專利名稱：二取代吡唑并苯并二氮雜*類的制作方法
二取代吡唑并苯并二氮雜萆類本申請是中國專利申請200580035121. 9的分案申請。本發(fā)明涉及抑制血管生成和/或激酶活性的二取代吡唑并苯并二氮雜萆類。這些 化合物可以用于治療癌性腫瘤，特別是乳腺、結(jié)腸、肺和前列腺癌。血管生成為新血管在組織或器官中的生成。在正常的生理條件下，人和動物僅在 非常特定的、有限的情況下進(jìn)行血管生成。例如，通常在傷口愈合、胎兒和胚胎發(fā)育以及黃 體、子宮內(nèi)膜和胎盤的形成中觀察到血管生成。毛細(xì)血管包含內(nèi)皮細(xì)胞和周細(xì)胞，它們由基膜包圍。血管生成始于由內(nèi)皮細(xì)胞和 白細(xì)胞分泌的酶對基膜的侵蝕。然后，內(nèi)襯在血管內(nèi)腔的內(nèi)皮細(xì)胞通過基膜伸出。血管源 性的刺激物誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞遷移通過侵蝕的基膜。遷移細(xì)胞在母體血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行有絲分 裂和增殖的地方之外形成“芽”。內(nèi)皮芽相互合并，生成毛細(xì)血管袢，從而產(chǎn)生新血管。不受控制的血管生成是癌癥的標(biāo)志。在1971年，Dr. Judah Folkman提出，腫 瘤生長取決于血管生成。參見例如，F(xiàn)olkman, New England Journalof Medicine, 285 1182-86(1971)。根據(jù)Dr. Folkman，在不生長另外的血管以滋養(yǎng)腫瘤的情況下，腫瘤僅能生 長到一定的尺寸。在其最簡單的表述中，該提議指出“一旦發(fā)生了腫瘤‘成活’，腫瘤細(xì)胞 群的每次增加必須由在腫瘤上會聚的新毛細(xì)管的增加來進(jìn)行”。目前理解的腫瘤‘成活’是 指腫瘤生長的血管前相，其中占幾個立方毫米體積并且不超過幾百萬個細(xì)胞的腫瘤細(xì)胞群 可以存活于現(xiàn)存的宿主微脈管上。腫瘤體積超過此相的擴(kuò)大需要誘導(dǎo)新的毛細(xì)血管。例 如，小鼠中的早期血管前相中的肺部微轉(zhuǎn)移除了在組織切片上進(jìn)行高倍顯微術(shù)之外是不能 檢測的。早在1945 年，Algire，等，J. Nat. Cancer Inst.，6 :73_85 (1945)，表明植入小鼠 中的皮下透明腔中的腫瘤的生長速率在新血管形成前是慢而線性的，而在新血管形成后是 快而接近指數(shù)的。1966年，Dr. Folkman報道在其中血管不增殖的離體灌住器官中的腫瘤 生長被限制到l_2mm3，但當(dāng)它們移植入小鼠中并且成為新血管形成時，快速膨脹到此體積 的> 1000 倍。參見例如，F(xiàn)olkman，等，Anals of Surgery, 164 491-502 (1966) 在無血管角膜中的腫瘤生長緩慢地并且以線性速率生長，但在新血管生長后轉(zhuǎn)為 指數(shù)生長。參見例如，Gimbrone，Jr.，等，J. Nat. Cancer Inst. ,52 :421_27 (1974))。懸浮于 兔眼前房的水性液體中的腫瘤保持活的、無血管的，并且尺寸被限制到< 1mm3。一旦將它們 植入虹膜血管床，它們開始新血管生長并且快速生長，在兩周內(nèi)達(dá)到其原始體積的16，000 倍。參見例如，Gimbrone, Jr.等，J. Exp. Med.，136 :261_76。當(dāng)將腫瘤植入小雞胚胎絨毛尿囊膜上時，在> 72小時的無血管相的過程中它們 緩慢地生長，但是不超過0. 93+0. 29mm的平均直徑。在新血管生長開始后的24小時內(nèi)， 發(fā)生快速腫瘤膨脹，并且到第7天，血管化的腫瘤達(dá)到8. 0+2. 5mm的平均直徑。參見例如， Knighton, British,J.Cancer,35 :347_56(1977))。轉(zhuǎn)移灶在兔肝中的血管管型顯示轉(zhuǎn)移灶尺寸的不均勻性，但對于在存在血管化時 的尺寸顯示相對均勻的截止點。腫瘤通常無血管最高到Imm的直徑，但超過該直徑被新血 管化。參見例如，Lien，等，Surgery, 68 =334-40(1970)
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在胰腺小孔的β細(xì)胞中發(fā)育癌的轉(zhuǎn)基因小鼠中，血管前增殖性小孔被限制到尺 寸< 1mm。在6-7周齡，4-10%的小孔成為新血管生長，并且從這些小孔，達(dá)到超過血管前小 孔體積1，000倍的大血管化腫瘤。參見例如，F(xiàn)olkman,等，Nature, 339 58-61 (1989)。
已經(jīng)表明，可以通過抑制血管生成而不是抑制腫瘤細(xì)胞本身的增殖，來治療腫瘤。 例如，Kim等，Nature，362 =841044(1993)表明抗VEGF (血管內(nèi)皮生長因子)的特異性抗 體降低了微血管密度并且導(dǎo)致依賴作為它們血管生成的單一介體(在裸小鼠中)的VEGF 的三種人腫瘤生長的“顯著或驚人的”抑制。該抗體不抑制腫瘤細(xì)胞在體外的生長。此外， Hori，等，Cancer，Resp. 51 6180-84 (1991)表明抗_bFGF單克隆抗體導(dǎo)致依賴于作為其血 管生成的唯一介體的bFGF分泌的小鼠腫瘤生長的70%抑制。該抗體不抑制腫瘤細(xì)胞在體 外的生長。還表明bFGF的腹膜內(nèi)注射通過刺激毛細(xì)內(nèi)皮細(xì)胞在腫瘤中的生長而增強了原 始腫瘤及其轉(zhuǎn)移灶的生長。缺乏bFGF受體和bFGF的腫瘤細(xì)胞本身不是對于體外的腫瘤細(xì) 胞的分裂素。參見例如,Gross，等，Proc. Am. Assoc. Cancer Res. ,31 :79 (1990)。特異的血管 生成抑制劑(AGM-1470)抑制體內(nèi)的腫瘤生長和轉(zhuǎn)移，但比抑制在體外的腫瘤細(xì)胞增殖的 活性低得多。與它抑制腫瘤細(xì)胞增殖相比，它以41ogs低濃度半最大地(half-maximally) 抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖。參見例如，Ingber，等，Nature, 48 =555-57(1990)。還有腫瘤生長與血管生成相關(guān)的間接臨床證據(jù)。例如，轉(zhuǎn)移到玻璃體的人視網(wǎng)膜 母細(xì)胞瘤發(fā)育成被限制到< Imm3的無血管螺旋樣體，盡管事實在于它們是能存活的并且結(jié) 合有3H-胸苷(在從摘除的眼中除去并且在體外分析時)。卵巢癌轉(zhuǎn)移至腹膜作為微小的 無血管白種子(l-3mm3)。這些植入物很少長得更大，直到它們中的一個或多個成為新血管 生成的。在乳腺癌(參見例如，Weidner，等，New Eng. J. ofMed. ,324 1-8 (1991) ；Weidner, 等，J. Nat. Cancer Inst.，84 1875-87 (1992))和在前列腺癌(Weidner，等，Am. J. Pathol.， 143(2) 401-09(1993))中的新血管生成強度與未來的轉(zhuǎn)移灶危險高度相關(guān)。在新血管生長前，來自人皮膚黑素瘤的轉(zhuǎn)移灶稀少。新血管生長開始導(dǎo)致病變厚 度增大并且轉(zhuǎn)移危險增加。參見例如，Srivastava，等，Am. J. Pathol.，133 :419_23 (1988))。 在膀胱癌中，血管源性蛋白，bFGF的尿水平是比細(xì)胞學(xué)更敏感的狀態(tài)和重大疾病指標(biāo)。參 見例如，Nguyen，等，J. Nat. Cancer, Inst. ,85 :241_42 (1993)。血管生成已經(jīng)與大量不同類型的癌癥相關(guān)，所述的癌癥包括實體瘤和血液運載的 腫瘤。與血管生成相關(guān)的實體瘤包括但不限于橫紋肌肉瘤，視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤，尤因肉瘤，成 神經(jīng)細(xì)胞瘤和骨肉瘤。血管生成與乳腺癌、前列腺癌、肺癌和結(jié)腸癌相關(guān)。血管生成還與血 液運載的腫瘤相關(guān)，所述的血液運載的腫瘤如白血病，淋巴瘤，多發(fā)性骨髓瘤以及各種急性 或慢性骨髓腫瘤疾病中的任何一種，其中發(fā)生白血細(xì)胞不受限制的增殖，通常伴隨有貧血、 削弱的血液凝固以及淋巴結(jié)、肝和脾的增大。還認(rèn)為，血管生成在骨髓異常中起一定的作 用，所述的異常引起白血病、淋巴瘤和多發(fā)性骨髓瘤。童年期最常見的血管源性疾病之一是血管瘤。血管瘤是由新形成血管構(gòu)成的腫 瘤。在大多數(shù)情況下，腫瘤是良性的，并且在沒有干預(yù)的條件下退化。在更嚴(yán)酷的情況下， 腫瘤發(fā)展到大海綿狀和浸入的形式，并且產(chǎn)生臨床并發(fā)癥。全身形式的血管瘤，多發(fā)性血管 瘤，死亡率高?？怪委煹难芰龃嬖?，其不能由目前使用的療法進(jìn)行治療。因此，清楚的是，血管生成在癌癥的轉(zhuǎn)移中起主要作用。如果能夠抑制或消除血管 源性活性，那么盡管腫瘤存在也將不生長。在疾病狀態(tài)下，防止血管生成可以公開由新微血管系統(tǒng)的侵入而導(dǎo)致的損傷。針對血管源性過程的控制的療法可能導(dǎo)致這些疾病的去除或 減輕。正在研究作為治療藥劑的抑制血管生成的幾個類別的化合物。這些是例如沙利度 胺和沙利度胺類似物(USP 6，235，756 (The Children's MedicalCenter Corporation)； 6,420,414(The Children' s Medical Center Corporation) ；6，476，052 (Celgene Corporation))；喹啉酮類(USP 6, 774, 237 (ChironCorporation))；絲氨酸蛋白酶和血管 舒緩素(USP 6，544，947 (EntreMedInc.)) ；VEGF 類似物和拮抗劑(USP 6，783，953 (Janssen Pharmaceutica N. V. ) ；6, 777, 534(Children' s Medical Center Corporation))；結(jié)合 Angiostatin 或 Endostatin 的肽或蛋白(USP 6, 201, 104 (EntreMed Inc.))；組織蛋白 酶 V-樣多肽(USP 6, 783, 969 (Nuvelo Inc.))；其它抗血管形成肽(USP 6，774，211 (Abbott Laboratories) ；4-苯胺基-喹唑啉類(W0 2002/092578,W02002/092577,WO 2002/016352, WO 2001/032651, WO 2000/047212 (Astrazeneca))；酞嗪類(W0 2004/033042 (Novartis), WO 2003/022282(Novartis), WO 2002/012227(Astrazeneca), WO 2001/010859 (Bayer), W098/35958 (Novartis))；異噻唑類(W0 99/62890 (Pf izer))；以及 二氫吲哚酮類 (indolinones)(W0 2001/037820, WO 2000/008202, WO 98/50356, W096/40116 (Sugen Inc.)) ο幾篇評論報道了血管生成抑制劑作為治療藥劑的應(yīng)用。這些文章包括Mazitschek 等，Current Opinion in Chemical Biology, 8 (4) 432-441 (2004) ；Underiner,等， Current Medicinal Chemistry,11(6) :731_745(2004) ；Manley, Biochimica et Biophysica Acta,1697(1-2) 17-27(2004) ；Alessi, Biochimica et Biophysica Acta, 1654(1) 39-49(2004) ；Tortora, φ, Current Pharmaceutical Design, 10(1) 11-26(2004)。不受控制的細(xì)胞增殖是癌癥的另一個標(biāo)志。癌性腫瘤細(xì)胞典型地具有對直接或間 接調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂周期的基因的某些形式的破壞。細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(CDKs)是對于細(xì)胞周期控制關(guān)鍵的酶。參見例如， Coleman 等，Annual Reports in Medicinal Chemistry，32 :171_179(1997)。這些酶 調(diào)節(jié)細(xì)胞周期不同期之間的過渡，例如G1期至S期的進(jìn)程(活性DNA合成的周期)，或 G2期至M期的進(jìn)程，其中發(fā)生了主動的有絲分裂和細(xì)胞分裂。參見例如，Science，274: 1643-1677 (6December 1996)上關(guān)于該主題的文章。⑶Ks由催化⑶K亞基和調(diào)節(jié)細(xì)胞周期蛋白亞基組成。細(xì)胞周期蛋白亞基是⑶K 活性的關(guān)鍵調(diào)節(jié)物，因為每個CDK與細(xì)胞周期蛋白的特定亞型相互作用如細(xì)胞周期蛋白 A(CDK1，CDK2)。不同的激酶/細(xì)胞周期蛋白對通過細(xì)胞周期的特定時期調(diào)節(jié)進(jìn)程。參見例 如，Coleman,見上文。在癌性細(xì)胞不受控制的生長過程中已涉及到細(xì)胞周期控制體系的異常。參見例 如，Kamb，Trends in Genetics, 11 136-140 (1995)；以及 Coleman，見上文。另外，在許多 腫瘤中已觀察到編碼CDK’ s或它們的調(diào)節(jié)物的基因的改變或基因的表達(dá)的改變。參見例 如，Webster，Exp. Opin. Invest. Drugs, 7 :865_887 (1998)，以及其中引用的參考文獻(xiàn)。因此， 有大量的參考文獻(xiàn)證實抑制CDKs的化合物用作抗增殖性治療藥劑。參見例如，美國專利 5，621，082 ；EP 0 666 270 A2 ；WO 97/16447 ；以及上文中Coleman中引用的參考文獻(xiàn)，特別是第10篇參考文獻(xiàn)。因此，需要鑒別CDK激酶活性的化學(xué)抑制劑。特別需要鑒定小分子化合物來治療一種或多種類型的腫瘤，所述小分子化合物易 于合成，并且有效抑制一種或多種CDK或CDK/細(xì)胞周期蛋白復(fù)合物。已經(jīng)研究或正在研究作為治療藥劑的抑制細(xì)胞周期蛋白激酶的幾個 種類的化合物。有例如Flavopiridol的類似物(USP 5，733，920 (Mitotix) ；WO 98/1344(Bristol-Myers Squibb) ；WO 97/42949(Bristol-MeyersSquibb))；嘌呤衍生 物(W0 98/05335 (CV Therapeutics) ；WO 97/20842 (CNRS))；吖啶酮類和苯并噻二嗪 類(TO 98/49146A2 (US Dept. ofHealthand Human Services))；以及 antisense(USP 5,821, 234(StanfordUniversity))。此外，在論述CNS-作用的化合物的文章中公開了 一些N，N-取代的二氫吡唑并苯并二氮雜罩類。參見，M.A. Berghot，Arch. Pharm. 325 285-289(1992)。仍然需要治療一種或多種類型腫瘤、特別是通過調(diào)節(jié)血管生成和/或⑶Ks來治療 的易于合成的小分子化合物。本發(fā)明涉及新型的7，8_ 二取代的吡唑并苯并二氮雜萆類和這些化合物的藥用鹽。 本發(fā)明的化合物是血管生成和/或激酶如細(xì)胞周期依賴性激酶(CDKs)，特別是CDK2的抑 制劑。這些化合物和它們的藥用鹽以及所述化合物的酯是可以用于治療或控制細(xì)胞增殖疾 病，特別是癌癥的抗增殖藥劑。本發(fā)明還涉及含有這樣化合物的藥物組合物以及用于治療 和/或預(yù)防癌癥的方法，特別是在治療或控制實體瘤方面。本發(fā)明的化合物可以特別用于 治療或控制乳腺、結(jié)腸、肺和前列腺腫瘤。本發(fā)明還涉及可以用于制備7，8_ 二取代的吡唑 并苯并二氮雜罩類化合物如下面所述的式IV的那些化合物的新型中間體。具體而言，本發(fā)明提供式IV的化合物 其中R1 為烷基，烷氧基，鹵素，C00H，COO 烷基，CN，C(O)N(R6)2 或(OCH2CH2)nOCH3 ；R2為烷基，鹵素，被鹵素取代的烷基，0H，烷氧基，被鹵素取代的烷氧基，苯基，
N(R6)2,(OCH2CH2)nOCH3, 0 (CH2)mNR7R8 或
N為任選被烷基或 C (0) OR6 取
代的6元雜環(huán)；或者R1和R2 —起形成5元雜環(huán)；R3為氫或烷基；R4為氫，鹵素，CN, NO2,烷基或烷氧基；每個R6獨立地為氫或烷基；
R7和R8各自獨立地為氫，烷基或烷氧基烷基；或R7和R8與它們連接的氮原子一起 形成任選被烷基取代的6元雜環(huán)；每個η獨立地為1，2或3 ；以及m 為 2，3 或 4;或其藥用鹽。本發(fā)明還涉及藥物組合物，其含有任何一種或多種上述的化合物或其藥用鹽，以 及藥用載體。制備這種組合物方法也是本發(fā)明的一部分。本發(fā)明還涉及使用本發(fā)明化合物的方法。本發(fā)明的化合物是血管生成和/或激酶 的抑制劑。因此，本發(fā)明涉及抑制血管生成的方法。本發(fā)明還涉及抑制激酶的方法。此外， 本發(fā)明涉及治療癌癥，特別是乳腺、結(jié)腸、肺和前列腺癌的方法，該方法包括對患有癌癥的 患者給藥治療有效量的式IV的化合物或其藥用鹽。在一個方面，本發(fā)明提供7，8- 二取代-5- (2-氯苯基)_1，2_ 二氫_3_甲基-吡唑 并[3，4-b] [1,4]苯并二氮雜草類化合物及含有它們的藥物組合物。在第二方面，本發(fā)明提 供用于合成本發(fā)明的化合物的方法以及在這種合成中使用的有價值中間體。本發(fā)明的化合物是血管生成的抑制劑。因此，在第三方面，本發(fā)明提供抑制血管生 成的方法，該方法包括給藥治療有效量的本發(fā)明化合物。本發(fā)明的化合物還是激酶如CDK2 的抑制劑。因此，在第四方面，本發(fā)明提供抑制激酶活性的方法，該方法包括給藥治療有效 量的本發(fā)明化合物。在第五方面，本發(fā)明提供用于治療或控制癌癥的方法，該方法包括給藥 治療有效量的本發(fā)明化合物。具體而言，本發(fā)明提供用于治療乳腺、前列腺、結(jié)腸和肺癌的 方法。如此處中所用的，下列術(shù)語具有下列定義。不管所述的術(shù)語單獨或組合出現(xiàn)，都采 用此處使用的下列定義。必須注意，如在說明書和后附權(quán)利要求書中所用的，單數(shù)形式“一 個”、“一種”和“所述的”包括復(fù)數(shù)形式，除非上下文另外清楚地指明?！巴榛笔侵负?至6個，優(yōu)選1至4個碳原子的直鏈或支鏈的、取代或未取代的 飽和脂族烴基。典型的烷基包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、叔丁基、2-丁基、戊基、己基寸。“烷氧基”是指直鏈或支鏈的烴氧基，其中"烷基"部分為如上定義的烷基，并且 該基團(tuán)通過氧原子連接到分子上。典型的烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁 氧基、2_ 丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、正己氧基等。“鹵素”是指氟、氯、溴或碘。優(yōu)選的鹵素為氟和氯?！半s原子”是指選自N，0和S中的原子?！?元雜環(huán)”是指6元非芳族的、部分或全部飽和的烴基，其含有1至3個雜原子， 雜原子中的至少一個為氮。6元雜環(huán)的實例包括哌啶、哌嗪、嗎啉、硫代嗎啉等?！?元或6元雜環(huán)”是指含有1至3個雜原子的5或6元環(huán)。碳環(huán)的實例包括戊基 和己基等。雜環(huán)的實例包括二噁烷、二氧戊環(huán)、吡咯烷、咪唑烷等"IC5tl”是指抑制50%特定測量活性所需要的特定的吡唑并苯并二氮雜蕈的濃度。 [IC50尤其可以如下面的實施例A中所述進(jìn)行測量]"IC9tl”指抑制90%特定測量活性所需要的特定吡唑并苯并二氮雜萆的濃度?！八幱谩?，例如藥用載體，賦形劑等是指對給藥具體化合物的受試者而言是藥用的、
