專利名稱：：毒蕈堿性m3拮抗劑-萘二磺酸鹽的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及作為毒蕈堿性拮抗劑的鹽，含有所述鹽的藥物組合物及其在治療中的用途。
背景技術(shù)：
：毒蕈堿性受體(Muscarinicreceptor)是G-蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)家族，具有5個家族成員M^M2、M3、M4和Ms。在5個毒蕈石威亞型中，已知三個亞型(MpM2和M3)對人肺組織具有生理效應(yīng)。副交感神經(jīng)是人體氣道中反射性支氣管收縮的主要途徑，通過向毒蕈堿性受體釋放乙酰膽堿來調(diào)節(jié)氣道緊張性(airwaytone)。氣道緊張性在患有呼吸系統(tǒng)病癥例如哮喘和慢性阻塞性肺病(COPD)的患者中有所增加，因此已經(jīng)開發(fā)毒蕈堿性受體拮抗劑以用于治療氣道疾病。毒蕈堿性受體拮抗劑在臨床實踐中通常稱作抗膽堿能類。作為針對COPD個體的一線治療，毒蕈堿性受體拮抗劑已經(jīng)獲得了廣泛認(rèn)可，且其用途已深入地闡述在有關(guān)文獻(xiàn)中(例如Lee等人，CurrentOpinioninPharmacology2001,1,223-229)。當(dāng)使用毒蕈堿性受體拮抗劑治療呼吸系統(tǒng)病癥時，毒蕈堿性受體拮抗劑通常通過吸入給藥。然而，當(dāng)通過吸入給藥時，顯著比例的毒蕈堿性受體拮抗劑通常被吸入系統(tǒng)循環(huán)中，導(dǎo)致出現(xiàn)已報道過的副作用，例如口干。此外，大多數(shù)毒蕈堿拮抗劑具有相對短的作用持續(xù)時間，這要求每天給藥數(shù)次。這種每日多次給藥方案不僅給患者帶來不方便，而且由于患者對頻繁重復(fù)給藥方案的不依從，導(dǎo)致治療不充分的重大危險。因此，仍然需要能夠阻斷毒蕈堿性受體的新化合物。具體地，仍然需要當(dāng)吸入給藥時具有高效力和低系統(tǒng)副作用的新毒蕈堿拮抗劑。此外，仍然需要當(dāng)吸入給藥時作用持續(xù)時間長、且允許每天給藥1次或2次的新毒蕈堿拮抗劑。在制備藥物制劑時，重要的是，活性化合物的形式使其可方便地處理和加工，以便得到商業(yè)可行的制備工藝。就此而言，活性化合物的化學(xué)穩(wěn)定性和物理穩(wěn)定性是重要的因素?；钚曰衔锖桶涞闹苿┍仨毮苡行У刭A存相當(dāng)長的時段，而沒有顯示活性化合物的理化性質(zhì)(例如化學(xué)成分、密度、吸濕性和溶解性)的顯著變化。此外，如果要將活性化合物加入肺部給藥用制劑中，則期望活性化合物能容易地微粉化以得到具有良好流動性質(zhì)并且包括高度細(xì)微結(jié)晶顆粒級分(即質(zhì)量中值S氣動力學(xué)直徑(massmedianaerodynamicdiameter)小于10pm(微米)的活性化合物顆粒的級分)的粉末。這種級分能很深地進入肺部，從而加快和提高了活性化合物的吸收。國際專利申請WO2007/017669(PCT/GB2006/002956)描述了一類新的對M3受體表現(xiàn)出高效力的毒蕈堿性拮抗劑。在PCT/GB2006/002956中描述的一種所述毒蕈堿性拮抗劑為曱磺酸[2-(4-氯-節(jié)氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基—羥基-苯基-曱基)-噁唑-5-基甲基]-二甲基-銨。在PCT/GB2006/002956中描述了曱磺酸[2-(4-氯-千氧基)-乙基]-[2-((11)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-碌、唑-5-基曱基]-二曱基-銨的制備，得到無定形固體，該固體不是晶體，因此不適于微粉化和肺部給藥?，F(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，制備下述的替代[2-(4-氯-千氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-噁唑-5-基曱基]-二甲基-銨鹽是可行的，所述銨鹽具有良好的物理化學(xué)性質(zhì)并適于肺部給藥用的干粉制劑。
發(fā)明內(nèi)容因此，根據(jù)本發(fā)明，其提供了一種鹽，所述鹽為[2-(4-氯-千氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-碌、唑-5-基曱基]-二曱基-銨的萘二磺酸(萘—1,5—二磺酸)鹽。在本發(fā)明中，所述鹽可稱作'萘二磺酸鹽(napadisylate)'。本發(fā)明的所述鹽在本文中稱作萘二磺酸[2-(4-氯-芐氧基)-乙基H2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-噁唑-5-基曱基]-二曱基-銨。化學(xué)名稱[2-(4-氯-千氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-碌唑-5-基曱基]-二曱基-銨是由IsisDraw2.5片反本的插件Autonom2000(由MDLInformationSystemsIncj是供)生成的，并且指示了在式A中描述的結(jié)構(gòu)。根據(jù)Cahn-Ingold-Prelog系統(tǒng)指定立體化學(xué)。式A本發(fā)明的萘二磺酸鹽中陽離子/陰離子比例可以變化，例如，可以是l:l或2:1，或可以是1:1和2:1之間的值。在本發(fā)明的一個實施方案中，所述萘二磺酸鹽具有的陽離子/陰離子比例為2:1,即其是半-萘-l，5-二磺酸[2-(4-氯-千氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-甲基)-。惡唑-5-基曱基]-二曱基-銨([2-(4-chloro-benzyloxy)-ethyl]—[2-((R)—cydohexyl—hydroxy-phenyl—mrthyl)畫oxazol匪5-ylmGthyl]隱dimGthyl—ammomumhemi-naphthalene-l，5-disulfonate)，如在式B中所描述的那樣。在本發(fā)明中，該鹽可稱作'半-萘二磺酸鹽，。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>式B本發(fā)明涵蓋萘二磺酸鹽的溶劑化物(例如，水合物)。在本發(fā)明的一個實施方案中，所述萘二磺酸鹽具有結(jié)晶性質(zhì)并優(yōu)選為至少50。/。結(jié)晶度(crystalline)，更優(yōu)選為至少60%結(jié)晶度，更優(yōu)選為至少70%結(jié)晶度，以及最優(yōu)選為至少80%結(jié)晶度。由常規(guī)的X-射線衍射技術(shù)可以估計結(jié)晶度。在本發(fā)明的另一個實施方案中，所述萘二磺酸鹽為50%、60%、70%、80%或90%至95%、96%、97%、98%、99%或100%結(jié)晶度。半-萘-i，5—二磺酸[2-(4-氯-芐氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-。惡唑-5-基曱基]-二曱基-銨的晶型為如下所述的晶型A。因此，在本發(fā)明的一個實施方案中，其提供半-萘-l,5-二磺酸[2-(4-氯-千氧基)-乙基H2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-噁唑-5-基曱基]-二曱基-銨的鹽形式(鹽形式A),所述鹽形式顯示至少如下特征X-射線粉末衍射峰(以。