專利名稱：銅綠假單胞菌a血清型脂多糖的抗體的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及銅綠假單胞菌A血清型脂多糖的抗體及其應(yīng)用。更具體地，本發(fā)明涉及特異性結(jié)合銅綠假單胞菌株A血清型脂多糖的抗體，以及含有任何該抗體的藥物組合物、銅綠假單胞菌感染診斷劑和銅綠假單胞菌檢測試劑盒。
背景技術(shù)：
銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)是廣泛且主要分布于自然環(huán)境如土壤和水中的革蘭氏陰性需氧桿菌。銅綠假單胞菌是通常不引起健康受試者致病的非病原細菌(avirulent bacterium),所述健康受試者對銅綠假單胞菌具有中度的抗體效價以及足夠的免疫功能。然而，一旦體弱患者感染銅綠假單胞菌，銅綠假單胞菌可引起嚴重癥狀，其可導致所述患者死亡。為此，銅綠假單胞菌作為醫(yī)院感染和機會感染的主要病原菌引人矚目，因此預防和治療銅綠假單胞菌感染已經(jīng)是醫(yī)學領(lǐng)域的重要問題。
為預防或治療銅綠假單胞菌感染，已經(jīng)主要使用抗生素或合成抗菌劑。然而，銅綠假單胞菌產(chǎn)生了對這些藥物的抗藥性，因此這種藥物在許多情況下無法提供足夠的治療作用。特別地，使用抗生素等治療耐多藥銅綠假單胞菌(MDRP)的感染很難且有限制。為此，作為替代方法，已經(jīng)開始進行使用免疫球蛋白制劑的治療。同時，已經(jīng)檢驗了使用銅綠假單胞菌的抗體預防和治療銅綠假單胞菌感染。例如，已經(jīng)開發(fā)了各自與特定血清型銅綠假單胞菌株特異性結(jié)合的抗體(專利文獻1-5，以及非專利文獻I和2)。然而，到目前為止開發(fā)的銅綠假單胞菌抗體在銅綠假單胞菌感染的預防或治療中尚無法提供足夠的作用。引用列表專利文獻專利文獻I日本未審查專利申請公開號平6-178688專利文獻2日本未審查專利申請公開號平6-178689專利文獻3日本未審查專利申請公開號平7-327677專利文獻4國際公開號W02004/101622專利文獻5國際公開號W02006/084758非專利文獻非專利文獻IThe Journal of Infectious Diseases, 152，6，1985，1290-1299.非專利文獻2Journal of General Microbiology, 133, 1987, 3581-3590.

發(fā)明內(nèi)容
技術(shù)問題鑒于上述情況作出本發(fā)明，且本發(fā)明的一個目標是提供對銅綠假單胞菌具有優(yōu)異抗菌活性的新型抗體。本發(fā)明的一個主要目標是提供對銅綠假單胞菌具有優(yōu)異抗菌活性且用作多克隆抗體制劑組分的新型抗體。作為這種新型抗體的一方面，本發(fā)明的一個目標是提供與銅綠假單胞菌株A血清型脂多糖特異性結(jié)合的抗體。技術(shù)方案為實現(xiàn)上述目標，本發(fā)明采用以下方法。首先，從慢性銅綠假單胞菌肺部感染的囊性纖維化患者和健康志愿者采集血液樣本。借助如下手段確定具有高比例的對脂多糖(下文中有時簡單稱為“LPS”)特異的成漿細胞的供體樣本(I)測定血液循環(huán)中成漿細胞和漿細胞的量的FACS分析；(2)測定血液循環(huán)中細胞量的ELISP0T分析，所述細胞制造對具體LPS抗原特異的抗體；和(3)測定存在或不存在對具體LPS抗原特異的免疫血球蛋白的ELISA分析。下一步，由這樣確定的供體樣本制備識別LPS的抗體。具體地，通過對⑶19、⑶38、λ -輕鏈和死細胞染色選擇存活成漿細胞。在選出的成漿細胞上，通過包括多重重疊延伸RT-PCR和后續(xù)巢式PCR的兩步PCR從相同B細胞獲 得編碼重鏈可變區(qū)(VH)和輕鏈可變區(qū)(VL)的成對DNA序列(圖I )。下一步，將擴增的DNA插入篩選載體，并隨后轉(zhuǎn)化到大腸桿菌(Escherichia coli)中。從所述大腸桿菌純化擴增載體的集合。將得到的抗體庫在動物培養(yǎng)細胞中表達。通過ELISA篩選編碼結(jié)合至純化的LPS分子的抗體的克隆，并選出LPS特異的克隆。隨后，測定所選出克隆的堿基序列。隨后，對由這樣得到的克隆所編碼的抗體檢測其各種活性、其血清型特異性和抗原表位。作為結(jié)果，發(fā)現(xiàn)所確定的抗體與銅綠假單胞菌A血清型LPS結(jié)合，并在體外和體內(nèi)具有優(yōu)異抗菌活性。具體地，本發(fā)明涉及與銅綠假單胞菌A血清型LPS結(jié)合的抗體，其表現(xiàn)出優(yōu)異的抗菌活性。本發(fā)明也涉及該抗體的用途。更具體地，本發(fā)明提供[I]識別銅綠假單胞菌脂多糖的B帶LPS的抗體，其與A血清型銅綠假單胞菌株的表面充分結(jié)合，但不與B、E、G、I和M血清型銅綠假單胞菌株的表面的任一種充分結(jié)合。[2]根據(jù)第I條所述的抗體，其具有對A血清型銅綠假單胞菌株的調(diào)理素活性。[3]根據(jù)第2條所述的抗體，其中對ATCC 27577標識的銅綠假單胞菌株的調(diào)理素活性的EC50為I μ g/ml或更少。[4]根據(jù)第I至3條的任一條所述的抗體，其具有對A血清型銅綠假單胞菌株的凝集活性。[5]根據(jù)第4條所述的抗體，其中對ATCC 27577標識的銅綠假單胞菌株的單位量(μ g) IgG的凝集效價為50或更大。[6]根據(jù)第I至5條的任一條所述的抗體，其對A血清型銅綠假單胞菌株的全身性感染具有抗菌作用。[7]根據(jù)第6條所述的抗體，其中所述全身性感染是中性白細胞減少癥受試者的全身性感染。[8]根據(jù)第7條所述的抗體，其中對全身性感染ATCC 27577標識的銅綠假單胞菌株的中性白細胞減少癥小鼠模型的抗菌作用的ED50不大于青霉酮(Venilon)的1/50。