本發(fā)明涉及醫(yī)藥
技術領域：
，尤其涉及一種鹽酸戊乙奎醚中雜質的制備方法。
背景技術：
：鹽酸戊乙奎醚(PenehyclidineHydrochloride)，化學名為3-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2苯基乙氧基)奎寧環(huán)烷鹽酸鹽，是1999年獲得國家藥品監(jiān)督管理局批準(軍事醫(yī)學科學院)，后由成都力思特制藥股份有限公司以商品名長托寧進行生產(chǎn)，用于有機磷毒物(農藥)中毒急救治療和中毒后期或膽堿酯酶(ChE)老化后維持阿托品化。化學結構式如(1)所示。本品系新型選擇性抗膽堿藥，能與M、N膽堿受體結合，抑制節(jié)后膽堿能神經(jīng)支配的平滑肌與腺體生理功能，對抗乙酰膽堿和其它擬膽堿藥物的毒蕈堿樣及煙堿樣作用，能透過血腦屏障，故同時具有較強、較全面的中樞和外周抗膽堿作用。本品對M受體具有明顯選擇性，即主要選擇作用于M1、M3受體，而對M2受體的作用較弱或不明顯，不阻斷突觸前膜M2受體調控神經(jīng)末梢釋放ACh的功能，穩(wěn)定心率。同時，本品對N1、N2受體也有一定作用。本品能較好的對抗乙酰膽堿的作用，解除因體內大量釋放乙酰膽堿，引起迷走神經(jīng)高度興奮所致的平滑肌痙攣；解除肺、腦微血管的持續(xù)痙攣引起的急性微循環(huán)功能障礙。同時，能較好地拮抗有機磷毒物(農藥)中毒引起的中樞中毒癥狀，如驚厥、中樞呼吸循環(huán)衰竭和煩躁不安等；在外周也能較強地拮抗有機磷毒物(農藥)中毒引起的毒蕈堿樣中毒癥狀，如支氣管平滑肌痙攣和分泌物增多、出汗、流涎、縮瞳和胃腸道平滑肌痙攣和收縮等。它還能增加呼吸頻率和呼吸流量。本品抗小鼠和家兔的唾液分泌作用均比阿托品強，且家兔的ED50僅為0.03mg/kg，比阿托品強約17倍；本品可明顯抑制小鼠唾液分泌及氣管粘液分泌(p<0.001)作用強度要強于等劑量的阿托品注射液；肌注本品后，對麻醉家兔及清醒家兔的胃、小腸、結腸、膽囊痙攣性收縮的松馳作用均較阿托品強(P<0.05)，對膀胱痙攣性收縮的松馳作用明顯強于阿托品(P<0.01)。長期毒性試驗表明：本品0.68、3.38、13.50mg/kg(分別相當于人臨床常用量的40、199、794倍)分別肌注于大鼠，本品0.015、0.9mg/kg(分別相當于人臨床常用量的0.9、53倍)分別肌注于狗，每天1次，連續(xù)12周給藥，除出現(xiàn)一些常見抗膽堿反應外，未見其它異常；一般生殖毒性試驗表明：本品2.5、12.5、62.5ppm(分別相當于人用量的15、75、375倍)分別口服于雄鼠連續(xù)給藥60天，雌鼠連續(xù)給藥14天，除高劑量組對小鼠有一定的毒性外，本品對小鼠配子的發(fā)生、受胎能力、分娩和出生后F1代仔鼠生長發(fā)育未見明顯影響，致突變試驗為陰性，在相當于人用量300倍內未見致畸胎作用和胚胎毒性。經(jīng)檢索，鹽酸戊乙奎醚的合成主要有兩條路線：路線一：如(2)所示，以α-環(huán)戊基扁桃酸為起始原料，經(jīng)還原得α-苯基-α-環(huán)戊基-α-羥基乙醇、α-苯基-α-環(huán)戊基-α-羥基乙醇經(jīng)磺酸酯化得到α-苯基-α-環(huán)戊基-α-羥基對甲苯磺酸乙酯，磺酸酯中間體在無水碳酸鉀作用下經(jīng)環(huán)化后制得α-苯基-α-環(huán)戊基-1,2-環(huán)氧乙烷，與3-奎寧醇反應得到戊乙奎醚游離堿，最后與氯化氫成鹽后得鹽酸戊乙奎醚。路線二：如(3)所示，以苯甲酰氯為起始物料，和環(huán)戊烯反應得α-苯基-α-環(huán)戊基甲酮，再環(huán)合制得α-苯基-α-環(huán)戊基-1,2-環(huán)氧乙烷，與3-奎寧醇反應得到戊乙奎醚游離堿，最后與氯化氫成鹽后得鹽酸戊乙奎醚。兩條路線均產(chǎn)生一種主要雜質(4)：3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)烷鹽酸鹽。