8并且基本上無毒的。“藥用鹽”是指常規(guī)酸式加成鹽或堿式加成鹽，其保留了式IV的化合物的生物效力 和性能，并從合適的無毒的有機(jī)或無機(jī)酸或有機(jī)或無機(jī)堿來形成。酸式加成鹽的實例包括 那些衍生自無機(jī)酸如鹽酸，氫溴酸，氫碘酸，硫酸，氨基磺酸，磷酸和硝酸的酸式加成鹽，和 那些衍生自有機(jī)酸例如對甲苯磺酸，水楊酸，甲磺酸，草酸，琥珀酸，檸檬酸，蘋果酸，乳酸， 富馬酸等的酸式加成鹽。堿式加成鹽的實例包括那些衍生自銨、鉀、鈉和季銨氫氧化物的堿 式加成鹽，例如四甲基銨氫氧化物?！氨交笔侵高@樣的官能團(tuán)，其為除去了一個氫的苯環(huán)。本發(fā)明的苯基可以是未取 代的或取代的，例如被烷基，烷氧基，商素，CN, N(R6)2, NO2等所取代的?！叭〈摹?，如取代的烷基，除非另外說明，是指取代可以發(fā)生在一個或多個位置， 并且在每個取代位置的取代基獨立地選自具體的選項。“治療有效量”表示至少一個式IV的化合物、或它的藥用鹽、酯或代謝物的量，其顯 著抑制腫瘤細(xì)胞，包括人腫瘤細(xì)胞系的增殖，或顯著地抑制供應(yīng)腫瘤或其轉(zhuǎn)移灶的血管的 血管生成。本發(fā)明提供式IV的化合物 其中R1 為烷基，烷氧基，鹵素，C000H，COO 烷基，CN, C(O)N(R6)2 或(OCH2CH2)nOCH3 ；R2為烷基，鹵素，被鹵素取代的烷基，0H，烷氧基，被鹵素取代的烷氧基，苯基，
N(R6)2,(OCH2CH2)nOCH3, O(CH2)mNR7R8 或
為任選被烷基或 C (0) OR6 取
代的6元雜環(huán)；或者R1和R2 —起形成5元雜環(huán)；R3為氫或烷基；R4為氫，鹵素，CN, NO2,烷基或烷氧基；每個R6獨立地為氫或烷基；R7和R8各自獨立地為氫，烷基或烷氧基烷基；或R7和R8與它們連接的氮原子一起 形成任選被烷基取代的6元雜環(huán)；每個η獨立地為1，2或3 ；以及m 為 2，3 或 4;或其藥用鹽。
在一個實施方案中，本發(fā)明提供式IV的化合物，其中R2為OCH2-C^N在此實
施方案內(nèi)，優(yōu)選的化合物包括那些其中R1為鹵素或氰基的化合物。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供式IV的化合物，其中R2為O(CH2)mNR7R815在這樣 的化合物中，R7和R8可以各自獨立地為氫，烷基或烷氧基烷基；或者R7和R8可以與它們連 接的氮原子一起形成6元雜環(huán)。例如，NR7R8可以形成嗎啉或哌嗪環(huán)。在此實施方案內(nèi)，優(yōu) 選的化合物是那些化合物，其中R7和R8與它們連接的氮原子一起形成6元雜環(huán)，并且R1為 鹵素或氰基。這種化合物的實例包括5- (2-氯苯基)-1，2- 二氫-7-氟_8_ (3- (4-嗎啉基)丙氧基))_3_甲基-吡唑并 [3，4-b][l，4]苯并二氮雜蕈;7-溴-5- (2-氯苯基)-1，2- 二氫_8_ (3- (4-嗎啉基)丙氧基))_3_甲基-吡唑并 [3，4-b][l，4]苯并二氮雜草；5- (2-氯苯基)-7-氰基-1，2- 二氫_8_ (3- (4-嗎啉基)丙氧基))_3_甲基-吡唑 并[3,4-b] [1,4]苯并二氮雜草；以及5- (2-氯苯基)-7-氰基-1，2- 二氫_8_ (2- (4-甲基哌嗪基)乙氧基)_3_甲 基-吡唑并[3,4-b] [1,4]苯并二氮雜罩。還優(yōu)選的是其中R7和R8各自獨立地為氫，烷基或烷氧基烷基并且R1為鹵素或氰 基的化合物。這樣的一種化合物的實例是5-(2_氯苯基)-7_氰基-1，2-二氫-8-(2_(2-甲氧基乙基)甲氨基)_乙氧 基)-3_甲基-吡唑并[3,4-b] [1,4]苯并二氮雜萆。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供式IV的化合物，其中R2為N(R6)2，其中每個R6 獨立地為氫或烷基。在此實施方案內(nèi)，優(yōu)選其中R1為鹵素或氰基的化合物，例如，化合物 5-(2-氯苯基)-1，2-二氫-7-氟-8-N，N-二甲氨基-3-甲基-吡唑并[3,4-b]苯并二氮 雜草。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供式IV的化合物，其中R2為鹵素，烷基或被鹵素 取代的烷基。在此實施方案內(nèi)，優(yōu)選的化合物是那些化合物，其中R1為鹵素，烷基或烷氧基。 這種化合物的實例包括5-(2_氯苯基)-1，2_ 二氫-3，7，8_三甲基-吡唑并[3,4-b] [1,4]苯并二氮雜蕈;8-氯-5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7-甲氧基_3_甲基-吡唑并[3,4-b] [1，4]苯 并二氮雜罩；5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-8-氟-7-甲氧基_3_甲基-吡唑并[3,4-b] [1，4]苯 并二氮雜萆；5-(2-氯苯基)-1，2-二氫-7-甲氧基_3_甲基_8_三氟甲基_吡唑并[3,4-b] [1， 4]苯并二氮雜蕈；以及8-氯-5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-3，7-二甲基-吡唑并[3,4-b] [1,4]苯并二氮
ο在另一個實施方案中，本發(fā)明提供式IV的化合物，其中R2為羥基，烷氧基或被鹵素取代的烷氧基。在此實施方案內(nèi)的優(yōu)選化合物是那些化合物，其中R1為烷基，氰基， NH2C(O)或O(CH2) n0CH3。這樣化合物的實例包括5-(2_氯苯基)-1，2_ 二氫-8-甲氧基_7_甲氧基乙氧基_3_甲基-吡唑并[3， 4_b][l，4]苯并二氮雜罩;5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，2-二氫-8-甲氧基_3_甲基-吡唑并[3，4_b] [1,4] 苯并二氮雜草；以及5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-3，7-二甲基-8-甲氧基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并 二氮雜萆。在此組內(nèi)的其它優(yōu)選化合物是那些化合物，其中R1為鹵素。這種化合物的實例包 括7-氯-5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-8-甲氧基_3_甲基-吡唑并[3，4_b] [1，4]苯 并二氮雜罩；7-溴-5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-8-甲氧基_3_甲基-吡唑并[3，4_b] [1，4]苯 并二氮雜草；5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7-氟-8-甲氧基_3_甲基-吡唑并[3，4_b] [1，4]苯 并二氮雜萆；5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7-氟-8-乙氧基_3_甲基-吡唑并[3，4_b] [1，4]苯 并二氮雜萆;以及5-(2-氯苯基)-1，2-二氫-7-氟-8-(1_甲基乙氧基)_3_甲基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并二氮雜萆。在此組內(nèi)的進(jìn)一步優(yōu)選化合物是那些化合物，其中R1為烷氧基。這種化合物的實 例包括5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7，8-二甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并 二氮雜萆；1，2-二氫-3，7-二甲基-8-甲氧基_5_苯基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并二氮雜 草；1，2_ 二氫-7，8-二甲氧基-5-(2-甲氧基苯基)_3_甲基-吡唑并[3，4_b] [1,4]
苯并二氮雜萆；5-(2-氯苯基)-1，2-二氫-7-甲氧基-8-(l-甲基乙氧基)_3_甲基-吡唑并[3， 4_b][l，4]苯并二氮雜萆；以及5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-8-甲氧基-7_(1_甲基乙氧基)_3_甲基-吡唑并[3， 4_b][l，4]苯并二氮雜蕈。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供式IV的化合物，其中R2為苯基。優(yōu)選的化合 物包括那些化合物，其中R1為烷氧基，例如，化合物5-(2_氯苯基)-1，2- 二氫-7-甲氧 基-3-甲基-8-苯基-吡唑并[3，4-b][l，4]苯并二氮雜萆。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供式IV的化合物，其中R2為(0CH2CH2)n0CH3。在此 實施方案內(nèi)的優(yōu)選化合物是那些化合物，其中R1為鹵素，烷氧基或氰基。這種化合物的實 例包括
5-(2_氯苯基)-1，2_ 二氫-7-甲氧基_8_甲氧基乙氧基_3_甲基-吡唑并[3， 4_b][l，4]苯并二氮雜草；5- (2-氯苯基)-1，2- 二氫-7-氟_8_甲氧基乙氧基_3_甲基-吡唑并[3，4_b] [1， 4]苯并二氮雜罩；5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，2-二氫-8-甲氧基乙氧基_3_甲基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并二氮雜罩；以及5-(2_氯苯基)-7_氰基-1，2-二氫-8-(2_(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)_3_甲 基-吡唑并[3，4-b][l，4]苯并二氮雜萆。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供式IV的化合物，其中R1和R2 —起形成二氧戊 環(huán)。這樣一種化合物的實例為5-(2-氯苯基)-8，10-二氫-7-甲基-1，3-二氧戊環(huán)并[4， 5-h]吡唑并[3,4-b] [1,4]苯并二氮雜萆。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供式IV的化合物，其中R1為鹵素。在此實施方 案內(nèi)，優(yōu)選的化合物是那些化合物，其中R2為商素；輕基；N(R6)2 ；O(CH2)mNR7R8,例如，其中
形成嗎啉環(huán)；烷氧基，例如，甲氧基或乙氧基；或O(CH2)n — CJ其中η為1或2。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供式IV的化合物，其中R1為(OCH2CH2)n0CH3。在此 實施方案內(nèi)，優(yōu)選的化合物是那些化合物，其中R2為烷氧基。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供式IV的化合物，其中R1為NH2C(O)。在此實施 方案內(nèi)，優(yōu)選的化合物是那些化合物，其中R2為烷氧基。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供式IV的化合物，其中R1為烷基。在此實施方案 內(nèi)，優(yōu)選的化合物是那些化合物，其中R2為烷氧基，鹵素，烷基或被鹵素取代的烷基。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供式IV的化合物，其中R1為烷氧基。在此實施 方案內(nèi)，優(yōu)選的化合物是那些化合物，其中R2為烷氧基；商素，例如，氯；苯基；或(OCH2CH2) n0CH3，其中η為1或2。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供式IV的化合物，其中R1為氰基。在此實施方案 內(nèi)，優(yōu)選的化合物是那些化合物，其中R2為羥基；
燒氧基；O(CH2)mNR7R8,特別是其中NR7R8形
成嗎啉環(huán)；(OCH2CH2)nOCH3 ；或O(CH2)n-C^JV其中η為1或2，并且m為2。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供式IV的化合物，其中R3為氫，即式XXII的化合 物。這種化合物的實例包括5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7-氟-8-甲氧基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并二氮雜 罩；5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-8-甲氧基_7_甲基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并二氮 雜罩；以及5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7-氰基-8-甲氧基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并二氮 雜罩。在再一個實施方案中，本發(fā)明提供如上定義的式IV的化合物，其中R4為鄰-氯；以及R1，R2和R3具有上面給出的含義。
在又一個實施方案中，本發(fā)明提供如上定義的式IV的化合物，其中R3為甲基；R4為鄰-氯；以及R1和R2具有上面給出的含義。在又一個實施方案中，本發(fā)明提供如上定義的式IV的化合物，其中R1為鹵素或-CN;R3為甲基；R4為鄰-氯；以及R2具有上面給出的含義。本發(fā)明提供用于合成二取代的吡唑并苯并二氮雜罩的方法。在實施例中提供用于 合成本發(fā)明化合物的適宜方法。通常，本發(fā)明的化合物可以根據(jù)下面提供的合成方案制備。下面的合成方案提供用于制備本發(fā)明化合物，即式IV的化合物的兩種一般方法。 方法A中，示于方案1和2中，將式I的苯并二氮雜蕈轉(zhuǎn)化為式IV的化合物。 方案1在方案1的方法中，根據(jù)本領(lǐng)域中已知的程序(W0 2000/064900 ；Scheibye, S.， 等，Bulletin des Societes Chimiques Beiges,87 :229_38(1978) ；Jesberger, Μ.,等， Synthesis, 1929-1958 (2003))，將內(nèi)酰胺I轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的硫代內(nèi)酰胺II。將硫代內(nèi)酰胺II 與N，N-二甲基乙酰胺的二甲基縮醛反應(yīng)，優(yōu)選在升高的溫度如60至130°C反應(yīng)，生成中間 體III，其通過與胼反應(yīng)，生成吡唑衍生物IV。
13 方案2在作為方案1的變體的方案2的方法中，或者通過本領(lǐng)域中已知的方法(Walser， Α.； 等，Chemistry of Heterocyclic Compounds， Chichester， United Kingdom， Vol. 50 :431_543 (1991) ；Walser, Α.； 等，Chemistry ofHeterocyclic Compounds， Chichester，United Kingdom，vol. 50 :545_629 (1991) ；Walser, Α.； 等，Chemistry of Heterocyclic Compounds， Chichester， United Kingdom， vol 50 :631_848(1991)； Walser, Α.；等，Chemistry ofHeterocyclic Compounds， Chichester， United Kingdom， vol 50 849-946(1991) ；Archer, G. A.；等，Chemical Reviews，68 :747_84 (1968); Sternbach，L. H.， 等，Journal ofOrganic Chemistry, 27 :3788_96 (1962) ；U. S. Patent No. 3，681，341)，或者通過與磷酰氯反應(yīng)，然后與甲醇鈉反應(yīng)，將內(nèi)酰胺I轉(zhuǎn)化為0-甲基醚 V。醚V與N，N-二甲基乙酰胺的二甲基縮醛反應(yīng)，形成中間體VI，其通過與胼反應(yīng)，生成吡 唑衍生物IV。制備式I化合物的方法在苯并二氮雜草文獻(xiàn)(Walser，Α.；等，Chemistry of Heterocyclic Compounds, Chichester, United Kingdom, vol. 50 :431_543 (1991)； Walser, Α.；等，Chemistry of Heterocyclic Compounds, Chichester, United Kingdom, vol. 50 545~629 (1991) ；Walser, Α.； 等，Chemistry of Heterocyclic Compounds, Chichester, United Kingdom, vol 50 631-848 (1991) ；Walser, Α. ； φ, Chemistry ofHeterocyclic Compounds, Chichester, United Kingdom, vol 50 :849_946 (1991)； Archer,G. A.；等，Chemical Reviews,68 :747_84(1968) ；Sternbach, L. H.,等，Journal of 0rganicChemistry,27 :3788_96 (1962))中是周知的。 方案3對于其中取代模式預(yù)先沒有描述的式I化合物的實例，其制備按照方案3中列出 的方法，其中根據(jù)在 Toyoda，Τ.，等，Tetrahedron Letters, 21 173-6 (1980)中所述的方 法，在路易斯酸存在下，苯胺衍生物VII與醛VIII縮合，生成氨基醇IX。式VIII的化合物是可商購的。式VIII的化合物是可商購的，或者可以由可商購的 材料通過本領(lǐng)域中已知的程序制備。式VII的化合物，除Vllgg，Vllkk，VIIii和VIIjj之 外，是可商購的。式VIIgg和VIIkk的化合物可以例如通過FR1573745的方法制備?；衔?VIIii和VIIjj可以通過下面的方法制備，其按照VIIii進(jìn)行描述。7. 34g(0. 0347mol)的 1-甲氧基-4-硝基-2-異丙氧基苯和15g的阮內(nèi)鎳在80mL的四氫呋喃-乙醇(1 1)中 的混合物在50psi氫氣氣氛下強力搖動4小時。然后，將混合物過濾通過硅藻土，并且在減 壓下濃縮，得到4. 57g的3-甲氧基-4-異丙氧基苯胺，將其直接用于下一步驟?？梢砸灶?似的方法，由2-甲氧基-4-硝基-1-異丙氧基苯制備VII jj，2-甲氧基-4-硝基-1-異丙 氧基苯可以由可商購的材料，使用Castello等，Tetrahedron Letters, 26 :2489_92 (1985) 的程序來制備。由本領(lǐng)域中已知的方法(參見例如，上述的Walser參考資料；Sugasawa，Τ.；等， Journal of Heterocyclic Chemistry, 16 (3) 445~8 (1979)；以及 Leroux，F(xiàn).，等，Journal ofOrganic Chemistry, 68 :4693_4699 (2003))，可以進(jìn)行IX至相應(yīng)的氨基酮X的氧化。通 過下面的方法用甘氨酸等價物衍生X :X與溴乙酰溴反應(yīng)，接著與氨反應(yīng)提供XII或與疊氮 化鈉反應(yīng)，接著疊氮化物進(jìn)行胺還原，提供XII，然后進(jìn)行環(huán)化，成為內(nèi)酰胺I (參見例如，上 面所述的Walser參考資料)。
15
方案4備選地，可以由方案4中列出的方法B，生成式IV的吡唑衍生物。中間體X與 氨基-氯-吡唑衍生物XIII反應(yīng)，生成中間體XIV。
Taniguchi, Τ.，等，Tetrahedron Letters, 39 =4679-4682(1998)中所述的一般方法，進(jìn)行烯丙基從XIV中的去除，其中中間 體XIV在氫化二異丁鋁和鎳催化劑存在下反應(yīng)，生成吡唑衍生物IV。由方案5和方案6中列出的方法制備氨基-氯-吡唑衍生物XIII。 方案5 方案6方案5中，乙基-2-氰基-3-乙氧基-2- 丁烯酸酯與2_丙烯基-胼反應(yīng)，生成吡唑 中間體XV?？梢杂煽缮藤彽牟牧希ㄟ^美國專利2，824，121中所述的方法制備乙基_2_氰 基-3-乙氧基-2- 丁烯酸酯。氨基酯XV通過重氮化并且在銅鹽存在下與氯化物反應(yīng)而轉(zhuǎn) 化為相應(yīng)的氯衍生物XVI。該酯在堿性條件下水解，提供吡唑酸中間體XVII。酸XVII與氯 甲酸甲酯反應(yīng)，接著與疊氮化物反應(yīng)，生成中間體羰基疊氮化物吡唑XVIII，其通過加熱，接 著后處理，提供氨基-氯-吡唑衍生物XIII。備選地，氨基-氯-吡唑衍生物XIII可以通 過烯丙基化硝基吡唑XIX (生成XX)，接著將硝基還原為氨基來制備(方案6)。在R1或R2為可以進(jìn)行進(jìn)一步轉(zhuǎn)化的官能團(tuán)時，可以得到R1和R2的另外取代。例如，在R1和R2為氟的情況下，通過在堿存在下與醇或胺反應(yīng)，可以進(jìn)行單取代。這些反應(yīng)示