[9]具有下列(a)至(C)特征任意之一的抗體(a)包括包括記載于SEQ ID NO: I至3的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID No: I至3的氨基酸序列并且其中至少一個序列的一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入的輕鏈可變區(qū)，和包括記載于SEQ ID N0:4至6的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID N0:4至6的氨基酸序列并且其中至少一個序列的一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入的重鏈可變區(qū)；(b)包括包括記載于SEQ ID NO:9至11的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO:9至11的氨基酸序列并且其中至少一個序列的一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入的輕鏈可變區(qū)，和包括記載于SEQ ID NO: 12至14的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO: 12至14的氨基酸序列并且其中至少一個序列的一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入 的重鏈可變區(qū)；以及(C)包括包括記載于SEQ ID NO: 17至19的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO: 17至19的氨基酸序列并且其中至少一個序列的一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入的輕鏈可變區(qū)，和包括記載于SEQ ID NO:20至22的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO:20至22的氨基酸序列并且其中至少一個序列的一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入的重鏈可變區(qū)。[10]具有下列(a)至(C)特征任意之一的抗體(a)包括包括記載于SEQ ID NO: 7的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO: 7的氨基酸序列并且其中一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入的輕鏈可變區(qū)，和包括記載于SEQ ID NO:8的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO:8的氨基酸序列并且其中一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入的重鏈可變區(qū)；以及(b)包括包括記載于SEQ ID NO: 15的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO: 15的氨基酸序列并且其中一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入的輕鏈可變區(qū)，和包括記載于SEQ ID NO: 16的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO: 16的氨基酸序列并且其中一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入的重鏈可變區(qū)；以及(C)包括包括記載于SEQ ID NO: 23的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO: 23的氨基酸序列并且其中一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入的輕鏈可變區(qū)，和包括記載于SEQ ID NO: 24的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO: 24的氨基酸序列并且其中一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入的重鏈可變區(qū)。[11]含有抗體的輕鏈或輕鏈可變區(qū)的肽，該肽具有下列(a)至(C)特征任意之一(a)包括記載于SEQ ID NO: I至3的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID N0:1至3的氨基酸序列并且其中至少一個序列的一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入；(b)包括記載于SEQ ID N0:9至11的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID N0:9至11的氨基酸序列并且其中至少一個序列的一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入；和(c)包括記載于SEQ ID NO: 17至19的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO: 17至19的氨基酸序列并且其中至少一個序列的一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入。[12]含有抗體的輕鏈或輕鏈可變區(qū)的肽，該肽具有下列(a)至(C)特征任意之一(a)包括記載于SEQ ID NO:7的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO:7的氨基酸序列并且其中一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入；(b)包括記載于SEQ ID NO: 15的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO: 15的氨基酸序列并且其中一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入；和(c)包括記載于SEQ ID NO:23的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO:23的氨基酸序列并且其中一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入。 [13]含有抗體的重鏈或重鏈可變區(qū)的肽，該肽具有下列(a)至(C)特征任意之一(a)包括記載于SEQ ID NO:4至6的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID N0:4至6的氨基酸序列并且其中至少一個序列的一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入；(b)包括記載于SEQ ID NO: 12至14的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO: 12至14的氨基酸序列并且其中至少一個序列的一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入；和(c)包括記載于SEQ ID NO:20至22的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID N0:20至22的氨基酸序列并且其中至少一個序列的一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入。[14]含有抗體的重鏈或重鏈可變區(qū)的肽，該肽具有下列(a)至(C)特征任意之一(a)包括記載于SEQ ID NO:8的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO:8的氨基酸序列并且其中一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入；(b)包括記載于SEQ ID NO: 16的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO: 16的氨基酸序列并且其中一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入；(c)包括記載于SEQ ID NO:24的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO:24的氨基酸序列并且其中一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入。[15]在下列(a)至(C)任一項所述的抗體中，與血清型A的銅綠假單胞菌株的脂多糖中的表位結(jié)合的抗體(a)含有包括記載于SEQ ID NO:7的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包括記載于SEQID NO:8的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)的抗體；(b)含有包括記載于SEQ ID NO: 15的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包括記載于SEQID NO: 16的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)的抗體；(C)含有包括記載于SEQ ID NO:23的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包括記載于SEQID N0:24的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)的抗體。[16]編碼根據(jù)第I至15條任一條所述的抗體或肽的DNA。[17]產(chǎn)生根據(jù)第I至10條和第15條的任一條所述的抗體的雜交瘤細胞。[18]用于銅綠假單胞菌相關(guān)疾病的藥物組合物，該藥物組合物包括根據(jù)第I至10條和第15條的任一條所述的抗體；和任選地
至少一種可藥用載體和/或稀釋劑。[19]根據(jù)第18條所述的藥物組合物，其中銅綠假單胞菌相關(guān)疾病是由銅綠假單胞菌感染引發(fā)的全身性感染性疾病。[20]根據(jù)第18條所述的藥物組合物，其中銅綠假單胞菌相關(guān)疾病是由銅綠假單胞菌感染引發(fā)的肺部感染性疾病。[21]用于檢測銅綠假單胞菌的診斷劑，該診斷劑包括根據(jù)第1、9、10和15條的任一條所述的抗體。
[22]用于檢測銅綠假單胞菌的試劑盒，該試劑盒包括根據(jù)第1、9、10和15條的任一條所述的抗體。有益效果本發(fā)明提供與銅綠假單胞菌A血清型LPS結(jié)合并表現(xiàn)出優(yōu)異抗菌活性的抗體。本發(fā)明的抗體對銅綠假單胞菌的全身性感染表現(xiàn)出優(yōu)異的調(diào)理素作用和優(yōu)異的抗菌作用。此夕卜，由于本發(fā)明的抗體源自慢性銅綠假單胞菌肺部感染的囊性纖維化患者，可以期待對臨床銅綠假單胞菌株的優(yōu)異作用。本發(fā)明的抗體可制備為人類抗體，并因此是高度安全的。使用本發(fā)明的抗體使其可有效治療或預防由銅綠假單胞菌，包括耐多藥銅綠假單胞菌引發(fā)的感染，如HAP/VAP、菌血癥、敗血癥和燒傷創(chuàng)面感染。


圖I是示出了進行兩步PCR得到編碼本發(fā)明抗體的DNA的圖。圖2是示出了用于使編碼重鏈可變區(qū)(VH)和輕鏈可變區(qū)(VL)的序列配對的00-VP-002載體的圖，所述序列源于相同B細胞。
具體實施例方式本發(fā)明提供與銅綠假單胞菌A血清型LPS結(jié)合的新型抗體。本發(fā)明的“抗體”包括免疫球蛋白的所有類別和所有子類。所述“抗體”包括多克隆抗體和單克隆抗體，也包括抗體功能片段的形式?！岸嗫寺】贵w”指的是包括針對不同表位的不同種類抗體的抗體制劑。同時，“單克隆抗體”是指由基本上同質(zhì)的抗體群體得到的抗體(包括抗體片段)。相比于多克隆抗體，單克隆抗體識別抗原上的單一決定子。本發(fā)明的多克隆抗體也包括能識別抗原上多個表位的多種單克隆抗體的結(jié)合物。本發(fā)明的抗體是已分離的抗體，即從自然環(huán)境中的組分分離和/或回收的抗體。本發(fā)明的抗體結(jié)合的“脂多糖(LPS)”是革蘭氏陰性菌細胞壁外膜的組分，是由脂質(zhì)和多糖形成的物質(zhì)(糖脂)。其糖鏈由被稱為核心多糖(或核心寡糖)的部分和被稱為O抗原(O側(cè)鏈多糖)的部分形成?！癆帶LPS”是其形成O抗原的多糖具有下述結(jié)構(gòu)的LPS。具體地,在結(jié)構(gòu)中，各自由 “3)-a -D-Rha-(I — 2) - a -D-Rha-(I — 3) - a -D-Rha-(I ” 組成的單元重復出現(xiàn)。在這些單元中，D-鼠李糖由α-1，2和α-1,3鍵連接。其結(jié)構(gòu)式在下面給出；然而，由α-1，2鍵連接的D-鼠李糖和由α-1,3鍵連接的D-鼠李糖的支鏈模式不限于下圖所示。[化學式I]
權(quán)利要求
1.ー種抗體，其識別銅綠假單胞菌脂多糖的B帶LPS，且與A血清型銅綠假單胞菌株的表面充分結(jié)合，但不與B、E、G、I和M血清型銅綠假單胞菌株的表面中的任何ー種充分結(jié)合。
