋喃-2-基、吡咯烷-1-基、吡咯烷-2-基、吡咯烷-3-基、吡咯啉基、哌啶基、嗎啉基、全氫化氮雜_基。
雜環(huán)基羰基例證性并優(yōu)選代表四氫呋喃-2-羰基，吡咯烷-1-羰基、吡咯烷-2-羰基、吡咯烷-3-羰基、吡咯啉羰基、哌啶羰基、嗎啉羰基、全氫化氮雜_羰基。
鹵素代表氟、氯、溴和碘。
當(dāng)說明Y1、Y2、Y3、Y4和Y5代表CH或N時，CH也代表被R3或R7取代基取代的環(huán)碳原子。
在鍵旁邊的*符號表示分子中的連接位置。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式(I)化合物，其中A代表芳環(huán)或雜芳環(huán)，R1、R2和R3彼此獨立代表氫、鹵素、硝基、氰基、C1-C6-烷基、羥基或C1-C6-烷氧基，其中C1-C6-烷基和C1-C6-烷氧基可被一個至三個選自以下的相同基團或不同基團進一步取代鹵素、羥基和C1-C4-烷氧基，R4代表C1-C6-烷基羰基、C1-C6-烷氧基羰基、C1-C6-烯氧基羰基、羥基羰基、氨基羰基、單-或二-C1-C4-烷基氨基羰基、C6-C10-芳基氨基羰基、雜芳基羰基、雜環(huán)基羰基、雜芳基、雜環(huán)基或氰基，其中C1-C6-烷基羰基、C1-C6-烷氧基羰基、單-和二-C1-C4-烷基氨基羰基可被一個至三個選自以下的相同基團或不同基團進一步取代C3-C8-環(huán)烷基、羥基、C1-C4-烷氧基、C1-C4-烷氧基羰基、羥基羰基、氨基羰基、單-和二-C1-C4-烷基氨基羰基、C1-C4-烷基羰基氨基、氨基、單-和二-C1-C4-烷基氨基、雜芳基、雜環(huán)基和三-(C1-C6-烷基)-甲硅烷基，
R5代表可被一個至三個選自以下的相同基團或不同基團取代的C1-C4-烷基鹵素、羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-烯氧基、C1-C6-烷硫基、氨基、單-和二-C1-C6-烷基氨基、芳基氨基、羥基羰基、C1-C6-烷氧基羰基和基團-O-C1-C4-烷基-O-C1-C4-烷基，或R5代表氨基，R6代表氫、C1-C6-烷基、甲?；被驶?、單-或二-C1-C4-烷基氨基羰基、C3-C8-環(huán)烷基羰基、C1-C6-烷基羰基、C1-C6-烷氧基羰基、N-(C1-C4-烷基磺?；?-氨基羰基、N-(C1-C4-烷基磺?；?-N-(C1-C4-烷基)-氨基羰基、雜芳基、雜環(huán)基、雜芳基羰基或雜環(huán)基羰基，其中C1-C6-烷基、單-和二-C1-C4-烷基氨基羰基、C1-C6-烷基羰基、C1-C6-烷氧基羰基、雜芳基和雜環(huán)基可被一個至三個選自以下的相同基團或不同基團取代芳基、雜芳基、羥基、C1-C4-烷氧基、羥基羰基、C1-C6-烷氧基羰基、氨基羰基、單-和二-C1-C4-烷基氨基羰基、氨基、單-和二-C1-C4-烷基氨基、C1-C4-烷基羰基氨基、三-(C1-C6-烷基)-甲硅烷基、氰基、N-(單-和二-C1-C4-烷基氨基-C1-C4-烷基)-氨基羰基、N-(C1-C4-烷氧基-C1-C4-烷基)-氨基羰基和鹵素，或R6代表下式部分 或 其中R6A選自氫和C1-C6-烷基，且n代表1或2的整數(shù)，R7代表鹵素、硝基、氰基、C1-C6-烷基、羥基或C1-C6-烷氧基，其中C1-C6-烷基和C1-C6-烷氧基可被一個至三個選自以下的相同基團或不同基團進一步取代鹵素、羥基和C1-C4-烷氧基，
且Y1、Y2、Y3、Y4和Y5彼此獨立代表CH或N，其中該環(huán)含有0、1個或2個氮原子。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式(I)化合物，其中A代表苯環(huán)、萘環(huán)或吡啶環(huán)，R1、R2和R3彼此獨立代表氫、氟、氯、溴、硝基、氰基、甲基、乙基、三氟甲基或三氟甲氧基，R4代表C1-C6-烷基羰基、C1-C6-烷氧基羰基、羥基羰基、氨基羰基、單-C1-C4-烷基氨基羰基或氰基，其中C1-C6-烷基羰基、C1-C6-烷氧基羰基和單-C1-C4-烷基氨基羰基可被一個至三個選自以下的相同基團或不同基團取代C3-C8-環(huán)烷基、羥基、C1-C4-烷氧基、C1-C4-烷氧基羰基、氨基、單-或二-C1-C4-烷基氨基、雜芳基和雜環(huán)基，R5代表甲基或乙基，R6代表氫、C1-C6-烷基、單-或二-C1-C4-烷基氨基羰基、C1-C6-烷基羰基、C1-C6-烷氧基羰基或雜環(huán)基羰基，其中C1-C6-烷基和C1-C6-烷氧基羰基可被一個至三個選自以下的相同基團或不同基團取代雜芳基、羥基、C1-C4-烷氧基、羥基羰基、C1-C6-烷氧基羰基、氨基羰基、單-和二-C1-C4-烷基氨基羰基、氰基、氨基、單-和二-C1-C4-烷基氨基，或R6代表下式部分 或 其中R6A選自氫和C1-C4-烷基，且n代表1或2的整數(shù)，R7代表鹵素、硝基、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基、甲基或乙基，且
Y1、Y2、Y3、Y4和Y5各自代表CH。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式(I)化合物，其中A代表苯環(huán)或吡啶環(huán)，R1和R3各自代表氫，R2代表氟、氯、溴、硝基或氰基，R4代表氰基、C1-C4-烷基羰基或C1-C4-烷氧基羰基，其中C1-C4-烷氧基羰基可被選自以下的基團取代羥基、C1-C4-烷氧基、C1-C4-烷氧基羰基、單-和二-C1-C4-烷基氨基、雜芳基和雜環(huán)基，R5代表甲基，R6代表氫、C1-C4-烷基、單-或二-C1-C4-烷基氨基羰基、C1-C4-烷基羰基或C1-C4-烷氧基羰基，其中C1-C4-烷基和C1-C4-烷氧基羰基可被選自以下的基團取代雜芳基、羥基、C1-C4-烷氧基、羥基羰基、氨基羰基、單-和二-C1-C4-烷基氨基羰基、氨基、單-和二-C1-C4-烷基氨基，或R6代表下式部分 或 其中R6A選自氫和甲基，R7代表三氟甲基或硝基，且Y1、Y2、Y3、Y4和Y5各自代表CH。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式(I)化合物，其中A為苯基或吡啶基。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式(I)化合物，其中R1為氫。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式(I)化合物，其中R2為氰基，尤其是其中A為苯基或吡啶基且R2為位于相對于中心二氫嘧啶酮環(huán)的對-位的氰基。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式(I)化合物，其中R3為氫。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式(I)化合物，其中R4為任選被羥基、尤其是2-羥基乙氧基羰基取代的C1-C4-烷氧基羰基，或其中R4為C1-C4-烷基羰基，尤其是甲基羰基。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式(I)化合物，其中R5為甲基。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式(I)化合物，其中R6為氫。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式(I)化合物，其中R7為三氟甲基或硝基，尤其是其中R7為位于相對于中心二氫嘧啶酮環(huán)的間-位的三氟甲基。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式(IA)化合物 其中Z代表CH或N，且R1、R3、R4和R6具有上述指定含義。
本發(fā)明化合物，其中R6為氫，可烯醇化成相應(yīng)的羥基脒
通式(I)化合物可在酸存在下通過三種成分/一步反應(yīng)或者依次將通式(II)化合物、通式(III)化合物和通式(IV)化合物縮合得到通式(IB)化合物，任選隨后在堿存在下由通式(IB)化合物與通式(V)化合物反應(yīng)來合成，通式(II)化合物 其中A、R1和R2具有上述指定含義，通式(III)化合物 其中R4和R5具有上述指定含義，通式(IV)化合物
其中R3、R7和Y1-Y5具有上述指定含義，通式(IB)化合物 其中A、R1-R5、R7和Y1-Y5具有上述指定含義，通式(V)化合物R6*-X(V)，其中R6*具有上述指定的R6的含義，但不代表氫，且X代表離去基團，如鹵素、甲苯磺酸酯、甲磺酸酯或硫酸酯。
另一方面，其中R4代表氰基、R5代表氨基和R6代表氫的通式(I)化合物可在酸存在下通過三種成分/一步反應(yīng)或者依次將通式(II)化合物、通式(IV)化合物和通式(VI)化合物縮合來制備。
NC-CH2-CN (VI)用于方法(II)+(III)/(VI)+(IV)→(IB)的合適溶劑一般為通常用的、在該反應(yīng)條件下不發(fā)生變化的有機溶劑。這些溶劑包括醚(如乙醚、異丙醚、1，2-二甲氧基乙烷、二噁烷或四氫呋喃)、乙酸乙酯、丙酮、乙腈、二甲亞砜、二甲基甲酰胺、醇(如甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇或叔丁醇)、烴(如戊烷、己烷、環(huán)己烷、苯、甲苯或二甲苯)或鹵代烴(如二氯甲烷、二氯乙烷、三氯甲烷或氯苯)。也可能使用上述溶劑的混合物。優(yōu)選用于該方法的溶劑為四氫呋喃。
用于方法(II)+(III)/(VI)+(IV)→(IB)的合適酸通常為無機酸或有機酸。這些酸優(yōu)選包括羧酸(如乙酸或三氟乙酸)、磺酸(如甲磺酸或?qū)?甲苯磺酸)、鹽酸或磷酸(如多磷酸)。優(yōu)選多磷酸乙酯。相對于1mol的通式(III)化合物，酸使用的量為0.25mol-100mol。
該方法通常于+20℃-+150℃、優(yōu)選+60℃-+100℃溫度范圍下進行。
該方法通常于常壓下進行。然而，也可能在加壓或減壓下進行(例如在0.5-5bar范圍)。
用于方法(IB)+(V)→(I)的合適溶劑通常為在該反應(yīng)條件下不發(fā)生變化的常規(guī)有機溶劑。這些溶劑包括醚(如乙醚、異丙醚、1，2-二甲氧基乙烷、二噁烷或四氫呋喃)、乙酸乙酯、丙酮、乙腈、二甲亞砜、二甲基甲酰胺、烴(如戊烷、己烷、環(huán)己烷、苯、甲苯或二甲苯)或鹵代烴(如二氯甲烷、二氯乙烷、三氯甲烷或氯苯)。也可能使用上述溶劑的混合物。優(yōu)選用于該方法的溶劑為四氫呋喃。
用于方法(IB)+(V)→(I)的合適堿通常為無機堿或有機堿。這些堿優(yōu)選包括環(huán)胺(如哌啶或4-N，N-二甲基氨基吡啶)、(C1-C4)-三烷基胺(如三乙基胺或二異丙基乙基胺)或氫化物(如氫化鈉)。優(yōu)選氫化鈉。相對于1mol通式(IV)化合物，堿使用的量為0.1mol-10mol，優(yōu)選1mol-3mol。
