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      特異性抗體IgY免疫制劑及其在預(yù)防與治療結(jié)核菌感染中的應(yīng)用的制作方法

      文檔序號(hào):3582567閱讀:242來源:國知局
      專利名稱:特異性抗體IgY免疫制劑及其在預(yù)防與治療結(jié)核菌感染中的應(yīng)用的制作方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域中的一種特異性抗體,具體地說是用于預(yù)防和治療結(jié)核菌感染的特異性抗體。
      背景技術(shù)
      1985年以來,全球結(jié)核病疫情再度上升,結(jié)核病再次成為嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題,受到了世界各國的關(guān)注。1993年4月23日,世界衛(wèi)生組織宣布全球結(jié)核病處于緊急狀態(tài)。中國現(xiàn)在是全球22個(gè)結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國家之一,結(jié)核病人數(shù)居世界第二位,全國活動(dòng)性肺結(jié)核病人約500萬人,結(jié)核病傳染源約200萬人,每年因結(jié)核病死亡多達(dá)15萬人。
      分析全球結(jié)核病疫情加劇及中國結(jié)核病防治的特征,主要原因是1)目前普遍使用的結(jié)核預(yù)防接種用卡介苗(BCG)沒有達(dá)到預(yù)期的免疫效果;2)經(jīng)過長期大量化學(xué)抗結(jié)核藥物的使用導(dǎo)致出現(xiàn)許多結(jié)核桿菌耐藥性菌株,使得化學(xué)藥物治療變得更加復(fù)雜;3)包括結(jié)核桿菌/艾滋病毒(TB/HIV)在內(nèi)的雙重感染的流行增加了結(jié)核感染高危人群的數(shù)量;4)面對(duì)職業(yè)接觸和家庭接觸人群,目前缺少有效預(yù)防感染的手段;5)雖然目前結(jié)核治療采用的是直接面視下督導(dǎo)化療優(yōu)選方法,建議最短治療時(shí)間仍然超過6個(gè)月的漫長期。中國雖然實(shí)行了免費(fèi)結(jié)核病檢查治療,免費(fèi)檢查的范圍僅包括胸部透視、攝X光胸片和痰涂片檢查,免費(fèi)治療僅限于提供統(tǒng)一方案的抗結(jié)核藥物,其它費(fèi)用仍需自理。2000年調(diào)查結(jié)果表明,近40%的結(jié)核病患者由于經(jīng)濟(jì)困難而不能就診,費(fèi)用問題依然是結(jié)核防治工作的難題。當(dāng)前,尋找和提供一種簡便、有效、經(jīng)濟(jì)、適用的手段,已成為結(jié)核病防治工作中亟待解決的緊迫問題。本發(fā)明所涉及的用于預(yù)防和治療結(jié)核菌感染的特異性抗雞IgY抗體,迄今尚未見到有關(guān)報(bào)道。
      本發(fā)明的目的之一是,提供一種簡便有效、經(jīng)濟(jì)適用的特異性抗體IgY;本發(fā)明的另一目的是,提供一組特異性抗體IgY免疫制劑,特別是用于預(yù)防和治療野生型及耐藥型結(jié)核菌感染的特異性抗體IgY免疫制劑。

      發(fā)明內(nèi)容
