專利名稱：作為dgat1抑制劑的1,3,4-二唑衍生物的制作方法
作為DGAT1抑制劑的1,3,4-P惡二唑衍生物
本發(fā)明涉及抑制乙酰CoA (乙酰輔酶A):甘油二酯酰基轉(zhuǎn)移酶 (DGAT1)活性的化合物、其制備方法、含有其作為活性成分的藥物組 合物、與DGAT1活性有關(guān)的疾病狀態(tài)的治療方法、上述化合物作為 藥物的用途、以及它們?cè)谥苽溆糜谠跍匮獎(jiǎng)游锶缛酥幸种艱GAT1的 藥物中的用途。具體的說(shuō)，本發(fā)明涉及用于治療在溫血?jiǎng)游镏腥缛说?II型糖尿病、胰島素抵抗、糖耐量降低和肥胖癥的化合物，更特別地， 涉及這些化合物在制備用于治療在溫血?jiǎng)游镏腥缛说腎I型糖尿病、胰 島素抵抗、糖耐量降低和肥胖癥的藥物中的用途。
?；o酶A:甘油二酯?；D(zhuǎn)移酶(DGAT)在細(xì)胞的微粒體部分發(fā) 現(xiàn)。其通過(guò)促進(jìn)甘油二酯與酰基輔酶A的結(jié)合而催化在磷酸甘油酯路 徑(其被認(rèn)為是甘油三酯合成的主要的路徑)中的最終反應(yīng)，從而導(dǎo)致 形成甘油三酯。盡管不清楚DGAT是否限制甘油三酯的合成速度，但 是其催化該路徑中用于產(chǎn)生此類型分子的唯一步驟[Lehner & Kuksis (1996) Biosynthesis of triacylglycerols(甘油三酉旨的生4勿合成).Prog. Lipid Res. 35: 169-201]。
已經(jīng)克隆和表征了兩種DGAT基因。所編碼的兩種蛋白質(zhì)均催化 相同反應(yīng)，然而它們不具有序列同源性。從序列數(shù)據(jù)庫(kù)斗全索來(lái)識(shí)別 DGAT1基因，這是因?yàn)槠渑c酰基輔酶A:膽固醇?；D(zhuǎn)移酶(ACAT)基 因的相似性[Cases等人(1998) Identification of a gene encoding an acyl CoA:diacylglycerol acyltransferase, a key enzyme in triacylglycerol synthesis (編碼?；o酶A:甘油二酯?；D(zhuǎn)移酶(甘油三酯合成中的關(guān) 鍵酶)的基因的識(shí)別)Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95: 13018-13023]。已經(jīng) 在許多哺乳動(dòng)物組織(包括脂肪細(xì)胞中)發(fā)現(xiàn)了 DGATl活性。
由于以前沒(méi)有分子探針，對(duì)DGATl的調(diào)節(jié)(regulation)知道得 很少。已知在脂肪細(xì)胞分化期間，DGATl被顯著上調(diào)。
對(duì)基因敲除小鼠的研究表明，DGATl的活性調(diào)節(jié)劑在II型糖尿 病和肥胖癥的治療是重要的。DGATl敲除(Z)ga",小鼠是可成活的， 并且能夠合成甘油三酯，正如由正常的空腹血清甘油三酯水平和正常 的脂肪組織組成所證明的那樣。Z)gfl W —A小鼠與野生型小鼠相比在初始
5期間具有較少脂肪組織，并且對(duì)飲食誘發(fā)的肥胖癥具有耐性。在正常
飲食和高脂肪飲食的情況下，z^^,-小鼠的代謝率比野生型小鼠高~
20% [Smith等人(2000) Obesity resistance and multiple mechanisms of triglyceride synthesis in mice lacking DGAT (肥胖癥耐性和缺乏DGAT 的小鼠中甘油三酯合成的復(fù)雜機(jī)理).Nature Genetics 25: 87-90]. Z)g" /v—小鼠的體力活動(dòng)增加占其能量消耗增加的一部分。Z)g^,-小鼠還顯 示胰島素敏感性提高和葡萄糖處理速率增加20%。 DgW,-小鼠的瘦蛋 白(leptin)水平被降低50%與脂肪質(zhì)量降低50%是符合的。
當(dāng)DgW,-小鼠與小鼠雜交時(shí)，這些小鼠顯示oM 6表型 [Chen等人(2002) Increased insulin and leptin sensitivity in mice lacking acyl CoA:diacylglycerol acylt薩sferase (缺乏?；o酶A:甘油二酉旨酰基 轉(zhuǎn)移酶的小鼠中升高的胰島素和瘦蛋白敏感性)J. Clin. Invest. 109:1049-1055],這表明DgaW;表型需要完整的瘦蛋白路徑。當(dāng) AgW盧-小鼠與jgow"小鼠雜交時(shí)，與野生型ago""或06/06/ DgW,-小 鼠相比，觀察到體重降低、葡萄糖水平正常和胰島素水平降低70% 。
將脂肪組織從 、鼠移植到野生型小鼠中為這些小鼠提供 了對(duì)飲食誘發(fā)的肥胖癥的耐性和改善的葡萄糖代謝作用[Chen等人 (2003) Obesity resistance and enhanced glucose metabolism in mice transplanted with white adipose tissue lacking acyl CoA:diacylglycerol acyltmnsferase (移植了缺乏酰基輔酶A:甘油二酯?；D(zhuǎn)移酶的白色脂 肪組織的小鼠中的肥胖癥耐性和提高的葡萄糖代謝)J. Clin. Invest. Ill: 1715-1722]。
國(guó)際專利申請(qǐng)WO2004/047755 (Tularik和Japan Tobacco)和 WO2005/013907 (Japan Tobacco和Amgen)描述了作為DGAT-l抑制劑的 稠合的二環(huán)含氮雜環(huán)。JP2004-67635 (Otsuka Pharmaceuticals)描述了噻 唑酰胺基取代的苯基化合物，其還被烷基膦酸鹽(酯)取代并抑制 DGAT-l。 WO2004/100881 (Bayer)描述了被咪唑、嚅唑或噻唑取代的聯(lián) 苯氨基化合物，其抑制DGAT-l。
我們的共同未決的國(guó)際申請(qǐng)PCT/GB2005/004726描述了抑制 DGAT-l的哺二唑化合物，包括類似于下面式(I)的化合物的兩種化合 物。在PCT/GB2005/004726中的一些化合物還顯示出抗ACAT酶的活 性。因此，本發(fā)明提供了式(I)的化合物
<formula>formula see original document page 7</formula>
或其鹽，其中
每個(gè)R獨(dú)立地選自氟、氯、氰基、曱基、乙基、曱氧基、乙氧基、三氟 甲基、三氟曱氧基和二氟曱氧基； n是l、 2或3。
我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，如上式(I)的那些的化合物具有良好的DGAT活性和 有利的物化性質(zhì)(例如溶解度)和/或有利的藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)。
應(yīng)當(dāng)意識(shí)到，式(I)包含其中羧基和氧鍵(oxy link)在環(huán)己基環(huán)上相 對(duì)于彼此呈順式或反式排列的化合物。
為避免疑義，應(yīng)理解的是，在本發(fā)明的說(shuō)明書(shū)中當(dāng)基團(tuán)被限定為 "如前文所定義"或"如上所定義"時(shí)，所述基團(tuán)包括該基團(tuán)的第一次出現(xiàn) 和最廣泛的定義以及該基團(tuán)的每個(gè)及所有的特定定義。
如果未另外說(shuō)明，特定基團(tuán)的合適的任選取代基是對(duì)本文中類似 基團(tuán)所定義的那些。
式(I)的化合物可以形成穩(wěn)定的酸或堿鹽，在上述情況中將化合物 作為鹽給藥可以是合適的，且藥學(xué)可接受的鹽可以通過(guò)例如下述那些 的常規(guī)方法來(lái)制備。
合適的藥學(xué)可接受的鹽包括酸加成鹽，例如曱烷磺酸鹽、曱苯磺 酸鹽、ot-甘油磷酸鹽、富馬酸鹽、鹽酸鹽、檸檬酸鹽、馬來(lái)酸鹽、酒 石酸鹽和(較不優(yōu)選的)氫溴酸鹽。合適的還有與磷酸和硫酸形成的鹽。 在另一方面，合適的鹽是堿鹽，例如第I族(堿金屬)鹽、第II族(堿土金 屬)金屬鹽、有機(jī)胺鹽(例如三乙胺、嗎啉、iV-曱基哌啶、7V-乙基哌啶、 普魯卡因、二千胺、A^V-二節(jié)基乙胺、三(2-羥乙基)胺、,甲基d-葡糖 胺和氨基酸如賴氨酸)。根據(jù)荷電官能團(tuán)的數(shù)量以及陽(yáng)離子或陰離子的 價(jià)態(tài)，可存在多于一個(gè)陽(yáng)離子或陰離子。
但是，為促進(jìn)制備期間的鹽的分離，優(yōu)選在所選溶劑中溶解度較 低的鹽，無(wú)論其是否是藥學(xué)可接受的。在本發(fā)明中，要理解的是，式(I)的化合物或其鹽可以顯示互變異 構(gòu)現(xiàn)象，且在本說(shuō)明書(shū)中的分子式圖僅代表可能的互變異構(gòu)形式之一 。
要要理解的是，本發(fā)明包括抑制DGAT1活性的任何互變異構(gòu)形式，并 不僅限于在分子式圖中所示的任何一種互變異構(gòu)形式。 式(I)的化合物的前藥或其鹽也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。 各種形式的前藥在本領(lǐng)域中是已知的。這些前藥衍生物的例子參
見(jiàn)
a) Design of Prodrugs (前藥設(shè)計(jì))，H. Bundgaard編，(Elsevier， 1985)和 Methods in Enzymology (酶學(xué)中的方法)，Vol, 42， 09-396頁(yè)，K. Widder等人編(Academic Press, 1985);
b) A Textbook of Drug Design and Development (藥物設(shè)計(jì)和開(kāi)發(fā)手冊(cè))， Krogsgaard-Larsen和H. Bundgaard編,第5章 "Design and Application of Prodrugs (前藥設(shè)計(jì)和應(yīng)用)"，由H. Bundgaard, 113-191頁(yè)(1991);