26表達(dá))(1)5.3,10.5，15.8和16.5，或(2)5.3，10.5,15.8，16.5,18.6和19.4，或(3)5.3，10.5，15.8,16.5,18.6,19.4，19.7和20.4,或(4)5.3，10,5,15.8,16.5,17.8,18.6,19.4，19,7,20.4和21.7。本發(fā)明也提供具有如下X-射線粉末衍射圖的半-萘-l,5-二磺酸[2-(4-氯-千氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-噁唑-5-基曱基]-二曱基-銨的鹽形式(鹽形式A)，所述X-射線粉末衍射圖包括如下所示的特征峰5.3，7.1，9.2，10.5,10.9,11.1,11.6，12.6,13.0,13.8,14.2，15.2,15.8,16.5,17.0,17.4，17.8，18.4，18.6,19.4，19.7,20.3,20.7，21.2，21.7，22.3,22.5，22.9,23.3,25.8,26.5和27.1。在本發(fā)明中，X-射線粉末衍射峰(以。26表達(dá))是使用波長為1.5418A的銅X-射線測量的。在本發(fā)明中，除非另有說明，x-射線粉末衍射峰(以。2e表達(dá))的誤差界限與美國藥典關(guān)于X-射線衍射的總章(USP941)—致-參見UnitedStatesPharmacopeiaConvention.X畫RayDiffraction,GeneralTest<941>。(t/m'tedStofey尸/2aTm"co;7e/a,第25版.Rockville，MD:UnitedStatesPharmacopeialConvention;2002:2088-2089)。在本發(fā)明的一個實施方案中，x-射線粉末衍射峰(以。2e表達(dá))的誤差界限為(士o.1。)。圖1顯示了半-萘-1,5-二磺酸[2-(4-氯-芐氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-。惡唑-5-基曱基]-二曱基-銨的鹽形式A的X-射線粉末衍射圖。本發(fā)明也提供X-射線粉末衍射圖與圖1所顯示的X-射線粉末衍射圖基本相同的鹽形式。在一個實施方案中，本發(fā)明提供半-萘-l,5-二磺酸[2-(4-氯-芐氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-。惡唑-5-基曱基]-二甲基-銨的鹽形式(鹽形式A),所述鹽形式具有至少下述特征性d-空間值(spacevalue):(1)16.8,8.4，5.6和5.4，或(2)16.8,8.4，5.6,5.4，4.8和4.6或(3)16.8,8.4,5.6,5.4，4.8，4.6,4.5和4.4或(4)16.8,8.4,5.6，5.4，5.04.8，4.6,4.5,4.4和4.1。本發(fā)明也提供具有如下X-射線粉末衍射圖的半-萘-1，5-二磺酸[2-(4-氯-芐氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-噁唑-5-基曱基]-二曱基-銨的鹽形式(鹽形式A)，所述圖像包括如下d-空間值16.8，12.5,9.6,8.4,8.1,8.0,7.7,7.0,6.8,6.4，6.2,5.8,5.6,5,4,5.2，5.1,5.0,4.8，4.8，4.6，4.5,4.4,4.3，4.2,4.1，4.0，4.0,3.9,3.8,3.5,3.4和3.3。在本發(fā)明的一個實施方案中，鹽形式A為無水形式的(unhydrate)(即，不含有水的結(jié)晶相)。在本發(fā)明的一個實施方案中，鹽形式A的吸水值(wateruptakevalue)小于1%,所述吸水值是通過由GVS在80%相對濕度和25。C對質(zhì)量增加進行測量而得到的。本發(fā)明一個實施方案提供基本不含其它物理形式的鹽形式A?；静缓渌锢硇问绞侵钢辽?0重量％，例如90、91、92、93、94、95、96、97、98或100重量％萘二磺酸鹽的那種物理形式。本發(fā)明的萘二磺酸鹽可按照如下方式制備將溴化[2-(4-氯-芐氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-甲基)-魂、唑-5-基曱基]-二甲基-銨和萘-l,5-二磺酸二鈉鹽的混合物在合適的溶劑(例如，二氯曱烷/水混合物)中和在合適的溫度(例如，20至25。C)反應(yīng)一段時間(例如，6至24小時)?？赏ㄟ^/人反應(yīng)混合物中分離出有機層并蒸發(fā)溶劑來分離固體產(chǎn)物，得到粗制半-萘-l，5-二磺酸[2-(4-氯-芐氧基)-乙基H2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-唾-唑-5-基曱基]-二曱基-銨，其為無定形固體?？蛇x擇地，可通過向反應(yīng)混合物中加入正庚烷來分離固體產(chǎn)物。將混合物攪拌，然后使其靜置，加入更多量的二氯曱烷，將混合物再次攪拌直到得到固體產(chǎn)物的沉淀物。然后收集固體并干燥，得到半-萘-l，5-二磺酸[2-(4-氯-芐氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-。惡唑-5-基曱基]-二甲基-銨?？赏ㄟ^如下方式制備半-萘-1，5-二磺酸[2-(4-氯-千氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-。惡唑-5-基曱基]-二曱基-銨的鹽形式A:取粗制半-萘-1,5-二磺酸[2-(4-氯-芐氧基)-乙基]-[2-((11)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-碌'唑-5-基曱基]-二曱基-銨(例如，通過上面描述的方法制備的)并形成所述鹽于乙腈中的漿液，攪拌漿液直到所述漿液包含鹽形式A，以及最后收集并干燥固體。在一個實施方案中，將所述漿液保持在環(huán)境溫度(例如，20°C)。在另一個實施方案中，可將所述漿液加熱到合適的溫度，然后冷卻回到環(huán)境溫度。可選擇地，可通過如下方式得到鹽形式A:將粗制半-萘-1,5-二磺酸[2-(4-氯-芐氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-碌、唑-5-基曱基]-二曱基-銨溶解在乙腈中，將溶液加熱合適的時間(即，直到樣品呈溶液形式，例如，0.5至48小時)，然后將溶液冷卻至環(huán)境溫度(例如，20°C)。半-萘-l，5-二磺酸[2-(4-氯-千氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-碌、唑-5-基曱基]-二曱基-銨和鹽形式A的其它制備描述在下面實施方案部分中。本發(fā)明的萘二磺酸鹽具有作為藥物的活性，特別是作為抗膽堿能藥物包括毒蕈堿性受體(M1、M2和M3)拮抗劑，特別是作為M3拮抗劑的活性?？捎盟鳆}治療的疾病和病癥包括1.呼吸道氣道阻塞性疾病，包括哮喘，包括支氣管哞喘、過敏性哮喘、內(nèi)源性哮喘、外源性哮喘、運動誘發(fā)性哮喘、藥物誘發(fā)性(包括阿司匹林和NSAID誘發(fā)的)哞喘和粉塵誘發(fā)性嗜喘，間歇性哞喘和持續(xù)性哮喘，以及各種嚴(yán)重度的哮喘，及其它原因引起的氣道高反應(yīng)性；慢性阻塞性肺病(COPD);支氣管炎，包括傳染性支氣管炎和嗜酸性支氣管炎；肺氣腫；支氣管擴張；嚢性纖維化；結(jié)節(jié)?。晦r(nóng)民肺及相關(guān)疾??