目前，并無文獻報道3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)烷鹽酸鹽的制備方法，而在開發(fā)鹽酸戊乙奎醚的過程中，發(fā)現(xiàn)此雜質是α-苯基-α-環(huán)戊基-1,2-環(huán)氧乙烷與3-奎寧醇反應制備戊乙奎醚游離堿的過程中產(chǎn)生，量小且分離操作復雜。藥物開發(fā)過程中雜質的研究是重要的一個環(huán)節(jié)，同時質量標準的建立需要一定量的標準品?；诖耍瑢}酸戊乙奎醚中的主要雜質：3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)烷鹽酸鹽的制備具有重要的意義，它可以用于鹽酸戊乙奎醚合成中雜質的定性及定量分析等質量研究，從而有助于提高鹽酸戊乙奎醚的質量，并為降低鹽酸戊乙奎醚的用藥風險提供重要的指導意義。技術實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一種鹽酸戊乙奎醚中的雜質的制備方法。本發(fā)明所述的雜質制備步驟如下：α-苯基-α-環(huán)戊基-α-羥基對甲苯磺酸乙酯和3-奎寧醇在堿性條件下反應一定時間，經(jīng)后處理得3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)烷游離堿，和氯化氫成鹽得3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)烷鹽酸鹽。合成路線(5)如下：本發(fā)明所述雜質的制備方法，包括以下步驟：(1)二甲基亞砜中加入3-奎寧醇，攪拌溶解后加入堿反應得3-奎寧醇鹽；滴加α-苯基-α-環(huán)戊基-α-羥基對甲苯磺酸乙酯的二甲基亞砜溶液，攪拌反應后滴加純化水，乙酸乙酯萃取；(2)酸性水溶液萃取有機相，分去有機相，水相用堿調節(jié)pH為8～9，乙酸乙酯萃取，有機相用純化水洗滌、無水硫酸鈉干燥、過濾和濃縮得粘稠物；(3)所得粘稠物經(jīng)柱層析分離得3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)烷游離堿；(4)將游離堿溶于混合溶劑中，控溫下滴加含有氯化氫的溶液，調節(jié)pH為2～3；(5)降溫析晶，過濾得粗品；(6)粗品用混合溶劑重結晶，得3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)烷鹽酸鹽成品。進一步地，所述步驟(1)中加入的堿為氫化鈉、叔丁醇鉀、甲醇鈉中的一種，優(yōu)選氫化鈉。進一步地，所述步驟(1)中所述α-苯基-α-環(huán)戊基-α-羥基對甲苯磺酸乙酯與3-奎寧醇的摩爾比為1～5:1，優(yōu)選1～3:1。進一步地，所述步驟(1)中攪拌反應溫度為40～100℃，優(yōu)選60～80℃、反應時間為1～10小時，優(yōu)選6～8小時。進一步地，所述步驟(2)中酸性溶液為鹽酸、檸檬酸、馬來酸、硫酸中的一種，優(yōu)選檸檬酸。進一步地，所述步驟(3)中柱層析的步驟為：a、拌樣：將粘稠物溶于二氯甲烷中，加適量拌樣硅膠，蒸干拌樣，其中粘稠物和硅膠的質量比為1:1～5，優(yōu)選1:1～2；b、裝柱：稱取硅膠，加入二氯甲烷勻漿，倒入玻璃柱中沉降，其中固定相硅膠和粘稠物的質量比為10～50:1，優(yōu)選10～30:1；C、洗脫：加入二氯甲烷和甲醇的混合溶液洗脫，收集產(chǎn)品點，其中二氯甲烷和甲醇的體積比為10～50:1，優(yōu)選10～30:1。進一步地，所述步驟(4)中溶解游離堿的混合溶劑為異丙醇-乙酸乙酯、乙醇-乙酸乙酯、甲醇-乙酸乙酯，優(yōu)選異丙醇-乙酸乙酯。進一步地，所述步驟(4)中所述的氯化氫的溶液為氯化氫的甲基叔丁基醚溶液、氯化氫的石油醚溶液、氯化氫的乙酸乙酯溶液中的一種，優(yōu)選氯化氫的乙酸乙酯溶液。進一步地，所述步驟(5)中析晶溫度為-10～10℃，優(yōu)選-5～5℃。