抗-p-選擇蛋白抗體制劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種穩(wěn)定液體藥物制劑，其包含40mg/ml至200mg/ml的針對P-選擇蛋白的抗體；0.01％至0.1％的泊洛沙姆；5mM至00mM緩沖液；和100mM至500mM至少一種穩(wěn)定劑；其pH在4.5-7.0的范圍內(nèi)。
【專利說明】抗-p-選擇蛋白抗體制劑

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及針對P-選擇蛋白的抗體分子的穩(wěn)定藥物液體制劑、用于制備所述制 劑的方法和所述制劑的用途。

【背景技術(shù)】
[0002] 針對P-選擇蛋白的抗體具有治療利益，特別是作為用于治療和預(yù)防炎性的和血 栓性的病癥和心血管疾病的藥物。針對P-選擇蛋白的抗體（⑶62P、GMP-140、PADGEM、 LECAM3)被描述在例如W0 2005/100402中。這些抗體會在粘附測定中抑制白細(xì)胞-樣HL60 細(xì)胞對被固定化在微量滴定板上的經(jīng)純化的P-選擇蛋白的粘附，具有〇. 08-0. 5 μ g/ml的 IC50 值。
[0003] 在W0 2010/031720中公開了呈液體形式、低壓凍干形式或從低壓凍干形式重構(gòu) 的液體形式的抗-P-選擇蛋白抗體的低濃度制劑（15mg/ml抗體）。
[0004] 抗體分子（作為蛋白藥物集合中的組成部分）非常易于物理和化學(xué)降解?；瘜W(xué) 降解包括涉及經(jīng)由鍵形成或切割而修飾蛋白從而產(chǎn)生新化學(xué)實體的任何過程。已知多種 化學(xué)反應(yīng)會影響蛋白。這些反應(yīng)可以涉及水解，包括肽鍵的切割以及脫酰胺化、異構(gòu)化、 氧化和分解。物理降解表示高級結(jié)構(gòu)的變化，且包括變性、吸附至表面、聚集和沉淀。蛋 白穩(wěn)定性受蛋白本身的特征（例如氨基酸序列、糖基化模式）和外部影響（諸如溫度、溶 劑pH、賦形劑、界面或剪切速率）而影響。所以，重要的是，限定最佳制劑條件以在制備、 貯存和施用過程中保護蛋白免于降解反應(yīng)（Manning，M.C.，等人（1989)，"Stability of protein pharmaceuticals(蛋白藥物的穩(wěn)定性）"，Pharm Res 6(ll)，903_918;Zheng， J. Y. ,Janis,L. J. (2005), uInfluence of pH, buffer species,and storage temperature on physicochemical stability of a humanized monoclonal antibody LA298(pH、 緩沖劑種類和貯存溫度對人源化單克隆抗體LA298的物理化學(xué)穩(wěn)定性的影響）"，Int. J. Pharmaceutics308,46-51)。當(dāng)制劑要包括高濃度的抗體時，特別難以得到治療性抗體的 穩(wěn)定液體制劑。
[0005] 因此，本發(fā)明的一個目的是，提供含有盡可能少的必要賦形劑的、高度濃縮的、 抗-P-選擇蛋白抗體的穩(wěn)定制劑，其能夠?qū)崿F(xiàn)期望的給藥并允許將所述抗體方便地施用給 患者。
[0006] 本發(fā)明的制劑在2_8°C的預(yù)期貯存溫度貯存18個月以后表現(xiàn)出良好穩(wěn)定性，沒有 形成肉眼可見的顆粒，這允許在不使用線內(nèi)過濾器的情況下靜脈內(nèi)施用，從而實現(xiàn)更大的 施用便利。將搖動和多次凍融步驟施加于液體制劑以模擬在藥物產(chǎn)品的制備或運輸過程中 可能發(fā)生的物理應(yīng)激條件。本發(fā)明的制劑在施加搖動和凍融應(yīng)激以后表現(xiàn)出良好穩(wěn)定性。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 在一個方面，本發(fā)明涉及一種穩(wěn)定液體藥物制劑，其包含：
[0008] -40mg/ml至200mg/ml的針對P-選擇蛋白的抗體；
[0009] -0· 01 %至0· 1 %的泊洛沙姆；
[0010] _5mM 至 100mM 緩沖液；
[0011] -100mM至500mM至少一種穩(wěn)定劑；
[0012] 其pH在4. 5-7.0的范圍內(nèi)。
[0013] 在一個實施方案中，所述針對P-選擇蛋白的抗體的濃度是在40mg/ml至100mg/ml 的范圍內(nèi)，特別是50mg/ml。
[0014] 在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及這樣的藥物制劑，其中所述泊洛沙姆是泊洛沙 姆 188。
[0015] 在另一個實施方案中，所述泊洛沙姆以在0. 01 %至0. 05%范圍內(nèi)、特別是0. 02% 的濃度存在。
[0016] 在一個實施方案中，本發(fā)明涉及這樣的藥物制劑，其中所述緩沖液是組氨酸緩沖 液，特別是組氨酸乙酸鹽緩沖液。
[0017] 在另一個實施方案中，所述緩沖液具有在10_30mM范圍內(nèi)、特別是20mM的濃度。
[0018] 在另一個實施方案中，所述制劑的pH是在5. 0-6. 0的范圍內(nèi)，特別是在5. 5。
[0019] 在一個實施方案中，本發(fā)明涉及這樣的藥物制劑，其中至少一種穩(wěn)定劑選自糖、多 元醇和氨基酸。更具體地，本發(fā)明的穩(wěn)定液體制劑包含一種選自糖、多元醇和氨基酸的穩(wěn)定 劑。
[0020] 在另一個實施方案中，所述至少一種穩(wěn)定劑以在140_250mM范圍內(nèi)、特別是在 210-230mM范圍內(nèi)的濃度存在。
[0021] 在另一個實施方案中，所述穩(wěn)定劑選自：海藻糖、蔗糖、山梨糖醇和精氨酸鹽酸鹽。
[0022] 在一個實施方案中，本發(fā)明涉及這樣的藥物制劑，其中所述針對P-選擇蛋白的抗 體是人抗體或人源化抗體。
[0023] 在另一個實施方案中，所述針對P-選擇蛋白的抗體包含可變區(qū)，所述可變區(qū)獨立 地選自：
[0024] a)由SEQ ID N0 :2的氨基酸序列限定的重鏈可變結(jié)構(gòu)域和由SEQ ID N0 :1的氨 基酸序列限定的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域；
[0025] b)由SEQ ID N0 :4的氨基酸序列限定的重鏈可變結(jié)構(gòu)域和由SEQ ID N0 :3的氨 基酸序列限定的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域；
[0026] c)由SEQ ID N0 :6的氨基酸序列限定的重鏈可變結(jié)構(gòu)域和由SEQ ID N0 :5的氨 基酸序列限定的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域；
[0027] d)由SEQ ID N0 :8的氨基酸序列限定的重鏈可變結(jié)構(gòu)域和由SEQ ID N0 :7的氨 基酸序列限定的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域；
[0028] e)由SEQ ID N0 :10的氨基酸序列限定的重鏈可變結(jié)構(gòu)域和由SEQ ID N0 :9的氨 基酸序列限定的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域；
[0029] f)由SEQ ID N0 :12的氨基酸序列限定的重鏈可變結(jié)構(gòu)域和由SEQ ID N0 :11的 氨基酸序列限定的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域；
[0030] g)由SEQ ID N0 :14的氨基酸序列限定的重鏈可變結(jié)構(gòu)域和由SEQ ID N0 :13的 氨基酸序列限定的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域；
[0031] h)由SEQ ID N0 :16的氨基酸序列限定的重鏈可變結(jié)構(gòu)域和由SEQ ID N0 :15的 氨基酸序列限定的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域；
[0032] i)由SEQ ID N0 :18的氨基酸序列限定的重鏈可變結(jié)構(gòu)域和由SEQ ID N0 :17的 氨基酸序列限定的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域；
[0033] j)由SEQ ID N0 :20的氨基酸序列限定的重鏈可變結(jié)構(gòu)域和由SEQ ID N0 :19的 氨基酸序列限定的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域；和
[0034] k)由SEQ ID N0 :22的氨基酸序列限定的重鏈可變結(jié)構(gòu)域和由SEQ ID N0 :21的 氨基酸序列限定的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域。