c) H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews (高級(jí)藥物輸送綜述)， & 1-38 (1992);
d) H. Bundgaard等人,Journal of Pharmaceutical Sciences, 22， 285 (1988);和
e) N. Kakeya等人，Chem Pharm Bull, H， 692 (1984)。
上述前藥的例子是本發(fā)明化合物的可體內(nèi)裂解的酯。含有羧基的 本發(fā)明的化合物的可體內(nèi)裂解的酯是，例如，在人或動(dòng)物體內(nèi)裂解以 產(chǎn)生母體酸的藥學(xué)可接受的酯。合適的藥學(xué)可接受的羧基酯包括(1-6C) 烷基酯，例如曱基酯或乙基酯；(l-6C)烷氧基曱基酯，例如曱氧基甲 基酯；(l-6C)烷酰氧基曱基酯，例如新戊酰氧基曱基酯；2-苯并(c)呋 喃酮基酯；(3-8C)環(huán)烷氧基羰基氧基(l-6C)烷基酯，例如1-環(huán)己基羰 基氧基乙基酯；1，3-二氧戊環(huán)-2-基曱基酯，例如5-曱基-l,3-二氧戊 環(huán)-2-基甲基酯；(l-6C)烷氧基羰基氧基乙基酯，例如l-曱氧基羰氧基 乙基酯；氨基羰基曱基酯以及其單-或二-N-((l-6C)烷基酯)類型，如 N，N-二甲基氨基羰基甲基酯和N-乙基氨基羰基曱基酯；并且可以在本 發(fā)明化合物的任何羧基處形成。含有羥基的本發(fā)明的化合物的可體內(nèi) 裂解的酯是，例如，在人或動(dòng)物體內(nèi)裂解以產(chǎn)生母體羥基的藥學(xué)可接 受的酯。合適的藥學(xué)可接受的羥基酯包括(1-6C)烷?；?，例如乙酰 基酯；和苯曱?；?，其中苯基可被氨基曱基或N-取代的單-或二-(1 -60)烷基氨基曱基所取代，例如4-氨基曱基苯曱?；ズ?-N，N-二 曱基氨基曱基苯曱?；?。
本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解的是，某些式(I)的化合物含有不對(duì)稱取 代的碳和/或硫原子，因此可能以旋光和外消旋形式存在或被分離。一 些化合物可能表現(xiàn)出同質(zhì)多晶。要理解的是，本發(fā)明包含任何外消旋、 旋光、同質(zhì)多晶或立體異構(gòu)形式或其混合物，這些形式具有可用于抑 制DGAT1活性的性質(zhì)，本領(lǐng)域/>知如何制備旋光形式(例如通過(guò)重結(jié) 晶技術(shù)拆分外消旋體，通過(guò)由旋光的起始材料合成，通過(guò)手性合成， 通過(guò)酶促拆分，通過(guò)生物轉(zhuǎn)化，或通過(guò)使用手性固定相進(jìn)行色譜分離) 和如何通過(guò)下文所述的標(biāo)準(zhǔn)試一瞼來(lái)確定抑制DGAT1活性的效力。
還應(yīng)當(dāng)理解的是，某些式(I)的化合物和其鹽可以以溶劑化和非溶 劑化形式存在，例如，水合形式。要理解的是，本發(fā)明包括抑制DGAT1 活性的所有上述溶劑化形式。
如上所述，我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了大量具有良好DGAT1抑制活性的化 合物。它們通常具有良好的物理和/或藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)。下列化合物具 有優(yōu)選的藥物和/或物理和/或藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)。它們還可以具有對(duì) AC AT的良好選擇性。
在一個(gè)方面，羧基和氧鍵在環(huán)己基環(huán)上呈順式構(gòu)型，從而得到式 (IA)的化合物
(IA)
在另一方面，羧基和氧鍵在環(huán)己基環(huán)上呈反式構(gòu)型，從而得到式 (IB)的化合物
(IB)在上下文中對(duì)式(I)的化合物的提及也應(yīng)適用于式(IA)和(IB)的化合物。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，提供了式(I)、 (IA)和(IB)的化合物， 在一個(gè)可替換的實(shí)施方式中，提供了式(I)、 (IA)和(IB)的化合物的鹽， 特別是藥學(xué)可接受的鹽。在另一個(gè)實(shí)施方式中，提供了式(I)、 (IA)和 (IB)的化合物的前藥，特別是可體內(nèi)裂解的前藥。在另一個(gè)實(shí)施方式 中，提供了式(I)、 (IA)和(IB)的化合物的前藥的鹽，特別是藥學(xué)可接受 的鹽。式(I)、 (IA)和(IB)的化合物中的取代基的特殊值如下所述。這些 值可在與上下文中所定義的任何其他值、定義、權(quán)利要求或?qū)嵤┓绞?相適應(yīng)時(shí)進(jìn)朽"使用。
1) n是l、 2或3，且每個(gè)R是氟。
2) 當(dāng)n〉l時(shí)，至少一個(gè)R是氟。
3) R選自氟和三氟曱基。
4) n是1 。
5) n是2。
6) n是3。
本發(fā)明的進(jìn)一步優(yōu)選的化合物是各實(shí)施例，它們每個(gè)均提供了本 發(fā)明的另一個(gè)獨(dú)立的方面。在其它方面中，本發(fā)明還包含實(shí)施例中的 任何兩種或更多種化合物。
在本發(fā)明的另 一個(gè)方面，提供了下列物質(zhì)中的任何一種或多種或 其鹽
4—(3-氟-4-{[5-(2,4，5-三氟-苯基氨基)-[1,3,4]喁二唑-2-羰基]-氨基}-苯氧 基)-環(huán)己烷曱酸；
4-(3-氟-4-{[5-(3,4，5-三氟-苯基氨基)-[1,3,4]"惡二唑-2-羰基]-氨基}-苯氧 基)-環(huán)己烷曱酸；
或?qū)嵤├?-5中命名的任何化合物。 方法
式(I)的化合物及其鹽可以通過(guò)已知適用于制備在化學(xué)上相關(guān)的 化合物的任何方法來(lái)制備。這種方法當(dāng)用于制備式(I)的化合物或其藥 學(xué)可接受的鹽時(shí)，作為本發(fā)明的另一個(gè)特征被提供。在本發(fā)明的另 一個(gè)方面，還提供了式(I)的化合物及其鹽可以通過(guò)
如下面的方法a)到b)來(lái)制備(除非另有說(shuō)明，其中所有變量如上文中 對(duì)式(I)的化合物所定義)。
a)使式(2)的胺與式(3)的羧酸鹽反應(yīng)，其中RP是(1-4C)烷基(例如 甲基、乙基、異丙基和叔丁基)，然后將RP基團(tuán)水解；
o
(2) (3) b)將式(4)的化合物環(huán)化(其中X是S或0),其中RP是(14C)烷 基，然后將RP基團(tuán)水解
o
然后，如果必要
1) 除去任何保護(hù)基；和/或
2) 形成藥學(xué)可接受的鹽。
方法a)
式(2)的化合物可以通過(guò)應(yīng)用本領(lǐng)域公知的標(biāo)準(zhǔn)合成方法來(lái)制備。
(2A)
式(2A)的化合物可以通過(guò)在方案1中所舉例說(shuō)明的SnAH匕學(xué)來(lái)制 備，其中RP是例如烷基，且X是例如氟。當(dāng)X是氟時(shí)，2-和4-氟取 代基的竟?fàn)幮灾脫Q可能導(dǎo)致產(chǎn)品的混合物。然而，所需產(chǎn)品可以通過(guò) 標(biāo)準(zhǔn)^支術(shù)而容易地分離。
ii<formula>formula see original document page 12</formula>
方案1
式(3)的化合物可以通過(guò)酯(5a)(其使用已公開(kāi)的方法制備)的堿性 水解來(lái)制造(J.Het. Chem. 1977, 14, 1385-1388)。酯(5a)可以以如方法b)
s)的環(huán):作用來(lái)制備。、《、、z ' z 、 、 ,<formula>formula see original document page 12</formula>
制備式(5a)的化合物的可替換方法如下所示
<formula>formula see original document page 12</formula>
偶聯(lián)以形成酰
胺鍵。例如使用合適的偶聯(lián)反應(yīng)，如任選在DMAP的存在下在合適的 溶劑如DCM、氯仿或DMF中在室溫下與EDAC進(jìn)行的石友二亞胺偶聯(lián) 反應(yīng)。
RP基團(tuán)可以通過(guò)本領(lǐng)域已知用于酯水解的任何方法來(lái)去除。方法b)
式(4)和(5b)的化合物(其中X是S)可以通過(guò)氨基羰基酰肼或乙氧基羰基酰肼與硫代異氰酸酯或硫代異氰酸酯等價(jià)物例如氨基硫代羰基咪唑在合適的溶劑(例如DMF或MeCN)在0到100°C的溫度下反應(yīng)。從苯胺制備氨基羰基酰肼和乙氧基羰基酰肼的制備在本領(lǐng)域中是公知的。例如苯胺與甲基草酰氯在吡啶的存在下在合適的溶劑如DCM中反應(yīng)，然后在O到100。C之間的溫度下在合適的溶劑如乙醇中與肼反應(yīng)。
然后，可以使用例如試劑(如羰基二咪唑或甲苯磺酰氯)和合適的堿(例如三乙胺)在本領(lǐng)域已知的條件下使式(4)的化合物環(huán)化。
異(硫代)氰酸酯R^-NCX (其中X是0或S)可以通過(guò)商業(yè)渠道獲得，或者可以通過(guò)酰氯！^-NH2與例如(硫代)光氣或(硫代)光氣等價(jià)物反應(yīng)然后通過(guò)合適的堿(例如三乙胺)來(lái)制備。Rp基團(tuán)可以通過(guò)在酯水解領(lǐng)域中已知的任何條件而被去除。
