專利名稱：一種n-(2)-l-丙氨酰-l-谷氨酰胺的合成方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種丙氨酰谷氨酰胺二肽化合物的合成方法，尤其是N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法。
背景技術(shù)：
酰胺氨基酸是機(jī)體內(nèi)含量非常豐富的一種氨基酸，是機(jī)體多種組織代謝的參與體，具有許多重要的生理功能:能促進(jìn)胃腸粘膜細(xì)胞增生，維持腸道的完整性；巨噬細(xì)胞的吞噬作用、淋巴細(xì)胞的增值及蛋白質(zhì)的合成都必須依賴充足的谷氨酰胺。缺乏谷氨酰胺會(huì)引發(fā)多種疾病。動(dòng)物在各種應(yīng)激狀態(tài)下，對(duì)L-谷氨酰胺的需求量大大增加，因此，給機(jī)體補(bǔ)充L-谷氨酰胺是極為必要的。但谷氨酰胺溶解度低且不穩(wěn)定，加熱后會(huì)產(chǎn)生有毒的焦谷氨酸和氨，因此限制了谷氨酰胺的腸外應(yīng)用。而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺不僅溶解度高，是同樣條件下游離谷氨酰胺的200倍，并且性質(zhì)穩(wěn)定。最重要的是能被機(jī)體快速有效地分解為丙氨酸和谷氨酰胺，滿足機(jī)體需要，而無任何副作用。現(xiàn)有的L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法主要有以下幾種:
(I)以L-丙氨酸為原料，其氨基經(jīng)保護(hù)生成叔丁氧羰基丙氨酸或芐氧羰基丙氨酸，接著與L-谷氨酰胺在堿性條件下生成Boc-Ala-Gln或Z-Ala-Gln,然后二氟乙酸脫保護(hù)得到目標(biāo)化合物。其路線步驟多，較為繁瑣，因而收率低。(2)以L-丙氨酸為原料，與光氣反應(yīng)生成N-羧酸酐，然后與L-谷氨酰胺在水中反應(yīng)，即得。該方法步驟少而簡單，但該反應(yīng)中間環(huán)化物N-羧酸酐不穩(wěn)定易分解，而且副產(chǎn)物難以除去，最終產(chǎn)品難以純化，所以收率低，另外，光氣為劇毒物質(zhì)，對(duì)環(huán)境和人體危害大。利用N端保護(hù)的氨基酸與 三苯基膦反應(yīng)生成活性酯，再與谷氨酰胺反應(yīng)，然后用無機(jī)酸酸化，脫去保護(hù)基即得產(chǎn)物，該方法成本較高。(3)中國專利200510102315.公開了一種L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法。該方法包括在縮合劑存在下，在惰性溶劑中將D-2-鹵代丙酸和谷氨酰胺縮合、酸化得到D-2-鹵代谷氨酰胺；然后勇敢水進(jìn)行氨解得到目標(biāo)化合物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明克服了已有技術(shù)中存在的不足，而提供一種工藝條件溫和，反應(yīng)成本低的L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法。本發(fā)明采取以下方案:
一種N (2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法，其合成方法如下:
(O室溫下將L-谷氨酰胺加入到甲苯和水的溶液中，甲苯和水配比為2:1，再加入5N無機(jī)堿，使溶液PH值達(dá)到8 10 ;滴加D- α -氯丙酰氯和甲苯混合溶液，用無機(jī)堿控制體系PH值為9 11。反應(yīng)溫度保持在0°C飛。C;滴加完畢后室溫?cái)嚢鑿V2小時(shí)后，冷卻，靜置分出有幾層，攪拌下將氯化鈉加入剩余溶液中，滴加鹽酸調(diào)PH值為f 2，繼續(xù)攪拌20分鐘，停止攪拌，冷卻析出，過濾，干燥得N- (2) -D-氯丙酰-L-谷氨酰胺。(2)將N-(2) -D-氯丙酰-L-谷氨酰胺與30%氨水按重量1: l(Tl: 30的比例投入反應(yīng)釜中反應(yīng)5 10小時(shí)，反應(yīng)溫度為20°C 70°C、反應(yīng)壓力為2Kg/cm2，反應(yīng)結(jié)束后冷卻至室溫，減壓濃縮，將濃縮液移至結(jié)晶罐，滴加甲醇，滴加完畢后，繼續(xù)攪拌I小時(shí)，冷卻至10°C，放置2小時(shí)，過濾干燥得粗品。(3)將粗品投入到反應(yīng)釜中，加入純化水溶解，后加入活性炭，過濾，濾液加入甲醇，攪拌，過濾得精制品。所述步驟(I)中無機(jī)堿為氫氧化鈉溶液；
所述步驟(I)中L-谷氨酰胺與甲苯溶液的體積比為1:7 1:11 ；