[0035] 在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及這樣的藥物制劑，其中所述針對P-選擇蛋白的 抗體的重鏈可變結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID N0 :4的氨基酸序列，且所述針對P-的抗體的輕鏈可變 結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID N0 :3的氨基酸序列。
[0036] 在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及這樣的藥物制劑，其中所述針對P-選擇蛋白的 抗體是包含SEQ ID N0:24的重鏈氨基酸序列和SEQ ID N0:23的輕鏈氨基酸序列的人抗 體。
[0037] 本發(fā)明的另一個方面提供了一種穩(wěn)定液體藥物制劑，其包含：
[0038] 50mg/ml的針對P-選擇蛋白的人抗體，所述人抗體包含SEQ ID N0 :24的重鏈氨 基酸序列和SEQ ID N0 :23的輕鏈氨基酸序列；和
[0039] (i)0. 02 % 的泊洛沙姆 188，
[0040] 230mM海藻糖，和
[0041] ρΗ5· 5的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者
[0042] (ii)0. 02% 的泊洛沙姆 188，
[0043] 210mM 蔗糖，和
[0044] ρΗ5· 5的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者
[0045] (iii)0. 02% 的泊洛沙姆 188，
[0046] 145mM精氨酸鹽酸鹽，和
[0047] ρΗ5· 5的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者
[0048] (iv) 0· 02% 的泊洛沙姆 188，
[0049] 23〇mM山梨糖醇，和
[0050] pH5. 5的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液。
[0051] 在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及這樣的穩(wěn)定液體藥物制劑，其中甲硫氨酸作為 第二種穩(wěn)定劑存在，特別是以5-25mM的濃度。
[0052] 例如，這樣的制劑可以包含：
[0053] 50mg/ml的針對P-選擇蛋白的人抗體，所述人抗體包含SEQ ID N0 :24的重鏈氨 基酸序列和SEQ ID N0 :23的輕鏈氨基酸序列；和
[0054] (v) 0· 02% 的泊洛沙姆 188，
[0055] 230mM 海藻糖，
[0056] 10mM甲硫氨酸，和
[0057] ρΗ5· 5的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者
[0058] (￥丨）0.02%的泊洛沙姆188，
[0059] 210mM 蔗糖，
[0060] lOmM甲硫氨酸，和
[0061] pH5. 5的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者
[0062] (vii)O. 02% 的泊洛沙姆 188，
[0063] 145mM精氨酸鹽酸鹽，
[0064] 10mM甲硫氨酸，和
[0065] pH 5. 5的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者
[0066] (viii)O. 02% 的泊洛沙姆 188，
[0067] 230mM山梨糖醇，
[0068] 10mM甲硫氨酸，和
[0069] pH5. 5的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液。
[0070] 在另一個方面，本發(fā)明提供了一種穩(wěn)定液體藥物制劑，其包含：
[0071] (a) 40mg/ml的針對P-選擇蛋白的人抗體，所述人抗體包含SEQ ID N0 :24的重鏈 氨基酸序列和SEQ ID N0 :23的輕鏈氨基酸序列，
[0072] 0· 01 %的泊洛沙姆188，
[0073] 210mM 蔗糖，和
[0074] ρΗ5· 0的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者
[0075] (b) 60mg/ml的針對P-選擇蛋白的人抗體，所述人抗體包含SEQ ID N0 :24的重鏈 氨基酸序列和SEQ ID N0 :23的輕鏈氨基酸序列，
[0076] 0· 01 %的泊洛沙姆188，
[0077] 210mM 蔗糖，和
[0078] ρΗ5· 0的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者
[0079] (c) 40mg/ml的針對P-選擇蛋白的人抗體，所述人抗體包含SEQ ID N0 :24的重鏈 氨基酸序列和SEQ ID N0 :23的輕鏈，
[0080] 0· 03%的泊洛沙姆188，
[0081] 210mM 蔗糖，和
[0082] ρΗ5· 0的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者
[0083] (d) 60mg/ml的針對P-選擇蛋白的人抗體，所述人抗體包含SEQ ID N0 :24的重鏈 氨基酸序列和SEQ ID N0 :23的輕鏈氨基酸序列，
[0084] 0· 03%的泊洛沙姆188，
[0085] 210mM 蔗糖，和
[0086] ρΗ5· 0的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者
[0087] (e) 40mg/ml的針對P-選擇蛋白的人抗體，所述人抗體包含SEQ ID N0 :24的重鏈 氨基酸序列和SEQ ID N0 :23的輕鏈氨基酸序列，
[0088] 0· 01 %的泊洛沙姆188，
[0089] 210mM 蔗糖，和
[0090] pH6. 0的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者
[0091] (f) 60mg/ml的針對P-選擇蛋白的人抗體，所述人抗體包含SEQ ID N0 :24的重鏈 氨基酸序列和SEQ ID N0 :23的輕鏈氨基酸序列，
[0092] 0· 01 %的泊洛沙姆188，
[0093] 210mM 蔗糖，和
[0094] pH6. 0的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者
[0095] (g) 40mg/ml的針對P-選擇蛋白的人抗體，所述人抗體包含SEQ ID N0 :24的重鏈 氨基酸序列和SEQ ID N0 :23的輕鏈氨基酸序列，
[0096] 0· 03%的泊洛沙姆188，
[0097] 210mM 蔗糖，和
[0098] ρΗ6· 0的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者
[0099] (h) 60mg/ml的針對P-選擇蛋白的人抗體，所述人抗體包含SEQ ID N0 :24的重鏈 氨基酸序列和SEQ ID N0 :23的輕鏈氨基酸序列，
[0100] 0· 03%的泊洛沙姆188，
[0101] 210mM 蔗糖，和
[0102] pH6. 0的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者
[0103] (i) 50mg/ml的針對P-選擇蛋白的人抗體，所述人抗體包含SEQ ID N0 :24的重鏈 氨基酸序列和SEQ ID N0 :23的輕鏈氨基酸序列，
[0104] 0· 02%的泊洛沙姆188，
[0105] 210mM 蔗糖，和
[0106] ρΗ5· 5的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液。
[0107] 在本發(fā)明的另一個方面，提供了用于預(yù)防或治療炎性疾病和血栓性疾病以及由 炎性過程和/或血栓性過程驅(qū)動的血管疾病病狀的穩(wěn)定液體藥物制劑。這樣的疾病包括 具有基礎(chǔ)性動脈粥樣化血栓形成（atherothrombosis)和血管狹窄的血管疾病，諸如冠 狀動脈疾病（coronary artery disease, CAD)、急性冠狀動脈綜合征（acute coronary syndrome，ACS)、周圍動脈疾?。╬eripheral arterial disease，PAD)、周圍動脈閉塞性 疾?。╬eripheral arterial occlusive disease，PA0D)、重癥肢體缺血（critical limb ischemia，CLI)、冠狀動脈旁路移植術(shù)（coronary artery bypass grafting，CABG)后狹窄、 冠狀靜脈移植物疾?。╟oronary vein graft disease)、經(jīng)皮冠狀動脈介入（percutaneous coronary intervention，PCI)后再狹窄、透析分流狹窄（dialysis shunt stenosis)、透 析分流阻塞（dialysis shunt occlusion)以及動脈和深靜脈血栓形成和血栓性血小板減 少性紫癜（thrombotic thrombocytopenic purpura, TPP)。其它應(yīng)用是預(yù)防和治療由心 肌梗死（myocardial infarction)、腦缺血事件（例如卒中）、腎梗死、急性腎損傷、器官移 植排斥和急性白細(xì)胞介導(dǎo)的肺損傷造成的缺血后組織損傷。針對P-選擇蛋白的抗體的 穩(wěn)定液體藥物制劑也適合用于治療膿毒性休克（septic shock)、變應(yīng)性病癥（allergic conditions)、哮喘（asthma)、慢性阻塞性月市疾?。╟hronic obstructive pulmonary disease，C0PD)、移植血管病變（transplant vasculopathy)、急性膜腺炎（acute pancreatitis)、炎性腸?。╥nflammatory bowel disease)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis)、特應(yīng)性皮炎（atopic dermatitis)、銀屑?。╬soriasis)、鐮狀細(xì)胞?。╯ickle cell disease)和預(yù)防腫瘤轉(zhuǎn)移（tumor metastasis)。