該方法通常在0℃-+150℃、優(yōu)選+20℃-+80℃尤其室溫下進行。
該方法通常在常壓下進行。然而，也可能在加壓或減壓下進行(例如0.5-5bar的范圍)。
通式(II)、(III)、(IV)、(V)和(VI)化合物本身為已知化合物，或它們可通過常規(guī)方法制備。
上述方法可用以下流程說明 本發(fā)明化合物表現(xiàn)出預(yù)料不到的、有效的藥理學(xué)和藥物代謝動力學(xué)活性范圍。因而它們適合用作治療和/或預(yù)防人和動物病癥的藥物。
出人意外的是，本發(fā)明化合物顯示出人嗜中性粒細胞彈性蛋白酶(HNE)抑制活性，因而適用于制備與HNE活性相關(guān)的疾病的治療藥物。因此它們可為以下急性和慢性炎性病變提供有效治療如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、動脈粥樣硬化；且尤其為以下急性、慢性肺病提供有效治療如肺纖維化、囊性纖維化、肺炎、急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)、特別是肺氣腫(包括吸煙-誘發(fā)的肺氣腫)和慢性阻塞性肺病(COPD)、慢性支氣管炎和支氣管擴張。本發(fā)明化合物還可為以下心血管缺血性疾病提供有效的治療如急性冠狀動脈綜合征、急性心肌梗塞、不穩(wěn)定性和穩(wěn)定性心絞痛、冠狀動脈旁路移植術(shù)(CABG)和心力衰竭發(fā)展，為動脈粥樣硬化、二尖瓣瓣膜病、房中隔缺損、經(jīng)皮腔內(nèi)冠狀動脈成形術(shù)(PTCA)、開放式心臟手術(shù)后炎癥以及為肺動脈高血壓提供有效的治療。它們也被證實可對以下疾病提供有效治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、急性炎性關(guān)節(jié)炎、癌癥、急性胰腺炎、潰瘍性結(jié)腸炎、牙周病、Chury-Strauss綜合證、急性和慢性異位性皮炎、銀屑病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、大皰性天皰瘡、膿毒癥、酒精性肝炎、肝纖維化、Behcet氏病、過敏性真菌鼻竇炎、過敏性鼻竇炎、節(jié)段性回腸炎、川畸病、腎小球性腎炎、急性腎孟腎炎、結(jié)腸直腸疾病、慢性化膿性中耳炎、慢性靜脈性腿潰瘍、腸炎、細菌性和病毒性感染、腦創(chuàng)傷、中風(fēng)和其它嗜中性粒細胞參與的病癥。
本發(fā)明還提供含有至少一種本發(fā)明化合物、優(yōu)選還有一種或多種藥理學(xué)安全的賦形劑或載體物質(zhì)的藥物，且也提供它們用于上述目的的用途。
活性成分可全身和/或局部地作用。為此目的，它可以合適的方式施用，例如經(jīng)口、經(jīng)腸胃外、經(jīng)肺、經(jīng)鼻、經(jīng)舌下、經(jīng)舌、經(jīng)口頰、經(jīng)直腸、經(jīng)皮、經(jīng)結(jié)膜、經(jīng)耳或作為植入劑施用。
對于這些施用途徑，活性成分可以合適的施用形式給藥。
有用的口服施用形式包括迅速和/或以改進方式釋放活性成分的施用形式，如片劑(非包衣片劑和包衣片劑，例如腸溶衣片劑)、膠囊劑、糖衣片劑、顆粒劑、丸劑、散劑、乳劑、混懸劑、溶液劑和氣霧劑。
腸胃外施用可避免吸收步驟(靜脈內(nèi)、動脈內(nèi)、心臟內(nèi)、脊柱內(nèi)或腰髓內(nèi))進行或包括吸收(肌內(nèi)、皮下、皮內(nèi)、透皮或腹膜內(nèi))進行。有用的腸胃外施用形式包括注射劑和溶液劑、混懸劑、乳劑、凍干劑和無菌粉劑形式的注入制劑。
適用于其它施用途徑的形式包括例如吸入性藥物形式(包括粉末吸入器、噴霧器)、鼻滴劑/溶液劑、噴霧劑；經(jīng)舌、舌下或口頰給藥的片劑或膠囊劑、栓劑、耳和眼制劑、陰道膠囊劑、含水混懸劑(洗劑、震蕩合劑)、親脂性混懸劑、乳膏劑、軟膏劑、乳劑(milk)、糊劑、撲粉劑或植入劑。
活性成分可用本身已知的方法轉(zhuǎn)化成敘述的施用形式。這通過使用惰性、無毒、適合藥用的賦形劑來完成。其中這些賦形劑包括載體(例如維晶纖維素)、溶劑(例如液體聚乙二醇)、乳化劑(例如十二烷基硫酸鈉)、分散劑(例如聚乙烯吡咯烷酮)、合成和天然的生物聚合物(例如白蛋白)、穩(wěn)定劑(例如抗氧化劑，如抗壞血酸)、著色劑(例如無機顏料，如氧化鐵)或味道和/或氣味矯味劑。
對于人用，在口服給藥的情況下，推薦給藥劑量為0.001-50mg/kg，優(yōu)選0.01mg/kg-20mg/kg。在腸胃外給藥的情況下，如靜脈內(nèi)或經(jīng)鼻粘膜、經(jīng)口頰或經(jīng)吸入給藥，推薦使用劑量為0.001mg/kg-0.5mg/kg。
盡管這樣，在一些情況下需要偏離所提及的量，即作為體重、施用途徑、對活性成分的個體行為、制劑方式和施用進行的時間或間隔的函數(shù)。例如，在一些情況下使用少于前述的最小量可能已足夠，而在其它情況將不得不超出前述量的上限。在施用較大的量的情況，可適當(dāng)將其分成一天內(nèi)的多個單劑量。
在以下試驗和實施例中，除非另外說明，否則百分比按重量計；份按重量計。溶劑比、稀釋比和報道的液體/液體溶液的濃度各自基于體積計。
A.生理活性評價例如，使用以下試驗可證明本發(fā)明化合物抑制嗜中性粒細胞彈性蛋白酶活性的活性I.人嗜中性粒細胞彈性蛋白酶(HNE)的體外酶試驗試驗內(nèi)容試驗緩沖液0.1M HEPES-NaOH緩沖液pH7.4，0.5M NaCl，0.1％(w/v)牛血清白蛋白；合適濃度(參見下面)的HNE(18U/mg親液物，#20927.01，SERVAElectrophoresis GmbH，Heidelberg，德國)的試驗緩沖液的溶液；合適濃度(參見下面)的底物的試驗緩沖液的溶液；合適濃度的由試驗緩沖液(來自10mM DMSO儲備溶液)稀釋的試驗化合物溶液。
實施例A使用熒光肽底物體外抑制HNE(連續(xù)讀出信號，384MTP測定方法)在該方案中，使用彈性蛋白酶底物MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC(#324740，Calbiochem-Novabiochem Corporation，Merck KgaA，Darmstadt，德國)。通過分別混合10μL試驗化合物稀釋液、20μL HNE酶稀釋液(最終濃度8-0.4μU/ml，通常為2.1μU/ml)和20μL底物稀釋液(最終濃度1mM-1μM，通常為20μM)制備供試溶液。所得溶液于37℃溫育0-2小時(通常為一小時)。于37℃測定由酶促反應(yīng)釋放的AMC的熒光(TECAN波譜熒光加板讀出器)。熒光(ex.395nm，em.460nm)增加的速率與彈性蛋白酶活性成比例。通過RFU-對-[I]作圖可確定IC50值。通過作Lineweaver-Burk圖可確定Km和Km(app.)值并通過Dixon圖轉(zhuǎn)化為Ki值。
在該試驗中，制備實施例化合物的IC50值在5nM-5μM范圍內(nèi)。代表性數(shù)據(jù)在表1中給出
表1
實施例B使用不溶性熒光彈性蛋白底物(間斷讀出信號，96MTP測定方法)體外抑制HNE在該方案中，使用彈性蛋白酶底物彈性蛋白-螢光素(#100620，ICN Biomedicals GmbH，Eschwege，德國)。通過混合3μL試驗化合物稀釋液、77μL HNE酶稀釋液(最終濃度0.22U/ml-2.2mU/ml，通常為21.7μU/ml)和80μL底物懸浮液(最終濃度為2mg/ml)制備供試溶液。所得懸浮液在輕微振搖的條件下于37℃溫育0-16小時(通常為四小時)。向供試溶液中加入160μL 0.1M的醋酸(最終濃度為50mM)以終止酶促反應(yīng)。通過離心沉降聚合的彈性蛋白-螢光素(Eppendorf 5804離心機，3.000rpm，10min)。上層清液轉(zhuǎn)移至新的MTP中，并測定由酶促反應(yīng)釋放的肽熒光素的熒光(BMG Fluostar板讀出器)。熒光(ex.490nm，em.520nm)的速率與彈性蛋白酶活性成比例。通過RFU-對-[I]作圖可確定IC50值。
II.人嗜中性粒細胞的體外試驗實施例APMN彈性組織離解體外試驗該試驗用于測定人多形核細胞(PMN)促彈性組織離解的潛力并評價由于嗜中性粒細胞彈性蛋白酶降解的比例[參見Z.W.She等，Am.J.Respir.Cell.Mol.Biol.9，386-392(1993)]。
溶于懸浮液中的氚標(biāo)記彈性蛋白以每孔10μg涂覆到96孔板上。將試驗化合物和對照化合物[ZD-0892(J.Med.Chem.40，1876-1885，3173-3181(1997)，WO 95/21855)和α1蛋白酶抑制劑(α1 PI)]以合適的濃度加入到孔中。從健康供體的外周靜脈血中分離出人PMN并懸浮于培養(yǎng)基中。將嗜中性粒細胞以每孔1×106-1×105個細胞的濃度加入到所涂覆的孔中。用豬胰彈性蛋白酶(1.3μM)作為該試驗的陽性對照，且用α1 PI(1.2μM)作為嗜中性粒細胞彈性蛋白酶的陽性抑制劑。細胞對照為以各自合適細胞密度的無化合物的PMN。將細胞和化合物在濕潤的恒溫箱中于37℃溫育4小時。將板離心以允許只收獲細胞上清液。將75μL體積上清液轉(zhuǎn)移至96孔LumaplateTM(含固體閃爍體的板)的相應(yīng)孔中。干燥板直至孔中無可見液體并用β-計數(shù)器對每孔閱讀三分鐘。
3H-彈性蛋白的彈性組織離解致使上清液中的讀數(shù)增加。與細胞對照比較，抑制該彈性組織離解則顯示上清液中的氚減少。在1.2μM(n＝3個不同供體，每孔3.6×105個細胞)，α1 PI產(chǎn)生83.46±3.97％(平均值±s.e.m.)的抑制。獲得參照化合物ZD-0892的IC50值為45.50±7.75nM(平均值±s.e.m.)(n＝2個不同供體，每孔3.6×105個細胞)。
已知ZD-0892為PMN彈性蛋白酶的選擇性抑制劑加上α1 PI抑制的數(shù)據(jù)結(jié)果，表明由PMN產(chǎn)生的彈性蛋白降解作用多數(shù)由于嗜中性粒細胞彈性蛋白酶的釋放而非由于另外促彈性組織離解酶如基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)。評價本發(fā)明化合物對這種HNE-依賴型嗜中性粒細胞彈性組織離解的抑制活性。
實施例B膜結(jié)合彈性蛋白酶的體外抑制使用人嗜中性粒細胞的試驗方法對結(jié)合到嗜中性粒細胞膜的彈性蛋白酶的抑制作用進行測定。于37℃用LPS刺激嗜中性粒細胞35min，然后以1600rpm離心。接著，將膜結(jié)合彈性蛋白酶用3％多聚甲醛和0.25％戊二醛于4℃固定到嗜中性粒細胞上3min。然后離心該嗜中性粒細胞，并加入溶媒和待評價的化合物，隨后以200μM加入底物MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC(#324740，Calbiochem-Novabiochem Corporation，Merck KgaA，Darmstadt，Germany)。接著于37℃溫育25min，用PMSF(苯甲磺酰氟)終止反應(yīng)，并于ex；400nm和em505nm讀出熒光。自相對熒光對抑制劑濃度所作圖中用內(nèi)插法確定IC50值。
