專利名稱：天然黃藤素結(jié)晶物及其大孔吸附樹脂制備方法
天然黃藤素結(jié)晶物及其大孔吸附樹脂制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥有效部位提取技術(shù)領(lǐng)域。更具體地，本發(fā)明涉及 一種黃藤素結(jié)晶物，還涉及釆用大孔吸附樹脂法制備所述黃藤素結(jié)晶物的 方法。背景技術(shù)：
黃藤又名土黃連、大黃藤，為防己科植物黃藤的根和莖。性寒，味甘 苦。黃藤生物堿是從黃藤中提取的一種生物堿，黃藤的根和莖含掌葉防己 堿、藥根堿、小檗堿，另含黃藤素甲、黃藤素乙、黃藤內(nèi)酯及甾醇，具有 清熱解毒、消炎抑菌等作用。其中黃藤素廣泛用于婦科炎癥、腸炎、呼吸 道及泌尿道感染、外科感染、眼結(jié)膜炎等醫(yī)藥領(lǐng)域。
大孔吸附樹脂是一類不含離子交換基團(tuán)的交聯(lián)聚合物，理化性質(zhì)穩(wěn)定， 不溶于酸、堿及有機(jī)溶媒，對(duì)有機(jī)物有濃縮、分離作用且不受無(wú)機(jī)鹽類、 強(qiáng)離子及低分子化合物的干擾。大孔吸附樹脂通過(guò)物理吸附有選擇地吸附 有機(jī)物質(zhì)達(dá)到分離提純的目的。根據(jù)樹脂的表面性質(zhì)，可分為非極性、中 極性和極性三類。
目前，中藥提取物的分離純化方法大體上可分為三類溶劑萃取法， 超臨界流體萃取法，柱層析法。釆用的有機(jī)溶劑萃取法獲得含黃藤生物堿 的提取物的較多，但都需要使用多種易燃易爆的有機(jī)溶劑，對(duì)工業(yè)設(shè)備要 求高，操作過(guò)程復(fù)雜，產(chǎn)品收率不高，廢液廢氣污染環(huán)境嚴(yán)重等不足之處。 超臨界流體萃取法的不足之處是儀器設(shè)備成本高，能源消耗嚴(yán)重。柱層析
法的主要缺點(diǎn)是硅膠不能再生，生產(chǎn)成本高。因此，依然還需要一種提取 安全、無(wú)污染、操作成本低廉、回收率高的中藥提取物分離純化方法，為 此本發(fā)明人經(jīng)過(guò)大量試驗(yàn)研究，終于完成了本發(fā)明。
發(fā)明內(nèi)容
[要解決的技術(shù)問題l本發(fā)明的目的是提供一種黃藤素結(jié)晶物。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種釆用大孔吸附樹脂法制備所述黃藤素 結(jié)晶物的方法。 [技術(shù)方案
本發(fā)明是通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。
本發(fā)明涉及一種釆用大孔吸附樹脂法制備天然黃藤素結(jié)晶的方法。該
方法的步驟如下
(1) 取干黃藤根或莖粉末，使用有機(jī)溶劑以所述有機(jī)溶劑與所述黃藤根 或莖粉末的重量比8-10在室溫下提取1.5-2.5小時(shí)，重復(fù)提取2-3次，合并 提取液，然后進(jìn)行減壓濃縮，回收有機(jī)溶劑，得到濃縮物；
(2) 步驟(1)得到的濃縮物以所述濃縮物與所述乙醇水溶液的重量比1: 2-4使用10%-20%(V/V)乙醇水溶液進(jìn)行溶解，然后與大孔吸附樹脂進(jìn)行 混合，所述吸附樹脂的干重量是干黃藤根或莖重量的8-10倍，然后加入為 所述乙醇水溶液體積10倍的水，攪拌2-3h后裝到所述的大孔吸附樹脂柱上， 用水沖洗至洗出液無(wú)色后，再用有機(jī)溶劑洗脫，所述有機(jī)溶劑的體積為2-4 倍柱體積，其流速為0.5-1倍柱體積/h，得到的洗脫液進(jìn)行減壓濃縮，回收 有機(jī)溶劑，得到呈棕色油狀的黃藤生物堿提取物；
