專利名稱：從對(duì)萼獼猴桃葉中分離制備高純度黃酮苷類化合物的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從對(duì)萼獼猴桃葉分離制備 黃酮苷類化合物，即山柰酚-3-0-a-L-鼠李糖基-a — 3) - a -L-鼠李糖基-(I — 6) - ^ -D-吡喃半乳糖苷、山柰酚-3-0- a -L-鼠李糖基-(I — 3) - (4-0-乙?；?a -L-鼠李糖基)-(I — 6) - P -D-吡喃半乳糖苷和山奈酌' -3-0- a -L-鼠李糖基_(1 — 3)-(2,4_ 二 _0_乙酸基-a -L-鼠李糖基)-(I — 6)-P-D-吡喃半乳糖苷的工藝方法。
背景技術(shù)：
對(duì)萼稱猴桃(Actinidia valvata Dunn)為稱猴桃科稱猴桃屬植物,主要分布于安徽、浙江、江西等華東地區(qū)，其根為貓人參，為華東地區(qū)常用的抗腫瘤中藥。近年來，發(fā)明人投入大量精力對(duì)該藥用植物進(jìn)行了系列藥學(xué)研究[H.L.Xin，Y.C.Wu，Y.F.Xu，et al. Chin JNat Med. , 2010,8 :260 ；H. L. Xin, X. Q. Yue, Y. F. Xu, et al. Helv. Chim. Acta, 2008,91 :575 ；Y. F Xu, R. L. Ge, J. Du, et al. Cancer Lett，2009，284 :229 ;張亞妮，劉嶺，凌昌全.中國(guó)中藥雜志，2006,36 :918.]，所獲研究成果處于該領(lǐng)域先進(jìn)水平。由于長(zhǎng)期以來對(duì)萼獼猴桃以根入藥，自然更新緩慢，野生資源急劇減少。為擴(kuò)大該藥用植物的藥用部位，發(fā)明人還對(duì)其葉的化學(xué)成分、藥理作用進(jìn)行了深入研究，是該領(lǐng)域中最早開展此項(xiàng)研究工作的學(xué)者。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)其葉中主要含有皂苷、黃酮類化學(xué)成分等[H. L. Xin, Y. C. ffu, Y. F. Xu, et al. Chin JNat Med.，2010，8 :260 ；H. L. Xin,Y. C. ffu,Y. H. Su, et al. Planta Med.，2011，77 :70.]，其中山柰酚-3-0- a -L-鼠李糖基-(I — 3) - (4-0-乙?；?a -L-鼠李糖基)-(I — 6) - P -D-批喃半乳糖苷和山柰酚-3-0-a-L-鼠李糖基-(I — 3)-(2，4_ 二-0-乙?；?a-L-鼠李糖基)_(1 — 6)-0_D-吡喃半乳糖苷系由本發(fā)明人通過采用經(jīng)典硅膠柱色譜法首次從對(duì)萼獼猴桃葉中制備得到，純度在 98% 以上[H. L. Xin, Y. C. ffu, Y. H. Su, et al. Planta Med.，2011，77 :70.]，它們具有顯著的抗氧化、抗心肌缺血的藥理作用，并分別就其化學(xué)結(jié)構(gòu)、藥理作用申請(qǐng)了中國(guó)專利(申請(qǐng)?zhí)朇N201010138085. I、CN201110271050. X)?；衔锷借头?3-0- a -L-鼠李糖基-(I — 3) - a -L-鼠李糖基-(I — 6) - P -D-吡喃半乳糖苷，與上述兩個(gè)化合物結(jié)構(gòu)相似，該單體已有報(bào)道從山茶及蛇莓中分離制備得到[許文東，林厚文，邱峰，等 沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2007, 24 402 ；C. Lakenbrink, T. M. L. Lam, U. H. Engelhardt, etal. Nat. Prod. Lett.，2000,14 :233.]。前述三種黃酮苷類化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下