III.體內(nèi)模型實施例A大鼠急性肺損傷體內(nèi)模型將人嗜中性粒細胞彈性蛋白酶(HNE)滴注入大鼠肺引起急性肺損傷。損傷程度可通過測定肺出血來評價。
用Hypnorm/Hypnovel/水麻醉大鼠并通過微型噴霧器釋放將HNE或生理鹽水滴注入肺中。給予HNE前，試驗化合物在設(shè)定時間經(jīng)靜脈注射、經(jīng)口管飼或經(jīng)吸入給予。給予彈性蛋白酶60分鐘后用過量的麻醉劑(戊巴比妥鈉)處死動物，并用2ml肝素化磷酸緩沖鹽溶液(PBS)灌洗肺。記錄支氣管肺泡灌洗(BAL)體積并將樣品放置于冰上保存。各BAL樣品于4-10℃以900r.p.m.離心10分鐘。棄去上清液并將細胞片狀沉淀物重新懸浮于PBS中并將樣品再次離心沉淀。再次棄去上清液并將細胞片狀沉淀物重新懸浮于1ml的0.1％十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)/PBS以溶解細胞。將樣品冷凍直至測定血含量時取出。在測定出血之前將樣品解凍并混合。每個樣品取100μl置入到96孔平底板中的單獨孔中。所有樣品均一式兩份測定。包括用100μl的0.1％CTAB/PBS作為空白。用分光光度計于415nm處測定孔中物質(zhì)的吸光度。通過測定不同濃度的血的0.1％CTAB/PBS溶液在415nm的OD值來建立標(biāo)準曲線。血含量的值通過與標(biāo)準曲線(包括在各板內(nèi))比較計算得出，且對于回收的BAL流體體積使其標(biāo)準化。
本發(fā)明化合物經(jīng)靜脈內(nèi)、經(jīng)口或經(jīng)吸入評價它們在該大鼠HNE-誘導(dǎo)的出血模型中的抑制活性。
實施例B大鼠急性心肌梗塞的體內(nèi)模型在大鼠穿線梗塞模型中測試彈性蛋白酶抑制劑。將10mg/kg阿司匹林于手術(shù)前30min給予雄性Wistar大鼠(重量＞300g)。用異氟烷(isofluran)麻醉并在整個手術(shù)過程中通氣(120-130博/min，200-250μL每搏輸出量；MiniVent Type 845，Hugo Sachs Elektronik，德國)。接著于左側(cè)第四根肋間隙進行胸廓切開術(shù)，打開心包并將心臟暫時取出。用線繞左冠狀動脈(LAD)包扎但不使動脈閉合。將這根線從皮下穿過到達動物頸部。閉合胸腔并讓動物復(fù)原4天。第五天，用乙醚麻醉大鼠3min，將線打結(jié)并于ECG控制下將LAD閉合。試驗化合物于LAD閉合前或閉合后經(jīng)口、經(jīng)腹膜內(nèi)或經(jīng)靜脈內(nèi)(一次性大容量注射或連續(xù)輸注)給予。閉合1小時后，將線重新打開以進行再灌注。切除心臟，并于48小時后通過以伊文思藍對重閉合的心臟染色，接著用TTC(氯化三苯基四唑鎓)對2mm的心臟切片染色測定梗塞大小。含氧量正常的(沒有閉合的組織)區(qū)域染成藍色，局部缺血的(閉合但存活的組織)區(qū)域染成紅色而壞死的(閉合的死組織)區(qū)域仍為白色。掃描每塊組織切片并用計算機求積法確定梗塞大小。
B.實施例縮寫aq. 水溶液conc.濃縮的DMF N，N-二甲基甲酰胺DMSO 二甲亞砜EI 電子轟擊電離(用于MS)ESI 電噴霧電離(用于MS)HPLC 高壓液相色譜LC-MS液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用Mp. 熔點MS 質(zhì)譜NMR 核磁共振波普Ofth.理論(產(chǎn)率)的Rt保留時間(用于HPLC)THF 四氫呋喃通用方法除非另外指明，否則所有反應(yīng)均在氬氣氣氛下進行。使用的溶劑均購自Aldrich沒有進一步純化?！肮枘z”或“二氧化硅”是指來自Merck KGaA公司的硅膠60(0.040mm-0.063mm)。熔點的測定采用Büchi 512或類似的測熔點裝置，并且未校正。
化合物通過制備型HPLC純化，經(jīng)RP18-柱用乙腈和水為洗脫液純化，采用1∶9-9∶1的梯度。
LC-MS/HPLC方法LC-MS方法1儀器Micromass Quattro LCZ，HP 1100；柱Uptisphere HDO，50mm×2.0mm，3μm；洗脫液A水+0.05％甲酸，洗脫液B乙腈+0.05％甲酸；梯度0.0min 100％A→0.2min 100％A→2.9min 30％A→3.1min 10％A→4.5min 10％A；烘箱55℃；流速0.8ml/min；UV-檢測208-400nm。
LC-MS方法2儀器Waters Alliance 2790 LC；柱Symmetry C18，50mm×2.1mm，3.5μm；洗脫液A水+0.1％甲酸，洗脫液B乙腈+0.1％甲酸；梯度0.0min 5％B→5.0min 10％B→6.0min 10％B；溫度50℃；流速1.0ml/min；UV-檢測210nm。
LC-MS方法3儀器Micromass Platform LCZ，HP1100；柱Aquasil C-18，50mm×2.0mm，3μm；洗脫液A水+0.05％甲酸，洗脫液B乙腈+0.05％甲酸；梯度0.0min 100％A→0.2min 100％A→2.9min 30％A→3.1min 10％A→4.5min 10％A；烘箱55℃；流速0.8ml/min；UV-檢測208-400nm。
HPLC方法4儀器HP 1100帶DAD-檢測器；柱Kromasil RP-18，60mm×2mm，3.5μm；洗脫液A＝5ml HClO4/1H2O，B＝乙腈；梯度0min 2％B，0.5min 2％B，4.5min 90％B，6.5min 90％B；流速0.75ml/min；溫度30℃；UV-檢測210nm。
LC-MS方法5儀器Micromass TOF-MUX-界面4-次(fold)平行注射，和HPLCWaters 600；柱Uptisphere HDO，50mm×2.0mm，3.0μm；洗脫液A11水+1ml 50％甲酸，洗脫液B11乙腈+1ml 50％甲酸；梯度0.0min100％A→0.2min 100％A→2.9min 30％A→3.1min 10％A→4.5min 10％A→4.6min 100％A→6.5min 100％A；烘箱室溫；流速0.8ml/min；UV-檢測210nm。
LC-MS方法6儀器Micromass Platform LCZ和HPLC Agilent系列1100；柱Grom-SIL120 ODS-4 HE，50mm×2.0mm，3μm；洗脫液A11水+1ml50％甲酸，洗脫液B11乙腈+1ml 50％甲酸；梯度0.0min 100％A→0.2min 100％A→2.9min 30％A→3.1min 10％A→4.5min 10％A；烘箱55℃；流速0.8ml/min；UV-檢測208-400nm。
LC-MS方法7儀器Micromass Quattro LCZ和HPLC Agilent系列1100；柱Uptisphere HDO，50mm×2.0mm，3μm；洗脫液A11水+1ml 50％甲酸，洗脫液B11乙腈+1ml 50％甲酸；梯度0.0min 100％A→0.2min 100A→2.9min 30％A→3.1min 10％A→4.5min 10％A；烘箱55℃；流速0.8ml/min；UV-檢測208-400nm。
起始原料實施例1A2-溴-5-(1，3-二氧戊環(huán)-2-基)吡啶 將6-溴-3-吡啶甲醛(500mg，2.7mmol)和1，2-乙二醇(200mg，3.2mmol)溶于甲苯(50ml)中，與大孔樹脂(Amberlyst)15(100mg)一起加至裝有回流冷凝器和Dean-Stark分水器的圓底燒瓶中。該溶液于回流下攪拌過夜，然后冷卻至室溫，過濾并真空濃縮。將該粗品以環(huán)己烷和乙酸乙酯為洗脫液經(jīng)硅膠層析，得到題述化合物，為無色油狀物。
產(chǎn)率0.489g(理論產(chǎn)率的79％)HPLC(方法4)3.46min.
MS(ESIpos)m/z＝231(M+H)+1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ＝8.46(d，1H)，7.64(m，1H)，7.49(m，1H)，4.15-4.00(m，4H)ppm.
實施例2A5-(1，3-二氧戊環(huán)-2-基)-2-吡啶甲腈 將實施例1A(2.8g，12.5mmol)、氰化鋅(1.6g，13.8mmol)和四-(三苯基膦)合鈀(O)(1.4g，1.3mmol)溶于二甲基甲酰胺(100ml)中并于80℃攪拌過夜(18h)。再加入四-(三苯基膦)合鈀(O)(0.1g)并將反應(yīng)再于80℃攪拌過夜(18h)，然后室溫放置2天(48小時)。真空除去溶劑，向殘渣中加入水(100ml)并用乙酸乙酯(1L)萃取產(chǎn)物。用鹽水(200ml)洗滌有機相，用硫酸鎂一水合物干燥，過濾并真空濃縮。將該粗品以環(huán)己烷和乙酸乙酯為洗脫液經(jīng)硅膠層析，得到題述化合物，為白色無定形固體。
產(chǎn)率0.94g(理論產(chǎn)率的42％)HPLC(方法4)3.21min.
MS(ESIpos)m/z＝177(M+H)+1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝8.81(s，1H)，8.09(s，2H)，5.95(s，1H)，4.13-3.94(m，4H)ppm.
實施例3A5-甲?；?2-吡啶甲腈 方法A)用類似于Dodd，D.等[J.Org.Chem.1992，57，7226-7234]的方法制備向攪拌下的5-(1，3-二氧戊環(huán)-2-基)-2-吡啶甲腈(實施例2A；850mg，4.8mmol)的丙酮/水(85∶15，59.5ml)溶液中加入對甲苯磺酸(102mg，0.59mmol)。將反應(yīng)在回流下攪拌過夜(18h)，然后再加入對甲苯磺酸(50mg)和水(5ml)。將反應(yīng)在回流下再攪拌48h。將該溶液冷卻至室溫并用飽和碳酸氫鈉溶液猝滅。用乙酸乙酯(3×100ml)萃取產(chǎn)物，用硫酸鎂一水合物干燥，過濾并真空濃縮。將該粗品用制備型HPLC純化，得到淡黃色固體。
產(chǎn)率0.66g(理論產(chǎn)率的93％)
熔點80-82℃HPLC(方法4)2.13min.
MS(ESIpos)m/z＝133(M+H)+1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝10.18(s，1H)，9.21(m，1H)，8.49(m，1H)，8.27(m，1H)ppm.