進一步地，所述步驟(6)中所述混合溶劑為乙醇和乙酸乙酯、乙醇和甲基叔丁基醚、異丙醇和乙酸乙酯、異丙醇和甲基叔丁基醚，丙酮和乙酸乙酯中的一種，優(yōu)選異丙醇-乙酸乙酯。本發(fā)明有益效果是：本發(fā)明提供了一種鹽酸戊乙奎醚中的雜質的制備方法，能顯著提高制備過程中雜質的含量，降低操作復雜程度，適用于大規(guī)模制備，采用新的制備工藝就可以獲得達到質量要求的高純度3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)烷鹽酸鹽，HPLC檢測3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)烷鹽酸鹽純度達到100％。附圖說明圖1為3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)烷鹽酸鹽的核磁共振氫譜(1H-NMR)；圖2為3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)烷鹽酸鹽ES-APIPositive譜；圖3為3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)烷鹽酸鹽高效液相(HPLC)圖譜。具體實施方式以下結合具體實施例和附圖詳細說明本發(fā)明，目的是使本發(fā)明的優(yōu)點更翔實，而非限制本發(fā)明。本領域技術人員應該理解，本發(fā)明并不限于這些實施例以及使用的制備方法，任何對本發(fā)明進行同等替換、組合、改良或修飾，均包含于本發(fā)明內。本發(fā)明中使用的α-苯基-α-環(huán)戊基-α-羥基對甲苯磺酸乙酯，可購自于市售產(chǎn)品，也可通過現(xiàn)有技術合成得到。實施例1一種鹽酸戊乙奎醚中雜質的制備方法，包括以下步驟：(1)于1L反應瓶中加入100ml二甲基亞砜、20g3-奎寧醇，攪拌使固體溶解，分次加入7.5g氫化鈉(60％)，攪拌混勻，升溫至60℃攪拌1小時，得3-奎寧醇鈉鹽。升溫至70℃，混合物中滴加113.4gα-苯基-α-環(huán)戊基-α-羥基對甲苯磺酸乙酯的二甲基亞砜溶液(100ml)，維持溫度攪拌反應6小時，降溫至10℃以下，滴加150ml純化水，滴畢，加入300ml乙酸乙酯，攪拌均勻后，靜置分液。(2)有機相用300ml10％檸檬酸水溶液萃取，分去有機相，水相用飽和碳酸氫鈉溶液調節(jié)酸水相pH值至8～9，加入100ml乙酸乙酯，分液，有機相用100ml純化水洗滌兩次，有機相用無水硫酸鈉干燥，過濾，濾液減壓蒸干，得黃色油狀物87g。(3)濾液用400ml二氯甲烷溶解，加入200～300目柱層析硅膠100g，減壓蒸干，得拌樣樣品。將2kg200～300目柱層析硅膠加入至10L二氯甲烷中，攪拌均勻后加入至玻璃層析柱中，沉降，加壓將柱子壓實，將拌好的樣品加入至玻璃柱中，用二氯甲烷：甲醇＝20:1的混合溶劑進行洗脫，收集目標點并減壓蒸干，得3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)烷淡黃色油狀物15.4g。(4)油狀物溶于45ml異丙醇和450ml乙酸乙酯混合溶劑中，滴加含有2mol/L氯化氫乙酸乙酯溶液，調節(jié)pH至2～3。(5)降溫至0～5℃析晶2小時，過濾，干燥得類白色固體3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)鹽酸鹽11.4g。(6)將上述固體加入60ml異丙醇和600ml乙酸乙酯混合溶劑中，加熱至40～50℃，過濾，降溫至0～5℃析晶2小時，過濾，40～50℃減壓干燥得3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)鹽酸鹽8.7g，純度100％。