(3) 將步驟(2)得到的黃藤生物堿提取物以所述提取物與所述乙醇水溶 液的重量比l: 2-4使用90%-98% ( V/V )乙醇水溶液溶解，然后與所述的 大孔吸附樹脂混合，所述的吸附樹脂的干重量是所述黃藤生物堿提取物重 量的8-10倍，然后加入為所述乙醇水溶液體積IO倍的水，攪拌2-3h后加 入到所述的大孔吸附樹脂柱上，用水沖洗至洗出液為無(wú)色后，先用非極性 有機(jī)溶劑洗脫，再用極性有機(jī)溶劑洗脫，所述極性有機(jī)溶劑的體積為2-4 倍柱體積，其流速為0.5-1倍柱體積/h,收集極性有機(jī)溶劑洗脫液；
(4) 將步驟(3)得到的極性有機(jī)溶劑洗脫液進(jìn)行減壓濃縮，回收有機(jī)溶 劑，得到的濃縮物用重結(jié)晶有機(jī)溶劑溶解，在溫度25-6(TC振蕩15-25min， 然后靜置結(jié)晶，得到的結(jié)晶在重結(jié)晶有機(jī)溶劑中進(jìn)行重結(jié)晶，得到呈小葉 片狀的黃藤素生物堿結(jié)晶產(chǎn)物。
根據(jù)本發(fā)明的一種優(yōu)選實(shí)施方案，在步驟(1)與(2)中所述的有機(jī)溶劑是一種或多種選自乙醇、甲醇、丙酮或乙酸乙酯的有機(jī)溶劑。
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實(shí)施方案，在步驟(2)中所述的大孔吸附樹脂 是HPD系列大孔吸附樹脂100或300型號(hào)或其極性相近的大孔吸附樹脂。
根據(jù)本發(fā)明的另 一種優(yōu)選實(shí)施方案，在步驟(3)中所述的非極性有機(jī)溶 劑是一種或多種選自石油醚、乙醚或正己烷的非極性有機(jī)溶劑。
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實(shí)施方案，在步驟(3)中所述的大孔吸附樹脂 是HPD系列大孔吸附樹脂500或600型號(hào)或其極性相近的大孔吸附樹脂。
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實(shí)施方案，所述的減壓濃縮是在溫度30-5(TC 與真空度0.1-0.5MPa條件下進(jìn)行的。
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實(shí)施方案，步驟(3)中作為洗脫液的所述極性 溶劑是濃度大于95% (V/V)的乙醇、甲醇、丙酮或乙酸乙酯。
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實(shí)施方案，所述的重結(jié)晶有機(jī)溶劑是一種或 多種選自石油醚、乙醚或正己烷的溶劑。
本發(fā)明涉及釆用上述制備方法得到的黃藤素結(jié)晶產(chǎn)物，其特征在于該 產(chǎn)物含有81%以上黃藤素甲和黃藤素乙。
下面將更詳細(xì)地描述本發(fā)明。
本發(fā)明采用如下技術(shù)方案制備黃藤素結(jié)晶取干黃藤根或莖，粉碎， 用有機(jī)溶劑提取2-3次，合并提取液并減壓濃縮，得到的濃縮物用乙醇溶解， 然后與吸附樹脂混合，再加入水，在攪拌后加到大孔吸附樹脂上，先用水 沖洗再用極性有機(jī)溶劑洗脫，洗脫液進(jìn)行減壓濃縮，得到黃藤生物堿提取 物。該提取物再用乙醇水溶液溶解，然后與吸附樹脂混合，再加入水，在 攪拌后加到大孔吸附樹脂上，再用大量水沖洗，然后先用非極性有機(jī)溶劑、 再用極性有機(jī)溶劑進(jìn)行洗脫。洗脫液進(jìn)行減壓濃縮，得到的濃縮物用有機(jī) 溶劑溶解后結(jié)晶兩次，得到期望產(chǎn)物黃藤素結(jié)晶。
具體地，本發(fā)明黃藤素結(jié)晶物的制備步驟如下
(l)取干黃藤根或莖粉末，使用有機(jī)溶劑以所述有機(jī)溶劑與所述黃藤根 或莖粉末的重量比8-10在室溫下提取1.5-2.5小時(shí)，重復(fù)提取2-3次，合并 提取液，然后進(jìn)行減壓濃縮，回收有機(jī)溶劑，得到濃縮物。