于方案7、8和9。 方案7該反應(yīng)可以用來將化合物如(2-氨基-4，5-二氟苯基)_(2-氯苯基)_甲酮(Xmm) 轉(zhuǎn)化為化合物如(2-氨基-5-氟-4-甲氧基苯基)-(2_氯苯基)-甲酮(Xa)和(2-氨 基-5-氟-4-(3-(4-嗎啉基)丙氧基)苯基)-(2_氯苯基)-甲酮(Xi)。 方案 8 該反應(yīng)可以用來將化合物如5- (2-氯苯基)-7，8- 二氟-1，3_ 二氫_2H_1，4_苯并 二氮雜草-2-酮(Imm)轉(zhuǎn)化為化合物如5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫-7-氟-8-甲氧基-2H-1， 4-苯并二氮雜草-2-酮(Ia)和5- (2-氯苯基)~7~氰基-1，3- 二氫-8-甲氧基-2H-1，4-苯 并二氮雜罩-2-酮(lb)。 方案9該反應(yīng)可以用來將化合物如5-(2_氯苯基)-1，3- 二氫-7，8_ 二氟_2Η_1，4_苯 并二氮雜罩-2-硫酮(IImm)轉(zhuǎn)化為化合物如5-(2-氯苯基)-1，3-二氫-7-氟-8-甲 氧基-2Η-1，4-苯并二氮雜萆-2-硫酮(IIa)，5-(2_氯苯基)-1，3_ 二氫-7-氟-8-甲 氧基乙氧基-2Η-1，4-苯并二氮雜草-2-硫酮(IIf)，5-(2_氯苯基)-1，3_ 二氫-8-乙 氧基-7-氟-2Η-1，4-苯并二氮雜草-2-硫酮(IIg)，和5-(2_氯苯基)_1，3_ 二 氫-7-氟-8- (1-甲基乙氧基)-2Η-1，4-苯并二氮雜罩-2-硫酮(IIh)。在其中R2為甲氧基的實例中，可以將中間體脫甲基化為相應(yīng)的羥基衍生物，然后 可以將其進(jìn)一步烷基化。這示于方案10中。 方案10該反應(yīng)可以用來例如將化合物如7-溴-5-(2_氯苯基)-1，3_ 二氫-8-甲氧 基-2H-1，4-苯并二氮雜罩-2-酮(Id)轉(zhuǎn)化為化合物如7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3- 二 氫-8-(3-(4-嗎啉基)丙氧基))-2Η-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(I j)，7-溴-5-(2-氯苯 基)-1，3- 二氫-8-甲氧基乙氧基-2H-1，4-苯并二氮雜罩-2-酮(Irm)，7-溴-5- (2-氯苯 基)-1，3- 二氫-8- (2- (2-甲氧基乙氧基)乙氧基)-2H-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(Ioo)，和
7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3- 二氫-8-羥基-2H-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(Ipp)。該反應(yīng)還 可以用來將式5- (2-氯苯基)-7-氰基-1，3- 二氫-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮雜草-2-酮 (Ib)的化合物轉(zhuǎn)化為化合物如5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氫-8-(3-(4-嗎啉基)丙氧 基))-2H-1，4-苯并二氮雜草-2-酮(Ik)，5- (2-氯苯基)_7_ 氰基-1，3- 二氫-8- (2- ((2-甲 氧基乙基)甲氨基)-乙氧基)-2H-1，4-苯并二氮雜草-2-酮(Iv)，5- (2-氯苯基)~7~氰 基-1，3- 二氫-8-羥基-2H-1，4-苯并二氮雜草-2-酮(Iqq)，5_ (2_氯苯基)_7_氰基_1， 3-二氫-8-(1-叔丁氧羰基-4-哌啶基)甲氧基-2H-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(Irr)和
8-(2-氯乙氧基)-5- (2-氯苯基)-7-氰基-1，3- 二氫-2H-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(Iss)。通過本領(lǐng)域中已知的方法，例如在美國專利6，440，959中所述的那些方法，可以 將其中R1為CN或C(O)N(R6)2的式IV化合物轉(zhuǎn)化為其中R1為COOH或COO烷基的化合物。對于其中R3為H(式XXII的化合物)的那些式IV的化合物，可以根據(jù)方案11中
列出的一般方法來制備所述的化合物。 方案 11
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在共同擁有的美國專利6，440，959中，對于其中R2為H的實例，預(yù)先描述了該方 法。硫代內(nèi)酰胺II與二甲基甲酰胺二乙基乙縮醛反應(yīng)，制備中間體XXI，然后其用胼處理， 得到吡唑并苯并二氮雜萆XXII。可以在下面的實施例90至92中發(fā)現(xiàn)此反應(yīng)的具體實例。取代表 式XIV的化合物是可以用作制備式IV的化合物中的中間體的新型化合物 其中R1 為烷基，烷氧基，鹵素，C00H, COO 烷基，CN, C(O)N(R6)2 或(OCH2CH2)nOCH3 ；R2為烷基，鹵素，被鹵素取代的烷基，0H，烷氧基，被鹵素取代的烷氧基，苯基，
N(R6)2, (OCH2CH2)nOCH3, O(CH2)mNR7R8 或O
為任選被烷基或 C (0) OR6 取 代的6元雜環(huán)；或者R1和R2 —起形成5元雜環(huán)；R4為氫，鹵素，CN，NO2，烷基或烷氧基；每個R6獨立地為氫或烷基；R7和R8各自獨立地為氫，烷基或烷氧基烷基；或R7和R8與它們連接的氮原子一起形成任選被烷基取代的6元雜環(huán)；每個η獨立地為1，2或3 ；以及m為2，3或4。在一個實施方案中，本發(fā)明提供式XIV的化合物。在另一個實施方 案中，本發(fā)明提供式XIV的下列具體化合物5-(2_ 氯苯基)-1，2_ 二氫-3，7，8_ 三甲基-l-(2-丙烯基)_ 吡唑并[3，4_b] [1， 4]苯并二氮雜蕈；5-(2_氯苯基)-1，2_ 二氫-7-氟-8-甲氧基_3_甲基(2_丙烯基)-吡唑并 [3，4-b][l，4]苯并二氮雜罩；5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7，8-二甲氧基-3-甲基(2_丙烯基)-吡唑并[3， 4_b][l，4]苯并二氮雜萆；8-氯-5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7-甲氧基_3_甲基(2_丙烯基)-吡唑并 [3，4-b][l，4]苯并二氮雜萆；5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-8-甲氧基_3，7_ 二甲基(2_丙烯基)-吡唑并[3， 4_b][l，4]苯并二氮雜罩；1，2-二氫-7，8-二甲氧基-5-(2-甲氧基苯基)-3-甲基(2_丙烯基)-吡唑并 [3，4-b][l，4]苯并二氮雜罩；5-(2-氯苯基)-8，10-二氫-7-甲基-1，3-二氧戊環(huán)并[4，5_h]吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并二氮雜罩；7-氯-5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-8-甲氧基_3_甲基(2_丙烯基)-吡唑并 [3，4-b][l，4]苯并二氮雜草;5-(2_氯苯基)-1，2_ 二氫-8-氟-7-甲氧基_3_甲基(2_丙烯基)-吡唑并 [3，4-b][l，4]苯并二氮雜罩;5- (2-氯苯基)-1，2- 二氫-7-甲氧基_3_甲基(2-丙烯基)_8_三氟甲基-吡 唑并[3,4-b] [1,4]苯并二氮雜萆；5- (2-氯苯基)-1，2- 二氫-7-甲氧基_3_甲基_8_苯基(2-丙烯基)-吡唑并 [3,4-b] [1,4]苯并二氮雜草；5-(2_氯苯基)-1，2_ 二氫-7-甲氧基_8_甲氧基乙氧基_3_甲基_1-(2_丙烯 基)_吡唑并[3，4-b][l，4]苯并二氮雜罩；8-氯-5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-3，7-二甲基-1-(2-丙烯基)_ 吡唑并[3,4-b] [1,4]苯并二氮雜罩；5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7-甲氧基-8_(1_甲基乙氧基)_3_甲基_1-(2_丙烯 基)_吡唑并[3,4-b] [1,4]苯并二氮雜草；5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-8-甲氧基-7_(1_甲基乙氧基)_3_甲基_1-(2_丙烯 基)_吡唑并[3，4-b][l，4]苯并二氮雜罩；以及5-(2_氯苯基)-1，2_ 二氫-8-甲氧基_7_甲氧基乙氧基_3_甲基_1-(2_丙烯 基)_吡唑并[3,4-b] [1,4]苯并二氮雜草。本發(fā)明提供藥物組合物，其包含至少一種本發(fā)明的化合物，例如式IV的化合物或其藥用鹽，以及藥用載體。例如，可以以片劑、包衣片、錠劑、硬或軟明膠膠囊、溶液、乳劑或混懸劑形式口服 給藥本發(fā)明的藥物組合物。還可以例如以栓劑形式經(jīng)直腸或例如以注射液形式非腸道給藥 所述的組合物。本發(fā)明的藥物組合物包含一種或多種式IV的化合物和/或其藥用鹽?？梢园凑毡?領(lǐng)域中公知的方式、例如通過常規(guī)混合、包囊、溶解、制粒、乳化、包埋、制錠或凍干工藝，制 備這樣的組合物?？梢允褂弥委熒隙栊缘臒o機(jī)或有機(jī)載體配制這些藥物組合物。乳糖、玉 米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸(steric acid)或其鹽可以用作片劑、包衣片、錠劑和硬明 膠膠囊的這類載體。合適的軟明膠膠囊載體包括植物油、蠟和脂肪。根據(jù)活性物質(zhì)的性質(zhì)， 在軟明膠膠囊的情況中一般不需要載體。制備溶液和糖漿劑的適宜載體為水、多元醇類、蔗 糖、轉(zhuǎn)化糖和葡萄糖。注射用的適宜載體為水、醇類、多元醇類、甘油、植物油、磷脂類和表面 活性劑。用于栓劑的適宜載體為天然或硬化油、蠟、脂肪和半液體多元醇類。藥物組合物還可以含有防腐劑、加溶劑、穩(wěn)定劑、濕潤劑、乳化劑、甜味劑、著色劑、 調(diào)味劑、用于改變滲透壓的鹽、緩沖劑、包衣劑或抗氧化劑。它們還可以含有其它治療上有 價值的物質(zhì)，包括其它非通式IV的那些活性組分。如上所述，式IV的化合物及它們的藥用鹽，以及含有這些化合物的組合物可以用 于治療或控制細(xì)胞增殖疾病，特別是腫瘤疾病。這些化合物和含有所述化合物的制劑可以 特別用于治療或控制實體瘤，諸如乳腺、前列腺、肺和結(jié)腸腫瘤。式IV化合物的治療有效量或劑量可以在寬限內(nèi)改變，并且將被調(diào)整在每種特定 的情況下的個體需要。一般來說，在對體重約為70kg的成年人進(jìn)行口服給藥或非腸道給藥 的情況下，約IOmg至約10，OOOmg、優(yōu)選約200mg至約1，OOOmg的每日劑量應(yīng)是合適的，不 過，必要時，可以超過上限?？梢詫⒚咳談┝孔鳛閱蝿┝炕蚍謩┝拷o藥，或?qū)Ψ悄c道給藥而 言，可以將其作為連續(xù)輸注給藥。下列實施例用來幫助理解本發(fā)明并且決不是用來限制其范圍的。實施例總則在下面的實施例中，溫度以。C表示。對于質(zhì)譜數(shù)據(jù)，給出的值是MH+/Z離子 形式，其是在Micromass Platform II質(zhì)譜儀測量的、正模式電霧化中得到的。在描述一個實施例是以類似于另一個實施例的方式進(jìn)行的情況下，全部條件與在 原始實施例中的規(guī)定的那些條件相同，不同之處在于，在一些情況下，采用不同量的材料。 在提供不同量的原料的情況下，以與在原始實施例中相對于該原料的相同比例的量使用在 此實施例中采用的其它成分。制備氨基二苯甲酮中間體X (方案3) 實施例1制備(2-氨基-5-氟-4-甲氧基苯基)_ (2-氯苯基)_甲酮(Xa) 于-20至-30°C，將2. Og(0.0142摩爾)的4_氟-3-甲氧基-苯胺在20mL的二 氯甲烷中的溶液滴加至在20mL 二氯甲烷中的2. 24g(0. 0142摩爾)的二氯苯基硼烷中，接 著加入在IOmL 二氯甲烷中的3. 59g(0. 0355摩爾)的三乙胺。將混合物攪拌30分鐘；然 后，加入在30mL的二氯甲烷中的2.0g(0.0142摩爾)的2-氯苯甲醛。移除冷卻浴，并且將 混合物于室溫攪拌4小時。在快速攪拌的條件下，將IOOmL的冷水加入至反應(yīng)混合物中，接 著加入150mL的鹽水。分離二氯甲烷層，用無水硫酸鈉干燥，過濾，并且減壓下濃縮。將剩 余物(4. 5g，為褐色油)與IOmL 二乙醚和30mL的2M氫氧化鈉一起于室溫攪拌1小時。將 反應(yīng)混合物用乙酸乙酯萃取，并且將乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥，過濾，并且在減壓下濃 縮，得到3. 6g的相應(yīng)氨基醇IXaO 1 = F, R2 = OCH3, R4 = Cl)，將其直接用于下一步驟。將在上面反應(yīng)中得到的氨基醇(3. 6g)溶解于60的二氯甲烷，并且與6. 09g(0. 071 摩爾)的二氧化錳一起攪拌。在4小時后，將混合物過濾，并且在減壓下濃縮，得到4. 2g粗 的酮(2-氨基-5-氟-4-甲氧基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xa)，為褐色油。將粗酮由用乙 酸乙酯_己烷洗脫的硅膠色譜純化，得到2. 03g的(2-氨基-5-氟-4-甲氧基苯基)_ (2-氯 苯基)-甲酮(Xa)。MH+/Z = 280。實施例2制備(2-氨基-5-溴-4-甲氧基苯基)-(2-氯苯基)_甲酮(Xd) (2-氨基-5-溴-4-甲氧基苯基)-(2_氯苯基)_甲酮(Xd)是以類似于實施例1 的方式，通過使2-氯苯甲醛與0. 086摩爾的4-溴-3-甲氧基苯胺反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 340。實施例3制備(2-氨基-4，5- 二甲基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xw) (2-氨基-4，5-二甲基苯基)_ (2-氯苯基)_甲酮(Xw)是以類似于實施例1的方 式，通過使2-氯苯甲醛與0. 123摩爾的3，4- 二甲基苯胺反應(yīng)而制備的。實施例4制備(2-氨基-4，5-二甲氧基苯基)_ (2-氯苯基)_甲酮(Xx) (2-氨基-4，5_二甲氧基苯基)-(2_氯苯基)_甲酮(Xx)是以類似于實施例1的方 式，通過使2-氯苯甲醛與0.0196摩爾的3，4_ 二甲氧基苯胺反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 292。實施例5制備(2-氨基-4-氯-5-甲氧基苯基)_ (2-氯苯基)_甲酮(Xy) (2-氨基-4-氯-5-甲氧基苯基)-(2_氯苯基)_甲酮(Xy)是以類似于實施例1 的方式，通過使2-氯苯甲醛與0. 019摩爾的3-氯-4-甲氧基苯胺反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 296。實施例6制備(2-氨基-4-甲氧基-5-甲基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xz)
(2-氨基-4-甲氧基-5-甲基苯基)_ (2-氯苯基)_甲酮(Xz)是以類似于實施例1 的方式，通過使2-氯苯甲醛與0. 0226摩爾的3-甲氧基-4-甲基苯胺反應(yīng)而制備的。MH+/ Z = 276。實施例7制備(2-氨基-4，5- 二甲氧基苯基)-(2-甲氧基苯基)_甲酮(Xaa) (2-氨基-4，5-二甲氧基苯基)_(2-甲氧基苯基)-甲酮(Xaa)是以類似于實施 例1的方式，通過使2-甲氧基苯甲醛與0.0196摩爾的3，4_ 二甲氧基苯胺反應(yīng)而制備的。 MH+/Z = 288。實施例8制備(6-氨基-1，3-苯并二氧戊環(huán)-5-基)-(2_氯苯基)_甲酮(Xbb) (6-氨基-1，3-苯并二氧戊環(huán)-5-基)-(2_氯苯基)_甲酮(Xbb)是以類似于實施 例1的方式，通過使2-氯苯甲醛與0. 020摩爾的3，4_亞甲二氧基苯胺反應(yīng)而制備的。MH+/ Z = 276。實施例9制備(2-氨基-5-氯-4-甲氧基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xcc) (2-氨基-5-氯-4-甲氧基苯基)-(2_氯苯基)_甲酮(Xcc)是以類似于實施例1 的方式，通過使2-氯苯甲醛與0. 019摩爾的3-甲氧基-4-氯苯胺反應(yīng)而制備的。MH+/Z =296。實施例10制備(2-氨基-4-氟-5-甲氧基苯基)-(2-氯苯基)_甲酮(Xdd) (2-氨基-4-氟-5-甲氧基苯基)-(2_氯苯基)_甲酮(Xdd)是以類似于實施例1 的方式，通過使2-氯苯甲醛與0. 0223摩爾的3-氟-4-甲氧基苯胺反應(yīng)而制備的。MH+/Z =280。實施例11制備(2-氨基-5-甲氧基-4-三氟甲基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xee) (2-氨基-5-甲氧基-4-三氟甲基苯基)_ (2-氯苯基)_甲酮(Xee)是以類似于實 施例1的方式，通過使2-氯苯甲醛與0. 0263摩爾的4-甲氧基-3-三氟甲基苯胺反應(yīng)而制 備的。MH+/Z = 330。實施例12制備(2-氨基-5-甲氧基-4-苯基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xff) (2-氨基-5-甲氧基-4-苯基苯基)-(2_氯苯基)_甲酮(Xff)是以類似于實施 例1的方式，通過使2-氯苯甲醛與0. 0226摩爾的4-甲氧基-3-苯基苯胺反應(yīng)而制備的。 MH+/Z = 338。實施例13制備(2-氨基-5-甲氧基-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-(2_氯苯基)-甲酮(Xgg) (2-氨基-5-甲氧基-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-(2_氯苯基)-甲酮(Xgg)是 以類似于實施例1的方式，通過使2-氯苯甲醛與0. 0296摩爾的4-甲氧基-3-(2-甲氧基 乙氧基)苯胺反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 336。實施例14制備(2-氨基-4-氯-5-甲基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xhh) (2-氨基-4-氯-5-甲基苯基)-(2_氯苯基)_甲酮(Xhh)是以類似于實施例1 的方式，通過使2-氯苯甲醛與0. 0318摩爾的3-氯-4-甲基苯胺反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 280。實施例15制備(2-氨基-5-甲氧基-4-(l-甲基乙氧基)苯基)-(2_氯苯基)_甲酮(Xii) (2-氨基-5-甲氧基-4-(1-甲基乙氧基)苯基)-(2_氯苯基)_甲酮(Xii)是以 類似于實施例1的方式，通過使2-氯苯甲醛與0. 0252摩爾的3-異丙氧基-4-甲氧基苯胺 反應(yīng)而制備的。ΜΗ+/Ζ = 320。實施例16制備(2-氨基-4-甲氧基-5-(1-甲基乙氧基)苯基)-(2_氯苯基)_甲酮(Xjj) (2-氨基-4-甲氧基-5-(1-甲基乙氧基)苯基)-(2_氯苯基)-甲酮(Xjj)是以 類似于實施例1的方式，通過使2-氯苯甲醛與0. 0267摩爾的4-異丙氧基-3-甲氧基苯胺 反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 320。實施例17制備(2-氨基-4-甲氧基-5-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-(2_氯苯基)-甲酮(Xkk) (2-氨基-4-甲氧基-5- (2-甲氧基乙氧基)苯基)-(2_氯苯基)-甲酮(Xkk)是 以類似于實施例1的方式，通過使2-氯苯甲醛與0. 0242摩爾的3-甲氧基-4-(2-甲氧基 乙氧基)苯胺反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 336。實施例18制備(2-氨基-4，5- 二氟苯基)-(2-氯苯基)_甲酮(Xmm) (2-氨基-4，5_ 二氟苯基)-(2_氯苯基)_甲酮(Xmm)是以類似于實施例1的方 式，通過使2-氯苯甲醛與0. 30摩爾的3，4- 二氟苯胺反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 268。實施例19由(2-氨基-4，5-二氟苯基)_ (2-氯苯基)_甲酮(Xmm)制備(2_氨基_5_氟_4_甲 氧基苯基)-(2_氯苯基)_甲酮(Xa) 將2. Olg (0.0075摩爾)的(2_氨基_4，5_ 二氟苯基)-(2_氯苯基)-甲酮(Xmm)， 24mL的甲醇和2. OSmL的25%甲醇鈉溶液的溶液在惰性氣氛下加熱回流80分鐘。然后將混 合物冷卻，放入乙酸乙酯中，并且用鹽水洗滌兩次。將乙酸乙酯萃取物用無水硫酸鈉干燥， 過濾，并且減壓下濃縮，得到2. 04g的氨基二苯甲酮(benzopheneone) (2_氨基_5_氟_4_甲 氧基苯基)-(2_氯苯基)-甲酮(Xa)，為結(jié)晶黃色固體。MH+/Z = 280。實施例20制備(2-氨基-5-氟-4-(3-(4-嗎啉基)丙氧基)苯基)-(2_氯苯基)-甲酮(Xi)