應(yīng)當(dāng)意識(shí)到，在本發(fā)明化合物中的多種環(huán)取代基中的一些，例如R可以在上述方法之前或在該方法之后立刻通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)的芳族取代反應(yīng)被引入或立刻通過(guò)常規(guī)的官能團(tuán)修飾來(lái)產(chǎn)生，這些也包括在本發(fā)明的方法方面中。這種反應(yīng)可以將式(I)的 一 種化合物轉(zhuǎn)化為式(I)的另 一 種化合物。這種反應(yīng)和修飾包括，例如，通過(guò)芳族取代反應(yīng)、取代基還原、取代基烷基化和取代基氧化而引入取代基。這種方法的試劑和反應(yīng)條件是化學(xué)領(lǐng)域中是公知的。芳族取代反應(yīng)的具體例子包括使用濃硝酸？ 1入硝基、在Friedel Crafts條件下使用例如酰卣和路易斯酸(例如三氯化鋁)引入酰基、在Friedel Crafts條件下使用卣代烷和路易斯酸(例如三氯化鋁)引入烷基、以及引入卣素基團(tuán)。修飾的具體例子包括通過(guò)例如用鎳催化劑進(jìn)行催化氫化或在鹽酸的存在下經(jīng)加熱用鐵處理將硝基還原為氨基；將烷硫基氧化為烷基亞磺酰基或烷基磺?；?。
如果不能通過(guò)商業(yè)渠道得到，用于例如上述方法的必要起始材料可以通過(guò)選自標(biāo)準(zhǔn)有機(jī)化學(xué)技術(shù)、與已知結(jié)構(gòu)上類似的化合物的合成相似的技術(shù)、在上述參考文獻(xiàn)中已經(jīng)描述或舉例說(shuō)明的技術(shù)、或者與上述方法或?qū)嵤├兴龅亩喾N方法相似的技術(shù)來(lái)制備。讀者進(jìn)一步參考Advanced Organic Chemistry (高等有機(jī)化學(xué))(第5版，Jerry March和Michael Smith著，John Wiley & Sons出版，2001)中關(guān)于反應(yīng)條件
和試劑的一般指導(dǎo)。
應(yīng)當(dāng)意識(shí)到，式(I)的化合物的一些中間體也是新穎的，且這些物質(zhì)作為本發(fā)明的單獨(dú)的獨(dú)立方面而被提供。特別是，式(4)的化合物形成了本發(fā)明的另 一方面。此外式(I)的化合物的酯書(shū)f生物形成了本發(fā)明的另一方面。
還應(yīng)意識(shí)到，在本文提到的一些反應(yīng)中，必要/需要的是保護(hù)化合物中的任何敏感基團(tuán)。必需或希望進(jìn)行保護(hù)的情況對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是已知的，這種保護(hù)的合適方法也是已知的?？梢愿鶕?jù)標(biāo)準(zhǔn)實(shí)踐來(lái)使用常規(guī)保護(hù)基(為說(shuō)明起見(jiàn)，參見(jiàn)T.W. Greene, Protective Groups inOrganic Synthesis (有機(jī)合成中的保護(hù)基)，John Wiley和Sons, 1991)。
去除所述;二 2的任何方便的方法^去除、，選^上述方法以實(shí)現(xiàn)保護(hù)基的去除且使對(duì)分子中其它位置的基團(tuán)的干擾最小。
因此，如果試劑包括，例如，如氨基、羧基或羥基之類的基團(tuán)，在本文所述的一些反應(yīng)中保護(hù)該基團(tuán)可能是需要的。
用于羥基的合適的保護(hù)基的例子是，例如，?；?，如烷?；?例如乙?；?、芳酰基(例如苯甲?；?；甲硅烷基，例如三甲基曱硅烷基；或芳基甲基，例如千基。上述保護(hù)基的脫保護(hù)條件必須根據(jù)保護(hù)基的選擇而改變。因此，例如，如烷?；蚍减；孽；梢酝ㄟ^(guò)例如用合適的堿如堿金屬氬氧化物(例如氬氧化鋰或氬氧化鈉)的水解來(lái)去除?；蛘?，曱硅烷基如三曱基曱硅烷基或SEM可以例如通過(guò)氟化物或通過(guò)含水酸來(lái)去除，或者芳基曱基如千基可以通過(guò)例如在催化劑如Pd/C的存在下氫化而去除。
合適的用于氨基的保護(hù)基是，例如，?；?，例如烷?；缫阴；煌檠趸驶?，如曱氧基羰基、乙氧基羰基或叔丁氧基羰基；芳基曱氧基羰基，例如千氧基羰基；或芳酰基，例如苯曱?；?。上述保護(hù)基的脫保護(hù)條件必須根據(jù)保護(hù)基的選擇而改變。因此，例如，?；缤轷；蛲檠趸驶蚍减；梢岳缤ㄟ^(guò)用合適的堿如堿金屬氫氧化物(例如氬氧化鋰或氬氧化鈉)的水解來(lái)去除?；蛘?，?；缡宥⊙趸驶梢岳缤ㄟ^(guò)用合適的酸如鹽酸、硫酸或磷酸或三氟乙酸處理來(lái)去除，且芳基曱氧基羰基如卡基氧基羰基可以例如通過(guò)使用催化劑如Pd/C的氫化或者用路易斯酸如三(三氟乙酸)硼處理來(lái)去除。適用于伯氨基的可選的保護(hù)基是例如鄰苯二曱?；淇梢酝ㄟ^(guò)用烷基胺如二
曱基氨基丙胺或2-羥基乙胺或用肼處理來(lái)去除。
用于羧基的合適的保護(hù)基是例如酯化基團(tuán)，例如曱基或乙基，其
可以例如通過(guò)用堿如氬氧化鈉水解而去除；或者^(guò)又丁基，其可以例如通過(guò)用酸如有機(jī)酸，例如三氟乙酸處理來(lái)去除；或者千基，其可以例如通過(guò)使用催化劑如Pd/C的氫化而去除。樹(shù)脂也可以用作保護(hù)基。
保護(hù)基可以使用化學(xué)領(lǐng)域公知的常規(guī)技術(shù)在合成的任何方便的階段去除，或者其可以在后面的反應(yīng)步驟或后處理(work-up)中去除。
有機(jī)化學(xué)技術(shù)人員將能夠使用并使在上述參考文獻(xiàn)中含有和提及的信息、以及其中所附的實(shí)施例還有本文中的實(shí)施例，適合于獲得必要的起始材料和產(chǎn)品。
任何保護(hù)基的去除和藥學(xué)可接受的鹽的形成均在使用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)的普通有機(jī)化學(xué)工作者的技藝范圍內(nèi)。此外，在上文中已經(jīng)提供了這些步驟的細(xì)節(jié)。
當(dāng)需要本發(fā)明化合物的旋光形式時(shí)，其可以通過(guò)實(shí)施上述使用旋光的起始材料(其通過(guò)例如在合適的反應(yīng)步驟中的不對(duì)稱誘導(dǎo)而形成)的方法、或通過(guò)使用標(biāo)準(zhǔn)方法來(lái)拆分該化合物或中間體的外消旋形式、或通過(guò)非對(duì)映異構(gòu)體(當(dāng)被制備時(shí))的色譜分離來(lái)獲得。酶促技術(shù)也可用于制備旋光的化合物和/或中間體。
類似地，當(dāng)需要本發(fā)明化合物的純的區(qū)域異構(gòu)體(regioisomer)時(shí)，其可以通過(guò)實(shí)施上述的使用純的區(qū)域異構(gòu)體作為起始材料的方法之 一 、或通過(guò)使用標(biāo)準(zhǔn)方法來(lái)拆分區(qū)域異構(gòu)體或中間體的混合物而獲
^曰付。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了一種藥物組合物，其包括如上文中所定義的式(I)的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、它們與藥學(xué)可接受的賦形劑或載體結(jié)合。
本發(fā)明的組合物可以為適合口服應(yīng)用的形式(例如片劑、錠劑、硬或軟膠嚢、水或油懸浮液、乳液、可分散粉末或顆粒、糖漿或酏劑)、適用于局部應(yīng)用的形式(例如乳膏、油膏、凝膠、或者水或油溶液或懸浮液)、適用于吸入給藥的形式(例如極細(xì)粉末或液體氣溶膠)、適用于吹入給藥的形式(例如極細(xì)粉末)、或者用于腸胃外給藥的形式(例如用
于靜脈內(nèi)、皮下、肌內(nèi)或肌內(nèi)注射(intramuscular dosing)的無(wú)菌水或油
溶液，或作為用于直腸給藥的栓劑)。
本發(fā)明的組合物可以通過(guò)本領(lǐng)域公知的常規(guī)方法(使用常規(guī)藥用賦形劑)來(lái)獲得。因此，旨在用于口服應(yīng)用的組合物可以含有例如一種或多種著色劑、甜味劑、調(diào)味劑和/或防腐劑。
用于片劑配方的合適的藥學(xué)可接受的賦形劑包括，例如，惰性稀釋劑，例如乳糖、碳酸鈉、磷酸鈣或碳酸鈣；?；瘎┖捅澜鈩?，例如玉米淀粉或海藻酸(algenic acid);粘合劑，例如淀粉；潤(rùn)滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石；防腐劑，例如對(duì)羥基苯曱酸乙酯或丙酯；以及抗氧化劑，例如抗壞血酸。片劑配方可以是無(wú)包衣或有包衣的，以改變其崩解和隨后的活性成分在胃腸道內(nèi)的吸收，或者改變其穩(wěn)定性和/或外觀，在每種情況中，使用本領(lǐng)域公知的常規(guī)包衣劑和方法。
用于口服應(yīng)用的組合物可以是硬明膠膠囊的形式，其中活性成分與惰性固體稀釋劑如碳酸鈣、磷酸鈣或高冷土相混和；或者可以是軟明膠膠嚢，其中活性成分與水或油如花生油、液體石蠟或橄欖油相混和。
水性懸浮液通常含有極細(xì)粉末形式的活性成分和一種或多種懸浮劑，例如羧曱基纖維素鈉、曱基纖維素、羥丙基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃蓍膠和阿拉伯樹(shù)膠；分散劑或濕潤(rùn)劑，例如卵磷脂，或烯化氧與脂肪酸的縮合產(chǎn)物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)，或環(huán)氧乙烷與長(zhǎng)鏈脂肪醇的縮合產(chǎn)物(例如，十七環(huán)氧乙烷基鯨蠟醇(heptadeca-ethyleneoxycetanol),或環(huán)氧乙烷與由脂肪酸和己糖醇得到的部分酯的縮合產(chǎn)物(例如聚環(huán)氧乙烷山梨醇單油酸酯)或環(huán)氧乙烷與長(zhǎng)鏈脂肪醇的縮合產(chǎn)物(例如，十七環(huán)氧乙烷基鯨蠟醇，或由環(huán)氧乙烷與由脂肪酸和己糖醇得到的部分酯的縮合產(chǎn)物(例如聚環(huán)氧乙烷山梨醇單油酸酯)，或環(huán)氧乙烷與由脂肪酸和己糖醇酐得到的部分酯的縮合產(chǎn)物，例如聚乙烯脫水山梨醇單油酸酯。水性懸浮液還可以含有一種或多種防腐劑(例如對(duì)羥基苯曱酸乙酯或丙酯)、抗氧化劑(例如抗壞血酸)、著色劑、調(diào)味劑和/或甜味劑(例如蔗糖、糖精或天冬甜素)。
