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      一種紫紅曲霉菌株及利用該菌株發(fā)酵生產(chǎn)紅曲色素的方法與流程

      文檔序號(hào):11936528閱讀:896來源:國(guó)知局

      本發(fā)明屬于微生物發(fā)酵的技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種紫紅曲霉菌株及利用該菌株發(fā)酵生產(chǎn)紅曲色素的方法。



      背景技術(shù):

      在我國(guó)以及很多歐美國(guó)家,肥胖已成為一種常見的病癥。引起肥胖的因素有很多,包括遺傳因素、環(huán)境因素、飲食習(xí)慣、生活習(xí)慣等,其中進(jìn)食過多,尤其是高脂肪食物的過多攝入是導(dǎo)致肥胖的主要原因。因此肥胖人群不僅應(yīng)該降低食物的熱量還應(yīng)該限制脂肪的攝入,限制脂肪攝入的一條途徑就是抑制體內(nèi)的脂肪酶活力,如果能夠阻止脂肪的消化吸收,同時(shí)配以低脂肪膳食,對(duì)高脂肪引起的肥胖和疾病將會(huì)有很大的改善。脂肪酶可以將脂肪水解成為自由脂肪酸和甘油,脂肪酶用來產(chǎn)生能量,儲(chǔ)藏在脂肪組織中。所以,如果人體中如果脂肪酶被抑制,脂肪吸收和肥胖都能夠被控制。四氫利潑斯汀(Tetrahydrolipstatin)是一種商業(yè)化的抑制肥胖的制劑,也是較好的脂肪酶抑制劑。

      在亞洲地區(qū),紅曲色素是一種天然的食品著色劑,有著悠久的食用習(xí)慣。已有大量研究報(bào)道紅曲色素能夠降低哺乳動(dòng)物體內(nèi)的膽固醇和甘油三酯含量,提高人體免疫力和抑菌等作用,但是研究紅曲色素對(duì)脂肪酶的抑制性的研究并不多。目前,董夏蓮等通過D-青霉胺(D-penicillamine簡(jiǎn)稱D-Pen)對(duì)紅曲霉進(jìn)行誘導(dǎo),發(fā)現(xiàn)可以產(chǎn)生具有脂肪酶抑制活性的紅曲色素,但是D-Pen價(jià)格昂貴,不適合在工業(yè)生產(chǎn)中大量使用。因此,尋找一種價(jià)格低廉的誘導(dǎo)劑,使得具有脂肪酶抑制活性的紅曲色素能夠廣泛用于食品生產(chǎn)中,是亟待解決的難題。



      技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:

      為了解決現(xiàn)有技術(shù)中紅曲色素不能工業(yè)化生產(chǎn)的問題,本發(fā)明提供了一種紫紅曲霉菌株及利用該菌株發(fā)酵生產(chǎn)紅曲色素的方法,該方法簡(jiǎn)單有效,且易于工業(yè)化操作,能夠提高具有脂肪酶抑制活性的紅曲色素的產(chǎn)量。

      本發(fā)明提供了一種紫紅曲霉菌株MN-1,其保藏編號(hào)為CGMCC 11611。

      所述菌株MN-1建議的分類命名為紫紅曲霉,拉丁學(xué)名為Monascus purpureus;保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(CGMCC),保藏地址:北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)中國(guó)科學(xué)院微生物研究所,保藏日期為2015年11月30日,保藏編號(hào)為CGMCC 11611。

      本發(fā)明中紫紅曲霉菌株的菌落特征:在麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基(MEA)上生長(zhǎng)較為局限,25℃黑暗條件下培養(yǎng)10d,菌落直徑為29-35mm,邊緣不規(guī)則,氣生菌絲稀疏,淺到暗橙色;菌落背面紅褐色。

      顯微特征:分生孢子較少,分生孢子梗特化不明顯,直或稍彎曲,分生孢子球形,無色,壁光滑,基部平截,串生,5.6-11μm。未見成熟閉囊殼及子囊孢子。其Calmodulin基因序列如序列表中序列1所示。

      本發(fā)明還提供了一種利用該紫紅曲霉菌發(fā)酵生產(chǎn)紅曲色素的方法,該方法包括以下步驟:

      (1)取保藏的紫紅曲霉進(jìn)行孢子培養(yǎng),將得到的孢子溶解分散成濃度為103-107cfu/ml的孢子液;

      (2)將孢子液接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中,接種量為5-9%,發(fā)酵培養(yǎng)36-60h后,添加L型氨基酸和D型氨基酸,繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng);

      (3)發(fā)酵完畢后,用乙醇萃取紅曲色素。

      本發(fā)明紅曲色素的發(fā)酵生產(chǎn)方法中在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加L型氨基酸和D型氨基酸,以氨基酸作為誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)生產(chǎn)紅曲色素。氨基酸成本較低易得,同時(shí)誘導(dǎo)產(chǎn)生色素含量高,且具有較強(qiáng)的脂肪酶抑制性。本發(fā)明制備紅曲色素的方法簡(jiǎn)單,易操作。

      進(jìn)一步的,步驟(1)中,取保藏的紫紅曲霉在瓊脂固體培養(yǎng)基上進(jìn)行孢子培養(yǎng),培養(yǎng)溫度為28-32℃,培養(yǎng)時(shí)間為5-9d。

      進(jìn)一步的,瓊脂固體培養(yǎng)基的配方為:碳源3-4%、氮源0.5-1%、礦物質(zhì)0.2-0.5%,其中,碳源為可溶性淀粉、蔗糖、葡萄糖、麥芽糖中的一種或多種,氮源為硝酸鈉、硝酸銨、氯化銨、牛肉膏、酵母粉、酪蛋白氨基酸、蛋白胨中的一種或多種,礦物質(zhì)為磷酸二氫鉀、硫酸鎂、氯化鉀、中的一種或多種。

      進(jìn)一步的,將瓊脂固體培養(yǎng)基上的紫紅曲霉孢子用滅菌鏟子刮下來后,接種到液體培養(yǎng)基中,28-32℃條件下擴(kuò)大培養(yǎng)45-50h。

      進(jìn)一步的,液體培養(yǎng)基的配方為:碳源4-6%、氮源1.5-2.5%、礦物質(zhì)0.9-1%,其中,碳源為果糖、可溶性淀粉、蔗糖、葡萄糖、麥芽糖中的一種或多種,氮源為細(xì)菌蛋白胨、硝酸鈉、硝酸銨、氯化銨、牛肉膏、酵母粉、酪蛋白氨基酸中的一種或多種,礦物質(zhì)為磷酸二氫鉀、氯化鈉、硫酸鎂中的一種或多種。

      進(jìn)一步的,步驟(2)中,L型氨基酸為甘氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、絲氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、精氨酸中的一種或多種,L型氨基酸的添加量為0.25-0.45%。

      進(jìn)一步的,D型氨基酸為甘氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、酪氨酸、色氨酸、蘇氨酸、甲硫氨酸中的一種或多種,D型氨基酸的添加量為0.25-0.45%。

      進(jìn)一步的,發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為:碳源8-10%、氮源0.8-1.2%、礦物質(zhì)0.1-0.25%,其中,碳源為可溶性淀粉、蔗糖、葡萄糖、麥芽糖中的一種或多種,氮源為硝酸鈉、硝酸銨、氯化銨、牛肉膏、酵母粉、酪蛋白氨基酸、蛋白胨中的一種或多種,礦物質(zhì)為磷酸二氫鉀、硫酸鎂、氯化鉀、硫酸鐵中的一種或多種。發(fā)酵培養(yǎng)基的pH為6.0-7.0。

      進(jìn)一步的,步驟(2)中,發(fā)酵培養(yǎng)的條件為:搖床轉(zhuǎn)速為150-200r/min,溫度為28-32℃,時(shí)間為5-7d。

      本發(fā)明的有益效果為:本發(fā)明公開了一種新的紫紅曲霉菌株,其可以用于發(fā)酵生產(chǎn)紅曲色素。本發(fā)明紅曲色素的發(fā)酵生產(chǎn)方法以氨基酸為誘導(dǎo)劑,誘導(dǎo)紅曲霉產(chǎn)生紅曲色素,所制得的紅曲色素可以抑制脂肪酶活性,使得脂肪酶活性降低至<110U;所用氨基酸成本較低易得,同時(shí)誘導(dǎo)產(chǎn)生色素含量高,具有較強(qiáng)的脂肪酶抑制性;本發(fā)明發(fā)酵生產(chǎn)紅曲色素的方法簡(jiǎn)單,易操作。