      本發(fā)明的實(shí)施方案包括抗原設(shè)計(jì)、免疫動(dòng)物、制備抗體、抗體純化及效價(jià)測(cè)定、抗體中和作用測(cè)定以及制劑制備等步驟。首先選用雞作為免疫用動(dòng)物,來產(chǎn)生對(duì)野生型和耐藥型結(jié)核桿菌具有中和作用的高效特異抗性抗體。采用這種方法得到的抗體產(chǎn)量高,產(chǎn)品安全無害,有利于大規(guī)模人群使用。這種具有中和作用的抗體,可通過呼吸道與結(jié)核桿菌結(jié)合/殺滅,以阻止結(jié)核桿菌對(duì)人體的侵入。與現(xiàn)有的產(chǎn)品如干擾素、中藥制劑等相比,本制品更具特異性、有效性和安全性。本發(fā)明通過噴劑和滴劑的方式將抗結(jié)核桿菌抗體直接送入人體口腔和鼻粘膜,以形成人體抵抗結(jié)核桿菌入侵的第一道防線。所說特異性抗體具有識(shí)別結(jié)核桿菌表面蛋白和其它抗原的特異的Fab或(Fab)’片段的功能,因此用它防治結(jié)核桿菌(包括耐藥型)感染更具有特異性,效果也優(yōu)于現(xiàn)有技術(shù)中使用的產(chǎn)品如干擾素和中藥制劑等,后者均不能與細(xì)菌直接作用,因而不具有特異性,不能有效達(dá)到防治結(jié)核感染之目的。
      通過這種途徑干擾或阻止結(jié)核桿菌進(jìn)入人體以達(dá)到預(yù)防結(jié)核的功效,明顯優(yōu)于現(xiàn)有技術(shù)中的其它給藥途徑。通過這種方法,抗體也能到達(dá)人體肺部,因而對(duì)于結(jié)核病患者也具有一定的治療作用。經(jīng)過蛋白酶處理去掉Fc段進(jìn)一步純化的抗體,也可以通過靜脈注射的方式用于結(jié)核患者的短期治療。由于本發(fā)明所說抗體的突出的特異性中和野生型和耐藥型結(jié)核桿菌的能力,和其它方法相比,不僅防治效果顯著,而且副作用也小。本發(fā)明通過對(duì)現(xiàn)有技術(shù)提取抗體方法的改良,簡化了純化抗體的方法,縮短了生產(chǎn)周期,降低了產(chǎn)品成本,更適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。
      發(fā)明效果本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于,其特異性抗體的Fab或(Fab)’片段具有識(shí)別結(jié)核桿菌表面蛋白和其它抗原的功能,因此用它防治結(jié)核桿菌感染更具特異性,效果也優(yōu)于現(xiàn)有技術(shù)中使用的產(chǎn)品如干擾素和中藥制劑等。通過對(duì)現(xiàn)有技術(shù)提取抗體方法的改進(jìn),簡化了純化方法,縮短了生產(chǎn)周期,降低了產(chǎn)品成本,更適于規(guī)?;I(yè)生產(chǎn)。
      下面的實(shí)施例有助于本領(lǐng)域技術(shù)人員更全面地理解本發(fā)明,但不以任何方式限制本發(fā)明。
      實(shí)施例1抗原的設(shè)計(jì)與制備1、抗原(菌株/卡介苗)材料1.1野生型為凍干保存人型結(jié)核分支菌H37RV(購自北京生物制品研究所)。
      1.2耐藥型為從臨床患者分離耐異煙肼株(R-INH-TB 010)和耐利福平株(R-RFP-TB 001)。本研究菌株從綜合醫(yī)院檢驗(yàn)科結(jié)核患者中分離,本發(fā)明人可以提供相關(guān)耐藥菌株;相同菌株可以從結(jié)核病??漆t(yī)院檢驗(yàn)科獲得,同樣可以自行分離。
      1.3卡介苗(BCG)(購自北京生物制品研究所)。
      2、抗原制備2.1野生型結(jié)核菌的制備野生株啟開菌種接種于蘇通馬鈴薯培養(yǎng)基,置37℃培養(yǎng)2~3周,然后移種在蘇通綜合培養(yǎng)基上,于37℃表面培育2~3周,再在甘油肉湯培養(yǎng)基上移種1~2代供大量接種之用。
      接種用接種環(huán)挑取一塊生長良好的菌膜,輕輕移種于5%(ml/ml)甘油肉湯培養(yǎng)基的表面,菌膜應(yīng)不下沉。接種后37℃培育8~10周,要避免振動(dòng)以免菌膜下沉。培育3周左右如培養(yǎng)瓶中菌膜未鋪滿表面,或培養(yǎng)期間有污染者應(yīng)廢棄。
      滅菌原液可用不超過0.1%(ml/ml)甲醛溶液滅菌,放37℃2~3天。滅菌后用無菌絨布或?yàn)V紙過濾除去菌體。