ES-APIPositive：504.41H-NMR(400MHz,CDCl3):δ7.13-7.38(m,2H),7.36-7.29(m,2H),7.26-7.17(m,4H),7.07-7.05(m,1.3H),6.87-6.85(m,0.7H),3.91(t,0.4H),3.86-3.85(m,0.3H),3.83-3.78(m,1.3H),3.75-3.73(m,0.7H),3.71-3.69(m,0.7H),3.62-3.61(m,0.3H),3.56-3.55(m,0.6H),3.52-3.47(m,1H),3.45-3.41(m,0.3H),3.24-3.18(m,2.5H),3.16-3.08(m,2H),3.07-2.94(m,1H),2.38-2.34(m,1H),2.27-2.16(m,2H),2.03-1.93(m,2H),1.85-1.68(m,2H),1.67-1.56(m,3H),1.55-1.42(m,3H),1.40-1.33(m,5H),1.29-1.12(m,5H)。實施例2一種鹽酸戊乙奎醚中雜質的制備方法，包括以下步驟：(1)于2L反應瓶中加入120ml二甲基亞砜、24g3-奎寧醇，攪拌使固體溶解，分次加入9.8g氫化鈉(60％)，攪拌混勻，升溫至50℃攪拌1小時，得3-奎寧醇鈉鹽。升溫至70℃，混合物中滴加204.2gα-苯基-α-環(huán)戊基-α-羥基對甲苯磺酸乙酯的二甲基亞砜溶液(200ml)，維持溫度攪拌反應8小時，降溫至10℃以下，滴加300ml純化水，滴畢，加入400ml乙酸乙酯，攪拌均勻后，靜置分液。(2)有機相用370ml10％檸檬酸水溶液萃取，分去有機相。水相用飽和碳酸氫鈉溶液調節(jié)酸水相pH值至8～9，加入120ml乙酸乙酯，分液，有機相用120ml純化水洗滌兩次，有機相用無水硫酸鈉干燥，過濾，得黃色油狀物104g。(3)濾液用500ml二氯甲烷溶解，加入200～300目柱層析硅膠150g，減壓蒸干，得拌樣樣品。將2.5kg200～300目柱層析硅膠加入至11L二氯甲烷中，攪拌均勻后加入至玻璃層析柱中，沉降，加壓將柱子壓實，將拌好的樣品加入至玻璃柱中，二氯甲烷：甲醇＝20:1的混合溶劑進行洗脫，收集目標點并減壓蒸干，得3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)烷淡黃色油狀物20.8g。(4)油狀物溶于60ml異丙醇中和600ml乙酸乙酯混合溶劑中，滴加2mol/L氯化氫乙酸乙酯溶液，調節(jié)pH至2～3。(5)降溫至0～5℃析晶2小時，過濾，干燥得類白色固體3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)鹽酸鹽16.5g。(6)將上述固體加入100ml異丙醇和1L乙酸乙酯混合溶劑中，加熱至40～50℃，過濾，降溫至0～5℃析晶3小時，過濾，40～50℃減壓干燥得3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)鹽酸鹽13.2g，純度100％。實施例3一種鹽酸戊乙奎醚中雜質的制備方法，包括以下步驟：(1)于1L反應瓶中加入60ml二甲基亞砜、12.7g3-奎寧環(huán)醇，攪拌使固體溶解，分次加入5g氫化鈉(60％)，攪拌混勻，升溫至50℃攪拌1小時，得3-奎寧醇鈉鹽。升溫至80℃，滴加90gα-苯基-α-環(huán)戊基-α-羥基對甲苯磺酸乙酯的二甲基亞砜溶液(90ml)，維持溫度攪拌反應7小時。降溫至10℃以下，滴加100ml純化水，滴畢，加入200ml乙酸乙酯，攪拌均勻后，靜置分液。(2)有機層用230ml10％檸檬酸水溶液萃取，分去有機層。水層用飽和碳酸氫鈉溶液調節(jié)酸水層pH值至8～9，加入100ml乙酸乙酯，分液，有機相用50ml純化水洗滌兩次，有機相用無水硫酸鈉干燥，過濾，得黃色油狀物56g。(3)濾液用300ml二氯甲烷溶解，加入200～300目柱層析硅膠80g，減壓蒸干，得拌樣樣品。