      具體實(shí)施方式

      下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方案進(jìn)行詳細(xì)描述,但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)理解,下列實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明,而不應(yīng)視為限制本發(fā)明的范圍。本發(fā)明中,所有的試劑盒原料均可從市場(chǎng)獲得或者是本行業(yè)常用的。下面實(shí)施例中的方法,如無特別說明,均為本領(lǐng)域的常規(guī)方法。

      本發(fā)明中紫紅曲霉發(fā)酵生產(chǎn)物的檢測(cè)方法如下:

      1、菌絲體生物量測(cè)定

      菌絲體干重的測(cè)定:發(fā)酵液用三層紗布過濾,再用蒸餾水洗滌2-3次,擰干水分,在60℃烘箱中烘干至恒重,即為菌絲干重。

      2、色素的提取和定量

      取10ml發(fā)酵液,于4000r/min離心15min,取上清液1ml,加入70%的乙醇9ml,于60℃保溫2h,用70%的乙醇進(jìn)行適當(dāng)稀釋后按照GB 4926-85《中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)-食品添加劑紅曲米》規(guī)定的方法測(cè)定色價(jià),結(jié)果以505nm下的吸光度值表示色價(jià)高低。

      3、脂肪酶抑制活性測(cè)定

      以對(duì)硝基苯酚棕櫚酸酯(p-NPP)為底物,在最佳酶促反應(yīng)條件下,底物p-NPP與脂肪酶作用生成產(chǎn)物為對(duì)硝基苯酚(pNP)。根據(jù)一定時(shí)間內(nèi)pNP的生成量來確定脂肪酶的活力。

      4、桔霉素測(cè)定方法

      參考GB/T 5009.222-2008《紅曲類產(chǎn)品中桔霉素的測(cè)定》測(cè)定發(fā)酵產(chǎn)物中桔霉素的含量。

      實(shí)施例1

      本發(fā)明提供了一種紫紅曲霉菌株MN-1,其保藏編號(hào)為CGMCC 11611。所述菌株MN-1建議的分類命名為紫紅曲霉,拉丁學(xué)名為Monascus purpureus;保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(CGMCC),保藏地址:北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)中國(guó)科學(xué)院微生物研究所,保藏日期為2015年11月30日,保藏編號(hào)為CGMCC 11611。

      本發(fā)明還提供了一種利用該紫紅曲霉菌發(fā)酵生產(chǎn)紅曲色素的方法,該方法包括以下步驟:

      (1)取保藏的紫紅曲霉在瓊脂固體培養(yǎng)基(瓊脂固體培養(yǎng)基的配方為:蔗糖3%、酵母粉0.5%、磷酸二氫鉀0.15%、硫酸鎂0.05%,以上%為質(zhì)量體積比)上進(jìn)行孢子培養(yǎng),培養(yǎng)溫度為28℃,培養(yǎng)時(shí)間為5d;

      將培養(yǎng)在瓊脂固體培養(yǎng)基上的紫紅曲霉孢子用滅菌鏟子輕輕刮下來后,用生理鹽水調(diào)節(jié)孢子數(shù)為105cfu/ml;取該含有孢子的生理鹽水接種至液體培養(yǎng)中,30℃下?lián)u床180r/min培養(yǎng)48h,進(jìn)行孢子液的制備,其中液體培養(yǎng)基的配方為:果糖5%、蛋白胨2%、磷酸二氫鉀0.8%、氯化鈉0.1%、硫酸鎂0.05%,以上%為質(zhì)量體積比。

      (2)將孢子數(shù)為105cfu/ml的孢子液接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中,30℃下?lián)u床180r/min培養(yǎng)6d;其中發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為:蔗糖10%、酪蛋白氨基酸1%、磷酸二氫鉀0.1%、硫酸鎂0.05%、氯化鉀0.05%、硫酸鐵0.001%,以上%為質(zhì)量體積比,接種量為培養(yǎng)基體積的7%;