將1.4g(0. 035摩爾)的60%氫化鈉，25mL的二噁烷，2. 68g(0. 01摩爾)的(2_氨 基-4，5-二氟苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xmm)和2. 23g (0. 016摩爾)的4-嗎啉丙醇的混 合物于室溫攪拌4小時。將混合物通過加入50mL的水而猝滅。將混合物用乙酸乙酯萃取， 并且將萃取物用水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，過濾，并且減壓下濃縮。將剩余物與己烷一起 研磨，然后從己烷_乙酸乙酯中重結(jié)晶，得到2. 55g的(2-氨基-5-氟-4-(3-(4-嗎啉基) 丙氧基)苯基)-(2_氯苯基)-甲酮(Xi)。MH+/Z = 393。由氨基二苯甲酮X制備內(nèi)酰胺I (方案3)
(Id)
實施例21
制備7-溴-5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮 在30分鐘內(nèi)，將3. 5mL(0. 04摩爾)的溴乙酰溴在3. 5mL的二氯甲烷中的溶液加 入至11.8g(0.035摩爾)的(2-氨基-5-溴-4-甲氧基苯基)-(2_氯苯基)-甲酮(Xd)、2. 94mL的吡啶和350mL的二氯甲烷的冷(0°C )溶液中。將混合物于室溫攪拌另外1小時， 然后在水和二氯甲烷之間分配。將二氯甲烷層用飽和硫酸銅溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥， 過濾，并且在減壓下濃縮，得到16. 5g的N-溴乙酰苯胺Xld。將上面得到的粗的N-溴乙酰苯胺(XId) (16. 5g，0. 0357摩爾)溶解于250mL的四 氫呋喃和SOmL的甲醇中。將混合物冷卻至_78°C，并且加入35mL的蒸餾氨。將混合物攪拌 1. 5小時；然后，移除冷卻浴，并且將混合物于室溫攪拌另外的2小時，在此期間，使過量的 氨汽化。將混合物減壓下濃縮，并且將剩余物在乙酸乙酯和水之間分配。將乙酸乙酯層依 次用水，然后用鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，過濾，并且減壓下濃縮，提供13. 6g粗的N-氨 基-酰苯胺Xlld。將在上面反應(yīng)中得到的粗XIId懸浮于375mL的乙醇中，回流24小時，然后冷卻。 通過過濾收集產(chǎn)物，得到9. 2g的7-溴-5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫-8-甲氧基-2H-1，4-苯 并二氮雜萆-2-酮(Id)。MH+/Z = 379。實施例22制備5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫-7-氟_8_甲氧基-2H-1，4_苯并二氮雜萆_2_酮 (Ia) 5-(2-氯苯基)-1，3-二氫-7-氟-8-甲氧基_2!1-1，4-苯并二氮雜罩-2-酮(Ia) 是以實施例21的方式，通過使0. 125摩爾的(2-氨基-5-氟-4-甲氧基苯基)(2-氯苯 基)_甲酮(Xa)與溴乙酰溴反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 319。實施例23制備5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫-7-氟_8_ (3- (4-嗎啉基)丙氧基))-2H-1，4_苯 并二氮雜罩-2-酮(Ii) 5- (2-氯苯基)-I，3- 二氫-7-氟_8_ (3_ (4_嗎啉基)丙氧基))-2H-1，4_苯并二氮 雜罩-2-酮(Ii)是以實施例21的方式，通過使0. 0062摩爾的(2-氨基-5-氟-4-(3-(4-嗎 啉基)丙氧基)苯基)-(2_氯苯基)-甲酮(Xi)與溴乙酰溴反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 432。實施例24制備5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫-8-甲氧基_7_甲基-2H-1，4_苯并二氮雜罩_2_酮 (Iz)
5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫-8-甲氧基_7_甲基-2Η-1，4_苯并二氮雜萆_2_酮(Iz) 是以實施例21的方式，通過使0. 13摩爾的(2-氨基-4-甲氧基-5-甲基苯基)-(2_氯苯 基)_甲酮(Xz)與溴乙酰溴反應(yīng)而制備的。實施例25制備5-(2-氯苯基)-7，8-二氟-1，3-二氫-2Η-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(Lnm) 5-(2_氯苯基)-7，8_二氟-1，3-二氫-2Η_1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(Imm)是以實 施例21的方式，通過使0.019摩爾的(2-氨基-4，5-二氟苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xmm) 與溴乙酰溴反應(yīng)而制備的。ΜΗ+/Ζ = 307。內(nèi)酰胺的轉(zhuǎn)化(方案8) 實施例265-(2-氯苯基)-7，8-二氟-1，3-二氫-2Η-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(Imm)轉(zhuǎn)化 為5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫-7-氟-8-甲氧基-2Η-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(Ia) 采用微波加熱，在密封的反應(yīng)容器中，將0. 10g(0. 00033摩爾)的5_(2_氯苯 基)-7，8- 二氟-1，3- 二氫-2H-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(Imm)，2mL的甲醇和0. 03g的氫化鈉的混合物于100°C加熱40分鐘。然后將混合物冷卻，用乙酸乙酯稀釋，并且依次用水， 然后用鹽水洗滌。將混合物用無水硫酸鈉干燥，過濾，并且在減壓下濃縮，得到0. 103g的 5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫-7-氟-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(Ia)，為白色 晶體。MH+/Z = 319。實施例275-(2-氯苯基)-7，8-二氟-1，3-二氫-2H-1，4-苯并二氮雜罩-2-酮(Imm)轉(zhuǎn)化 為5- (2-氯苯基)-8-N，N- 二甲氨基-1，3- 二氫-7-氟-2H-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(Il) 采用微波加熱，將0.9201g (0.003摩爾)的5_ (2_氯苯基)_7，8_ 二氟-1，3_ 二 氫-2H-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(Imm)和二甲胺在四氫呋喃中的3mL 2. OM溶液的混合物 于150°C加熱30分鐘。將混合物冷卻，然后減壓下濃縮。將剩余物與乙酸乙酯-己烷一起 研磨，得到0. 63g的5- (2-氯苯基)-8-N，N- 二甲氨基_1，3- 二氫-7-氟-2H-1，4-苯并二 氮雜萆-2-酮(II)，為黃色固體。MH+/Z = 332。內(nèi)酰胺的轉(zhuǎn)化(方案10) 7-溴-5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫_8_甲氧基-2H-1，4_苯并二氮雜罩_2_酮(Id) 轉(zhuǎn)化為7-溴-5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫-8- (3- (4-嗎啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮 雜萆-2-酮(Ij) 將1.00g(0. 0263 摩爾)的 7_ 溴 _5_(2_ 氯苯基)_1，3_ 二氫 _8_ 甲氧基-2H-1， 4_苯并二氮雜萆-2-酮(Id)在85mL的1，2-二氯乙烷中的溶液與1. 053g(0. 0079摩爾) 的三氯化鋁一起攪拌過夜。加入另外的l.OOg的三氯化鋁，并且將混合物攪拌過夜，此時間 之后，將混合物傾倒入冰水中。將混合物用二氯甲烷-甲醇萃取，并且將有機(jī)層用水洗滌兩 次，然后用無水硫酸鈉干燥。將溶液在減壓下濃縮，提供0. 700g的7-溴-5- (2-氯苯基)-1， 3- 二氫-8-羥基-2H-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(Ipp) (MH+/Z = 465)，其具有用于下一步 驟的足夠純度。在氬氣氛下，來自上面步驟的1.8281g (0.005摩爾)的7_溴_5-(2_氯苯基)_1， 3- 二氫-8-羥基-2H-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(Ipp)、0. 636g 的碳酸鈉，0. 9818g (0. 006 摩 爾)的4-(3_氯丙基)_嗎啉和50mL的二甲基甲酰胺的混合物于50°C攪拌73小時。然后 將混合物冷卻，并且在乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉之間分配。然后將水層用乙酸乙酯反萃取。 將乙酸乙酯層依次用飽和碳酸氫鈉，水，鹽水洗滌，然后用無水硫酸鈉干燥，過濾，并且在減 壓下濃縮，得到粗的7-溴-5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫-8- (3- (4-嗎啉基)丙氧基))-2H-1， 4_苯并二氮雜罩-2-酮(Ij)。通過用乙酸乙酯-甲醇(90 10)洗脫的硅膠色譜，得到純 的7-溴-5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫-8- (3- (4-嗎啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮雜萆 -2-酮(Ij) (1. 721g)。MH+/Z = 492。實施例29 5- (2-氯苯基)-7-氰基-1，3- 二氫_8_甲氧基-2H-1，4_苯并二氮雜萆_2_酮(Ib) 轉(zhuǎn)化為5- (2-氯苯基)-7-氰基-1，3- 二氫-8- (3- (4-嗎啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二 氮雜萆-2-酮(Ik)
將1. 2g (0. 0037 摩爾)的 5_ (2_ 氯苯基)_7_ 氰基 _1，3_ 二氫 _8_ 甲氧基 _2H_1，
4-苯并二氮雜萆-2-酮(Ib，實施例30中制備)在IOOmL的1，2-二氯乙烷中的溶液與 2. 5g(0. 0187摩爾)的三氯化鋁一起于42°C攪拌8小時，之后加入另外的2. 5g的三氯化鋁。 將加熱和攪拌繼續(xù)另外的48小時，此時間之后，加入另外的2. 5g的三氯化鋁。6小時后，將 混合物冷卻，然后傾倒在冰水上。將該水用二氯甲烷-甲醇-四氫呋喃(80 10 10)萃 取，并且將萃取物用水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，過濾，并且在減壓下濃縮，得到1. 6g粗的
5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3- 二氫-8-羥基-2H-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(Iqq)。由用乙 酸乙酯-甲醇(90 10)洗脫的硅膠色譜純化，得到1. 17g的5-(2_氯苯基)-7_氰基-1， 3- 二氫-8-羥基-2H-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(Iqq) (MH+/Z = 312),其具有用于下一步 驟足夠的純度。在氬氣氛下，將0. 322g(0. 00103摩爾)的5_ (2-氯苯基)_7_氰基-1，3_ 二 氫-8-羥基-2H_1，4-苯并二氮雜草-2-酮(Iqq)、6mL的二甲基甲酰胺，0. 132g(0. 00124 摩爾)的碳酸鈉和0. 2028g(0. 00124摩爾)的4-(3-氯丙基)_嗎啉的混合物于50°C攪拌 24小時。然后將混合物冷卻，并且在乙酸乙酯和水之間分配。將水相用乙酸乙酯反萃取， 然后將乙酸乙酯萃取物用無水硫酸鈉干燥，過濾，并且減壓下濃縮。將剩余物由乙腈-甲 醇(90 10)洗脫的硅膠色譜純化，提供0.199g的5-(2_氯苯基)-7_氰基-1，3-二 氫-8- (3- (4-嗎啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮雜蕈-2-酮(Ik)。MH+/Z = 439。實施例307-溴-5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫_8_甲氧基-2H-1，4_苯并二氮雜萆_2_酮(Id) 轉(zhuǎn)化為5- (2-氯苯基)-7-氰基-1，3- 二氫-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮雜罩-2-酮(Ib) 5- (2-氯苯基)-7-氰基-1，3_ 二氫_8_甲氧基-2H-1，4_苯并二氮雜罩_2_酮(Ib)是由7-溴-5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(Id)，通過 在鈀催化劑(四(三苯膦)鈀)存在下，根據(jù)與由Tschaen等，Synthetic Communications, 24:887-90(1994)所述的那些條件類似的條件，與氰化鋅反應(yīng)而制備的。在氬氣氛下，將 0. 9491g(0. 0025摩爾)的7-溴-5- (2-氯苯基)_1，3- 二氫-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮 雜萆-2-酮(ld)，0. 176g (0.0015摩爾)的氰化鋅、4mL的二甲基甲酰胺和0. 289g(0. 00025 摩爾)的四(三苯膦)鈀的混合物于110°C加熱24小時。然后將混合物冷卻，放入乙酸乙 酯中，并且用0. 2M碳酸鈉溶液洗滌。將水相用乙酸乙酯反萃取，并且將乙酸乙酯層用水洗 滌，用無水硫酸鈉干燥，過濾，并且減壓下濃縮。使剩余物經(jīng)過用乙酸乙酯-己烷(4 1)洗 脫的硅膠色譜，得到0. 620g的5- (2-氯苯基)-7-氰基-1，3- 二氫-8-甲氧基-2H-1，4-苯 并二氮雜草-2-酮(Ib)。MH+/Z = 326。實施例317-溴-5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫_8_甲氧基乙氧基-2H-1，4_苯并二氮雜萆_2_酮 (Inn)轉(zhuǎn)化為5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氫-8-甲氧基乙氧基-2H-1，4-苯并二氮雜 萆-2-酮(Im) 5-(2-氯苯基)-7_氰基-1，3- 二氫_8_甲氧基乙氧基-2Η_1，4_苯并二氮雜萆 -2-酮(Im)是以類似于實施例30的方式，在四(三苯膦)鈀存在下，通過使0.001摩爾的 7-溴-5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫-8-甲氧基乙氧基-2Η-1，4-苯并二氮雜罩-2-酮(Irm) 與氰化鋅反應(yīng)而制備的。ΜΗ+/Ζ = 370。實施例327-溴-5-(2-氯苯基)_1，3-二氫-8-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)-2Η-1，4_苯 并二氮雜罩-2-酮(Ioo)轉(zhuǎn)化為5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氫-8-(2-(2-甲氧基乙 氧基)乙氧基)-2Η-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(In) 5-(2_氯苯基)-7_氰基-1，3-二氫-8-(2_(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)_2Η_1， 4_苯并二氮雜萆-2-酮(In)是以類似于實施例30的方式，在四(三苯膦)鈀存在下， 通過使0. 0017摩爾的7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3_ 二氫-8-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧 基)-2Η-1，4-苯并二氮雜蕈-2-酮(Ioo)與氰化鋅反應(yīng)而制備的。ΜΗ+/Ζ = 414。