所述步驟(2)中N-(2)-D-氯丙酸-L-谷氨酸胺與30%氨水重量比為1:10 1:30。本發(fā)明工藝簡單，不涉及氨基保護(hù)，成本低，與光氣法相比，本發(fā)明毒性小，操作性高，有利于人們的身體健康和環(huán)境保護(hù)，更適合規(guī)?；a(chǎn)。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1.N⑵-D- α -氯丙酰-L-谷氨酰胺的合成
在反應(yīng)釜中先加入300kg水，150kg甲苯，室溫下加入48.2kgL-谷氨酰胺，冰浴至0-50C。攪拌下加入66kg5N NaOH溶液至L-谷氨酰胺全溶。再緩慢加入42Kg的D-2-氯丙酰氯的90kg甲苯溶液，同時(shí)滴加74kg的5N NaOH溶液維持反應(yīng)液PH 10(滴加兩個(gè)小時(shí))。滴加完畢后繼續(xù)冰浴在0-5°C保持I小時(shí)。分層除去甲苯。60kgNaCl室溫下加到水相。加入22kg濃HC1，調(diào)PH為2.5，加入晶種，攪拌半小時(shí)。加入8kg濃鹽酸調(diào)PH I,靜止I小時(shí)。過濾，干燥得產(chǎn)物。熔點(diǎn)(分解溫度)148°C,產(chǎn)率:85.3%。2.N (2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成
稱60kg上述產(chǎn)物加入壓力釜，再加入600kg28%濃氨水，密封。攪拌升溫至60°C，保溫8小時(shí),壓力在2kg/cm2,冷卻至室溫,旋轉(zhuǎn)濃縮,加入30kg水。滴加甲醇450kg,靜止2小時(shí)。過濾干燥得產(chǎn)物。產(chǎn)率為69%。30kg粗產(chǎn)品溶于50kg水中，0.6kg活性炭，過濾，加入42kg甲醇。靜止2小時(shí)，30°C加入138kg甲醇。過濾干 燥得產(chǎn)物。熔點(diǎn)為215-216。。。比旋光度為[a]2d°-3.50 (C=10, IN鹽酸)。
權(quán)利要求
1.一種N-(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法，其特征在于其合成方法的步驟為: (O室溫下將L-谷氨酰胺加入到甲苯和水的溶液中，甲苯和水配比為2:1，再加入5N無機(jī)堿，使溶液PH值達(dá)到8-10 ;滴加D- α -氯丙酰氯和甲苯混合溶液，用無機(jī)堿控制體系PH值為9-11 ;反應(yīng)溫度保持在0°C -5°C，滴加完畢后室溫?cái)嚢?-2小時(shí)后，冷卻，靜置分出有幾層，攪拌下將氯化鈉加入剩余溶液中，滴加鹽酸調(diào)PH值為1-2，繼續(xù)攪拌20分鐘，停止攪拌，冷卻析出，過濾，干燥得N- (2) -D-氯丙酰-L-谷氨酰胺； (2 )將N- (2) -D-氯丙酰-L-谷氨酰胺與30%氨水按重量1:10-1:30的比例投入反應(yīng)釜中反應(yīng)5-10小時(shí)，反應(yīng)溫度為20°C _70°C、反應(yīng)壓力為2Kg/cm2，反應(yīng)結(jié)束后冷卻至室溫，減壓濃縮，將濃縮液移至結(jié)晶罐，滴加甲醇，滴加完畢后，繼續(xù)攪拌I小時(shí)，冷卻至10°C，放置2小時(shí)，過濾干燥得粗品； (3)將粗品投入到 反應(yīng)釜中，加入純化水溶解，后加入活性炭，過濾，濾液加入甲醇，攪拌，過濾得精制品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的N-(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法，其特征在于步驟(1)中L-谷氨酰胺與甲苯溶液的體積比為1:7-11 ;氯丙酰氯與L-谷氨酰胺的摩爾比為1:1-3。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的N-(2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法，其特征在于步驟⑵中N-(2)-D-氯丙酰-L-谷氨酰胺與30%氨水重量比為1:10-1:30。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法，屬于免疫二肽化合物的制備。其制備步驟為以D-2-氯代丙酰氯和L-谷氨酰胺為原料，縮合得到N-(D-2-氯丙酰)-L-谷氨酰胺，再經(jīng)氨化后得到N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺；通過精制方法得到精制品。
文檔編號(hào)C07K5/062GK103087148SQ20111034287
公開日2013年5月8日 申請(qǐng)日期2011年11月3日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月3日
發(fā)明者姚德勇, 郝智慧, 王艷玲 申請(qǐng)人:青島康地恩藥業(yè)股份有限公司