[0108] 更具體地，針對p-選擇蛋白的抗體的穩(wěn)定液體藥物制劑被用于預(yù)防或治療急性 冠狀動脈綜合征（ACS)、冠狀動脈旁路移植術(shù)（CABG)后狹窄、冠狀靜脈移植物疾病、經(jīng)皮冠 狀動脈介入（PCI)諸如血管成形術(shù)或支架放置后再狹窄、周圍動脈疾病（PAD)、周圍動脈閉 塞性疾?。≒AOD)和重癥肢體缺血（CLI)。
[0109] 本發(fā)明的另一個方面是，所述穩(wěn)定液體藥物制劑用于制備藥物的用途，所述藥物 用于預(yù)防或治療炎性疾病和血栓性疾病以及由炎性過程和/或血栓性過程驅(qū)動的血管疾 病病狀。這樣的疾病包括具有基礎(chǔ)性動脈粥樣化血栓形成和血管狹窄的血管疾病，諸如冠 狀動脈疾?。–AD)、急性冠狀動脈綜合征（ACS)、周圍動脈疾?。≒AD)、周圍動脈閉塞性疾病 (PA0D)、重癥肢體缺血（CLI)、冠狀動脈旁路移植術(shù)（CABG)后狹窄、冠狀靜脈移植物疾病、 經(jīng)皮冠狀動脈介入（PCI)后再狹窄、透析分流狹窄、透析分流阻塞以及動脈和深靜脈血栓 形成和血栓性血小板減少性紫癜（TPP)，所述藥物用于預(yù)防和治療由心肌梗死、腦缺血事件 (例如卒中）、腎梗死、急性腎損傷、器官移植排斥和急性白細(xì)胞介導(dǎo)的肺損傷造成的缺血 后組織損傷，所述藥物用于治療膿毒性休克、變應(yīng)性病癥、哮喘、慢性阻塞性肺疾?。–0PD)、 移植血管病變、急性胰腺炎、炎性腸病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、特應(yīng)性皮炎、銀屑病、鐮狀細(xì)胞病 和預(yù)防腫瘤轉(zhuǎn)移。
[0110] 更具體地，本發(fā)明涉及針對P-選擇蛋白的抗體的穩(wěn)定液體藥物制劑用于制備 藥物的用途，所述藥物用于預(yù)防或治療急性冠狀動脈綜合征（ACS)、冠狀動脈旁路移植術(shù) (CABG)后狹窄、冠狀靜脈移植物疾病、經(jīng)皮冠狀動脈介入（PCI)諸如血管成形術(shù)或支架放 置后再狹窄、周圍動脈疾?。≒AD)、周圍動脈閉塞性疾病（PA0D)和重癥肢體缺血（CLI)。
[0111] 本發(fā)明的另一個方面是，一種方法，其用于預(yù)防或治療炎性疾病和血栓性疾病以 及由炎性過程和/或血栓性過程驅(qū)動的血管疾病病狀，特別是用于預(yù)防或治療具有基礎(chǔ)性 動脈粥樣化血栓形成和血管狹窄的血管疾病，諸如冠狀動脈疾?。–AD)、急性冠狀動脈綜合 征（ACS)、周圍動脈疾?。≒AD)、周圍動脈閉塞性疾?。≒A0D)、重癥肢體缺血（CLI)、冠狀動 脈旁路移植術(shù)（CABG)后狹窄、冠狀靜脈移植物疾病、經(jīng)皮冠狀動脈介入（PCI)后再狹窄、透 析分流狹窄、透析分流阻塞以及動脈和深靜脈血栓形成和血栓性血小板減少性紫癜（TPP)， 用于預(yù)防和治療由心肌梗死、腦缺血事件（例如卒中）、腎梗死、急性腎損傷、器官移植排斥 和急性白細(xì)胞介導(dǎo)的肺損傷造成的缺血后組織損傷，用于治療膿毒性休克、變應(yīng)性病癥、哮 喘、慢性阻塞性肺疾?。–0PD)、移植血管病變、急性胰腺炎、炎性腸病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、特 應(yīng)性皮炎、銀屑病、鐮狀細(xì)胞病和預(yù)防腫瘤轉(zhuǎn)移，所述方法包括施用根據(jù)本發(fā)明的穩(wěn)定液體 藥物制劑。

【具體實施方式】
[0112] 本發(fā)明涉及一種穩(wěn)定的藥物液體制劑，其包含高濃度的針對P-選擇蛋白的抗體。
[0113] 術(shù)語"藥物制劑"表示這樣的制品：其處于允許活性成分的生物活性明確有效的形 式，且其不含有對所述制劑要施用的受試者有毒的額外組分。
[0114] 本文中結(jié)合根據(jù)本發(fā)明的制劑使用的術(shù)語"液體"表示，在大氣壓下在至少約2°C 至約8°C的溫度為液體的制劑。
[0115] "穩(wěn)定的"制劑是這樣的制劑：其中所含的蛋白（例如抗體）在貯存后基本上保留 它的物理和化學(xué)穩(wěn)定性，且因而保留它的生物活性。
[0116] "穩(wěn)定的液體藥物抗體制劑"是，在冷藏溫度（2_8°C )保持至少12個月、特別是2 年、更特別是3年后沒有觀察到顯著變化的液體抗體制劑。穩(wěn)定性的標(biāo)準(zhǔn)如下：通過尺寸排 阻色譜法（SEC-HPLC)測得，不超過10%、特別是5%的抗體單體被降解。此外，通過視覺分 析，該溶液是無色或透明至輕微乳白色。所述制劑的蛋白濃度具有不超過±10%變化。形 成不超過10%、特別是5%的聚集。通過本領(lǐng)域已知的方法，諸如紫外光譜法、尺寸排阻色 譜法（SEC-HPLC)、離子交換色譜法（IE-HPLC)、比濁法和目檢，測量穩(wěn)定性。
[0117] 術(shù)語 "P-選擇蛋白"表示如 Hsu-Lin 等人，J Biol Chem 259 :9121(1984)和 Me Ever等人，J Clin Invest 84 :92(1989)所描述的由人血小板和內(nèi)皮細(xì)胞表達的140kDa蛋 白質(zhì)。該I型跨膜糖蛋白（SwissProt序列P16109)由NH 2-端凝集素結(jié)構(gòu)域、其后的表皮 生長因子（EGF)樣結(jié)構(gòu)域和九個共有重復(fù)結(jié)構(gòu)域構(gòu)成。它通過單個跨膜結(jié)構(gòu)域錨定在膜中 并且含有一個小細(xì)胞質(zhì)尾。
[0118] 術(shù)語"針對P-選擇蛋白的抗體"和"抗-P-選擇蛋白抗體"表示這樣的抗體：其 能夠以足夠的親和力結(jié)合P-選擇蛋白，使得所述抗體可在靶向P-選擇蛋白中用作診斷劑 和/或治療劑。本文中使用的術(shù)語"結(jié)合P-選擇蛋白"是指，在BIAcore測定（Pharmacia Biosensor AB，Uppsala,瑞典）中或在ELISA中抗體對P-選擇蛋白的結(jié)合，其中將經(jīng)純化 的P-選擇蛋白或P-選擇蛋白CH0轉(zhuǎn)染子包被在微量滴定板上。
[0119] 在BIAcore測定中，抗體結(jié)合于表面上，并且通過表面等離子體共振（SPR)來測量 P-選擇蛋白的結(jié)合。結(jié)合的親和性由術(shù)語ka(來自抗體/抗原復(fù)合物中的抗體的結(jié)合速率 常數(shù)）、kd(解離常數(shù)）以及KD(kd/ka)來定義。對于本發(fā)明特別有用的抗體表現(xiàn)出ΚΓ 8或 更小、特別是約ΚΓ11至1(Γ9Μ的KD。
[0120] 在P-選擇蛋白-特異性的ELISA中，將表達經(jīng)純化的P-選擇蛋白的CH0轉(zhuǎn)染子 包被在微量滴定板上，并且用生物素化的抗-人IgG和ELISA的常規(guī)步驟檢測抗體對P-選 擇蛋白的結(jié)合。對于本發(fā)明特別有用的抗體在該測定中的EC 5(I值范圍是在0. 01-0. 08 μ g/ ml之間，更特別地是在0. 01-0. 04 μ g/ml之間。
[0121] 術(shù)語"抗體"包括不同形式的抗體結(jié)構(gòu)，包括、但不限于完整抗體和抗體片段。根 據(jù)本發(fā)明的抗體具體地是人抗體、人源化抗體、嵌合抗體、抗體片段或其它遺傳工程改造抗 體，只要保留根據(jù)本發(fā)明的特有性能即可。更具體地，所述抗體是人或人源化的單克隆抗 體，特別是重組人抗體。
[0122] "抗體片段"包含全長抗體的一部分，優(yōu)選其可變結(jié)構(gòu)域，或至少其抗原結(jié)合位點。 抗體片段的例子包括由抗體片段形成的雙抗體、單鏈抗體分子和多特異性抗體。scFv抗體 描述在例如 Houston，J. S.，Methods in Enzymol. 203(1991)46-96 中。另外，抗體片段包 括具有VH結(jié)構(gòu)域（即能夠與 '結(jié)構(gòu)域裝配在一起）或結(jié)合Α β的' 結(jié)構(gòu)域（即能夠與VH 結(jié)構(gòu)域裝配在一起成為功能性抗原結(jié)合位點并由此提供性質(zhì)）的特征的單鏈多肽。
