專利名稱：一種喹啉酮生物堿衍生物及其制備方法與應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種從海洋內生真菌的菌體中提取分離的喹啉酮生物堿衍生物2-吡咯基-3-羧基-4-喹啉酮及其制備方法和作為微生物農藥殺蟲劑的應用。
背景技術：
自從1929年從真菌中制備出青霉素以來，真菌的代謝產物已成為藥物的豐 富來源，絕大多數臨床應用的抗生素都來源于真菌和細菌。真菌的代謝產物還 有其他的藥用價值，如抗腫瘤，治療心血管疾病，酶抑制劑等。由于海洋環(huán)境 的特殊性和微生物在生態(tài)系統的功能，海洋微生物已發(fā)展出獨特的代謝方式， 也提供了陸生微生物無法提供的代謝產物，人們對從海洋微生物中尋找新的特 效藥物及微生物農藥寄于極大希望。然而到目前為止，尚未見到由海洋真菌獲 得有藥用價值的微生物農藥殺蟲劑。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于提供一種來源于海洋真菌的2-吡咯基-3-羧基-4-喹啉酮 及其制備方法與作為微生物農藥的應用，它能滿足現有技術的上述需求。
一種喹啉酮生物堿衍生物，其特征在于分子式為C14H1()N203，結 構式為
上述喹啉酮生物堿衍生物的制備方法，其特征在于先在菌種培養(yǎng)基中對海 洋真菌進行菌種培養(yǎng)，再在發(fā)酵培養(yǎng)基中發(fā)酵培養(yǎng)，將所得發(fā)酵液過濾，得到 菌體，將所得菌體用有機溶劑提??；提取液濃縮后迸行色譜分離，將所得洗脫 液濃縮，得黃色粉末，即為喹啉酮生物堿衍生物。
上述的喹啉酮生物堿衍生物在制備微生物農藥殺蟲劑中的應用。 本發(fā)明的喹啉酮生物堿衍生物具有很強的殺死棉蚜、小菜蛾和煙芽夜蛾的作用，可用作微生物農藥殺蟲劑，并且原料可以進行大規(guī)模生產，應用前景廣 闊。
具體實施例方式
制備本發(fā)明的化合物時，采取下述各步驟
(1) 先在菌種培養(yǎng)基中對海洋真菌(i^m'"7/iww sp. ZZF32#)進行菌種培養(yǎng)，所 用的培養(yǎng)基含有葡萄糖1.0% (重量百分數，下同)、酵母膏0.1%、蛋白胨0.2%、 瓊脂1.0%、氯化鈉0.3%，其余為水。使用時將其制成試管斜面，上述真菌菌株 在30'C下培養(yǎng)5天。
所述的菌種培養(yǎng)基含有葡萄糖0.1%-5.0%、酵母膏0.01%-1%、蛋白胨 0.01%-1%、瓊脂0.1%-3.0%、氯化鈉0.05%-5%，其余為水。培養(yǎng)溫度為15-35°C， 培養(yǎng)時間為3-10天。
(2) 上述培養(yǎng)所得的真菌菌種進行發(fā)酵培養(yǎng)，所用的發(fā)酵培養(yǎng)基含有葡萄糖 1.0%、酵母膏0.1%、蛋白胨0.2%、氯化鈉0.3%，其余為水。真菌菌株于28'C 培養(yǎng)30天。
所述的發(fā)酵培養(yǎng)基含有葡萄糖0.1%-5.0%、酵母膏0.01%-1%、蛋白胨 0.01°/。-1%、氯化鈉0.05%-5%，其余為水。培養(yǎng)溫度為15-35°C，培養(yǎng)時間為7-40 天。
(3) 化合物2-吡咯基-3-羧基-4-喹啉酮的提取分離
將前一步驟所得發(fā)酵液過濾，得到菌體；菌體用有機溶劑甲醇提取5次， 將所得提取液合并濃縮后，進行柱層析或薄層色譜分離，將洗脫液濃縮得黃色 粉末，即為2-吡咯基-3-羧基-4-喹啉酮。
所述的有機溶劑甲醇可改用正丁醇或氯仿或乙醇或乙酸乙酯。
所得化合物的波譜數據
2-吡咯基-3-羧基-4-喹啉酮a yellow amorphous powder; mp 350-352 。C; UV (CH3OH) ;imax (log s) 214.5 (3.00), 312.5 (1.82), 353.0 (1.80) nm; IR (KBr) vwax 3292， 3113, 1626, 1569， 1524， 1500, 1471， 1442, 1396， 1353, 1132， 867， 777, 754