方法b)將1.04g(8.2mmol)草酰氯溶于8ml二氯甲烷中。于-78℃滴加入1.28g(16.4mmol)二甲亞砜。將該溶液于-78℃攪拌20分鐘，然后加入1g(7.46mmol)實施例5A化合物溶于7ml二氯甲烷的溶液，并于-78℃再連續(xù)攪拌2小時。然后滴加入3.4g(33.6mmol)三乙胺，升溫至室溫后，柱層析純化該混合物(二氧化硅，洗脫液為環(huán)己烷至環(huán)己烷/乙酸乙酯2∶1)。
產(chǎn)率0.76g(理論產(chǎn)率的77％)數(shù)據(jù)分析見上。
實施例4A5-甲基-2-吡啶甲腈 將36g(209mmol)2-溴-5-甲基吡啶和37.5g(418mmol)氰化銅于500ml二甲基甲酰胺中回流兩小時。冷卻到50℃后，攪拌下加入10％氨水溶液(500ml)。用二氯甲烷萃取產(chǎn)物，有機相用硫酸鎂干燥并真空除去溶劑。用柱層析(二氧化硅，洗脫液∶環(huán)己烷/乙酸乙酯9∶1)純化產(chǎn)物。
產(chǎn)率18g(理論產(chǎn)率的73％)
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ＝2.4(s，3H)，7.6(m，2H)，8.6(s，1H)ppm.
實施例5A5-(羥甲基)-2-吡啶甲腈 將實施例4A化合物(13g，110mmol)溶于400ml四氯化碳中，并加入29.4g(165mmol)N-溴代琥珀酰亞胺和0.4g(1.6mmol)過氧化二苯甲酰。反應(yīng)混合物回流三小時，冷卻至室溫并過濾。用硫代硫酸鈉水溶液洗滌該溶液，硫酸鎂干燥，并真空除去溶劑。將殘渣溶于200ml二噁烷和200ml水中，加入碳酸鈣(44g，440mmol)，并將該混合物于回流下攪拌2小時。冷卻至室溫后，過濾該混合物，并加入二氯甲烷。相分離后，有機相用硫酸鎂干燥，并真空除去溶劑。用柱層析(二氧化硅，洗脫液∶環(huán)己烷/乙酸乙酯2∶1)純化產(chǎn)物。
產(chǎn)率5.2g(理論產(chǎn)率的35％)1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝4.7(d，2H)，5.6(t，1H)，8.0(m，2H)，8.7(s，1H)ppm.
制備實施例實施例14-(4-氰基苯基)-6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸乙酯 將7.0g(34.29mmol)N-[3-(三氟甲基)苯基]脲、8.99g(68.58mmol)4-氰基苯甲醛、8.92g(68.58mmol)3-氧代丁酸乙酯和20g多磷酸乙酯懸浮于250ml THF中。該混合物于回流下攪拌18小時。冷卻至室溫后，真空除去溶劑，并以環(huán)己烷/乙酸乙酯為洗脫液用二氧化硅柱層析純化殘渣。
產(chǎn)率13.4g(91％)1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝1.1(t，3H)；2.0(s，3H)；4.0(q，2H)；5.4(d，1H)；7.6(m，3H)；7.7(m，3H)；7.9(m，2H)；8.4(d，1H)ppm.
實施例24-{5-乙酰基-6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-4-嘧啶基}苯甲腈 將265mg(1.3mmol)N-[3-(三氟甲基)苯基]脲、131mg(1.0mmol)4-氰基苯甲醛和100mg(1.0mmol)2，4-戊二酮懸浮于2ml THF中，并加入催化量的濃鹽酸。該混合物于回流下攪拌18小時。冷卻至室溫后，真空除去溶劑并以環(huán)己烷/乙酸乙酯為洗脫液用二氧化硅柱層析純化殘渣。
產(chǎn)率29mg(7％)1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝2,0(s，3H)；2.2(s，3H)；5.5(d，1H)；7.5(m，1H)；7.6(m，3H)；7.7(m，1H)；7.8(m，1H)；7.9(m，2H)；8.5(d，1H)ppm.
實施例34-(4-溴苯基)-6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸乙酯 將204mg(1.0mmol)N-[3-(三氟甲基)苯基]脲、142mg(0.77mmol)4-溴苯甲醛和100mg(0.77mmol)3-氧代丁酸乙酯懸浮于2ml THF中，并加入催化量的濃鹽酸。該混合物于回流下攪拌18小時。冷卻至室溫后，真空除去溶劑并以環(huán)己烷/乙酸乙酯為洗脫液用二氧化硅柱層析純化殘渣。
產(chǎn)率23mg(6％)1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝1.1(t，3H)；2.0(s，3H)；4.0(q，2H)；5.3(d，1H)；7.4(m，2H)；7.6(m，3H)；7.7(m.3H)；8.3(d.1H)ppm.
實施例44-(4-氰基苯基)-6-甲基-2-氧代-1-[4-氟苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸乙酯 將154mg(1.0mmol)N-[4-氟苯基]脲、101mg(0.77mmol)4-氰基苯甲醛和100mg(0.77mmol)3-氧代丁酸乙酯懸浮于2ml THF中，并加入催化量的濃鹽酸。該混合物于回流下攪拌18小時。冷卻至室溫后，真空除去溶劑并以環(huán)己烷/乙酸乙酯為洗脫液用二氧化硅柱層析純化殘渣。
產(chǎn)率40mg(14％)1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝1.1(t，3H)；2.0(s，3H)；4.0(q，2H)；5.3(d，1H)；7.3(m，4H)；7.5(m，2H)；7.9(m，2H)；8.3(d，1H)ppm.
實施例54-(4-氰基苯基)-6-甲基-2-氧代-1-[3-氯苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸乙酯 將170mg(1.0mmol)N-[3-氯苯基]脲、100mg(0.77mmol)4-氰基苯甲醛和100mg(0.77mmol)3-氧代丁酸乙酯懸浮于2ml THF中，并加入催化量的濃鹽酸。該混合物于回流下攪拌18小時。冷卻至室溫后，真空除去溶劑并以環(huán)己烷/乙酸乙酯為洗脫液用二氧化硅柱層析純化殘渣。
產(chǎn)率13mg(4％)1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝1.1(t，3H)；2.1(s，3H)；4.0(q，2H)；5.3(d，1H)；7.2(m，1H)；7.4(m，3H)；7.5(m，2H)；7.9(m，2H)；8.3(d，1H)ppm.
實施例64-(4-氰基苯基)-6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸(1S)-2-甲氧基-1-甲基-2-氧代乙基酯 將200mg(0.98mmol)N-[3-(三氟甲基)苯基]脲、129mg(0.98mmol)4-氰基苯甲醛、92mg(0.49mmol)3-氧代丁酸(1S)-2-甲氧基-1-甲基-2-氧代乙基酯和295mg多磷酸乙酯懸浮于3ml THF中。該混合物于回流下攪拌18小時。冷卻至室溫后，真空除去溶劑并以環(huán)己烷/乙酸乙酯為洗脫液用二氧化硅柱層析純化殘渣。得到非對映異構(gòu)體混合物。
產(chǎn)率96mg(40％)1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝1.3(d，3H)；1.4(d，3H)；2.0(s，3H+3H)；3.6(s，3H)；3.6(s，3H)；5.0(m，1H+1H)；5.4(m，1H+1H)；7.6-7.9(m，8H+8H)；8.4(m，1H+1H)ppm.
實施例74-{6-甲基-5-(4-嗎啉基羰基)-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-4-嘧啶基}苯甲腈 將150mg(0.73mmol)N-[3-(三氟甲基)苯基]脲、96mg(0.73mmol)4-氰基苯甲醛、63mg(0.37mmol)4-(4-嗎啉基)-4-氧代-2-丁酮和220mg多磷酸乙酯懸浮于3ml THF中。該混合物于回流下攪拌18小時。冷卻至室溫后，真空除去溶劑并以二氯甲烷/甲醇為洗脫液用二氧化硅柱層析純化殘渣。
產(chǎn)率28mg(16％)1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝1.5(s，3H)；3.1(m，4H)；3.6(m，4H)；5.3(br.s，1H)；7.6(m，2H)；7.7(m，1H)；7.8(m，2H)；7.9(m，2H)；8.0(br.s，1H)ppm.
實施例84-(4-氰基苯基)-N，N-二乙基-6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酰胺 將200mg(0.98mmol)N-[3-(三氟甲基)苯基]脲、128mg(0.98mmol)4-氰基苯甲醛、77mg(0.49mmol)4-(4-二乙基氨基)-4-氧代-2-丁酮和295mg多磷酸乙酯懸浮于3ml THF中。該混合物于回流下攪拌18小時。冷卻至室溫后，真空除去溶劑并以二氯甲烷/甲醇為洗脫液用二氧化硅柱層析純化殘渣。
產(chǎn)率106mg(47％)1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝0.9(m，6H)；3.1(m，4H)；5.2(br.s，1H)；7.6(m，2H)；7.7(m，1H)；7.8(m，2H)；7.9(m，2H)；8.0(brs，1H)ppm.
實施例96-氨基-4-(4-氰基苯基)-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲腈 將400mg(1.97mmol)N-[3-(三氟甲基)苯基]脲、199mg(1.51mmol)4-氰基苯甲醛和100mg(1.51mmol)丙二腈懸浮于2ml THF中，并加入催化量的濃鹽酸。該混合物于回流下攪拌18小時。冷卻至室溫后，真空除去溶劑并以二氯甲烷/甲醇為洗脫液用二氧化硅柱層析純化殘渣。
產(chǎn)率4mg(1％)1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝5.2(d，1H)；6.0(s，2H)；7.6(m，3H)；7.7(m，2H)；7.8(m，1H)；7.9(m，2H)8.4(d，1H)ppm.
實施例104-(4-氰基苯基)-3-甲?；?6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸乙酯 將100mg(0.23mmol)實施例1化合物溶于1ml二甲基甲酰胺中，并加入35.7mg(0.23mmol)磷酰氯。該反應(yīng)混合物于70℃攪拌兩小時。冷卻至室溫后，產(chǎn)物用制備型HPLC分離。
產(chǎn)率43mg(41％)1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝1.1(t，3H)；2.1(s，3H)；4.1(q，2H)；6.4(s，1H)；7.6(m，2H)；7.7(m，1H)；7.8(m，1H)；7.9(m，4H)；9.2(s，1H)ppm.
實施例114-(4-氰基苯基)-6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸
將3g(7mmol)的實施例1化合物溶于50ml水和100ml 5％KOH的乙醇溶液的混合物中。該反應(yīng)混合物于室溫攪拌18小時。真空除去溶劑并以二氯甲烷/甲醇為洗脫液用二氧化硅柱層析純化殘渣。
產(chǎn)率1.27g(45％)1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝2.0(s，3H)；5.4(d，1H)；7.6(m，1H)；7.6(m，2H)；7.7(m，1H)；7.8(m，1H)；7.9(m，3H)；8.3(d，1H)；12.5(s，1H)ppm.
實施例124-(4-氰基苯基)-6-甲基-2-氧代-N-丙基-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酰胺 將40mg(0.1mmol)的實施例11化合物溶于2ml二甲基甲酰胺中，并加入7mg(0.11mmol)正丙胺、15mg(0.11mmol)1-羥基-1H-苯并三唑水合物和12mg(0.1mmol)4-二甲基氨基吡啶。該反應(yīng)混合物于0℃攪拌，然后加入21mg(0.11mmol)鹽酸1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺。該反應(yīng)混合物于室溫攪拌18小時，然后加入水和乙酸乙酯。有機相用飽和KHSO4水溶液、水和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)至干。如需要，產(chǎn)物用柱層析或制備型HPLC進一步純化。
產(chǎn)率29mg(66％)
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝0.7(t，3H)；1.3(sext，2H)；1.7(s，3H)；3.0(q，2H)；5.4(d，1H)；7.6(m，3H)；7.7(m，2H)；7.8(m，2H)；7.9(m，1H)；8.1(d，1H)ppm.