實施例33由7-溴-5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫_8_羥基-2H-1，4_苯并二氮雜萆_2_酮(Ipp) 制備7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3- 二氫-8-甲氧基乙氧基-2H-1，4-苯并二氮雜草-2-酮 (Inn) 向0. 300g (0. 00082摩爾)實施例28中制備的7_溴_5_ (2_氯苯基)_1，3_ 二 氫-8-羥基-2H-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(Ipp)、60mL的四氫呋喃、0. 070mL的2-甲氧基 乙醇和0. 2586g的三苯膦的攪拌混合物中，加入0. 194mL(0. 00099摩爾)的偶氮二羧酸二 異丙酯。將混合物攪拌過夜；然后，加入另外的0. 2586g的三苯膦，0. 070mL的2-甲氧基 乙醇和0. 194mL的偶氮二羧酸二異丙酯。將混合物攪拌另外1小時，然后減壓下濃縮。使 剩余物經(jīng)過二氯甲烷-甲醇(98 2)洗脫的硅膠色譜，得到0.212g的7-溴-5-(2-氯苯 基)-1，3_ 二氫-8-甲氧基乙氧基-2H-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(Inn)。MH+/Z = 423。實施例34由7-溴-5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫_8_羥基-2H-1，4_苯并二氮雜罩_2_酮(Ipp) 制備7-溴-5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫-8- (2- (2-甲氧基乙氧基)乙氧基)-2H-1，4-苯并 二氮雜罩-2-酮(Ioo) 7-溴-5-(2_氯苯基)-1，3_ 二氫-8-(2_(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)_2H_1， 4_苯并二氮雜草-2-酮(Ioo)是以類似于實施例33的方式，通過使0. 00238摩爾的 7-溴-5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫-8-羥基-2H-1，4-苯并二氮雜罩-2-酮(Ipp)與2- (2-甲 氧基乙氧基)乙醇反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 467。實施例35由5-(2_氯苯基)-7-氰基-1，3- 二氫_8_羥基-2H-1，4_苯并二氮雜罩_2_酮 (Iqq)制備8- (2-氯乙氧基)_5_ (2_氯苯基)_7_氰基_1，3_ 二氫_2H_1，4_苯并二氮雜草 -2-酮(Iss) 8-(2-氯乙氧基)-5-(2-氯苯基)_7_氰基_1，3_ 二氫-2Η_1，4_苯并二氮雜萆 -2-酮(Iss)是以類似于實施例33的方式，通過使0. 0031摩爾的5-(2-氯苯基)-7_氰 基-1，3-二氫-8-羥基-2Η_1，4-苯并二氮雜草-2-酮(Iqq)與2_氯乙醇反應(yīng)而制備的。 ΜΗ+/Ζ = 374。實施例36制備5-(2_氯苯基)-7_氰基-1，3-二氫-8-(2-((2_甲氧基乙基)甲氨基)_乙 氧基)-2Η-1，4-苯并二氮雜罩-2-酮(Iν) 在氬氣氛下，將1.2g (0.0032摩爾)的8_ (2_氯乙氧基)_5_ (2_氯苯基)_7_氰 基-1，3- 二氫-2H-1，4-苯并二氮雜罩-2-酮(Iss，實施例35中制備)，2. 85g (0. 032摩爾) 的2-((2_甲氧基乙基)甲氨基)乙醇，20mL的四氫呋喃和4.8g(0.032摩爾)的碘化鈉的 混合物于83°C的油浴中加熱20小時。將混合物冷卻，然后在乙酸乙酯和0. 6M碳酸氫鈉溶 液之間分配。將乙酸乙酯層用鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，過濾，并且減壓下濃縮。使剩 余物經(jīng)過用乙腈-甲醇(80 20)洗脫的硅膠色譜，得到0.233g的5-(2_氯苯基)-7_氰 基-1，3- 二氫-8- (2- ((2-甲氧基乙基)甲氨基)-乙氧基)-2H-1，4-苯并二氮雜罩-2-酮 (Iv)。 MH+/Z = 427。實施例37制備5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氫-8-(2-((2-(4-甲基-1-哌嗪基)乙氧 基))-2Η-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(It) 5-(2_氯苯基)-7_氰基-1，3-二氫-8-(2-((2_(4-甲基-1-哌嗪基)乙氧 基))-2Η-1，4-苯并二氮雜草-2-酮(It)是以類似于實施例36的方式，通過使0. 00414摩爾的8- (2-氯乙氧基)-5- (2-氯苯基)-7-氰基-1，3- 二氫-2H-1，4-苯并二氮雜罩-2-酮 (Iss)與N-甲基哌嗪反應(yīng)而制備的。由內(nèi)酰胺(I)生成硫代內(nèi)酰胺(II)(方案1) 實施例38制備7-溴-5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫_8_甲氧基-2H-1，4_苯并二氮雜萆_2_硫 酮(IId) 將2. Og (0. 0053 摩爾)的 7_ 溴 _5_ (2_ 氯苯基)_1，3_ 二氫 _8_ 甲氧基-2H-1，4_ 苯 并二氮雜萆-2-酮(Id)，200mL的1，2_ 二甲氧基乙烷和2. 13g(0. 0053摩爾)的Lawesson試 劑(2，4-雙(4-甲氧基苯基)-2，4-二硫-1,3, 2，4-二噻二磷庚烷(dithiadiphosphetane)) 的混合物于85°C加熱1小時，然后冷卻，并且傾倒在冰冷卻的碳酸氫鈉溶液上。將混合物 用乙酸乙酯-甲醇(9 1)萃取兩次，并且將有機(jī)層依次用水和鹽水洗滌。將合并的萃取 物用無水硫酸鈉干燥，過濾，并且減壓下濃縮。剩余物與乙酸乙酯一起研磨，提供1. 7g的 7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氫-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮雜萆-2-硫酮(IId)。MH+/ Z = 395。實施例39制備5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫_7_氟_8_甲氧基-2H-1，4_苯并二氮雜萆_2_硫 酮(IIa) 5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫_7_氟_8_甲氧基-2Η-1，4_苯并二氮雜萆_2_硫 酮(IIa)是以類似于實施例38的方式，通過使0. 0284摩爾的5_(2_氯苯基)-1，3_ 二氫-7-氟-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮雜罩-2-酮(Ia)與Lawesson試劑反應(yīng)而制備的。 MH+/Z = 335。實施例40制備5- (2-氯苯基)-7-氰基-1，3_ 二氫_8_甲氧基-2H-1，4_苯并二氮雜萆_2_硫 酮(IIb) 5- (2-氯苯基)-7-氰基-1，3- 二氫_8_甲氧基-2H-1，4_苯并二氮雜萆_2_硫酮 (IIb)是以類似于實施例38的方式，通過使0. 0019摩爾的5- (2-氯苯基)_7_氰基-1，3- 二 氫-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮雜草-2-酮(Ib)與Lawesson試劑反應(yīng)而制備的。MH+/Z =342。實施例41制備5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫_7_氟_8_ (3_ (4_嗎啉基)丙氧基))-2H-1，4_苯 并二氮雜罩-2-硫酮(IIi) 5-(2_ 氯苯基)-l，3-二氫-7-氟-8-(3_(4-嗎啉基)丙氧基))_2H_1，4_ 苯并 二氮雜罩-2-硫酮(IIi)是以類似于實施例38的方式，通過使0.0053摩爾的5-(2_氯苯 基)_1，3-二氫-7-氟-8-(3-(4-嗎啉基)丙氧基))-2Η-1，4-苯并二氮雜罩-2-酮(內(nèi)酰 胺Ii)與Lawesson試劑反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 448。實施例42制備7-溴-5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫_8_ (3_ (4_嗎啉基)丙氧基))-2H-1，4_苯 并二氮雜萆-2-硫酮(IIj) 7-溴-5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫 _8_ (3_ (4_ 嗎啉基)丙氧基))-2H—1，4_ 苯并:氮雜草-2-硫酮(IIj)是以類似于實施例38的方式，通過使0. 0011摩爾的7-溴-5-(2-氯 苯基)-1，3_ 二氫-8-(3-(4-嗎啉基)丙氧基))-2Η-1，4-苯并二氮雜萆.-2-酮(Ij)與 Lawesson試劑反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 508。實施例43制備5-(2_氯苯基)-7_氰基-1，3-二氫-8-(3_(4-嗎啉基)丙氧基))_2H_1， 4_苯并二氮雜罩-2-硫酮(IIk) 5- (2-氯苯基)-7-氰基-1，3- 二氫_8_ (3_ (4_嗎啉基)丙氧基))-2H-1，4_苯并 二氮雜萆-2-硫酮(Ik)是以類似于實施例38的方式，通過使0.00057摩爾的5-(2_氯苯 基)-7-氰基-1，3- 二氫-8- (3- (4-嗎啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮雜草-2-酮(Ik) 與Lawesson試劑反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 455。實施例44制備5- (2-氯苯基)-8-N，N- 二甲氨基_1，3_ 二氫_7_氟-2H-1，4_苯并二氮雜罩 -2-硫酮(III) 5- (2-氯苯基)-8-N，N- 二甲氨基_1，3_ 二氫_7_氟-2H-1，4_苯并二氮雜罩_2_硫 酮(III)是以類似于實施例38的方式，通過使0.006摩爾的5-(2_氯苯基)-8-N，N-二甲 氨基-1，3-二氫-7-氟-2H_1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(Il)與Lawesson試劑反應(yīng)而制備 的。MH+/Z = 348。實施例45制備5- (2-氯苯基)-7-氰基-1，3- 二氫_8_甲氧基乙氧基-2H-1，4_苯并二氮雜 草-2-硫酮(IIm) 5-(2-氯苯基)-7_氰基-1，3- 二氫_8_甲氧基乙氧基-2Η_1，4_苯并二氮雜罩 -2-硫酮(IIm)是以類似于實施例38的方式，通過使0. 00081摩爾的5-(2-氯苯基)-7-氰 基-1，3-二氫-8-甲氧基乙氧基-2Η-1，4-苯并二氮雜罩-2-酮(Im)與Lawesson試劑反 應(yīng)而制備的。MH+/Z = 386。實施例46制備5-(2_氯苯基)-7_氰基-1，3-基)-2Η-1，4-苯并二氮雜草-2-硫酮(IIn) 5-(2_氯苯基)-7_氰基-1，3-二氫-8-(2_(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)_2H_1， 4_苯并二氮雜萆-2-硫酮(IIn)是以類似于實施例38的方式，通過使0.00089摩爾的 5- (2-氯苯基)-7-氰基-1，3- 二氫-8- (2- (2-甲氧基乙氧基)乙氧基)-2H-1，4-苯并二氮 雜萆-2-酮(內(nèi)酰胺In)與Lawesson試劑反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 430。實施例47制備5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氫-8-(2-((2-(4-甲基-1-哌嗪基)乙氧 基))-2Η-1，4-苯并二氮雜罩-2-硫酮(IIt) 5-(2_氯苯基)-7_氰基-1，3-二氫-8-(2-((2_(4-甲基-1-哌嗪基)乙氧
基))-2Η-1，4-苯并二氮雜 >草-2_硫酮(IIt)是以類似于實施例38的方式，通過使
0. 00069摩爾的5- (2-氯苯基)-7-氰基-1，3- 二氫-8- (2- ((2- (4-甲基-1-哌嗪基)乙氧 基))-2Η-1，4-苯并二氮雜罩-2-酮(It)與Lawesson試劑反應(yīng)而制備的。實施例48制備5- (2-氯苯基)-7-氰基-1，3- 二氫_8_ (2_ ((2_甲氧基乙基)甲氨基)_乙 氧基)_2Η-1，4_苯并二氮雜萆._2_硫酮(IIv) 5-(2_氯苯基)-7_氰基-1，3-二氫-8-(2-((2_甲氧基乙基)甲氨基)_乙氧 基)-2Η-1，4-苯并二氮雜罩.-2-硫酮(IIv)是以類似于實施例38的方式，通過使0. 00052 摩爾的5-(2_氯苯基)-7_氰基-1，3-二氫-8-(2-((2-甲氧基乙基)甲氨基)_乙氧 基)-2Η-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(Iv)與Lawesson試劑反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 443。實施例49制備5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫-7，8- 二甲基-2H-1，4_苯并二氮雜萆_2_硫酮 (IIw)5-(2_ 氯苯基)-1，3_ 二氫-7，8_ 二甲基-2H_1，4-苯并二氮雜罩-2-硫酮(IIw) 是以類似于實施例38的方式，通過使0. 0006摩爾的5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫-7，8- 二甲 基-2H-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(Iw)與Lawesson試劑反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 315。實施例50制備5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫_8_甲氧基_7_甲基-2H-1，4_苯并二氮雜萆_2_硫 酮(IIz) 5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫-8-甲氧基_7_甲基-2H-1，4_苯并二氮雜萆_2_硫酮 (IIz)是以類似于實施例38的方式，通過使0. 0064摩爾的5- (2-氯苯基)-I，3- 二氫-8-甲 氧基-7-甲基-2H-1，4-苯并二氮雜萆-2-酮(Iz)與Lawesson試劑反應(yīng)而制備的。MH+/Z =331。實施例51制備5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫-7，8- 二氟-2H-1，4-苯并二氮雜罩_2_硫酮 (IImm) 5-(2_ 氯苯基)-1，3_ 二氫-7，8_ 二氟-2H_1，4-苯并二氮雜罩-2-硫酮(IImm) 是以類似于實施例38的方式，通過使0. 003摩爾的5-(2-氯苯基)-1，3_ 二氫-7，8- 二 氟-2H-1，4-苯并二氮雜罩-2-酮(Imm)與Lawesson試劑反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 332。硫代內(nèi)酰胺的轉(zhuǎn)化(方案9) 實施例52制備5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫_7_氟_8_甲氧基乙氧基-2H-1，4_苯并二氮雜草 -2-硫酮(IIf) 將l.Og (0.0031 摩爾)的 5_ (2_ 氯苯基)_1，3_ 二氫 _7，8_ 二氟-2H-1，4_ 苯并二 氮雜草-2-硫酮(IImm)，0. 372g的氫化鈉和20mL的2-甲氧基乙醇的混合物在微波容器中 于120°C加熱30分鐘，冷卻，然后用乙酸乙酯稀釋。將混合物依次用水和鹽水洗滌，用無水 硫酸鈉干燥，過濾，并且減壓下濃縮。將剩余物與乙酸乙酯一起研磨，得到0. 74g的5-(2_氯 苯基)-1，3- 二氫-7-氟-8-甲氧基乙氧基-2H-1，4-苯并二氮雜萆-2-硫酮(IIf)，為白 色固體，然后將其根據(jù)實施例58用來制備5-(2_氯苯基)-1，2- 二氫-7-氟-8-甲氧基乙 氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][l，4]苯并二氮雜罩(IVf)，而沒有進(jìn)一步純化。MH+/Z = 379。實施例53制備5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫_8_乙氧基_7_氟-2H-1，4_苯并二氮雜萆_2_硫 酮(IIg) 將0.5g (0.00155 摩爾)的 5_ (2_ 氯苯基)_1，3_ 二氫 _7，8_ 二氟-2H-1，4_ 苯并 二氮雜蕈-2-硫酮(IImm)、10mL的乙醇和0. 62g的60%氫化鈉的混合物加熱回流24小時。 將混合物冷卻，用乙酸乙酯稀釋，并且依次用水，然后用鹽水洗滌。將乙酸乙酯萃取物用無 水硫酸鈉干燥，過濾，并且在減壓下濃縮，得到0. 52g的5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫-8-乙氧 基-7-氟-2H-1，4-苯并二氮雜章-2-硫酮(Hg)，為黃色固體。MH+/Z = 349。實施例54制備5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫_7_氟_8_ (1_甲基乙氧基)-2H-1，4_苯并二氮雜 萆-2-硫酮(IIh) 將l.Og (0.0031 摩爾)的 5_ (2_ 氯苯基)_1，3_ 二氫 _7，8_ 二氟-2H-1，4_ 苯并二 氮雜萆-2-硫酮(IImm)，IOmL的異丙醇和0. 62g的60%氫化鈉的混合物加熱回流5小時。 將混合物冷卻，用乙酸乙酯稀釋，并且依次用水，然后用鹽水洗滌。將乙酸乙酯萃取物用無 水硫酸鈉干燥，過濾，并且在減壓下濃縮，得到1. 2g的剩余物，其與己烷和乙酸乙酯一起研 磨，得到0. 76g的5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫-7-氟-8- (1-甲基乙氧基)-2H-1，4-苯并二 氮雜萆-2-硫酮(IIh)，為白色固體。MH+/Z = 363。由硫代內(nèi)酰胺II制備吡唑并苯并二氮雜萆IV(方案2) 實施例55制備7-溴-5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-8-甲氧基_3_甲基-吡唑并[3，4_b] [1， 4]苯并二氮雜萆(IVd) 將1.8g (0.00455 摩爾)的 7_ 溴 _5_ (2_ 氯苯基)_1，3_ 二氫 _8_ 甲氧基-2H-1， 4-苯并二氮雜罩-2-硫酮(lid)、2. 26mL的1，1_ 二甲氧基-N，N- 二甲基-乙胺和20mL的二 甲基甲酰胺的混合物于室溫攪拌1.5小時，然后于110°C攪拌5小時。將混合物冷卻，并且減 壓下濃縮。粗中間體IIId與0. 713mL的無水胼，9mL的甲醇和24mL的二氯甲烷的溶液一起 攪拌26小時，然后在乙酸乙酯和水之間分配。將乙酸乙酯層用水洗滌，用無水硫酸鈉干燥， 過濾，并且減壓下濃縮。經(jīng)過用乙酸乙酯洗脫的硅膠色譜，得到0. 690g的7-溴-5-(2-氯 苯基)-1，2_ 二氫-8-甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][l，4]苯并二氮雜罩(IVd)。從二 氯甲烷中重結(jié)晶，提供晶體7-溴-5- (2-氯苯基)-1，2- 二氫-8-甲氧基-3-甲基-吡唑并 [3,4-b] [1,4]苯并二氮雜草(IVd), mp 210_211°C。MH+/Z = 417。實施例56制備5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7-氟-8-甲氧基_3_甲基-吡唑并[3,4-b] [1， 4]苯并二氮雜草(IVa) 5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7-氟-8-甲氧基_3_甲基-吡唑并[3,4-b] [1，4]苯 并二氮雜萆(IVa)是以類似于實施例55的方式，通過使0. 0224摩爾的5-(2-氯苯基)_1， 3-二氫-7-氟-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮雜萆-2-硫酮(IIa)與1，1_ 二甲氧基-N， N-二甲基-乙胺反應(yīng)，然后與胼反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 357。實施例57制備5-(2_氯苯基)-7_氰基-1，2-二氫-8-甲氧基_3_甲基-吡唑并[3,4-b] [1,4]苯并二氮雜草(IVb) 5-(2_氯苯基)-7_氰基-1，2_ 二氫-8-甲氧基_3_甲基-吡唑并[3，4_b][l， 4]苯并二氮雜萆(IVb)是以類似于實施例55的方式，通過使0.0016摩爾的5-(2_氯苯 基)-7-氰基-1，3-二氫-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮雜罩-2-硫酮(IIb)與1，1_ 二甲 氧基-N，N-二甲基-乙胺反應(yīng)，然后與胼反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 364。實施例58制備5-(2_氯苯基)-1，2_ 二氫-7-氟-8-甲氧基乙氧基_3_甲基-吡唑并[3， 4_b][l，4]苯并二氮雜蕈(IVf) 5-(2_氯苯基)-1，2_ 二氫-7-氟-8-甲氧基乙氧基_3_甲基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并二氮雜草(IVf)是以類似于實施例55的方式，通過使0.0026摩爾的5-(2_氯 苯基)-1，3_ 二氫-7-氟-8-甲氧基乙氧基-2H-1，4-苯并二氮雜萆-2-硫酮(IIf)與1， 1-二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺反應(yīng)，然后與胼反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 401。實施例59制備5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7-氟-8-乙氧基_3_甲基-吡唑并[3，4_b] [1， 4]苯并二氮雜罩(IVg) 5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7-氟-8-乙氧基_3_甲基-吡唑并[3，4_b] [1，4]苯 并二氮雜萆(IVg)是以類似于實施例55的方式，通過使0.0016摩爾的5-(2_氯苯基)-1， 3-二氫-8-乙氧基-7-氟-2H-1，4-苯并二氮雜草-2-硫酮(IIg)與1，1_ 二甲氧基-N， N-二甲基-乙胺反應(yīng)，然后與胼反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 371。