      制備得到的野生型結(jié)核桿菌菌液(抗原),最終濃度不低于1×108個(gè)/ml。
      2.2耐藥型結(jié)核菌的制備篩選將從臨床患者得到的試樣接種于加入異煙肼(INH)1μg/ml或利福平(RFP)50μg/ml的蘇通馬鈴薯培養(yǎng)基,置37℃培養(yǎng)2~3周,然后移種在含有同樣濃度異煙肼或利福平的蘇通綜合培養(yǎng)基上,于37℃表面培育2~3周,再在含有同樣濃度異煙肼或利福平的甘油肉湯培養(yǎng)基上移種1~2代供大量接種之用。
      接種用接種環(huán)挑取一塊生長良好的菌膜,輕輕移種于5%(ml/ml)含有同樣濃度異煙肼或利福平的甘油肉湯培養(yǎng)基的表面,菌膜應(yīng)不下沉。接種后37℃培育8~10周,要避免振動(dòng)以免菌膜下沉。培育3周左右如培養(yǎng)瓶中菌膜未鋪滿表面,或培養(yǎng)期間有污染者應(yīng)廢棄。
      滅菌原液可用不超過0.1%(ml/ml)甲醛溶液滅菌,放37℃2~3天。滅菌后用無菌絨布或?yàn)V紙過濾除去菌體。
      分別得到耐異煙肼株(R-INH-TB 010)和耐利福平株(R-RFP-TB 001)菌液(抗原)。制備得到的耐藥型結(jié)核桿菌最終濃度不低于1×108個(gè)/ml。
      實(shí)施例2動(dòng)物免疫本發(fā)明選用母雞作為免疫動(dòng)物,與常用的馬,羊等動(dòng)物及單克隆抗體等制備抗體的方法不同。它的主要特點(diǎn)是抗原需用量小,抗體產(chǎn)量高,因此可以在短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生提供大量人群使用的抗體。具體步驟包括1.抗原組合,結(jié)核桿菌來自實(shí)施例1中野生型結(jié)核桿菌、異煙肼耐藥型結(jié)核桿菌、利福平耐藥型結(jié)核桿菌,分別與卡介苗組合,構(gòu)成A、滅活野生型結(jié)核桿菌和卡介苗;B、滅活異煙肼耐藥型結(jié)核桿菌和卡介苗;C、滅活利福平耐藥型結(jié)核桿菌和卡介苗三種抗原。使用時(shí),每種結(jié)核菌與卡介苗的體積比均為1∶1;2.動(dòng)物選擇,用母雞(出生6-8個(gè)月)作為主要免疫用動(dòng)物;3.采用皮內(nèi)和肌肉兩種注射途徑,抗原分別選用上述A、B和C抗原組合,與不完全福氏佐劑(液體石蠟和羊毛脂)的體積比分別為1∶1,充分混合后注射動(dòng)物,每只雞用量1ml;4.于第十五天和第三十天分別加強(qiáng)注射一次(每只雞1ml);5.從第三次注射后的第三天開始收集雞蛋(共收集6個(gè)月,3個(gè)月時(shí)加強(qiáng)免疫一次),用于提取抗體。
      實(shí)施例3從蛋黃中提取抗體本發(fā)明對(duì)原有的提取方法進(jìn)行了改進(jìn),采用無毒的試劑及溫和的理化條件,保持抗體的活性,對(duì)人完全無毒副作用。具體步驟為
      1.將免疫雞蛋黃用蒸餾水稀釋(1∶5),充分?jǐn)嚢瑁?.10℃以下濾紙過濾,收集濾液;3.加入33%的飽和硫酸銨,使抗體蛋白沉淀;4.離心(3000r/min 20min 4℃)后收集沉淀,將其融于生理鹽水;5.用生理鹽水10℃以下透析過夜;定容后得到初提抗體;6.用蛋白酶處理抗體,通過柱層析(DEAE-SephadexA50,SephadexG200凝膠)分離有中和作用的片段.;7.用生理鹽水溫度10℃以下透析過夜,得到精制抗體。
      實(shí)施例4抗體純度及效價(jià)測(cè)定1.應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)測(cè)定抗體滴度.將滅活 野生型結(jié)核桿菌、滅活 異煙肼耐藥型結(jié)核桿菌和滅活 利福平耐藥型結(jié)核桿菌作為抗原,包被96孔酶標(biāo)板,4℃過夜,然后將抗體從1∶200開始倍比稀釋,之后加入酶標(biāo)板,37℃孵育2小時(shí),然后加入1∶5000稀釋的酶標(biāo)記抗雞IgY抗體。最后加入化學(xué)底物(辣根過氧化物酶)顯色,測(cè)定光密度。IgY效價(jià)均大于1∶1024。