；超敏感性肺炎；肺纖維化，包括隱原性纖維化肺泡炎、特發(fā)性間質(zhì)性肺炎、抗腫瘤治療和慢性感染(包括結(jié)核病和曲霉病及其它真菌感染)并發(fā)的纖維化；肺移植的并發(fā)癥；肺血管的血管炎和血栓形成疾病及肺動脈高壓；鎮(zhèn)咳活性，包括治療與氣道炎癥和分泌情況相關(guān)的慢性咳嗽及醫(yī)源性咳嗽；急性鼻炎和慢性鼻炎，包括藥物性鼻炎和血管運動性鼻炎；常年性(perennial)過敏性鼻炎和季節(jié)性過敏性鼻炎，包括神經(jīng)性鼻炎(花粉癥)；鼻息肉?。患毙圆《靖腥?，包括普通感冒和由呼吸道合胞病毒、流行性感冒、冠狀病毒(包括SARS)和腺病毒引起的感染；2.骨和關(guān)節(jié)與骨關(guān)節(jié)炎/骨關(guān)節(jié)病相關(guān)或包括骨關(guān)節(jié)炎/骨關(guān)節(jié)病的關(guān)節(jié)炎，包括原發(fā)性關(guān)節(jié)炎和繼發(fā)性關(guān)節(jié)炎，例如先天性髖關(guān)節(jié)發(fā)育不良；頸和腰脊推炎及腰背痛和頸部疼痛；類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和斯蒂爾病(Still，sdisease);血清陰性脊柱關(guān)節(jié)病，包括強直性脊柱炎、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎和未分化脊柱關(guān)節(jié)??；膿毒性關(guān)節(jié)炎和其它感染相關(guān)的關(guān)節(jié)病和骨疾病，例如結(jié)核病，包括波特病(Potts，disease)和蓬塞綜合征(Poncet，ssyndrome);晶體誘發(fā)的急性和慢性滑膜炎，包括尿酸鹽沉積病、焦磷酸鈣沉積病和鈣^粦灰石相關(guān)的腱、粘液嚢和滑膜炎癥；貝切特病(Behcet，sdisease);原發(fā)性和繼發(fā)性斯耶格倫綜合征(Sjogren，ssyndrome);全身性硬化和局限性硬皮?。幌到y(tǒng)性紅斑狼瘡、混合性結(jié)締組織病和未分化結(jié)締組織??；炎性肌病，包括皮肌炎和多肌炎；風(fēng)濕性多肌痛；幼年型關(guān)節(jié)炎，性并發(fā)癥；血管炎(vasculitis)，包括巨細(xì)胞性動脈炎、高安動脈炎(Takayasu，sarteritis),丘-施綜合征(Churg-Strausssyndrome)、結(jié)節(jié)性多動脈炎、顯微鏡性多動脈炎和與病毒感染、超敏反應(yīng)、冷球蛋白和異蛋白相關(guān)的血管炎；腰背痛；家族性地中海熱、穆-韋綜合征(Muckle-Wellssyndrome)和家族性愛爾蘭熱(FamilialHibernianFever)、菊池病(Kikuchidisease);藥物誘發(fā)性關(guān)節(jié)痛、力建炎和"幾?。?.由損傷(例如運動損傷)或疾病引起的疼痛和結(jié)締組織再造的肌肉骨骼疾病關(guān)節(jié)炎(例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)或晶體性關(guān)節(jié)病)、其它關(guān)節(jié)疾病(例如推間盤變性或顳下頜關(guān)節(jié)變性)、骨再造疾病(例如骨質(zhì)疏松、佩吉特病(Paget，sdisease)或骨壞死)、多軟骨炎、硬皮病、混合性結(jié)締組織病、脊推關(guān)節(jié)病或牙周病(例如牙周炎)；4.皮膚牛皮癬、特應(yīng)性皮炎、接觸性皮炎或其它濕滲性皮膚病及遲發(fā)型超敏反應(yīng)；植物性和光照性皮炎；脂溢性皮炎、皰滲樣皮炎、扁平苔癬、萎縮性硬化性苔癬、壞疽性膿皮癥、皮膚結(jié)節(jié)病、盤狀紅斑狼瘡、天皰瘡、類天皰瘡、大皰性表皮松解、蕁麻瘆、血管性水腫、血管炎、中毒性紅斑、皮膚嗜酸粒細(xì)胞增多、斑禿、男性型脫發(fā)、斯威特綜合征(Sweet，ssyndrome)、韋-克綜合征(Weber-Christiansyndrome)、多形性紅斑；蜂窩組織炎，包括傳染性和非傳染性蜂窩組織炎；脂膜炎；皮膚淋巴瘤、非黑素瘤皮膚癌和其它發(fā)育不良性損傷；藥物誘發(fā)的疾病，包括固定性藥疹；5.目艮瞼炎；結(jié)膜炎，包括常年性過敏性結(jié)膜炎或春季過敏性結(jié)膜炎；虹膜炎；前色素層炎和后色素層炎；脈絡(luò)膜炎；自身免疫；影響視網(wǎng)膜的變性或炎性疾病；眼炎，包括交感性眼炎；結(jié)節(jié)??；感染，包括病毒、真菌和細(xì)菌感染；6.胃腸道舌炎、齦炎、牙周炎；食管炎，包括返流；嗜酸性胃腸炎、肥大細(xì)胞增多、克羅恩病(Crohn，sdisease)、結(jié)腸炎包括潰瘍性結(jié)腸炎、直腸炎、肛門瘙癢；腹部疾病、腸應(yīng)激綜合征，以及具有遠(yuǎn)離腸作用的食物相關(guān)的變態(tài)反應(yīng)(例如偏頭痛、鼻炎或濕滲)；7.腹部肝炎，包括自身免疫性、酒精性和病毒性肝炎；肝纖維化和硬化；膽嚢炎；胰腺炎，包括急性和慢性胰腺炎；8.生殖泌尿系統(tǒng)腎炎，包括間質(zhì)性腎炎和腎小球性腎炎；腎病綜合征；膀胱炎，包括急性和慢性(間質(zhì)性)膀胱炎和杭納潰瘍(Hu皿er，sulcer);急性和慢性尿道炎、前列腺炎、附睪炎、卵巢炎和輸卵管炎；女陰陰道炎；佩倫涅病(Peyronie'sdisease);勃起機能障礙(男性和女性)；9.同種異體移植物排斥在例如腎臟、心臟、肝臟、肺臟、骨髓、皮膚或角膜移植后或在輸血后出現(xiàn)的急性和慢性同種異體移植物排斥；或慢性移4直物抗宿主病；10.CNS:阿爾茨海默病(Alzheimer，sdisease)和其它癡呆疾病包括CJD和nvCJD;淀粉樣變性?。欢喟l(fā)性硬化和其它脫髓鞘綜合征；腦動脈粥樣硬化和血管炎；顳動脈炎；重癥肌無力；急性和慢性疼痛(急性、間歇性或持續(xù)性疼痛，無論是中樞源性的還是外周源性的)，包括內(nèi)臟痛、頭痛、偏頭痛、三叉神經(jīng)痛、不典型面痛、關(guān)節(jié)和骨痛、由癌癥和腫瘤4曼入引起的疼痛、神經(jīng)性疼痛綜合征包括糖尿病性、皰滲后和HIV相關(guān)的神經(jīng)?。簧窠?jīng)性肉樣瘤?。粣盒?、感染性或自身免疫性過程的中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥；11.其它自身免疫性和變態(tài)反應(yīng)性疾病，包括橋本曱狀腺炎(Hashimoto'sthyroiditis)、才各雷夫斯病(Graves'disease)、阿《火森病(Addison，sdisease)、糖尿病、特發(fā)性血小板減少性紫癜、嗜酸性筋膜炎、高IgE綜合征、抗磷脂綜合征；12.其它帶有炎性或免疫性組成的疾病，包括獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)、麻風(fēng)病、塞扎里綜合征(Sezarysyndrome)和瘤外綜合征；13.心血管影響冠脈和外周循環(huán)的動脈粥樣硬化；心包炎；心肌炎；炎性和自身免疫性心肌病，包括心肌結(jié)節(jié)病；缺血性再灌注損傷；心內(nèi)膜炎、心瓣炎和主動脈炎，包括傳染性(例如梅毒性)的；血管炎；近端和外周靜脈的疾病，包括靜脈炎和血栓形成包括深靜脈血栓形成及靜脈曲張的并發(fā)癥；14.肺瘤對一般癌癥的治療，包括前列腺、乳腺、肺、卵巢、胰腺、腸和結(jié)腸、胃、皮膚和腦肺瘤及影響骨髓(包括白血病)和淋巴增生系統(tǒng)的惡性腫瘤(例如何杰金(Hodgkin，s)和非何杰金淋巴瘤)；包括對轉(zhuǎn)移性疾病和腫瘤復(fù)發(fā)及瘤外綜合征的預(yù)防和治療；和15.