實施例134-(4-氰基苯基)-N-(2-甲氧基乙基)-6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酰胺 將48mg(0.12mmol)的實施例11化合物溶于2ml二甲基甲酰胺中，加入10mg(0.13mmol)2-甲氧基乙胺、18mg(0.13mmol)1-羥基-1H-苯并三唑水合物和15mg(0.12mmol)4-二甲基氨基吡啶。該反應(yīng)混合物于0℃攪拌，然后加入25mg(0.13mmol)鹽酸1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺。該反應(yīng)混合物于室溫攪拌18小時，然后加入水和乙酸乙酯。有機相用飽和KHSO4溶液、水和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)至干。如需要，產(chǎn)物用柱層析或制備型HPLC進一步純化。
產(chǎn)率22mg(40％)1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝1.7(s，3H)；3.2(s，3H)；3.3(m，4H)；5.4(d，1H)；7.6(m，3H)；7.7(m，3H)；7.9(m，2H)；8.1(m，1H)ppm.
實施例144-(4-氰基苯基)-3，6-二甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸乙酯 將89mg(0.21mmol)的實施例1化合物加入到12.4mg(0.31mmol)60％氫化鈉(在礦物油中)的2ml THF的懸浮液中。該混合物于室溫攪拌兩小時。然后加入26mg(0.21mmol)硫酸二甲酯，并將該混合物于室溫再攪拌兩小時。然后加入水和乙酸乙酯，有機相用水和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)至干。如需要，產(chǎn)物用柱層析或制備型HPLC進一步純化。
產(chǎn)率85mg(93％)1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝1.1(t，3H)；2.0(s，3H)；2.8(s，3H)；4.0(q，2H)；5.5(s，1H)；7.6(m，3H)；7.7(m，1H)；7.8(m，2H)；7.9(m，2H)ppm.
實施例153-乙?；?4-(4-氰基苯基)-6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸乙酯 將100mg(0.23mmol)的實施例1化合物加入到12mg(0.28mmol)60％氫化鈉(在礦物油中)的2ml THF的懸浮液中。該混合物于室溫攪拌兩小時。然后加入91mg(1.16mmol)乙酰氯，并將該混合物于室溫再攪拌兩小時。然后加入水和乙酸乙酯，有機相用水和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)至干。如需要，產(chǎn)物用柱層析或制備型HPLC進一步純化。
產(chǎn)率93mg(85％)1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝1.2(t，3H)；2.1(s，3H)；2.5(s，3H)；4.2(m，2H)；6.7(s，1H)；7.4(m，1H)；7.5(m，2H)；7.6(m，1H)；7.7(m，1H)；7.8(m，1H)；7.9(m，2H)ppm.
實施例166-(4-氰基苯基)-4-甲基-2-氧代-3-[3-(三氟甲基)苯基]-3，6-二氫-1，5(2H)-嘧啶二甲酸二乙酯 將100mg(0.23mmol)的實施例1化合物加入到12mg(0.28mmol)60％氫化鈉(在礦物油中)的2ml THF的懸浮液中。該混合物于室溫攪拌兩小時。然后加入126mg(1.16mmol)氯碳酸乙酯，并將該混合物于室溫再攪拌兩小時。然后加入水和乙酸乙酯，有機相用水和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)至干。如需要，產(chǎn)物用柱層析或制備型HPLC進一步純化。
產(chǎn)率92mg(79％)1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝1.2(t，3H；t，3H)；2.1(s，3H)；4.2(m，2H)；4.3(q，2H)；6.4(s，1H)；7.4(m，1H)；7.5(m，3H)；7.7(m，1H)；7.8(m，1H)；7.9(m，2H)ppm.
實施例174-(4-氰基苯基)-6-甲基-1-(3-甲基苯基)-2-氧代-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸乙酯 將150mg(1.0mmol)N-[3-甲基苯基]脲、101mg(0.77mmol)4-氰基苯甲醛和100mg(0.77mmol)3-氧代丁酸乙酯懸浮于2ml THF中，并加入催化量的濃鹽酸。該混合物于回流下攪拌18小時。冷卻至室溫后，真空除去溶劑并以環(huán)己烷/乙酸乙酯為洗脫液用二氧化硅柱層析純化殘渣。
產(chǎn)率8mg(3％)1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝1.1(t，3H)；2.0(s，3H)；2.3(s，3H)；4.0(q；2H)；5.3(d，1H)；7.0(m，2H)；7.2(m，1H)；7.3(m，1H)；7.6(m，2H)；7.9(m，2H)；8.2(d，1H)ppm.
實施例184-(4-氯苯基)-6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸乙酯 將204mg(1.0mmol)N-[3-(三氟甲基)苯基]脲、108mg(0.77mmol)4-氯苯甲醛和100mg(0.77mmol)3-氧代丁酸乙酯懸浮于2ml THF中，并加入催化量的濃鹽酸。該混合物于回流下攪拌18小時。冷卻至室溫后，真空除去溶劑并以環(huán)己烷/乙酸乙酯為洗脫液用二氧化硅柱層析純化殘渣。
產(chǎn)率29mg(9％)1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝1.1(t，3H)；2.0(s，3H)；4.0(q，2H)；5.3(d，1H)；7.5(m，5H)；7.6(m，1H)；7.7(m，2H)；8.3(d，1H)ppm.
實施例196-(溴甲基)-4-(4-氰基苯基)-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸乙酯 將3g(7mmol)的實施例1化合物溶于100ml氯仿中。于0℃滴加入558mg(3.48mmol)溴。該混合物于室溫攪拌兩小時，然后真空除去溶劑。以環(huán)己烷/乙酸乙酯為洗脫液用二氧化硅柱層析純化殘渣。
產(chǎn)率3.2g(90％)1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝1.1(t，3H)；4.0(q，2H，d，1H)；4.6(br d，1H)；5.4(d，1H)；7.6(m，3H)；7.7(m，2H)；7.8(m，1H)，7.9(m，2H)；8.6(d，1H)ppm.
實施例204-(4-氰基苯基)-6-[(二乙基氨基)甲基]-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸乙酯
將20mg(0.04mmol)的實施例19化合物溶于2ml丙酮中，并加入8mg(0.10mmol)二乙胺。該混合物于室溫攪拌18小時，然后真空除去溶劑。用制備型HPLC純化殘渣。
產(chǎn)率15mg(75％)1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝0.6(t，6H)；1.1(t，3H)；2.0(m，2H)；2.2(m，2H)；3.1(br d，1H)；3.9(br d，1H)；4.1(q，2H)；5.4(d，1H)；7.5(m，1H)；7.6(m，4H)；7.7(m，1H)；7.9(m，2H)ppm.
實施例216-(苯胺基甲基)-4-(4-氰基苯基)-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸乙酯 將50mg(0.10mmol)的實施例19化合物溶于2ml丙酮中，并加入18mg(0.20mmol)苯胺。該混合物于室溫攪拌18小時，然后真空除去溶劑。用制備型HPLC純化殘渣。
產(chǎn)率28mg(55％)1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝1.1(t，3H)；3.6(d/d，1H)；4.1(q，2H)；4.4(d/d，1H)；5.4(m，2H)；6.2(m，2H)；6.5(m，1H)；6.9(m，2H)；7.6(m，6H)；7.9(m，2H)；8.4(d，1H)ppm.
實施例22(+)-4-(4-氰基苯基)-6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸乙酯 用制備型HPLC以手性相分離實施例1的對映異構(gòu)體將100mg化合物溶于1.5ml乙酸乙酯中，柱KBD 8361(基于單體N-異丁烯?；?L-亮氨酸-1-_基酰胺的手性硅膠選擇器，參見EP-A-379917)，250mm×20mm，洗脫液乙酸乙酯，流速25ml/min，溫度23℃，進樣體積2500μl，檢測254nm。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝1.1(t，3H)；2，0(s，3H)；4.0(q，2H)；5.4(d，1H)；7.6(m，3H)；7.7(m，2H)；7.8(m，1H)；7.9(m，2H)；8.4(d，1H)ppm.20＝+3.3°(λ＝589nm，二氯甲烷，c＝535.0mg/100ml)
實施例23(-)-4-(4-氰基苯基)-3，6-二甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸乙酯 將100mg(0.23mmol)的實施例22化合物加入到14mg(0.35mmol)60％氫化鈉(在礦物油中)的2ml THF的懸浮液中。該混合物于室溫攪拌兩小時。然后加入29mg(0.23mmol)硫酸二甲酯，并將該混合物于室溫再攪拌兩小時。然后加入水和乙酸乙酯，有機相用水和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)至干。產(chǎn)物以環(huán)己烷/乙酸乙酯為洗脫液用二氧化硅柱層析純化。
產(chǎn)率76mg(74％)1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝1.1(t，3H)；2.0(s，3H)；2.8(s，3H)；4.0(q，2H)；5.5(s，1H)；7.6(m，3H)；7.7(m，1H)；7.8(m，2H)；7.9(m，2H)ppm.20＝-18.1°(λ＝589nm，二氯甲烷，c＝530.0mg/100ml)
實施例244-(6-氰基-3-吡啶基)-6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸乙酯 向攪拌著的實施例3A化合物(76mg，0.58mmol)的四氫呋喃(5ml)溶液中加入3-氧代丁酸乙酯(75mg，0.58mmol)、N-[3-(三氟甲基)苯基]脲(118mg，0.58mmol)和多磷酸乙酯(200mg；依照Cava等，J.Org.Chem.1969，34，2665的方法新鮮制備)。該反應(yīng)混合物回流兩天(48小時)，然后該溶液用DMSO(2ml)稀釋并用制備型HPLC純化。真空濃縮產(chǎn)物份并以環(huán)己烷/乙酸乙酯為洗脫液再次二氧化硅柱層析。
產(chǎn)率92mg(理論產(chǎn)率的35％)MS(ESIpos)m/z＝431(M+H)+HPLC(方法4)＝4.63min1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝8.76(s，1H)，8.36(d，1H)，8.16-8.00(m，2H)，7.83-7-74(m，2H)，7.75-7.58(m，2H)，5.47(d，1H)，4.03(四重峰，2H)，2.06(s，3H)，1.08(t，3H)ppm.
實施例254-{5-(1H-咪唑-1-基羰基)-6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-4-嘧啶基}苯甲腈 向501mg(1.25mmol)實施例11化合物的5ml無水二甲基甲酰胺溶液中加入567mg(3.5mmol)N，N-羰基二咪唑。將該反應(yīng)混合物放置過夜后，真空蒸發(fā)掉溶劑。所得殘渣用乙酸乙酯溶解并用水和鹽水洗滌。用硫酸鎂干燥后，真空蒸發(fā)掉溶劑。
產(chǎn)率500mg(理論產(chǎn)率的88.6％)MS(EI)m/z＝452(M+H)+1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝1.40(d，3H)，5.5(d，1H)，7.0(s，1H)，7.55-8.0(m，9H)，8.4(s，1H)，8.45(d，1H)ppm.
實施例264-(4-氰基苯基)-6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸2-羥基乙酯 將45.1mg(0.1mmol)實施例25化合物加入到0.5ml乙二醇中。該反應(yīng)混合物于約100℃攪拌1小時。冷卻后，該反應(yīng)混合物用制備型HPLC純化(柱Agilent Zorbax Extend C18 20mm×50mm，5μm；溶劑A乙腈，溶劑B水+0.1％濃氨水；梯度0min 10％A，2min 10％A，6min 90％A，7min 90％A，7.1min 10％A，8min 10％A；波長220nm；進樣體積約500μl；進樣次數(shù)1)。合并含產(chǎn)物份并真空濃縮。
產(chǎn)率22mg(理論產(chǎn)率的49.4％)MS(EI)m/z＝446(M+H)+1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝2.05(d，3H)，3.5(四重峰，2H)，3.95-4.15(m，2H)，4.75(tr，1H)，5.45(d，1H)，7.55-7.75(m，5H)，7.75(d，1H)，7.85(d，2H)，8.35(d，1H)ppm.