      發(fā)酵培養(yǎng)48h后,添加L型亮氨酸和D型亮氨酸,L型亮氨酸的添加量為培養(yǎng)基體積的0.35%,D型亮氨酸的添加量為培養(yǎng)基體積的0.35%。

      (3)發(fā)酵完畢后,用體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇萃取紅曲色素。

      培養(yǎng)6d后菌體量為6.8g,發(fā)酵液吸光度值為0.7,脂肪酶活性為95.22U,未檢出桔霉素。

      實(shí)施例2

      本發(fā)明提供了一種紫紅曲霉菌株MN-1,其保藏編號(hào)為CGMCC 11611。所述菌株MN-1建議的分類命名為紫紅曲霉,拉丁學(xué)名為Monascus purpureus;保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(CGMCC),保藏地址:北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)中國(guó)科學(xué)院微生物研究所,保藏日期為2015年11月30日,保藏編號(hào)為CGMCC 11611。

      本發(fā)明還提供了一種利用該紫紅曲霉菌發(fā)酵生產(chǎn)紅曲色素的方法,該方法包括以下步驟:

      (1)取保藏的紫紅曲霉在瓊脂固體培養(yǎng)基(瓊脂固體培養(yǎng)基的配方為:葡萄糖3.5%、酵母粉0.6%、磷酸二氫鉀0.2%、氯化鈉0.05%、硫酸鎂0.05%,以上%為質(zhì)量體積比)上進(jìn)行孢子培養(yǎng),培養(yǎng)溫度為30℃,培養(yǎng)時(shí)間為7d;

      將培養(yǎng)在瓊脂固體培養(yǎng)基上的紫紅曲霉孢子用滅菌鏟子輕輕刮下來后,用生理鹽水調(diào)節(jié)孢子數(shù)為103cfu/ml;取該含有孢子的生理鹽水接種至液體培養(yǎng)中,28℃下?lián)u床150r/min培養(yǎng)45h,進(jìn)行孢子液的制備,其中液體培養(yǎng)基的配方為:蔗糖6%、酵母粉1.5%、磷酸二氫鉀0.75%、氯化鈉0.1%、硫酸鎂0.05%,以上%為質(zhì)量體積比。

      (2)將孢子數(shù)為103cfu/ml的孢子液接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中,30℃下?lián)u床180r/min培養(yǎng)5d;其中發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為:葡萄糖12%、酵母粉0.8%、磷酸二氫鉀0.15%、硫酸鎂0.05%、氯化鉀0.05%,以上%為質(zhì)量體積比,接種量為培養(yǎng)基體積的9%;

      發(fā)酵培養(yǎng)36h后,添加L型酪氨酸和D型色氨酸,L型酪氨酸的添加量為培養(yǎng)基體積的0.2%,D型色氨基酸的添加量為培養(yǎng)基體積的0.3%。

      (3)發(fā)酵完畢后,用體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇萃取紅曲色素。

      培養(yǎng)5d后菌體量為6.2g,發(fā)酵液吸光度值為0.62,脂肪酶活性為100.23U,未檢出桔霉素。

      實(shí)施例3

      本發(fā)明提供了一種紫紅曲霉菌株MN-1,其保藏編號(hào)為CGMCC 11611。所述菌株MN-1建議的分類命名為紫紅曲霉,拉丁學(xué)名為Monascus purpureus;保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(CGMCC),保藏地址:北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)中國(guó)科學(xué)院微生物研究所,保藏日期為2015年11月30日,保藏編號(hào)為CGMCC 11611。

      本發(fā)明還提供了一種利用該紫紅曲霉菌發(fā)酵生產(chǎn)紅曲色素的方法,該方法包括以下步驟:

      (1)取保藏的紫紅曲霉在瓊脂固體培養(yǎng)基(瓊脂固體培養(yǎng)基的配方為:果糖4%、酪蛋白氨基酸1%、磷酸二氫鉀0.2%、氯化鈉0.15%、硫酸鎂0.15%,以上%為質(zhì)量體積比)上進(jìn)行孢子培養(yǎng),培養(yǎng)溫度為32℃,培養(yǎng)時(shí)間為9d;