油性懸浮液可以通過(guò)將活性成分懸浮在植物油(例如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)或礦物油(如液體石蠟)中來(lái)配制。油性懸浮液還
16可以含有增稠劑如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇。可以加入甜味劑如上面列 出的那些和調(diào)味劑以提供適口的口服制劑。這些組合物可以通過(guò)加入 抗氧化劑如抗壞血酸來(lái)防腐。
適用于通過(guò)加水來(lái)制備水性懸浮液的可分散粉末和顆粒通常含 有活性成分和分散或濕潤(rùn)劑、懸浮劑、以及一種或多種防腐劑。合適 的分散或濕潤(rùn)劑以及懸浮劑通過(guò)上面已經(jīng)提到的那些來(lái)例舉。其它賦 形劑如甜味劑、調(diào)味劑和著色劑也可以存在。
本發(fā)明的藥物組合物也可以呈水包油乳液的形式。油相可以是才直
物油，例如橄欖油或花生油；或者可以是礦物油，例如液體石蠟；或 者是任何這些物質(zhì)的混合物。合適的乳化劑可以是例如天然樹(shù)膠，例 如阿拉伯樹(shù)膠或黃蓍膠；天然磷脂，如大豆卵磷脂、卯磷脂；得自脂 肪酸和己糖醇肝的酯或部分酯(例如脫水山梨醇單油酸酯)以及所述部 分酯與環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物(例如聚環(huán)氧乙烷脫水山梨醇單油酸酯)。 乳液還可以含有甜味劑、調(diào)味劑和防腐劑。
糖漿和酏劑可以用甜味劑如甘油、丙二醇、山梨醇、天冬甜素或 蔗糖來(lái)配制，還可以含有緩和劑(demulcent)、防腐劑、調(diào)味劑和/或著 色劑。
藥物組合物還可以是無(wú)菌可注射水或油性懸浮液的形式，其可以 根據(jù)已知方法通過(guò)使用上面已經(jīng)提及的一種或多種合適的分散或濕 潤(rùn)劑以及懸浮劑來(lái)配制。無(wú)菌可注射制劑還可以是在無(wú)毒腸胃外可接 受的稀釋劑或溶劑中的無(wú)菌可注射溶液或懸浮劑，例如在1，3-丁二醇 中的溶液。
用于通過(guò)吸入給藥的組合物可以是常規(guī)增壓氣溶膠的形式，其被 設(shè)置為將活性成分作為含有極細(xì)固體的氣溶膠或液滴來(lái)分配?？梢允?用例如揮發(fā)性氟化烴或烴類的常規(guī)推進(jìn)劑，且氣溶膠設(shè)備被方便地設(shè) 置以分配測(cè)定量的活性成分。
對(duì)于制劑的進(jìn)一 步的信息，讀者可參閱Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Pergamon Press 1990,第5巻，第25.2章。
與 一種或多種賦形劑組合用于生產(chǎn)單劑劑型的活性成分的量將
必要地根據(jù)所治療的宿主(host)和特定的給藥途徑而改變。例如，意圖 用于人類口服給藥的制劑通常將含有，例如，與合適和適宜量的賦形劑(其可以在總組合物的約5wt。/。-約98wt%中變化)混和的0.5 mg到2 g活性藥劑。單位劑型通常將含有約1 mg到約500 mg活性成分。對(duì) 于給藥途徑和劑量方案的進(jìn)一步的信息，讀者可參閱Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Pergamon Press 1990,第5巻，第25.3章。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了如上文中所定義的用于通過(guò)治療 人或動(dòng)物體的治療方法的式(I)、 (IA)和(IB)的化合物或其藥學(xué)可接受的 鹽
JUL 。
我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的化合物抑制DGATl活性，因此具有其 降血糖效果的好處。
本發(fā)明的另一個(gè)特征是用作為藥物的式(I)、 (IA)和/或(IB)或其藥
學(xué)可接受的鹽。
方便地，這是用作為用于在溫血?jiǎng)游锶缛祟愔挟a(chǎn)生對(duì)DGATl活 性的抑制的藥物的式(I) 、 (IA)和/或(IB)或其藥學(xué)可接受的鹽。
特別地，這是用作為用于在溫血?jiǎng)游锶缛祟愔兄委熖悄虿『?或肥 胖癥的藥物的式(I)、 (IA)和/或(IB)或其藥學(xué)可接受的鹽。
因此，根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了式(I)、 (IA)和/或(IB)或其 藥學(xué)可接受的鹽在制備用于在溫血?jiǎng)游锶缛祟愔挟a(chǎn)生對(duì)DGAT1活性 的抑制作用的藥物中的用途。
因此，根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了式(I)、 (IA)和/或(IB)或其 藥學(xué)可接受的鹽在制備用于在溫血?jiǎng)游锶缛祟愔兄委熖悄虿『?或肥 胖癥的藥物中的用途。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了用于在溫血?jiǎng)游锶缛祟愔挟a(chǎn)生對(duì) DGAT1活性的抑制作用的組合物，其包含如上文所定義的式(I)、 (IA) 和/或(IB)或其藥學(xué)可接受的鹽，它們與藥學(xué)可接受的賦形劑或載體結(jié) 合。
根據(jù)本發(fā)明的另 一方面，提供了用于治療在溫血?jiǎng)游锶缛祟愔械?糖尿病和/或肥胖癥的組合物，其包含如上文所定義的式(I)、 (IA)和/ 或(IB)或其藥學(xué)可接受的鹽，它們與藥學(xué)可接受的賦形劑或載體結(jié)合。
根據(jù)本發(fā)明的另 一 方面，提供一種在需要這種治療的溫血?jiǎng)游锶?人類中產(chǎn)生對(duì)DGAT1活性的抑制作用的方法，其包括對(duì)所述動(dòng)物給 予有效量的如上文所定義的式(I)、 (IA)和/或(IB)或其藥學(xué)可接受的鹽。根據(jù)本發(fā)明的另 一方面，提供了 一種在需要這種治療的溫血?jiǎng)游?如人類中治療糖尿病和/或肥胖癥的方法，其包括對(duì)所述動(dòng)物給予有效
量的如上文所定義的式(I)、 (IA)和/或(IB)或其藥學(xué)可接受的鹽。
如上所述，特定疾病狀態(tài)的治療或預(yù)防性治療所需的劑量大小必 須根據(jù)所治療的宿主、給藥途徑和待治療疾病的嚴(yán)重性而改變。優(yōu)選
使用l-50mg/kg的日劑量。但是，日劑量必要地根據(jù)所治療的宿主、 給藥途徑和待治療疾病的嚴(yán)重性而改變。因此，可以由治療任何具體 患者的開(kāi)業(yè)醫(yī)生來(lái)確定最佳劑量。
如上所述，本發(fā)明中定義的化合物由于它們抑制DGAT1活性的 能力而具有用處。因此，本發(fā)明的化合物可用于預(yù)防、緩解或治療多 種疾病狀態(tài)，包括糖尿病(更具體的說(shuō)是2型糖尿病(T2DM)和由其引 發(fā)的并發(fā)癥(例如視網(wǎng)膜病、神經(jīng)病和腎病))、糖耐量減低(IGT)、空腹 血糖受損的病癥，代謝性酸中毒、酮病、代謝紊亂綜合征(dysmetabolic syndrome)、關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)疏松癥、肥胖癥及與肥胖癥有關(guān)的病癥(包 括周圍血管疾病(包括間歇性跛行)、心力衰竭及某些心肌病、心月幾局 部缺血、大腦局部缺血及再灌注、高脂血癥、動(dòng)脈粥樣硬化、不孕和 多嚢卵巢綜合征)；本發(fā)明的化合物還可用于肌無(wú)力、皮膚疾病如痤瘡、 各種免疫調(diào)節(jié)疾病(例如牛皮癬)、HIV感染、炎性腸綜合征及炎性腸 病如克羅恩氏病和潰瘍性結(jié)腸炎。
特別是，本發(fā)明的化合物具有預(yù)防、緩解或治療糖尿病和/或肥胖 癥和/或與肥胖癥有關(guān)的病癥的用處。在一個(gè)方面，本發(fā)明的化合物用
于預(yù)防、緩解或治療糖尿病。在另一方面，本發(fā)明的化合物用于預(yù)防、 緩解或治療肥胖癥。在又一方面，本發(fā)明的化合物用于預(yù)防、緩解或 治療與肥胖癥有關(guān)的病癥。
本文所述的抑制DGAT1的活性可以作為單獨(dú)的療法，或者與一 種或多種用于所治療的適應(yīng)癥的其他物質(zhì)和/或治療法相結(jié)合而進(jìn)行 使用。這種聯(lián)合治療可以通過(guò)將該治療的單個(gè)組分同時(shí)、依次或分別 給藥來(lái)實(shí)現(xiàn)。同時(shí)治療可以為單片形式，或者作為分離片劑。例如， 這種聯(lián)合治療可用于治療代謝綜合征[定義為腹型肥胖(如通過(guò)對(duì)人種 和性別的特定切割點(diǎn)(specific cut-points)的腰圍測(cè)量)加上以下病癥 中的任何兩種高甘油三酯血癥(> 150mg/dl; 1.7mmol/l);低HDLc(對(duì) 于男性，<40 mg/dl或〈1.03mmol/l,對(duì)于女性，〈50 mg/dl或1.29 mmo1/1)
19或?qū)Φ虷DL(高密度脂蛋白)的治療；高血壓(SBP上130mmHg, DBP > 85mmHg),或?qū)Ω哐獕旱闹委?；以及高血?空腹血糖^ 100 mg/dl或 5.6 mmo1/1或并唐耐量減j氐或原發(fā)斗唐尿病(pre-existing diabetes mellitus)-International Diabetes Federation & input from IAS/NCEP]。 上述聯(lián)合治療法可以包括下列主要的類別