將1.2kg200～300目柱層析硅膠加入至6L二氯甲烷中，攪拌均勻后加入至玻璃層析柱中，沉降，加壓將柱子壓實，將拌好的樣品加入至玻璃柱中，二氯甲烷：甲醇＝20:1的混合溶劑進行洗脫，收集目標點并減壓蒸干，得3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)烷淡黃色油狀物10.9g。(4)油狀物溶于30ml異丙醇和300ml乙酸乙酯混合溶劑中，滴加2mol/L氯化氫乙酸乙酯溶液，調節(jié)pH至2～3。(5)降溫至0～5℃析晶2小時，過濾干燥得類白色固體3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)鹽酸鹽8.1g。(6)將上述固體加入50ml異丙醇和500ml乙酸乙酯混合溶劑中，加熱至40～50℃，過濾，降溫至0～5℃析晶3小時，過濾，40～50℃減壓干燥得3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)鹽酸鹽6.6g，純度100％。實施例4一種鹽酸戊乙奎醚中雜質的制備方法，包括以下步驟：(1)于1L反應瓶中加入120ml二甲基亞砜、25.4g3-奎寧環(huán)醇，攪拌使固體溶解，分次加入10g氫化鈉(60％)，攪拌混勻，升溫至50℃攪拌1小時，得3-奎寧醇鈉鹽。升溫至75℃，滴加180gα-苯基-α-環(huán)戊基-α-羥基對甲苯磺酸乙酯的二甲基亞砜溶液(180ml)，維持溫度攪拌反應7.5小時。降溫至10℃以下，滴加200ml純化水，滴畢，加入400ml乙酸乙酯，攪拌均勻后，靜置分液。(2)有機層用460ml10％檸檬酸水溶液萃取，分去有機層。水層用飽和碳酸氫鈉溶液調節(jié)酸水層pH值至8～9，加入200ml乙酸乙酯，分液，有機相用100ml純化水洗滌兩次，有機相用無水硫酸鈉干燥，過濾，得黃色油狀物110g。(3)濾液用500ml二氯甲烷溶解，加入200～300目柱層析硅膠130g，減壓蒸干，得拌樣樣品。將2.4kg200～300目柱層析硅膠加入至10L二氯甲烷中，攪拌均勻后加入至玻璃層析柱中，沉降，加壓將柱子壓實，將拌好的樣品加入至玻璃柱中，二氯甲烷：甲醇＝20:1的混合溶劑進行洗脫，收集目標點并減壓蒸干，得3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)烷淡黃色油狀物22.6g。(4)油狀物溶于60ml異丙醇和600ml乙酸乙酯混合溶劑中，滴加2mol/L氯化氫乙酸乙酯溶液，調節(jié)pH至2～3。(5)降溫至0～5℃析晶2小時，過濾干燥得類白色固體3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)鹽酸鹽16.7g。(6)將上述固體加入100ml異丙醇和1L乙酸乙酯混合溶劑中，加熱至40～50℃，過濾，降溫至0～5℃析晶3小時，過濾，40～50℃減壓干燥得3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)鹽酸鹽12.7g，純度100％。3-[2-環(huán)戊基-2-苯基-2-(2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎寧環(huán)烷鹽酸鹽的HPLC檢測方法：檢查方法：中國藥典2015版二部附錄高效液相色譜法試驗條件：C18柱(型號：長150mm，內徑4.6mm，填充料粒徑3μm)檢測器：UV檢測器檢測波長：230nm柱溫：25℃流速：1.0ml/min流動相A：0.02mol/L磷酸二氫鉀溶液(含0.5％三乙胺，用磷酸調pH至4.5)流動相B：乙腈線性梯度洗脫如下表1所示：時間(min)流動相A(％)流動相B(％)0.073275.0732720.0505030.0406050.0406055.0732765.07327其中精密量取供試品(實施例1)溶液20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液色譜圖中如有雜質峰，按峰面積歸一化法計算，結果見附圖3，純度為100％。當前第1頁1 2 3