      2.抗體純度測(cè)定將抗體樣本用聚丙烯酰胺凝膠電泳分離,然后用考馬斯亮藍(lán)染色1小時(shí),再用5%乙酸脫色,檢查色帶,證明獲得IgY抗體純品。
      實(shí)施例5間接動(dòng)物效價(jià)實(shí)驗(yàn)在4支試管中分別放入野生型結(jié)核桿菌液2ml,并分別混合2ml初級(jí)抗體(a)、精制抗體(b)作為實(shí)驗(yàn)組,混合正常IgY(c)和生理鹽水(d)作為對(duì)照組,37℃反應(yīng)30分鐘。每組取體重300~400g的雌性豚鼠3只,從腹股溝皮下注射上述各種混合液。經(jīng)10-14天觀察,發(fā)現(xiàn)對(duì)照組出現(xiàn)注射局部出現(xiàn)小節(jié)壞死潰瘍,同時(shí)附近淋巴結(jié)腫大,干酪化。繼而出現(xiàn)全身臟器結(jié)核性病點(diǎn),甚至死亡。當(dāng)實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物注射抗體中和后的菌液,24-48小時(shí)注射局部區(qū)出現(xiàn)潰瘍,但迅速趨向痊愈,附近淋巴結(jié)不出現(xiàn)干酪化。10-14天后,解剖檢查中觀察淋巴結(jié)、肝、脾、肺等臟器有無結(jié)核病變。
      此外,對(duì)異煙肼耐藥型結(jié)核桿菌和利福平耐藥型結(jié)核桿菌進(jìn)行的間接動(dòng)物效價(jià)實(shí)驗(yàn)得到類似的結(jié)果。
      實(shí)施例6抗細(xì)胞吸附試驗(yàn)試驗(yàn)選用兩種細(xì)胞進(jìn)行,一組為支氣管細(xì)胞(HBE4/E7),另一組為巨噬細(xì)胞(PMC2),兩種細(xì)胞均來自人體組織,可以體外多代培養(yǎng)(細(xì)胞株從美國細(xì)胞中心ATCC購買)?,F(xiàn)將細(xì)胞于60mm平皿過夜培養(yǎng),使之總數(shù)達(dá)3×106。吸取培養(yǎng)液后,分別加入1ml抗野生型結(jié)核桿菌的初提抗體(a)、抗野生型結(jié)核桿菌的精制抗體(b)和正常IgY(c)反應(yīng)30分鐘。同時(shí),將初級(jí)抗體(a)、精制抗體(b)和正常IgY(c)分別放入于1×108細(xì)菌懸液中,37℃反應(yīng)30分鐘。然后,將混有抗體的細(xì)菌懸液加入細(xì)胞培養(yǎng)皿內(nèi)(將抗體稀釋液吸取干凈)。37℃孵育10分鐘后,吸去反應(yīng)液,用生理鹽水洗3次,每次5分鐘。用戊二醛固定5分鐘,生理鹽水洗3次,進(jìn)行結(jié)核菌染色,脫色后于顯微鏡下計(jì)數(shù)每一千個(gè)細(xì)胞表面吸附結(jié)核菌的數(shù)量。每組有三個(gè)平皿。試驗(yàn)結(jié)果細(xì)胞表面吸附結(jié)核菌數(shù)統(tǒng)計(jì),支氣管細(xì)胞(a)25.3、(b)28.6、(c)225.0;巨噬細(xì)胞(a)24.3、(b)26.6、(c)248.9。
      此外,對(duì)抗異煙肼耐藥型結(jié)核桿菌和抗利福平耐藥型結(jié)核桿菌的初提抗體和精制抗體所進(jìn)行的抗細(xì)胞吸附試驗(yàn)得到類似的結(jié)果。
      實(shí)施例7安全試驗(yàn)取體重300~400g的雌性豚鼠2只,各皮下注射抗野生型結(jié)核桿菌的精制抗體IgY(2.0ml,于第3、5日觀察局部反應(yīng),除輕度紅腫外,無膿腫及壞死,并于第7日局部反應(yīng)消失,體重不輕于注射前,判為合格。如體重有輕微下降,可繼續(xù)觀察3日,如體重上升且高于注射前可判為合格。對(duì)照組同樣取體重300~400g的雌性豚鼠2只,各皮下注射滅菌生理鹽水2ml。試驗(yàn)結(jié)果,處理3、5日未發(fā)現(xiàn)膿腫和壞死現(xiàn)象,體重?zé)o對(duì)照組無顯著差異。