1) 抗肥胖治療劑，例如那些通過(guò)對(duì)食物攝取、營(yíng)養(yǎng)素吸收或能量消耗 方面的作用來(lái)引起體重減輕的治療法，例如奧利司他、西布茶明等。
2) 胰島素分泌促進(jìn)劑，包括磺酰脲類(例如優(yōu)降糖、格列曱嗪)、膳食 葡萄糖調(diào)節(jié)劑(例如瑞格列奈、那格列奈)；
3) 改善腸促胰島素作用的藥劑(例如二肽基肽酶IV抑制劑和GLP - 1 促效劑)；
4) 胰島素敏化劑，包括PPARy激動(dòng)劑(例如吡格列酮和羅格列酮)， 以及具有PPARa和y聯(lián)合活性的藥劑；
5) 調(diào)整肝糖平衡的藥劑(例如二曱雙胍、果糖-l,6-二磷酸酶抑制劑、 糖原磷酸化酶(glycogen phopsphorylase)抑制劑、糖原合成酶激酶抑制 劑、葡萄糖激酶活化劑)；
6) 用于減少來(lái)自腸的葡萄糖吸收的藥劑(例如阿卡波糖)；
7) 預(yù)防葡萄糖通過(guò)腎重吸收的藥劑(SGLT抑制劑)；
8) 用于治療長(zhǎng)期高血糖(prolonged hyperglycaemia )并發(fā)癥的藥劑(例 如醛糖還原酶抑制劑)；
9) 抗脂質(zhì)代謝紊亂的藥劑，如HMG - CoA還原酶抑制劑(例如抑制 素)；PPARa-激動(dòng)劑(貝特(fibrates),例如吉非羅齊)；膽汁酸螯合劑 (消膽胺)；膽固醇吸收抑制劑(植物甾醇、合成抑制劑)；膽汁酸吸收抑 制劑(IBATi);以及煙酸及類似物(煙酸及緩釋劑型)；
10) 抗高血壓藥，如卩-阻斷劑(例如氨酰心安、鹽酸心得安)；ACE抑 制劑(例如賴諾普利)；鈣拮抗劑(例如，灘苯吡啶(nifedipine));血 管緊張素受體拮抗體(例如，坎地沙坦)，a-拮抗劑及利尿劑(例如，利 尿磺胺，爺噻溱)；
11) 止血調(diào)節(jié)劑，如抗血栓形成劑、纖溶活化劑和抗血小板藥劑；凝 血酶拮抗劑；Xa因子抑制劑；VIIa因子抑制劑)；抗血小板劑(例如， 阿斯匹林、氯吡格雷)；抗凝劑(肝素及低分子量類似物，水蛭素)和華 法林；12) 拮抗胰高血糖素作用的藥劑；以及
13) 消炎藥，例如，非甾族消炎藥(例如，阿斯匹林)及甾族消炎藥(例 如，可的+〉)。
除了其在治療藥物中的用途之外，式(I)的化合物及其藥學(xué)可接受 的鹽還可用作用于評(píng)價(jià)DGAT1活性抑制劑在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(如貓、狗、兔 子、猴子、大鼠和小鼠)中的效果的體外和體內(nèi)試驗(yàn)系統(tǒng)的開(kāi)發(fā)和標(biāo)準(zhǔn) 化中的藥理學(xué)工具，作為尋找新型治療劑的 一 部分。
如上所指出的，所有化合物及其相應(yīng)的藥學(xué)可接受的鹽可用于抑制 DGAT1 。式(I)的化合物及其相應(yīng)的藥學(xué)可接受的酸加成鹽抑制 DGAT1的能力可以使用下列酶試驗(yàn)來(lái)證明
人的酶試驗(yàn)
識(shí)別DGAT1抑制劑的體外試驗(yàn)使用在昆蟲(chóng)細(xì)胞膜中表達(dá)的人的 DGAT1作為酶源(Proc.Natl. Acad. Sci. 1998， 95, 13018-13023)。簡(jiǎn)要地 說(shuō)，sf9細(xì)胞用含有人的DGAT1編碼序列的重組桿狀病毒感染，并在 48小時(shí)后收獲(harvest)。通過(guò)聲波降解法溶解細(xì)胞，并通過(guò)在4。C在 41%蔗糖梯度上以28000 rpm離心1小時(shí)來(lái)膜分離。收集相界面處的 膜組分(membrane fraction)，洗滌，并存貯在液氮中。
通過(guò)Coleman所述的方法的變型來(lái)檢測(cè)DGAT1活性(Methods in Enzymology 1992,209,98-102)。用在塑料管中的200 pi總檢測(cè)體積中 的0.4 fig膜蛋白、5 mM MgCh和10 1，2-二油?；?s"-甘油來(lái)培養(yǎng) l-10(iM的化合物。通過(guò)加入14C油?；o酶A (30pM的最終濃度)來(lái) 啟動(dòng)反應(yīng)，并在室溫培養(yǎng)30分鐘。加入1.5 mL 2-丙醇:庚烷:水(80:20:2) 以停止反應(yīng)。通過(guò)加入lmL庚烷和0.5 mL 0.1 M碳酸緩沖液(pH 9.5) 來(lái)將放射性三油酸甘油酯(triolein)產(chǎn)品分離到有機(jī)相中。DGATl活性 通過(guò)用液體閃爍法計(jì)數(shù)上庚烷層的等分試樣來(lái)量化。
使用該檢測(cè)方法，化合物通常顯示ICs()〈100nM的活性，優(yōu)選<50 nM,更優(yōu)選〈10nM。實(shí)施例l顯示了 IC5o = 4 nM。
式(I)的化合物及其相應(yīng)的藥學(xué)可接受的酸鹽抑制DGAT1的能力可 以使用以下完整細(xì)胞試驗(yàn)1 )和2)來(lái)進(jìn)一步證明。
1)測(cè)量3T3細(xì)胞中的甘油三酯合成
小鼠脂肪細(xì)胞3T3細(xì)胞在6孔板中在含新生小牛血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)到鋪滿(confluency)。通過(guò)在含有10%胎牛血清、1 pg/mL胰島素、 0.25 (iM地塞米松和0.5 mM異丁基曱基黃噪呤的培養(yǎng)基中培養(yǎng)來(lái)誘 導(dǎo)細(xì)胞分化。48小時(shí)之后，將細(xì)胞在含有10%胎牛血清和1嗎/ml胰 島素的培養(yǎng)基中再保持4-6天。用于該試驗(yàn)，將培養(yǎng)基換成不含血清 的培養(yǎng)基，并將細(xì)胞用溶解在DMSO中的化合物(最后濃度0.1%)預(yù)培 養(yǎng)30分鐘。通過(guò)向每個(gè)孔內(nèi)加入0.25 mM醋酸鈉+ l(aCi/mL 14C醋酸 鈉并再保持2小時(shí)來(lái)測(cè)量新生脂肪生成(De novo lipogenesis) (J. Biol. Chem., 1976,251,6462-6464)。細(xì)胞在用磷酸鹽緩沖的鹽水中洗滌，并 溶解在1%十二烷基硫酸鈉中。取出等分試樣，使用蛋白測(cè)定試劑盒 (protein estimation kit) (Perbio)才艮才居Lowry法來(lái)觀'J定蛋白(J. Biol. Chem., 1951, 193, 265-275)。根據(jù)Coleman法，使用庚烷丙-2-醇:水 (80:20:2)混合物、接著使用水和庚烷的等分試樣將脂質(zhì)萃取到有機(jī)相 中(Methods in Enzymology, 1992, 209, 98-104)。收集有機(jī)相，在氮?dú)?流下蒸發(fā)溶劑。將萃取物溶解在異己烷乙酸(99:1)中，且脂質(zhì)經(jīng)由正 相高效液相色譜(HPLC)使用下述條件Lichrospher diol-5, 4 x 250 mm 柱，異己烷乙酸(99:l)和異己烷丙-2-醇乙酸(85:15:l)的梯度溶劑系 統(tǒng)，lmL/分鐘的流速，根據(jù)Silversand和Haux方法(1997)進(jìn)行分離。 加入到甘油三酯級(jí)分中的放射性標(biāo)記物使用連接到HPLC儀上的 Radiomatic Flo-one檢測(cè)器(Packard)來(lái)分析。
2)測(cè)量MCF7細(xì)胞中的甘油三酯合成
在6孔板中在含有培養(yǎng)基的胎牛血清中將人的乳腺上皮(MCF7) 細(xì)胞培養(yǎng)到鋪滿。用于該試驗(yàn)，將培養(yǎng)基換成不含血清的培養(yǎng)基，并 將細(xì)胞用溶解在DMSO中的化合物(最后濃度0.1%)預(yù)培養(yǎng)30分鐘。 通過(guò)向每個(gè)孔中加入50 (iM乙酸鈉+ 3 pCi / mL的14C醋酸鈉并再保 持3小時(shí)來(lái)測(cè)量新生脂肪生成(J. Biol. Chem.， 1976, 251, 6462-6464)。 細(xì)胞在磷酸鹽緩沖鹽水中進(jìn)行洗滌，并溶解在1%十二烷基硫酸鈉中。 取出等分試樣，使用蛋白測(cè)定試劑盒(Perbio)根據(jù)Lowry法來(lái)測(cè)定蛋 白(J. Biol. Chem.， 1951, 193, 265-275)。根據(jù)Coleman方法，使用庚烷: 丙-2-醇:水(80:20:2)的混合物，然后使用水和庚烷的等分試樣，將脂質(zhì) 萃取到有機(jī)相中(Methods in Enzymology, 1992, 209， 98-104)。收集有 機(jī)相，并在氮?dú)饬飨抡舭l(fā)溶劑。將萃取物溶解在異己烷乙酸(99:1)中，
22且脂質(zhì)經(jīng)由正相高效液相色譜(HPLC)使用下述條件Lichrospher diol-5, 4 x 250 mm柱，異己烷乙酸(99:1)和異己烷丙-2-醇乙酸 (85:15:1)的梯度溶劑系統(tǒng)，1 mL/分鐘的流速，根據(jù)Silversand和Haux 方法(1997)進(jìn)行分離。加入到甘油三酯餾分中的放射性標(biāo)記物使用連 接到HPLC儀上的Radiomatic Flo-one檢測(cè)器(Packard)來(lái)分析。 3)化合物抑制ACAT的能力可以使用在Billheimer, (1985) Methods in Enzymology, 111,286-293中所述的酶4企測(cè)方法的變型來(lái)測(cè)量。該測(cè)試 通過(guò)測(cè)量由放射性標(biāo)記的油?；o酶A形成的放射性標(biāo)記的膽甾醇 油酸酯(cholesteryl oleate )的量來(lái)測(cè)量來(lái)評(píng)估化合物抑制膽固醇的酯 化作用的能力?；衔镉?0 (ig膜蛋白和267(iM膽固醇來(lái)培養(yǎng)。在 37。C下預(yù)培養(yǎng)5分鐘之后，通過(guò)加入14C油酰基輔酶A(50|iM最終濃 度)來(lái)啟動(dòng)反應(yīng)，并且在37。C下繼續(xù)培養(yǎng)30分鐘。通過(guò)加入2-丙醇 庚烷(12:1)來(lái)停止反應(yīng)。通過(guò)加入庚烷和1M碳酸鹽緩沖液(pH 9.5) 來(lái)將放射性的膽固醇酯產(chǎn)品分離到有機(jī)相中。通過(guò)用液體閃爍法計(jì)數(shù) 上面的庚烷層的等分試樣來(lái)量化ACAT活性。