黃藤根或莖在加工處理前需要進(jìn)行干燥處理， 一般地在干燥箱中在溫度5(TC-75"C下進(jìn)行干燥2-3小時(shí)。所述的干燥箱是通常中藥材加工使用的 干燥設(shè)備。黃藤根或莖在經(jīng)過(guò)干燥處理后的含水量一般低于1.0重量％。
干燥后的黃藤根或莖再使用在中藥材加工領(lǐng)域中通常使用的粉碎設(shè)備 進(jìn)行粉碎，粉碎黃藤根或莖的粒度一般是20-200目。當(dāng)然，黃藤根或莖的 粒度不是很關(guān)鍵的，超過(guò)這個(gè)粒度范圍的黃藤根或莖也可以使用，因此， 這些粒度范圍沒有超出本發(fā)明的保護(hù)范圍。
在本發(fā)明中，有機(jī)溶劑應(yīng)該理解是一種能夠?qū)ⅫS藤生物堿從其黃藤根 或莖中提取出來(lái)的有機(jī)溶劑，這些有機(jī)溶劑是一種易揮發(fā)的，其殘留物還 不會(huì)對(duì)煙草制品產(chǎn)生不良后果的有機(jī)溶劑。
在本發(fā)明中，所述的有機(jī)溶劑是一種選自乙醇、甲醇、丙酮或乙酸乙 酯的有機(jī)溶劑。在本發(fā)明中，所述的乙醇、甲醇一般是乙醇水溶液、甲醇 水溶液。
優(yōu)選地，所述的有機(jī)溶劑是乙醇水溶液或丙酮。 更優(yōu)選地，所述的有機(jī)溶劑是乙醇水溶液。
在本發(fā)明中，所述的有機(jī)溶劑濃度是50。/。(V/V)以上，它的加入量是 干黃藤根或莖粉末重量的8-10倍。
所述的有機(jī)溶劑在提取步驟完成后需要進(jìn)行回收，通常釆用本技術(shù)領(lǐng) 域的技術(shù)人員熟知的蒸餾法進(jìn)行回收。
(2)步驟(1)得到的濃縮物以所述濃縮物與所述乙醇水溶液的重量比1: 2-4使用10%-20%(V/V)乙醇水溶液進(jìn)行溶解，然后與大孔吸附樹脂進(jìn)行 混合，所述吸附樹脂的干重量是干黃藤根或莖重量的8-10，然后加入為所 述乙醇水溶液體積IO倍的水，攪拌2-3h后裝到所述的大孔吸附樹脂柱上， 用水沖洗至洗出液無(wú)色后，再用有機(jī)溶劑洗脫，所述有機(jī)溶劑的體積為2-4 倍柱體積，其流速為0.5-1倍柱體積/h，得到的洗脫液進(jìn)行減壓濃縮，回收 有機(jī)溶劑，得到呈棕色油狀的黃藤生物堿提取物。釆用HPLC法測(cè)得在該 黃藤生物堿提取物中的黃藤素甲、黃藤素乙的總含量不低于33%。
在本發(fā)明中，大孔吸附樹脂是一種新型非離子型有機(jī)高分子聚合物吸 附劑。已廣泛用于中草藥有效成分的分離和提純過(guò)程。它是以苯乙烯和丙 烯酸酯為單體，以二乙烯苯為交聯(lián)劑，甲苯、二甲苯為致孔劑，它們相互交聯(lián)聚合形成了多孔骨架結(jié)構(gòu)。這種樹脂通過(guò)它本身與被吸附的分子之間 的范德華力和氫鍵作用而具有吸附性，因其網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)和高比表面積而具有 選擇地吸附有機(jī)物質(zhì)的能力，因此使用這種樹脂能夠?qū)崿F(xiàn)黃藤生物堿提取 物的分離與純化的目的。
在本發(fā)明中，所述的大孔吸附樹脂為HPD系列大孔吸附樹脂100或300 型號(hào)或其它極性相近的大孔吸附樹脂。該HPD系列大孔吸附樹脂例如是由 滄州寶恩化工有限公司以商品名HPD系列大孔吸附樹脂銷售的產(chǎn)品。其它 極性相近大孔吸附樹脂例如是由上海華震科技有限公司以商品名HZ系列 大孔吸附樹脂銷售的產(chǎn)品。
所述的大孔吸附樹脂的粒度是60-16目，優(yōu)選地50-30,更優(yōu)選地40-30。 所述的大孔吸附樹脂預(yù)處理是將樹脂置于容器中用自來(lái)水洗2-3次，每 次水的用量為樹脂體積的1-1.5倍；再將樹脂轉(zhuǎn)移至柱內(nèi)，用乙醇洗至l份 乙醇于三份水中不產(chǎn)生白色渾濁后再用水洗凈樹脂中的乙醇即可。經(jīng)反復(fù) 使用后，吸附樹脂顏色變深，吸附效果下降時(shí)，可用1 mol/LNaOH(或HC1) 洗滌或浸泡適當(dāng)時(shí)間，至樹脂接近原顏色為宜，繼用蒸餾水洗至中性即可 再用。