胃腸道腹部疾病、直腸炎、嗜酸性胃腸炎、肥大細(xì)胞增生、克羅恩病、潰瘍性結(jié)腸炎、顯微鏡性結(jié)腸炎、不確定性結(jié)腸炎、腸應(yīng)激病、腸應(yīng)激綜合征、非炎性腹瀉、具有遠(yuǎn)離腸作用的食物相關(guān)的變態(tài)反應(yīng)(例如偏頭痛、鼻炎或濕滲)。因此，本發(fā)明還提供如上所定義的萘二磺酸[2-(4-氯-千氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-噁唑-5-基曱基]-二曱基-銨，其用于治療。另一個方面，本發(fā)明提供如上所定義的萘二磺酸[2-(4-氯-千氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-噁唑-5-基曱基]-二曱基-銨在制備用于治療的藥物中的用途。在本發(fā)明的上下文中，除非有具體的相反說明，術(shù)語"治療"也包括"預(yù)防"。術(shù)語"治療的"和"治療地"應(yīng)作相應(yīng)理解。物中治療病癥的方法，所述方法包括向需要所述治療的哺乳動物給藥治療有效量的如上所定義的萘二磺酸[2-(4-氯-千氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-。惡唑-5-基曱基]-二曱基-銨。本發(fā)明也提供萘二磺酸[2-(4-氯-千氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-。惡唑-5-基曱基]-二曱基-銨，其用于治療慢性阻塞性肺病(COPD)(例如，不可逆COPD)。本發(fā)明也提供如上所定義的萘二磺酸[2-(4-氯-芐氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-碌-唑-5-基曱基]-二曱基-銨在制備用于治療慢性阻塞性肺病(COPD)(例如，不可逆COPD)的藥物中的用途。本發(fā)明也提供如上所定義的萘二磺酸[2-(4-氯-芐氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-噁唑-5-基曱基]-二曱基-銨在制備用于治療哮喘的藥物中的用途。本發(fā)明還提供一種在溫血動物(例如人)中治療慢性阻塞性肺病(COPD)(例如，不可逆COPD)的方法，所述方法包括向需要所述治療的哺乳動物給藥治療有效量的如上所定義的萘二磺酸[2-(4-氯-千氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-噁唑-5-基曱基]-二曱基-銨。為了使用本發(fā)明化合物來治療性處置溫血動物(例如，人)，通常根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)藥物實踐將所述成分配制成藥物組合物。對于上述治療用途，劑量當(dāng)然會隨給藥模式、所期望的治療和適應(yīng)的病癥而變化，但可通?？稍?.001mg/kg至30mg/kg范圍內(nèi)。根據(jù)本發(fā)明的鹽可單獨使用，但通常會以藥物組合物的形式給藥，其中萘二磺酸[2-(4-氯-千氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-幾基-苯基-曱基)-噁唑-5-基曱基]-二曱基—銨(活性成分)與可藥用助劑、稀釋劑或載體結(jié)合。用于選擇和制備合適藥物制劑的常規(guī)方法描述在例如"Pharmaceuticals-TheScienceofDosageFormDesigns",M.E.Aulton，ChurchillLivingstone,1988中。依賴于給藥模式，所述藥物組合物可包含0.05至99。/。w(重量百分比)，更優(yōu)選0.05至80%w,更優(yōu)選0.10至70%w,以及甚至更優(yōu)選0.10至50%w活性成分，所有重量百分比都基于組合物總重量。本發(fā)明也提供藥物組合物，其包含萘二磺酸[2-(4-氯-芐氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-甲基)-碌、唑-5-基曱基]-二曱基-銨和可藥用助劑、稀釋劑或載體。本發(fā)明還提供制備本發(fā)明藥物組合物的方法，所述方法包括將萘二磺酸[2-(4-氯-千氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-。惡唑-5-基曱基]-二曱基-銨與可藥用助劑、稀釋劑或載體混合。所述藥物組合物可以局部給藥(例如給藥至皮膚或給藥至肺和/或氣道)，例如以乳膏劑、溶液劑、混懸劑、七氟代烷(HFA)氣霧劑和干粉制劑(例如在稱為Turbuhale^的吸入裝置中的制劑)的形式局部給藥；或全身給藥，例如以片劑、膠嚢劑、糖漿劑、粉劑或顆粒劑的形式口服給藥；或溶液劑或混懸劑的形式胃腸外給藥；或皮下給藥；或以栓劑的形式直腸給藥；或經(jīng)皮給藥。在本發(fā)明的實施方案中，對活性成分進行吸入給藥。在另一個實施方案中，活性成分通過干粉吸入器(drypowderinhaler)給藥。吸入器可以是單劑量的吸入器或多劑量的吸入器，并且可以是呼吸驅(qū)動的干粉吸入器(breathactuateddrypowderinhaler)。當(dāng)通過吸入給藥時，活性成分的劑量范圍通?？蔀镺.l嗎至IOOOO嗎、0.1至5000|ig、0.1至1000嗎、0.1至500昭、0.1至200嗎、0.1至200嗎、0.1至IOO嗎、0.1至50|ig、5嗎至5000嗎、5至1000嗎、5至500嗎、5至200(ig、5至100(ig、5至50嗎、10至5000嗎、10至1000嗎、10至500嗎、10至200(xg、10至100(xg、10至50嗎、20至5000嗎、20至1000嗎、20至500fig、20至200嗎、20至100嗎、20至50昭、50至5000jig、50至1000(ig、50至500(ag、50至200(xg、50至100|ag、100至5000嗎、100至lOOOpg或100至500|ig?；钚猿煞值母煞壑苿┖图訅篐FA氣霧劑可通過口或鼻吸入給藥。就吸入而言，化合物理想的是微細(xì)分散的。微細(xì)分散的化合物的質(zhì)量中值直徑優(yōu)選小于10(im,并且可在分散劑(例如CVC2o脂肪酸或其鹽(例如油酸)、膽汁鹽、磷脂、烷基糖、全氟化或聚乙氧基化表面活性劑或其它可藥用分散劑)的輔助下，將微細(xì)分散的化合物懸浮于噴射劑混合物中。一種可能性是混合微細(xì)分散的本發(fā)明化合物與載體物質(zhì)例如單糖、二糖或多糖、糖醇或另一種多元醇混合。合適的載體有糖例如乳糖、葡萄糖、棉子糖、松三糖、乳糖醇、麥芽醇、海藻糖、蔗糖、甘露醇和淀粉?？晒┻x擇地，微細(xì)分散的化合物可用另一種物質(zhì)包衣。也可將該粉末混合物分裝到硬明膠膠嚢中，每個膠嚢均包含所需劑量的活性化合物。另一種可能性是將微細(xì)分散的粉末制成球，所述球在吸入操作期間碎裂。可將這種球化粉末裝到多劑量吸入器(例如稱為Turbuhale^)的儲藥器中，其中計量給藥單元計量出所需的劑量，所需的劑量然后會被患者吸入。利用該系統(tǒng)，在存在或不存在載體物質(zhì)的情況下，將活性化合物給予患者。對于口服給藥，本發(fā)明的化合物可與輔料或載體，例如乳糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇；淀粉，例如馬鈴薯淀粉、玉米淀粉或支鏈淀粉；纖維素衍生物；粘合劑，例如明膠或聚乙烯吡咯烷酮，和/或潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、聚乙二醇、蠟、石蠟等混合，然后壓制成片。