      將培養(yǎng)在瓊脂固體培養(yǎng)基上的紫紅曲霉孢子用滅菌鏟子輕輕刮下來后,用生理鹽水調(diào)節(jié)孢子數(shù)為107cfu/ml;取該含有孢子的生理鹽水接種至液體培養(yǎng)中,32℃下?lián)u床200r/min培養(yǎng)50h,進(jìn)行孢子液的制備,其中,液體培養(yǎng)基的配方為:葡萄糖4%、酪蛋白氨基酸2.5%、磷酸二氫鉀0.85%、氯化鈉0.1%、硫酸鎂0.05%,以上%為質(zhì)量體積比。

      (2)將孢子數(shù)為107cfu/ml的孢子液接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中,32℃下?lián)u床200r/min培養(yǎng)7d;其中發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為:麥芽糖8%、牛肉膏1.2%、磷酸二氫鉀0.05%、硫酸鎂0.05%、氯化鉀0.05%,以上%為質(zhì)量體積比。

      發(fā)酵培養(yǎng)60h后,添加L型色氨酸和D型酪氨酸,L型色氨酸的添加量為培養(yǎng)基體積的0.45%,D型酪氨酸的添加量為培養(yǎng)基體積的0.45%。

      (3)發(fā)酵完畢后,用體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇萃取紅曲色素。

      培養(yǎng)7d后菌體量為6.0g,發(fā)酵液吸光度值為0.6,脂肪酶活性為100.45U,未檢出桔霉素。

      實(shí)施例4

      本發(fā)明提供了一種紫紅曲霉菌株MN-1,其保藏編號(hào)為CGMCC 11611。所述菌株MN-1建議的分類命名為紫紅曲霉,拉丁學(xué)名為Monascus purpureus;保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(CGMCC),保藏地址:北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)中國(guó)科學(xué)院微生物研究所,保藏日期為2015年11月30日,保藏編號(hào)為CGMCC 11611。

      本發(fā)明還提供了一種利用該紫紅曲霉菌發(fā)酵生產(chǎn)紅曲色素的方法,該方法包括以下步驟:

      (1)取保藏的紫紅曲霉在瓊脂固體培養(yǎng)基(瓊脂固體培養(yǎng)基的配方為:葡萄糖3.5%、酵母粉0.6%、磷酸二氫鉀0.2%、氯化鈉0.05%、硫酸鎂0.05%,以上%為質(zhì)量體積比)上進(jìn)行孢子培養(yǎng),培養(yǎng)溫度為30℃,培養(yǎng)時(shí)間為7d;

      將培養(yǎng)在瓊脂固體培養(yǎng)基上的紫紅曲霉孢子用滅菌鏟子輕輕刮下來后,用生理鹽水調(diào)節(jié)孢子數(shù)為103cfu/ml;取該含有孢子的生理鹽水接種至液體培養(yǎng)中,28℃下?lián)u床150r/min培養(yǎng)45h,進(jìn)行孢子液的制備,其中液體培養(yǎng)基的配方為:蔗糖6%、酵母粉1.5%、磷酸二氫鉀0.75%、氯化鈉0.1%、硫酸鎂0.05%,以上%為質(zhì)量體積比。

      (2)將孢子數(shù)為103cfu/ml的孢子液接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中,30℃下?lián)u床180r/min培養(yǎng)5d;其中發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為:葡萄糖12%、酵母粉0.8%、磷酸二氫鉀0.15%、硫酸鎂0.05%、氯化鉀0.05%,以上%為質(zhì)量體積比,接種量為培養(yǎng)基體積的9%;

      發(fā)酵培養(yǎng)36h后,添加L型酪氨酸、L型苯丙氨酸和D型色氨酸,L型酪氨酸的添加量為培養(yǎng)基體積的0.2%,L型苯丙氨酸的添加量為培養(yǎng)基體積的0.2%,D型色氨酸的添加量為培養(yǎng)基體積的0.4%。