2.根據(jù)權(quán)利要求I的抗體，其對A血清型銅綠假單胞菌株具有調(diào)理素活性。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的抗體，其中對ATCC27577標識的銅綠假單胞菌株的調(diào)理素活性的EC50為I u g/ml或更少。
4.根據(jù)權(quán)利要求I至3中任ー權(quán)利要求的抗體，其具有對A血清型銅綠假單胞菌株的凝集活性。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的抗體，其中単位量(Ug)IgG對ATCC27577標識的銅綠假單胞菌株的凝集效價為50或更大.
6.根據(jù)權(quán)利要求I至5中任ー權(quán)利要求的抗體，其對A血清型銅綠假單胞菌株的全身 性感染具有抗菌作用。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的抗體，其中所述全身性感染是中性白細胞減少癥受試者的全身性感染。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的抗體，其中對全身性感染ATCC27577標識的銅綠假單胞菌株的中性白細胞減少癥小鼠模型的抗菌作用的ED50不大于青霉酮的1/50。
9.具有下列(a)至(C)特征任意之一的抗體 Ca)包括 包括記載于SEQ ID NO: I至3的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO: I至3的氨基酸序列并且其中至少ー個序列的一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入的輕鏈可變區(qū)，和 包括記載于SEQ ID N0:4至6的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID N0:4至6的氨基酸序列并且其中至少ー個序列的一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入的重鏈可變區(qū)； (b)包括 包括記載于SEQ ID NO:9至11的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO:9至11的氨基酸序列并且其中至少ー個序列的一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入的輕鏈可變區(qū)，和 包括記載于SEQ ID NO: 12至14的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO: 12至14的氨基酸序列并且其中至少ー個序列的一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入的重鏈可變區(qū)；以及 (C)包括 包括記載于SEQ ID NO: 17至19的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO: 17至19的氨基酸序列并且其中至少ー個序列的一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入的輕鏈可變區(qū)，和 包括記載于SEQ ID NO:20至22的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID N0:20至22的氨基酸序列并且其中至少ー個序列的一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入的重鏈可變區(qū)。
10.具有下列(a)至(C)特征任意之一的抗體 Ca)包括包括記載于SEQ ID NO: 7的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO: 7的氨基酸序列并且其中一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入的輕鏈可變區(qū)，和 包括記載于SEQ ID NO:8的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID N0:8的氨基酸序列并且其中一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入的重鏈可變區(qū)；以及 (b)包括 包括記載于SEQ ID NO: 15的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO: 15的氨基酸序列并且其中一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入的輕鏈可變區(qū)，和 包括記載于SEQ ID NO: 16的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO: 16的氨基酸序列并且其中一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入的重鏈可變區(qū)；以及 (C)包括 包括記載于SEQ ID NO: 23的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO: 23的氨基酸序列并且其中一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入的輕鏈可變區(qū)，和 包括記載于SEQ ID NO: 24的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO: 24的氨基酸序列并且其中一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入的重鏈可變區(qū)。
11.含有抗體的輕鏈或輕鏈可變區(qū)的肽，該肽具有下列(a)至(c)特征任意之一 Ca)包括記載于SEQ ID NO: I至3的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO: I至3的氨基酸序列并且其中至少一個序列的一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入； (b)包括記載于SEQID NO:9至11的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO:9至11的氨基酸序列并且其中至少一個序列的一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入；和 (c)包括記載于SEQID NO: 17至19的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO: 17至19的氨基酸序列并且其中至少一個序列的一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入。