如果需要包衣片，那么如上所述制備的片芯可用濃的糖溶液包衣，所述糖溶液可包含例如阿拉伯膠、明膠、滑石和二氧化鈦?？晒┻x擇地，片可用溶解在易揮發(fā)有機溶劑中的合適聚合物包衣。為了制備軟明膠膠嚢，可將本發(fā)明的化合物與，例如植物油或聚乙二醇混合。硬明膠膠嚢可包含所述化合物的顆粒，所述顆粒使用用于片劑的任一上述賦形劑。也可將本發(fā)明化合物的液體或半固體制劑裝到硬明膠膠嚢中。用于口服給藥的液體制劑的形式可以是糖漿劑或混懸劑，例如包含本發(fā)明化合物以及余量為糖以及乙醇、水、甘油和聚丙二醇的混合物的溶液。任選地，這些液體制劑可包含著色劑、調(diào)味劑、糖精和/或作為增稠劑的羧13曱基纖維素或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它賦形劑。現(xiàn)在，通過如下非限定性實施例對本發(fā)明進行說明。在實施例中提供了如下附圖圖1:半-萘-1,5-二磺酸[2-(4-氯-千氧基)-乙基H2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-碌-唑-5-基曱基]-二曱基-銨的鹽形式A的X-射線粉末衍射圖。具體實施方案實施例半-萘-l,5-二磺酸『2-(4-氯-芐氧基V乙基l-『2-(m)-環(huán)己基-羥基-苯基-甲基P惡唑-5-基曱基-二甲基-銨的合成制備[l]用于制備「11的一般實驗細(xì)節(jié)除非另有說明，所有反應(yīng)都是在氮氣氣氛中進行的。通過如下方式獲得NMR光鐠在具有5mm反檢測三重共振探針的VarianUnityInova400光譜儀上在400MHz操作或在具有5mm反檢測三重共振TXI探針的BmkerAvanceDRX400光譜儀上在400MHz操作，或在具有標(biāo)準(zhǔn)5mm雙頻率探針的BmkerAvanceDPX300光譜4義上在300MHz操作。位移相對于四曱基硅烷以ppm給出。當(dāng)產(chǎn)品通過柱色譜法純化時，'快速硅膠(flashsilica)，是指用于色譜法的硅膠，0.035至0.070mm(220至440目)(例如，F(xiàn)luka硅膠60)，并且施加的高達(dá)10p.s.i的氮氣壓力加速柱洗脫。在使用薄層色譜(TLC)時，是指硅膠TLC,其使用板(通常是鋁箔板上的3x6cm硅膠)以及熒光指示劑(254nm)(例如，F(xiàn)luka60778)。所有溶劑和商購試劑都原樣使用。除非另有說明，所有含有堿性中心的化合物(通過HPLC純化)都以TFA鹽的形式獲得。制備性HPLC條件C18-反相柱(100x22.5mm內(nèi)徑Genesis柱，4立徑為7(am)。在230nm進行UV檢測。LC/MS系統(tǒng)所使用的液相色譜質(zhì)譜(LC/MS)系統(tǒng)LC-MS方法1具有C18-反相柱(100x3.0mmHigginsClipeus，粒徑為5pm)的WatersPlatformLCT，用A:水+0.1%曱酸；B:乙腈+0.1%曱酸洗脫。梯度梯度-時間流速(mlv/min)%A%B0.001.0951.001.09515.001.09520.001.09522.001.09525.001.0955檢測-MS、ELS、UV(IOOpi分流至具有在線UV檢測器(254nm)的MS)MS電離方法-電噴霧(正離子)LC-MS方法2具有C18-反相柱(30x4.6mmPhenomenexLuna,粒徑為3jam)的WatersMicromassZQ,用A:水+0.1%曱酸；B:乙腈+0.1%曱酸洗脫。梯度梯度-時間流速mL/min%A%B0.002.09550.502.09554.502.05955.502.05956.002.0955檢測-MS、ELS、UV(100pl分流至具有在線UV監(jiān)測器的MS)MS電離方法-電噴霧(正離子和負(fù)離子)用在制備[l]中的縮寫Aq二水溶液DC1VN二氯曱烷DMF:二曱基曱酰胺EtOAc二乙S吏乙酉旨EtOEN乙醇GVS二重量蒸汽吸收(Gravimetricvapoursorption)MeOH:曱醇RT二室溫Rt—呆留時間THF^四氫吹喃Satd^飽和的下述中間體1-8用在半-萘-l,5-二磺酸[2-(4-氯-節(jié)氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-。惡唑-5-基曱基]-二曱基-銨的制備[1]中。中間體1:2-氧代-2-苯基-AK丙-2-炔基)-乙酰胺將草酰氯(6.1g，48mmol)加入到苯酰曱酸(6.0g,40mmol)和3滴DMF于無水DCM(50mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌3小時，然后除去溶劑。將殘余物吸收在無水DCM(50mL)中，將溶液冷卻到0。C。歷時10分鐘小心加入炔丙基胺(2.2g，40mmol)和三乙胺(4.05g，40mmol)的混合物，然后使混合物溫?zé)嶂潦覝?。繼續(xù)攪拌2.5小時，然后加入水(IOmL)。將混合物用濃度為1M的HC1溶液、飽和碳酸氫鈉(水溶液)和鹽水洗滌。然后干燥(Na2S04)有機相并除去溶劑。將殘余物從環(huán)己烷中結(jié)晶，得到產(chǎn)物，其為淺棕色固體。收率5.75g，76%。LC-MS方法2:Rt為2.47分鐘，m/z188[Mtf]。中間體2:(5-甲基-碌、唑-2-基V苯基-甲酮.將甲磺酸(IOg,104mmol)滴加到2-氧代-2-苯基-^-(丙-2-炔基)_乙酰胺(中間體1)(2.4g,12.83mmol)于1,4-二碌、烷(20mL)的溶液中。將所得溶液在90。C加熱66小時。將反應(yīng)混合物冷卻并除去溶劑。將黑色殘余物在DCM和水之間分配。DCM部分用濃度為1M的HC1溶液(2x)、々包和碳酸氫鈉溶液(水溶液，2x)和鹽水洗滌。干燥(Na2S04)溶液，除去溶劑，得到粗制產(chǎn)物。通過柱色譜法實現(xiàn)純化(用環(huán)己烷/EtOAc(4:l)洗脫)。這樣就得到產(chǎn)物，其為灰白色固體。收率1.0g，41%。LC-MS方法2:Rt為2.94分鐘，m/z188[MI^]。中間體3:環(huán)己基-(5-曱基-噁唑-2-基)-苯基-曱醇在0。C和氮氣氣氛中，歷時10分鐘將(5-曱基-。惡唑-2-基)-苯基-曱酮(中間體2)(3.0g,16mmol)于32mL無水THF中的溶液用濃度為2M的環(huán)己基氯化鎂的乙醚溶液(IOmL,20mmol)逐滴處理。將所得深黃色溶液在0。C攪拌約30分鐘(在此期間有沉淀物形成)，然后在室溫攪拌1.5小時。將反應(yīng)混合物再次冷卻到0。C，并用飽和氯化銨溶液(水溶液)小心處理。將混合物在室溫攪拌10分鐘，然后用水(10mL)稀釋。分離各相，有機相用鹽水洗滌。合并的水相用DCM萃取，干燥(MgS04)合并的有機相，真空濃縮，得到粗制產(chǎn)物，用乙醚(ether)對其進行研磨，過濾出來并干燥。收率3.65g,84%。LCMS方法2:Rt為3.78分鐘，m/z272[MH+]。中間體4:(5-溴甲基-嚙唑-2-基)-環(huán)己基-苯基-曱醇.將環(huán)己基-(5-曱基-噁唑-2-基)-苯基-曱醇(中間體3)(3.0g,11.1mmol)于1,2-二氯乙烷(22mL)中的溶液用處理7V-溴代琥珀酰亞胺(2.16g,12.2mmol)處理，然后用2，2，-偶氮二(2-曱基丙腈)(0.18g，2.1mmol)處理。將混合物加熱至80。