實施例60制備5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7-氟-8-(1-甲基乙氧基)_3_甲基-吡唑并[3， 4_b][l，4]苯并二氮雜草(IVh) 5-(2-氯苯基)-1，2-二氫-7-氟-8-(1_甲基乙氧基)_3_甲基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并二氮雜罩(IVh)是以類似于實施例55的方式，通過使0. 00198摩爾的5_(2_氯 苯基)-1，3- 二氫-7-氟-8- (1-甲基乙氧基)-2H-1，4-苯并二氮雜萆-2-硫酮(IIh)與1，1-二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺反應(yīng)，然后與胼反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 385。實施例61制備5- (2-氯苯基)-1，2- 二氫_7_氟_8_ (3- (4-嗎啉基)丙氧基))_3_甲基-吡 唑并[3,4-b] [1,4]苯并二氮雜罩(IVi) 5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7-氟-8-(3-(4-嗎啉基)丙氧基))_3_甲基-吡唑 并[3，4-b][l，4]苯并二氮雜罩(IVi)是以類似于實施例55的方式，通過使0. 0045摩爾 的5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫-7-氟-8- (3- (4-嗎啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮雜草. -2-硫酮(硫代內(nèi)酰胺IIi)與1，1_ 二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺反應(yīng)，然后與胼反應(yīng)而 制備的。MH+/Z = 470。實施例62制備7-溴-5- (2-氯苯基)-1，2- 二氫_8_ (3- (4-嗎啉基)丙氧基))_3_甲基-吡 唑并[3,4-b] [1,4]苯并二氮雜萆(IVj) 7-溴-5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-8-(3-(4-嗎啉基)丙氧基))_3_甲基-吡唑 并[3，4-b][l，4]苯并二氮雜草(IVj)是以類似于實施例55的方式，通過使0. 0011摩爾 的7-溴-5- (2-氯苯基)-1，3- 二氫-8- (3- (4-嗎啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮雜萆 -2-硫酮(IIj)與1，1_ 二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺反應(yīng)，然后與胼反應(yīng)而制備的。MH+/ Z = 530。實施例63制備5-(2_氯苯基)-7_氰基-1，2-二氫-8-(3_(4-嗎啉基)丙氧基))_3_甲 基-吡唑并[3，4-b][l，4]苯并二氮雜萆(IVk) 5- (2-氯苯基)-7-氰基-1，2_ 二氫_8_ (3- (4-嗎啉基)丙氧基))_3_甲基-吡唑 并[3，4-b][l，4]苯并二氮雜罩(IVk)是以類似于實施例55的方式，通過使0.00054摩爾 的5- (2-氯苯基)-7-氰基-1，3- 二氫-8- (3- (4-嗎啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮雜萆-2-硫酮(硫代內(nèi)酰胺IIk)與1，1- 二甲氧基-N，N- 二甲基-乙胺反應(yīng)，然后與胼反應(yīng) 而制備的。MH+/Z = 477。實施例64制備5-(2-氯苯基)-1，2-二氫-7-氟-8_隊N-二甲氨基_3_甲基-吡唑并[3， 4_b][l，4]苯并二氮雜萆(IVl)5-(2-氯苯基)-1，2-二氫-7-氟-8_隊N-二甲氨基_3_甲基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并二氮雜草(IVl)是以類似于實施例55的方式，通過使0.00187摩爾的5-(2_氯 苯基)-8-N，N-二甲氨基-1，3-二氫-7-氟-2H-1，4-苯并二氮雜罩-2-硫酮(III)與1， 1-二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺反應(yīng)，然后與胼反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 370。實施例65制備5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，2-二氫-8-甲氧基乙氧基_3_甲基-吡唑并[3， 4_b][l，4]苯并二氮雜罩(IVm) 5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，2-二氫-8-甲氧基乙氧基_3_甲基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并二氮雜罩(IVm)是以類似于實施例55的方式，通過使0. 00048摩爾的5_(2_氯 苯基)-7-氰基-1，3- 二氫-8-甲氧基乙氧基-2H-1，4-苯并二氮雜罩-2-硫酮(IIm)與1， 1-二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺反應(yīng)，然后與胼反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 408。實施例66制備5-(2_氯苯基)-7_氰基-1，2-二氫-8-(2_(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)_3_甲 基-吡唑并[3，4-b][l，4]苯并二氮雜草(IVn) 5-(2_氯苯基)-7_氰基-1，2-二氫-8-(2_(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)_3_甲 基-吡唑并[3，4-b][l，4]苯并二氮雜萆(IVn)是以類似于實施例55的方式，通過使 0.00067摩爾的5-(2_氯苯基)-7_氰基-1，3-二氫-8-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧 基)-2H-1，4-苯并二氮雜草-2-硫酮(IIn)與1，1_ 二甲氧基-N，N- 二甲基-乙胺反應(yīng)，然 后與胼反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 452。實施例67
制備5-(2_氯苯基)-7_氰基-1，2-二氫-8-(2_(4-甲基-1-哌嗪基)乙氧 基)-3_甲基-吡唑并[3，4-b][l，4]苯并二氮雜萆(IVt) 5- (2-氯苯基)-7-氰基-1，2- 二氫_8_ (2- (4-甲基哌嗪基)乙氧基)_3_甲 基-吡唑并[3，4-b][l，4]苯并二氮雜草(IVt)是以類似于實施例55的方式，通過使 0. 00062摩爾的5- (2-氯苯基)-7-氰基-1，3- 二氫-8- (2- ((2- (4-甲基-1-哌嗪基)乙氧 基))-2Η-1，4-苯并二氮雜罩-2-硫酮(IIt)與1，1_ 二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺反應(yīng)， 然后與胼反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 476。實施例68制備5-(2_氯苯基)-7_氰基-1，2-二氫-8-(2-((2_甲氧基乙基)甲氨基)_乙 氧基)-3_甲基-吡唑并[3，4-b][l，4]苯并二氮雜罩(IVv) 5-(2_氯苯基)-7_氰基-1，2-二氫-8-(2-((2_甲氧基乙基)甲氨基)_乙氧 基)-3_甲基-吡唑并[3，4-b][l，4]苯并二氮雜罩(IVv)是以類似于實施例55的方式， 通過使0. 0005摩爾的5- (2-氯苯基)-7-氰基-1，3- 二氫-8- (2- ((2-甲氧基乙基)甲氨基)-乙氧基)-2Η-1，4-苯并二氮雜罩-2-硫酮(IIv)與1，1_ 二甲氧基-N，N-二甲基-乙 胺反應(yīng)，然后與胼反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 465。實施例69制備5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-3，7，8-三甲基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并二氮 雜罩(IVw) 5-(2_氯苯基)-1，2_ 二氫-3，7，8_三甲基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并二氮雜罩 (IVw)是以類似于實施例55的方式，通過使0. 0005摩爾的5-(2-氯苯基)-1，3_ 二氫-7， 8-二甲基-2H-1，4-苯并二氮雜罩-2-硫酮(IIw)與1，1_ 二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺 反應(yīng)，然后與胼反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 337。實施例70制備5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-3，7-二甲基-8-甲氧基-吡唑并[3，4_b] [1,4] 苯并二氮雜‘罩(IVz) 5-(2_氯苯基)-l，2-二氫-3，7_二甲基-8-甲氧基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并 氮雜萆(IVz)是以類似于實施例55的方式，通過使0. 0005摩爾的5- (2-氯苯基)-1，3-氫-8-甲氧基-7-甲基-2H-1，4-苯并二氮雜罩-2-硫酮(IIz)與1，1-二甲氧基-N，N-甲基-乙胺反應(yīng)，然后與胼反應(yīng)而制備的。MH+/Z = 353。由內(nèi)酰胺I制備吡唑并苯并二氮雜萆IV(方案2) 實施例71制備5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7-氟-8-甲氧基_3_甲基-吡唑并[3，4_b] [1， 4]苯并二氮雜蕈(IVa) 向0 °C 的 3. Og(0. 0094 摩爾)的 5_(2_ 氯苯基)_1，3_ 二氫 _7_ 氟 _8_ 甲氧 基-2H-1，4-苯并二氮雜草-2-酮(Ia)，11. 8mL的乙基二異丙胺、4. 62g的1，2，4-三唑和 45mL的四氫呋喃的混合物中，加入1. 575mL的磷酰氯。20分鐘之后，移除冷卻浴，并且將混 合物于室溫攪拌另外60分鐘。然后，將17mL4. 37M甲醇鈉的甲醇溶液加入至反應(yīng)混合物中。 攪拌2小時后，加入另外的5mL甲醇鈉溶液，并且攪拌混合物過夜。然后將混合物在乙酸乙 酯和水之間分配。將乙酸乙酯層依次用水和鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，過濾，并且減壓 下濃縮，得到3. 2g的5- (2-氯苯基)-7-氟_2，8- 二甲氧基-3H-1，4-苯并二氮雜萆(中間 體Va)，其具有用于下一步驟中的足夠純度。將3. Og上面制備的中間體Va、30mL的二甲基甲酰胺和13. 2mL的1，1_ 二甲氧 基-N，N-二甲基-乙胺的混合物于110°C加熱24小時，然后冷卻。將混合物在減壓下濃縮， 得到粗的中間體Via，將其直接用于下一步驟。將剩余物溶解于48mL的二氯甲烷和15mL的 甲醇中，并且與1.41mL的無水胼反應(yīng)30小時。將混合物在水和乙酸乙酯之間分配。將水 相用乙酸乙酯反萃取，并且將乙酸乙酯層用水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，過濾，并且減壓下 濃縮。使剩余物經(jīng)過用乙酸乙酯-己烷(8 1)洗脫的硅膠色譜，得到2.05g的5-(2_氯 苯基)-1，2- 二氫-7-氟-8-甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b] [1,4]苯并二氮雜萆(IVa)。 將該材料從己烷-二氯甲烷中結(jié)晶，得到IVa，為黃色固體，mp 217-218°C。MH+/Z = 357。由氨基二苯甲酮X與吡唑XIII制備吡唑并苯并二氮雜草IV(方案4)。 實施例72制備5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-3，7，8-三甲基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并二氮 雜萆(IVw) 將3.0g(0.0116摩爾)的(2_氨基_4，5_ 二甲基苯基)-(2_氯苯基)-甲酮 (Xw)、2.0g(0. 0116 摩爾)的 4-氨基-5-氯-3-甲基 (2-丙烯基)-IH-吡唑(XIII)， 2. 21g(0. 0116摩爾)的對甲苯磺酸一水合物和40mL的異丙醇的混合物在密封管中于 170°C加熱90分鐘。將混合物減壓下濃縮，并且將剩余物用乙酸乙酯稀釋，然后用飽和碳酸 氫鈉溶液洗滌兩次。將水相洗滌物用乙酸乙酯反萃取，并且將合并的乙酸乙酯層用無水硫 酸鈉干燥，過濾，并且減壓下濃縮。剩余物與己烷一起研磨，得到中間體5-(2_氯苯基)-1， 2- 二氫-3，7，8-三甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3,4-b] [1,4]苯并二氮雜萆(XIVw)，為 黃色固體。濾液由用乙酸乙酯-二氯甲烷(1 1)洗脫的硅膠色譜純化，提供另外的XIVw， 并且與上面得到的材料合并，總產(chǎn)量為2. 7g的XIVw，為黃色固體，將其直接用于下一步驟。向-401的2.78(0.00716摩爾)的 5_ (2-氯苯基)_1，2_ 二氫-3，7，8_ 三甲 基-l-(2-丙烯基)-吡唑并[3,4-b] [1,4]苯并二氮雜罩(XIVw)、0. 155g(0. 00029 摩爾) 的1，3_雙(二苯基膦基)丙烷氯化鎳(II)和140mL的無水四氫呋喃的溶液中加入43mL IM的氫化二異丁基鋁的甲苯溶液。將混合物于0°C攪拌6小時，然后通過小心地加入冰水 而猝滅。將混合物用乙酸乙酯萃取兩次。將合并的乙酸乙酯萃取物用無水硫酸鈉干燥，過 濾，并且減壓下濃縮。剩余物由用乙酸乙酯-二氯甲烷(1 1)洗脫的硅膠色譜純化，得到 1.58的5-(2-氯苯基)-1，2-二氫-3，7，8-三甲基-吡唑并[3,4-b] [1,4]苯并二氮雜萆 (IVw)，為橙色固體。MH+/Z = 337。實施例73制備5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7-氟-8-甲氧基_3_甲基-吡唑并[3,4-b] [1， 4]苯并二氮雜萆(IVa) 5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7-氟-8-甲氧基-3-甲基-吡唑并[3,4-b] [1,4]苯并 二氮雜罩(IVa)是以類似于實施例72的方式，通過使0. 0014摩爾的(2-氨基-5-氟-4-甲氧基苯基)(2-氯苯基)-甲酮(Xa)與4-氨基-5-氯-3-甲基(2-丙烯基)-IH-吡唑 (XIII)反應(yīng)，隨后用氫化二異丁基鋁對中間體5-(2_氯苯基)-1，2- 二氫-7-氟-8-甲氧 基-3-甲基-l-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b] [1,4]苯并二氮雜草(XIVa)進(jìn)行脫烷基化而 制備的。MH+/Z = 357。實施例74制備5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7，8-二甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4_b] [1,4] 苯并二氮雜罩(IVx) 5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7，8-二甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并 二氮雜萆(IVx)是以類似于實施例72的方式，通過使0.00093摩爾的(2-氨基-4，5-二 甲氧基苯基)(2-氯苯基)-甲酮(Xx)與4-氨基-5-氯-3-甲基-l-(2-丙烯基)-1Η-吡 唑(XIII)反應(yīng)，隨后用氫化二異丁基鋁對中間體5-(2_氯苯基)-1，2_ 二氫-7，8-二甲氧 基-3-甲基-l-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b] [1,4]苯并二氮雜罩(XIVx)進(jìn)行脫烷基化而 制備的。MH+/Z = 369。實施例75制備8-氯-5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7-甲氧基_3_甲基-吡唑并[3，4_b] [1， 4]苯并二氮雜草(IVy) 8-氯-5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7-甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并 二氮雜罩(IVy)是以類似于實施例72的方式，通過使0. 0012摩爾的(2-氨基-4-氯-5-甲 氧基苯基)(2-氯苯基)-甲酮(Xy)與4-氨基-5-氯-3-甲基(2-丙烯基)-IH-吡唑 (XIII)反應(yīng)，隨后用氫化二異丁基鋁對中間體8-氯-5-(2-氯苯基)-1，2_ 二氫-7-甲氧 基-3-甲基-l-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b] [1,4]苯并二氮雜草(XIVy)進(jìn)行脫烷基化而 制備的。MH+/Z = 373。實施例76制備5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-8-甲氧基_3，7_ 二甲基-吡唑并[3，4_b] [1,4] 苯并二氮雜萆(IVz) 5-(2_ 氯苯基)-1，2_ 二氫-8-甲氧基 _3，7-二甲基-吡唑并[3，4_b][l，4]苯 并二氮雜萆(IVz)是以類似于實施例72的方式，通過使0.0012摩爾的(2-氨基-4-甲 氧基-5-甲基苯基)-(2_氯苯基)-甲酮(Xz)與4-氨基-5-氯-3-甲基-l-(2-丙烯 基)-1Η-吡唑(XIII)反應(yīng)，隨后用氫化二異丁基鋁對中間體5-(2_氯苯基)-1，2_ 二 氫-8-甲氧基_3，7-二甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][l，4]苯并二氮雜蕈(XIVz) 進(jìn)行脫烷基化而制備的。MH+/Z = 353。此外，還從脫烷基化反應(yīng)中分離出0.4%的1，2-二氫-3，7-二甲基-8-甲氧 基-5-苯基-吡唑并[3，4-b][l，4]苯并二氮雜萆(IVe)。MH+/Z = 319。實施例77制備1，2_ 二氫-7，8_ 二甲氧基-5-(2_甲氧基苯基)_3_甲基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并二氮雜蕈(IVaa) 1，2-二氫-7，8-二甲氧基-5-(2-甲氧基苯基)_3_甲基-吡唑并[3，4_b] [1,4] 苯并二氮雜草(IVaa)是以類似于實施例72的方式，通過使0.0023摩爾的(2-氨基-4， 5-二甲氧基苯基)-(2_甲氧基苯基)-甲酮(Xaa)與4_氨基_5_氯-3-甲基_1_(2_丙 烯基)-1Η-吡唑(XIII)反應(yīng)，隨后用氫化二異丁基鋁對中間體1，2_ 二氫-7，8-二甲氧 基-5-(2-甲氧基苯基)-3_甲基-1_(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][l，4]苯并二氮雜罩 (XIVaa)進(jìn)行脫烷基化而制備的。MH+/Z = 365。