專利名稱：一種查帕苦樹素的提純方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于植物提取技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種從扭旋堡樹的干燥樹皮中提取純化查帕苦樹素的方法。
背景技術(shù)：
查帕苦樹素(Chaparrin)是一種苦木素類化合物，主要來源于苦木科(Simaroubaceae)扭旋堡樹tortuosa Liemb的樹皮?，F(xiàn)代藥理研究表明，查帕苦樹素具有抗癌作用，在40mg/kg時對P388的T/C為145% ;具有細胞毒活性，體外對鼻咽癌9KB細胞的ED50為6.5 ii g/mL ;具有抗瘧作用，對惡性瘧原蟲體外培養(yǎng)的IC50為0.180 u g/mL(對照品氯喹為 0.21 ii g/mL)，對 D6 株的 IC50 為 0.25 y g/mL, W2 株為 0.35 u g/mL ;具有抗阿米巴活性，對體外培養(yǎng)的阿米巴在加入本品100iiM，48小時后有約100%的抑制率。查帕苦樹素分子式為C2tlH28O7,分子量為380.44,結(jié)構(gòu)式為:
權(quán)利要求
1.一種查帕苦樹素的提純方法，其特征在于包括以下步驟: (1)酶解:取原料扭旋堡樹的干燥樹皮，經(jīng)粉碎處理，用酶溶液浸泡，水浴酶解2-5小時； (2)提取:將上述酶解液過濾，取濾渣用5-8倍材重量的乙醇水溶液提取2-3次，合并提取液，減壓濃縮得浸膏； (3)富集:將浸膏過大孔樹脂柱，吸附完成后，醇水洗脫，收集洗脫液； (4)純化:將上述洗脫液減壓回收乙醇，上硅膠柱(硅膠粒度為100-200目)，乙酸乙酯-甲醇梯度洗脫，TLC跟蹤監(jiān)測，收集查帕苦樹素流分，減壓濃縮，冷凍干燥得粗品； (5)高速逆流色譜分離:粗品采用高速逆流色譜分離，以氯仿-甲醇-水為溶劑系統(tǒng)，比例為(2-5): (5-9): (4-7)，收集目標成分，濃縮干燥即得高純度查帕苦樹素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提純方法，其特征在于:步驟(I)中所述酶可選纖維素酶、葡聚糖酶和果膠酶中的 一種或幾種，酶用量為2.5-3.5%。，pH為4-4.6，酶解溫度為45_50°C。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提純方法，其特征在于:步驟(2)中所述乙醇水溶液中乙醇的體積百分比濃度為80-95%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提純方法，其特征在于:步驟(3)中所述大孔樹脂選自AB-8、XDA-8、XAD-16 或 HZ806 型中的一種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提純方法，其特征在于:步驟(3)中所述醇水洗脫為3-4BV20%-30%乙醇水溶液一4-6BV80%-90%乙醇水溶液。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提純方法，其特征在于:步驟(4沖所述乙酸乙酯-甲醇體積比為 3-11:1。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種查帕苦樹素的提純方法，方法包括(1)取原料扭旋堡樹的干燥樹皮，經(jīng)粉碎處理，用酶溶液浸泡，水浴酶解；(2)將酶解原料過濾，取濾渣用5-10倍量的乙醇水溶液提取2-3次，合并提取液，減壓濃縮得浸膏；(3)將浸膏過大孔吸附樹脂柱，醇水溶液洗脫，收集洗脫液；(4)將洗脫液減壓回收乙醇，上硅膠柱，乙酸乙酯-甲醇梯度洗脫，TLC跟蹤監(jiān)測，收集查帕苦樹素流分，減壓濃縮，冷凍干燥即得粗品；(5)粗品采用高速逆流色譜分離，收集目標成分，濃縮干燥即得高純度查帕苦樹素。本發(fā)明操作簡單、所得產(chǎn)品收率高、成本低，適合規(guī)?；a(chǎn)。
文檔編號C07D493/10GK103242333SQ20131019613
公開日2013年8月14日 申請日期2013年5月24日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月24日
發(fā)明者蘇劉花, 萬冬梅 申請人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司