所述的大孔吸附樹脂柱在吸附后先用大量水沖洗直至洗出液無(wú)色，這 樣，可以更加充分、徹底地將大孔吸附樹脂柱吸附的糖類、粘液汁等水溶 性大極性雜質(zhì)洗脫掉，然后再用極性有機(jī)溶劑洗脫。
在本發(fā)明中，所述的極性有機(jī)溶劑是一種選自乙醇、甲醇、丙酮或乙 酸乙酯的溶劑。在本發(fā)明中，所述的乙醇、甲醇一般是乙醇水溶液、甲醇 水溶液。
優(yōu)選地，所述的極性有機(jī)溶劑是乙醇或甲醇水溶液。 所述的極性有機(jī)溶劑的濃度是85。/。(V/V)以上，其體積是樹脂柱體積
的2-4倍。進(jìn)行洗脫的條件是將洗脫液緩慢加入吸附柱中，調(diào)節(jié)流速至0.5-1
倍柱體積/h。
(3)將步驟(2)得到的黃藤生物堿提取物以所述提取物與所述乙醇水溶 液的重量比l: 2-4使用90%-98% ( V/V )乙醇水溶液溶解，然后與所述的 大孔吸附樹脂混合，所述的吸附樹脂的千重量是所述黃藤生物堿提取物重量的8-10倍，然后加入為所述乙醇水溶液體積IO倍的水，攪拌2-3h后加 入到所述的大孔吸附樹脂柱上，用水沖洗至洗出液為無(wú)色后，先用非極性 有機(jī)溶劑洗脫，再用極性有機(jī)溶劑洗脫，所述極性有機(jī)溶劑的體積為2-4 倍柱體積，其流速為0.5-1倍柱體積/h,收集極性有機(jī)溶劑洗脫液；
該步驟中所述的大孔吸附樹脂是HPD系列的大孔吸附樹脂500或600 型號(hào)或其它極性相當(dāng)?shù)拇罂孜綐渲?。該HPD系列大孔吸附樹脂例如是由 由滄州寶恩化工有限公司以商品名HPD系列大孔吸附樹脂銷售的產(chǎn)品。其 它極性相近大孔吸附樹脂例如是由上海華震科技有限公司以商品名HZ系 列大孔吸附樹脂銷售的產(chǎn)品。
所述的大孔吸附樹脂的粒度是60-16目，優(yōu)選地50-30,更優(yōu)選地40-30。 所述的大孔吸附樹脂預(yù)處理是將樹脂置于容器中用自來(lái)水洗2-3次，每 次水的用量為樹脂體積的1-1.5倍；再將樹脂轉(zhuǎn)移至柱內(nèi)，用乙醇洗至l份 乙醇于三份水中不產(chǎn)生白色渾濁后再用水洗凈樹脂中的乙醇即可。經(jīng)反復(fù) 使用后，吸附樹脂顏色變深，吸附效果下降時(shí)，可用1 mol/LNaOH(或HC1) 洗滌或浸泡適當(dāng)時(shí)間，至樹脂接近原顏色為宜，繼用蒸僧水洗至中性即可 再用。
在該步驟中，所述的非極性有機(jī)溶劑是一種或多種選自石油醚、正己
烷、環(huán)己烷的溶劑。
優(yōu)選地，所述的非極性有機(jī)溶劑是石油醚。 所述的極性有機(jī)溶劑是一種選自乙醇、甲醇、丙酮或乙酸乙酯的溶劑。
在本發(fā)明中，所述的乙醇、甲醇一般是乙醇水溶液、甲醇水溶液。 優(yōu)選地，所述的極性有機(jī)溶劑是乙醇或甲醇水溶液。 該乙醇水溶液、甲醇水溶液的濃度是95% (V/V)以上。 在本發(fā)明中，所述的洗脫液體積是柱體積的2-4倍，進(jìn)行洗脫的條件
是將洗脫液緩慢加入吸附柱中，調(diào)節(jié)流速至0.5-1倍柱體積/h。
(4)將上述步驟(3)得到的極性有機(jī)溶劑洗脫液進(jìn)行減壓濃縮，回收有機(jī)
溶劑，得到的濃縮物用重結(jié)晶有機(jī)溶劑溶解，在溫度25-6(TC振蕩15-25min,
然后靜置結(jié)晶，得到的結(jié)晶在重結(jié)晶有機(jī)溶劑中進(jìn)行重結(jié)晶，得到呈小葉
片狀的黃藤素生物堿結(jié)晶產(chǎn)物。在本發(fā)明中，所述的重結(jié)晶有機(jī)溶劑是一種或多種選自石油醚、乙醚 或正己烷的溶劑，優(yōu)選地石油醚或乙醚，更優(yōu)選地石油醚。