實施例78制備5-(2-氯苯基)-8，10-二氫-7-甲基-1，3-二氧戊環(huán)并[4，5_h]吡唑并[3， 4_b][l，4]苯并二氮雜草(IVbb) 5-(2-氯苯基)-8，10-二氫-7-甲基-1，3-二氧戊環(huán)并[4，5_h]吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并二氮雜罩(IVbb)是以類似于實施例72的方式，通過使0.0023摩爾的(6-氨 基-1，3-苯并二氧戊環(huán)-5-基)-(2_氯苯基)-甲酮(Xbb)與4-氨基-5-氯-3-甲 基-l-(2-丙烯基)-1Η-吡唑(XIII)反應(yīng)，隨后用氫化二異丁基鋁對中間體5-(2_氯苯 基)-8，10-二氫-7-甲基-1，3-二氧戊環(huán)(肚(《010)-1-(2-丙烯基)-[4，5-11]吡唑并[3， 4-b] [1,4]苯并二氮雜萆(XIVbb)進(jìn)行脫烷基化制備的。MH+/Z = 353。實施例79制備7-氯-5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-8-甲氧基_3_甲基-吡唑并[3,4-b] [1， 4]苯并二氮雜萆(IVcc) 7-氯-5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-8-甲氧基-3-甲基-吡唑并[3,4-b] [1,4]苯并 二氮雜萆(IVcc)是以類似于實施例72的方式，通過使0. 0023摩爾的(2-氨基-5-氯-4-甲 氧基苯基)-(2_氯苯基)-甲酮(Xcc)與4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-IH-吡 唑(XIII)反應(yīng)，隨后用氫化二異丁基鋁對中間體7-氯-5-(2-氯苯基)-1，2_ 二氫-8-甲 氧基-3-甲基-l-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][l，4]苯并二氮雜萆(XIVcc)進(jìn)行脫烷基 化而制備的。MH+/Z = 373。實施例80制備5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-8-氟-7-甲氧基_3_甲基-吡唑并[3,4-b] [1， 4]苯并二氮雜罩(IVdd) 5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-8-氟-7-甲氧基-3-甲基-吡唑并[3,4-b] [1,4]苯并二氮雜萆(IVdd)是以類似于實施例72的方式，通過使0. 0023摩爾的(2-氨基-4-氟-5-甲 氧基苯基)-(2_氯苯基)-甲酮(Xdd)與4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-IH-吡 唑(XIII)反應(yīng)，隨后用氫化二異丁基鋁對中間體5-(2_氯苯基)-1，2_ 二氫-8-氟-7-甲 氧基-3-甲基-l-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][l，4]苯并二氮雜草(XIVdd)進(jìn)行脫烷基 化而制備的。MH+/Z = 357。實施例81制備5-(2_氯苯基)-1，2_ 二氫-7-甲氧基_3_甲基_8_三氟甲基-吡唑并[3， 4_b][l，4]苯并二氮雜萆(IVee) 5-(2_氯苯基)-1，2_ 二氫-7-甲氧基_3_甲基_8_三氟甲基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并二氮雜萆(IVee)是以類似于實施例72的方式，通過使0. 0023摩爾的(2-氨 基-5-甲氧基-4-三氟甲基苯基)-(2_氯苯基)-甲酮(Xee)與4_氨基_5_氯-3-甲 基-l-(2-丙烯基)-1Η-吡唑(XIII)反應(yīng)，隨后用氫化二異丁基鋁對中間體5-(2_氯苯 基)-1，2_ 二氫-7-甲氧基-3-甲基-1-(2-丙烯基)-8-三氟甲基-吡唑并[3,4-b] [1,4] 苯并二氮雜草(XIVee)進(jìn)行脫烷基化制備的。MH+/Z = 407。實施例82制備5-(2_氯苯基)-1，2_ 二氫-7-甲氧基_3_甲基_8_苯基-吡唑并[3,4-b] [1,4]苯并二氮雜罩(IVff) 5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7-甲氧基_3_甲基_8_苯基-吡唑并[3,4-b] [1,4] 苯并二氮雜罩(IVff)是以類似于實施例72的方式，通過使0. 0023摩爾的(2-氨基-5-甲 氧基-4-苯基苯基)-(2_氯苯基)-甲酮(Xff)與4-氨基-5-氯-3-甲基-l-(2-丙烯 基)-1Η-吡唑(XIII)反應(yīng)，隨后用氫化二異丁基鋁對中間體5-(2_氯苯基)-1，2_ 二 氫-7-甲氧基-3-甲基-8-苯基-l-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][l，4]苯并二氮雜萆 (XIVff)進(jìn)行脫烷基化而制備的。MH+/Z = 415。實施例83
制備5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7-甲氧基_8_甲氧基乙氧基_3_甲基-吡唑并 [3，4-b][l，4]苯并二氮雜罩(IVgg) 5-(2_氯苯基)-1，2_ 二氫-7-甲氧基_8_甲氧基乙氧基_3_甲基-吡唑并[3， 4_b][l，4]苯并二氮雜萆(IVgg)是以類似于實施例72的方式，通過使0.0023摩爾的 (2-氨基-5-甲氧基-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-(2_氯苯基)-甲酮(Xgg)與4-氨 基-5-氯-3-甲基-l-(2-丙烯基)-1Η-吡唑(XIII)反應(yīng)，隨后用氫化二異丁基鋁對中間 體5-(2_氯苯基)-1，2_ 二氫-7-甲氧基-8-甲氧基乙氧基-3-甲基-l-(2-丙烯基)-吡 唑并[3,4-b] [1,4]苯并二氮雜萆(XIVgg)進(jìn)行脫烷基化而制備的。MH+/Z = 413。實施例84制備8-氯-5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-3，7-二甲基-吡唑并[3,4-b] [1,4]苯并 二氮雜萆(IVhh) 8-氯-5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-3，7-二甲基-吡唑并[3,4-b] [1,4]苯并二氮 雜蕈(IVhh)是以類似于實施例72的方式，通過使0.0023摩爾的(2-氨基-4-氯-5-甲 基苯基)-(2_氯苯基)-甲酮(Xhh)與4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-IH-吡唑 (XIII)反應(yīng)，隨后用氫化二異丁基鋁對中間體8-氯-5- (2-氯苯基)-1，2- 二氫-3，7- 二甲 基-l-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b] [1,4]苯并二氮雜罩(XIVhh)進(jìn)行脫烷基化而制備的。 MH+/Z = 357。實施例85制備5-(2_氯苯基)-1，2_ 二氫-7-甲氧基-8_(1_甲基乙氧基)_3_甲基-吡唑 并[3，4-b] [1,4]苯并二氮雜萆(IVii) 5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7-甲氧基-8_(1_甲基乙氧基)_3_甲基-吡唑并[3， 4_b][l，4]苯并二氮雜草(IVii)是以類似于實施例72的方式，通過使0. 0023摩爾的(2-氨 基-5-甲氧基-4-(l-甲基乙氧基)苯基)-(2_氯苯基)-甲酮(Xii)與4-氨基-5-氯-3-甲 基-1-(2-丙烯基)-1Η-吡唑(XIII)反應(yīng)，隨后用氫化二異丁基鋁對中間體5-(2_氯苯 基)-1，2- 二氫-7-甲氧基-8- (1-甲基乙氧基)-3-甲基-1- (2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b] [1,4]苯并二氮雜罩(XIVii)進(jìn)行脫烷基化而制備的。MH+/Z = 397。實施例86制備5-(2_氯苯基)-1，2_ 二氫-8-甲氧基-7_(1_甲基乙氧基)_3_甲基-吡唑 并[3,4-b] [1,4]苯并二氮雜草(IVjj) 5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-8-甲氧基-7_(1_甲基乙氧基)_3_甲基-吡唑并[3， 4-b] [1,4]苯并二氮雜萆(IVjj)是以類似于實施例72的方式，通過使0. 0023摩爾的(2-氨 基-4-甲氧基-5- (1-甲基乙氧基)苯基)_ (2-氯苯基)-甲酮(Xjj)與4-氨基-5-氯-3-甲 基-l-(2-丙烯基)-1Η-吡唑(XIII)反應(yīng)，隨后用氫化二異丁基鋁對中間體5-(2_氯苯 基)-1，2- 二氫-8-甲氧基-7- (1-甲基乙氧基)-3-甲基-1- (2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b] [1,4]苯并二氮雜罩(XIVjj)進(jìn)行脫烷基化而制備的。MH+/Z = 397。實施例87制備5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-8-甲氧基_7_甲氧基乙氧基_3_甲基-吡唑并 [3,4-b] [1,4]苯并二氮雜罩(IVkk) 5-(2_氯苯基)-1，2_ 二氫-8-甲氧基_7_甲氧基乙氧基_3_甲基-吡唑并[3，4_b][l，4]苯并二氮雜萆(IVkk)是以類似于實施例72的方式，通過使0.0014摩爾的 (2-氨基-4-甲氧基-5-(2_甲氧基乙氧基)苯基)-(2_氯苯基)_甲酮(Xkk)與4-氨 基-5-氯-3-甲基-l-(2-丙烯基)-1Η-吡唑(XIII)反應(yīng)，隨后用氫化二異丁基鋁對中間 體5-(2-氯苯基)-1，2-二氫-8-甲氧基-7-甲氧基乙氧基-3-甲基-l-(2-丙烯基)-吡 唑并[3，4-b] [1,4]苯并二氮雜草(XIVkk)進(jìn)行脫烷基化而制備的。MH+/Z = 413。實施例88制備4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-IH-吡唑(XIII)，方法1(方案δ) 步驟1 制備5-氨基-3-甲基-l-(2-丙烯基)_1Η_吡唑_4_羧酸乙酯(XV)向10. 3g(0. 056摩爾)的2_氰基-3-乙氧基_2_ 丁烯酸乙酯在250mL甲醇中的 溶液中，加入8. 9g(0. 0616摩爾)的烯丙基胼二鹽酸鹽和39mL的三乙胺。將反應(yīng)混合物于 80°C回流3小時，然后減壓下濃縮。將剩余物由用乙酸乙酯-己烷(1 1)洗脫的硅膠色 譜純化，得到6. 7g的5-氨基-3-甲基-1- (2-丙烯基)-IH-吡唑-4-羧酸乙酯(XV)，為黃 色油。步驟2 制備5-氯-3-甲基-l-(2-丙烯基)_1Η_吡唑_4_羧酸乙酯(XVI)向6. 7g (0.032摩爾)的5_氨基_3_甲基(2_丙烯基)-IH-吡唑_4_羧酸乙酯
(XV)在30mL濃鹽酸中的溶液中，加入8.6g (0.064摩爾)的氯化銅(II)。將混合物冷卻至 0°C，并且在20分鐘內(nèi)，分批地加入2. 65g(0.038摩爾)的亞硝酸鈉。將混合物于室溫攪拌 1小時，然后于40°C攪拌2小時。將混合物用50mL水稀釋，并且用氯仿萃取兩次。將氯仿 萃取物用無水硫酸鈉干燥，過濾，并且減壓下濃縮。將剩余物由用乙酸乙酯-己烷(1 4) 洗脫的硅膠色譜純化，得到5. Og的5-氯-3-甲基-1- (2-丙烯基)-IH-吡唑-4-羧酸乙酯
(XVI)，為淡黃色油。步驟3 制備5-氯-3-甲基-l-(2-丙烯基)_1Η_吡唑_4_羧酸(XVII)
向5. Og (0.0249摩爾)的5_氯_3_甲基(2_丙烯基)-IH-吡唑_4_羧酸乙酯 (XVI)在40mL的四氫呋喃-水-甲醇(3 1 1)中的溶液中，加入5mL IOM氫氧化鈉溶 液。將混合物于65°C加熱4小時，然后在減壓下濃縮至更小的體積。通過加入鹽酸，將pH調(diào) 節(jié)至1-2。將產(chǎn)物通過過濾收集，用水洗滌，并且干燥，得到4. 7g的5-氯-3-甲基-1- (2-丙 烯基)-IH-吡唑-4-羧酸(XVII)，為茶色固體。步驟4:制備5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-IH-吡唑-4-羰基疊氮化物(XVIII)向-10°C的6. 0g(0. 030摩爾)的5_氯_3_甲基(2_丙烯基)-IH-吡唑_4_羧 酸(XVII)、4. 2mL(0. 030摩爾)的三乙胺和IOOmL的丙酮的溶液中，加入2. 9mL(0. 030摩爾) 的氯甲酸乙酯。30分鐘后，加入在50mL水中的5. 8g(0. 090摩爾)的疊氮化鈉。將混合物 于室溫攪拌1小時，然后減壓下濃縮至約原始體積的一半。將混合物用氯仿萃取兩次，并且 將萃取物用無水硫酸鈉干燥，過濾，并且在減壓下濃縮，得到4. 7g5-氯-3-甲基-1- (2-丙 烯基)-IH-吡唑-4-羰基疊氮化物(XVIII)，為白色固體。步驟5 制備4-氨基-5-氯-3-甲基_1-(2_丙烯基)_1Η_吡唑(XIII)將12. 3g(0. 0545摩爾)的5_氯_3_甲基_1-(2_丙烯基)_1Η_吡唑_4_羰基疊 氮化物(XVIII)在120mL甲苯中的溶液于100°C加熱1小時。加入20mL的鹽酸，并且將混 合物于110°C加熱2小時，然后冷卻。將混合物減壓下濃縮，然后與50mL的二氯甲烷和IOmL 的三乙胺一起于室溫攪拌。將混合物過濾，并且將濾液在減壓下濃縮。將剩余物由用乙酸 乙酯-己烷(1 1)洗脫的硅膠色譜純化，得到6. Og的4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙 烯基)-IH-吡唑(XIII)，為橙色油。MS MH+/Z 172該材料具有用于隨后反應(yīng)的足夠的純度。實施例89制備4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-IH-吡唑(XIII)，方法2 (方案6) 步驟1 制備5-氯-3-甲基-4-硝基-l-(2-丙烯基)_1Η_吡唑(XX)在氬氣下，向5. Og (0. 031摩爾)的5_氯_3_甲基~4~硝基-IH-吡唑在IOOmL的 無水四氫呋喃中的溶液中，加入0. 37g(0. 0464摩爾)的氫化鋰。將混合物于室溫攪拌15 分鐘。然后，加入5. 6g(0. 0464摩爾)的烯丙基溴，并且將混合物于80°C加熱10小時。將 混合物冷卻，傾倒在冰上，并且用乙酸乙酯萃取兩次。將合并的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干 燥，過濾，并且減壓下濃縮。將剩余物由用乙酸乙酯-己烷(1 2)洗脫的硅膠色譜純化，得 到作為高極性成分的1. 36g3-氯-5-甲基-4-硝基-l-(2-丙烯基)-IH-吡唑，為無色油， 和作為低極性成分的0. 5g5-氯-3-甲基-4-硝基-1-(2-丙烯基)-IH-吡唑(XX)，為無色 油。步驟2 還原XX，生成4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-IH-吡唑(XIII)
將0. 5g (0. 00248摩爾)的5_氯_3_甲基~4~硝基(2_丙烯基)-IH-吡唑 (XX)、1. 6g (0. 0198摩爾)的氯化銨、1. 6g的鋅粉、20mL的甲醇和20mL的水的混合物于室溫 攪拌1小時。將混合物過濾，并且將濾液用乙酸乙酯萃取。將乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干 燥，過濾，并且減壓下濃縮。剩余物由用乙酸乙酯-己烷(1 1)洗脫的硅膠色譜純化，得 到0. IOg的4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-IH-吡唑(XIII)，其與在上面實施例 88(方法1)中制備的材料相同。實施例90制備5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7-氟-8-甲氧基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并二 氮雜罩(XXIIa) 向0. 64g(0. 0019 摩爾)的 5_(2-氯苯基)_1，3_ 二氫 _7_ 氟-8-甲氧基-2H-1， 4_苯并二氮雜草-2-硫酮(IIa)在5mL的二氯甲烷中的溶液中，加入5mL (0.029摩爾)的 1，1-二乙氧基-N，N-二甲基-甲胺。將混合物于室溫攪拌過夜，然后減壓下濃縮。將含有 中間體XXIa的剩余物與18mL的二氯甲烷、5. 5mL的甲醇和0. 3mL的胼的混合物一起攪拌 6小時，然后在二氯甲烷和水之間分配。將二氯甲烷層用水洗滌兩次，用無水硫酸鈉干燥， 過濾，并且減壓下濃縮。將產(chǎn)物由用乙酸乙酯-己烷(4 1)洗脫的硅膠色譜純化，提供 0. 500g的5- (2-氯苯基)-1，2- 二氫-7-氟-8-甲氧基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并二氮雜 草(XXIIa)。從二氯甲烷-乙酸乙酯中重結(jié)晶，得到XXIIa，為淡紅色固體，mp 242-2430C0實施例91制備5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-8-甲氧基_7_甲基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并 二氮雜萆(XXIIz) 5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-8-甲氧基_7_甲基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并二氮 雜萆(XXIIz)是以類似于實施例90的方式，通過使0.003摩爾的5-(2_氯苯基)-1，3_ 二 氫-8-甲氧基-7-甲基-2H-1，4-苯并二氮雜草-2-硫酮(IIz)與1，1_ 二乙氧基_N，N_ 二 甲基-甲胺反應(yīng)，然后與胼反應(yīng)而制備的。從乙酸乙酯-甲醇中重結(jié)晶，提供5-(2_氯苯 基)-1，2_ 二氫-8-甲氧基-7-甲基-吡唑并[3，4-b] [1,4]苯并二氮雜萆，為淡紅色固體， mp 275-276"C。實施例92制備5-(2-氯苯基)_1，2-二氫-7-氰基-8-甲氧基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并 二氮雜草(XXIIb) 5-(2_氯苯基)-1，2_二氫-7-氰基-8-甲氧基-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并二氮雜'M (XXIIb)是以類似于上面的實施例的方式，通過使0. 00096摩爾的5-(2-氯苯基)-7-氰
基-1，3- 二氫-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮雜草-2-硫酮(I Ib)與1，1- 二乙氧基-N，N- 二 甲基-甲胺反應(yīng)，然后與胼反應(yīng)而制備的。從乙酸乙酯中重結(jié)晶，提供5-(2_氯苯基)-1， 2-二氫-7-氰基-8-甲氧基-吡唑并[3，4-b] [1,4]苯并二氮雜草(XXIIb)，為淡紅色固體，
mp 288--290 "C。
實施例93
片劑制劑
項組分 Mg/片
1 化合物1* 5 25 100250500 750
2 無水乳糖 103 83 351938 57
3 交聯(lián)羧甲基6 6 81632 48
纖維素鈉
4 聚乙烯吡咯 5 5 61224 36
烷酮K30
5 硬脂酸鎂 1 1 136 9
總重 120 120 150300600 900
*化合物1表示本發(fā)明的一種化合物。
制備步驟
在適宜的混合器中將第1、2和3項混合15分鐘。
用20%聚乙烯吡咯烷酮K30溶液(第4項)對來自步·
在50°C下干燥來自步驟2的顆粒。
使來自步驟3的顆粒通過適宜的研磨設(shè)備。
將第5項加入到研磨的制粒步驟4中并混合3分鐘。
在適宜的壓片機(jī)上壓制來自步驟5的顆粒。
實施例94
膠囊劑
項組分 mg/膠囊
1 化合物1* 5 25100250 500
2 無水乳糖 159 123148— —
3 米淀粉 25 354035 70
4 滑石 10 151012 24
5 硬脂酸鎂 1 223 6
總填充重量 200 200300300 600
*化合物1表示本發(fā)明的化合物。
制備步驟
在適宜的混合器中將第1、2和3項混合15分鐘。
加入第4和5項并混合3分鐘。
填充入適宜的膠囊。
實施例95注射液/乳劑制劑 項 組分 mg/mL 1 化合物Γ Img FEG 400
卵磷脂 大豆油 甘油 水適量
10-50mg 20-50mg l_5mg 8-12mg ImL
*化合物1表示本發(fā)明的化合物。 制備步驟
溶解第1項于第2項中。
將第3、4和5項加入到第6項中并混合至分散，然后勻化。
將來自步驟1的溶液加入到來自步驟2的混合物中，并勻化至分散液變?yōu)榘胪该?