      (3)發(fā)酵完畢后,用體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇萃取紅曲色素。

      培養(yǎng)5d后菌體量為6.1g,發(fā)酵液吸光度值為0.65,脂肪酶活性為98.42U,未檢出桔霉素。

      實(shí)施例5

      本發(fā)明提供了一種紫紅曲霉菌株MN-1,其保藏編號(hào)為CGMCC 11611。所述菌株MN-1建議的分類命名為紫紅曲霉,拉丁學(xué)名為Monascus purpureus;保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(CGMCC),保藏地址:北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)中國(guó)科學(xué)院微生物研究所,保藏日期為2015年11月30日,保藏編號(hào)為CGMCC 11611。

      本發(fā)明還提供了一種利用該紫紅曲霉菌發(fā)酵生產(chǎn)紅曲色素的方法,該方法包括以下步驟:

      (1)取保藏的紫紅曲霉在瓊脂固體培養(yǎng)基(瓊脂固體培養(yǎng)基的配方為:果糖4%、酪蛋白氨基酸1%、磷酸二氫鉀0.2%、氯化鈉0.15%、硫酸鎂0.15%,以上%為質(zhì)量體積比)上進(jìn)行孢子培養(yǎng),培養(yǎng)溫度為32℃,培養(yǎng)時(shí)間為9d;

      將培養(yǎng)在瓊脂固體培養(yǎng)基上的紫紅曲霉孢子用滅菌鏟子輕輕刮下來后,用生理鹽水調(diào)節(jié)孢子數(shù)為107cfu/ml;取該含有孢子的生理鹽水接種至液體培養(yǎng)中,32℃下?lián)u床200r/min培養(yǎng)50h,進(jìn)行孢子液的制備,其中,液體培養(yǎng)基的配方為:葡萄糖4%、酪蛋白氨基酸2.5%、磷酸二氫鉀0.85%、氯化鈉0.1%、硫酸鎂0.05%,以上%為質(zhì)量體積比。

      (2)將孢子數(shù)為107cfu/ml的孢子液接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中,32℃下?lián)u床200r/min培養(yǎng)7d;其中發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為:麥芽糖8%、牛肉膏1.2%、磷酸二氫鉀0.05%、硫酸鎂0.05%、氯化鉀0.05%,以上%為質(zhì)量體積比。

      發(fā)酵培養(yǎng)60h后,添加L型色氨酸、L型精氨酸、D型亮氨酸和D型酪氨酸,L型色氨酸的添加量為培養(yǎng)基體積的0.2%,L型精氨酸的添加量為培養(yǎng)基體積的0.2%,D型亮氨酸的添加量為培養(yǎng)基體積的0.2%,D型酪氨酸的添加量為培養(yǎng)基體積的0.2%,。

      (3)發(fā)酵完畢后,用體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇萃取紅曲色素。

      培養(yǎng)5d后菌體量為7.5g,發(fā)酵液吸光度值為0.75,脂肪酶活性為90.46U,未檢出桔霉素。

      對(duì)比例1

      紅曲霉孢子液培養(yǎng)和紅曲發(fā)酵液制備方法同實(shí)施例1,其中紅曲發(fā)酵液制備的發(fā)酵培養(yǎng)基中,不添加氨基酸,培養(yǎng)6d后菌體量為2.25g,發(fā)酵液吸光度值為0.38,脂肪酶活性為465.80U。

      對(duì)比例2

      紅曲霉孢子液培養(yǎng)和紅曲發(fā)酵液制備方法同實(shí)施例2,其中紅曲發(fā)酵液制備的發(fā)酵培養(yǎng)基中,分別只添加L型的甘氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、絲氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、精氨酸,或者只添加D型的甘氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、酪氨酸、色氨酸、蘇氨酸、甲硫氨酸,上述氨基酸的的添加量為培養(yǎng)基體積的0.3%。發(fā)酵過程中產(chǎn)生的色素衍生物,進(jìn)行脂肪酶活性測(cè)定實(shí)驗(yàn)。結(jié)果見表1,如表1所示,與未添加氨基酸的發(fā)酵條件相比,脂肪酶活性沒有顯著差異。

      以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已,并不用以限制本發(fā)明,凡在本發(fā)明實(shí)質(zhì)內(nèi)容上所作的任何修改、等同替換和簡(jiǎn)單改進(jìn)等,均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。

      表1添加氨基酸后制得的紅曲色素對(duì)脂肪酶活性的影響

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