      此外,對(duì)抗異煙肼耐藥型結(jié)核桿菌和抗利福平耐藥型結(jié)核桿菌的精制抗體進(jìn)行的安全試驗(yàn)得到相同的結(jié)果。
      實(shí)施例8人體試驗(yàn)正常人(志愿者)4名,接受口腔噴霧(制劑為抗野生型結(jié)核桿菌的精制抗體IgY)試驗(yàn)7天,每天兩次。4名實(shí)驗(yàn)者均未出現(xiàn)任何不良反應(yīng)。通過對(duì)其唾液中ELISA檢測(cè),發(fā)現(xiàn)噴入的抗體可在口腔滯溜12小時(shí)以上。4名結(jié)核菌帶菌但未發(fā)病者連續(xù)使用噴劑5天,每天取唾液進(jìn)行結(jié)核菌涂片檢查,發(fā)現(xiàn)其口腔中結(jié)核菌的數(shù)量逐漸減少,7天后為陰性。
      實(shí)施例9預(yù)防結(jié)核免疫制劑的配制配方特異性抗野生型結(jié)核桿菌初提抗體IgY0.5%(主要功能劑)蛋黃蛋白 5%(穩(wěn)定劑)甘油 1.0%(穩(wěn)定劑)氯化鈉 0.85%(滲透壓保持劑)苯甲酸鈉 0.1%(防腐劑)蒸餾水 加至100ml首先在60ml蒸餾水中按上述組份和順序加入并攪拌后加水至100ml,混均后0.22μ膜過濾除菌,裝入無菌噴霧瓶中,每瓶10ml。
      實(shí)施例10治療結(jié)核免疫制劑的配制(I)配方特異性抗野生型結(jié)核桿菌精制抗體IgY10.5%(主要功能劑)蛋黃蛋白 5%(穩(wěn)定劑)氯化鈉 0.85%(滲透壓保持劑)苯甲酸鈉 0.1%(防腐劑)蒸餾水 加至100ml首先在60ml蒸餾水中按上述組份和順序加入并攪拌后加水至100ml,混均后0.22μ膜過濾除菌,裝入無菌玻璃瓶中,每瓶10ml。
      實(shí)施例11治療結(jié)核免疫制劑的配制(II)配方特異性抗異煙肼耐藥型結(jié)核桿菌精制抗體IgY10.5%(主要功能劑)蛋黃蛋白 5%(穩(wěn)定劑)氯化鈉 0.85%(滲透壓保持劑)苯甲酸鈉 0.1%(防腐劑)蒸餾水 加至100ml首先在60ml蒸餾水中按上述組份和順序加入并攪拌后加水至100ml,混均后0.22μ膜過濾除菌,裝入無菌玻璃瓶中,每瓶10ml。
      實(shí)施例12治療結(jié)核免疫制劑的配制(III)配方特異性抗利福平耐藥型結(jié)核桿菌精制抗體IgY10.5%(主要功能劑)蛋黃蛋白 5%(穩(wěn)定劑)氯化鈉 0.85%(滲透壓保持劑)苯甲酸鈉 0.1%(防腐劑)蒸餾水 加至100ml首先在60ml蒸餾水中按上述組份和順序加入并攪拌后加水至100ml,混均后0.22μ膜過濾除菌,裝入無菌玻璃瓶中,每瓶10ml。
      權(quán)利要求
      1.一種用于防治結(jié)核菌感染的特異性抗體IgY,它是由結(jié)核桿菌免疫母雞的雞卵中產(chǎn)生的。
      2.如權(quán)利要求1所述抗體IgY的制備方法,其特征在于該方法包括以下步驟A、抗原設(shè)計(jì);B、免疫動(dòng)物;C、提取抗體;D、純度測(cè)定。
      3.如權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于抗原的獲取步驟是將野生型結(jié)核桿菌于蘇通馬鈴薯培養(yǎng)基上接種培養(yǎng),再移種于甘油肉湯培養(yǎng)基表面培養(yǎng);異煙肼耐藥型結(jié)核桿菌于含異煙肼的蘇通馬鈴薯培養(yǎng)基上接種培養(yǎng),再移種于含異煙肼的甘油肉湯培養(yǎng)基表面培養(yǎng);利福平耐藥型結(jié)核桿菌于含利福平的蘇通馬鈴薯培養(yǎng)基上接種培養(yǎng),再移種于含利福平的甘油肉湯培養(yǎng)基表面培養(yǎng);三種結(jié)核桿菌原液經(jīng)甲醛溶液滅活后,分別與卡介苗構(gòu)建組成三種抗原。