實施例274-(4-氰基苯基)-6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸2-(二甲基氨基)乙基酯 將45.1mg(0.1mmol)實施例25化合物加入到0.5ml 2-(二甲基氨基)乙醇中。該反應(yīng)混合物于約100℃攪拌1小時。冷卻后，該反應(yīng)混合物用制備型HPLC純化(柱Agilent Zorbax Extend C18 20mm×50mm，5μm；溶劑A乙腈，溶劑B水+0.1％濃氨水；梯度0min 10％A，2min 10％A，6min 90％A，7min 90％A，7.1min 10％A，8min 10％A；波長220nm；進樣體積約500μl；進樣次數(shù)1)。合并含產(chǎn)物的份并真空濃縮。
產(chǎn)率24mg(理論產(chǎn)率的50.8％)MS(EI)m/z＝473(M+H)+1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝2.05(d，3H)，2.1(s，6H)，2.4(m，2H)，4.1(m，2H)，5.35(d，1H)，7.55(d，1H)，7.6(d，2H)，7.7(m，2H)，7.8(d，1H)，7.85(d，2H)，8.35(d，1H)ppm.
實施例284-(4-氰基苯基)-6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸2-(4-吡啶基)乙基酯 將45.1mg(0.1mmol)實施例25化合物加入到0.5ml 2-(4-吡啶基)乙醇中。該反應(yīng)混合物于約100℃攪拌1小時。冷卻后，該反應(yīng)混合物用制備型HPLC純化(柱Agilent Zorbax Extend C18 20mm×50mm，5μm；溶劑A乙腈，溶劑B水+0.1％濃氨水；梯度0min 10％A，2min 10％A，6min 90％A，7min 90％A，7.1min 10％A，8min 10％A；波長220nm；進樣體積約500μl；進樣次數(shù)1)。合并含產(chǎn)物的份并真空濃縮。
產(chǎn)率17mg(理論產(chǎn)率的33.5％)MS(EI)m/z＝507(M+H)+1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝2.0(d，3H)，2.9(tr，2H)，4.3(tr，2H)，5.25(d，1H)，7.15(d，2H)，7.45(d，2H)；7.5(d，1H)，7.65(tr，2H)，7.8(m，3H)，8.35(d，1H)，8.4(d，2H)ppm.
實施例294-(4-氰基苯基)-6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸2-(2-吡啶基)乙酯 將45.1mg(0.1mmol)實施例25的化合物加入到0.5ml 2-(2-吡啶基)乙醇中。該反應(yīng)混合物于約100℃攪拌1小時。冷卻后，該反應(yīng)混合物用制備型HPLC純化(柱Agilent Zorbax Extend C18 20mm×50mm，5μm；溶劑A乙腈，溶劑B水+0.1％濃氨水；梯度0min 10％A，2min 10％A，6min 90％A，7min 90％A，7.1min 10％A，8min 10％A；波長220nm；進樣體積約500μl；進樣次數(shù)1)。合并含產(chǎn)物的份并真空濃縮。
產(chǎn)率22mg(理論產(chǎn)率的43.4％)MS(EI)m/z＝507(M+H)+1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝2.0(d，3H)，3.0(tr，2H)，4.4(tr，2H)，5.25(d，1H)，7.15-7.25(m，2H)，7.4(d，2H)，7.5(d，1H)，7.6-7.75(m，3H)，7.8(m，3H)，8.3(d，1H)，8.45(d，1H)ppm.
實施例304-(4-氰基苯基)-6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸2-(2-氧代-1-吡咯烷基)乙基酯 將45.1mg(0.1mmol)實施例25化合物加入到0.5ml 1-(2-羥乙基)-2-吡咯烷酮中。該反應(yīng)混合物于約100℃攪拌1小時。冷卻后，該反應(yīng)混合物用制備型HPLC純化(柱Agilent Zorbax Extend C18 20mm×50mm，5μm；溶劑A乙腈，溶劑B水+0.1％濃氨水；梯度0min10％A，2min 10％A，6min 90％A，7min 90％A，7.1min 10％A，8min10％A；波長220nm；進樣體積約500μl；進樣次數(shù)1)。合并含產(chǎn)物的份并真空濃縮。
產(chǎn)率25mg(理論產(chǎn)率的48.8％)MS(EI)m/z＝513(M+H)+1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝1.8(五重峰，2H)，2.0(d，3H)，2.1(tr，2H)，3.2(tr，2H)，3.4(tr，2H)，4.0-4.2(m，2H)，5.35(d，1H)，7.55(d，1H)，7.6(d，2H)，7.7(tr，2H)，7.8(d，1H)，7.9(d，2H)，8.4(d，1H)ppm.
用類似于實施例14-16的方法制備以下化合物





用類似于實施例6-8的方法制備以下化合物
實施例594-(4-氰基苯基)-6-甲基-3-[2-(4-嗎啉基)-2-氧代乙基]-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸乙酯 將80mg(0.16mmol)的實施例44化合物溶于2ml二甲基甲酰胺中，加入16mg(0.18mmol)嗎啉、24mg(0.18mmol)1-羥基-1H-苯并三唑水合物和20mg(0.16mmol)4-二甲基氨基吡啶。該反應(yīng)混合物于0℃攪拌，然后加入35mg(0.18mmol)1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基-碳二亞胺鹽酸鹽。該反應(yīng)混合物于室溫攪拌18小時，然后加入水和乙酸乙酯。有機相用硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)至干。如需要，產(chǎn)物用柱層析或制備型HPLC進-步純化。
產(chǎn)率78mg(85％)1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝1.1(t，3H)；2.0(s，3H)；3.4(m，4H)；3.6(m，4H)；3.7(d，1H)；4.1(m，2H)；4.5(d，1H)；5.5(s，1H)；7.6(m，5H)；7.8(m，1H)；7.9(m，2H)ppm.
用類似于實施例59的方法制備以下化合物
用類似于實施例6-8的方法制備以下化合物

實施例704-(4-氰基苯基)-6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酰胺 將200mg(0.5mmol)的實施例11化合物溶于5ml四氫呋喃中，并加入6mg(0.05mmol)4-N，N-二甲基氨基吡啶、77mg(0.6mmol)N，N-二異丙基乙基胺和115mg(0.6mmol)六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基-三(吡咯烷-1-基)(pyrrolidino)鏻。該反應(yīng)混合物于室溫攪拌15分鐘，然后加入5ml(2.5mmol)氨(為0.5M二噁烷溶液)。該反應(yīng)混合物于室溫攪拌1小時，然后加入水和乙酸乙酯。有機相用硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)至干。產(chǎn)物用制備型HPLC進一步純化。
產(chǎn)率55mg(理論產(chǎn)率的28％)1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝1.8(s，3H)；5.4(d，1H)；7.2(br.s，1H)；7.4(br.s，1H)；7.6(m，5H)；7.7(m，1H)；7.9(m，2H)；8.1(d，1H)ppm.
實施例71(+)-4-(4-氰基苯基)-6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸 用制備型HPLC以手性相分離實施例11的對映異構(gòu)體[柱KBD8361(基于單體N-異丁烯?；?L-亮氨酸-1-_基酰胺的手性硅膠選擇器，參見EP-A-379917)，250mm×20mm，洗脫液乙酸乙酯→甲醇→乙酸乙酯，流速25ml/min，溫度23℃，檢測254nm]。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝2.0(s，3H)；5.4(d，1H)；7.6(m，1H)；7.6(m，2H)；7.7(m，1H)；7.8(m，1H)；7.9(m，3H)；8.3(d，1H)；12.5(s，1H)ppm.20＝+2.5°(λ＝589nm，甲醇，c＝505mg/100ml).
實施例72(+)-4-(4-氰基苯基)-6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸2-羥基乙基酯 于氬氣下，將1560mg(3.89mmol)實施例71化合物加入到19.6mlDMF中。加入1.095ml(7.86mmol)三乙胺和1.11ml(15.7mmol)2-溴乙醇后，該反應(yīng)混合物于約70℃攪拌8小時。冷卻后，該反應(yīng)混合物真空濃縮。用乙酸乙酯溶解殘渣并用水洗滌。用硫酸鎂干燥后，有機相真空蒸發(fā)。所得殘渣用8ml甲醇溶解并用制備型HPLC純化(柱Nucleosil 100-5C 18 Nautilus，20×50mm，5μm；溶劑A乙腈，溶劑B水+0.3％甲酸；梯度0min 10％A，2min 10％A，6min 90％A，7min90％A，7.1min 10％A，8min 10％A；波長220nm；進樣體積約500μl；進樣次數(shù)18)。合并含產(chǎn)物的份并凍干。
產(chǎn)率1290mg(理論產(chǎn)率的74.5％)MS(EI)m/z＝446(M+H)+1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝2.05(d，3H)；3.5(四重峰，2H)；3.95-4.15(m，2H)；4.75(tr，1H)；5.45(d，1H)；7.55-7.75(m，5H)；7.75(d，1H)；7.85(d，2H)；8.35(d，1H)ppm.20＝+14.3°(λ＝589nm，甲醇，c＝455mg/100ml).
實施例735-{5-乙?；?6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-4-嘧啶基}-2-吡啶甲腈 向攪拌著的實施例3A化合物(75mg，0.57mmol)的四氫呋喃(5ml)溶液中加入2，4-戊二酮(57mg，0.57mmol)、N-[3-(三氟甲基)苯基]脲(116mg，0.57mmol)和多磷酸乙酯(200mg)[依照Cava等，J.Org.Chem.34，2665(1969)所述方法新鮮制備]。該反應(yīng)混合物回流24小時，然后該溶液用DMSO(2ml)稀釋并用制備型HPLC純化。
產(chǎn)率101mg(理論產(chǎn)率的44％)1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝2.02(s，3H)；2.24(s，3H)；5.54(d，1H)；7.52-7.90(m，4H)；8.08(d，2H)；8.50(d，1H)；8.81(s，1H)ppm.
實施例74(+)-5-{5-乙?；?6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-4-嘧啶基}-2-吡啶甲腈 用制備型HPLC以手性相分離實施例73的對映異構(gòu)體[柱KBD8361(基于單體N-異丁烯?；?L-亮氨酸-1-_基酰胺的手性硅膠選擇器，參見EP-A-379 917)，250mm×20mm，洗脫液乙酸乙酯→甲醇→乙酸乙酯，流速25ml/min，溫度23℃，檢測254nm]。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ＝2.06(s，3H)；2.35(s，3H)；5.69(d，1H)；6.02(d，1H)；7.29-7.50(m，2H)；7.57-7.75(m，3H)；7.83(dd，1H)；8.74(d，1H)ppm.
MS(ESIpos)m/z＝401(M+H)+[α]20＝+25.1°(δ＝589nm，甲醇，c＝505mg/100ml).
實施例754-(4-氰基苯基)-6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸2-(2-吡啶基)甲基酯 向40.1mg(0.1mmol)實施例11化合物的0.4ml無水二甲基甲酰胺溶液中加入48.6mg(0.3mmol)N，N-羰基二咪唑。該反應(yīng)混合物放置一小時后，用水稀釋反應(yīng)混合物并用二氯甲烷萃取。用硫酸鎂干燥后，真空蒸發(fā)掉溶劑。向殘渣中加入0.5ml(2-吡啶基)甲醇。該反應(yīng)混合物于約100℃攪拌1小時。冷卻后，用制備型HPLC純化該反應(yīng)混合物(柱Nucleosil 100-5C 18 Nautilus 20mm×50mm，5μm；溶劑A乙腈，溶劑B水+0.1％甲酸；梯度0min 10％A，2min 10％A，6min 90％A，7min 90％A，7.1min 10％A，8min 10％A；流速25ml/min；波長220nm；進樣體積約550μl；進樣次數(shù)1)。合并含產(chǎn)物的份并真空濃縮。
產(chǎn)率17mg(理論產(chǎn)率的34.5％)MS(EI)m/z＝493(M+H)+1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝2.1(d，3H)；5.15(dd，2H)；5.45(d，1H)；7.05(d，1H)；7.3(dd，1H)；7.5-7.85(m，9H)；8.35(d，1H)；8.5(d，2H)ppm.