[0123] 本文中使用的術(shù)語"單克隆抗體"或"單克隆抗體組合物"表示具有單一氨基酸組 成的抗體分子的制品。
[0124] 術(shù)語"嵌合抗體"指一種抗體，其包括來自一種來源或物種的可變區(qū)，即結(jié)合區(qū)， 以及源自不同來源或物種的恒定區(qū)的至少一部分，其通常通過重組DNA技術(shù)進行制備。包 括鼠可變區(qū)和人恒定區(qū)的嵌合抗體是特別重要的。本發(fā)明涵蓋的"嵌合抗體"的其它形式 是這樣的那些，其中恒定區(qū)已經(jīng)被從初始抗體的恒定區(qū)開始進行修飾或改變以產(chǎn)生根據(jù)本 發(fā)明的特性，特別是關(guān)于Clq結(jié)合和/或Fc受體（FcR)結(jié)合。也將這種"嵌合"抗體稱作 "類別轉(zhuǎn)換抗體"。嵌合抗體是被表達的免疫球蛋白基因的產(chǎn)物，該基因包括編碼免疫球蛋 白可變區(qū)的DNA區(qū)段和編碼免疫球蛋白恒定區(qū)的DNA區(qū)段。制備嵌合抗體的方法包括目前 在本領(lǐng)域眾所周知的常規(guī)重組DNA和基因轉(zhuǎn)染技術(shù)。見，例如，Morrison，S.L.，等，美國國 家科學(xué)院學(xué)報（Proc. Natl. Acad Sci. USA)81 (1984)6851-6855 ;美國專利號 5, 202, 238 和 5, 204, 244。
[0125] 術(shù)語"人源化抗體"指這樣的抗體，其中的框架或"互補決定區(qū)"（⑶R)已經(jīng)被修飾 為包括與母體免疫球蛋白相比特異性不同的免疫球蛋白的CDR。在一個優(yōu)選實施方案中， 將鼠 CDR移植到人抗體的框架區(qū)以制備"人源化抗體"。見，例如，Riechmann，L.，等，自然 (Nature) 332 (1988) 323-327 ;和 Neuberger，M. S.，等，自然（Nature) 314 (1985) 268-270。特 別優(yōu)選的CDRs對應(yīng)于識別以上指出的關(guān)于嵌合抗體的抗原的那些代表性序列。本發(fā)明涵 蓋的"人源化抗體"的其它形式是這樣的那些，其中恒定區(qū)已經(jīng)另外被從初始抗體的恒定區(qū) 開始進行修飾或改變以產(chǎn)生根據(jù)本發(fā)明的特性，特別是關(guān)于Clq結(jié)合和/或Fc受體（FcR) 結(jié)合。
[0126] 本文中使用的術(shù)語"人抗體"意欲包括具有源自人種系免疫球蛋白序列的可變區(qū) 和恒定區(qū)的抗體。人抗體是現(xiàn)有技術(shù)中公知的（van Dijk，M. A.，和van de Winkel，J. G， 當(dāng)前化學(xué)生物學(xué)觀點（Curr. Opin. Chem. Biol). 5(2001)368-374)。人抗體還可以在轉(zhuǎn)基因 動物（例如小鼠）中產(chǎn)生，所述轉(zhuǎn)基因動物在免疫時能夠在缺乏內(nèi)源免疫球蛋白生成的條 件下產(chǎn)生人抗體的全部所有組成成分或選擇部分（selection)。在所述種系突變小鼠中轉(zhuǎn) 移人種系免疫球蛋白基因陣列將導(dǎo)致在抗原攻擊時產(chǎn)生人抗體（見，例如Jakobovits，A.， 等·，Proc. Natl. Acad. Sci. USA(美國國家科學(xué)院學(xué)報）90 (1993) 2551-2555 Jakobovits， A.，等·，Nature (自然）362 (I993) 255_258 ;Bruggemann，Μ·，等·，Year Immunol.(免疫 學(xué)年度）7(1993)33-40)。人抗體還可以在噬菌體展示文庫中產(chǎn)生〇1〇(^61113〇〇111，！1.1?.，和 Winter，G.，J. Mol. Biol.(分子生物學(xué)雜志）227 (1992) 381-388 ;Marks，J. D.，等·，J. Mol. Biol.(分子生物學(xué)雜志）222 (1991) 581-597)。Cole，等和Boerner等的技術(shù)也可以用于 制備人單克隆抗體（Cole，等·，Monoclonal antibodies and Cancer Therapy (單克隆抗 體和癌癥治療），Alan R. Liss，第 77 頁（l985);和 Boerner, Ρ·，等·，J. Immunol.(免疫學(xué) 雜志）147 (1991) 86-95)。如已經(jīng)對根據(jù)本發(fā)明的嵌合和人源化抗體所提及地，術(shù)語"人抗 體"用于本文中時還包括這樣的抗體，其在恒定區(qū)內(nèi)進行修飾以產(chǎn)生根據(jù)本發(fā)明的特性，特 別是關(guān)于Clq結(jié)合和/或FcR結(jié)合，例如通過"類別轉(zhuǎn)換"即改變或突變Fc部分（例如由 IgGl 到 IgG4 和 / 或 IgGl/IgG4 突變。）
[0127] 本文中使用的針對P-選擇蛋白的人抗體的特征在于，相對于E-選擇蛋白和L-選 擇蛋白，對P-選擇蛋白的高選擇性。根據(jù)本發(fā)明的這樣的抗體以在〇. 01-0. 07 μ g/ml范圍 內(nèi)的EC5Q值結(jié)合表達P-選擇蛋白的細(xì)胞。在表達E-選擇蛋白和L-選擇蛋白的細(xì)胞上的 EC5Q值優(yōu)選地超過100 μ g/ml。
[0128] 本文中使用的術(shù)語"重組人抗體"意欲包括通過重組方法制備、表達、產(chǎn)生或分離 的所有人抗體，諸如分離自宿主細(xì)胞，諸如NS0或CH0細(xì)胞的抗體或分離自人免疫球蛋白基 因的轉(zhuǎn)基因動物（例如小鼠）的抗體，或利用轉(zhuǎn)染到宿主細(xì)胞中的重組表達載體表達的抗 體。這種重組人抗體具有處于重排形式的可變區(qū)和恒定區(qū)。根據(jù)本發(fā)明的重組人抗體已經(jīng) 經(jīng)歷了體內(nèi)體細(xì)胞高變。因此，重組抗體的VH和VL區(qū)域的氨基酸序列是盡管源自并涉及 人種系VH和VL序列，但在體內(nèi)可能不天然存在于人抗體種系所有組成成分中的序列。
[0129] 本文中使用的"可變區(qū)"（輕鏈的可變區(qū)（')、重鏈的可變區(qū)（VH))或"可變結(jié)構(gòu) 域"表示直接參與抗體與抗原結(jié)合的每對輕鏈和重鏈結(jié)構(gòu)域?？勺冚p鏈和重鏈結(jié)構(gòu)域具有 相同的一般結(jié)構(gòu)且每個結(jié)構(gòu)域包括4個框架（FR)區(qū)，所述框架區(qū)的序列普遍保守，其通過3 個"高變區(qū)"（或互補決定區(qū)，⑶R)相連接?？蚣軈^(qū)采用β-折疊構(gòu)象，且⑶R可以形成連 接β-折疊結(jié)構(gòu)的環(huán)。每條鏈中的CDR通過框架區(qū)以其三維結(jié)構(gòu)保持并與來自另一條鏈的 CDR -起形成抗原結(jié)合位點?？贵w的重鏈和輕鏈CDR3區(qū)在根據(jù)本發(fā)明的抗體的結(jié)合特異性 /親和性方面發(fā)揮特別重要的作用。本文中使用的術(shù)語"抗體的抗原結(jié)合部分"表示抗體的 負(fù)責(zé)抗原結(jié)合的氨基酸殘基?？贵w的抗原結(jié)合部分包括來自"互補決定區(qū)"或"CDR"的氨基 酸殘基。"框架"或"FR"區(qū)是除本文中定義的高變區(qū)殘基之外的那些可變結(jié)構(gòu)域區(qū)域。因 此，抗體的輕鏈和重鏈可變結(jié)構(gòu)域從Ν端到C端包括結(jié)構(gòu)域FR1XDR1、FR2XDR2、FR3XDR3 和FR4。特別地，重鏈的⑶R3是最有助于抗原結(jié)合并限定抗體的性能的區(qū)域。按照Kabat 等，免疫目的的蛋白質(zhì)序列（Sequences of Proteins of Immunological Interest)，第 5 版，公眾健康服務(wù)，國家健康研究所（Public Health Service, National Institutes of Health)，Bethesda，MD. (1991)的標(biāo)準(zhǔn)定義，確定CDR和FR區(qū)域和/或來自"高變環(huán)"的那 些殘基。
[0130] 術(shù)語"表位"包括能夠特異性結(jié)合抗體的任何多肽決定簇。在某些實施方案中，表 位決定簇包括分子的化學(xué)活性表面分組（groupings)，諸如氨基酸、糖側(cè)鏈、磷酰基或磺酰 基，且，在某些實施方案中，可以具有特定的三維結(jié)構(gòu)特征，和或特定的帶電特性。表位是被 抗體結(jié)合的抗原區(qū)域。
[0131] 對于本發(fā)明特別有用的抗體具體地能夠在有P-選擇蛋白片段氨基酸 60-75(SWissPr 〇t序列P16109)存在下結(jié)合P-選擇蛋白，和/或不會競爭性地抑制由指定 為ATCC登記號HB11041的細(xì)胞系分泌的抗體對P-選擇蛋白的結(jié)合。
[0132] "恒定區(qū)"或"恒定結(jié)構(gòu)域"不直接參與抗體與抗原的結(jié)合，但是表現(xiàn)出各種效應(yīng)子 功能。取決于它們的重鏈的恒定區(qū)的氨基酸序列，將抗體或免疫球蛋白分成以下類別：IgA、 IgD、IgE、IgG和IgM，并且這些類別中的幾類可以進一步分成亞類（同種型），例如IgGl、 IgG2、IgG3和IgG4、IgAl和IgA2。在本發(fā)明中使用的抗體具體地屬于IgG類型，更具體地 屬于IgGl或IgG4人亞型。
