專利名稱：一種從三葉海棠葉中提取白楊素苷的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及從三葉海棠葉中提取白楊素苷的方法，尤其是涉及一種采用超聲提取和大孔樹脂吸附提取白楊素苷的方法。
背景技術：
三葉海棠又名山里紅、山茶果，為薔科植物。三葉海棠具有較強的抗菌、抗炎、抗癌、降血壓、降血脂、利尿等療效作用。三葉海棠葉是一種能顯著增強人體免疫機能、具較營養(yǎng)價值的保健茶飲料。三葉海棠葉中含有咖啡堿、茶多酚、黃酮類、氨基酸等多種營養(yǎng)成分，其中黃酮類白楊素苷具有抗氧化、抗病毒、抗高血壓、降血糖和抑制芳香酶活性的作用，研究表明白楊素苷具有治療潰瘍性結腸炎、降血壓作用。特別受人關注的是其代謝產(chǎn)物具有腫瘤預防和治療作用。白楊素苷為5，7- 二羥基黃酮葡萄糖苷，溶于堿水、甲醇、乙醇、丙酮，微溶于熱水、 乙酸乙酯、正丁醇，不溶于石油醚、氯仿。現(xiàn)有提取白楊素苷工藝公開較少，一般為有機試劑提取。如“HPLC法測定三葉海棠葉中白楊素苷含量”，該文獻采取丙酮超聲提取，干樣上聚酰胺柱乙醇梯度洗脫，濃縮結晶，丙酮重結晶。此法采用丙酮提取，溶劑沸點低，對操作人員和環(huán)境危害嚴重，干樣上柱， 分離量較小，只適合實驗室生產(chǎn)。

發(fā)明內容
本發(fā)明要解決技術問題是提供一種從三葉海棠葉中提取白楊素苷的方法，該方法無毒性有機試劑，對操作人員無危害，產(chǎn)品無溶劑殘留控制，適合工業(yè)化生產(chǎn)。為解決上述問題，本發(fā)明的目的是通過以下技術方案來實現(xiàn)的一種從三葉海棠葉中提取白楊素苷的方法，其特征在于包含以下步驟1)提取取三葉海棠葉粉碎20-40目，加5-10倍量50-70%乙醇超聲提取2-3次， 得提取液；2)大孔樹脂吸附將上述提取液減壓回收乙醇濾過，加入大孔樹脂柱吸附，水洗至無糖色，再用4-6BV40-70%乙醇洗脫，收集洗脫液減壓濃縮，得濃縮液；3)萃取上述濃縮液調至PH8-9，加水飽和正丁醇萃取，保留水相調節(jié)PH3-5，再加入水飽和正丁醇萃取，收集正丁醇層，減壓濃縮，浸膏加入70-90 %乙醇回流溶解，過濾，濃縮1/2-1/3體積，放置結晶；4)重結晶濾出上述結晶物，熱水洗滌2-3次，再用乙醇回流溶解結晶，結晶物干燥得產(chǎn)品。所述步驟2)中大孔樹脂可選AB-8、HZ818、SPD-300和LSA-40中的一種。綜上所述本發(fā)明的優(yōu)點是采用三葉海棠葉原料易得，白楊素苷含量高，易于純化；超聲提取能耗低、雜質少；大孔樹脂吸附，操作簡單，處理量大；不同PH正丁醇萃取，除雜效果好，而且正丁醇揮發(fā)性小，比乙酸乙酯安全。下面將結合具體實施方式
進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