實施例764-(4-氰基苯基)-6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸2-(3-吡啶基)乙基酯 向60.2mg(0.15mmol)實施例11化合物的0.57ml無水二甲基甲酰胺溶液中加入72.9mg(0.45mmol)N，N-羰基二咪唑。該反應(yīng)混合物放置一小時后，用水稀釋反應(yīng)混合物并用乙酸乙酯萃取。用硫酸鎂干燥后，真空蒸發(fā)掉溶劑。向殘渣中加入185mg(1.5mmol)2-(3-吡啶基)乙醇和20μL(0.27mmol)三乙胺。該反應(yīng)混合物于100℃攪拌1小時。然后用0.4ml甲醇稀釋該反應(yīng)混合物，過濾并用制備型HPLC純化(柱Nucleosil 100-5C 18 Nautilus 20mm×50mm，5μm；溶劑A乙腈，溶劑B水+0.1％甲酸；梯度0min 10％A，2min 10％A，6min 90％A，7min 90％A，7.1min 10％A，8min 10％A；流速25ml/min；波長220nm；進樣體積約550μl；進樣次數(shù)1)。合并含產(chǎn)物的份并真空濃縮。
產(chǎn)率44mg(理論產(chǎn)率的57.9％)LC-MS(EI，方法5)m/z＝507(M+H)+，Rt＝3.19min.
實施例774-(4-氰基苯基)-3，6-二甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸 將4.1g(9.25mmol)的實施例14化合物溶于100ml乙醇中。向該溶液中加入6.2ml(27.6mmol)氫氧化鉀水溶液(25％重量)。該反應(yīng)混合物室溫下放置18小時。然后再加入12.4ml(55.2mmol)氫氧化鉀水溶液(25％重量)并將該反應(yīng)混合物攪拌2小時。用水稀釋該反應(yīng)混合物并用乙酸乙酯萃取三次。水相用1N鹽酸酸化并用乙酸乙酯萃取。該后者萃取液用硫酸鎂干燥并真空蒸發(fā)掉溶劑。殘渣以環(huán)己烷/乙酸乙酯為洗脫液用二氧化硅柱層析純化。
產(chǎn)率1.5g(理論產(chǎn)率的39％)MS(EI)m/z＝416(M+H)+1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝2.0(s，3H)；2.8(s，3H)；5.5(d，1H)；7.6-7.8(m，6H)；7.9(d，2H)；12.6(s，1H)ppm.
用類似于實施例76的方法制備以下化合物




1)在這種情況下，使用的醇為固體且反應(yīng)在0.4ml DMF存在下進行。
實施例1024-(4-氰基苯基)-1-(3，5-二氯苯基)-6-甲基-2-氧代-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸乙酯 于氬氣下，將30.8mg(0.15mmol)N-(3，5-二氯苯基)脲與39.3mg(0.3mmol)4-甲?；郊纂妗?9mg(0.3mmol)3-氧代丁酸乙酯和90mg三甲硅烷基多磷酸酯(trimethylsilylpolyphosphate)在0.5ml二噁烷中于80℃一起攪拌4小時。加入少量DMSO后，過濾該反應(yīng)混合物并用制備型HPLC純化(柱Agilent Zorbax Extend C18 20mm×50mm，5μm；溶劑A乙腈，溶劑B水+0.1％濃氨水；梯度0min 10％A，2min10％A，6min 90％A，7min 90％A，7.1min 10％A，8min 10％A；流速25ml/min；波長220nm；進樣體積約500μl；進樣次數(shù)1)。合并含產(chǎn)物的份并真空濃縮。
產(chǎn)率38.1mg(理論產(chǎn)率的59％)LC-MS(EI，方法7)m/z＝431(M+H)+，Rt＝4.14min.
實施例1036-甲基-4-(3-硝基苯基)-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸乙酯 將30.6mg(0.15mmol)N-[3-(三氟甲基)苯基]脲與45.3mg(0.3mmol)3-硝基苯甲醛、39mg(0.3mmol)3-氧代丁酸乙酯和90mg多磷酸乙酯[依照Cava等，J.Org.Chem.34，2665(1969)的方法新鮮制備]一起在0.5ml二噁烷和0.1ml DMF中于80℃振搖18小時。加入200μlDMF后，過濾該反應(yīng)混合物并用制備型HPLC純化(柱Nucleosil 100-5C18 Nautilus 20mm×50mm，5μm；溶劑A乙腈，溶劑B水+0.1％甲酸；梯度0min 10％A，2min 10％A，6min 90％A，7min 90％A，7.1min 10％A，8min 10％A；流速25ml/min；波長220nm；進樣體積約800μl；進樣次數(shù)1)。合并含產(chǎn)物的份并真空濃縮。
產(chǎn)率34mg(理論產(chǎn)率的50.4％)LC-MS(EI，方法6)m/z＝450(M+H)+，Rt＝3.94min.
用類似于實施例102的方法制備以下化合物
實施例1084-(4-氰基苯基)-6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-嘧啶-5-甲酸2-氰基乙基酯 將9.87g(48.3mmol)N-[3-(三氟甲基)苯基]脲、12.68g(96.68mmol)4-氰基苯甲醛、15g(96.68mmol)3-氧代丁酸(2-氰基乙基)酯和37.5g多磷酸乙酯懸浮于250ml THF中。該混合物回流下攪拌18小時。冷卻至室溫后，真空除去溶劑并以環(huán)己烷/乙酸乙酯為洗脫液用二氧化硅柱層析純化殘渣。
產(chǎn)率25g(理論產(chǎn)率的100％)1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝2.1(s，3H)；2.8(m，2H)；4.2(m，2H)；5.4(d，1H)；7.6(m，4H)；7.7(m，2H)；7.9(m，2H)；8.5(d，1H)ppm.
實施例1094-(4-氰基苯基)-6-甲基-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫-嘧啶-5-甲腈 將0.609g(1.52mmol)實施例70化合物溶于60ml THF并加入1.24g(12.93mmol)(甲氧羰基氨磺?；?-三乙基銨-N-甜菜堿。該反應(yīng)混合物室溫下攪拌1小時，真空除去溶劑并以二氯甲烷/甲醇混合物為洗脫液用二氧化硅柱層析純化殘渣。
產(chǎn)率249mg(理論產(chǎn)率的43％)1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝1.8(s，3H)；5.4(d，1H)；7.7(m，4H)；7.8(m，2H)；8.0(m，2H)，8.4(d，1H)ppm.
實施例1106-甲基-4-(4-硝基苯基)-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫嘧啶-5-甲酸乙酯 將7.84g(38.4mmol)N-[3-(三氟甲基)苯基]脲、5.81g(38.4mmol)4-硝基苯甲醛、5.0g(38.4mmol)3-氧代丁酸乙酯和15g多磷酸乙酯懸浮于100ml THF中。該混合物回流下攪拌18小時。冷卻至室溫后，真空除去溶劑并以甲苯/乙酸乙酯為洗脫液用二氧化硅柱層析純化殘渣。
產(chǎn)率8.75g(理論產(chǎn)率的51％)1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝1.1(t，3H)；2.1(s，3H)；4.0(m，2H)；5.4(d，1H)；7.5-7.8(m，6H)；8.3(m，2H)；8.5(d，1H)ppm.
實施例1115-乙酰基-6-甲基-4-(4-硝基苯基)-2-氧代-1-[3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，4-四氫嘧啶 將0.407g(2.0mmol)N-[3-(三氟甲基)苯基]脲、0.302g(2.0mmol)4-硝基苯甲醛、0.2g(2.0mmol)2，4-戊二酮和0.4g多磷酸乙酯懸浮于20ml THF中。該混合物回流下攪拌18小時。冷卻至室溫后，真空除去溶劑并以環(huán)己烷/乙酸乙酯為洗脫液用二氧化硅柱層析純化殘渣。
產(chǎn)率0.302g(理論產(chǎn)率的36％)1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝2.0(s，3H)；2.2(s，3H)；5.5(d，1H)；7.5-7.8(m，6H)；8.3(m，2H)；8.5(d，1H)ppm.