[0133] 對于本發(fā)明特別有用的抗體的特征在于，它含有從人起源衍生出的Fc部分，并且 它不會結(jié)合補體因子Clq也不會結(jié)合效應(yīng)細(xì)胞上的Fcy受體。具體地，所述抗體的特征在 于，它是含有至少一個在 L234、L235、D270、N297、E318、K320、K322、P331 和 / 或 P329 中的 突變的人亞類IgGl的抗體，或含有至少一個在L235和S228(根據(jù)EU索引編號）中的突變 的人亞類IgG4的抗體。更具體地，它是人亞類IgG4的抗體，其中S228被P替代且L235被 E替代（SPLE突變）。這樣的抗體被定義為IgG4vl (S228P ;L235E)。特別感興趣的其它抗 體是被定義為 IgGlvl(PVA-236 ;如由 E233P 指定的 GLPSS331 ;L234V ;L235A ;8G236 ;A327G ; A330S ;P331S)和 IgGlv2(L234A ;L235A)的那些。
[0134] 藥物制劑所含的針對P-選擇蛋白的抗體的濃度是在40mg/ml至200mg/ml的范圍 內(nèi)，特別是在40mg/ml至100mg/ml的范圍內(nèi)，更特別地在40mg/ml至60mg/ml的范圍內(nèi)，最 特別地為50mg/ml。
[0135] 本發(fā)明的藥物制劑包含泊洛沙姆作為表面活性劑，以減少抗體的聚集和顆粒形 成。本文中使用的術(shù)語"泊洛沙姆（poloxamer)"包括由聚氧丙烯中央疏水鏈和側(cè)接的2 個聚氧乙烯親水鏈構(gòu)成的聚氧乙烯-聚氧丙烯三嵌段共聚物，其被稱作泊洛沙姆188,并 由BASF(Parsippany, N. J.)在商業(yè)名稱PLURONiC? F68下銷售。在本發(fā)明的制劑中 可以使用的其它泊洛沙姆包括泊洛沙姆403(銷售為PLURONIC? P123)、泊洛沙姆 407 (銷售為PLURONIC? P127)、泊洛沙姆402 (銷售為PLURONiC? P122)、泊洛沙 姆181 (銷售為PLURONIC?L61)、泊洛沙姆401 (銷售為PLURONlC?:L121)、泊洛沙 姆 185 (銷售為 PLURONiC? P65)和泊洛沙姆 338 (銷售為 PLURONIC?. F108)。
[0136] 本文中使用的術(shù)語"表面活性劑"表示，用于保護蛋白制劑抵抗物理應(yīng)力（如攪拌 和剪切）的藥學(xué)上可接受的賦形劑。藥學(xué)上可接受的表面活性劑的例子包括：聚氧乙烯脫 水山梨糖醇脂肪酸酯（吐溫）、聚氧乙烯烷基醚（例如在商標(biāo)Brij?下銷售的那些）和聚 氧乙烯-聚氧丙烯共聚物（泊洛沙姆，Pluronic)。聚氧乙烯脫水山梨糖醇-脂肪酸酯的例 子是聚山梨酯20 (在商標(biāo)吐溫20?下銷售）和聚山梨酯80 (在商標(biāo)吐溫80?下銷售）。
[0137] 本文中使用的術(shù)語"緩沖液"表示穩(wěn)定藥物制劑的pH的藥學(xué)上可接受的賦形劑。 合適的緩沖液是本領(lǐng)域眾所周知的，且可以在文獻中找到。優(yōu)選的藥學(xué)上可接受的緩沖液 包括但不限于：組氨酸緩沖液、檸檬酸鹽緩沖液、琥珀酸鹽緩沖液、乙酸鹽緩沖液、精氨酸緩 沖液、磷酸鹽緩沖液或其混合物。特別感興趣的緩沖液包含L-組氨酸或L-組氨酸和L-組 氨酸鹽酸鹽的混合物，其用本領(lǐng)域已知的酸或堿進行pH調(diào)節(jié)。上述的緩沖液通常以約5mM 至約100mM、特別是約10mM至約30mM、更特別是約20mM的量使用。獨立于使用的緩沖液， 用本領(lǐng)域已知的酸或堿（例如鹽酸、乙酸、磷酸、硫酸和檸檬酸、氫氧化鈉和氫氧化鉀）可 以將pH調(diào)至在4. 5-7. 0范圍內(nèi)的值，特別是調(diào)至在5. 0-6. 0范圍內(nèi)的值，最特別地是調(diào)至 pH5. 5±0. 03。
[0138] 術(shù)語"穩(wěn)定劑"表示，在制備、貯存和應(yīng)用過程中保護活性藥物成分和/或制劑免 于化學(xué)和/或物理降解的藥學(xué)上可接受的賦形劑。Cleland等人（1993)，Crit Rev Ther Drug Carrier Syst 10(4) :307-77,Wang(1999)Int J Pharm 185(2) ： 129-88,Wang(2000) Int J Pharm 203(1-2) :1-60 和 Chi 等人（2003)Pharm Res 20(9) :1325-36 綜述了蛋白藥 物的化學(xué)和物理降解途徑。穩(wěn)定劑包括、但不限于：糖，氨基酸，多元醇，環(huán)糊精，例如羥丙 基-β-環(huán)糊精、磺丁基乙基-β-環(huán)糊精、β-環(huán)糊精，聚乙二醇，例如PEG 3000、PEG 3350、 PEG 4000、PEG 6000,白蛋白，人血清白蛋白（HSA)，牛血清白蛋白（BSA)，鹽，例如氯化鈉、 氯化鎂、氯化鈣，螯合劑，例如EDTA，如在后面定義的。在本發(fā)明中具體地使用的穩(wěn)定劑選自 糖、多元醇和氨基酸。更具體地，所述穩(wěn)定劑選自蔗糖、海藻糖、山梨糖醇和精氨酸鹽酸鹽。 穩(wěn)定劑可以以下述量存在于制劑中：約lOOmM至約500mM的量，特別是約140至約250mM的 量，更特別是約210mM至約230mM的量。更具體地，以約210mM至約230mM的量使用蔗糖或 海藻糖作為穩(wěn)定劑。
[0139] 在某些實施方案中，本發(fā)明的穩(wěn)定液體藥物制劑包含抗氧化劑作為第二種穩(wěn)定 齊IJ。"抗氧化劑"是阻止活性藥物成分的氧化的藥學(xué)上可接受的賦形劑?？寡趸瘎┌?、但 不限于：螯合劑諸如EDTA、檸檬酸、抗壞血酸、丁羥甲苯（BHT)、丁羥茴香醚（BHA)、亞硫酸 鈉、對氨基苯甲酸、谷胱甘肽、沒食子酸丙酯、半胱氨酸、甲硫氨酸、乙醇、苯甲醇和正乙酰基 半胱氨酸。可以以下述量使用抗氧化劑：約〇. 01至約l〇〇mM的量，特別是約5至約50mM的 量，更特別是約5至約25mM的量。具體地，選擇甲硫氨酸作為第二種穩(wěn)定劑，特別是以約5 至約25mM的濃度，更特別地以約10mM的濃度。
[0140] 本文中使用的術(shù)語"糖"表示單糖或寡糖。單糖是不可被酸水解的單體碳水化合 物，包括單糖和它們的衍生物，例如氨基糖。單糖的例子包括葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖、 山梨糖、核糖、脫氧核糖、神經(jīng)氨酸。寡糖是由超過一個經(jīng)由糖苷鍵連接的單體糖單元組成 的支鏈或直鏈碳水化合物。在寡糖內(nèi)的單體糖單元可以是相同的或不同的。取決于單體糖 單元的數(shù)目，寡糖是二糖、三糖、四糖、五糖諸如此類。與多糖不同，單糖和寡糖是水溶性的。 寡糖的例子包括蔗糖、海藻糖、乳糖、麥芽糖和棉子糖。具體地，糖選自蔗糖和海藻糖。
[0141] 本文中使用的術(shù)語"氨基酸"表示，具有位于羧基的α -位的氨基部分的藥學(xué)上可 接受的有機分子。氨基酸的例子包括精氨酸、甘氨酸、鳥氨酸、賴氨酸、組氨酸、谷氨酸、天冬 氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、絲氨酸、脯氨酸。通 常以下述量使用氨基酸：約5-500mM的量，特別是約5至約200mM的量，更特別是約100至 約150mM的量。
[0142] 本文中使用的術(shù)語"多元醇"表示具有超過一個羥基的藥學(xué)上可接受的醇。合適的 多元醇包括、但不限于：甘露醇、山梨糖醇、甘油（glycerine)、葡聚糖、丙三醇（glycerol)、 阿糖醇、丙二醇、聚乙二醇和它們的組合?？梢砸韵率隽渴褂枚嘣迹杭s10mM至約500mM的 量，特別是約10至約250mM的量，更特別是約200至約250mM的量。
[0143] 術(shù)語"穩(wěn)定劑"也包括冷凍保護劑。術(shù)語"冷凍保護劑"表示，在冷凍干燥過程、隨 后的貯存和重構(gòu)中保護不穩(wěn)定的活性成分（例如蛋白）抵抗失穩(wěn)條件的藥學(xué)上可接受的賦 形劑。冷凍保護劑包括、但不限于糖、多元醇（例如糖醇）和氨基酸。具體地，冷凍保護劑 可以選自：糖類諸如蔗糖、海藻糖、乳糖、葡萄糖、甘露糖、麥芽糖、半乳糖、果糖、山梨糖、棉 子糖、神經(jīng)氨酸，氨基糖類諸如葡糖胺、半乳糖胺、N-甲基葡糖胺（"葡甲胺"），多元醇類諸 如甘露醇和山梨糖醇，和氨基酸類諸如精氨酸和甘氨酸或其混合物。通常以下述量使用冷 凍保護劑：約10至約500mM的量，特別是約10至約250mM的量，更特別是約100至約250mM 的量。
[0144] 藥物制劑還可以含有張度劑。本文中使用的術(shù)語"張度劑"表示用于調(diào)節(jié)制劑的 張度的藥學(xué)上可接受的張度劑。所述制劑可以是低滲的、等滲的或高滲的。等滲性通常涉 及溶液的相對滲透壓，經(jīng)常是相對于人血清的滲透壓。根據(jù)本發(fā)明的制劑可以是低滲的、等 滲的或高滲的，但是優(yōu)選地是等滲的。等滲制劑是液體或從固體形式（例如從低壓凍干形 式）重構(gòu)的液體，且表示具有與它所對比的某種其它溶液（諸如生理學(xué)的鹽溶液和血清） 相同的張度的溶液。合適的張度劑包括、但不限于氯化鈉、氯化鉀、甘油和選自以下的任意 組分：氨基酸，糖，尤其是葡萄糖。通常以約5mM至約500mM的量使用張度劑。在穩(wěn)定劑和 張度劑內(nèi)，存在一組可以以兩種方式起作用的化合物，即它們可以同時為穩(wěn)定劑和張度劑。 其例子可以在以下集合中找到：糖、氨基酸、多元醇、環(huán)糊精、聚二醇和鹽。可以同時為穩(wěn)定 劑和張度劑的糖的一個例子是海藻糖。