在本發(fā)明中，所述的減壓濃縮是在溫度30-5(TC與真空度0.1-0.5MPa
的條件下進(jìn)行的。
所述減壓濃縮使用的設(shè)備是由上海魯伊工貿(mào)有限公司以商品名ZX98-1 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀銷售的產(chǎn)品。
得到的呈小葉片狀的黃藤素生物堿結(jié)晶產(chǎn)物釆用HPLC法(高效液相色 譜法)進(jìn)行了分析，其結(jié)果表明該結(jié)晶產(chǎn)物含有總計(jì)81%以上黃藤素甲和黃 藤素乙。
在本發(fā)明中，所述的HPLC測(cè)定法是在該分析技術(shù)通常實(shí)施步驟與條 件經(jīng)過(guò)適當(dāng)調(diào)整，完全符合本發(fā)明測(cè)定要求的測(cè)定方法。 [有益效果
本發(fā)明制備的含黃藤生物堿提取物中有效成分含量較高，黃藤素甲、 黃藤素乙的含量可達(dá)33%以上。生產(chǎn)出的黃藤素結(jié)晶色雪白、純度高，其 中黃藤素甲、黃藤素乙總含量為81%以上。
由于選用大孔吸附樹脂，其對(duì)黃藤生物堿的吸附選擇性良好，吸附快， 解吸也快，吸附容量較大；物理化學(xué)穩(wěn)定性高，機(jī)械強(qiáng)度好，再生容易； 操作十分簡(jiǎn)便，步驟少，成本低廉，提取率達(dá)95%以上，溶劑皆可回收利 用，對(duì)環(huán)境無(wú)污染，特別適用于大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)。具體實(shí)施方式

下面通過(guò)實(shí)施例將更詳細(xì)地說(shuō)明本發(fā)明，而不是對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的 實(shí)施例1
稱取廣東黃藤根干燥粉末200g,在溫度3(TC并不斷攪拌下用丙酮提取 3次，每次800ml，每次lh。然后進(jìn)行過(guò)濾，合并濾液，濃縮回收丙酮。得 到的濃縮物用30ml 10Q/。乙醇(V/V)溶解后，與干燥重量1600g的HPD100 樹脂混合，再加入400ml水，恒速(30rpm)攪拌2h。然后用1000ml水沖 洗，流速為400ml/h,然后用300ml 85%(V/V)乙醇沖洗,流速75ml/h。得 到的乙醇洗脫液進(jìn)行濃縮，得到含黃藤生物堿提取物1.86g,收率0.93%,HPLC法測(cè)得提取物中黃藤素甲、黃藤素乙總含量為38.25%。
稱取上述含黃藤生物堿提取物3.00g,用6ml 95。/。(V/V)乙醇水溶液溶解 后，與干燥重量為30g的HPD600樹脂混合，再加入100ml水，攪拌2h后 上柱。用500ml水沖洗直到洗出液為無(wú)色后，再用300ml石油醚洗脫，流 速為75ml/h。然后用300ml95。/。(V/V)乙醇繼續(xù)洗脫，流速為75ml/h。減壓 濃縮乙醇洗脫液回收溶劑，得到的濃縮物用石油醚溶解，在5(TC下振蕩 25min,然后靜置結(jié)晶，得到的結(jié)晶再次重結(jié)晶，得到雪白色小葉片狀黃藤 素結(jié)晶0.91g。黃藤生物堿回收率82.5%。 HPLC法測(cè)得結(jié)晶中含黃藤素甲 69.21%,黃藤素乙28.45%, 二者總含量為81.66%。 實(shí)施例2
稱取黃藤根或莖干燥粉末200g,在6(TC并不斷攪拌下用50。/。(V/V)乙 醇提取2次，每次1200ml,每次lh。然后進(jìn)行過(guò)濾，合并濾液，濃縮回收 乙醇。得到的濃縮物用40ml 15。/o乙醇(V/V)溶解后，與干燥重量2000 g的 HPD300樹脂混合，再加入400ml水，恒速(30rpm )撹拌2h,然后用1000ml 水沖洗，流速為楊ml/h，再用270ml95。/o(V/V)乙醇沖洗,流速為120ml/h。 得到的乙醇洗脫液進(jìn)行濃縮，得到含黃藤生物堿提取物L(fēng)78g,收率0.89%, HPLC法測(cè)得提取物中黃藤素甲、黃藤素乙總含量為38.64%。