C.有關(guān)藥用組合物的操作實施例本發(fā)明化合物可按如下方法轉(zhuǎn)化為藥用制劑片劑組成100mg實施例1化合物、50mg乳糖(一水合物)、50mg玉米淀粉(當(dāng)?shù)?、10mg聚乙烯吡咯烷酮(PVP 25)(來自BASF，Ludwigshafen，Germany)和2mg硬脂酸鎂。
片重212mg，直徑8mm，曲率半徑12mm。
制備將活性成分、乳糖和淀粉的混合物用5％PVP水溶液(m/m)制粒。干燥后，將顆粒與硬脂酸鎂混合5min。該混合物用常規(guī)壓片機壓片(片劑規(guī)格見上)。壓片所用的壓力一般為15kN。
口服混懸劑組成1000mg實施例1化合物、1000mg乙醇(96％)、400mg Rhodigel(來自FMC，Pennsylvania，USA的黃原膠)和99g水。
10ml口服混懸劑提供單劑量的100mg本發(fā)明化合物。
制備將Rhodigel懸浮于乙醇中并將活性成分加入到該懸浮液中。攪拌下加入水。繼續(xù)攪拌約6h直至Rhodigel溶脹完全。
權(quán)利要求
1.通式(I)化合物及其鹽、水合物和/或溶劑合物以及它們的互變異構(gòu)體， 其中A代表芳環(huán)或雜芳環(huán)，R1、R2和R3彼此獨立代表氫、鹵素、硝基、氰基、C1-C6-烷基、羥基或C1-C6-烷氧基，其中C1-C6-烷基和C1-C6-烷氧基可被一個至三個選自以下的相同基團或不同基團進一步取代鹵素、羥基和C1-C4-烷氧基，R4代表三氟甲基羰基、C1-C6-烷基羰基、C1-C6-烷氧基羰基、C1-C6-烯氧基羰基、羥基羰基、氨基羰基、單-或二-C1-C4-烷基氨基羰基、C6-C10-芳基氨基羰基、芳基羰基、雜芳基羰基、雜環(huán)基羰基、雜芳基、雜環(huán)基或氰基，其中C1-C6-烷基羰基、C1-C6-烷氧基羰基、單-和二-C1-C4-烷基氨基羰基可被一個至三個選自以下的相同基團或不同基團進一步取代C3-C8-環(huán)烷基、羥基、C1-C4-烷氧基、C1-C4-烷氧基羰基、羥基羰基、氨基羰基、單-和二-C1-C4-烷基氨基羰基、C1-C4-烷基羰基氨基、(C1-C4-烷基羰基)-C1-C4-烷基氨基、氰基、氨基、單-和二-C1-C4-烷基氨基、雜芳基、雜環(huán)基和三-(C1-C6-烷基)-甲硅烷基，且其中雜芳基羰基、雜環(huán)基羰基、雜芳基和雜環(huán)基可被C1-C4-烷基進一步取代，R5代表可被一個至三個選自以下的相同基團或不同基團取代的C1-C4-烷基鹵素、羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-烯氧基、C1-C6-烷硫基、氨基、單-和二-C1-C6-烷基氨基、芳基氨基、羥基羰基、C1-C6-烷氧基羰基和基團-O-C1-C4-烷基-O-C1-C4-烷基，或R5代表氨基，R6代表氫、C1-C6-烷基、甲?；被驶?、單-或二-C1-C4-烷基氨基羰基、C3-C8-環(huán)烷基羰基、C1-C6-烷基羰基、C1-C6-烷氧基羰基、N-(C1-C4-烷基磺?；?-氨基羰基、N-(C1-C4-烷基磺?；?-N-(C1-C4-烷基)-氨基羰基、雜芳基、雜環(huán)基、雜芳基羰基或雜環(huán)基羰基，其中C1-C6-烷基、單-和二-C1-C4-烷基氨基羰基、C1-C6-烷基羰基、C1-C6-烷氧基羰基、雜芳基和雜環(huán)基可被一個至三個選自以下的相同基團或不同基團取代芳基、雜芳基、羥基、C1-C4-烷氧基、羥基羰基、C1-C6-烷氧基羰基、氨基羰基、單-和二-C1-C4-烷基氨基羰基、氨基、單-和二-C1-C4-烷基氨基、C1-C4-烷基羰基氨基、三-(C1-C6-烷基)-甲硅烷基、氰基、單-和二-C1-C4-烷基氨基-C1-C4-烷基氨基羰基、C1-C4-烷氧基-C1-C4-烷基氨基羰基和鹵素，或R6代表下式部分 或 其中R6A選自氫和C1-C6-烷基，且n代表1或2的整數(shù)，R7代表鹵素、硝基、氰基、C1-C6-烷基、羥基或C1-C6-烷氧基，其中C1-C6-烷基和C1-C6-烷氧基可被一個至三個選自以下的相同基團或不同基團進一步取代鹵素、羥基和C1-C4-烷氧基，且Y1、Y2、Y3、Y4和Y5彼此獨立代表CH或N，其中該環(huán)含有0、1個或2個氮原子。
2.權(quán)利要求1的通式(I)化合物，其中A代表芳環(huán)或雜芳環(huán)，R1、R2和R3彼此獨立代表氫、鹵素、硝基、氰基、C1-C6-烷基、羥基或C1-C6-烷氧基，其中C1-C6-烷基和C1-C6-烷氧基可被一個至三個選自以下的相同基團或不同基團進一步取代鹵素、羥基和C1-C4-烷氧基，R4代表C1-C6-烷基羰基、C1-C6-烷氧基羰基、C1-C6-烯氧基羰基、羥基羰基、氨基羰基、單-或二-C1-C4-烷基氨基羰基、C6-C10-芳基氨基羰基、雜芳基羰基、雜環(huán)基羰基、雜芳基、雜環(huán)基或氰基，其中C1-C6-烷基羰基、C1-C6-烷氧基羰基、單-和二-C1-C4-烷基氨基羰基可被一個至三個選自以下的相同基團或不同基團進一步取代C3-C8-環(huán)烷基、羥基、C1-C4-烷氧基、C1-C4-烷氧基羰基、羥基羰基、氨基羰基、單-和二-C1-C4-烷基氨基羰基、C1-C4-烷基羰基氨基、氨基、單-和二-C1-C4-烷基氨基、雜芳基、雜環(huán)基和三-(C1-C6-烷基)-甲硅烷基，R5代表可被一個至三個選自以下的相同基團或不同基團取代的C1-C4-烷基鹵素、羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-烯氧基、C1-C6-烷硫基、氨基、單-和二-C1-C6-烷基氨基、芳基氨基、羥基羰基、C1-C6-烷氧基羰基和基團-O-C1-C4-烷基-O-C1-C4-烷基，或R5代表氨基，R6代表氫、C1-C6-烷基、甲?；?、氨基羰基、單-或二-C1-C4-烷基氨基羰基、C3-C8-環(huán)烷基羰基、C1-C6-烷基羰基、C1-C6-烷氧基羰基、N-(C1-C4-烷基磺?；?-氨基羰基、N-(C1-C4-烷基磺?；?-N-(C1-C4-烷基)-氨基羰基、雜芳基、雜環(huán)基、雜芳基羰基或雜環(huán)基羰基，其中C1-C6-烷基、單-和二-C1-C4-烷基氨基羰基、C1-C6-烷基羰基、C1-C6-烷氧基羰基、雜芳基和雜環(huán)基可被一個至三個選自以下的相同基團或不同基團取代芳基、雜芳基、羥基、C1-C4-烷氧基、羥基羰基、C1-C6-烷氧基羰基、氨基羰基、單-和二-C1-C4-烷基氨基羰基、氨基、單-和二-C1-C4-烷基氨基、C1-C4-烷基羰基氨基、三-(C1-C6-烷基)-甲硅烷基、氰基、單-和二-C1-C4-烷基氨基-C1-C4-烷基氨基羰基、C1-C4-烷氧基-C1-C4-烷基氨基羰基和鹵素，或R6代表下式部分 或 其中R6A選自氫和C1-C6-烷基，且n代表1或2的整數(shù)，R7代表鹵素、硝基、氰基、C1-C6-烷基、羥基或C1-C6-烷氧基，其中C1-C6-烷基和C1-C6-烷氧基可被一個至三個選自以下的相同基團或不同基團進一步取代鹵素、羥基和C1-C4-烷氧基，且Y1、Y2、Y3、Y4和Y5彼此獨立代表CH或N，其中該環(huán)含有0、1個或2個氮原子。
3.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的通式(I)化合物，其中A代表苯環(huán)、萘環(huán)或吡啶環(huán)，R1、R2和R3彼此獨立代表氫、氟、氯、溴、硝基、氰基、甲基、乙基、三氟甲基或三氟甲氧基，R4代表C1-C6-烷基羰基、C1-C6-烷氧基羰基、羥基羰基、氨基羰基、單-C1-C4-烷基氨基羰基或氰基，其中C1-C6-烷基羰基、C1-C6-烷氧基羰基和單-C1-C4-烷基氨基羰基可被一個至三個選自以下的相同基團或不同基團取代C3-C8-環(huán)烷基、羥基、C1-C4-烷氧基、C1-C4-烷氧基羰基、氨基、單-或二-C1-C4-烷基氨基、雜芳基和雜環(huán)基，R5代表甲基或乙基，R6代表氫、C1-C6-烷基、單-或二-C1-C4-烷基氨基羰基、C1-C6-烷基羰基、C1-C6-烷氧基羰基或雜環(huán)基羰基，其中C1-C6-烷基和C1-C6-烷氧基羰基可被一個至三個選自以下的相同基團或不同基團取代雜芳基、羥基、C1-C4-烷氧基、羥基羰基、C1-C6-烷氧基羰基、氨基羰基、單-和二-C1-C4-烷基氨基羰基、氰基、氨基、單-和二-C1-C4-烷基氨基，或R6代表下式部分 或 其中R6A選自氫和C1-C4-烷基，且n代表1或2的整數(shù)，R7代表鹵素、硝基、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基、甲基或乙基，且Y1、Y2、Y3、Y4和Y5各自代表CH。
4.權(quán)利要求1、2或3的通式(I)化合物，其中A代表苯環(huán)或吡啶環(huán)，R1和R3各自代表氫，R2代表氟、氯、溴、硝基或氰基，R4代表氰基、C1-C4-烷基羰基或C1-C4-烷氧基羰基，其中C1-C4-烷氧基羰基可被選自以下的基團取代羥基、C1-C4-烷氧基、C1-C4-烷氧基羰基、單-和二-C1-C4-烷基氨基、雜芳基和雜環(huán)基，R5代表甲基，R6代表氫、C1-C4-烷基、單-或二-C1-C4-烷基氨基羰基、C1-C4-烷基羰基或C1-C4-烷氧基羰基，其中C1-C4-烷基和C1-C4-烷氧基羰基可被選自以下的基團取代雜芳基、羥基、C1-C4-烷氧基、羥基羰基、氨基羰基、單-和二-C1-C4-烷基氨基羰基、氨基、單-和二-C1-C4-烷基氨基，或R6代表下式部分 或 其中R6A選自氫和甲基，R7代表三氟甲基或硝基，且Y1、Y2、Y3、Y4和Y5各自代表CH。
5.權(quán)利要求1-4中至少一項的通式(I)化合物，其中A為苯基或吡啶基。
6.權(quán)利要求1-5中至少一項的通式(I)化合物，其中R1為氫。
7.權(quán)利要求1-6中至少一項的通式(I)化合物，其中R2為氰基。
8.權(quán)利要求1-7中至少一項的通式(I)化合物，其中R3為氫。
9.權(quán)利要求1-8中至少一項的通式(I)化合物，其中R4為任選被羥基取代的C1-C4-烷氧基羰基，或其中R4為C1-C4-烷基羰基。
10.權(quán)利要求1-9中至少一項的通式(I)化合物，其中R5為甲基。
11.權(quán)利要求1-10中至少一項的通式(I)化合物，其中R6為氫。
12.權(quán)利要求1-11中至少一項的通式(I)化合物，其中R7為三氟甲基或硝基。
13.通式(IA)的化合物 其中Z代表CH或N，且R1、R3、R4和R6具有權(quán)利要求1-12中指定的含義。
14.分別合成權(quán)利要求1-13所定義的通式(I)或(IA)化合物的方法，所述方法包括在酸存在下通過三種成分/一步反應(yīng)或者依次將通式(II)化合物、通式(III)化合物和通式(IV)化合物縮合得到通式(IB)化合物，任選通式(IB)化合物隨后在堿存在下與通式(V)化合物反應(yīng)，通式(II)化合物 其中A、R1和R2具有權(quán)利要求1-13中指定的含義，通式(III)化合物 其中R4和R5具有權(quán)利要求1-13中指定的含義，通式(IV)化合物 其中R3、R7和Y1-Y5具有權(quán)利要求1-13中指定的含義，通式(IB)化合物 其中A、R1-R5、R7和Y1-Y5具有權(quán)利要求1-13中指定的含義，通式(V)化合物R6*-X(V)，其中R6*具有權(quán)利要求1-13中指定的R6的含義，但不代表氫，且X代表離去基團，如鹵素、甲苯磺酸酯、甲磺酸酯或硫酸酯。
15.組合物，所述組合物含有至少一種權(quán)利要求1-13中定義的通式(I)或(IA)化合物和藥理學(xué)上可接受的稀釋劑。
16.權(quán)利要求15的組合物，所述組合物用于治療急性和慢性炎性、缺血性和/或重建性病變。
17.制備權(quán)利要求15和16的組合物的方法，其特征在于使權(quán)利要求1-13中定義的通式(I)或(IA)化合物與常用輔料一起形成合適的施用形式。
18.權(quán)利要求1-13中定義的通式(I)或(IA)化合物用于制備藥物的用途。
19.權(quán)利要求18的用途，所述用途用于制備急性和慢性炎性、缺血性和/或重建性病變的治療藥物。
20.權(quán)利要求19的用途，其中所述病變?yōu)槁宰枞苑尾?、急性冠狀動脈綜合征、急性心肌梗塞或心力衰竭發(fā)展。
21.控制人和動物慢性阻塞性肺病、急性冠狀動脈綜合征、急性心肌梗塞或心力衰竭發(fā)展的方法，所述方法通過給予嗜中性粒細胞彈性蛋白酶抑制量的至少一種權(quán)利要求1-13中任一項的化合物實現(xiàn)。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的雜環(huán)衍生物、它們的制備方法及它們在藥物中的用途，尤其在治療慢性阻塞性肺病中的用途。
文檔編號C07D403/12GK1732159SQ03824983
公開日2006年2月8日 申請日期2003年8月28日 優(yōu)先權(quán)日2002年9月10日
發(fā)明者H·吉倫-黑特維希, 李民堅, U·羅森特雷特, K·-H·施勒默, S·阿勒黑利根, L·特蘭, L·貝爾法克, J·克爾德尼希, M·F·費茨格拉爾德, K·納斯, B·阿爾布雷希特, D·莫伊雷爾 申請人:拜耳醫(yī)藥保健股份公司