專利名稱：一種羅丹明b衍生物的合成方法
—種羅丹明B衍生物的合成方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及有機(jī)合成領(lǐng)域，具體涉及一種羅丹明B衍生物的合成方法。
背景技術(shù)：
羅丹明B是一種人工合成的熒光染料，在細(xì)胞染色、熒光探針等領(lǐng)域都有著廣泛的應(yīng)用價(jià)值。因此，對羅丹明B進(jìn)行化學(xué)改性，以合成具有各種活性基團(tuán)的羅丹明B衍生物
具有重要意義。胱氨是帶有二硫鍵和兩個(gè)氨基的較長鏈的鏈狀化合物。將胱氨與羅丹明B進(jìn)行縮合，以合成帶有二硫鍵和一個(gè)活潑氨基的羅丹明B衍生物具有重要的意義。因?yàn)榘被c二 硫鍵均為反應(yīng)活性基團(tuán)，這為羅丹明B的進(jìn)一步應(yīng)用提供了平臺(tái)。羅丹明B和一些短鏈類氨基化合物，如乙二胺、水合肼等反應(yīng)時(shí)，較容易得到存在獨(dú)立氨基的羅丹明B衍生物。但對于胱氨這種含有多個(gè)反應(yīng)活性基團(tuán)的物質(zhì)，在劇烈的反應(yīng)條件下，這些活性基團(tuán)很難被保留，不易得到目標(biāo)產(chǎn)物。目前常用的制備酰胺化合物的方法包括直接用DCC/DMAP催化縮合，或者用EDC/NHS活化羧基后再進(jìn)行酰氨化等。但對于胱氨而言，這些反應(yīng)條件常會(huì)使另外一個(gè)氨基由于位阻較小，而和另一分子的羅丹明B的羧基或者酰胺鍵發(fā)生一些副反應(yīng)，造成胱氨的兩個(gè)氨基都參與反應(yīng)或者是二硫鍵斷裂。這使得羅丹明B的進(jìn)一步應(yīng)用成為泡影。目前，已有人將7-二乙氨基-3-香豆素酸和胱氨的一個(gè)氨基成功地連接起來，并利用另外一個(gè)獨(dú)立的氨基和卟啉進(jìn)行反應(yīng)，得到了一個(gè)利用熒光共振能量轉(zhuǎn)移原理來檢測體內(nèi)巰基化合物的熒光探針。但將胱氨與羅丹明B縮合，以合成具有一個(gè)獨(dú)立活潑氨基的羅丹明B衍生物，目前還沒有報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明旨在提供一種將胱氨與羅丹明B縮合，以合成存在獨(dú)立的活潑氨基的羅丹明類酰氨化合物的方法，從而為羅丹明B的進(jìn)一步應(yīng)用提供平臺(tái)。根據(jù)本發(fā)明，羅丹明B衍生物的合成方法包括以下步驟氨基保護(hù)在胱氨二鹽酸鹽的甲醇溶液中，加入摩爾過量的三乙胺，冰浴下，緩慢滴加與胱氨二鹽酸鹽等摩爾量的二碳酸二叔丁酯的甲醇溶液，滴加完畢后，使反應(yīng)液在室溫下反應(yīng)3-5小時(shí)，分離純化后，得到單邊保護(hù)的胱氨；縮合將羅丹明B、N，N-二環(huán)己基碳二亞胺、催化量的二甲氨基吡啶溶于二氯甲烷，先室溫下反應(yīng)O. 5-1小時(shí)，再加入摩爾過量的單邊保護(hù)的胱氨，回流反應(yīng)6-14小時(shí)，分離純化，得到縮合產(chǎn)物；脫保護(hù)冰浴溫度至室溫條件下，將縮合產(chǎn)物溶于二氯甲烷，添加三氟乙酸，反應(yīng)1-2. 5小時(shí)，分離純化，得到下式的羅丹明B衍生物。
權(quán)利要求
1.一種羅丹明B衍生物的合成方法，包括以下步驟 氨基保護(hù)在胱氨二鹽酸鹽的甲醇溶液中，加入摩爾過量的三乙胺，冰浴下，緩慢滴加與胱氨二鹽酸鹽等摩爾量的二碳酸二叔丁酯的甲醇溶液，滴加完畢后，使反應(yīng)液在室溫下反應(yīng)3-5小時(shí)，分離純化后，得到單邊保護(hù)的胱氨； 縮合將羅丹明B、N，N-二環(huán)己基碳二亞胺、催化量的二甲氨基吡啶溶于二氯甲烷，先室溫下反應(yīng)O. 5-1小時(shí)，再加入摩爾過量的單邊保護(hù)的胱氨，回流反應(yīng)6-14小時(shí)，分離純化，得到縮合產(chǎn)物； 脫保護(hù)冰浴溫度至室溫條件下，將縮合產(chǎn)物溶于二氯甲烷，添加三氟乙酸，反應(yīng)1-2. 5小時(shí)，分離純化，得到下式的羅丹明B衍生物
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的合成方法，其特征在于，氨基保護(hù)步驟中，三乙胺的量為胱氨二鹽酸鹽摩爾量的3倍。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的合成方法，其特征在于，縮合步驟中，單邊保護(hù)的胱氨的量為羅丹明B摩爾量的1-1. 3倍，N, N- 二環(huán)己基碳二亞胺的量為羅丹明B摩爾量的1.1倍，并且二甲氨基吡啶的量為羅丹明B摩爾量的O. 1-0. 2倍。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的合成方法，其特征在于，分離純化的操作包括萃取、洗滌、柱層析，以及它們的組合。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的合成方法，其特征在于，氨基保護(hù)步驟中的分離純化操作為去除溶劑，以PH為4. 2的KH2PO4溶液溶解，然后用乙醚萃取以除去一些副產(chǎn)物，再以IM的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至不再出現(xiàn)沉淀，之后用乙酸乙酯萃取并收集有機(jī)層，去除溶劑，得到呈淡黃色油狀的單邊保護(hù)的胱氨。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的合成方法，其特征在于，縮合步驟中的分離純化操作為去除溶劑，用硅膠柱層析純化，得到呈白色至淺紅色粉末狀的縮合產(chǎn)物。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的合成方法，其特征在于，脫保護(hù)步驟中的分離純化操作為去除溶劑后，用二氯甲烷溶解固體物質(zhì)，然后用O. 2M的NaOH溶液萃取以除去殘留的三氟乙酸，再用水洗滌，收集有機(jī)相，除去溶劑后得到粗產(chǎn)品，之后進(jìn)一步用硅膠柱層析純化，得到呈白色粉末狀的產(chǎn)品。
全文摘要
本發(fā)明公開一種羅丹明B衍生物的合成方法。通過對胱氨一端的氨基進(jìn)行Boc保護(hù)，進(jìn)而使用DCC/DMAP使單邊保護(hù)的胱氨與羅丹明B的羧基酰胺化縮合，最后脫去Boc保護(hù)，得到存在獨(dú)立活潑氨基的羅丹明B衍生物，為羅丹明B的進(jìn)一步應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。本發(fā)明的合成方法產(chǎn)率較高，操作方便，純化過程簡單，易于實(shí)現(xiàn)大量生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07D491/107GK103012419SQ20121055846
公開日2013年4月3日 申請日期2012年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月20日
發(fā)明者蔡林濤, 楊月婷, 龔萍 申請人:中國科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院