4cm—1; 'H畫R (DMSO-d6, 500 MHz) 3 16.13 (1H, s, 3-COOH), 12.33 (1H， s, l隱NH), 11.80 (1H, s, l，-NH), 8.23 (1H, dd， /= 8.0, 1.5 Hz， H-5), 7.86 (1H, dd, / = 8.0， 1.5 Hz, H-8), 7.81 (1H, ddd, 8.0, 8.0, 1.5 Hz, H-7), 7.51 (1H， ddd, 8.0, 8.0, 1.5 Hz， H-6)， 7.14 (1H, m, H-3，)， 6.82 (1H, m, H-5，)， 6.28 (1H, m, H-4，)； 13C NMR (DMSO-d6， 125 MHz) 3 178.4 (C， C-4), 166.2 (C, 3-COOH), 147.6 (C, C-2), 138.8 (C, C-9), 133.7 (CH, C陽7)， 125.3 (CH, C-6), 124.9 (CH, C-5)， 123.6 (C, C-2，)， 123.0 (CH， C-3，)， 122.8 (C, C-10), 119.1 (CH, C-8), 113.7 (CH, C-5，), 108.8 (CH， C-4，)， 106.3 (C, C-3); EIMS (pos.)附/z 254 [M]+， 236, 210， 179， 154, 127; HREIMS 254.0681 (calcd for C14H10N2O3, 254.0691). 本實施例制得的2-吡咯基-3-羧基-4-喹啉酮的結構式為
本發(fā)明的化合物在制備微生物農藥殺蟲劑中的應用 本發(fā)明的化合物的殺蟲活性試驗
殺蟲活性實驗平行測試三次，測試的病害蟲分別為棉蚜蟲(go^w 〃)、 小菜蛾幼蟲(尸/w"〃a xy/oW)和煙芽夜蛾幼蟲(//e//oA" vz>"ce"s)。三種測試 樣品用水溶解后，測試時均用水稀釋為1000ppm，將各樣品分別加入到96孔板 中，各幼蟲均培養(yǎng)5-9天。將本發(fā)明的2-吡咯基-3-羧基-4-喹啉酮用水稀釋成 1000ppm的濃度，分別向上述孔板加入0.5ml，測定結果表明，對棉蚜蟲的致死 率均為100%,對小菜蛾幼蟲和煙芽夜蛾幼蟲也顯示強的致死活性。
實驗表明，本發(fā)明的2-吡咯基-3-羧基-4-喹啉酮對棉蚜蟲、小菜蛾幼蟲和煙 芽夜蛾幼蟲具有明顯的致死活性，因此可作為微生物農藥殺蟲劑，并且原料可 以進行大規(guī)模生產，應用前景廣闊。
權利要求
1.一種喹啉酮生物堿衍生物，其特征在于分子式為C14H10N2O3，結構式為
2. 權利要求1所述的喹啉酮生物堿衍生物的制備方法，其特征在于先在菌種培養(yǎng)基中 對海洋真菌進行菌種培養(yǎng)，再在發(fā)酵培養(yǎng)基中發(fā)酵培養(yǎng)，將所得發(fā)酵液過濾，得到菌體，將所得菌體用有機溶劑提??；提取液濃縮后進行色譜分離，將所得洗脫液濃縮，得黃色粉末，即為喹啉酮生物堿衍生物。
3. 如權利要求2所述的制備方法，其特征在于所述的菌種培養(yǎng)基含有葡萄糖 0.1%-5.0%、酵母膏0.01%-1%、蛋白胨0.01%-1%、瓊脂0.1%-3.0%、氯化鈉 0.05%-5%，其余為水。
4. 如權利要求2所述的制備方法，其特征在于所述的發(fā)酵培養(yǎng)基含有葡萄糖 0.1%-5.0%、酵母膏0.01°/。-1%、蛋白胨0.01%-1%、氯化鈉0.05%-5%，其余為水。
5. 權利要求1所述的喹啉酮生物堿衍生物在制備微生物農藥殺蟲劑中的應用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種喹啉酮生物堿衍生物及其制備方法與應用，制備時先在菌種培養(yǎng)基中對海洋真菌進行菌種培養(yǎng)，再在發(fā)酵培養(yǎng)基中發(fā)酵培養(yǎng)，將所得發(fā)酵液過濾，得到菌體，將所得菌體用有機溶劑提??；提取液濃縮后進行色譜分離，將所得洗脫液濃縮，得黃色粉末，即為喹啉酮生物堿衍生物。本發(fā)明的化合物具有很強的殺死棉蚜、小菜蛾和煙芽夜蛾的作用，可用作微生物農藥殺蟲劑，并且原料可以進行大規(guī)模生產，應用前景廣闊。
文檔編號C07D401/04GK101643468SQ20091001832
公開日2010年2月10日 申請日期2009年8月25日 優(yōu)先權日2009年8月25日
發(fā)明者佘志剛, 周世寧, 林永成, 王長云, 邵長倫, 顧玉誠 申請人:中國海洋大學