C，持續(xù)2.5小時，然后使其冷卻至室溫。加入飽和碳酸氫鈉溶液(水溶液)并分離出各相。有機層用鹽水洗滌，合并的水層用DCM萃取。干燥(MgS04)合并的有機相，真空濃縮，得到粗制產(chǎn)物，其為棕色油狀物。通過柱色譜法實現(xiàn)純化(先后用33-100%DCM/環(huán)己烷和25%EtOAc/DCM洗脫)。收率1.85g,48%。LCMS方法2:Rt為4.27min，m/z350,352[MH^。中間體5:環(huán)己基-(5-二曱基M甲基-碌、唑-2-基)-苯基-曱醇17將(5-溴曱基-。惡唑-2-基)-環(huán)己基-苯基-曱醇(中間體4)(3.2g,9.2mmol)于THF(40mL)中的溶液用濃度為2M的二曱基胺THF溶液(40mL,80mmol)處理。攪拌幾分鐘后形成懸浮液。將反應(yīng)混合物置于室溫過夜，然后過濾出固體并棄去。減壓濃縮濾液，將殘余物在DCM和飽和石友酸氬鈉溶液(水溶液)之間分配。干燥(Na2S04)有機層并蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物，其為固體。收率2.74g,95%。LC-MS(方法1):Rt為6.57分鐘，m/z315[MHT]。'HNMR(DMSO-d6):50.92-1.29(m，6H)，1.42-1.74(m，4H),2.10(s，6H)，2.22(m,1H),3.45(s，2H),5.90(s，1H)，6.98(s,1H),7.18陽7.22(m,1H),7.27-7.34(m,2H)，7.40畫7.46(m，2H)ppm。通過使用250x20mmChiralpakIA柱(填充有固定在5pm硅膠上的淀粉酶三(3，5-二曱基苯基-氨基曱酸酯))的制備性手性HPLC分離環(huán)己基-(5-二曱基氨基曱基-碌.唑-2-基)-苯基-曱醇(中間體5)(2.74g)的兩種對映異構(gòu)體。柱用5%EtOH/庚烷(用0.1%二乙胺緩沖)以15mL/分鐘洗脫。第一個洗脫的對映異構(gòu)體(Rt為8.5分鐘)得到(S)-環(huán)己基-(5-二曱基氨基曱基-噁唑-2-基)-苯基-曱醇(中間體5a)，其為白色固體。中間體5a:(S)-環(huán)己基-(S-二曱基氨基甲基-碌、唑-:2-基)-苯基-甲醇收率0.73g,27%。LC-MS(方法1):Rt為6.50分鐘，m/z315[MHT]。&NMR(CDC13):51.12-1.39(m，7H),1.62-1.76(m，3H),2.25(s,6H),2.29-2.32(m,1H),3.54((1(1瑪2H)，3.70(br.s，1H)，6.84(s，1H)，7.24(t,1H),7.33(t，2H)，7.64(d,2H)ppm。第二個洗脫的對映異構(gòu)體(Rt為10.3分鐘)得到(R)-環(huán)己基-(5-二曱基氨基曱基-。惡唑-2-基)-苯基-曱醇(中間體5b),其為白色固體。中間體5b:(R)-環(huán)己基-(S-二曱基M甲基-碌唑-:2-基)-苯基-甲醇收率1.04g，38%。LC-MS(方法1):Rt為6.48分鐘，m/z315[MH^]。'HNMR(CDC13):5U0-1.39(m,7H),1.62-1.76(m,3H)，2.25(s,6H):2.29-2.35(m,1H),3.54(ddAB，2H)，3.70(br.s,1H),6.84(s,1H)，7.24(t，1H)，7.33(t2H)，7.64(d,2H)ppm。中間體6:甲磺酸2-(4-氯-芐氧基)-乙基酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>將曱磺酰氯(980(iL,12.6mmol)于無水DCM(10mL)中的溶液緩慢加入到冷的(O。C)2-(4-氯-千氧基)-乙醇(2.14g,11.46mmol)和二異丙基乙基胺(2.0mL，23mmol)于無水DCM(IOmL)中的溶液中。使反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝剡^夜。加入水，干燥(MgS04)有機層并濃縮。通過硅膠柱色譜法對殘余物進行純化(使用0-20%乙醚/環(huán)己烷的梯度)，得到純的產(chǎn)物。收率1.87g，67%。!HNMR(CDC13):53.03(s,3H)，3.74(m，2H)，4.39(m，2H)，4,54(s，2H),7.27(d，2H),7.33(d,2H)ppm。中間體7:l-(2-溴-乙氧基甲基V4-氯-苯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>將曱磺酸2-(4-氯-千氧基)-乙基酯(中間體6)(1.37g,5.18腿ol)和溴化鋰(l.80g,20.7mmol)于丙酮(l5mL)中的混合物在回流溫度加熱過夜。將反應(yīng)混合物濃縮至干，將殘余物在DCM和水之間分配。干燥(MgS04)有機層，濃縮，通過硅膠柱色譜法進行純化(使用DCM/環(huán)己烷(1:3)作為洗脫劑)，得到產(chǎn)物，其為無色油狀物。收率0.67g，78%。NMR(CDC13):53.49(t，2H)，3.79(t,2H),4.55(s，2H),7.30(d,2H)，7.32(d，2H)ppm。中間體8:溴化〖2-f4-氯-芐氧基)-乙基l-2-mRV環(huán)己基-羥基-苯基-甲基)_碌唑_5_基甲基卜二曱基_銨將(R)-環(huán)己基-(5-二曱基氨基甲基。惡唑-2-基)-苯基-曱醇(中間體5b)(0.40g，1.27mmol)和1-(2-溴-乙氧基曱基)-4-氯-苯(中間體7)(0.67g,2.68mmol)于氯仿(4mL)和乙腈(4mL)中的溶液在50。C加熱3天。將反應(yīng)混合物濃縮至干，得到黃色油狀物，通過柱色譜法對所述油狀物進行純化(用2.5-25%MeOH/DCM洗脫)，得到產(chǎn)物，其為白色泡沫。收率，0.68g,92%。LC-MS(方法1):Rt為8.72分鐘，m/z483[M+]。^NMR(CDC13):51.08-1.40(m,7H),1.61-1.76(m,3H),2.31(m，1H)，3.32(s，6H),3.88(m，2H)，3.94(m,2H)，4.03(br.s,1H)，4.54(s,2H),5.17(dd線2H),7.21-7.26(m,3H),7.28-7,34(m，4H),7,46(s，1H),7.56(d,2H)ppm。半-萘丄5-二磺酸2-(4-氯-芐氧基V乙基l-『2-f(RV環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-噁唑-5-基甲基l-二曱基-銨制備m將溴化[2-(4-氯-千氧基)-乙基]-[2-((11)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-口惡唑-5-基甲基]-二曱基-銨(0.20g,0.36mmol)(中間體8)、萘-l,5-二磺酸二鈉鹽(0.059g，0.18mmol)、DCM(2.8mL)和水(2.8mL)的混合物在室溫劇烈攪拌過夜。加入正庚烷(1.0mL),將混合物劇烈攪拌。靜置后，得到兩層透明層和一種黃色油狀物。加入DCM(1.0mL)(使所述油狀物溶解)，將混合物在室溫攪拌過夜，得到白色固體沉淀物。過濾收集固體，用DCM/水混合物洗滌，在50。C真空干燥。'HNMR顯示對應(yīng)于半-鹽(陽離子/陰離子2:l比例)的譜圖。收率0.17g,77%。LC-MS(方法1):Rt為8.62分鐘，m/z483[M""]。'