具體實施例方式實施例1 干燥三葉海棠葉粉碎40目，取lkg，加入10kg50%乙醇超聲提取1小時，抽濾液體，再加入8kg50%乙醇超聲提取0. 5小時，合并提取液減壓回收乙醇，濾過，加入IL AB-8大孔樹脂柱吸附，上柱流速0. 5L/h，吸附結束后，水洗至無糖色，流速控制2L/h，再用 6L40%乙醇洗脫，流速lL/h，收集洗脫液減壓濃縮至密度1.05，加5%氫氧化鈉溶液調節(jié) pH9，加IOOml水飽和正丁醇萃取3次，保留水相，再鹽酸溶液調節(jié)pH3，加入IOOml水飽和正丁醇萃取4次，收集正丁醇層減壓濃縮，浸膏加入70%乙醇回流溶解，趁熱抽濾，濃縮至1/3 體積，放置結晶12小時，濾出結晶物，加入IOOml熱水攪拌洗滌2次，濾餅用70%乙醇回流飽和溶解，重結晶，結晶物濾出，真空干燥得白楊素苷21. 6g，經(jīng)高效液相檢測含量93. 2%。實施例2:干燥三葉海棠葉粉碎20目，取1kg，加入乙醇超聲提取1小時，抽濾液體， 再加入8kg70%乙醇超聲提取0. 5小時，合并提取液減壓回收乙醇，濾過，加入1LHZ818大孔樹脂柱吸附，上柱流速lL/h，吸附結束后，水洗至無糖色，流速控制lL/h，再用5L50%乙醇洗脫，流速1. 5L/h，收集洗脫液減壓濃縮至密度1. 1，加5%碳酸鈉溶液調節(jié)pH8，加200ml 水飽和正丁醇萃取2次，保留水相，再鹽酸溶液調節(jié)pH5，加入IOOml水飽和正丁醇萃取3 次，收集正丁醇層減壓濃縮，浸膏加入90%乙醇回流溶解，趁熱抽濾，濃縮至1/2體積，放置結晶18小時，濾出結晶物，加入IOOml熱水攪拌洗滌3次，濾餅用80%乙醇回流飽和溶解， 重結晶，結晶物濾出，真空干燥得白楊素苷23. lg，經(jīng)高效液相檢測含量95. 1%。實施例3 干燥三葉海棠葉粉碎40目，取1kg，加入10kg50%乙醇超聲提取1小時，抽濾液體，再加入^^50%乙醇超聲提取0.5小時，合并提取液減壓回收乙醇，濾過，加入 1LSPD-300大孔樹脂柱吸附，上柱流速lL/h，吸附結束后，水洗至無糖色，流速控制2L/h，再用4L7%乙醇洗脫，流速lL/h，收集洗脫液減壓濃縮至密度1. 05，加5%氫氧化鈉溶液調節(jié) pH8，加200ml水飽和正丁醇萃取2次，保留水相，再鹽酸溶液調節(jié)pH4，加入IOOml水飽和正丁醇萃取4次，收集正丁醇層減壓濃縮，浸膏加入75%乙醇回流溶解，趁熱抽濾，濃縮至1/2 體積，放置結晶15小時，濾出結晶物，加入IOOml熱水攪拌洗滌3次，濾餅用65%乙醇回流飽和溶解，重結晶，結晶物濾出，真空干燥得白楊素苷28. 8g，經(jīng)高效液相檢測含量91. 2%。實施例4 干燥三葉海棠葉粉碎20-40目，取1kg，加入10kg60%乙醇超聲提取1小時，抽濾液體，再加入iokgeo%乙醇超聲提取ο. 5小時，合并提取液減壓回收乙醇，濾過，加入 1LLSA-40大孔樹脂柱吸附，上柱流速0. 8L/h，吸附結束后，水洗至無糖色，流速控制lL/h， 再用5L60%乙醇洗脫，流速lL/h，收集洗脫液減壓濃縮至密度1. 1，加5%碳酸鈉溶液調節(jié) pH9，加IOOml水飽和正丁醇萃取3次，保留水相，再鹽酸溶液調節(jié)pH3，加入200ml水飽和正丁醇萃取2次，收集正丁醇層減壓濃縮，浸膏加入90%乙醇回流溶解，趁熱抽濾，濃縮至1/3體積，放置結晶20小時，濾出結晶物，加入IOOml熱水攪拌洗滌2次，濾餅用80%乙醇回流飽和溶解，重結晶，結晶物濾出，真空干燥得白楊素苷24. 