合物的DGAT和ACAT酶試驗(yàn)中產(chǎn)生IC50值之比。例如，實(shí)施例l證明 了70倍的選擇性。
在上述其他藥物組合物、工藝、方法、用途和藥物制造技術(shù)特征 中，還應(yīng)用了本文所述的本發(fā)明的化合物的可選和優(yōu)選方案。
實(shí)施例
現(xiàn)在將通過(guò)以下實(shí)施例來(lái)說(shuō)明本發(fā)明，在實(shí)施例中，除非另外指 明，否則
(i) 溫度以攝氏度(。C)給出；操作在室溫或環(huán)境溫度下進(jìn)行，即，在 18-25 °C范圍內(nèi)的溫度進(jìn)行，并且在惰性氣體如氬氣下進(jìn)行；
(ii) 有機(jī)溶液用無(wú)水硫酸鎂干燥；溶劑的蒸發(fā)使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在減壓 下(600-4000 Pa; 4.5-30 mmHg)進(jìn)行，浴溫高達(dá)60。C;
(iii) 色譜表示在硅膠上的快速柱層析；其中Biotage短柱是指下述短 柱其含有KP-SII/M二氧化硅，60A，粒徑32-63 mM,由Dyax Corp. 的子7〉司Biotage乂〉司才是供，1500 Avon Street Extended, Charlottesville, VA 22902, USA;(iv) —般地，反應(yīng)過(guò)程之后是TLC,且給出的反應(yīng)時(shí)間僅為舉例說(shuō)明；
(v) 給出的產(chǎn)率僅為舉例說(shuō)明，而不必然是通過(guò)勤奮的方法開(kāi)發(fā)可以 獲得的那些；如果需要更多材料，可以重復(fù)制備；
(vi) 當(dāng)指定時(shí)，NMR數(shù)據(jù)(!H)是主要診斷質(zhì)子(diagnostic proton )的 5值的形式，以相對(duì)于四甲基硅烷的百萬(wàn)分之份數(shù)(ppm)的形式給出， 在300或400 MHz(除非另外指明)下測(cè)定，使用氘化二曱亞砜 (DMS0^6)(除非另外指明)作為溶劑；如下顯示峰的重?cái)?shù)s，單峰；d， 雙重峰；dd，雙重雙峰；dt，三重雙峰；dm,多重雙峰；t，三重峰； q四重峰；m,多重峰；br,寬峰；
(vii) 化學(xué)符號(hào)具有其常用含義；使用SI單位和符號(hào)；
(viii) 溶劑比率以體積給出體積(v/v)項(xiàng)；
(ix) 質(zhì)譜(MS) (loop)在配有HP 1100檢測(cè)器的Micromass Platform LC 上記錄；除非另外指明，否則所引證的質(zhì)量離子是(MH+);
(x) LCMS (液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用)在包括配有Waters 996光電二極管陣 列檢測(cè)器的Waters 2790 LC和Micromass ZMD MS中記錄，使用 Phenomenex Gemini 5u C18 110A 50x2 mm柱，并用流速為1.1 ml/min的5% (水/乙腈(l:l) + 1%甲酸)洗脫，梯度在最初4分鐘期間 從0%乙腈增加到95%乙腈，余量為水(95-0%),其中除非另外指明， 否則所報(bào)道的在該系統(tǒng)中的HPLC停留時(shí)間以分鐘計(jì)；除非另外指明， 否則所提供的質(zhì)量離子是(MH+);
(xi) 當(dāng)提及相分離短柱時(shí)，則使用ISOLUTEPhase Separator, 70ml柱， 由Argonaut Technologies, New Road, Hengoed， Mid Glamorgan, CF82 8AU, United Kingdom提供；
(xii) 當(dāng)提及SiliCycle短柱時(shí)，其表示含有超純硅膠顆粒(粒徑230-400 目，40-63碰孑L徑，由 SiliCycle Chemical Division, 1200 Ave St畫(huà)Jean漏Baptiste, Suite 114, Quebec City, Quebec, G2E 5E8， CANADA 提供)的短柱；
(xiii) 當(dāng)^是及Isco Companion時(shí),貝'H吏用Combiflash companion色i普 設(shè)備，其由ISOC Inc.供應(yīng)，地址為Teledyne ISOC Inc, 4700 Superior Street, Lincoln, NE 68504, USA;
(xiv) 當(dāng)4是及樣i波時(shí)，其表示Biotage Initiator sixty or Smith Creator孩l 波爐，其由Biotage供應(yīng)，該公司是Dyax Corp., 1500 Avon StreetExtended, Charlottesville, VA 22902, USA的子公司；
(xv) 當(dāng)提及GCMS時(shí)，則在配有AOC 20i自動(dòng)取樣器的QP-2010 GC-MS系統(tǒng)上進(jìn)行氣相色譜-質(zhì)譜分析，并用'GCMS solutions，軟件2.0 版控制，其由Shimadzu， Milton Keynes, MK12 5RE, UK提供；GC柱 是具有25m長(zhǎng)度、0.32 mm內(nèi)徑和0.52 pm膜厚的DB-5MS柱，其由 J & W Scientific, Folsom, CA， USA提供；
(xvi) 當(dāng)提及離心時(shí)，這表示Genevac EZ-2plus，其由Genevac Limited, The Soveriegn Centre, Farthing Road, Ipswich, IP1 5AP, UK提供；
(xvii) 當(dāng)提及手性色語(yǔ)時(shí)，其通常使用下述條件進(jìn)行使用20 Merck 50mm Chiralpak AD柱,(由Chiral Technologies Europe, Pare d,Innovation, Bd. Gonthier d，Andernach, 67404 Illkirch Cedex, France提 供的手性固定相)，使用MeCN/2-丙醇/AcOH (90/10/0.l)作為洗脫液， 流速80 mL/min,波長(zhǎng)300nm，使用Gilson制備HPLC儀器(200ml頭部
(head));
(xviii) 使用BuchiS30設(shè)備來(lái)測(cè)量熔點(diǎn)，且不進(jìn)行校正；
(xix) 以下縮略語(yǔ)在下文中或上文中的方法部分中l(wèi)吏用
DMF 二曱基曱酰胺
DCM 二氯曱烷
MeOH 曱醇
THF 四氬呋喃
DMSO 二甲亞石風(fēng)
EDCI (EDAC) 1 -乙基-3-(3-二曱基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸
CH3CN或MeCN 乙腈
h 小時(shí)
min 分鐘
NaOH 氬氧化鈉
AcOH 醋酸
DMA 二曱基乙酰胺
MgS04 硫酸鎂
HC1 鹽酸所有最終的實(shí)施例名稱均通過(guò)使用ACD NAME計(jì)算機(jī)軟件包得出。
實(shí)施例l:順-4-(3-氟-4-(「5-(7,4,5-三氟-苯基氨基)-「l,3,4T惡二唑-2-羰 基l-氨基卜苯氧基)-環(huán)己烷曱酸
將氫氧化鋰(965 mg, 23.0 mmol)在水(5 mL)中的溶液一次性加入 到4-(3-氟-4-([5-(2，4,5-三氟-苯基氨基)-[l,3,4r惡二唑-2-羰基]-氨基)-苯 氧基)-環(huán)己烷曱酸乙酯(中間體l，1.2g， 2.3 mmol)在THF與曱醇的l:l 混合物(50 mL)中的溶液中，混合物在環(huán)境溫度下攪拌4 h?；旌衔镌?真空中進(jìn)行濃縮，用1M檸檬酸水溶液酸化，然后過(guò)濾留下固體。用水 洗滌該固體，干燥并用乙醇(30mL)重結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物，其是白 色固體(700 mg, 64%)。
^ NMR 5 1.6-1.9 (8H, m)， 2.35-2.44 (1H， m)， 4.5-4.63 (1H, m), 6.85 (1H, dd), 6.98 (1H, dd), 7.35-7.46 (1H， m)， 7.65-7.78 (1H， m)， 8.1-8.26 (1H， m)， 10.6 (1H, s), 11.05 (1H, s), 12.08 (1H， s); MS m/e MH+ 495。
中間體1:順-4-(3-氟-44「5-(2,4,5-三氟-苯基氨基V「U,4P惡二唑-2-羰
基l-氨基卜苯氧基)-環(huán)己烷曱酸乙酯
i)順-4-(3-氟-4-硝基-苯氧基)-環(huán)己烷曱酸乙酯
在4。C,將氫化鈉(在礦物油中的60%分散體，5.05 g， 126mmo1) 一次性加入到攪拌下的4-羥基環(huán)己烷曱酸乙酯(20.7 g， 120 mmol)和 2,4-二氟硝基苯(19.1g, 120.2 mmol)在DMA (100 mL)中的溶液中,該 混合物在4。C下攪拌1小時(shí)，然后使反應(yīng)混合物回暖到環(huán)境溫度并攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻到0°C,然后加入水和乙酸乙酯。分層， 有機(jī)層用鹽水洗滌，干燥(MgS04)，在真空中干燥，留下黃色的油。 油用柱色譜進(jìn)行純化，使用梯度的在異己烷中的20-50%乙酸乙酯作 為洗脫液，得到標(biāo)題化合物，其是淺黃色固體(4.1 g, 11%)。 ^ NMR 5 1.19 (3H, t), 1.63-1.9 (9H, m)， 4.07 (2H, q), 4.72-4.8 (1H, m), 6.99 (1H, dd), 7,22 (1H, dd), 8.13 (1H, dd); MS m/e MH+ 312。