[0145] 所述藥物制劑還可以含有佐劑諸如防腐劑、潤濕劑、乳化劑和分散劑。通過滅菌操 作和通過包含不同的抗細(xì)菌劑和抗真菌劑（例如，對羥基苯甲酸甲酯、三氯叔丁醇、苯酚、 山梨酸等），可以確保阻止微生物的存在。通常以約0.001至約2% (w/v)的量使用防腐劑。 防腐劑包括、但不限于：乙醇、苯甲醇、苯酚、間甲酚、對氯-間甲酚、對羥基苯甲酸甲酯或?qū)?羥基苯甲酸丙酯、苯扎氯銨。
[0146] 根據(jù)本發(fā)明的針對P-選擇蛋白的抗體的穩(wěn)定液體藥物制劑可以用于預(yù)防或治療 血栓性病癥和炎性疾病，特別是用于預(yù)防或治療選自以下的病癥或疾?。貉懿“Y諸如血 管狹窄、動脈粥樣硬化、動脈和深靜脈血栓形成、急性冠狀動脈綜合征（ACS)、冠狀動脈疾 病（CAD)、冠心病，用于預(yù)防用冠狀動脈旁路移植術(shù)（CABG)外科手術(shù)或經(jīng)皮冠狀動脈干預(yù) (PCI)治療的患者中的繼發(fā)性心血管事件、狹窄、血管成形術(shù)或支架放置以后再狹窄、周圍 動脈疾病（PAD)、周圍動脈閉塞性疾?。≒AOD)、重癥肢體缺血（CLI)、由以下病癥造成的白 細(xì)胞介導(dǎo)的缺血后組織損傷：心肌梗死、腦缺血事件（例如卒中）、血液透析分流狹窄、透析 分流阻塞、腎梗死、急性腎損傷、膿毒癥、急性白細(xì)胞介導(dǎo)的肺損傷、變態(tài)反應(yīng)諸如哮喘、移 植血管病變，用于預(yù)防器官移植排斥、急性胰腺炎、炎性腸病、自身免疫疾病諸如類風(fēng)濕性 關(guān)節(jié)炎、血栓性血小板減少性紫癜（TPP)、銀屑病、鐮狀細(xì)胞病，和用于通過抑制循環(huán)癌細(xì)胞 的粘附而預(yù)防腫瘤轉(zhuǎn)移。
[0147] 更具體地，針對P-選擇蛋白的抗體的穩(wěn)定液體藥物制劑可以用于預(yù)防或治療急 性冠狀動脈綜合征（ACS)、用冠狀動脈旁路移植術(shù)（CABG)外科手術(shù)或經(jīng)皮冠狀動脈干預(yù) (PCI)治療的患者中的繼發(fā)性心血管事件、狹窄、血管成形術(shù)或支架放置以后再狹窄、周圍 動脈疾?。≒AD)、周圍動脈閉塞性疾?。≒A0D)和重癥肢體缺血（CLI)。
[0148] 通過靜脈內(nèi)（i. V.)、皮下（s. c.)或任意其它胃腸外施用方式（如藥學(xué)領(lǐng)域中已知 的那些方式），可以施用根據(jù)本發(fā)明的穩(wěn)定液體藥物制劑。
[0149] 考慮到它們的高穩(wěn)定性，根據(jù)本發(fā)明的藥物制劑可以在不需要線內(nèi)過濾器 (in-line filter)的情況下靜脈內(nèi)施用，且因而比需要用線內(nèi)過濾器才能施用的常規(guī)制劑 遠(yuǎn)遠(yuǎn)更方便地操作。必須將線內(nèi)過濾器諸如Stenfix'R安裝在靜脈內(nèi)藥物的輸注線中，以 防止可能存在于靜脈內(nèi)溶液或線中的任何顆粒、空氣或微生物的施用。5-20微米尺寸和更 大的顆粒具有阻塞穿過肺毛細(xì)血管的血流的能力，這會導(dǎo)致并發(fā)癥諸如肺栓塞。外來顆粒 還可以在注射部位處造成靜脈炎，并且過濾器可以幫助降低靜脈炎的發(fā)病率。
[0150] 要用于體內(nèi)施用的穩(wěn)定制劑必須是無菌的。這通過穿過無菌過濾膜的過濾容易地 實現(xiàn)。
[0151] 通過本領(lǐng)域已知的方法，例如超濾-透析過濾、透析、添加和混合、冷凍干燥、重構(gòu) 及其組合，可以制備根據(jù)本發(fā)明的穩(wěn)定液體藥物制劑?？梢栽谙挛闹姓业礁鶕?jù)本發(fā)明的制 劑的制備例子。
[0152] 根據(jù)本發(fā)明的穩(wěn)定液體藥物制劑還可以呈低壓凍干形式或呈從低壓凍干形式重 構(gòu)的液體形式。通過本領(lǐng)域已知的冷凍干燥方法，制備"低壓凍干形式"。所述凍干粉劑經(jīng) 常具有約〇. 1-5% (w/w)的殘余含水量，且作為粉末或物理上穩(wěn)定的餅狀物存在。通過在加 入重構(gòu)介質(zhì)以后的快速溶解，可以從凍干粉劑得到"重構(gòu)形式"。合適的重構(gòu)介質(zhì)包括、但不 限于：注射用水（WFI)、抑制細(xì)菌注射用水（BWFI)、氯化鈉溶液（例如0. 9% (w/v)NaCl)、葡 萄糖溶液（例如5 % (w/v)葡萄糖）、含有表面活性劑的溶液（例如0.01 % (w/v)聚山梨酯 20和pH緩沖溶液（例如磷酸鹽緩沖溶液）。
[0153] 抗體的生產(chǎn)
[0154] 從雜交瘤細(xì)胞系、尤其是從雜交瘤細(xì)胞系hu-Mab〈P_選擇蛋白〉LC1004_001(抗 體 HuMab 001)、hu-Mab〈P-選擇蛋白〉LC 1004-002 (抗體 HuMab 002)和 hu-Mab〈P-選擇 蛋白〉LC 1004-017(抗體HuMab 017)(它們在國際承認(rèn)用于專利程序的微生物保存布達佩 斯條約下于2004年3月30日保藏在德國的德意志微生物保藏中心（Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH，DSMZ)，并分別在保藏號 DSM ACC2640、DSM ACC2641和DSM ACC2642下得到），可以生產(chǎn)對于本發(fā)明特別有用的針對P-選擇蛋白的抗 體。
[0155] 具體地，通過重組方式生產(chǎn)對于本發(fā)明特別有用的抗體。這樣的方法是在現(xiàn)有 技術(shù)中廣泛已知的，并且描述在例如以下綜述文章中：Makrides，S. C. , Protein Expr. Purif. 17(1999) 183-202 ；Geisse, S.,等人，Protein Expr. Purif. 8 (1996) 271-282 ; Kaufman, R.J. , Mol. Bio techno 1. 16 (2000) 151-161 ;或 Werner, R.G.，Drug Res. 48(1998)870-880。所述方法包括在原核和真核細(xì)胞中表達蛋白，隨后分離抗體多肽， 并經(jīng)常純化至藥學(xué)上可接受的純度。為了表達蛋白，通過標(biāo)準(zhǔn)方法將編碼輕鏈和重鏈或其 片段的核酸插入表達載體中。使用常規(guī)操作，容易地分離編碼抗體的DNA和RNA并測序。 雜交瘤細(xì)胞可以充當(dāng)所述DNA和RNA的來源?？梢允褂贸Ｒ?guī)方法容易地對這樣的核酸進行 分離和測序（例如，通過使用能夠特異性結(jié)合編碼抗體的重鏈和輕鏈的基因的寡核苷酸探 針）。在適當(dāng)?shù)脑嘶蛘婧怂拗骷?xì)胞如CH0細(xì)胞、NS0細(xì)胞、SP2/0細(xì)胞、HEK293細(xì)胞或C0S 細(xì)胞中進行表達，并通過標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)從細(xì)胞（裂解以后的上清液或細(xì)胞）回收抗體。通過常 規(guī)免疫球蛋白純化操作，例如，使用蛋白A-瓊脂糖的柱色譜法、羥基磷灰石色譜法、凝膠電 泳、透析或親和色譜法，適當(dāng)?shù)貜呐囵B(yǎng)基中分離出抗體。
[0156] 在本申請中公開的氨基酸序列：
[0157] SEQ ID NO :1 HuMab 001的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域
[0158] SEQ ID NO :2 HuMab 001的重鏈可變結(jié)構(gòu)域
[0159] SEQ ID NO :3 HuMab 002的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域
[0160] SEQ ID NO :4 HuMab 002的重鏈可變結(jié)構(gòu)域
[0161] SEQ ID NO :5 HuMab 003的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域
[0162] SEQ ID NO :6 HuMab 003的重鏈可變結(jié)構(gòu)域
[0163] SEQ ID NO :7 HuMab 004(1)的輕鏈⑴可變結(jié)構(gòu)域
[0164] SEQ ID NO :8 HuMab 004(1)的重鏈⑴可變結(jié)構(gòu)域
[0165] SEQ ID NO :9 HuMab 004(11)的輕鏈（II)可變結(jié)構(gòu)域
[0166] SEQ ID N0 :10 HuMab 004(11)的重鏈（II)可變結(jié)構(gòu)域
[0167] SEQ ID N0 :11 HuMab 005的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域
[0168] SEQ ID N0 :12 HuMab 005的重鏈可變結(jié)構(gòu)域
[0169] SEQ ID N0 :13 HuMab 010(1)的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域