2g，經(jīng)高效液相檢測含量91. 8%。實施例5 干燥三葉海棠葉粉碎40目，取^g，加入35kg50%乙醇超聲提取1小時，抽濾液體，再加入乙醇超聲提取0. 5小時，濾渣再加35kg50%提取依次(濾液下次提取套用)，用合并前兩次提取液減壓回收乙醇，濾過，加入5L HZ818大孔樹脂柱吸附，上柱流速 4L/h，吸附結束后，水洗至無糖色，流速控制10L/h，再用30L55%乙醇洗脫，流速6L/h，收集洗脫液減壓濃縮至密度1. 05，加5%碳酸鈉溶液調節(jié)pH9，加IL水飽和正丁醇萃取2次，保留水相，再鹽酸溶液調節(jié)PH3，加入500ml水飽和正丁醇萃取3次，收集正丁醇層減壓濃縮， 浸膏加入80%乙醇回流溶解，趁熱抽濾，濃縮至1/2體積，放置結晶15小時，濾出結晶物，力口入500ml熱水攪拌洗滌2次，濾餅用70%乙醇回流飽和溶解，重結晶，結晶物濾出，真空干燥得白楊素苷123. 4g，經(jīng)高效液相檢測含量94. 3%。
權利要求
1.一種從三葉海棠葉中提取白楊素苷的方法，其特征在于包含以下步驟1)提取取三葉海棠葉粉碎20-40目，加5-10倍量50-70%乙醇超聲提取2-3次，得提取液；2)大孔樹脂吸附將上述提取液減壓回收乙醇濾過，加入大孔樹脂柱吸附，水洗至無糖色，再用4-6BV40-70%乙醇洗脫，收集洗脫液減壓濃縮，得濃縮液；3)萃取上述濃縮液調至PH8-9，加水飽和正丁醇萃取，保留水相調節(jié)pH3-5，再加入水飽和正丁醇萃取，收集正丁醇層，減壓濃縮，浸膏加入70-90 %乙醇回流溶解，過濾，濃縮 1/2-1/3體積，放置結晶；4)重結晶濾出上述結晶物，熱水洗滌2-3次，再用乙醇回流溶解結晶，結晶物干燥得女口廣 PFt ο
2.如權利要求1所述從三葉海棠葉中提取白楊素苷的方法，其特征在于所述步驟2)中大孔樹脂可選AB-8、HZ818、SPD-300和LSA-40中的一種。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種從三葉海棠葉中提取白楊素的苷方法，工藝方法是以三葉海棠葉為原料，粉碎20-40目，加5-10倍量50-70％乙醇超聲提取2-3次，提取液減壓回收乙醇，濾過，加入大孔樹脂柱吸附，水洗至無糖色，再用4-6BV40-70％乙醇洗脫，收集洗脫液減壓濃縮，濃縮液調至pH8-9，加水飽和正丁醇萃取，保留水相調節(jié)pH3-5，再加入水飽和正丁醇萃取，收集正丁醇層，減壓濃縮，浸膏加入70-90％乙醇回流溶解，過濾，濃縮1/2-1/3體積，放置結晶，濾出上述結晶物，熱水洗滌2-3次，再用乙醇回流溶解結晶，結晶物干燥得產(chǎn)品。采用本方法生產(chǎn)白楊素苷，工藝簡單，無毒害試劑使用，對環(huán)境友好，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C07H17/07GK102464687SQ201010549768
公開日2012年5月23日 申請日期2010年11月19日 優(yōu)先權日2010年11月19日
發(fā)明者劉東鋒, 李法慶, 楊成東 申請人:蘇州寶澤堂醫(yī)藥科技有限公司