ii)順-4-(4-氨基-3-氟-苯氧基)-環(huán)己烷曱酸乙酯。
將Pd( 10wt%)/C (500 mg)—次性加入到4-(3-氟-4-硝基-苯氧基)-環(huán)己烷曱酸乙酯(2.6 g, 8.35mmol)在乙醇(75mL)中的溶液中，該混 合物在氫氣氛下攪拌6 h。將反應(yīng)混合物過(guò)濾并在真空下濃縮，留下 殘余物。殘余物用柱色譜進(jìn)行純化，使用梯度的20-50yoEtOAc和異己 烷作為洗脫液，得到標(biāo)題化合物，其是淺黃色固體(2.0g, 85%)。
NMR 5 1.18 (3H, t), 1.53-1.67 (4H, m)， 1.69-1.82 (4H， m), 2.38-2.48 (1H, m)， 4.07 (2H， q), 4.26-4.33 (1H, m), 4.65 (2H， s), 6.54 (1H， dd)， 6.69 (1H, dd), 7.0 (1H， dd); MS m/e MH+ 282。
iii)順-4-[3-氟-4-(甲氧基草?；?氨基)-苯氧基]-環(huán)己烷曱酸乙酯
在4°C,將曱基草酰氯(methyl chlorooxoacetate )(1.18 g, 9.6 mmol) 一次性加入到4-(4-氨基-3-氟-苯氧基)-環(huán)己烷曱酸乙酯(1.8 g, 6.4 mmol)和p比咬(1.55 mL, 19.2 mmol)在DCM (50 mL)中的攪拌溶液中， 反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度攪拌2h。反應(yīng)混和物真空蒸發(fā)，留下殘余物， 并加入乙酸乙酯。加水并分層。有機(jī)層用鹽水洗滌，干燥(MgS04)并真空濃縮，得到標(biāo)題化合物，其是無(wú)色油，該化合物不經(jīng)進(jìn)一步純化
就投入使用；MS m/e (M-H)- 366。
iv)順_4_[3_氟_4-(肼基草?；?氨基)-苯氧基]-環(huán)己烷曱酸乙酯
將一水合肼(458 mg, 9.15 mmol)—次性加入到4-[3-氟-4-(曱氧基 草?；?氨基)-苯氧基]-環(huán)己烷曱酸乙酯(2.8 g, 7.62mmol)在乙醇(" mL)中的溶液中，混合物在環(huán)境溫度下攪拌2h。將混合物過(guò)濾，用乙 醇洗滌并干燥，得到標(biāo)題化合物，其是白色固體(2.35g, 84%)。 !H NMR 5: 1.19 (3H, t), 1.61-1.86 (8H, m), 4,08 (2H, q), 4.43-4.53 (1H, m), 4.64 (2H， s), 6.81 (1H, dd), 6.98 (1H， dd)， 7.46 (1H, dd), 10.1 (1H, s), 10.27 (lH,s); MS m/e (M陽(yáng)H)- 366。
v)順-4-(3-氟-4-{[5-(2,4,5-三氟-苯基氨基)-[1,3,4]嚅二唑-2-羰基]-氨 基}-苯氧基)-環(huán)己烷曱酸乙酯
將2,4，5-三氟苯基異硫氰酸酯(600 mg, 3.0 mmol)—次性加入到攪 拌下的4-[3-氟-4-(肼基草酰基-氨基)-苯氧基]-環(huán)己烷-曱酸乙酯(920 mg, 2.5 mmol)在DMA (10 mL)中的攪拌懸浮液中，該反應(yīng)混合物在環(huán) 境溫度下攪拌1 h。加入EDCI (720 mg, 3.76 mmol)，混合物在孩i波爐 中在90。C加熱IO分鐘。反應(yīng)混合物在真空中進(jìn)行濃縮，留下殘余物。 加水，將混合物過(guò)濾并在高真空下干燥，留下標(biāo)題化合物(中間體1)， 其是淺黃色粉末(1.2g， 92%)。
28!H NMR 5 1.2 (3H, t), 1.62-1,88 (8H, m), 2.4-2.5 (1H， m)， 4.08 (2H， q)， 4.55-4.63 (1H, m)， 6.83 (1H, dd), 6.99 (1H, dd)， 7.38 (1H, dd)， 7.68-7.79 (IH， m)， 8.12-8.26 (1H， m)， 10.6 (1H, s), 11.1 (1H, s); MS m/e MH+523。
實(shí)施例2:順-4-(3-氟-4-{「5-(3,4,5-三氟-苯基氨基)-「1,3,41嗜二唑-2-羰 基l-氨基L苯氧基)-環(huán)己烷曱酸
<formula>formula see original document page 29</formula>
將氫氧化鋰(1.61 g, 38.3 mmol)在水(lO mL)中的溶液一次性加入 到4-(3-氟-4j[5-(3,4，5-三氟-苯基氨基Hl,3,4r惡二唑-2-羰基]-氨基L 苯氧基)-環(huán)己烷曱酸乙酯(中間體2, 2.0 g， 3.83 mmol)在THF和曱醇 的1:1混合物(60 mL)中的溶液中，混合物在環(huán)境溫度下加熱4 h?；?合物在真空中進(jìn)行濃縮，用1M檸檬酸水溶液酸化，然后過(guò)濾，留下 固體。固體用水洗滌，干燥，并從乙醇(30mL)中重結(jié)晶，得到標(biāo)題化 合物，其是白色固體(l.lg， 58%)。
NMR 5 1.66-1.95 (8H, m), 2.38-2.53 (1H， m), 4.58-4.68 (1H， m), 6-9 (1H, dd), 7.04 (1H, dd), 7.47 (1H， dd), 7.49-7.6 (2H, m)， 10.7 (1H， s), 11.5(1H, s)， 12.1 (m， s);MS m/e MH+ 495。
中間體2:順-4-(3-氟-4"「5-(3,4,5-三氟-苯基氨基)-「l,3,4P惡二唑-2-羰 基卜氨基i-苯氧基)-環(huán)己烷曱酸乙酯
<formula>formula see original document page 29</formula>將3,4,5-三氟苯基異硫氰酸酯(897 mg, 4.74 mmol)—次性加入到 攪拌下的4-[3-氟-4-(肼基草?；?氨基)-苯氧基]-環(huán)己烷曱酸乙酯(l .45 g， 3.95mmol)在DMA(20mL)中的懸浮液中，該反應(yīng)混合物在環(huán)境溫 度下攪拌1 h。然后加入EDCI (1.14 g， 5.92mmo1)，混合物在環(huán)境溫 度下攪拌2 h。反應(yīng)混合物在真空中進(jìn)行濃縮，留下殘余物。加水， 將混合物過(guò)濾并在高真空下干燥，得到標(biāo)題化合物(中間體2)，其是 淺黃色粉末(2,0g, 95%)。
& NMR 5 1.2 (3H， t)， 1.64-1.88 (8H， m), 2.45-2.6 (1H, m)， 4.1 (2H, q), 4.54-4.6 (1H, m)， 6.84 (1H, dd), 7.0 (1H， dd), 7.36-7,53 (3H， m)， 10.62 (1H, s), 11.45 (1H, s); MS m/e MH+ 523。
實(shí)施例3:順-4-「3-氟-4-「「5-「(4-氟苯基〗氨基ll,3,4J惡二唑-2-羰基l氨基l 苯氧基l環(huán)己烷-l-曱酸
其以與對(duì)實(shí)施例l所述類似的方式由中間體3進(jìn)行制備。 ^ NMR: 5 1.6-1.9 (8H, m), 2.35-2.45 (1H， m), 4.54-4.62 (1H, m), 6.83 (1H， dd)， 6.99 (1H, dd), 7.2-7.3 (2H, m)， 7.4 (1H, dd)， 7.58-7.68 (2H, m), 10.75 (1H， s), 11.05 (1H, s)， 12.2 (1H， s); MS m/e MH. 457。
中間體3:順-4-「3-氟-4-r「5-r(4-氟苯基)氨基ll,3,4J惡二唑-2-羰基l氨基l 苯氧基l環(huán)己烷-l-曱酸乙酯
30其以與對(duì)中間體1的V)部分中所述類似的方式進(jìn)行制備。
^ NMR: 5 1.09 (3H, t)， 1.6-1.9 (8H， m), 2,4-2.5 (1H， m), 4.07 (2H， q), 4.5-4.62 (1H, m), 6.81 (1H， dd), 6.96 (1H, dd), 7.2-7.3 (2H， m), 7.39 (1H, dd), 7.57-7.69 (2H, m)， 10.56 (1H, s)， 10.94 (1H, s); MS m/e MH+ 487。
實(shí)施例4:反-4-「3-氟-4-「「5-「(2,4,5-三氟苯基)氨基ll,3,4-嚅二唑-2-羰基l 氨基l苯氧基l環(huán)己烷-l-曱酸<formula>formula see original document page 31</formula>
其以與對(duì)實(shí)施例l所述類似的方式由中間體4進(jìn)^f亍制備。 ^ NMR: S 1.08 (3H, t)， 1.32-1.62 (4H， m)， 1.89-2,0 (2H, m)， 2.02-2.14 (2H， m), 2.2-2.32 (1H, m), 4.27-4.4 (1H， m), 6.83 (1H, dd), 6.97 (1H, dd)， 7.33-7.44 (1H, m), 7.63-7.75 (1H, m), 8.09-8.24 (1H, m), 10.6 (1H， s), 11.05 (1H, s), 12.1 (1H, s); MS m/e MH+ 495。
中間體4:反-4-「3-氟-4-「「5-「(2,4，5-三氟苯基〗氨基11,3,4-嚅二唑-2-羰基1
氨基l苯氧基l環(huán)己烷-l-曱酸乙酯