權(quán)利要求
1.一種從對(duì)萼獼猴桃葉中分離制備高純度黃酮苷類化合物的方法，其特征是，包括藥材提取工序、粗提物制備工序和單體化合物分離純化工序， 藥材提取工序中，將對(duì)萼獼猴桃葉用體積濃度為50% 80%的乙醇回流提取2-4次，減壓回收乙醇后得提取液； 粗提物制備工序中，提取液過大孔吸附樹脂，用水、體積濃度為20 % 30 %的乙醇及體積濃度為50% 60%的乙醇洗脫，收集體積濃度為50% 60%的乙醇洗脫液，濃縮干燥后得到粗提物； 單體化合物分離純化工序中，采用高速逆流色譜法對(duì)所得粗提物進(jìn)行分離純化，包括配制構(gòu)成固定相、流動(dòng)相的溶劑體系，使逆流色譜儀柱子中充滿固定相，然后使柱子轉(zhuǎn)動(dòng)，再將流動(dòng)相泵入柱內(nèi)，將制備好的粗提物進(jìn)入進(jìn)樣閥，根據(jù)檢測(cè)圖譜接收目標(biāo)流份，其中，溶劑體系為乙酸乙酯正丁醇水，當(dāng)乙酸乙酯正丁醇水為2 : I : 3時(shí)，分離得到山柰酚-3-O-a-L-鼠李糖基-(I — 3)-a-L-鼠李糖基-(I — 6)-β- -吡喃半乳糖苷、山柰酚-3-O-a-L-鼠李糖基-(I — 3)-(4-0-乙酰基_ a -L-鼠李糖基)-(1 — 6)-β-D-卩比喃半乳糖苷；當(dāng)乙酸乙酯正丁醇水為4 I 5時(shí)，分離得到山柰酚-3-0- a -L-鼠李糖基-(I — 3) - (4-0-乙?；?a -L-鼠李糖基)-(I — 6) - β -D-吡喃半乳糖苷、山柰酚-3-0-a-L-鼠李糖基-(I — 3)-(2，4_ 二-O-乙酰基-a-L-鼠李糖基)_ (I — 6) - β -D-卩比喃半乳糖苷ο
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的從對(duì)萼獼猴桃葉中分離制備高純度黃酮苷類化合物的方法，其特征在于，藥材提取工序中，對(duì)萼獼猴桃葉用體積濃度為70%的乙醇回流提取。
3.據(jù)權(quán)利要求I所述的從對(duì)萼獼猴桃葉中分離制備高純度黃酮苷類化合物的方法，其特征在于，粗提物制備工序中，大孔吸附樹脂型號(hào)為HPD-300或DM-301型，依次用水、體積濃度為20%、體積濃度為60%乙醇洗脫，收集體積濃度為60%乙醇洗脫液，濃縮干燥后可得到粗提物。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從對(duì)萼獼猴桃葉中分離制備高純度黃酮苷類化合物的方法，包括藥材提取工序、粗提物制備工序和單體化合物分離純化工序，藥材提取工序中，將對(duì)萼獼猴桃葉用體積濃度為50％～80％的乙醇回流提取2-4次，減壓回收乙醇后得提取液；粗提物制備工序中，提取液過大孔吸附樹脂，用水、體積濃度為20％～30％的乙醇及體積濃度為50％～60％的乙醇洗脫，收集體積濃度為50％～60％的乙醇洗脫液，濃縮干燥后得到粗提物；單體化合物分離純化工序中，采用高速逆流色譜法對(duì)所得粗提物進(jìn)行分離純化，包括配制構(gòu)成固定相、流動(dòng)相的溶劑體系，使逆流色譜儀柱子中充滿固定相，然后使柱子轉(zhuǎn)動(dòng)，再將流動(dòng)相泵入柱內(nèi)，將制備好的粗提物進(jìn)入進(jìn)樣閥，根據(jù)檢測(cè)圖譜接收目標(biāo)流份。
文檔編號(hào)C07H1/08GK102617656SQ20121002283
公開日2012年8月1日 申請(qǐng)日期2012年2月2日 優(yōu)先權(quán)日2012年2月2日
發(fā)明者凌昌全, 彭浩, 曲麗萍, 李同明, 蘇永華, 辛海量, 鄭國(guó)銀 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)