H畫R(CD30D):31.04-1.37(m,12H)，1.53(m，2H)，1.64誦1.76(m,6H)，2.38(m,2H),3.03(s,12H),3.46(m，4H),3.85(m，4H),4.52(s，4H),4.70(s,4H)，7.24(m,2H),7.34(m，12H)，7.43(s，2H),7.52(m，6H),8.20(d,2H),9.02(d,2H)ppm。半—萘-l，5-二磺酸[2-(4-氯-千氧基)-乙基-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基國曱基)-。惡唑-5-基曱基-二曱基-銨的'鹽形式A，在室溫，將半-萘-1，5-二磺酸[2-(4-氯-芐氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-噁唑-5-基曱基]-二曱基-銨(如上所制備)(107mg,0.17mmol)溶解在最少量的MeCN中。加熱溶液，然后使其冷卻回到室溫。將所得晶體固體過濾出來并真空干燥。收率83mg，78%。通過XRPD對由該^各線制備的產(chǎn)物進行分析，鑒定所述產(chǎn)物為'鹽形式A，。制備21用于制備[2]的一般實驗條件除非另有說明，所有反應(yīng)都在惰性氣體氣氛中進行。在BrukerAVANCE400光譜儀上進行NMR光譜頻率400MHz;2-通道；z-梯度。溫度范圍0-120。C。HPLC條件Phenome認(rèn)L腿C18(2)柱(50x4.6mm)，3|tim粒徑。在210nm進行UV檢測。用A:水+0.05%三氟乙酸；B:乙腈+0.05%三氟乙酸洗脫。梯度梯度-時間流速(mL/min)%A%B0.001.09010謹(jǐn)1.01090<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>LC-MS方法LC-方法如上所給出。MS:HP-1100MSD。檢測-API-ES,正模式(positivemode)。制備『21將(R)-環(huán)己基-(5-二曱基氨基甲基碌、唑-2-基)-苯基-曱醇1(1當(dāng)量)和l-(2-溴-乙氧基甲基)-4-氯-苯(2當(dāng)量)于2-丙醇(5倍體積)的混合物在52°C加熱164小時。HPLC顯示98%轉(zhuǎn)化。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，得到溴化[2-(4-氯-芐氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-噁唑-5-基甲基]-二曱基-銨。將溴化[2-(4-氯-芐氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-噁唑-5-基曱基]-二曱基—銨的粗制樣品溶解在二氯曱烷(4.98倍體積)中，在室溫歷時IO分鐘加入1,5-萘二石黃酸二鈉鹽(1當(dāng)量)于水(IO倍體積)中的溶液。將混合物用二氯曱烷(4.98倍體積)稀釋并在室溫攪拌1小時。關(guān)掉攪拌器，使乳狀液沉降，然后分離。在室溫歷時72分鐘的一段時間，向有^L層中加入^k丁基曱基醚(tBME)(10倍體積)和2-丙醇(1.6倍體積)的混合物。將所得懸浮液過濾，濾餅用tBME(2.15倍體積)沖洗。干燥(在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，40-50°C的浴溫和5-10巴的壓力)，得到半-萘-l，5-二磺酸[2-H-氯-千氧基)-乙基]-P-((R)-環(huán)己基-鞋基-苯基-曱基)-碌、唑-5-基甲基]-二曱基-銨。通過該制備使用130克(R)-環(huán)己基-(5-二曱基氨基曱基噁唑-2-基)-苯基-曱醇得到的收率為216g，83%。'HNMR顯示對應(yīng)于半-鹽(陽離子/陰離子2:l比例)的譜圖。通過如下方式實現(xiàn)向'鹽形式A，的轉(zhuǎn)化將如上制備的一批粗制半-萘-1，5-二磺酸[2-(4-氯-千氧基)-乙基]-[2-((10-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-。惡唑-5-基曱基]-二曱基-銨溶解在乙腈(13.8倍體積)中。將懸浮液加熱至回流并在回流溫度攪拌l小時。然后將懸浮液冷卻至70。C并在該溫度攪拌過夜。將懸浮液冷卻至室溫，過濾固體，用乙腈(1.4倍體積)洗滌并干燥(在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，40-50。C的浴溫和5-10巴的壓力)，得到'鹽形式A，。通過這樣的轉(zhuǎn)化使用216g粗制半-萘-l,5-二磺酸[2-(4-氯-芐氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-噁唑-5-基甲基]-二曱基-銨作為起始物質(zhì)得到的收率為203.5g,94%。如上面在制備[l]中所描述，乂R)-環(huán)己基-(5-二甲基氨基曱基碌唑-2-基)-苯基-曱醇為中間體5b。(R)-環(huán)己基-(5-二曱基氨基曱基噁唑-2-基)-苯基-曱醇的替代制備如下所述。(R)-環(huán)己基-(5-二甲基氨基曱基-碌、唑-2-基)-苯基-甲醇將(5-二曱基氨基曱基-口惡唑-2-基)-苯基-曱酮2溶解在THF(8.4L/kg)中，冷卻至溫度0士5。C,歷時至少1個小時向其中投入環(huán)己基氯化鎂(1.3當(dāng)量，20w/w。/。的甲苯/THF溶液)。歷時40分鐘將反應(yīng)混合物加熱至20。C，并在20。C攪拌至少l個小時，此時通過HPLC表明向產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化率為〉96。/。。將反應(yīng)混合物投入到23.1w/w%NH4Cl(3.97L/kg)和水(3.97L/kg)的混合物中。分離各相，水層用乙酸乙酯(7L/kg)萃取。合并的有機層用水(5.25L/kg)洗滌，通過蒸餾(p^130毫巴，50。C)除去70%體積。向蒸餾殘余物中加入乙腈(7.82L/kg)，將懸浮液加熱直到達(dá)到完全溶解(70。C)。然后歷時7小時將反應(yīng)混合物冷卻到0。C，并在0。C攪拌至少1小時。然后過濾收集反應(yīng)產(chǎn)物(士)-環(huán)己基-(5-二曱基氨基曱基-碌、唑-2-基)-苯基-曱醇，用冷乙腈(1.65L/kg)洗滌3次。使用該方法實現(xiàn)的收率在60-70%范圍內(nèi)，實現(xiàn)的純度為〉97。/。峰面積(HPLC)和>97%w/w(NMR)。通過手性SMB色語法在ChiralpakAD柱上從該外消旋混合物中分離(R)-環(huán)己基-(5-二曱基氨基甲基-碌、唑-2-基)-苯基-曱醇(使用乙腈:異丙醇:二乙基曱基胺(90:10:0.1)作為洗脫劑)。2在WO2007/017669(中間體4)中描述了(5-二曱基氨基曱基-噁唑-2-基)-苯基-曱酮的制備。制備m用于制備[3]的一般實驗條件與用于制備[2]的一般實驗條件相同使(R)-環(huán)己基-(5-二曱基氨基曱基噁唑-2-基)-苯基-甲醇(1當(dāng)量)和1-(2-溴-乙氧基曱基)-4-氯-苯(2當(dāng)量)于2-丙醇(5倍體積)中的混合物經(jīng)歷如下溫度程序歷時1小時加熱至70。C(內(nèi)部溫度)，在70°C攪拌26小時，然后歷時30分鐘冷卻至20°C。通過HPLC^f企查轉(zhuǎn)化情況。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干(在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，40-50。