      4.如權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于免疫動(dòng)物選用出生6-8個(gè)月的母雞,抗原選用滅活野生型、滅活異煙肼耐藥型和滅活利福平耐藥型結(jié)核桿菌分別與卡介苗組成的三種抗原,將抗原與不完全福氏佐劑充分混合后注射免疫動(dòng)物,之后定期加強(qiáng)免疫兩次,連續(xù)收集雞蛋6個(gè)月,用于提取抗體IgY。
      5.如權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于提取抗體的具體步驟是將免疫雞蛋黃用蒸餾水稀釋,充分?jǐn)嚢?,濾紙過濾,收集濾液,加入飽和硫酸銨,使抗體蛋白沉淀;離心后將沉淀溶于生理鹽水,透析過夜,定容后得到初提抗體;經(jīng)DEAE-SephadexA50和SephadexG200凝膠柱層析,分離有中和作用的片段.,生理鹽水透析過夜,得到精制抗體。
      6.如權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于抗體純度測(cè)定方法包括1)、酶聯(lián)免疫法測(cè)定抗體滴度,將滅活野生型、滅活異煙肼耐藥型和滅活利福平耐藥型結(jié)核桿菌作為抗原,包被96孔酶標(biāo)板過夜,加入稀釋抗體孵育,然后加入稀釋的酶標(biāo)記抗雞IgY抗體,最后加入化學(xué)底物顯色,測(cè)定光密度,IgY效價(jià)均大于1∶1024;2)、聚丙烯酰胺凝膠電泳分離鑒定,將抗體樣本經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳分離,然后用考馬斯亮藍(lán)染色,檢查色帶,證明獲得IgY抗體純品。
      7.特異性抗體IgY預(yù)防結(jié)核的免疫制劑,其特征是所說免疫制劑包含有以下功能組分與基本組份特異性抗野生型結(jié)核桿菌初提抗體IgY蛋黃蛋白-穩(wěn)定劑甘油-穩(wěn)定劑氯化鈉-滲透壓保持劑苯甲酸鈉-防腐劑蒸餾水
      8.特異性抗體IgY治療結(jié)核的免疫制劑,其特征是所說免疫制劑含有的功能組分分別是特異性抗野生型結(jié)核桿菌精制抗體IgY、特異性抗異煙肼耐藥型結(jié)核桿菌精制抗體IgY特異性抗利福平耐藥型結(jié)核桿菌精制抗體IgY;共同基本組分是蛋黃蛋白-穩(wěn)定劑甘油-穩(wěn)定劑氯化鈉-滲透壓保持劑苯甲酸鈉-防腐劑蒸餾水。
      9.特異性抗體IgY在制備預(yù)防與治療結(jié)核菌感染藥物中的應(yīng)用。
      全文摘要
      本發(fā)明涉及特異性抗體IgY免疫制劑及其在預(yù)防與治療結(jié)核菌感染中的應(yīng)用,所說抗體的實(shí)施方案包括抗原設(shè)計(jì)、免疫動(dòng)物、制備抗體、抗體純化及效價(jià)測(cè)定、抗體中和作用測(cè)定及制劑制備等步驟,由于所說抗體具有識(shí)別結(jié)核桿菌表面蛋白和其它抗原的特異的Fab或(Fab)’片段的能力,用它預(yù)防與治療結(jié)核桿菌感染更具特異性,與現(xiàn)有技術(shù)中使用的產(chǎn)品如干擾素和中藥制劑等相比,效果更加顯著,本發(fā)明通過對(duì)現(xiàn)有技術(shù)提取抗體方法的改進(jìn),簡化了純化方法,縮短了生產(chǎn)周期,降低了產(chǎn)品成本,更適于規(guī)?;I(yè)生產(chǎn)。
      文檔編號(hào)C07K16/12GK1569231SQ20041003782
      公開日2005年1月26日 申請(qǐng)日期2004年5月11日 優(yōu)先權(quán)日2004年5月11日
      發(fā)明者常兵 申請(qǐng)人:常兵
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