i)反-4-(3-氟-4-硝基-苯氧基)環(huán)己烷-l-曱酸乙酯<formula>formula see original document page 31</formula> 在~ 5°C,向攪拌下的4-羥基環(huán)己烷曱酸乙酯(20.7 g， 120.19 mmol) 和2,4-二氟硝基苯(19.125 g, 120.19 mmol)的DMF溶液中一次性加入 NaH (5.05 g， 126.2 mmol)，導(dǎo)致緩慢放熱到~ 10°C 。該反應(yīng)在5。C下 攪拌l小時(shí)，然后使其回暖到環(huán)境溫度并攪拌24小時(shí)。將該反應(yīng)冷卻 到0。C ，并用水(~ 400 mL)淬滅(quenched )。混合物用EtOAc (3 x 150 mL)進(jìn)行萃取，合并有機(jī)層，用鹽水(2 x ~ 100 mL)洗滌，干燥(MgS04),過(guò)濾并蒸發(fā)至橙色的油(36g)。粗殘余物通過(guò)制備HPLC (二氧化硅，4:1 乙酸乙酯:異己烷)進(jìn)行純化，得到標(biāo)題化合物(4.5 g, 12%)，其是淺橙 色油。
NMR: 5 1.19 (3H, t)， 1.39-1.53 (4H， m), 1.9-2.0 (2H， m), 2.04-2.13 (2H， m), 2.31-2.41 (1H， m), 4.08 (2H, q), 4.51-4.61 (1H， m)， 6.99 (1H, dd), 7.25 (1H, dd)， 8.12 (1H, dd); MS m/e MH+ 312。
ii)反-4-(4-氨基-3-氟-苯氧基)環(huán)己烷-l-曱酸乙酯
其以與對(duì)中間體1的部分ii)所述類似的方式進(jìn)行制備。
麗R: S 1.19 (3H, t), 1.27-1.4 (2H， m), 1.42-1.55 (2H, m), 1.86-1.95 (2H, m), 1.96-2.05 (2H, m)， 2.25-2.38 (1H, m), 4.01-4.13 (1H, m), 4.07 (2H， q), 4.63 (2H, s)， 6.54 (1H, dd), 6.69 (1H， dd), 6.7 (1H， dd)。
iii)反-4-[3-氟-4-[(曱氧基羰基曱?；?氨基]苯氧基]環(huán)己烷-l-曱酸乙
酯
其以與對(duì)中間體1的部分iii)所述類似的方式進(jìn)行制備。 MSm/e Mff366。
iv)反-4-[3-氟-4-[(肼基羰基曱?；?氨基]苯氧基]環(huán)己烷-l-甲酸乙酯其以與對(duì)中間體1的部分iv)所述類似的方式進(jìn)行制備。 工H NMR: 5 1.2 (3H, t), 1.34-1.46 (2H, m)， 1.48-1.61 (2H, m), 1.88-1.98 (2H, m), 2.01-2.11 (2H， m), 2.3-2.4 (1H, m)， 4.07 (2H, q), 4.3-4.4 (1H, m), 4.64 (2H, s), 6.8 (1H, dd), 6.98 (1H, dd), 7.45 (1H, dd), 10.1 (1H, s), 10.3 (1H, s); MS m/e MH. 366。
v)反-4-[3-氟-4-[[5-[(2,4,5-三氟苯基)氨基]1,3,4^惡二唑-2-羰基]氨基] 苯氧基]環(huán)己烷-l-曱酸乙酯
其以與對(duì)中間體1的部分v)所述類似的方式進(jìn)行制備。 !H NMR: S 1.08 (3H, t)， 1.13-1.55 (4H, m), 1.79-1.91 (2H， m), 1.92-2,05 (2H, m)， 2.16-2,37 (1H， m), 3.98 (2H， q)， 4.2-3.35 (1H, m), 6.73 (1H, dd), 6.9 (1H, dd), 7.28 (1H, dd)， 7.55-7.65 (1H, m), 8.0-8.15 (1H, m), 10.52 (1H, s);MSm/e MH+ 523。
實(shí)施例5:反-4-「3-氟-4-「「5-「(4-氟苯基)氨基ll,3,4-嚅二唑-2-羰基l氨基l 苯氣基l環(huán)己烷-l-曱酸
其以與對(duì)實(shí)施例l所述類似的方式由中間體5進(jìn)行制備。 工H麗R: 5 1.3-1.62 (4H, m), 1.85-2.12 (4H, m)， 2.17-2.33 (1H, m), 4.24-4.4 (1H， m), 6.8 (1H, dd), 6.97 (1H, dd), 7.2-7.3 (2H， m), 7.37 (1H, dd), 7.54-7.68 (2H, m)， 10.53 (1H, s), 10.97 (1H， s), 12.07 (1H, s); MS
33m/e MH— 457。
中間體5:反-4-「3-氟-4-「[5-「(4-氟苯基)氨基11,3,4-哺、二唑-2-羰基1氨基1 苯氧基l環(huán)己烷-l-曱酸乙酯
其以與對(duì)中間體4的部分v)所述類似的方式進(jìn)行制備。 & NMR: 5 1.19 (3H, t)， 1.32-1.43 (4H, m)， 1.88-2.12 (4H， m), 2.28-2.41 (1H， m), 4.05 (2H， q), 4.28-4.42 (1H, m), 6.81 (1H, dd)， 6.96 (1H, dd)， 7.2-7.3 (2H, m), 7.39 (1H， dd), 7.57-7.69 (2H, m), 10.56 (1H, s), 10.94 (1H, s);MS m/e MH+487。
權(quán)利要求
1. 式(I)的化合物，或其鹽，其中每個(gè)R獨(dú)立地選自氟、氯、氰基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟甲氧基和二氟甲氧基；n是1、2或3。
2.如權(quán)利要求1所述的式(I)的化合物或其鹽，其是式(IA)的化合物(IA)。
3.如權(quán)利要求1所述的式(I)的化合物或其鹽，其是式(IB)的化合物:
4.如權(quán)利要求1所述的化合物或這些化合物中任何一種的藥學(xué)可 接受的鹽，所述化合物選自順-4-(3-氟-4-{[5-(2,4,5-三氟-苯基氨基)-[1，3,4]哺二唑-2-羰基]-氨基}-苯氧基)-環(huán)己烷曱酸；順-4-(3-氟-4-{[5-(3,4,5-三氟-苯基氨基)-[1，3，4]哺二唑-2-羰基]-氨 基}-苯氧基)-環(huán)己烷曱酸；順-4-[3-氟-4-[[5-[(4-氟苯基)氨基]1，3,4,惡二唑-2-羰基]氨基]苯氧 基]環(huán)己烷-l-曱酸；反_4-[3-氟-4-[[5-[(2,4,5-三氟苯基)氨基]1,3,4-嗝二唑-2-羰基]氨基]苯氧基]環(huán)己烷-l-曱酸；反_4-[3-氟-4-[[5-[(4-氟苯基)氨基]1,3,4-"惡二唑-2-羰基]氨基]苯氧 基]環(huán)己烷-l-曱酸。
5. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物或其藥學(xué)可接受的 鹽，其用作藥物。
6. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物或其藥學(xué)可接受的 鹽，其用作用于治療溫血?jiǎng)游锶缛祟惖奶悄虿『?或肥胖癥的藥物。
7. —種在需要這種治療的溫血?jiǎng)游锶缛祟愔挟a(chǎn)生對(duì)DGAT1活 性的抑制的方法，該方法包括對(duì)所述動(dòng)物給予有效量的如權(quán)利要求 1 一4中任一項(xiàng)所述的式(I)的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽。
8. —種在需要這種治療的溫血?jiǎng)游锶缛祟愔兄委熖悄虿『?或肥 胖癥的方法，該方法包括對(duì)所述動(dòng)物給予有效量的如權(quán)利要求1-4中 任一 項(xiàng)所述的式(I)的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽 或前藥在制備用于在溫血?jiǎng)游锶缛祟愔挟a(chǎn)生對(duì)DGAT1活性的抑制的 藥物中的用途。
10. 如權(quán)利要求9所述的用途，其中所述藥物用于在溫血?jiǎng)游锶?人類中治療糖尿病和/或肥胖癥。
11. 藥物組合物，其包括如權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的式(I)的 化合物或其藥學(xué)可接受的鹽，其與藥學(xué)可接受的賦形劑或載體結(jié)合。
12. 制備根據(jù)權(quán)利要求l所述的化合物的方法，其包括以下步驟之 一(除非另外指明，否則其中所有變量如上文中對(duì)式(I)的化合物所定 義)a)使式(2)的胺與式(3)的羧酸鹽反應(yīng)，其中RP是(1-4C)烷基(例如 曱基、乙基、異丙基或叔丁基)，然后將RP基團(tuán)水解；<formula>formula see original document page 4</formula>b)將式(4)的化合物(其中X是S或O)環(huán)化，其中R是(14C)烷基， 然后將RP基團(tuán)水解；<formula>formula see original document page 4</formula> (4)然后，如果必要1) 去除任何保護(hù)基；和/或2) 形成(藥學(xué)可接受的)鹽。
全文摘要
提供了式(I)的化合物或其鹽、它們的制備方法、含有它們的藥物組合物及其作為藥物的用途，該化合物或其鹽抑制乙酰CoA(乙酰輔酶A)甘油二酯酰基轉(zhuǎn)移酶(DGAT1)活性，如上，其中n是1、2或3，且每個(gè)R獨(dú)立地選自氟、氯、氰基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟甲氧基和二氟甲氧基。
文檔編號(hào)C07D271/10GK101460470SQ200780020219
公開(kāi)日2009年6月17日 申請(qǐng)日期2007年5月29日 優(yōu)先權(quán)日2006年5月30日
發(fā)明者A·普洛懷特, C·約翰斯頓 申請(qǐng)人:阿斯利康(瑞典)有限公司