C的浴溫和10-15巴的壓力)，將殘余物溶解在二氯曱烷(8.9倍體積)中。歷時至少10分鐘向溶液中加入1,5-萘二磺酸二鈉鹽(l當(dāng)量)于水(17.7倍體積)中的溶液。將所得混合物用二氯曱烷(8.9倍體積)稀釋，并繼續(xù)在室溫攪拌l小時。關(guān)掉攪拌器，使乳狀液沉降，然后分離。在室溫歷時至少60分鐘的一段時間向有機層中加入tBME(17.7倍體積)和2-丙醇(2.86倍體積)的混合物。將形成的懸浮液在室溫攪拌10至60分鐘，然后過濾。濾餅用tBME(3.46倍體積)洗滌2次并干燥(在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上在40-50。C浴溫和在5-10毫巴)直到得到^2w/w%的干燥損失(LOD)。將物質(zhì)懸浮在乙腈(22.9倍體積)中，并使懸浮液經(jīng)歷如下溫度程序歷時至少30分鐘的一段時間加熱至回流。在回流溫度攪拌60至70分鐘，然后冷卻至70。C(內(nèi)部溫度)，在70。C攪拌16至24小時，并最后歷時1小時冷卻至20。C。將懸浮液過濾，濾餅用乙腈(4.61倍體積)洗滌。將物質(zhì)干燥(在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上在40-50。C浴溫和在5-10毫巴)直到得到LODS1w/w%。通過該制備使用25.0克(11)-環(huán)己基-(5-二曱基氨基曱基碌.唑-2-基)-苯基-曱醇得到的收率為38.7g,78%。通過該制備使用129.9克(R)-環(huán)己基-(5-二曱基氨基曱基碌、唑-2-基)-苯基-曱醇得到的收率為203.6g,79%。HPLC和NMR顯示了對應(yīng)于半-鹽(陽離子/陰離子2:1比例)的譜圖。半—萘4，5-二磺酸[2-(4-氯-千氧基)-乙基-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-。惡唑-5-基甲基-二曱基-銨的鹽形式A的固體狀態(tài)分析根據(jù)制備[2]制備的'鹽形式A，按照如下方式測試。設(shè)備細(xì)節(jié)〇XRPD-0-0構(gòu)造的PANalyticalCubiXPRO機器，在2。至40。20的掃描范圍內(nèi)，100-秒暴露/0.02°增量。通過在45kV和40mA操作的銅制長-細(xì)聚焦管(long-finefocustube)產(chǎn)生X-射線。銅X-射線的波長為1.5418A。將數(shù)據(jù)收集到零背景支持器(zerobackgroundholder)上，其上放置2mg化合物。所述支持器由單晶硅制成，已經(jīng)沿非衍射平面對其進行切割并然后在光學(xué)平的面漆(opticallyflatfinish)上進行拋光。入射在該表面上的X-射線被Bragg消散(extinction)4氐消。〇DSC熱分析圖是使用TAQ1000差示掃描量熱計(具有鋁盤和經(jīng)穿孔的蓋子(piercedlid))測量的。樣品重量在0.5至5mg之間變化。所述方法在氮氣流(50ml/min)中進行，研究的溫度以10。C/分鐘的恒定溫度增加速率從25。C增加至300°C。〇TGA熱分析圖是使用TAQ500熱重量分析儀(具有鉑盤)測量的。樣品重量在1至5mg之間變化。所述方法是在氮氣流(60ml/min)中進行的，研24究的溫度以10。C/分鐘的恒定溫度增加速率從25。C增加至200。C。OGVS分布圖是使用動態(tài)蒸汽吸收(DynamicVapourSorption)DVS-1設(shè)備測量的。將約l-5mg的固體樣品放置在玻璃容器上，在混合循環(huán)步驟方法(40至90至0至90至0%相對濕度(RH)，步長為10%RH)中在25。C記錄一羊品重量。發(fā)現(xiàn)通過DSC確定的形式A的熔化溫度為233。C(起始)(士3°C)。在熔化前通過TGA觀察到的重量損失非常低(從0.0%-0.5%)。GVS確定給出在80%RH(士0.3。/。)小于0.5。/。(。/。w/w)的重量增加。'鹽形式A，的XRPD譜呈現(xiàn)在圖1中。在50mm噴射粉碎機中將'鹽形式A，微粉化，噴射器壓力為5巴，粉碎機壓力為1.5-2巴，結(jié)果(90%收率)。通過具有干粉進料器的Malvern激光衍射確定的經(jīng)微粉化的物質(zhì)的粒徑為d(O,l)0,77pm:d(0,5),1,45p:d(0，9):2,65iam。對經(jīng)微粉化的'鹽形式A，的解聚集性質(zhì)的研究性評價顯示了在相對濕度范圍內(nèi)(0-75%RH)出色的細(xì)顆粒部分(FineParticleFraction)(FPF>60%)?！?-"-氯-芐氣基)-乙基l-2-f(RV環(huán)己基-羥基-苯基-甲基)-碌、唑-5-基甲基卜二曱基-銨的生物活性通過毒蕈堿性受體放射性配體結(jié)合測定確定萘二磺酸鹽化合物的抑制作用。在閃爍親近測定(SPA)形式中利用[3H]-N-甲基莨菪堿([3H]-NMS)和表達(dá)人毒蕈堿性受體(M2或M3)的細(xì)胞膜(涂覆在SPA珠上)進行放射性配體結(jié)合研究。將經(jīng)涂覆的SPA珠在96-孔板中在具有[3H]-NMS和M3拮抗劑的HEPES緩沖液中培養(yǎng)16小時。然后使用WallacMicrobeta閃爍計數(shù)器對放射性配體結(jié)合進行計數(shù)。[2-(4-氯-千氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-。惡唑-5-基曱基]-二甲基-銨表現(xiàn)出的M3結(jié)合pIC5o為9.8。權(quán)利要求1.一種鹽，其為萘二磺酸[2-(4-氯-芐氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-甲基)-噁唑-5-基甲基]-二甲基-銨。2.權(quán)利要求1所述的鹽，其是半-萘-l,5-二磺酸[2-(4-氯-千氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-曱基)-噁唑-5-基甲基]-二曱基-銨。3.權(quán)利要求2所述的鹽，所述鹽顯示至少如下特征X-射線粉末衍射峰,以。20表達(dá)(1)5.3，10.5,15.8和16.5，或(2)5.3,10.5,15.8,16.5，18.6和19.4，或(3)5.3,10.5,15.8，16.5，18.6，19.4，19.7和20.3，或(4)5.3,10.5，15.8，16.5,17.8，18.6,19.4,19.7,20.4和21.7。4.權(quán)利要求3所述的鹽，所述鹽的X-射線粉末衍射圖與圖1所顯示的X-射線粉末衍射圖基本相同。5.權(quán)利要求1至4任一項所述的鹽，所述鹽為無水形式的。6.—種藥物組合物，其包含權(quán)利要求1至5任一項所述的鹽和可藥用助劑、稀釋劑或載體。7.權(quán)利要求1至5任一項所述的鹽，其用于治療。8.權(quán)利要求1至5任一項所述的鹽在制備用于治療慢性阻塞性肺病的藥物中的用途。全文摘要本發(fā)明披露了萘二磺酸[2-(4-氯-芐氧基)-乙基]-[2-((R)-環(huán)己基-羥基-苯基-甲基)-噁唑-5-基甲基]-二甲基-銨，含有該化合物的藥物組合物及其在治療中的用途。文檔編號C07D263/12GK101636390SQ200880004522公開日2010年1月27日申請日期2008年2月6日優(yōu)先權(quán)日2007年2月7日發(fā)明者巴巴拉·G·阿維塔比爾,戴維·奧沙利文,理查德·J·布爾申請人:阿金塔探索有限公司;阿斯利康(瑞典)有限公司