無菌過濾通過0. 2 μ m濾膜并裝入小瓶。
實施例96
注射液/乳劑制劑項組分mg/mL
1化合物Img
2四氫呋喃聚乙二醇醚 10-50mg
3卵磷脂20-50mg
4大豆油l_5mg
5甘油8-12mg
6水適量至ImL
*化合物1表示本發(fā)明的化合物。
制備步驟
溶解第1項于第2項中。
將第3、4和5項加入到第6項中并混合至分散，然后勻化。 將來自步驟1的溶液加入到來自步驟2的混合物中，并勻化至分散液變?yōu)榘胪该鳌?無菌過濾通過0. 2 μ m濾膜并裝入小瓶。
如下證明本發(fā)明化合物的抗血管源性活性和抗增殖活性。這些效果表明感興趣的 化合物在抑制血管生成并且在治療癌癥，特別是實體瘤如乳腺和結(jié)腸癌方面是有用的。 實施例97
CDK2Flash Plate 測定
為確定CDK2活性的抑制，將純化的重組成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤(Rb)蛋涂布在96孔 FlashPlate 培養(yǎng)板(New England Nuclear,Boston,ΜΑ)上。Rb 是由 CDK2 介導(dǎo)的磷酸化的 天然底物(Herwig和Strauss Eur. Biochem.，246卷(1997) 581-601頁，和該文引用的參考 文獻(xiàn))。從昆蟲細(xì)胞提取物中部分純化重組活性人細(xì)胞周期蛋白E/CDK2復(fù)合物。將活性 細(xì)胞周期蛋白E/CDK2與33P-ATP和測試化合物的稀釋物一起加入到Rb涂布的FlashPlate 中。室溫?fù)u動孵育該板25分鐘，然后洗滌，并在Topcount閃爍計數(shù)器(Packard InstrumentCo.，Downers Grove, IL)中計數(shù)。測試化合物的稀釋物在每個測定中一式兩份進(jìn)行檢測。 依照下式，確定Rb磷酸化的抑制百分比，其為CDK2活性抑制的衡量標(biāo)準(zhǔn) 其中，“實驗化合物”指的是重復(fù)實驗的平均數(shù)/分鐘，“非特異性數(shù)”指的是當(dāng)不 加入細(xì)胞周期蛋白E/CDK2時的平均數(shù)/分鐘，“總數(shù)”指的是當(dāng)不加入化合物時的平均數(shù)/ 分鐘。本發(fā)明化合物的CDK2IC5Q值低于10 μ Μ,優(yōu)選低于1 μ Μ。代表性化合物的KDR IC50 值列于下面的表I中。表 ICDK2 的抑制 實施例98KDR&FGFr為了測定對 KDR 和 FGFR 的抑制作用，使用 HTRF (Homogeneous TimeResolved Fluorescence)測定法進(jìn)行激酶試驗。該測定法描述在A. J. Kolb等，Drug Discovery Today, 1998,3(7)，ρ 333 中。在激酶反應(yīng)前，在活化緩沖液(50mM HEPES, pH 7.4、lmM DTT、10 %甘油、150mM NaCl、0. ImM EDTA、26mM MgCljn4mM ATP)存在下活化重組 EEE-標(biāo)記的 KDR。將該酶在 4°C 溫育1小時。在96-孔聚丙烯平板(Falcon)中進(jìn)行激酶活性試驗，其中各孔中總體積為90 μ L。 各孔中含有1 μ M KDR底物(生物素-EEEEYFELVAKKKK)、InM活化的KDR和100 μ M至 128ρΜ(1 5連續(xù)稀釋)范圍內(nèi)的8個試驗濃度之一的測試化合物。在IOOmM HEPES，pH 7. 4、lmM DTT,0. ImMNa2VO4,25mM MgCl2、50mM NaCl (來自 KDR 儲備溶液)、1 % DMSO(來自化 合物)、0. 3mM ATP (在Km濃度下)和0. 02% BSA存在下，進(jìn)行激酶活性試驗。將該反應(yīng)體 系在37°C下溫育30分鐘。為了終止KDR反應(yīng)，將72 μ L反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)入含有18 μ L展開 緩沖液(20mM EDTA、50mMHEPES，pH 7. 4,0. 02% BSAUOnM Eu-標(biāo)記的抗-pY 抗體(終濃度 2ηΜ)和IOOnM鏈霉抗生物素(終濃度20ηΜ))的STOP平板中?；旌虾?，將35 μ L的溶液轉(zhuǎn)Λ 384-孔黑平板(Costar)的兩個孔中，并用Wallac Victor 5讀出器在615/665nm處讀數(shù)。如上述對KDR活性試驗所述進(jìn)行FGFR活性試驗，但有如下區(qū)別。在室溫，于下列活 化緩沖液中將GST-標(biāo)記的FGFR酶活化 1 小時1 OOmMHEPES，pH 7. 4、50mM NaCl、20mM MgCl2 和 4mM ATP。在 IOOmMHEPESUmM DTT、0. 4mM MgCl2、0. 4mM MnCl2,50mM NaClU % DMSOUO μ M ATP (對 FGFR 而言 Km = 8· 5 μ Μ)、0· ImM Na2VO4 和 0. 02 % BSA 存在下，使用 1 μ M 底物(生物 素-EEEEYFELV)、1. 5ηΜ活化的FGFR和測試化合物進(jìn)行激酶活性試驗，總體積為90 μ L。按 照與KDR試驗相同的方式進(jìn)行試驗的其余部分。根據(jù)一式兩份的數(shù)據(jù)組確定化合物的IC5tl值，并通過使用Excel和與等式Y(jié) = [(a-b)/{l+(X/c)d]+b的擬合數(shù)據(jù)進(jìn)行計算，其中a和b分別為在沒有測試抑制劑化合物存 在和有極大量測試抑制劑化合物存在下的酶活性，c為IC5tl且d為化合物響應(yīng)的希爾常數(shù)。 IC50值是在所述測試條件下將酶的活性降低50%的測試化合物濃度。本發(fā)明化合物的KDR IC5tl值低于10 μ M，優(yōu)選低于1 μ M，最優(yōu)選低于0.5 μ M，或 FGFR IC50值低于10 μ Μ,優(yōu)選低于1 μ Μ。最優(yōu)選地，本發(fā)明化合物的KDR IC50值低于1 μ M 和FGFR IC50值低于1 μ Μ。代表化合物的KDR IC50值列于下面的表II中，并且代表化合物 的FGFR IC50值列于下面的表III中。表IIKDR的抑制 表 IIIFGFR 的抑制 實施例99MDA-MB-435, SW480 和 HCT-116從American Type Cell Culture Collection (ATOC ；Rockvilie, MD)購買雌激素 受體陰性上皮乳腺癌系(MDA-MB-435)，并且在ATCC推薦的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。為了分析測試化 合物對這些細(xì)胞生長的影響，將該細(xì)胞在96孔組織培養(yǎng)板上以每孔2000個細(xì)胞進(jìn)行鋪板， 然后在37°C、5%C02下溫育過夜。第二天，將測試化合物溶解于100%二甲亞砜(DMSO)中， 制成IOmM儲備液。將每種化合物用足夠量的無菌培養(yǎng)基稀釋至ImM，得到最終濃度120 μ Μ。 然后將該化合物用1.2% DMSO在培養(yǎng)基中連續(xù)稀釋。將四分之一最終體積的稀釋化合物 轉(zhuǎn)移至96孔板上。重復(fù)檢測該測試化合物。將DMSO加入到一排“對照細(xì)胞”中，使每孔中 DMSO的終濃度達(dá)到0.3%。將沒有加入細(xì)胞的孔作為“空白”。將沒有加入抑制劑的孔作為 “無抑制劑對照”。將該板再重新置于培養(yǎng)箱中，加入測試化合物后5天，如下進(jìn)行分析。將3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基-2Η-四唑溴鐺(噻唑蘭；MTT)加入 到每孔上，得到最終濃度lmg/mL。然后將該板在37°C溫育3小時。在將含MTT培養(yǎng)基吸 出前，將該板在IOOOrpm下離心5分鐘。然后取出含MTT培養(yǎng)基，將100 μ L 100%乙醇加 入到每孔中，以溶解最終的甲月替代謝物。為了保證完全溶解，將該板在室溫?fù)u動15分鐘。 570歷下在微量滴定板讀數(shù)器(Molecular Dynamics)上讀出吸光度讀數(shù)，650nm下讀數(shù)作 為對照。通過所有孔的值減去空白孔(沒有細(xì)胞)的吸光度，然后用1.00減去每個測試化 合物重復(fù)測定的平均值與對照平均值的比值，計算抑制百分比。對濃度的對數(shù)值/抑制百 分比曲線進(jìn)行線性回歸，確定抑制濃度(IC5tl)。本發(fā)明化合物的MDA-MB-435IC5Q值低于20μΜ，優(yōu)選低于2μΜ。對于5_(2_氯苯 基)-1，3- 二氫-7，8- 二甲基-2Η-1，4-苯并二氮雜罩-2-酮(Iw)，在MDA-MB-435細(xì)胞基試 驗中抑制的IC50值為0. 950 μ Μ。還從ATCC獲得結(jié)腸腺癌系SW480和結(jié)腸癌系HCT-116，并且按照上述與 MDA-MB-435細(xì)胞基檢測相同的方案進(jìn)行檢測，只是進(jìn)行以下修改。細(xì)胞系SW480以每孔 1000細(xì)胞進(jìn)行鋪板，在加入測試化合物后第6天進(jìn)行檢測。細(xì)胞系HCT-116以每孔1000細(xì) 胞進(jìn)行鋪板，在加入測試化合物后第4天進(jìn)行分析。本發(fā)明化合物的SW480IC5Q值低于20μΜ，優(yōu)選低于2μΜ。對于5_ (2_氯苯基)_1， 3- 二氫-7，8- 二甲基-2Η-1，4-苯并二氮雜草-2-酮(Iw)，在SW480 (結(jié)腸)基試驗中抑制 的 IC50 值為 0. 950 μ Μ。本發(fā)明化合物的HCT-116IC5(1值低于20 μ Μ，優(yōu)選低于2 μ Μ。對于代表性化合物， 在HCT-116 (結(jié)腸)基試驗中抑制的IC5tl值列于下面的表IV中。表IV抗增殖活性HCT 116 (結(jié)腸)試驗 實施例100VEGF和FGF-刺激的HUVBC增殖試驗通過BrdU 試驗、使用 BrdU 試劑盒(Roche Biochemicals 1-647-229)評價本發(fā) 明測試化合物在細(xì)胞基試驗中的抗增殖活性。將人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC，Clonetics CC-2519)在EGM-2 (Clonetics CC-3162)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并以10000個細(xì)胞/孔在96-孔平 底平板(Costar 3595)中體積為200 μ L的EGM-2 (Clonetics CC-3162)培養(yǎng)基中接種過夜。 在37°C和5% CO2下培養(yǎng)24小時后，通過抽吸緩慢除去溫育培養(yǎng)基，并用含有50 μ g/mL慶 大霉素和501^/1^兩性霉素-8((101^^化8 CC-4083)的 300 μ L 預(yù)溫?zé)岬?EBM-2 (Clonetics CC-3156)洗滌各孔中的內(nèi)含物。隨后再次抽吸剩余的培養(yǎng)基，并用160 μ L/孔缺血清的培 養(yǎng)基(補充了 加熱失活的FBS(CloneticsCC-4102)、50y g/mL慶大霉素和50ng/mL兩 性霉素-B (Clonetics CC-4083)、10 個單位/mL Wyeth-Ayerst 肝素(NDC0641-0391-25)和 2mM L-谷氨酰胺(GIBC0 25030-081)的EBM-2)替代。在對細(xì)胞進(jìn)行缺血清24小時后，將 20 μ L在含有2. 5% DMSO的缺血清培養(yǎng)基中IOX測試濃度的測試化合物加入到適宜的孔 中。對照孔含有20 μ L含有2. 5% DMSO的缺血清培養(yǎng)基。將平板放回培養(yǎng)箱內(nèi)2小時。在 將細(xì)胞與測試化合物一起預(yù)溫育2小時后，加入在缺血清培養(yǎng)基中IOX稀釋的測試濃度的 20 μ L 生長因子、50ng/mL 的 FGF 或 200ng/mL 的 VEGF (R&D systems 293-VE)。本試驗中 FGF 的終濃度為5ng/mL，且本試驗中VEGF的終濃度為20ng/mL。不含生長因子的對照孔中含有 20 μ L/孔的缺血清培養(yǎng)基和與含有生長因子的孔中相同量的BSA。將平板再放回培養(yǎng)箱內(nèi) 22小時。BrdU ELISA在接觸測試化合物24小時后，通過加入已經(jīng)在缺血清培養(yǎng)基中稀釋(1 100)的 20 μ L/孔的BrdU標(biāo)記試劑而用BrdU (Roche Biochemicalsl-647-229)標(biāo)記細(xì)胞。然后將 平板放回到培養(yǎng)箱內(nèi)4小時。通過在紙巾上吸干培養(yǎng)基除去標(biāo)記培養(yǎng)基。通過將200yL 固定/變性溶液加入到各孔中并在室溫下溫育45分鐘而固定細(xì)胞并使DNA變性。在紙巾 上吸干固定/變性溶液并向各孔中加入100 μ L抗-BrdU-POD，并在室溫下將各孔溫育2小 時。除去抗體溶液并用300 μ L PBS將孔各自洗滌3-4次。向各孔中加入100 μ LTMB底物 溶液，并將各孔在室溫下溫育5-8分鐘。然后通過加入100 μ L/孔的IM磷酸終止反應(yīng)。在 450nm處與650nm對照波長處讀取平板。通過下列步驟計算各測試化合物的抑制百分比 從所有孔中扣除空白(不含細(xì)胞)孔的吸光度，然后用1減去一式兩份的每次測試的平均吸光度與對照平均值的比值。隨后將終產(chǎn)物乘以100(抑制(ι-—式兩份測試的平均 吸光度/對照平均值)100)。IC5tl值為抑制50% BrdU標(biāo)記的測試化合物濃度且為抑制細(xì) 胞增殖的測定值。根據(jù)對濃度的對數(shù)與抑制百分比的曲線進(jìn)行線性回歸來確定IC5(I。本發(fā)明化合物的VEGF-刺激的HUVEC試驗IC5tl值低于10 μ Μ,優(yōu)選低于1 μ Μ，或 FGF-刺激的HUVEC試驗IC5tl值低于10 μ Μ,優(yōu)選低于1 μ Μ。更優(yōu)選地，本發(fā)明化合物的 VEGF-刺激的HUVEC試驗IC5tl值低于1 μ Μ,并且TOF-刺激的HUVEC試驗IC5tl值低于1 μ Μ。 代表性化合物在VEGF-刺激的HUVEC試驗中的IC5tl值提供于表V中，并且代表性化合物在 FGF-刺激的HUVEC試驗中的IC5tl值提供于下面的表VI中。表V抗增殖活性VEGF-刺激的HUVEC試驗 表VI抗增殖活性FGF-刺激的HUVEC試驗 實施例101H460a 從(AT0C ；Rockvilie, MD)購買H460a細(xì)胞系，并且在ATCC推薦的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。 為了分析測試化合物對這些細(xì)胞生長的影響，將該細(xì)胞在96孔組織培養(yǎng)板上以每孔150個 細(xì)胞進(jìn)行鋪板，然后在37°C、5% CO2下溫育過夜。第二天，將測試化合物溶解于100%二甲 亞砜(DMSO)中，制成IOmM儲備液。將每種化合物用足夠量的無菌培養(yǎng)基稀釋至ImM，得到最終濃度120μΜ。然后將該化合物用1.2% DMSO在培養(yǎng)基中連續(xù)稀釋。將四分之一最終 體積的稀釋化合物轉(zhuǎn)移至96孔板上。重復(fù)檢測該測試化合物。將DMSO加入到一排“對照 細(xì)胞”中，使每孔中DMSO的終濃度達(dá)到0.3%。將沒有加入細(xì)胞的孔作為“空白”。將沒有 加入抑制劑的孔作為“無抑制劑對照”。將該板再重新置于培養(yǎng)箱中，加入測試化合物后第 5天，如下進(jìn)行分析。將3-(4，5- 二甲基噻唑-2-基)_2，5_ 二苯基_2Η_四唑鐺溴化物(噻唑蘭；MTT) 加入到每孔上，得到最終濃度lmg/mL。然后將該板在37°C溫育3小時。在將含MTT培養(yǎng)基 吸出前，將該板在IOOOrpm下離心5分鐘。然后取出含MTT培養(yǎng)基，將100 μ L 100%乙醇加 入到每孔中，以溶解最終的甲月替代謝物。為了保證完全溶解，將該板在室溫?fù)u動15分鐘。 在微量滴定板讀數(shù)器(Molecular Dynamics)上讀出570nm波長處的吸光度，在650nm波長 處讀數(shù)作為對照。通過從所有孔的值減去空白孔(沒有細(xì)胞)的吸光度，然后用1.00減去 每個測試化合物重復(fù)測定的平均值與對照平均值的比值，得到抑制百分比。通過對濃度的 對數(shù)值/抑制百分比的曲線進(jìn)行線性回歸，確定抑制濃度(IC5tl)。本發(fā)明化合物的H460a IC50值低于20 μ Μ,優(yōu)選低于2 μ Μ。對于代表性化合物，在 H460a基試驗中抑制的IC5tl值列于表VII中。在H460a試驗中，對于代表性化合物的IC9tl值 列于下面的表VII中。表VII抗增殖活性H460a試驗 如上所述，本發(fā)明化合物具有抗血管源性活性，因而可以用于抑制個體中的血管 生成。血管生成與癌癥相關(guān)。具體而言，腫瘤在沒有新血管生長以供給和滋養(yǎng)它們的情況下 僅可以生長到一定的尺寸。因此，通過抑制這種新血管的生長，本發(fā)明的化合物可以用于治 療癌癥。因此，本發(fā)明提供一種抑制患者中血管生成的方法，該方法包括給藥治療有效量， 即血管生成-抑制量的式IV的化合物。除了它們的抗血管源性活性外，本發(fā)明的化合物還是各種激酶如CDK2、KDR和 FGFr的抑制劑。這些激酶的抑制影響腫瘤細(xì)胞的增殖。因此，本發(fā)明還提供通過直接抑制 激酶而抑制腫瘤生長的方法。本發(fā)明提供用于治療癌癥的方法，該方法包括給患有癌癥的患者給藥治療有效量 的本發(fā)明化合物或其藥用鹽。具體而言，本發(fā)明提供用于治療乳腺癌的方法，該方法包括給 患有乳腺癌的患者給藥治療有效量的本發(fā)明化合物或其藥用鹽。本發(fā)明還提供用于治療前 列腺癌的方法，該方法包括給患有前列腺癌的患者給藥治療有效量的本發(fā)明化合物或其藥 用鹽。本發(fā)明進(jìn)一步提供用于治療結(jié)腸癌的方法，該方法包括給患有結(jié)腸癌的患者給藥治 療有效量的本發(fā)明化合物或其藥用鹽。本發(fā)明提供用于治療肺癌的方法，該方法包括給患有肺癌的患者給藥治療有效量的本發(fā)明化合物或其藥用鹽。 盡管參照具體和優(yōu)選實施方案解釋了本發(fā)明，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解可以通 過常規(guī)實驗和實施本發(fā)明進(jìn)行改變和修改。因此，本發(fā)明并不限于上述描述，而由后附權(quán)利 要求及其等同技術(shù)方案定義。
權(quán)利要求
式XIV的化合物其中R1為C1 6烷基，C1 6烷氧基，鹵素，COOH，COO C1 6 烷基，CN，C(O)N(R6)2或(OCH2CH2)nOCH3；R2為C1 6烷基，鹵素，被鹵素取代的C1 6烷基，OH，C1 6烷氧基，被鹵素取代的C1 6烷氧基，苯基，N(R6)2，(OCH2CH2)nOCH3，O(CH2)mNR7R8或為任選被C1 6烷基或C(O)OR6取代的6元雜環(huán)；或者R1和R2一起形成5元雜環(huán)；R4為氫，鹵素，CN，NO2，C1 6烷基或C1 6烷氧基；每個R6獨立地為氫或C1 6烷基；R7和R8各自獨立地為氫，C1 6烷基或C1 6烷氧基 C1 6 烷基；或R7和R8與它們連接的氮原子一起形成任選被C1 6烷基取代的6元雜環(huán)；每個n獨立地為1，2或3；以及m為2，3或4。FSA00000082095900011.tif,FSA00000082095900012.tif,FSA00000082095900013.tif
2.權(quán)利要求1的化合物，選自(5-(2-氯苯基)-1，2-二氫-3，7，8-三甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4_b] [1，4]苯 并二氮雜罩；(5-(2_氯苯基)-1，2_ 二氫-7-氟-8-甲氧基-3-甲基-l-(2-丙烯基)-吡唑并[3， 4_b][l，4]苯并二氮雜罩；(5- (2-氯苯基)-1，2- 二氫-7，8- 二甲氧基-3-甲基-1- (2-丙烯基)-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并二氮雜章；(8-氯-5-(2-氯苯基)-1，2_ 二氫-7-甲氧基-3-甲基-l-(2-丙烯基)-吡唑并[3， 4_b][l，4]苯并二氮雜萆；(5- (2-氯苯基)-1，2- 二氫-8-甲氧基-3，7- 二甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并二氮雜罩；(1，2-二氫-7，8-二甲氧基-5-(2-甲氧基苯基)-3-甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3， 4_b][l，4]苯并二氮雜罩；(5-(2-氯苯基)-8，10-二氫-7-甲基-1，3-二氧戊環(huán)并[4，5-h]吡唑并[3，4_b] [1,4]苯并二氮雜萆；以及7-氯-5-(2-氯苯基)-1，2-二氫-8-甲氧基-3-甲基-l-(2-丙烯基)-吡唑并[3， 4_b][l，4]苯并二氮雜草。
3.權(quán)利要求1的化合物，選自5-(2_氯苯基)-1，2_ 二氫-8-氟-7-甲氧基-3-甲基-l-(2-丙烯基)-吡唑并[3， 4_b][l，4]苯并二氮雜罩；5- (2-氯苯基)-1，2- 二氫-7-甲氧基-3-甲基-1- (2-丙烯基)_8_三氟甲基-吡唑并 [3，4-b][l，4]苯并二氮雜萆；5-(2-氯苯基)-1，2-二氫-7-甲氧基-3-甲基-8-苯基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3， 4_b][l，4]苯并二氮雜罩；5-(2-氯苯基)-1，2-二氫-7-甲氧基-8-甲氧基乙氧基-3-甲基-l-(2-丙烯基)-吡 唑并[3，4-b][l，4]苯并二氮雜萆；8-氯-5-(2-氯苯基)-1，2- 二氫-3，7- 二甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4_b] [1， 4]苯并二氮雜草；5- (2-氯苯基)-1，2-二氫-7-甲氧基-8- (1-甲基乙氧基)-3-甲基-1- (2-丙烯基)-吡 唑并[3,4-b] [1,4]苯并二氮雜罩;5- (2-氯苯基)-1，2-二氫-8-甲氧基-7- (1-甲基乙氧基)-3-甲基-1- (2-丙烯基)-吡 唑并[3,4-b] [1,4]苯并二氮雜草；以及5- (2-氯苯基)-1，2- 二氫-8-甲氧基-7-甲氧基乙氧基-3-甲基-1- (2-丙烯基)-吡 唑并[3,4-b] [1,4]苯并二氮雜罩。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種二取代吡唑并苯并二氮雜類。本發(fā)明提供下式(I)的化合物，其中R1，R2，R3和R4如本文中所述。本發(fā)明還提供用于制備這種化合物的合成方法及含有這種化合物的藥物組合物。本發(fā)明還提供用于抑制激酶，特別是CDK2的方法，用于抑制血管生成的方法，和用于治療癌癥，特別乳腺、結(jié)腸、前列腺和肺癌的方法。
文檔編號C07D491/14GK101899049SQ20101015853
公開日2010年12月1日 申請日期2005年10月4日 優(yōu)先權(quán)日2004年10月13日
發(fā)明者任毅, 克希蒂吉·查比爾波?！に_卡, 劉進(jìn)軍, 張筑明, 彼得·米夏埃爾·沃庫利希, 賈科莫·皮佐拉托, 陸建春 申請人:霍夫曼-拉羅奇有限公司