[0170] SEQ ID N0 :14 HuMab 010(1)的重鏈可變結(jié)構(gòu)域
[0171] SEQ ID N0 :15 HuMab 010(11)的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域
[0172] SEQ ID N0 :16 HuMab 010(11)的重鏈可變結(jié)構(gòu)域
[0173] SEQ ID N0 :17 HuMab 010(111)的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域
[0174] SEQ ID N0 :18 HuMab 010(111)的重鏈可變結(jié)構(gòu)域
[0175] SEQ ID N0 :19 HuMab 011的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域
[0176] SEQ ID NO :20 HuMab 011的重鏈可變結(jié)構(gòu)域
[0177] SEQ ID NO :21 HuMab 017的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域
[0178] SEQ ID NO :22 HuMab 017的重鏈可變結(jié)構(gòu)域
[0179] SEQ ID NO 23 HuMab 002 IgG4vl 的輕鏈
[0180] SEQ ID NO 24 HuMab 002 IgG4vl 的重鏈
[0181] 實施例
[0182] 如下開發(fā)根據(jù)本發(fā)明的用于靜脈內(nèi)（i. v.)施用的液體藥物產(chǎn)品制劑。
[0183] 實施例1 :用于初步制劑篩詵的液體制劑的制各
[0184] 以50mg/ml的蛋白濃度，制備在表1中列出的huMAb P-選擇蛋白液體制劑F1至 F24。
[0185] 以大約20mg/mL的濃度，在20mM組氨酸緩沖液（pH為大約5. 5)中提供如在 W02005/100402中所述制備和得到的huMAb P-選擇蛋白抗體。在本實施例中使用的huMAb P-選擇蛋白抗體是包含SEQ ID NO :24的重鏈和SEQ ID NO :23的輕鏈的人抗體。
[0186] 為了制備液體制劑，將huMAb P-選擇蛋白在含有預(yù)期的緩沖液組成的滲濾緩沖液 中進行緩沖液交換，并通過超濾濃縮至大約80mg/mL的抗體濃度。超濾操作結(jié)束以后，將賦 形劑（例如海藻糖、甲硫氨酸）作為儲備溶液添加到抗體溶液中。然后加入作為125倍儲 備溶液的表面活性劑。最后，用緩沖液將蛋白濃度調(diào)至大約50mg/mL的最終huMAb P-選擇 蛋白濃度。
[0187] 將所有制劑穿過0. 22 μ m低蛋白結(jié)合過濾器無菌過濾，并無菌填充進無菌6mL玻 璃管形瓶中，所述玻璃管形瓶用ETFE (乙烯和四氟乙烯的共聚物）包被的橡膠塞和鋁鉗口 蓋（alucrimp cap)封閉。填充體積為大約2. 4mL。將這些制劑在不同氣候條件（5°C、25°C 和40°C )下存儲不同的時間段，并通過搖動（在5°C和25°C以ΖΟΟπ?ιΓ1搖動頻率搖動1周） 和凍融應(yīng)激方法（在_80°C /+5°C進行5個循環(huán)）施加應(yīng)激。
[0188] 表 1
[0189]
[0190]

【權(quán)利要求】
1. 一種穩(wěn)定液體藥物制劑，其包含： -40mg/ml至200mg/ml的針對P-選擇蛋白的抗體； -0.01 %至0. 1 %的泊洛沙姆； -5mM至lOOmM的緩沖液； -100mM至500mM的至少一種穩(wěn)定劑； 其pH在4. 5-7.0的范圍內(nèi)。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物制劑，其中所述針對P-選擇蛋白的抗體的濃度在40mg/ ml至100mg/ml的范圍內(nèi)，特別是50mg/ml。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的藥物制劑，其中所述泊洛沙姆是泊洛沙姆188。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1-3中的任一項所述的藥物制劑，其中所述泊洛沙姆以在0.01%至 0. 05%范圍內(nèi)、特別是0. 02%的濃度存在。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1-4中的任一項所述的藥物制劑，其中所述緩沖液是組氨酸緩沖液， 特別是組氨酸乙酸鹽緩沖液。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1-5中的任一項所述的藥物制劑，其中所述緩沖液具有在10-30mM范 圍內(nèi)、特別是20mM的濃度。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1-6中的任一項所述的藥物制劑，其中所述制劑的pH在5. 0-6. 0的范 圍內(nèi)，特別是5. 5。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1-7中的任一項所述的藥物制劑，其中至少一種穩(wěn)定劑選自糖或氨基 酸。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1-8中的任一項所述的藥物制劑，其中至少一種穩(wěn)定劑以在 140-250mM范圍內(nèi)、特別是在210-230mM范圍內(nèi)的濃度存在。
10. 根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的藥物制劑，其中所述穩(wěn)定劑選自由海藻糖、蔗糖、山梨糖 醇和精氨酸鹽酸鹽組成的組。
11. 根據(jù)權(quán)利要求1-11中的任一項所述的藥物制劑，其中所述針對P-選擇蛋白的抗體 是人抗體或人源化抗體。
12. 根據(jù)權(quán)利要求1-11中的任一項所述的藥物制劑，其中所述針對P-選擇蛋白的抗體 包含可變區(qū)，所述可變區(qū)獨立地選自由下述組成的組： l) 由SEQ ID NO :2的氨基酸序列限定的重鏈可變結(jié)構(gòu)域和由SEQ ID NO :1的氨基酸 序列限定的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域； m) 由SEQ ID NO :4的氨基酸序列限定的重鏈可變結(jié)構(gòu)域和由SEQ ID NO :3的氨基酸 序列限定的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域； η)由SEQ ID NO :6的氨基酸序列限定的重鏈可變結(jié)構(gòu)域和由SEQ ID NO :5的氨基酸 序列限定的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域； 〇)由SEQ ID NO :8的氨基酸序列限定的重鏈可變結(jié)構(gòu)域和由SEQ ID NO :7的氨基酸 序列限定的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域； P)由SEQ ID N0:10的氨基酸序列限定的重鏈可變結(jié)構(gòu)域和由SEQ ID N0:9的氨基酸 序列限定的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域； q)由SEQ ID N0:12的氨基酸序列限定的重鏈可變結(jié)構(gòu)域和由SEQ ID N0:11的氨基 酸序列限定的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域； r) 由SEQ ID NO :14的氨基酸序列限定的重鏈可變結(jié)構(gòu)域和由SEQ ID NO :13的氨基 酸序列限定的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域； s) 由SEQ ID N0:16的氨基酸序列限定的重鏈可變結(jié)構(gòu)域和由SEQ ID N0:15的氨基 酸序列限定的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域； t) 由SEQ ID N0:18的氨基酸序列限定的重鏈可變結(jié)構(gòu)域和由SEQ ID N0:17的氨基 酸序列限定的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域； u) 由SEQ ID N0:20的氨基酸序列限定的重鏈可變結(jié)構(gòu)域和由SEQ ID N0:19的氨基 酸序列限定的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域；和 v) 由SEQ ID NO :22的氨基酸序列限定的重鏈可變結(jié)構(gòu)域和由SEQ ID NO :21的氨基 酸序列限定的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域。