稱取上述含黃藤生物堿提取物3.00g,用6ml 95%(V/V)乙醇水溶液溶 解后，與干燥重量為25g的HPD500樹脂混合，再加入200ml水，攪拌3h 后上柱。用500ml水沖洗直到洗出液為無(wú)色后，再用環(huán)己烷250ml洗脫， 流速為60ml/h。然后用300ml甲醇繼續(xù)洗脫，流速為100ml/h。減壓濃縮甲 醇洗脫液回收溶劑，得到的濃縮物用正己烷溶解，在4(TC下振蕩25min, 然后靜置結(jié)晶，得到的結(jié)晶再次重結(jié)晶，得到雪白色小葉片狀黃藤素結(jié)晶 0.90g。黃藤生物堿回收率81.3%。 HPLC法測(cè)得結(jié)晶中含黃藤素甲69.19%， 黃藤素乙28.45%, 二者總含量為83.64%。
實(shí)施例3
稱取黃藤根或莖干燥粉末200g，在6(TC并不斷攪拌下，用80%乙醇提
取3次，每次乙醇的量是5倍重量，每次lh。然后進(jìn)行過(guò)濾，合并濾液，
濃縮回收乙醇。得到濃縮物用40ml20。/。乙醇(V/V)溶解后，與干燥重量1800g的HPD300樹脂混合。然后加入400ml水，恒速(30rpm )攪拌3h，再用 1000ml水沖洗，流速為400ml/h。然后用120ml甲醇沖洗，流速為50ml/h。 得到的甲醇洗脫液進(jìn)行濃縮，得到含黃藤生物堿提取物1.88g,收率0.94%。 HPLC法測(cè)得提取物中黃藤素甲、黃藤素乙總含量為37.35%。
稱取上述含黃藤生物堿提取物3.00g,用6ml95。/。(V/V)乙醇水溶液溶 解后，與千燥重量25g的HPD600樹脂混合，再加入200ml水，攪拌2h后 上柱。用500ml水沖洗直到洗出液為無(wú)色后，再用石油醚環(huán)己烷=1: 1(V/V) 的300ml混合溶劑洗脫，流速為75ml/h。然后用300ml丙酮繼續(xù)洗脫，流 速為75ml/h。減壓濃縮丙酮洗脫液回收溶劑，得到的濃縮物用石油醚乙 醚=1: 1(V/V)混合溶劑溶解，在30。C下振蕩25min,然后靜置結(jié)晶，得到 的結(jié)晶再次重結(jié)晶，得到雪白色小葉片狀黃藤素結(jié)晶0.92g。黃藤生物堿回 收率82.0%。 HPLC法測(cè)得結(jié)晶中含黃藤素甲69.21%,黃藤素乙28.52%, 二者總含量為85.73%。
權(quán)利要求
1、一種采用大孔吸附樹脂法制備天然黃藤素結(jié)晶物的方法，其特征在于該方法步驟如下(1)取干黃藤根或莖粉末，使用有機(jī)溶劑以所述有機(jī)溶劑與所述黃藤根或莖粉末的重量比8-10在室溫下提取1.5-2.5小時(shí)，重復(fù)提取2-3次，合并提取液，然后進(jìn)行減壓濃縮，回收有機(jī)溶劑，得到濃縮物；(2)步驟(1)得到的濃縮物以所述濃縮物與所述乙醇水溶液的重量比1∶2-4使用10％-20％(V/V)乙醇水溶液進(jìn)行溶解，然后與大孔吸附樹脂進(jìn)行混合，所述吸附樹脂的干重量是干黃藤根或莖重量的8-10倍，然后加入為所述乙醇水溶液體積10倍的水，攪拌2-3h后裝到所述的大孔吸附樹脂柱上，用水沖洗至洗出液無(wú)色后，再用有機(jī)溶劑洗脫，所述有機(jī)溶劑的體積為2-4倍柱體積，其流速為0.5-1倍柱體積/h，得到的洗脫液進(jìn)行減壓濃縮，回收有機(jī)溶劑，得到呈棕色油狀的黃藤生物堿提取物；(3)將步驟(2)得到的黃藤生物堿提取物以所述提取物與所述乙醇水溶液的重量比1∶2-4使用90-98％(V/V)乙醇水溶液溶解，然后與所述的大孔吸附樹脂混合，所述的吸