12.含有抗體的輕鏈或輕鏈可變區(qū)的肽，該肽具有下列(a)至(c)特征任意之一 (a)包括記載于SEQID NO:7的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO:7的氨基酸序列并且其中一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入； (b)包括記載于SEQID NO: 15的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO: 15的氨基酸序列并且其中一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入；和 (c)包括記載于SEQID NO:23的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID N0:23的氨基酸序列并且其中一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入。
13.含有抗體的重鏈或重鏈可變區(qū)的肽，該肽具有下列(a)至(C)特征任意之一 Ca)包括記載于SEQ ID N0:4至6的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID N0:4至6的氨基酸序列并且其中至少一個序列的一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入； (b)包括記載于SEQID NO: 12至14的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO: 12至14的氨基酸序列并且其中至少一個序列的一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入；和 (c)包括記載于SEQID NO:20至22的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID N0:20至22的氨基酸序列并且其中至少一個序列的一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入。
14.含有抗體的重鏈或重鏈可變區(qū)的肽，該肽具有下列(a)至(c)特征任意之一 (a)包括記載于SEQ ID NO:8的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO:8的氨基酸序列并且其中一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入；(b)包括記載于SEQID NO: 16的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID NO: 16的氨基酸序列并且其中一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入；和 (c)包括記載于SEQID NO:24的氨基酸序列或包括記載于SEQ ID N0:24的氨基酸序列并且其中一個或多個氨基酸被置換、刪除、添加和/或插入。
15.ー種抗體，在血清型A的銅綠假單胞菌株的脂多糖中，與記載于下列(a)至(c)任意之一的抗體的表位結(jié)合 (a)含有包括記載于SEQID NO:7的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包括記載于SEQ IDNO:8的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)的抗體； (b)含有包括記載于SEQID NO: 15的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包括記載于SEQ IDNO: 16的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)的抗體；和 (c)含有包括記載于SEQID NO:23的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包括記載于SEQ ID NO:24的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)的抗體。
16.編碼根據(jù)權(quán)利要求I至15中任ー權(quán)利要求的抗體或肽的DNA。
17.產(chǎn)生根據(jù)權(quán)利要求I至10和15中任ー權(quán)利要求的抗體的雜交瘤細胞。
18.用于銅綠假單胞菌相關(guān)疾病的藥物組合物，該藥物組合物包括 根據(jù)權(quán)利要求I至10和15中任ー權(quán)利要求的抗體；以及任選地， 至少ー種可藥用載體和/或稀釋劑。
19.根據(jù)權(quán)利要求18的藥物組合物，其中銅綠假單胞菌相關(guān)疾病是由銅綠假單胞菌感染引發(fā)的全身性感染疾病。
20.根據(jù)權(quán)利要求18的藥物組合物，其中銅綠假單胞菌相關(guān)疾病是由銅綠假單胞菌感染引發(fā)的肺部感染疾病。
21.用于檢測銅綠假單胞菌的診斷劑，該診斷劑包括根據(jù)權(quán)利要求1、9、10和15中任ー權(quán)利要求的抗體。
22.用于檢測銅綠假單胞菌的試劑盒，該試劑盒包括根據(jù)權(quán)利要求1、9、10和15中任ー權(quán)利要求的抗體。
全文摘要
本發(fā)明提供對銅綠假單胞菌具有優(yōu)異抗菌活性的新型抗體。通過使用從具有慢性銅綠假單胞菌肺部感染的囊性纖維化患者得到的成漿細胞作為初始材料，成功得到與A血清型銅綠假單胞菌株的LPS結(jié)合且在體內(nèi)和體外具有優(yōu)異抗菌活性的抗體。
文檔編號C07K16/12GK102858975SQ20118001024
公開日2013年1月2日 申請日期2011年2月18日 優(yōu)先權(quán)日2010年2月18日
發(fā)明者田中二朗, P·S·安德森, 奧富隆文, 稻葉常良, 大冢圭子, 赤羽宏友, 星名由佳利, 長曾宏, 熊谷正志 申請人:明治制果藥業(yè)株式會社, 西福根有限公司