13. 根據(jù)權(quán)利要求1-12中的任一項所述的藥物制劑，其中所述針對P-選擇蛋白的抗體 的重鏈可變結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO :4的氨基酸序列，且所述針對P-的抗體的輕鏈可變結(jié)構(gòu) 域包含SEQ ID NO : 3的氨基酸序列。
14. 根據(jù)權(quán)利要求1-13中的任一項所述的藥物制劑，其中所述針對P-選擇蛋白的抗體 是包含SEQ ID NO :24的重鏈氨基酸序列和SEQ ID NO :23的輕鏈氨基酸序列的人抗體。
15. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的穩(wěn)定液體藥物制劑，其包含： 50mg/ml的針對P-選擇蛋白的人抗體，所述人抗體包含SEQ ID NO :24的重鏈氨基酸 序列和SEQ ID NO :23的輕鏈氨基酸序列；和 (i) 0.02 %的泊洛沙姆188， 230mM海藻糖，和 pH5. 5的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者 (ii) 0.02%的泊洛沙姆188， 210mM鹿糖，和 pH5. 5的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者 (iii) 0. 02%的泊洛沙姆188， 145mM精氨酸鹽酸鹽，和 pH5. 5的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者 (iv) 0.02 %的泊洛沙姆188， 230mM山梨糖醇，和 pH5. 5的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液。
16. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的穩(wěn)定液體藥物制劑，其包含： (a) 40mg/ml的針對P-選擇蛋白的人抗體，所述人抗體包含SEQ ID NO :24的重鏈氨基 酸序列和SEQ ID NO :23的輕鏈氨基酸序列， 〇. 01 %的泊洛沙姆188， 210mM鹿糖，和 pH5. 0的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者 (b) 60mg/ml的針對P-選擇蛋白的人抗體，所述人抗體包含SEQ ID NO :24的重鏈氨基 酸序列和SEQ ID NO :23的輕鏈氨基酸序列， 〇. 01 %的泊洛沙姆188， 210mM鹿糖，和 pH5. 0的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者 (c) 40mg/ml的針對P-選擇蛋白的人抗體，所述人抗體包含SEQ ID NO :24的重鏈氨基 酸序列和SEQ ID NO :23的輕鏈氨基酸序列， 0. 03%的泊洛沙姆188， 210mM鹿糖，和 pH5. 0的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者 (d) 60mg/ml的針對P-選擇蛋白的人抗體，所述人抗體包含SEQ ID NO :24的重鏈氨基 酸序列和SEQ ID NO :23的輕鏈氨基酸序列， 0. 03%的泊洛沙姆188， 210mM鹿糖，和 pH5. 0的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者 (e) 40mg/ml的針對P-選擇蛋白的人抗體，所述人抗體包含SEQ ID NO :24的重鏈氨基 酸序列和SEQ ID NO :23的輕鏈氨基酸序列， 〇. 01 %的泊洛沙姆188， 210mM鹿糖，和 pH6. 0的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者 (f) 60mg/ml的針對P-選擇蛋白的人抗體，所述人抗體包含SEQ ID NO :24的重鏈氨基 酸序列和SEQ ID NO :23的輕鏈氨基酸序列， 〇. 01 %的泊洛沙姆188， 210mM鹿糖，和 pH6. 0的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者 (g) 40mg/ml的針對P-選擇蛋白的人抗體，所述人抗體包含SEQ ID NO :24的重鏈氨基 酸序列和SEQ ID NO :23的輕鏈氨基酸序列， 0. 03%的泊洛沙姆188， 210mM鹿糖，和 pH6. 0的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者 (h) 60mg/ml的針對P-選擇蛋白的人抗體，所述人抗體包含SEQ ID NO :24的重鏈氨基 酸序列和SEQ ID NO :23的輕鏈氨基酸序列， 0. 03%的泊洛沙姆188， 210mM鹿糖，和 pH6. 0的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液；或者 (i) 50mg/ml的針對P-選擇蛋白的人抗體，所述人抗體包含SEQ ID N0:24的重鏈氨基 酸序列和SEQ ID NO :23的輕鏈氨基酸序列， 0. 02%的泊洛沙姆188， 210mM鹿糖，和 pH5. 5的20mM組氨酸乙酸鹽緩沖液。
17.根據(jù)權(quán)利要求1-16中的任一項所述的穩(wěn)定液體藥物制劑，其用于預(yù)防或治療炎 性疾病和血栓性疾病以及由炎性過程和/或血栓性過程驅(qū)動的血管疾病病狀，特別是用于 預(yù)防或治療具有基礎(chǔ)性動脈粥樣化血栓形成和血管狹窄的血管疾病，諸如冠狀動脈疾病 (CAD)、急性冠狀動脈綜合征（ACS)、周圍動脈疾病（PAD)、周圍動脈閉塞性疾?。≒AOD)、重 癥肢體缺血（CLI)、冠狀動脈旁路移植術(shù)（CABG)后狹窄、冠狀靜脈移植物疾病、經(jīng)皮冠狀動 脈介入（PCI)后再狹窄、透析分流狹窄、透析分流阻塞以及動脈和深靜脈血栓形成和血栓 性血小板減少性紫癜（TPP)，用于預(yù)防和治療由心肌梗死、腦缺血事件（例如卒中）、腎梗 死、急性腎損傷、器官移植排斥和急性白細(xì)胞介導(dǎo)的肺損傷造成的缺血后組織損傷，用于治 療膿毒性休克、變應(yīng)性病癥、哮喘、慢性阻塞性肺疾?。–OPD)、移植血管病變、急性胰腺炎、 炎性腸病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、特應(yīng)性皮炎、銀屑病、鐮狀細(xì)胞病，和用于預(yù)防腫瘤轉(zhuǎn)移。
18. 根據(jù)權(quán)利要求1-16中的任一項所述的穩(wěn)定液體藥物制劑用于制備藥物的用途，所 述藥物用于預(yù)防或治療炎性疾病和血栓性疾病以及由炎性過程和/或血栓性過程驅(qū)動的 血管疾病病狀，特別是用于預(yù)防或治療具有基礎(chǔ)性動脈粥樣化血栓形成和血管狹窄的血管 疾病，諸如冠狀動脈疾?。–AD)、急性冠狀動脈綜合征（ACS)、周圍動脈疾病（PAD)、周圍動 脈閉塞性疾病（PAOD)、重癥肢體缺血（CLI)、冠狀動脈旁路移植術(shù)（CABG)后狹窄、冠狀靜脈 移植物疾病、經(jīng)皮冠狀動脈介入（PCI)后再狹窄、透析分流狹窄、透析分流阻塞以及動脈和 深靜脈血栓形成和血栓性血小板減少性紫癜（TPP)，用于預(yù)防和治療由心肌梗死、腦缺血事 件（例如卒中）、腎梗死、急性腎損傷、器官移植排斥和急性白細(xì)胞介導(dǎo)的肺損傷造成的缺 血后組織損傷，用于治療膿毒性休克、變應(yīng)性病癥、哮喘、慢性阻塞性肺疾?。–OPD)、移植血 管病變、急性胰腺炎、炎性腸病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、特應(yīng)性皮炎、銀屑病、鐮狀細(xì)胞病，和用于 預(yù)防腫瘤轉(zhuǎn)移。
19. 一種方法，其用于預(yù)防或治療炎性疾病和血栓性疾病以及由炎性過程和/或血栓 性過程驅(qū)動的血管疾病病狀，特別是用于預(yù)防或治療具有基礎(chǔ)性動脈粥樣化血栓形成和血 管狹窄的血管疾病，諸如冠狀動脈疾?。–AD)、急性冠狀動脈綜合征（ACS)、周圍動脈疾病 (PAD)、周圍動脈閉塞性疾?。≒AOD)、重癥肢體缺血（CLI)、冠狀動脈旁路移植術(shù)（CABG)后 狹窄、冠狀靜脈移植物疾病、經(jīng)皮冠狀動脈介入（PCI)后再狹窄、透析分流狹窄、透析分流 阻塞以及動脈和深靜脈血栓形成和血栓性血小板減少性紫癜（TPP)，用于預(yù)防和治療由心 肌梗死、腦缺血事件（例如卒中）、腎梗死、急性腎損傷、器官移植排斥和急性白細(xì)胞介導(dǎo)的 肺損傷造成的缺血后組織損傷，用于治療膿毒性休克、變應(yīng)性病癥、哮喘、慢性阻塞性肺疾 ?。–OPD)、移植血管病變、急性胰腺炎、炎性腸病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、特應(yīng)性皮炎、銀屑病、鐮 狀細(xì)胞病，和用于預(yù)防腫瘤轉(zhuǎn)移，所述方法包括施用根據(jù)權(quán)利要求1-16中的任一項所述的 穩(wěn)定液體藥物制劑。
【文檔編號】C07K16/28GK104105506SQ201380008162
【公開日】2014年10月15日 申請日期:2013年3月7日 優(yōu)先權(quán)日:2012年3月8日
【發(fā)明者】米夏埃爾·阿德勒, 烏拉·格勞施奧夫, 漢斯-克里斯蒂·馬勒 申請人:霍夫曼-拉羅奇有限公司