附樹脂的干重量是所述黃藤生物堿提取物重量的8-10倍，然后加入為所述乙醇水溶液體積10倍的水，攪拌2-3h后加入到所述的大孔吸附樹脂柱上，用水沖洗至洗出液為無(wú)色后，先用非極性有機(jī)溶劑洗脫，再用極性有機(jī)溶劑洗脫，所述極性有機(jī)溶劑的體積為2-4倍柱體積，其流速為0.5-1倍柱體積/h，收集極性有機(jī)溶劑洗脫液；(4)將步驟(3)得到的極性有機(jī)溶劑洗脫液進(jìn)行減壓濃縮，回收有機(jī)溶劑，得到的濃縮物用重結(jié)晶有機(jī)溶劑溶解，在溫度25-60℃振蕩15-25min，然后靜置結(jié)晶，得到的結(jié)晶在重結(jié)晶有機(jī)溶劑中進(jìn)行重結(jié)晶，得到呈小葉片狀的黃藤素生物堿結(jié)晶產(chǎn)物。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于在步驟(1)與(2)中所述的有 機(jī)溶劑是一種或多種選自乙醇、甲醇、丙酮或乙酸乙酯的有機(jī)溶劑。
3、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于在步驟(2)中所述的大孔吸附樹脂是HPD系列大孔吸附樹脂100或300型號(hào)或其極性相近的大孔吸附樹脂。
4、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于在步驟(3)中所述的非極性 有機(jī)溶劑是一種或多種選自石油醚、乙醚或正己烷的非極性有機(jī)溶劑。
5、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于在步驟(3)中所述的大孔吸 附樹脂是HPD系列大孔吸附樹脂500或600型號(hào)或其極性相近的大孔吸附
6、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于所述的減壓濃縮是在溫度 30-50°C與真空度0.1-0.5MPa條件下進(jìn)行的。
7、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于步驟(3)中作為洗脫液的所 述極性溶劑是濃度大于95% (V/V)的乙醇、甲醇、丙酮或乙酸乙酯。
8、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于所述的重結(jié)晶有機(jī)溶劑是 一種或多種選自石油醚、乙醚或正己烷的溶劑。
9、 根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的制備方法得到的黃藤素 結(jié)晶物，其特征在于該產(chǎn)物含有81%以上黃藤素甲和黃藤素乙。
全文摘要
本發(fā)明涉及從黃藤根或莖中提取的黃藤素結(jié)晶及其制備方法。本發(fā)明方法在于用有機(jī)溶劑提取出黃藤根或莖中的生物堿成分，提取液進(jìn)行減壓濃縮，濃縮物經(jīng)大孔吸附樹脂分離純化得到含黃藤素的生物堿提取物，提取物繼續(xù)經(jīng)大孔吸附樹脂純化后重結(jié)晶，得到所述的黃藤素結(jié)晶。所述的黃藤素結(jié)晶中的黃藤素甲、黃藤素乙的總含量可達(dá)81％以上。本發(fā)明提供了高效、簡(jiǎn)便的制備方法，并適用于大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07D455/03GK101619062SQ20091005428
公開日2010年1月6日 申請(qǐng)日期2009年7月2日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月2日
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